cck8实验原理是什么？

增殖是一种在生物医学领域内， 非常常见的表型， 甚至可以说是最常见的一种表型。 细胞增殖是高等生物体最为重要的生命特征。 高等动物体内的细胞，主要有两种增殖的方式。第一种是体细胞的增殖方式： 有丝分裂。 有丝分裂也是最常见的一种增殖方式。 在有丝分裂的过程中， 2 倍体的体细胞在经过有丝分裂之后， 产生两个都是 2 倍体的后代细胞；另一种是性生殖细胞所采用的增殖方式， 被称为减数分裂。 减数分裂最大的特点是， 2倍体的性生殖细胞， 经过减数分裂后， 形成 2 个单倍体的后代细胞。 由于细胞在分裂前是 2 倍体， 而分裂后变成了单倍体， 使得细胞内的染色体数目变成了原先的一半， 因此得名“减数分裂” 。 增殖是最为常见的表型。 无论是正常生理条件下， 还是异常的病理条件下， 无论是正常的细胞， 还是异常的细胞， 增殖现象都是普遍存在的。 一.增殖表型如何检测？ 1.分子层面检测增殖表型 有些分子的表达和增殖的表型有密切的关系， 因此， 只要能检测到这些特定分子的表达， 就表征了增殖现象的发生。 这类分子就是增殖的 marker 分子。 常见的和增殖相关的 marker 分子有如下几种： （1） 与增殖相关的分子标志物 A) MCM （微小染色体维持蛋白， minichromasome maintenance protein， MCM） 。 MCM只存在于真核细胞中。 MCM 在有丝分裂的晚期和 G1 期与染色质紧密结合， 在 S 期和G2 期分开。 MCM 蛋白只在细胞的增殖期才能检测到， 它的表达在 G1/S 转换点达到峰值， 在分化期和静息期时， 表达缺失， 因此可以作为细胞增殖的特殊标志物。 B) 细胞核相关抗原 Ki-67。 这个分子是经典的细胞增殖相关分子标志物， 最早在 1983年在增殖细胞中发现， 目前在病理诊断中使用非常地广泛。 Ki-67 的一级结构比较特殊，还没有发现与之同源的蛋白， 所以目前对于 Ki-67 的功能了解得不多。 推测它可能具有如下的几个功能： 1） 推测 Ki-67 可以调节细胞周期； 2） Ki-67 能和 DNA 或者 RNA 发 生相互结合； 3） Ki-67 在细胞分裂期参与合成核糖体。 Ki-67 在细胞的 G0 期不表达，G1 中期到后期出现表达， S 期和 G2 期表达逐渐增加， 有丝分裂期达到高峰， 细胞分裂后迅速降解。 C) 增殖细胞核抗原 PCNA。 PCNA 又称为周期素， 它是 DNA 聚合酶δ的辅助蛋白。 这个分子也是经典的增殖相关分子标志物， 最早在 1978 年就有所报道。 又因为 PCNA 出现在增殖期细胞的细胞核中， 所以被称之为增殖细胞核抗原。 PCNA 的主要功能有： 1）DNA 聚合酶δ的辅助蛋白； 2） 参与 DNA 损伤的修复； 3） 参与细胞周期的调控； 4）和 p21 相互作用。 P21 是 CDK 的抑制因子， 因此 PCNA 通过和 p21 相互作用， 间接影响细胞周期和增殖。 在增殖细胞的细胞周期中， PCNA 的量会发生明显变化， 它在 G0/G1期几乎没有表达， G1 晚期表达大幅度增加， S 期达到高峰,G2/M 期表达下降。 PCNA 也已经广泛应用于临床病理诊断和相关的生物学研究中。 PCNA 和 Ki-67 作为细胞增殖标志物， 所存在的一些缺陷。 PCNA 和 Ki-67在 G1 早期不表达， 因此在整个细胞周期过程中， 存在表达时间上的间隙。 另外 PCNA 在DNA 修复和复制过程中， 发挥了作用， 这会导致结果的“假阳性”。 就是说某些没有发生增殖， 但是发生了 DNA 修复的细胞， 也会上调 PCNA 的表达， 这会让研究者误以为细胞发生了增殖。 Ki-67 也会有类似假阳性现象的存在， 比如说 Ki-67 的表达水平， 会受到外部因素的影响， 比如在营养缺乏的时候。 MCM 蛋白相对于 PCNA 和 Ki-67 而言， 很大的优势在于整个细胞周期中都有表达， 而且它不受 DNA 损伤修复和其他外部因素的影响。 因此有的研究者认为， MCM 蛋白是优于 PCNA 和 Ki-67 的理想的细胞增殖标志物。 但是从实际的应用层面看， 无论是在临床应用当中， 还是在基础科研当中， PCNA 和 Ki-67 的应用， 都更加广泛。 （2） 和干细胞相关的分子标志物 根据肿瘤干细胞的理论， 肿瘤干细胞是肿瘤中， 具有自我更新的能力并且能够产生异质性的肿瘤细胞。 肿瘤干细胞通过自我更新和无限增殖， 维持了肿瘤细胞群的生命力。 因此， 如果通过肿瘤干细胞相关分子标志物的检测， 证实肿瘤干细胞的数量增加， 这就提示肿瘤的恶性程度高， 间接地说明了肿瘤增殖能力的增强。 例如， CD44 是胰腺癌中肿瘤干细胞常用的分子标志物， 因此可以通过检测 CD44 的表达水平， 证实胰腺癌中肿瘤干细胞的情况， 间接地证实肿瘤细胞增殖能力的强弱。 但是采用这种方法是具有局限性的， 因为不同肿瘤的肿瘤干细胞分子标志物是不同的。 而且在很多肿瘤当中， 肿瘤干细胞的标志物， 还存在很大的争议。所以我个人的建议是， 直接检测 PCNA 或者 Ki-67 之类的细胞增殖相关标志物更好更直接；检测肿瘤干细胞相关的分子标志物， 只能间接地说明肿瘤细胞的恶性增殖情况， 只能算是锦上添花而已。 （3） 检测抑癌基因 检测抑癌基因相关的分子标志物也是一类和细胞增殖间接相关的分子标志物。检测这一类分子标志物， 它存在着如下的一种逻辑推理的过程， 首先， 在细胞内抑癌基因的表达水平或者活性明显下降， 就提示肿瘤的恶性程度明显提升， 间接地说明了肿瘤的恶性增殖表型会有所增加。 在这一类分子标志物当中常见的抑癌基因有两个： p53 和 PTEN。 经常可以看到在论文当中， 通过 western 或者 qPCR， 证实 p53 以及 PTEN 分子表达水平降低， 从而间接地说明肿瘤细胞恶性程度上升， 肿瘤的增殖表型也会显著的提升。 2.细胞层面检测增殖表型 （1） 直接检测细胞的增殖状态 A） 最为经典的方法是 MTT 法。 MTT 是一种染料。 它的检测原理是活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan） 并沉积在细胞中，而死细胞没有这个现象。 DMSO 能溶解细胞中的甲瓒， 最后用酶标仪在特定的波长处， 测定光吸收值， 可间接反映活细胞的数量。 MTT 法早已成为研究细胞增殖的经典方法。 后续基于类似的实验原理，还在 MTT方法的基础之上，演化出了各种不同的替代技术，比如 CCK8染色实验等等。 在做 MTT 实验的时候， 通常取 5 个时间点（通常就是 5 天） 。 把 5 天中每一天的吸光度数据都记录下来， 最后形成一条细胞增殖的曲线。 通过比较不同处理方式或者不同实验组之间， 细胞增殖曲线的高低， 就可以判断细胞增殖情况的快慢。 B） 另一种经常用于检测细胞增殖的经典方法是 Brdu 染色法。 Brdu 是胸腺密啶的衍生物，可以标记活细胞中新合成的 DNA， 可以代替胸腺嘧啶， 选择性地整合到复制细胞新合成的DNA 中。 这种渗入可以稳定存在， 随着 DNA 的复制， Brdu 可以进入子代细胞中。 Brdu 特异性抗体可以用于检测 Brdu 在细胞 DNA 中的渗入， 从而判断细胞增殖能力的变化。 通常在使用 Brdu 单克隆抗体之后， 都会结合免疫荧光染色， 显示增殖的细胞， 同时结合其他细胞标记物， 进行双重染色， 可以判断增殖细胞的种类， 增殖细胞的增殖速度， 对研究细胞动力学有重要的意义， 因为组织细胞内没有内源性 Brdu 的存在， 所以这种方法用于检测细胞的增殖， 应用非常广。 另外， 通过 Brdu 染色法可以提供影像学相关的数据， 这比单纯采用MTT 法（只能提供简单的折线图） ， 要更富有视觉效果。 基于 Brdu 染色方法， 又演化迭代出 Edu 的染色方法。 Edu 也是一种胸腺嘧啶核苷类似物， 能够在 DNA 复制时期代替胸腺嘧啶， 渗入正在合成的 DNA 分子中。 而且在检测的时候， 直接采用荧光染料与 Edu 特异性反应， 直接准确地检测出 DNA 复制活性， 能更有效地检测细胞增殖现象。 C) MTT 法或者 Brdu 染色法， 这类技术都属于 End-point assay（终点分析法） 。 因为这类技术对于细胞都有破坏作用， 在检测过程中， 细胞已经死亡， 结构也不再完整。 因此， 有公司（例如罗氏） 研发了实时记录细胞增殖状态的设备和方法， 这种设备成为 RTCA（real time cell analyzer， RTCA） 。 RTCA 这类技术的特点就是实时（real time） 。 RTCA 实时细胞分析仪， 需要用到特定的细胞培养板（被称为 E-plate） ， 在 E-plate 每一个孔的底部都含有特制的电极。 电极的作用就是实时记录孔内的电阻抗（electric impedance） 。 当细胞在孔内发生粘附， 转移， 增殖的时候， 孔内的电阻抗发生变化， 被电 极实时记录， 研究者也就获得了相关的实时数据。 不过需要特别强调的是， 采用这种 RTCA的方法， 不仅仅可以用于细胞增殖的数据的获取， 也可以用来检测细胞的黏附， 细胞的凋亡、细胞的转移等等， 所以它的应用范围是非常广的。 （2） 检测细胞的克隆形成能力 肿瘤细胞由于恶性程度高， 因而还具有一类特殊的增殖能力--被称为克隆形成能力。 正常细胞在增殖的时候， 需要细胞与细胞之间的信号传递。 这些信号的存在， 使得正常细胞增殖过程中， 可以有序地受到调控。 但是肿瘤细胞具有高度的恶性， 它的增殖是不受调控的， 所以即便缺少细胞之间的交互和信号通路， 肿瘤细胞也可以由单独一个细胞， 增殖形成大量的子代细胞， 最终形成一个细胞克隆。 这种现象就被称之为克隆形成能力， 可以通过克隆形成实验， 加以检测。 对于干细胞， 也有一种类似于克隆形成实验的技术， 用于检测干细胞的增殖能力， 这种方法被称为“干细胞悬浮成球试验” （microsphere formation assay） 。 鉴定干细胞需要很多的指标， 能在离体条件下， 形成微球/悬浮球（microsphere） 是鉴定具有干性细胞的方法和指标之一。 3.组织层面检测增殖表型 （1） 检测分子标志物 临床上最容易获得的组织样本， 通常都是石蜡切片。 基于石蜡切片， 可以进行免疫组织化学IHC 的研究， 检测和增殖相关的分子标志物， 比如 PCNA 和 Ki-67。 （2） 细胞形态和组织结构上的差异 在临床组织样本当中， 除了检测和增殖表型相关的分子标志物之外， 还可以通过形态学的方式， 检测细胞形态的多样性和组织结构上的巨大差异。 通过石蜡切片的染色实验， 可以观察到恶性肿瘤细胞一般比正常细胞要大。 而且即便是同一种肿瘤， 在相同的组织部位， 肿瘤细胞的大小和形态也会很不一致， 很不均匀， 有时甚至会出现巨细胞。 在有些肿瘤细胞的细胞核内， 会出现细胞核体积增大的现象， 这就使肿瘤细胞的细胞核与细胞浆的比例异常。 肿瘤细胞的细胞核大小， 形状都很不均一， 甚至会出现巨核、双核、 多核或者是形态奇异的奇异型细胞核。 通过详细的形态学观察可以判定细胞发生了恶性增殖。 正常组织当中， 是由很多不同类型的细胞所组成。 不同类型的细胞在组织内， 以特定的、 有序的排列顺序， 组成了健康的组织。 但是在组织内发生肿瘤之后， 由于肿瘤细胞发生不受控制的恶性增殖， 并且挤压了周围的正常细胞， 导致整个正常组织内细胞的有序排列顺序被破坏， 组织内不同类型细胞的排列结构发生异常。 通过对于组织内部细胞排列顺序和排列结构的检测， 也能够获得肿瘤细胞发生恶性增殖的证据。 4.动物层面检测增殖表型 大部分的疾病类型都有与之相对应的， 可用于研究的动物模型。 在肿瘤研究当中， 用于研究增殖相关表型的动物模型， 最常见的就是移植瘤动物模型。 在移植瘤当中， 为了获取和增殖相关的表型， 通常要记录几个参数， 比较简单的有肿瘤的大小也就是体积， 其次是肿瘤的重量， 这些参数是反应肿瘤大小和细胞增殖特性， 最直观的数据。 有了移植瘤的样本之后， 我们还是可以通过降低维度的方式， 以移植瘤的样本作为检测对象， 检测分子标志物以及检测细胞相关的行为学和形态学。 二.总结 u200b

没有确定的最大和最小值，Cell Counting Kit-8（简称 CCK-8 ）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其 基本原理 为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基 苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

材料表面在 SBF 中形成磷灰石的能力能够反应材料在体内的生物活性，具体检测方法如下：1.SBF 配置由于SBF 溶液对于磷灰石过饱和，所以配备方法不恰当会导致溶液中磷灰石沉淀产生。整个配备过程需要确保溶液无色、透明，容器表面无沉淀出现，如果过程中产生沉淀，倒去溶液，洗净仪器重新配制。准备一个 1000ml 的塑料烧杯。首先于塑料烧杯中装好 700ml 离子交换蒸馏水、一个适当大小磁子，杯口密封以蒸发皿或塑料薄膜。搅拌并调节水温至 36.5±1.5C。按表1所列顺序在 36.5C 恒温下逐个溶解第一到第八个化合物，溶解过程表1 配置1000 ml SBF 溶液时试剂添加顺序、添加量 Order Reagents Amounts Containers Purities（%） Formula weights 1 NaCl 8.035 Weight paper 99.5 58.4430 2 NaHCO3 0.355 Weight paper 99.5 84.0068 3 KCl 0.225 Weight bottle 99.5 74.5515 4 K2HPO4·3H2O 0.231 Weight bottle 99.0 228.2220 5 MgCl2·6H2O 0.311 Weight bottle 98.0 203.3034 6 1.0 M-HCl 39ml Graduated cylinder — — 7 CaCl2 0.292 Weight bottle 95.0 110.9848 8 Na2SO4 0.072 Weight bottle 99.0 142.0428 9 Tris 6.118 Weight paper 99.0 121.1356 10 1.0 M-HCl 0-5ml Syringe — — 2.磷灰石形成能力测试对于密质薄片材料，测出样品尺寸并计算样品表面积精确到 2mm 应用如下公式计算出 SBF 用量：Vs=Sa/10,Vs（ml）是 SBF 的体积量，Sa（mm）表示样品的表面积。对于多孔材料，SBF 的用量应大于上式计算量准备好塑料瓶或烧杯，装入计算出的 SBF 体积量加热到 36.5C， 然后按示意图往里放置样品。 笔记：样品在容器中放置有两种情况，如图 1(a)，1(b)。少数情况下，SBF 溶液会生成同 质磷灰石沉积于样品表面。所以如果样品放置是图 A1(b)种情况，表征实验应该检测样品的 下表面。 四个星期内，分别取出恒温浸透不同时长的各组样品，纯水轻盈洗净。然后将样品放入干燥 器中常温干燥。图1 SBF中样品浸泡示意图 1.四唑盐（MTT）比色法：检测细胞存活和生长的方法除前面所介绍的方法外，还可用四唑盐比色法试验（MTT）。此法的原理是：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物，并沉积在细胞中，而细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的蓝紫色结晶物，用酶联免疫检测，以在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反应活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。●0.25%胰蛋白酶消化细胞使其成为单细胞，用含0.1%胎牛血清的RPMI培养基配成1x10^9个/L的但细胞悬液，将细胞接种于96孔培养板中，每孔100ul。●将培养板置CO2培养箱中，在37℃、5%CO2条件下，培养3-5天。●培养3-5天后，每孔加入MTT溶液10ul，继续置培养箱孵育3-6h，终止培养，加10%SDS-HCl 100ul/孔，37℃培养数小时，将细胞内与细胞周围的MTT颗粒充分溶解。●用酶联免疫检测仪测定每孔吸光度（OD），选波长490nm。以时间为横轴，OD值为纵轴绘制细胞生长曲线。用此法测细胞活力，为保证结果的准确性，最好在试验前测定每种细胞的贴比率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，再确定每孔细胞接种数和培养时间，以保证培养终止时不会过满。另外，实验时设空白对照，比色时，以空白孔调零。3.2.2 CCK-8 法Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。● 制备细胞悬液：细胞计数● 接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数，每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做3个重复。● 37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。●加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。或者直接配置含10%CCK8的培养基，以换液的形式加入。●培养1-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认最佳条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。●测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。

EdU可以在DNA复制的时候掺入到新合成的DNA链中，通过一个“Click”反应，把荧光基团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样我们就能通过检测荧光而知道细胞的增殖情况了！http://www.bioon.com.cn/news/showarticle.asp?newsid=14929&typename=技术前沿详情请见上面这个链接！

其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT法。优点1、使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT法；5、对细胞毒性小；6、为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。

2。1、cck8的吸光度读数是针对不同的菌种和不同的培养基均不同，需要自己前期做一个标准曲线。2、也就是用培养基为空白对照，不同生长阶段发酵液为样品测定OD值，并测定这些阶段的活菌数，此后再按照发酵时间对比标准曲线得出单位活菌数。3、一般读数为2最合适，十几的话可能就是培养液中产生了吸光色素之类的。

我们在实验过程中,经常被该如何设计实验而困扰,不知从何下手开展实验,细胞实验作为被经常用到的体外实验,在科研工作中占有很大的比例。下面就盘点一下实验室常用的细胞实验技术1细胞增殖常用来检测细胞增殖的方法是CCK8法和Brdu法。CCK8主要通过分光光度计进行检测,OD只越高,说明存活的细胞越多,增殖能力强。Brdu是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中,最后通过荧光强度的变化来判定细胞的增殖能力。

cck8实验算出大于百分之百的存活率正常。细胞毒性通常是指在某一个药物处理浓度下细胞的死亡率，所以在某个浓度下细胞的存活率与100%之间无统计差异，那么就说在该浓度下是无毒的。但是如果笼统的说某个药物是否有毒，是在说该药物相对毒性大小，通常要比较IC50，即半数致死量。化疗药物的IC50通常<10uM，如果要说某个药物无任何毒性，那么其IC50值可能要>1mM。不过这个并没有严格的定义，你可以设计个阳性对照。基本概念意义：细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一，是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。方式：真核生物的分裂依据过程不同有三种方式，有有丝分裂，无丝分裂，减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、真菌等一切真核生物中的一种最为普遍的分裂方式，是真核细胞增殖的主要方式。减数分裂是生殖细胞形成时的一种特殊的有丝分裂。

cck-8孵育时间1~2h足够，孵育前将孔里原来的 液体吸尽，cck-8与新鲜培养基按照1：10比例混匀后，每孔加入100ul,孵育1h，上机检测OD450。

CCK-8计算增殖速率有两种方法，一种是绘制生长曲线，计算线性阶段的吸光度的均值另一种是计算某时间点的（实验组与对照组吸光度的差值）/对照组的比率

不能。1、CCK8可以检测大肠杆菌，但不能在一个板子上检测ros细胞，需要分开测量。2、在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染，以免影响结果。

6孔板的情况下直接加药，无需更换培养基，记得两组的细胞浓度要稀释到差不多

建议用CCK8，可以直接加CCK8到细胞内

查查与其同源的基因在其它生物尤其是亲缘关系很近的生物体内有没有已经被证明功能的，或者猜想与什么功能有关的。寻找突变体（该基因缺失的个体）或者设计序列沉默该基因，然后观察其表型和正常个体有什么差别。寻找该基因过量表达的个体，观察表型和一般个体的差异，也可以作为一个参考。这些知识给你的研究提供思路，最后你要克隆得到该基因，在一个该基因缺失的突变体（株）内表达该基因，如果你在该个体内检测到表达并且该个体和一般个体性状差异消失，那么证明该个体是控制此性状的基因（之一）。

额。 96个孔除去你加的8个对照品而外，其他的孔全部用来加样品，88孔，88种样品（按照的说法的话，88个孔可以同时检测88个病人的某一指标），也就是可以检测88种样品的结果，如果你每个样品准备做复孔求平均值的话，可以检测44种样品。

DMSO可以提高PCR的特异性，帮助扩增一些难扩的模板。但要摸索，量大的话会抑制扩增，而且最好用于扩增1KB以上模板。

还是比较常用的. 但是因为MTT价格相对CCK-8试剂盒更便宜,实验室更较多采用MTT法.CCK-8法更灵敏,而且不用用DMSO溶解,减少接触有毒试剂的机会. 96孔板培养细胞,检测时每孔加入10%培养基体积的CCK-8,在细胞培养箱中继续孵育0.5-4个小时,时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,初次实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测,检测波长为450nm.

不需要，如果你的药物需要饥饿处理，那就另当别论，就CCK8检测而言是不需要的。

标准曲线法中为消除试剂影响，最适合用十字校验来进行零点校正，通过对十点四个角和方向来进行的这种情况也可以，更好更准确完成校验

终点法。一、实验原理：细胞活力检测试剂盒(CCK-8)可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪_硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazandye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT法。二、用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。三、优点：使用方便，无需洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂。CCK-8法能快速检测。CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度。CCK-8法的重复性优于MTT法，产生的formazan是水溶性的，减少因洗涤和溶解带来的误差。CCK-8法对细胞毒性小，可以多次测定选取最佳测定时间，与MTT方法相比线性范围更宽，灵敏度更高。CCK-8细胞活性检测试剂无需预制，即开即用。

细胞增殖的研究方法有很多，主要包括：BrdU，EdU，CCK8等方法。CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒是西安百萤生物生产的一种基于 SST-8 的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐 SST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)，SST-8 是一种类似于 MTT 的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜（formazan，参考图1)。SST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系

cck8实验怎么看有没有细胞毒性CCK-8是一种基于WST-8的检测细胞增殖和细胞毒性的方法。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。数据呢，一般根据原始资料来选择统计分析方法，肿瘤细胞cck8增值这是什么，这个一般是计量资料，如果符合正态分布及方差齐性检验，可以用t检验或方差分析，不符合可以采用非参数检验，即秩和检验。

数据呢，一般根据原始资料来选择统计分析方法，肿瘤细胞cck8增值这是什么，这个一般是计量资料，如果符合正态分布及方差齐性检验，可以用t检验或方差分析，不符合可以采用非参数检验，即秩和检验。

cck8实验怎么看有没有细胞毒性CCK-8是一种基于WST-8的检测细胞增殖和细胞毒性的方法。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。数据呢，一般根据原始资料来选择统计分析方法，肿瘤细胞cck8增值这是什么，这个一般是计量资料，如果符合正态分布及方差齐性检验，可以用t检验或方差分析，不符合可以采用非参数检验，即秩和检验。

一、含义不同：空白试验是指在不加试样的情况下按试样分析，规程在同样的操作条件下进行的分析。所得结果的数值为空白值。然后从试样测得结果中扣除此空白值就得到比较可靠的分析结果。对照实验就是进行两组实验，控制变量，比较不同。二、作用不同：对照组采用一种无药理作用的假药，它在药物剂型或处置上不能为受试者识别，称安慰剂。用现有标准方法或常规方法做对照。这种对照在临床试验中用得较多，因为很多情况下不给病人任何治疗是不符合医德的。另外，还可用于某种新的检验方法是否能代替传统方法的研究。条件对照指虽给对象施以某种实验处理，但这种处理是作为对照意义的，或者说这种处理不是实验假设所给定的实验变量意义的。例如，“动物激素饲喂小动物”实验，采用等组实验法，其实验设计方案是：甲组：饲喂甲状腺激素（实验组）；乙组：饲喂甲状腺抑制剂（条件对照组）；丙组：不饲喂药剂（空白对照组）。显然，乙组为条件对照，该实验既设置了条件对照，又设置了空白对照，通过比较、对照，更能充分说明实验变量——甲状腺激素能促进动物的生长发育。以上内容参考：百度百科-空白对照组

不变颜色最好，变了没准是污染了。如果是观察细胞死活状态什么的，推荐用显微镜观察、细胞计数什么的。推荐注意拍照，保存好实验记录。

超滤过程为动态过滤，分离是在流动状态下完成的。溶质仅在膜表面有限沉积，超滤速率衰减到一定程度而趋于平衡，且通过清洗可以恢复。 在超滤过程中，水溶液在压力推动下，流经膜表面，小于膜孔的溶剂（水）及小分子溶质透水膜，成为净化液（滤清液），比膜孔大的溶质及溶质集团被截留，随水流排出，成为浓缩液。

教育不能造成两极分化,而应该是大众教育,适当地精英教育.也就是应该"众星捧月"

问题一：忘记的英文怎么读 forget 英[f??get] 美[f?r?get] vt. 忘掉; 忘记，忘却; 忽略，疏忽; 遗落; vi. 忘记; 忽视; [例句]Sometimes I improvise and change the words because I forget them. 有时，我临场发挥改了词，因为我把原来的词给忘了。 [其他] 第三人称单数：forgets 现在分词：forgetting 过去式：forgot过去分词：forgotten 形近词： forges forger gorget 双语例句 柯林斯词典 英英释义 百度百科 问题二：忘记用英文怎么说 forget 问题三：忘记该忘记的用英文怎么说 忘记该忘记的 Forget what you should forget. 问题四：“忘记”怎么翻译英文 forget 问题五：忘记一切 用英文怎么说？ forgot everything 问题六：“我忘了” 英文怎么说？ i forgot 问题七：我已经忘记了，用英语怎么说？ I already forgot. 问题八：我忘记了做某事 英语怎么说 i foget doing something i fogot doing something 两种都可以 问题九：把什么忘在什么地方用英语怎么说 leave something in some place

海陆风：由于陆地比热小于海洋，白天升温时，陆地升温快于海洋，在陆地形成上升气流，海洋出现下沉气流，陆地近地面形成低压，海洋近地面形成高压，在近地面出现自海洋吹向陆地的海风；黑夜降温时，陆地降温快于海洋，在陆地形成下沉气流，海洋形成上升气流，陆地近地面形成高压，海洋近地面形成低压，在近地面出现自陆地吹向海洋的陆风。城市风：由于城市气温高于郊区，在城区出现上升气温，造成城区近地面形成低压，郊区出现下沉气流，郊区近地面出现高压，近地面出现自郊区吹向城市的风。（与海陆风不同的是，城市风没有季节变化，四季风向相同）（无论是海陆风还是城市风，均是指近地面的风，而高空风的风向与近地面的风向相反）

月明星稀【拼音】：yuè míng xīng xī【解释】：月亮明亮时，星星就显得稀疏了。【出处】：三国·魏·曹操《短歌行》：“月明星稀，乌鹊南飞。绕树三匝，何枝可依？”典故明色明亮，星辰稀疏。 形容月夜景色。语出汉．曹操《短歌行》：“月明星稀，乌鹊南飞。绕树三匝，何枝可依？”林语堂《无所不谈合集·谈海外钓鱼之乐》：“夜来时，月明星稀，海面灯光辉然，另是一番气象。”造句1、这个夜晚月明星稀，给我留下了美好的回忆。2、走在月明星稀的路上，看着湖面若隐若现，我突然想起了曾经的你。3、前一刻还是月明星稀，没想到后一刻暴雨忽至。4、月明星稀，难敌孤寂。廿五岁月，祝自己生日快乐！5、今夕何夕，月明星稀。我等月圆，也在等你。6、晚风清凉，月明星稀，何不把酒言欢，笑谈风花雪月。7、月明星稀，蚊子乱飞。咬你一口，然后飞走。8、月明星稀，竹影婆娑，清茶一杯，饮得一杯云淡风轻。9、那些淡烟细雨的早晨，长风斜过的午后，月明星稀的晚上。——白落梅《你是锦瑟，我为流年》10、窗外月明星稀，万家灯火，这个世界，有从未消失过的温暖。——倾陌兮11、风里有雾，雾顺风来。笑里有苦，苦随笑淡。空中有月，月明星稀。12、我们俩，一个如月，一个似星，即便夜夜流光相皎洁，却躲不过月明星稀的宿命，这辈子，注定此消彼长！13、月明星稀，残月的光辉，在这一片漆黑的夜晚，依然是那样明亮！朦胧的光彩，也依旧是如梦如幻！——风凌天下《傲世九重天》14、那晚月明星稀，暖风拂面，像足许多长篇故事的开场，风平浪静，波澜不兴。——渥丹《浮光》15、你是否在月明星稀之时，遥望着属于她的远方，填补自己内心空白的诗…16、你，来了。看似容易，又有谁了解，跋山涉水几重，柳暗花明几春。穿云破雾几层，月明星稀几回。17、深秋，月明星稀，灯下独行。夜晚的灯总那样冰冷，却不是彻骨的冷，而是深入灵魂，令人清醒的冷。

超滤膜是一种微孔隔离膜，其工作原理基于分子尺寸筛选和陶瓷或聚合物材料的孔隙结构。当液体通过膜表面时，大分子、胶体、悬浮物和微生物等被截留在膜表面，而水分子和小分子溶质则能通过膜孔进入膜内部。这种分离效果可实现对悬浮物的去除、浓缩和分级过滤。超滤膜广泛应用于水处理、食品与饮料加工、制药业、化工领域等。在水处理中，它可用于去除悬浮物、细菌、病毒、有机物和重金属等污染物；在食品与饮料加工中，可用于浓缩果汁、脱色和去除杂质；在制药业中，可用于蛋白质纯化、生物反应器的细胞分离和床层保护；在化工领域中，可用于溶剂回收、废水处理和分离提纯等方面。其高效的分离性能和广泛的应用领域使得超滤膜成为现代工业和生活中不可或缺的关键技术之一。如今，市面上净水品牌众多，榜单中的大部分净水器名牌仅供家用。而作为全领域净水的龙头企业，立升旗下的净水产品已广泛应用于市政供水、污水处理及其回用、公共场所直饮水等领域。立升的全屋中央净水系统，包括前置过滤器、中央超滤净水器、超滤伴侣、软水机、即热饮水机。其核心装置——中央超滤净水器，采用立升自主研发的PVC合金超滤膜，过滤精度高达0.01微米（头发丝的万分之一），能有效滤除水中的细菌、胶体、大分子有机物、小颗粒固体等杂质，高效解决自来水输送过程中的二次污染。与此同时，过滤后的水保留了对人体有益的天然矿物质和微量元素，可达安全直饮标准，孕妇、婴幼儿均可放心饮用，健康安全两不误。

城市升温快，使得城市大气受热上升，城市上方的大气受挤压而流向郊区，温度下降，在郊区下沉，就把郊区的空气挤向城市。城市为低压，上空为高压，郊区上空为低压，下面为高压。形成一个简单的热力环流。

我也想要一份。

与T细胞识别、粘附及活化有关的CD分子及其结构特点，配体识别及与功能的关系如下：(1)CD3：CD3分子由u03b3、u03b4、u03b5、u03b6、u03b7五种链组成，与T细胞受体组成TCR-CD3复合物，其胞浆区有免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)结构，其中的酪氨酸磷酸化后，可活化有关激酶，转导TCR-CD3介导的活化途径的信号。(2)CD4：CD4为单链跨膜糖蛋白，胞膜外有四个IgSF结构域，CD4是T细胞TCR-CD3识别抗原的辅助受体，与配体MHCⅡ类分子结合，参与信号转导。(3)CD8：CD8分子是由u03b1、u03b2链借二硫键连接的异源二聚体，是T细胞的辅助受体，与MHCⅠ类分子结合，参与T细胞活化和增殖的信号转导。(4)CD2：又称为LFA-2，其配体主要是CD58(LFA-3)，与配体结合后能促进T细胞对抗原的识别功能和介导T细胞的信号转导。(5)CD58：又称LFA-3，与配体LFA-2结合后，可参与T细胞信号的转导。(6)CD28：CD28分子是由二硫键相连的同源二聚体，其配体B7-1(CD80)和B7-2(CD86)，CD28作为辅助刺激分子，提供T细胞活化的辅助信号。(7)CTLA-4：又称CD152，为同源二聚体，与配体CD80/CD86结合后，对已活化的CD8T细胞的扩增起抑制作用。(8)CD40L：又称CD154，属TNF超家族成员，以三聚体形式结合CD40分子，与B细胞表面的配体CD40结合产生的信号，是B细胞进行免疫应答和淋巴结生发中心形成的重要条件。

问题一：简答怠速控制的主要控制内容 1.燃油泵的检查 a.燃油系统静态油压的测量 (1) 用一根短导线将电动汽油泵的两个检测插孔 (一般电控车上都有 ,如找不到可直接给电动汽油泵供电 )短接。 (2) 打开点火开关(但不要启动发动机),让电动汽油泵运转。 (3) 测量燃油压力,其正常油压应为 300kPa左右。若油压过高,应检查油压调节器；若油压过低,应检查电动汽油泵、汽油滤清器和油压调节器。 (4) 关闭点火开关 (OFF),拔掉电动汽油泵检测插孔的短接线。 b.燃油系统保持压力的测量 测量静态油压结束 5min后 ,观察油压表的示数 ,此时的压力称为燃油系统保持压力 ,其正常值应不小于 147kPa。若油压过低 ,应检查电动汽油泵保持压力、 油压调节器保持压力及喷油器有无泄漏。 c.发动机运转时燃油压力的测量 (1) 启动发动机 ,让发动机怠速运转 ,测量此时的燃油压力。 (2) 缓慢开大节气门 (踩下加速踏板 ) ,测量在节气门接近全开时的燃油压力。 (3) 拔下油压调节器上的真空软管 ,并用手堵住 ,让发动机怠速运转 ,测量此时的燃油压力 ,该压力应和节气门全开时的燃油压力基本相等。若测得的油压过高 ,应检查油压调节器及其真空软管;若测得的油压过低 ,则应检查电动汽油泵、 汽油滤清器及油压调节器。 d.电动汽油泵最大压力和保持压力的测量 (1) 将燃油系统卸压。 (2) 拆下蓄电池负极搭铁线。 (3) 将油压表接在燃油管路上 ,并将出油口塞住。 (4) 接上蓄电池负极搭铁线。 (5) 用一根导线将电动汽油泵的两个检测插孔短接。 (6) 打开点火开关 ,持续 10 s左右 (不要启动发动机 )。使电动汽油泵工作 ,同时读出油压表的压力 ,该压力称为电动汽油泵的最大压力 ,其正常值应比发动机运转时的燃油压力高 200～300kPa,通常可达 490～640kPa。如不符合标准值 ,应更换电动汽油泵。 (7) 关闭点火开关 , 5min后观察油压表的压力 ,此时的压力称为电动汽油泵的保持压力 ,其正常值应大于 340kPa。如不符合标准值 ,应更换电动汽油泵。 2.怠速控制阀的检查 a.检查怠速控制阀的供电电压 拔出怠速控制阀的插头，打开点火开关，用万用表测量线束插头上的电压，对于3线制怠速控制阀而言只有1根线有12V电压、对于4线制怠速控制阀而言有2根线有12V电压、对于6线制怠速控制阀而言也是有2根线有12V电压。如不符合上述情况则说明怠速控制阀的供电有问题，则应检查EFI继电器、保险丝或线路。 b.检查怠速控制阀的电阻 拔出怠速控制阀的插头，用万用表测量怠速控制阀的线圈电阻应该符合厂家规定。3线制怠速控制阀有2组线圈，4线制怠速控制阀也是有2组线圈，6线制怠速控制阀有4组线圈。每组线圈之间的电阻值是差不多相等的。 c.怠速控制阀的动作试验 将点火钥匙拧至“ON”挡但不要起动发动机，仔细听怠速控制阀动作的声音，应能听到怠速控制阀动作的声音，如不能听到动作的声音，在供电、怠速控制阀正常的情况下，就可能是控制电路或ECU存在故障了。 问题二：简述发动机怠速控制的基本内容有哪些 怠速马达，进，排气节气门 问题三：汽车怠速控制系统的内容 把怠速马达的电源断掉（拔掉即可）后看看，以便区分故障区域。如果拔掉怠速马达后故障消失，那可能是电脑板的问题，如果依旧，看看你的节气门是否太脏了，需要清洗了。还有一种可能是节气门不能回位。 问题四：怠速控制系统的功能有几点？分为哪几种不同的类型 怠速控制的主要内容有：起动后控制、暖机过程控制、负荷变化控制、减速控制等 怠速控制系统是电控发动机的一个子系统，主要由传感器、ECU及执行机构组成。 怠速控制均采用发动机转速反馈法的闭环控制方式 ，即发动机转速传感器将发动机的实际转速和目标转速进行比较，根据比较的差值确定使发动机达到目标值的控制量，并通过执行机构对发动机怠速转速进行校正。 车速传感器信号和节气门位置传感器信号用于判断发动机是否处于怠速工况。当节气门处于怠速位置，车速低于2KM/h时，ECU便确认发动机处于怠速工况，并启动怠速控制系统实施怠速控制 冷却液温度传感器信号、空调压缩机接通信号、自动变速器档位信号、蓄电池电压等信号用来确定发动机怠速时的目标转速。不同怠速条件下的目标转速值已预先存储在ECU的存储器中。发动机转速信号作为怠速控制系统反馈信号，用来计算控制量的大小 ECU一般不单独设置，是由燃油喷射系统、点火系统等 共用一个，这使系统简单化、提高控制精度。执行机构的作用是调节发动机进气量，实现怠速控制。按进气量调节方式不同，一般可分为两种类型：一是改变旁通空气道截面积的旁通空气式 ，二是直接改变节气门开度的节气门直动式 。 问题五：怠速控制系统有几种类型 怠速控制执行机构的类型：节气门直动式和旁通空气式。 参考文档：1.怠速控制系统的组成与控制原理？ 答：怠速控制系统的组成：1）传感器：转速传感器、节气门位置传感器、水温传感器、起动开关信号、空调开关信号、车速传感器、空挡起动开关信号、液力编剧器负荷信号、动力转向开关信号、发动机负荷信号。2）执行器：怠速控制阀3）ECU 怠速控制原理： ECU根据从各传感器的输入信号所决定的目标转速与发动机的实际转速进行比较，根据比较得出的差值，确定相当于目标转速的控制量，去驱动空气量的执行机构，使怠速转速保持在目标转速附近。 2.怠速控制执行机构的类型：节气门直动式和旁通空气式。 4.各种排放控制的工作原理？ 答：闭环控制 为了将实际空燃比精确控制在14.7：1附近，在发动机控制系统中，普遍采用由氧传感器组成的空燃比反馈控制方式，即闭环控制方式。为此，在三元催化转换器前面的排气歧管或排气管内装有氧传感器，用来据此排气中的氧气含量，并向ECU反馈相应的电压信号。ECU根据氧传感器反馈的空燃比浓稀信号，控制喷油量的增加或减少。 废气再循环控制 排气中的主要成分是CO2、H2O和N2等，这三种气体的热容量较高。当新混合气和部分排气混合后，热容量也随之增大。在进行相同发热量的燃烧时，与不混合时相比，可使燃烧温度下降，这样就抑制NOx生成。 二次空气吸入 利用废气的波动打开和关闭片簧阀，让空气断续地进入排气歧管。 二次空气喷射 使用空气泵，迫使空气进入排气歧管。 活性炭罐汽油蒸发污染控制 发动机工作时，ECU根据发动机转速、温度、空气流量等信号，以控制碳罐电磁阀的开闭来控制排放控制阀上部的真空度，从而控制排放控制阀的开度。当排放控制阀打开时，汽油蒸气通过排放控制阀被吸入进气歧管。 6.其它辅助控制装置的工作原理？ 答：正时控制 通过采用延长进、排气门的开启时间，增大气体的进出容量，以改善进、排气门的工作状态，继而提高发动机的性能。（不知是否正确） 断缸控制 当发动机处于部分负荷下运行时，控制系统指令切断几个气缸的汽油供给与点火，停止几个气缸工作，则剩下各缸的工作效率得到增大，从而提高了发动机的效率并降低了燃油消耗。而当功率不能满足要求时，再恢复其余气缸工作。 问题六：汽车制动电子控制系统主要控制内容有哪些 燃油的控制EFI,防抱死制动的控制ABS,防滑的控制ASR,点火的控制MCIC,发动机爆震控制系统EDCS,怠速控制系统ISC,空燃比反馈控制系统AFC,加速踏板控制系统EAP,第二代车载系统诊断OBD-2，电子控制变速系统ECT控制器区域网络CAN，电子控制悬架系统ECSS，自动空调系统ACS，座椅调整系统SAMS，车距报警系统PWS车载计算机OBC，车载电话CT，交通控制与通信系统TCIS，信息显示系统IDS，声音复制系统ESR，线束复用系统CHMS，牵引力控制系统TCS或TRC，电子控制制动辅助分配系统EBD，动态稳定控制系统DSC，辅助保护安全气囊系统SRS，安全带张紧控制系统STTS，车辆保安系统VESS，巡航控制系统CCS，电子控制动力转向控制系统EPS，防盗报警系统GACS，中央门销控制系统CLCS，前照灯控制与清洗系统HAWS，轮胎气压控制系统TPCS，气体放电车灯GDL，刮水器与清洗器控制系统WWCS，维修周期显示系统LSID，液面与磨损监控系统FWMS。 问题七：怠速控制系统的工作原理是什么? 他的专业名词应叫怠速控制阀. 怠速控制阀装在节汽门旁通空气孔上，由怠速控制器依据点火信号，在引擎转速低于750RPM时，即使怠速控制阀动作，以提升引擎转速， 在引擎转速超过1050RPM后,则停止动作。在配备冷气系统的车种，又将此控制阀称为怠速提速阀后因冷气压缩机动作后，产生引擎负载，使引擎怠速降低，而怠速控制阀随之动作，以维持怠速的稳定性。 怠速控制阀由点火开关供电，只要点火开关转至ON位置，怠速控制阀即通电，发动机电脑控制其电路搭铁。当发动机的工作参数偏离正常值时，便使用该阀来调整怠速转速。怠速转速是通过控制旁通节气门体的空气量来调整的。发动机起动后，怠速控制阀开启一段时间进气量增加，使发动机怠速转速提高约150r/min-300r/min。当发动机冷却液温度较低时，怠速控制阀开启，以获得适当的快怠速。发动机电脑根据不同的冷却液温度，通过改变传到怠速控制阀的信号强度来控制怠速控制阀柱塞的位置。 步进电机式怠速控制阀是世界上目前应用最多的一种怠速控制装置。用于汽车电喷系统旁通空气通道的开度，从而调节旁通气量，使发动机转速达到所要求的目标值。结构原理：由永久磁铁构成的转子，激磁线圈构成的定子和把旋转运动转换成直线运动的进给丝杆及阀门等部分组成。它利用系统供给的步进信号进行转换控制，使转子可以正转，也可以反转，从而使阀芯（丝杆）进行伸缩运动以达到调节旁通空气道截面的目的，从而稳定怠速，并达到理想的怠速转速。 问题八：怠速控制阀有那几种 很多【汽车有问题，问汽车大师。4S店专业技师，10分钟解决。】 问题九：汽车怠速的控制器叫什么 拉线的话，控制怠速的是怠速马达。电子节气门的话。就直接电子节气门控制【汽车有问题，问汽车大师。4S店专业技师，10分钟解决。】 问题十：发动机断油控制的内容有那些? 1.超速断油控制，当发动机转速超过设计（设定）转速的时候，发动机会切断供油。发动机电脑检测到发动机的转速已经超过设定转速的时候，会控制喷油器停止喷射。 2.急减速断油控制，当发动机转速超过设定转速，同时发动机节气门从较大开度迅速关闭到怠速位置，此时发动机会实现断油控制。发动机电脑检测到发动机转速较高，且节气门由较大开度迅速关闭到怠速位置的时候（通过监测节气门位置信号），发动机电脑会控制喷油器停止喷射，切断燃油供给。 3.搭载自动变速器的汽车，在换挡时，实现断油控制。 以上是三种发动机断油的情况，断油其实就是让喷油器停止喷射。

十七届三中全会通过的《中共中央关于推进农村改革发展若干重大问题的决定》指出“现有土地承包关系要保持稳定并长久不变”。也就是说承包期不再是三十年而是无期限的，三十年后也不动。添人后你可以采取两种办法解决生活问题，一是向城里人一样去打工或经商办企业，二是从别人手里转租土地耕种。前者是中央的意图，减少农民，逼迫农民弃农经商提高生活质量。要知道光靠一亩三分地永远都不能发财。后者将土地转租给大户实现集中经营是中央的意图，让更多的农民弃农经工经商，从而全国减少农民，实现国家、集体、个人都富强。早做准备吧，到那时你一定会感觉比种地强

超滤膜的原理是什么？在超滤膜两侧存在压力差的情况下，当自来水流过膜表面时，超滤膜表面密布的许多细小的微孔(每米长的超滤膜丝管壁上分布有约60亿个0.01微米的微孔)只允许水分子及小分子物质(有益矿物质和微量元素)通过，而体积大于微孔直径的物质(细菌、胶体、铁锈、悬浮物、泥沙、大分子有机物的直径都大于细菌)则被截留，从而实现对自来水的净化的效果。孔径与分子量之间有关系吗？一般超滤截留分子量的范围约为300-500000，这个分子量对应的膜孔径是2-50nm。如果孔径规定大小不一样的话，截留分子量可能也不一样

　　1、白天与山坡等高的谷地上空气温低于山坡，谷地上空气流下沉，山谷底部气压高，谷底的风吹向山坡，形成谷风；夜晚与山坡等高的谷地上空气温高于山坡，谷地近地面空气上升，山坡上气压高，山坡上的风吹向谷底形成山风。 　　2、山谷风是出现于山地及其周边地区的，具有日周期的地方性风（local winds）。 　　3、山谷风的成因主要为昼夜交替过程中山坡-山谷和山地-平原间的气温差。气温差带来了近地面大气的密度和气压差，气压梯度力推动气流由高压（低温）区域向低压（高温）区域运动。此外夜间下坡风和山风的运动也受到重力和摩擦力的影响。

forget英 [fu0259"get] 美 [fu025a"ɡu025bt] vt.忘记；忽略vi.忘记n.(Forget)人名；(法)福尔热forget [fu0259"ɡet]vt.忘，忘记，遗忘；记不起来，没记得：I"msorry,I"veforgottenyourname.对不起，我记不起你的姓名了。Hehasforgottenmuchofwhathelearned.他过去学过的东西已经忘了大半。(无意)漏做(某事)；忘带；疏忽，忽视：Dont"forgettowrite.别忘记写信来。Iforgotmykeys.我忘了带钥匙。(有意)忽视，忘却，漠视：Let"sforgetourdifferences.让我们忘掉我们的分歧吧。

方法如下：1、通过检查蓄电池的电压是否充足来判别，蓄电池长期保持充足的电量说明发电机工作性能正常。2、打开点火锁不启动车，用金属工具接近发电机皮带轮，正常时应有明显的磁场吸引力。3、找车后万用表测试发电机输出电压，随着油门加动电压会随之上升，最高能达到14.5V左右，说明发电机发电正常。怠速马达是控制机动车怠速的一种元件，其目的是用来根据汽车怠速时候的发动机负荷来调节发动机怠速转速的。怠速马达的作用是在汽车怠速运行时，根据发动机温度高低和负荷大小，改变怠速空气道的截面积，使发动机在不同条件下都有最佳的怠速转速。怠速马达的工作原理：怠速马达安装在节流阀体上，通过步进电机调节怠速气孔的面积，从而控制发动机进气管的进气量，之后进气压力传感器将感应到的进气压力信号传送到ECU上，ECU进行判断进气量和发动机负荷，再计算出所需的喷油量，以此控制发动机怠速的功率。发动机怠速靠怠速马达控制，在发动机运转时，如果车主松开油门踏板，发动机将进入空转状态，此时发动机的转速机为怠速转速，怠速马达通过调节进气量，进而使发动机的怠速转速进入最佳。如果空气中灰尘过多，发动机在运行时，怠速马达阀芯与阀座处会堆积污垢，当污垢积存过多时，发动机将会出现怠速过低、怠速稳定性差、行驶时易熄火。

热力环流说明了只要有冷热差异后，就会引起气流的运动，最终形成环流。城市与乡村比较，因为燃烧化石燃料排放的废气更多，汽车尾气的排放以及植被也较缺乏稀疏，所以城市大量废气吸收地面辐射而稳定比郊区更高，越接近城市稳定越高，越接近市中心附近就越高，所以形象称之为热岛，由于城市温度高气流上升，近地面形成低压，郊区温度较低气流下沉，近地面形成高压，所以近地面就会形成从郊区到城市的风，高空风向从城市到郊区，从而形成了热岛环流。同理海陆热力性质不同（同一时间吸热放热速度不同，所以海陆温度总是不同），白天时，陆地温度高于海洋，所以陆地气流上升，近地面形成低压（类似于城市），海洋温度较低气流下沉，近地面形成高压（类似于郊区），近地面的风从海洋吹向陆地，高空风相反，形成了环流，夜晚时，陆地气温低，海洋气温高（相当于城市郊区的角色晚上互换了）同理也形成了环流。我们把近地面随昼夜交替而变化的风就称之为海陆风。

是双胞胎姓名 娜奥美(姐姐) , 丽莎(妹妹) 身高：100cm 体重：14.5kg 出生日期 2005年11月9日 韩美混血，曾居住中国青岛，现已回韩。 妹妹丽莎比较瘦

去百度里搜forget，会出来语音

月明星稀,月暗星多属于感觉对比的心理现象。感觉的对比现象：是指当同一感官受到不同刺激的作用时，其感觉会发生变化。感觉的对比可以分为同时对比现象和继时对比现象。几个刺激物同时作用于同一感受器产生的对比现象称为同时对比。这在视觉中表现得很明显。视觉对比可分为无彩色对比和彩色对比，前者对比的结果是引起明度感觉的变化。例如，同样两个灰色小方块，一个放在白色背景上，一个放在黑色背景上，结果在白色背景上的小方块看起来比黑色背景上的小方块要暗得多，同时在相互连接的边界附近，对比特别明显。彩色对比的结果是引起颜色感觉的变化，而且是向着背景色的补色方向变化，例如，两个绿色正方形，一个放在蓝色背景上，一个放在黄色背景上，结果在黄色背景上的正方形看上去略带蓝色，在蓝色背景上的正方形看上去略带黄色，同时在两色的交界附近，对比也特别明显。

热力环流原理可以解释山谷风。白天，山坡接受太阳光热较多，成为一只小小的“加热炉”，空气增温较多；而山谷上空，同高度上的空气因离地较远，增温较少。于是山坡上的暖空气不断上升，并在上层从山坡流向谷地，谷底的空气则沿山坡向山顶补充，这样便在山坡与山谷之间形成一个热力环流。下层风由谷底吹向山坡，称为谷风。 热力环流的原理是什么 热力环流是由于地面冷热不均而形成的空气环流，它是大气运动的一种最简单的形式。如果地面受热多，近地面空气膨胀上升，这样，近地面的空气密度减小，形成低压；上升的空气到上空聚集起来，使上空的空气密度增大，形成高气压；如果地面受热少，空气冷却收缩下沉，上空的空气密度减小，形成低气压；因为有下沉气流，近地面的空气密度增大，形成高气压。就同一水平面而言，气流总是由高压流向低压。这样，这些空气的水平运动和垂直运动，就构成了简单的热力环流圈。作用：冷热差异导致了空气的垂直运动，使水平方向出现了气压差，引起水平气流的运动。海陆风、山谷风、城市热岛环流、季风等都是热力环流的具体表现。”

一般用于女性名，常见为：直美、尚美、奈绪美、ナオミ

超滤的工作原理是什么？在超滤膜两侧存在压力差的情况下，当自来水流过膜表面时，超滤膜表面密布的许多细小的微孔(每米长的超滤膜丝管壁上分布有约60亿个0.01微米的微孔)只允许水分子及小分子物质(有益矿物质和微量元素)通过，而体积大于微孔直径的物质(细菌、胶体、铁锈、悬浮物、泥沙、大分子有机物的直径都大于细菌)则被截留，从而实现对自来水的净化的效果。

汽车的4S店更换。四眼波罗更换怠速马达需要有电脑做匹配，有条件才可更换，因此个人无法操作，需要去汽车的4S店更换。“马达”为英语motor的音译，即为电动机、发动机，工作原理为通过通电线圈在磁场中受力转动带动起动机转子旋转，转子上的小齿轮带动发动机飞轮旋转。

毛巾的英语是：towel。1、释义n.毛巾；手巾；纸巾；抹布v.用毛巾擦干2、短语towel ring毛巾环；手巾环；毛巾挂环；毛巾圈sanitary towel卫生带；卫生巾；月经垫；护垫face towel面巾；洗脸毛巾；小方巾；毛巾towel rack毛巾架；浴巾架；纸巾架tea towel茶巾；擦拭杯盘用的抹布；抹布dish towel洗碗布；擦盘巾；洗碗巾；擦碗布operation towel手术巾bathing towel浴巾towel的例句：1、Use a disinfecting cleanser once a week on the bathroom floor and sides of the tub and shower; rinse well and dry the surfaces with a towel.每周用消毒清洁剂清洗浴室地面、浴缸外侧以及淋浴间，然后用毛巾擦干。2、The fabric bed head was stained where other guests" heads had been and I had to put a towel over it before I could sleep.用丝织成的枕头被以前用过的客人染色，我睡之前不得不盖上一个毛巾。3、Dye printing towel merit artistic, variety more changeable, after the shortcoming washes the variety to be easy to draw back.印花毛巾优点是美观、花色较多变化，缺点是洗涤后花色易退。