基因表达载体的构建为什么也可以叫重组DNA?高中生物
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小惠03 共回答了20个问题
|采纳率100%- 因为在载体构建的过程中,载 体作为一个中间体,连接目的基因和生物体基因,所以叫重组DNA.
- 1年前
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为什么基因工程中构建基因表达载体中插入启动子和终止子属于基因突变98792821年前3
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心理啄木鸟 共回答了22个问题
|采纳率95.5%插入启动子或终止子,相当于插入三个碱基对,而基因中某个位点碱基对的增加或缺失,也属于基因突变的范围.1年前查看全部
- 在基因表达载体的构建中,下列说法错误的是( )
在基因表达载体的构建中,下列说法错误的是( )
①一个表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子
②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA
③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止
④所有基因表达载体的构建是完全相同的.
A.②③
B.①④
C.①②
D.③④caicaibaby5201年前1
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斜月微雨 共回答了17个问题
|采纳率88.2%解题思路:基因表达载体的构建的目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用.基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因.①基因表达载体的构建是基因工程的核心内容,一个表达载体的组成,除了目的基因外,还有启动子、终止子和标记基因等,故①错误;
②启动子在基因的首段,它是RNA聚合酶的结合位点,能控制着转录的开始,故②正确;
③终止子在基因的尾端,它控制着转录的结束,故③正确;
④由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分,以及目的基因导入受体细胞的方法不同,因此基因表达载体的构建是不完全相同的,故④错误.
故选:B.点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题考查基因表达载体的构建,可以通过理解记忆的方法平时加以训练,解题的关键是掌握教材知识.1年前查看全部
- 基因表达载体的构建
小鱼锅贴1年前0
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共回答了个问题
|采纳率
- 如图为基因表达载体模式图,下列有关叙述正确的是( )
如图为基因表达载体模式图,下列有关叙述正确的是( )
A.甲表示启动子,位于基因的首端,它是DNA聚合酶识别和结合的位点
B.乙表示终止密码子,位于基因的尾端,作用是使转录过程停止
C.丙表示目的基因,其作用是获取人们需要的性状
D.复制原点的存在有利于目的基因在宿主细胞内扩增qlinlin06081年前1
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一言而尽 共回答了21个问题
|采纳率85.7%解题思路:分析题图:基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等,如图,则图中甲表示启动子,乙表示终止子,丙表示抗性基因.
A、甲表示启动子,位于基因的首段,它是RNA聚合酶识别和结合的位点,A错误;
B、乙表示终止子,不是终止密码子,B错误;
C、丙表示抗性基因,其作用是筛选含有重组质粒的受体细胞,C错误;
D、复制原点的存在有利于目的基因在宿主细胞内扩增,D正确.
故选:D.点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的操作步骤,尤其是基因表达载体的构建过程,掌握基因表达载体的组成部分及各部分的功能,能结合所学的知识准确判断各选项.1年前查看全部
- 基因表达载体的构建:将生物的所有DNA直接导入受体细胞不是更简便吗?如果这么做会有什么后果?
wueil1年前1
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卖精来上网 共回答了26个问题
|采纳率96.2%所有DNA转入受体细胞就达不到让确定的基因按人类意愿表达的目的,也就失去了基因工程的意义了.1年前查看全部
- 在生物基因工程中,基因表达载体的构建中的复制原点是什么
人间的天使1年前2
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欧阳杉树 共回答了22个问题
|采纳率81.8%复制原点处的A和T特别多,相对氢键少,不稳定,DNA容易解旋,因此就容易和引物结合,成为转录的起点或复制的起点.启动子是复制原点附近的一段DNA,它和特定的物质(如激素)作用后,通过一系列复杂的正反馈机制,激活复制原点(复制原点通常被某些酶结合而不易解旋).1年前查看全部
- 基因表达载体有哪几部分组成?终止密码子是组成部分之一吗?
放mm5121年前1
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忧gg忧民不忧gg 共回答了15个问题
|采纳率86.7%基因表达载体由目的基因(插入基因)、启动子、终止子、标记基因(抗生素基因)等组成.终止密码子应是上面的目的基因的组成部分之一1年前查看全部
- (2014•天津一模)下列关于基因表达载体的构建描述错误的是( )
(2014•天津一模)下列关于基因表达载体的构建描述错误的是( )
A.基因表达载体的构建是基因工程的核心
B.基因表达载体的构建包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分
C.目的基因就是指编码蛋白质的结构基因
D.构建的基因表达载体都是相同的wywy92621年前1
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qwerty002 共回答了25个问题
|采纳率72%解题思路:1、目的基因:是人们需要的特定基因,主要指编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子.
2、基因表达载体的构建
(1)目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用.(2)基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因
②启动子在基因的首段,它是RNA聚合酶的结合位点,能控制着转录的开始,故②正确;
③终止子在基因的尾端,它控制着转录的结束,故③正确;
④由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分,以及目的基因导入受体细胞的方法不同,因此基因表达载体的构建是不完全相同的,A、基因表达载体使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用,是基因工程的核心,A正确;
B、基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因,B正确;
C、目的基因主要指编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子,C正确;
D、由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分,以及目的基因导入受体细胞的方法不同,因此基因表达载体的构建是不完全相同的,D错误.
故选:D.点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题考查基因表达载体的构建,意在考查学生的识记和理解能力,属于中档题.1年前查看全部
- 基因表达载体模式图上面的复制原点是干什么的?
raddine1年前1
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cuiowoo 共回答了26个问题
|采纳率92.3%ori区控制这个质粒可以在那类生物中复制.
比如穿梭载体,要有两个ori区,使其分别能在细菌、脓杆菌中复制.1年前查看全部
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关于基因表达载体
基因表达载体,不是用限制酶切开质粒,然后插入目的基因吗?那么,为什么又要有启动子来启动转录出mRNA?要RNA来干什么?窗外桃花朵朵开1年前3
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gyaaron 共回答了15个问题
|采纳率86.7%基因工程的目的就是要让一种生物的基因能够在另外一种生物体内表达,所谓的表达就是要合成蛋白质,所以目的基因要在受体细胞中转录成mRNA,再由mRNA翻译出蛋白质来.启动子的作用就是启动转录过程.你应该知道基因的表达是有选择性的,比如胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达,基因之所以只在特定细胞中表达就是由基因前的启动子来调节的,所以构建的基因表达载体时,要在目的基因前加上能让这个目的基因在受体细胞中表达的启动子.1年前查看全部
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利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素,需要构建一种能高水平表达的基因表达载体,选择合适的基因启动子至关重要.由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列,运用PCR技术单独克隆启动子存在困难.科研人员经过长期研究,终于发明了下图所示的一种克隆启动子的方法.请分析回答:
(1)培育转基因奶牛时,需要在生长激素基因编码序列前插入______的启动子;构建的基因表达载体导入动物受精卵常用______技术.
(2)由基因表达产物无法推知启动子碱基序列,其原因是______.
(3)过程①需选择的限制酶是______,过程③需选择的限制酶是______.过程④需要使用的工具酶是______.
(4)过程④中可以根据编码序列两端的部分碱基序列设计______进行扩增.运用PCR扩增DNA片段的原理是______.tuyu12171年前1
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martin717 共回答了18个问题
|采纳率88.9%解题思路:分析题图:外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、MboⅠ、HindⅢ的识别序列和切割位点,且限制酶BamHⅠ和MboⅠ的识别序列相同,用限制酶HindⅢ、MboⅠ和HindⅢ切割都会破坏目的基因.①表示获取目的基因的过程;②表示基因表达载体的构建过程;③表示将基因表达载体中的目的基因切开;④表示采用PCR技术体外扩增目的基因.(1)培育转基因奶牛时,根据基因的选择性表达原理,需要在生长激素编码序列前插入乳腺蛋白基因的启动子,使生长激素编码序列只在乳腺组织细胞中表达.构建的基因表达载体导入动物受精卵常用显微注射技术.
(2)因为基因中启动子的碱基序列不能被转录,所以由基因表达产物无法推知启动子碱基序列.
(3)含有目的基因的外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、MboⅠ、HindⅢ的识别序列和切割位点,但是用限制酶HindⅢ、MboⅠ和HindⅢ切割都会破坏目的基因,所以过程①应选择限制酶BamHⅠ.而限制酶BamHⅠ和MboⅠ的识别序列相同,所以过程③中要将基因表达载体中的目的基因切开,应选择位于目的基因上的另一个限制酶HindⅢ.过程④表示采用PCR技术体外扩增目的基因的过程,该过程在高温条件下进行,因此需要使用耐高温的DNA聚合酶(Taq酶).
(4)过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计引物进行扩增.PCR技术应用的原理是DNA复制.
故答案为:
(1)乳腺蛋白基因显微注射
(2)基因中启动子的碱基序列不能被转录
(3)Bam HⅠHindⅢ热稳定DNA聚合酶(Taq酶)
(4)引物DNA双链复制点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题结合克隆启动子的流程图,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,能正确分析图解,并从中获取有效信息准确答题,属于考纲理解和应用层次的考查.1年前查看全部
- 求详细的基因表达载体的组成,····
求详细的基因表达载体的组成,····
不好意思,少说了一些,是在基因工程中的基因表达载体~···,boni19832261年前5
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soho1688 共回答了21个问题
|采纳率90.5%完整的表达载体必须包括:
1、复制子,在细菌中扩增时所必须.
2、启动子,目的基因在细菌或细胞中转录所必须,转录了才能翻译,是谓“表达”.
3、原核筛选标记,细菌增菌所必须.
4、真核筛选标记,如果是真核表达,就是必须的.
5、多克隆位点,即酶切位点,插入目的片段的区域.
6、其他所需构件,可视实验设计情况而选用现成载体或在载体上自行添加.
另:表达的起始和终止,在目的基因上附带起始密码子和终止密码子.1年前查看全部
- 如图为基因表达载体的模式图.下列有关基因工程中载体的说法错误的是( )
如图为基因表达载体的模式图.下列有关基因工程中载体的说法错误的是( )
A.基因工程的核心步骤是基因表达载体构建
B.任何基因表达载体的构建都是一样的,没有差别
C.图中启动子位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,所以也叫起始密码子
D.抗生素基因的作用是作为标记基因,用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因快乐薰衣草1年前1
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zxzx8613 共回答了15个问题
|采纳率93.3%解题思路:根据题意和图示分析可知:图示为基因表达载体的模式图,基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子、标记基因(插入基因)、标记基因(抗生素抗性基因)等.据此答题.A、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建,A正确;
B、不同基因表达载体的构建过程不一定相同,B错误;
C、启动子位于基因编码区的上游,是RNA聚合酶识别和结合的部位,但不能叫起始密码子,因为密码子位于RNA上,C错误;
D、抗生素抗性基因作为标记基因,用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因,D正确.
故选:BC.点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题结合基因表达载体的模式图,考查基因工程的原理及技术,要求学生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用,能结合所学的知识准确判断各选项,属于考纲识记层次的考查.1年前查看全部
- 如果是将目的基因转入动物细胞,在基因表达载体构建这一步,用的是什么载体,还是质粒?
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yxue122 共回答了18个问题
|采纳率94.4%将目的基因转入动物细胞,在基因表达载体构建这一步,用的肯定是质粒.没有质粒就没法进行构建.
常用的质粒有两种,一种是真核表达质粒,比如pcDNA3.1等,它们有真核启动子比如CMV,可以进行瞬时转染.另一种是病毒质粒,比如逆转录病毒质粒等,它们可以包装成逆转录病毒,整合到细胞基因组中,稳定地遗传并表达.
但不论哪种载体,在构建的时候,一定是以质粒的形式进行的,否则无法操作.1年前查看全部
- 载体,质粒,基因表达载体3者有何不同?
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rrhero10 共回答了14个问题
|采纳率100%载体是一种运输工具,细胞膜上的蛋白质也是一种载体,其识别很单一,也因此有了选择透过性.
质粒是一种小型环状DNA,广泛存在于微生物中,一般的基因工程中,质粒被用来当做目的基因的运载体,也是一种运输工具.
基因表达载体是目的基因和运载体连接后的产物.1年前查看全部
- 下列关于基因表达载体构建的相关叙述中,不正确的是( )
下列关于基因表达载体构建的相关叙述中,不正确的是( )
A.需要限制酶和DNA连接酶
B.抗生素抗性基因可作为标记基因
C.在细胞外进行
D.启动子位于目的基因的首端,是启动翻译的一段DNA人生如梦总难醒1年前1
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终会有一天 共回答了14个问题
|采纳率92.9%解题思路:构建基因表达载体是基因工程的核心步骤,该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,还需要DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子;基因表达载体的组成包括复制原点、启动子、目的基因、标记基因和终止子.据此答题.A、构建基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶,A正确;
B、抗生素抗性基因可作为标记基因,便于筛选,B正确;
D、基因表达载体的构建过程在体外进行,C正确;
D、启动子位于目的基因的首端,是启动转录的一段DNA,D错误.
故选:D.点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、工具和操作步骤,掌握各操作步骤中的相关细节,能运用所学的知识准确判断各选项,属于考纲识记层次的考查.1年前查看全部
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xuzike5201年前1
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48453a45b9012c10 共回答了16个问题
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构载体要连接两个接头,一个接头是一个双链;一个接头的一个链形成一个磷酸二酯键,因此要形成4个磷酸二酯键.1年前查看全部
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基因表达载体的构建问题.
这时候把目的基因植入表达载体里面,这个载体是和质粒一回事吗?基因植入载体后还要再植入受体,所以它是运输的作用吗?
那么请问载体的作用除了运输之外?
可是我觉得载体要比质粒广泛啊,质粒只是一种DNA啊。chenwg1351年前3
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huohuo1984 共回答了17个问题
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载体的作用不仅仅是起到介导外源基因导入受体细胞的作用1年前查看全部
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基因工程题,求问什么是基因表达载体的构建是什么意思,谢谢
2.在基因表达载体的构建中,下列说法不正确的是( )
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ouyangbo7758 共回答了16个问题
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所有基因表达载体的构建是完全相同的绝对错,有些可以不含复制原点1年前查看全部
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heyongtao 共回答了14个问题
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(1)基因表达载体含有目的基因、标记基因、启动子和终止子四个部分,其中启动子的作用是______,而终止子上特殊的碱基序列能够阻碍的移动,并使其从模板链上脱离下来.
(2)基因工程操作过程中,将目的基因导入植物受体细胞时,一般采用______法,选择______做运载体;若导入动物细胞则采用______法,而细菌作为受体细胞时应用______溶液处理使其成为感受态细胞便于吸收游离的DNA.
(3)动物细胞培养中需要使用胰蛋白酶而不是胃蛋白酶处理______能力旺盛的组织或器官,是因为______.细胞培养时培养液中一般需加入动物血清,其作用是______.
(4)胚胎分割技术是指采用机械方法将早期胚胎切割成多个等份,然后经移植后获得同卵双胎或多胎的技术,因后代遗传物质相同,故我们可将此技术认为是______生殖.大量的实验证明同卵多胎成功的概率极低,其可能的原因是______.天空颜色Faye1年前1
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|采纳率86.7%解题思路:1、将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
2、动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养.
3、来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质,胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一.胚胎分割存在问题:胚胎分割的分数越多,操作的难度越大,移植的成功率也越低.(1)启动子的作用是驱动基因,促进基因表达.
(2)将目的基因导入植物受体细胞时,一般采用农杆菌转化法,选择Ti质粒做运载体;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞时常有感受态细胞法,即用CaCl2溶液处理微生物细胞,使其成为感受态细胞,便于吸收周围环境中游离的DNA分子.
(3)动物细胞培养的适宜pH呈弱碱性,这会导致胃蛋白酶变性失活,因此动物细胞培养中需要使用胰蛋白酶而不是胃蛋白酶处理分裂能力旺盛的组织或器官.细胞培养时培养液中一般需加入动物血清,因为血清可以补充合成培养基中缺乏的物质(如促细胞生长因子等).
(4)胚胎分割所得后代遗传物质相同,因此该技术可视为无性生殖.胚胎分割的分数越多,操作的难度越大,移植的成功率也越低,因此同卵多胎成功的概率极低.
故答案为:
(1)驱动基因
(2)农杆菌转化 Ti质粒 显微注射 CaCl2
(3)分裂 动物细胞培养的适宜pH呈弱碱性,会导致胃蛋白酶变性失活 血清可以补充合成培养基中缺乏的物质(如促细胞生长因子等)
(4)无性 胚胎分割的分数越多,操作的难度越大,移植的成功率也越低点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术;胚胎分割移植.
考点点评: 本题考查基因工程、动物细胞培养和胚胎分割等知识,要求考生识记基因工程的操作步骤及相关细节;识记动物细胞培养的具体过程及条件;识记胚胎分割技术的特点及存在问题,能结合所学的知识准确答题.1年前查看全部
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基因表达载体不就是使目的基因导入受体细胞吗?谢谢回答··o(∩_∩)o...
基因导入植物细胞是不是将基因表达载体植入Ti质粒中?还是只把目的基因?如果是基因表达载体,则在使目的基因插入受体细胞中染色体DNA中时插入的是基因表达载体还是只是目的基因?o(∩_∩)o...鹰之精灵1年前4
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nokia6150qq 共回答了22个问题
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你必需构建好了载体(终止子,开始子,标记基因.等等),再植入到受体细胞中,从而表达出目的基因所控制的形状.1年前查看全部
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sk198549 共回答了24个问题
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部分质粒具有复制原点这一结构,作用是在此点处开始DNA的复制
起始密码子的作用是开始翻译过程
这三个名词分别代表了三个过程,即复制,转录,翻译
如有疑问,欢迎追问;如果喜欢,欢迎采纳
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二哥_hh1年前2
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长毛ssss 共回答了24个问题
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构建完成后,即可将表达载体导入宿主细胞,进行目的基因的表达.1年前查看全部
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ninayi 共回答了23个问题
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不需要导入细胞核中一起复制么?质粒可以在原生质中复制么?泥慢1年前3
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卡奥佩拉 共回答了17个问题
|采纳率88.2%有人说的不对.一般的质粒,除非是穿梭质粒,否则在真核细胞中根本无法复制.
而且,即使复制,也必须在细胞核中进行,在原生质中没有复制相关的酶.
质粒进入原生质体后,会有一些进入细胞核.其机制目前还不十分清楚,可能与特定的序列被识别有关.进入细胞核的质粒就可以转录,之后mRNA就可以运出核进行翻译.
质粒上一般都是带有强启动子,比如CMV.可以保证少量质粒就可以多次转录,最终生成足量蛋白质.1年前查看全部
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关于基因表达载体模式图
我想问的是,插入基因里是不是包含目的基因和标记基因?如果说“标记基因”是“抗生素抗性基因”的话,那它不在启动子和终止子之间,又怎么表达出来呢?
如果抗生素抗性基因不是标记基因的话,那能不能给我解释一下不在启动子和终止子之间的部分有什么意义?当然复制原点的作用是不用解释了.
偶遇凡路1年前1
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yehao56 共回答了15个问题
|采纳率100%插入基因狭义来说只是目的基因,而标记基因是用来检测的,广义上也是插入的成分1年前查看全部
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mosenr1年前5
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xchz 共回答了26个问题
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下列哪项不是基因表达载体的组成成分( )
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91kongtong 共回答了11个问题
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B、终止密码子是mRNA上的碱基,终止翻译的作用,B错误;
C、标记基因是基因表达载体的组成成分,C正确;
D、复制原点是基因表达载体的组成成分,D正确.
故选:B.点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题主要考查学生对知识的记忆和理解的能力.基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与鉴定.基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤.1年前查看全部
- (2008•南通一模)下列关于基因表达载体构建的相关叙述,不正确的是( )
(2008•南通一模)下列关于基因表达载体构建的相关叙述,不正确的是( )
A.需要限制酶和DNA连接酶
B.必须在细胞内进行
C.抗生素抗性基因可作为标记基因
D.启动子位于目的基因的首端hanbing1211年前1
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戒阳光 共回答了15个问题
|采纳率93.3%解题思路:基因表达载体的构建目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用.基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因.A、基因表达载体构建过程中需要限制酶和DNA连接酶两种工具酶的协助,A正确;
B、基因工程的操作中基因表达载体构建是在体外条件下进行的,B错误;
C、抗生素抗性基因或荧光标记基因可作为标记基因,便于目的基因的筛选,C正确;
D、基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、标记基因,其中启动子位于目的基因的首端,终止子位于目的基因的末端,D正确.
故选:B.点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题考查了基因表达载体构建的相关知识,意在考查学生的识记和理解能力,属于中档题.1年前查看全部
- (2013•南通模拟)如图表示某种绿色荧光蛋白基因表达载体的构建过程.绿色荧光蛋白基因有720个碱基对(bp),质粒有5
(2013•南通模拟)如图表示某种绿色荧光蛋白基因表达载体的构建过程.绿色荧光蛋白基因有720个碱基对(bp),质粒有5369个碱基对(bp),其上酶切位点和标记基因如图.请回答:
(1)限制酶BamHI的识别序列和切割位点是G↓GATTC,则该酶切割DNA后形成的黏性末端是______.过程③所需的工具酶是______.
(2)②过程可以通过PCR技术进行,为了准确获取目的基因,设计引物对是关键.设计引物对的依据______.
(3)基因工程中常用限制酶酶切后再电泳的方法进行重组质粒的鉴定和筛选,电泳时DNA片段的迁移速率与片段大小呈负相关.
①图中质粒经BamHⅠ、HindⅢ双酶切后进行电泳,出现了一条长度为5300bp的DNA条带(如图1),而重组质粒经BamHⅠ、HindⅢ双酶切,电泳后形成了两条长度分别为______和______的腿片段条带.
②图中质粒经BamHI单酶切后电泳图谱如图2.请在答题纸相应图中画出重组质粒用BamHI单酶切并电泳后条带所在的大致位置.______
(4)该基因工程中的受体细胞无任何抗生素抗性,某同学用只含有氨苄青霉素的培养基筛选导入重组质粒的受体细胞.他能否成功?为什么?______.yjut1年前1
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ljw7283 共回答了21个问题
|采纳率95.2%解题思路:分析图解:在质粒上存在一个复制原点,两个抗性基因和三个酶切位点,但是限制酶BamHI的切割位点存在于四环素抗性基因中.因此在利用BamHI和HindⅢ双酶切割时,原质粒上将缺少部分片段;而目的基因也用这两种酶进行切割,能够保证目的基因和质粒之间定向连接.因此图中③表示利用DNA连接酶形成重组质粒.
PCR技术中,在低温复性的过程中,引物将结合到DNA的两条链上,并且遵循碱基的互补配对原则.
电泳技术中,电泳时DNA片段的迁移速率与片段大小呈负相关,因此碱基对多的在上,少的在下.(1)限制酶BamHI的识别序列和切割位点是G↓GATTC,则该酶切割DNA后形成的黏性末端是GATTC--.过程③表示切割后的目的基因和质粒发生重组,该过程需要DNA连接酶.
(2)目的基因的扩增可以通过PCR技术进行,为了准确获取目的基因,设计引物对是关键,设计引物对的依据绿色荧光蛋白基因两端的部分DNA序列.
(3)①根据题意可知,绿色荧光蛋白基因有720个碱基对(bp),质粒有5369个碱基对(bp).图中质粒经BamHⅠ、HindⅢ双酶切后进行电泳,出现了一条长度为5300bp的DNA条带(如图1),说明5300bp的DNA条带是原质粒中切去部分片段的质粒;而目的基因也用这两种酶进行切割,因此形成的重组质粒上仍然存在这两种酶的识别位点.则重组质粒经BamHⅠ、HindⅢ双酶切,电泳后形成了两条长度分别为5300bp(质粒)和720bp(目的基因)的片段条带.
②质粒有5369个碱基对,质粒经BamHI单酶切后碱基长度不变.而重组质粒的长度=5300+720=6020kb,用BamHI单酶切割长度也不变.由于电泳时DNA片段的迁移速率与片段大小呈负相关,因此电泳后重组质粒在图2中质粒之上.
(4)由于该基因工程中的受体细胞无任何抗生素抗性,而导入质粒或重组质粒的受体细胞都具有氨苄青霉素抗性,都能正常生长,因此用只含有氨苄青霉素的培养基筛选导入重组质粒的受体细胞不能成功.
故答案为:
(1)GATTC--DNA连接酶
(2)绿色荧光蛋白基因两端的部分DNA序列
(3)①5300bp720bp
②如右图
(4)不能成功,导入质粒或重组质粒的受体细胞都具有氨苄青霉素抗性,都能正常生长点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题考查了基因工程的相关知识,意在考查考生的分析能力和理解应用能力,难度适中.考生要明确基因工程的工具酶的作用以及PCR技术中引物的特点;能够从题干获取有效解题信息;在目的基因筛选时不能仅仅根据标记基因鉴定.1年前查看全部
- 将目的基因导入大肠杆菌需要先在体外构建基因表达载体?
将目的基因导入大肠杆菌需要先在体外构建基因表达载体?
用Ca2+处理转化的方法和这个方法是并列关系?yefeng881年前1
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wjm935 共回答了19个问题
|采纳率94.7%在体外构建基因表达载体主要是指将目的基因与载体(一般以质粒居多)连接,形成的重组DNA才能导入大肠杆菌,它能在大肠杆菌细胞内复制和表达.
用Ca2+处理,我学的是用Ca2+处理大肠杆菌的细胞壁,增大细胞壁的通透性,便于重组DNA分子导入大肠杆菌细胞.
所以这两个应该是同一个方法的两个步骤.1年前查看全部
- 这句话是对还是错----构建基因表达载体时,必须用限制霉将运载体切开两个切口
gmacell1年前2
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高三入ll 共回答了16个问题
|采纳率87.5%构建基因表达载体时,需要将外源基因(即要表达的基因)连接到表达载体上.
一般做法是:用限制性内切酶将表达载体切开,同时用同一种限制性内切酶去切割外源基因(不要破坏基因的完整性),这样,表达载体和外源基因就会产生相同的黏性末端,再利用连接酶将二者连接在一起.这时,外源基因就插入到表达载体中了.
从上面可以看出,利用限制性内切酶的目的主要是使表达载体产生缺口,以便将外源基因连进去.如果可以通过其它方法(如同源重组)将外源基因连进表达载体,就可以不用限制性内切酶切割载体.1年前查看全部
- 基因表达载体的构建所需的条件
autopoweroff111年前1
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zhangcl 共回答了26个问题
|采纳率92.3%作为重组基因的载体,
1,必须能够在宿主细胞中复制,使重组基因能够在宿主基因中复制,从而稳定保存下来,这是作为运载体的必须条件.
2.具有多个限制酶切点,从而可以使不同的粘性末端与之相连,增强实用性
3.拥有标记基因是为了方便质粒进入宿主细胞后容易被检测出来,以便检测目的基因是否导入受体.
下面说说 载体所需的序列结构
目的基因就是能够产生所需蛋白质的DNA片段,比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因.
启动子、终止子:启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基.RNA从启动子开始转录、翻译,到终止子结束.整个过程完成后便产生所需蛋白质.如果不清楚RNA的转录翻译过程,可以再细说.
标记基因:用于检测是否已经植入目的基因.植入的成功率其实很低,所以有必要选出已经植入的个体.比如抗虫棉,判断是否植入,用种植后让虫子吃的方法判断周期太长.所以在目的基因前或后植入比如抗四环素基因(如果目的基因成功植入,抗四环素基因也一起植入),然后用四环素来淘汰植入失败的个体,剩下的都是还有目的基因的个体.除了抗四环素基因,还有荧光基因等,总之就是方便检测.
应该很详细了吧.1年前查看全部
- (1)为了鉴别a_抗胰蛋白酶基因是否导入山羊受精软中,基因表达载体中须含有什么
flfsz1年前1
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薄雾残酒 共回答了18个问题
|采纳率83.3%标记基因
标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用.在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说,它是对目的基因进行标志的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位.
举例
1、“作为重组DNA载体的重要标记”举例:大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因(该基因可以认为是标记基因),当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因.当人们用选择培养基(比如含有青霉素的培养基),来培养受体细胞时,能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源DNA,标记基因就起作用了.
2、“作为目的基因的细胞定位工具”举例:通过将可定位检测的标记基因(只要已知其序列,既可针对设计标记探针,从而对其进行细胞定位)与目的基因进行连锁,当成功转化目的基因,该基因同时有成功表达后,既可间接对其进行定位;或者已知目的基因(该基因本身就处于某细胞中)周边序列,通过针对这些序列设计可插入标记基因,继而对该标记基因进行检测,也可间接对目的基因定位.1年前查看全部
- 虽然基因工程中的受体细胞有所不同,但构建的基因表达载体都是一样的
虽然基因工程中的受体细胞有所不同,但构建的基因表达载体都是一样的
受体细胞用植物的受精卵或体细胞均可meiguiwoxin1年前2
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liudefei1234 共回答了21个问题
|采纳率90.5%不对.针对不同的受体细胞,要使用不同的载体.1年前查看全部
- 基因表达载体中的复制原点是什么?
安奈儿1年前1
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长得突然 共回答了15个问题
|采纳率93.3%质粒载体的就是Ori,人工染色体的就是ARS.1年前查看全部
- 已知基因表达载体中的复制原点处比较容易打开双链,可以推断该处( )
已知基因表达载体中的复制原点处比较容易打开双链,可以推断该处( )
A. A+T的比例较高
B. C+G的比例较高
C. 位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位
D. 位于基因的尾端,是转录停止的信号lisa_k1年前1
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隆回深圳人 共回答了17个问题
|采纳率88.2%解题思路:DNA分子中,A-T之间有2个氢键,C-G之间有3个氢键,氢键越多越稳定.复制原点处比较容易打开双链,说明此处的结构不是很稳定.由于A与T配对时形成两个氢键,而C与G配对时形成三个氢键,所以双链容易打开的部位A与T的比例较高.
故选:A.点评:
本题考点: A:基因工程的原理及技术 B:DNA分子结构的主要特点
考点点评: 本题考查DNA分子结构稳定性,意在考查考生识记和理解所列知识点的能力.1年前查看全部
- 请问:1.目的基因是否只有整合到染色体DNA上才能稳定维持和表达.2.我们在基因表达载体的构建时已经加入了标记基因,为何
请问:1.目的基因是否只有整合到染色体DNA上才能稳定维持和表达.2.我们在基因表达载体的构建时已经加入了标记基因,为何还要用DNA分子杂交技术等一些方法进行目的基因的检测.
laogongaiwo1231年前1
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妮可00 共回答了16个问题
|采纳率93.8%1.是的.虽然其他的像RNA、信使RNA等也可以遗传,但是却不能像DNA一样能够稳定维持和表达.因为DNA是双螺旋配对结构.这注定了DNA的这一特性,只有配对正确了才会表达遗传,也就是说,DNA表达遗传了,就表示已经配对正确了,...1年前查看全部
- 基因表达载体中含有启动子和内含子,为什么错
aijuan10181年前1
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aikevin 共回答了22个问题
|采纳率86.4%内含子与外显子之分主要存于真核生物中,原核生物则无内外子之分.基因表达载体常取自原核生物或病毒,无内外子之分.1年前查看全部
- 基因表达载体中含有启动子和内含子,错在哪?
net1101年前1
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cooljp 共回答了21个问题
|采纳率100%内含子在基因中,构造是时只用外显子和启动子1年前查看全部
- 在基因表达载体的构建步骤中,原质粒是否含有启动子和终止子?
leijunleon1年前1
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zhuwenjin 共回答了23个问题
|采纳率91.3%表达载体必须的四个部分:目的基因、启动子、终止子、标记基因.1年前查看全部
- 完整的基因表达载体包括哪些
bushinanren1年前2
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dycxz 共回答了20个问题
|采纳率85%启动子:RNA酶的结合部位
终止子:一段有特殊结构的DNA短片段,转录结束的标志
目的基因:这个一定得有,
标记基因:共重组DNA的鉴定和选择
复制原点:DNA复制起点,即DNA聚合酶结合位点1年前查看全部
- 基因表达载体的构建 重组运载体的构建 答题的时候这两个写哪一个?
忧愁的小兔尾巴1年前1
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chíkéd 共回答了16个问题
|采纳率100%一般写第一个1年前查看全部
- 对于基因表达载体的构件的目的是什么?
碧海蓝天ov1年前2
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乘风逐梦 共回答了21个问题
|采纳率100%构建基因表达载体也就是把目的基因和载体连接,其目的是通过载体把目的基因片段导入活细胞.1年前查看全部
- 基因表达载体构建的原理和操作步骤
基因表达载体构建的原理和操作步骤
转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗?骆驼蚊子1年前1
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yuanliyuan 共回答了20个问题
|采纳率85%先回答你的问题,转入外源基因的农杆菌不能较载体,它本身是外源基因的受体,携带外源基因的质粒或者噬菌体才是载体.
你想问基因表达载体的构建,这个问题太大,而且表达载体多种多样,用处也很多,所以很难一下子概况.我只能大概说一下:
原理:将外源基因片段与载体连接(载体通常选用质粒或者噬菌体或其他病毒),将重组的载体转染受体细胞,使之整合入宿主基因组或者在稳定存在于胞质内,是宿主细胞能够表达载体上的外源基因,从而获得新性状或者新产物.
大概步骤:
1)从基因组或cDNA上克隆得到完整的目的基因(至少包含CDS区),通常在两端加粘性末端或重组位点
2)选择合适的表达载体(真核、原核、噬菌体、某些病毒、标记等)
3)将克隆得到的目的基因与载体连接
4)将重组载体通过某种手段转入受体,即宿主中(化学转染、脂质体、电转、显微操作等)
5)筛选阳性的宿主细胞并扩繁1年前查看全部
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