重组DNA分子需要限制性内切酶和DNA连接酶和DNA聚合酶

li**chai1232022-10-04 11:39:541条回答

重组DNA分子需要限制性内切酶和DNA连接酶和DNA聚合酶
请分别介绍三种酶的作用异同,再解释为什么要用或不用

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smxxxt 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
错 没有DNA聚合酶 限制性内切酶是切开特定序列 切开后进行基因重组 重组完以后通过DNA连接酶来连接碳骨架 而碱基是自动连接的,不需要酶 所以不需要DNA聚合酶
1年前

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目的基因的构建过程中需要什么工具?只考虑两两结合,产生几种重组DNA分子
gmgh2945481年前3
yuan2x 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%
构建过程中需要限制核酸内切酶、DNA连接酶和运载体三种工具.只考虑两两结合的话,产生3种重组DNA分子,即目的基因和目的基因、运载体和运载体、目的基因和运载体结合形成的重组DNA分子.
质粒上,每种酶的切割位点最好只有一个,以便获得结构单一的重组DNA,这句话是什么意思
beerw1年前1
songshu789 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
这个跟遗传学有类似的地方比如质粒是D目的基因是d,则两两组合的结果有DD,Dd,dd。那一个切割位点,可以跟好的获得不是组合的DNA
目的基因和运载体重组完是筛选含有目的基因的DNA吗 还是将重组DNA导入受体细胞在筛选
金属6661年前1
小霸主 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
导入受体细胞后再筛选.
因为载体上有抗药性基因,成功导入载体的大肠杆菌就能在含抗生素的平板上活下来,没导进去的就死了.
求问第一个重组DNA分子的意义是什么?
巷子口的眼神1年前1
elsa1985 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
这是世界上第一个重组DNA分子.1973年,科恩(S.Cohen)等人把两个不同质粒的DNA拼接起来,构成一个重组质粒,并将该重组质粒转入大肠杆菌,第一次完整地建立起了基因克隆体系.DNA重组技术创立近30多年来所获得的丰硕成果已经把人们带进了一个不可思议的科学世界,使人类获得了打开生命奥秘和防病治病“魔盒”的金钥匙.
标记基因作为重组DNA载体的重要标记的问题
标记基因作为重组DNA载体的重要标记的问题
大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因(该基因可以认为是标记基因),当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒.其中的“质粒与外源DNA组合”是有可能没组合上吗?
为什么可以根据受体是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因?
athlon_841年前1
晨晨梦 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
在基因工程中当然会出现外源DNA没有整合到质粒上的现象.
受体是否具有青霉素抗性只能证明受体细胞获得了质粒,至于是有没有连接上外源DNA片段的质粒则是一般不知道的.因此一般使用双选法.即有一个标记基因是抗性基因,另一个基因常用的是lacZ基因.这样通过蓝白斑筛选可获得转入了重组质粒的细胞.
以下说法正确的是(  )A.目的基因是指重组DNA质粒B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.重组DNA所用的工具
以下说法正确的是(  )
A.目的基因是指重组DNA质粒
B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C.重组DNA所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
D.只要受体细胞中含有目的基因,目的基因一定能够表达
周树1年前1
醉看花落 共回答了18个问题 | 采纳率77.8%
解题思路:1、目的基因:主要指编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子.
2、DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体,其中限制酶和DNA连接酶是常用的工具酶.
3、限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂

A、目的基因和质粒重组才能构成重组DNA质粒,A错误;
B、限制酶具有专一性,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,B正确;
C、运载体不是工具酶,C错误;
D、目的基因导入受体细胞后不一定能够成功表达,D错误.
故选:B.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查基因工程的原理及技术,要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤,掌握各步骤的相关细节,能结合所学的知识准确判断各选项,属于考纲识记和理解层次的考查.

基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙)。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(
基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙)。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是
[ ]
A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
zxs19601年前1
hanrong5 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%
D
.常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有几种?并分析其优缺点.比较大肠杆菌、植物和动物三种不同系
.常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有几种?并分析其优缺点.比较大肠杆菌、植物和动物三种不同系
作为基因工程宿主的优缺点.
还有 常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有几种?并分析其优缺点.
男子汉人1年前1
blackcat96 共回答了11个问题 | 采纳率72.7%
一般就是电穿孔法或化学转化法,或者你用噬菌体也行.
大肠杆菌系统是原核表达系统中比较成熟的一种.大肠杆菌的遗传背景和生理生化特性为人们所熟悉 ,宜于进行基因操作 ,生产技术简便 ,生产成本低廉 ,是目前使用广泛的表达体系.但是,由于大肠杆菌内不存在翻译后修饰等机制,所以大量表达的外源性蛋白通常为胞浆内不溶性、 无功能的包含体 ,需要经过变性复性等处理 ,才能使其成为有功能的可溶性蛋白.
植物能够进行光合作用,容易大规模生产,成本低廉.植物为外源蛋白的表达提供了真核蛋白质修饰场所,允许表达蛋白的正确折叠及转录后修饰.植物体只表达病原菌的部分免疫蛋白,不含致病微生物或潜在致病微生物,合成的外源蛋白相对比较安全.而且植物转基因操作和克隆技术比较成熟.但是,植物外源蛋白表达水平低,重组蛋白质中糖链结构会发生改变,对植物生产的表达产物进行提纯,下游生产费用昂贵.
虽然哺乳动物细胞产品表达量低 ,大规模培养复杂 ,但因其生物学特性更接近于人体天然产物 ,特别是对人体的免疫原性远低于原核等其它系统的同类产品 ,成为目前生物技术产品重点研发的系统.
只是粘性末端相同能否形成重组DNA分子
只是粘性末端相同能否形成重组DNA分子
如AATTG G
C CTTAA
可是上下分別是GA和CA之間的磷酸二酯键也可以連嗎?
shidream1年前1
kcjlei 共回答了15个问题 | 采纳率73.3%
可以.只要粘性末端相同,就可以形成重组DNA分子.因为碱基可以互补,连接酶即可将它们连接起来.连接酶制作用于磷酸二酯键,不像限制性内切酶酶那样识别特定的序列.
基因工程在畜牧养殖业上的应用有广阔的前景,科学家将某些特定基因与病毒DNA构成重组DNA,然后通过感染或显微注射技术转移
基因工程在畜牧养殖业上的应用有广阔的前景,科学家将某些特定基因与病毒DNA构成重组DNA,然后通过感染或显微注射技术转移到动物的
[ ]
A.去核卵细胞中
B.受精卵中
C.乳腺细胞中
D.任何体细胞中
00723958001年前1
读不懂的人生 共回答了15个问题 | 采纳率80%
B
转基因生物与环境安全的关系教材中提到重组DNA进入或土壤后能存活多久?技术很难追踪,因此人们担心,如果重组DNA与微生物
转基因生物与环境安全的关系
教材中提到重组DNA进入或土壤后能存活多久?技术很难追踪,因此人们担心,如果重组DNA与微生物杂交,会产生对动植物和人类有害的病原微生物. 那如何体现转基因生物危害环境安全了
青蛙酋长1年前1
freeranky 共回答了13个问题 | 采纳率100%
任何DNA离开细胞,就不能再进行遗传信息的传递和表达了,DNA和细胞的关系就如同意识和大脑的关系一样,DNA只能在细胞内发挥作用.
如果转基因过程是将目标基因插入到受体生物的染色体上,或整合到受体生物的线粒体、叶绿体的DNA上的,就绝不可能和其他微生物“杂交”.
估计你说的这种重组DNA,指的是重组质粒,几乎所有的细菌都存在大量的质粒,实际上一种细菌的质粒“逃逸”到另一种细菌体内的决不是容易事,此处的“逃逸”就是转基因过程,真的容易的话,你都可以转基因了!真这么容易的话,大自然数亿年来,应该天天都在转基因,基因工程也就不再是高科技了.
弱弱地问一句:你说的内容出自于哪一本教材?
下列关于转基因生物与环境安全的叙述错误的是 [ ] A.重组DNA与微生
下列关于转基因生物与环境安全的叙述错误的是
[ ]
A.重组DNA与微生物杂交可能会产生对动植物和人类有害的病原微生物
B.种植抗虫棉可以减少农药的使用量,对环境没有任何负面影响
C.如果转基因花粉中有毒蛋白或过敏蛋白,可能会通过食物链传递到人体内
D.重组微生物在降解某些化合物过程中产生的中间产物,可能会对环境造成二次污染
娃哈哈c5471年前1
aa1500 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
B
比较大肠杆菌、植物和动物三种不同系统作为基因工程宿主的优缺点.常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的
比较大肠杆菌、植物和动物三种不同系统作为基因工程宿主的优缺点.常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的
常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有哪几种?分析各种方法的优缺点
比较大肠杆菌、植物和动物三种不同系统作为基因工程宿主的优缺点.
黑猫猪脚1年前1
sxy0819 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%
我恰好是学生物的,你要是需要可以把你的邮箱给我,我给你发点PPT过去,全都有.
把重组DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上,
把重组DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上,
zyan10131年前2
恨嫁D人 共回答了16个问题 | 采纳率100%
这是为了便于筛选出含有重组DNA的寄主.转移重组DNA是将一定数量的重组DNA导入宿主细胞群,然而导入并不是百分百的.这就要区别那些含重组DNA的和不含重组DNA的宿主细胞.一种好的办法就是在重组DNA上再加上能弥补缺陷的基因,一起导入宿主.这样成功导入的宿主就可以存活,而未导入的就因为缺陷而不能在培养基上生存,从而将两者区别.
制作重组DNA时的载体为什么最好要用多个限制性内切酶切点?
制作重组DNA时的载体为什么最好要用多个限制性内切酶切点?
人教版高三选修本P50 倒数第二段“作为运载体必须有以下条件:……具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接……”
只要一个不是就够了吗?或者说是为了方便鸟枪法所以要越多越好?那如果是人工合成的目的基因的载体也是最好要多个吗?那是为什么?
Really_Despair1年前1
red73 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
5月7日 19:50 限制性核酸内切酶根据其功能可分为一级和二级两大类.在基因重组,基因解析方面广泛使用的是二级,一般情况下识别由4~8个碱基构成的特定序列有选择地将其切断.一级限制性核酸内切酶则跟特定的碱基序列结合,切断位置上不具有特异性.
以典型的二级限制性核酸内切酶EcoRI为例,识别5’-GAATTC-3’这一序列(双链中的另外一条链为3’-CTTAAG-5’)将各链上连接G(鸟嘌呤)和A(腺嘌呤)之间的磷酸二酯键切断生成两个DNA的断片.
由该例子可见,在许多场合,限制性核酸内切酶识别的地方是一个回文序列(palindrome),在这个位置上呈锯齿状切断后给生成断片的末端一个单链部分(叫做附着末端)用同一种限制性核酸内切酶切断的断片的末端是互相吻合的,所以使用连接酶就很容易把这些结合起来.这就是 “剪刀与糨糊”这种说法的由来.
为什么从土壤农杆菌中提取的质粒变为重组DNA分子后导入大肠杆菌,还要用标记基因筛选含目的基因的大肠杆菌,它原先不就有吗
bigoldwolf1年前3
hayescg 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
目的基因是利用重组质粒导入的,但大肠杆菌不一定会将它整合到自身基因中,目的基因有可能会丢失.所以质粒上需要含有标记基因,用标记基因来判断质粒有没有被整合,侧面反映目的基因有没有被整合.
对重组DNA分子形成的一些说法,不正确的是
对重组DNA分子形成的一些说法,不正确的是
A.需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与 B.重组DNA分子中含有目的的基因和密码子 C.通常用抗生素基因作为标记基因 D.重组DNA分子的形成是基因工程的核心
新新新xin1年前4
服和各 共回答了22个问题 | 采纳率86.4%
答:选B.解析:A项对限制性核酸内切酶和DNA连接酶是基因工程的工具.B项错,DNA分子重组中不含密码子.密码子是mRNA上的三个碱基.C项对,基因工程中作为运载体必须具有标记基因.D项对,基因工程的核心就是根据人们的需求定向改造生物的性状,让DNA分子重组.
将重组DNA导入水稻受体细胞的常用方法是什么?
1983jun1年前1
ZigZag8218 共回答了18个问题 | 采纳率77.8%
水稻是单子叶植物,所以要用基因枪法(单子叶植物常用),花粉管通道法也可,但农杆菌转化法只适用于双子叶植物.
如何测定重组DNA在受体细胞中的拷贝数,
珊瑚的思念1年前1
疯瘤菜籽 共回答了17个问题 | 采纳率100%
可以用定量荧光PCR的方法,当然这还是只能测定群体细胞里的拷贝数,如果一定要精确到单个细胞,那也可以考虑荧光原位杂交法.
具体的方法比较复杂,如果需要的话欢迎追问~
如何测定重组DNA在受体细胞中的拷贝数
bbbddd151年前1
tingeJN 共回答了30个问题 | 采纳率96.7%
==
PCR肯定可以
或许也可以酶切检测,流式什么的
..你是重组的质粒还是染色体DNA啊?想检测重组效率还是单个细胞(或单位细胞)内含有的拷贝数?
DNA连接酶可把目的基因与载体的粘性末端的碱基黏合,形成重组DNA 这句话哪里错了
niey961年前1
youkeng 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%
连的是含氮碱基,形成氢键
为什么重组DNA进入细菌细胞后不易被分解呢?
初可xin1年前1
一笑网事 共回答了11个问题 | 采纳率90.9%
因为一般的载体是质粒,与细菌有很好的相容性.(它不被DNA水解酶识别,具体不详)但也不是随便都能相互侵染的,类似选择性
基因表达载体的构建为什么也可以叫重组DNA?高中生物
看的淡一点1年前1
小惠03 共回答了20个问题 | 采纳率100%
因为在载体构建的过程中,载 体作为一个中间体,连接目的基因和生物体基因,所以叫重组DNA.
“一次基因工程操作中,能够摄入重组dna分子的受体细胞很多.”为什么错?知道水...
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“一次基因工程操作中,能够摄入重组dna分子的受体细胞很多.”为什么错?知道水电离产生的氢离子浓度或氢氧根浓度,可以判断出什么?怎么判断
beifangdeliang1年前3
一丝_花泪 共回答了23个问题 | 采纳率100%
1能够摄入重组dna分子的受体细胞很少,重组dna移入成功率一般很低
2先看温度 再看是否有酸碱或可水解的盐,酸碱电离产生的氢离子或氢氧根不是水电离产生而水解产生的氢离子或氢氧根是水电离产生的
什么是外源DNA,重组DNA,环状运载体DNA
广州老周海柳1年前1
mayfell 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%
外源DNA:通过基因工程技术或病毒感染等途径引入靶细胞中的DNA序列.
重组DNA:不同来源的DNA重新组合产生的DNA分子.
环状运载体DNA:在通过转化或转染将外源DNA导入细胞时所用的起辅助作用的DNA.
目的基因与运载体结合形成重组DNA是否是依据DNA分子杂交原理?
目的基因与运载体结合形成重组DNA是否是依据DNA分子杂交原理?
为什么?请说明理由.
那夜的烟火1年前1
mws3f25hw1518 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
不是.看看DNA分子杂交的定义吧.下面有资料,
还有:目的基因与载体结合形成重组DNA是利用限制性内切酶分别对目的基因和载体进行酶切产生粘性末端.然后利用T4连接酶进行连接,形成重组DNA.如果有转进感受态细胞,那么他就可以进行扩增,得到很多个相同的重组DNA.所以这个不是分子杂交.