分子生物

职业前景生物化学与分子生物学专业主要对学生进行实验操作技能的训练和创新意识的培养。本专业的毕业生主要到科研机构、高等学校从事科学研究、教学工作或在工业、医药、食品、农、林、牧、渔、环保、园林等行业的企业、事业和行政管理部门，从事与生物技术有关的应用研究、技术开发、生产管理和行政管理等工作。主要课程化学、植物学、动物学、微生物学、生物化学、细胞生物学、现代遗传学、现代分子生物学、生化工程、生物技术制药、基因组学与生物信息学、蛋白组学等。

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生物学研究包括对生物体的研究，包括对生态系统的研究。任何生物体都是由物质组成的，因此对生物体的了解离不开物理学。例如，生物大分子（包括核酸、蛋白质等）结构的研究是当今生命科学一个重要的领域，其中重要的研究方法就是利用X衍射等物理学手段解析大分子结构，比如楼上提到的DNA双螺旋结构的发现，就是经典的例子。神经科学研究领域对脑活动的理解也需要众多物理学知识及仪器。生态系统生态学研究中也需要能量传递等众多物理学知识。生物体内众多代谢反应都是化学过程。例如，生物大分子的合成、运输、降解等；众多代谢过程实际上就是酶的化学催化过程；等等。另外，害虫防治研究中重要的一个方面是利用化学手段来合成生物信息素，这又是一个重要的例子。化学生态学也是生态学研究中重要的领域。如果你学习生物专业，那么应该知道生物化学、生物物理学、化学生态学等都是生物学重要分支。

生化与分子生物学目前的前沿研究是什么生物化学与分子生物学，属于理学大类，生物科学类。生物化学与分子生物学专业主要是从微观即分子的角度来研究生物现象，在分子水平探讨生命的本质，研究生物体的分子结构与功能、物质代谢与调节。该专业涉及物理、化学、数学、生物学等多学科的交叉，渗透于生物学的其他专业之中，属于基础性研究专业。生物化学与分子生物学是目前自然科学中进展最迅速、最具活力的前沿领域。 通过学习，将具备以下几方面的能力：1、掌握数理化、生物科学和计算机科学等方面的基础理论、基础知识和技术；2、掌握生物化学、分子生物学等方面的基础理论、基础知识和基本实验技能；3、了解国家科技政策、知识产权等有关政策和法规；4、了解生物化学与分子生物学的理论前沿、应用前景和最新发展动态；5、掌握生物化学与分子生物学资料的查询、文献检索及运用现代信息技术获得相关信息的基本方法；6、具有一定的该领域的实验设计、分析实验结果、撰写论文、参与学术交流的能力。 化学、植物学、动物学、微生物学、生物化学、细胞生物学、现代遗传学、现代分子生物学、生化工程、生物技术制药、基因组学与生物信息学、蛋白组学等。

因为葡萄糖效应的存在是因为葡萄糖的存在可以维持对葡萄糖的吸收而抑制岁其他碳源的吸收。也就是对于葡萄糖来说，葡萄糖的存在促进对葡萄糖的吸收，因此是正调控作用。

首先噬菌体会侵染细菌，随后将自己的遗传物质注入其体内，然后用细菌体内的物质为原料来合成自己所需的物质，再将其进行组装

从现在生命科学的发展进程中可以看出来这三驾马车的作用。以下是现代生物学的发展过程：发展过程目前，普遍认为现代生命科学系统的建立开始于16世纪。他的基本特征是人们对生命现象的研究牢固地植根于观察和实验的基础上，以生命为对象的生物分支学科相继建立，逐渐形成一个庞大的生命科学体系。现代生命科学可以说是从形态学创立开始的。1543年比利时医生维萨里（Andreas Vesalius 1514~1564）的名著《人体的结构》发表不仅标志着解剖学的建立，并直接推动了以血液循环研究为先导的生理分支学科的形成，其标志是1628年，英国医生哈维（William Harvey 1578～1657）发表了他的名著《心血循环论》。解剖学和生理学的建立为人们对生命现象的全面研究奠定了基础。18世纪以后，随着自然科学全面蓬勃地发展，生命科学业进入它的辉煌发展阶段。生命科学重要得分支相继建立，其中以细胞学、进化论和遗传学为主要代表，构成了现代生命科学的基石。1665年，胡克（Robert Hooke，1636～1702）在他的《显微图谱》中第一次使用“细胞”一词（cell）。现在一般认为细胞学创立于19世纪30年代，是由施莱登（Matthias Jacob Schleiden， 1804～1881）、施旺（Theodor Schwann，1810～1882）以及稍后的数位生物学家共同完成的。他们奠定了细胞是独立的生命单位、新细胞只能通过老细胞分裂繁殖产生，一切生物都是有细胞组成和由细胞发育而来的细胞学说的基本内容。林耐因他对现代生物分类系统建立的卓越贡献成为有史以来最伟大的生物分类学家千姿百态的生物物种被科学的归纳在界、门、纲、目、科、属、种的秩序里。林耐生物分类系统建立的更重要的意思还在于他直接的诱发了生物进化理论。在林耐当初建立生物分类体系时，企图表达的是精确地显现上帝造物的构思和成就。但是事与愿违，林耐生物分类系统中体现的各生物物种的相关性和物种由简单到复杂的“秩序”排列强烈的安是了生物的进化现象。在马耶（Benoit 的 Mailler，1656～1738）、布丰（Comte de Lamarck 1744~1829）拉马克（Chavalier de Lamarck 1744～1829）等人工作的基础上，1859年，达尔文（Charless Darwin，1809～1882）的《物种起源》发表。19世纪前后，生命科学的重大成就还包括其他一些重要的发现和分支学科的建立。解剖学和细胞学促使人们对生物发育现象的研究获得了长足的进步，并由此建立了实验胚胎学。胚胎学实现了对各种代表生物的形态发育过程的组织学和细胞学的研究，绘制了有史以来最精美的生物学图谱。魏斯曼（August Weismann,1839~1914）关于生物发育的种质学说推动了遗传学的建立。1856年，现代遗传学创始人孟德尔（Gregor Mendel，1822～1884）在“布隆自然历史学会”上宣读了自己的豌豆杂交实验结果，遗憾的是其工作的价值被满摸了30多年。直到20世纪初，当孟德尔发现的生物遗传规律被几个人几乎同时再次试验证实时，才引起了人们的注意。为遗传学作出重大贡献的另一位伟大的遗传学家是摩尔根（Thomas Hunt Morgen，1866～1945）。202世纪10～20年代他用果蝇为实验材料确立了以孟德尔和摩尔根的名字共同命名的景点遗传学的分离、连锁和交换三大定律，并因此而荣获了1933年的诺贝尔奖。遗传学科学的解释了生物的遗传现象，将细胞学发现的染色体结构和进化论解释的生物进化现象联系起来，指出了遗传物质定位在染色体上而推动了DNA双螺旋结构合中心法则的发现，为分子生物学的建立奠定了基础。在19世纪中，法国科学家巴斯德（Louis Paster，1822～1895）创立了微生物学。微生物学直接导致了医学疫苗的发明和免疫学的建立，推动了生物化学的进展，并为分子生物学的出现准备了条件。生物化学的辉煌发展出现在20世纪的前叶到中叶，围绕能量和生物大分子物质代谢的研究，发现了生物以三磷酸循环卫枢纽的有着复杂超循环结构的代谢途径，和以电子传递和氧化磷酸化为中心的生物能量获取、利用的基本方式。分子生物学的建立是生命科学进入20世纪最伟大的成就。遗传学的研究预示了生物遗传载体分子的存在，而DNA双螺旋结构的发现（J.D.Watson,F.Crick,1953）直接导致了对生物DNA－RNA－蛋白质中心法则（central dogma）的揭示。人们因此探索到了生命运作的基础框架和生物世代更替的联系方式。从此，以基因组成、基因表达和遗传控制为核心的分子生物学的思想和研究方法迅速的深入到生命科学的各个领域，极大地推动了生命科学的发展。（自己摘抄点 归纳下 就可以出答案了）

不大，主要的考试内容没有变

可以提取可用于基因治疗的基因工程细胞，进一步了解基因调控机制和疾病分子基理，也对于人类医学的发展具有重要意义 另外，根据重组技术所制造的基因芯片，基因芯片即通过微价格技术将特定序列DNA片段（基因探针）固定与硅片上，基因芯片可用于

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一.名词解释 1．基因和基因表达 2．重组DNA技术 3．自杀基因疗法 4．嵌合抗体 5．转基因动物

　　现代分子生物学发展的基础是生物大分子。　　分子生物学是在分子水平上研究生命现象的科学。通过研究生物大分子(核酸、蛋白质)的结构、功能和生物合成等方面来阐明各种生命现象的本质。研究内容包括各种生命过程。比如光合作用、发育的分子机制、神经活动的机理、癌的发生等。　　生物大分子，特别是蛋白质和核酸结构功能的研究，是分子生物学的基础。现代化学和物理学理论、技术和方法的应 用推动了生物大分子结构功能的研究，从而出现了近30年来分子生物学的蓬勃发展。

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生物学研究包括对生物体的研究，包括对生态系统的研究。任何生物体都是由物质组成的，因此对生物体的了解离不开物理学。例如，生物大分子（包括核酸、蛋白质等）结构的研究是当今生命科学一个重要的领域，其中重要的研究方法就是利用X衍射等物理学手段解析大分子结构，比如楼上提到的DNA双螺旋结构的发现，就是经典的例子。神经科学研究领域对脑活动的理解也需要众多物理学知识及仪器。生态系统生态学研究中也需要能量传递等众多物理学知识。生物体内众多代谢反应都是化学过程。例如，生物大分子的合成、运输、降解等；众多代谢过程实际上就是酶的化学催化过程；等等。另外，害虫防治研究中重要的一个方面是利用化学手段来合成生物信息素，这又是一个重要的例子。化学生态学也是生态学研究中重要的领域。如果你学习生物专业，那么应该知道生物化学、生物物理学、化学生态学等都是生物学重要分支。

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这两版书，都不是特别好，我们当时学分子生物学的时候都不用这本书，内容少，调理乱，很多东西将不明白推荐基因八，基因九

1.目前我国对DNA的研究中研究DNA的疫苗最为火热,因为目前，结核病在我国流行严重，由于结核杆菌耐药株持续增加，常规卡介苗疫苗的效价降低。与此同时，我国每年导致肾综合征出血热等疾病发病人数占世界总发病人数的90％以上，而且分布广泛，病死率高，没有特效药，加强疫苗的研制也是预防和控制该病流行的重要手段。 2.前沿在于设想研制一种有稳定持久免疫效果的联合疫苗，能同时对付出血热、结核病病的病菌病毒3.学校方面属清华大学生物学院较为领先.个人以目前国内对DNA疫苗研究者、主管技师黄浩为精通.具体情况还要看目前几年我国对DNA遗传病方面的更多发现!

奠定了现代分子生物学的基础，说白了，让人们知道遗传物质是什么，人类有30亿碱基对，这是天书，现代分子生物学就是努力读懂它，希望对您有帮助。

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现代分子生物学研究进展课本中荧光标记物有哪两大类病原菌检测涉及到食品安全检验、疾病诊断、环境监测以及反生物恐怖等领域,与人类健康、社会安定和国家安全息息相关。传统的病原菌检测方法灵敏度低、费时耗力。各种建立在现代分子生物学、免疫学技术和现代分析仪器基础上的病原菌快速检测方法,为提高检测的灵敏度和可靠性做出了重要贡献,然而这些方法仍然存在各种局限性。功能化纳米材料具有许多普通材料无可比拟的优良特性,在病原菌的快速、灵敏检测上显示出广阔的应用前景。其中,硅壳荧光纳米材料是荧光最强的纳米材料之一,基于硅壳荧光纳米材料建立的荧光纳米标记技术比传统荧光标记技术具有更高的灵敏度和更好的光稳定性,为样品中少量病原菌的超灵敏检测提供了新的契机。

证明基因在染色体上的科学家是摩尔根，现代分子生物学采用的测定基因在染色体上位置的方法是荧光分子标记法，通过荧光分子显示，就可以知道基因在染色体上的位置．故选：B．

610分子生物学：　　1.《现代分子生物学》（第四版），朱玉贤 李毅著，高等教育出版社，2012；2.《Molecular Biology》（第五版），Robert Weaver著，McGraw-Hill出版社，2011 （爱问网上有电子版可下载）；3.《Molecular Biology of the cell》（第六版），Bruce ，Alberts等著，Garland Science出版社，2009 （爱问网上有电子版可下载）。612生物化学与分子生物学：1.《生物化学》（2002年第三版），上、下册 王镜岩等编著，高等教育出版社 ；2.《基因VIII》（中文版），Benjamin Lewin，科学出版社。

第四版

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帮你对比了一下目录，大的方面没有什么改变，一般来说，新版本的书可能是引入了一些发展的前沿或是新的实验方法，主要内容变化不大。下面是第三和第四版的目录的地址：http://baike.baidu.com/link?url=DfOt5F5KleIg6Pjl6uy5YdmHQqxUJXhi9LaNu3BLAalGaHJous-pkrRCAhIPXoeCVC6flk3cZI0w3vJObE_1wKhttp://www.amazon.cn/%E7%8E%B0%E4%BB%A3%E5%88%86%E5%AD%90%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%AD%A6-%E6%9C%B1%E7%8E%89%E8%B4%A4/dp/product-description/B00BLXE6JG/ref=dp_proddesc_0?ie=UTF8&s=books

国内分子书里最好的了好吧，要拿来和基因或者基因的分子生物学比那当然没戏

分子生物学试题（一）一、名词解释：（每题3分，共30分）1、物理图谱指应用限制性核酸内切酶，将DNA分子降解成大小不同的片段，再将这些片段排列成一定顺序的图谱。2、SSB 可与DNA单链相结合防止核酸酶对DNA的水解及防止DNA单链重新构成双链并使前端DNA双螺旋的稳定性降低、易于解开的蛋白质。3、断裂基因是指真核生物的基因是由编码序列和非编码序列构成的，编码序列被非编码序列分割开来。4、同源重组、是指减数分裂过程中同源染色体间的遗传物质的交换。重组对之间具有同源性。5、trans-acting element、调节蛋白通过扩散结合于细胞内的多个靶位点，发生突变后将同时影响不同染色体上等位基因的表达，这种作用为反式作用，这些调节蛋白即称为反式作用因子。6、反义RNA 为载体，即基因载体或称克隆载体、，是在基因工程中为“携带”感兴趣的外源DNA、实现外源DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子，具有自我复制和表达功能。7、母源影响基因、是指果蝇在个体发育中，其身体极性的分化受到来源于母本的抚育细胞、滤泡细胞、和脂肪体细胞的基因的影响，这些被输入到卵母细胞的基因称为母源影响基因，对卵子的发育有重大影响。8、CpG岛是指在某些基因上游的转录调控区及其附近，存在着成串的CpG二核苷酸序列，长度可达1—2kb,这段序列往往被称为CpG岛。其上的大部分CpG不被甲基化。9、热休克蛋白是指生物体在适宜温度范围以上，经热诱导合成的一系列蛋白，它们参与靶蛋白的活性和功能的调节。对生物体具有保护作用并在细胞的正常生长和发育中起重要作用。10、功能基因组学是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。二、是非题（对的打“√”，错的打“Ⅹ”；每题1分，共10分）1、编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型改变。 （ ）2、真核基因的外显子是成熟的mRNA或蛋白质中的存在序列，内含子是初级转录产物hnRNA加工成熟时被切除的序列。外显子是有功能的，内含子是无功能的。 （ ）3、DNA复制的半不连续模型是由复制时两条DNA单链分别复制得来的。（ ） 4、锌指（Zn finger）是转录因子转录激活功能区的一种结构模式。 （ ）5、IS元件整合到靶位点时会导致靶位点产生序列重复。 （ ）6、增强子具有启动子的功能。 （ ）7、假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上。 　　　　　（　）8、C0t1/2与基因组大小相关，与基因组复杂性也相关。 　　　　　（　）9、大肠杆菌中SOS反应的最主要作用是通过在原始DNA损伤区附近导入补偿突变来提高细胞存活率。 　　　　　　　　　　　　　　　（　）10、编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型改变。 　　　（　）三、选择题（每题1分，共20分）1、 大肠杆菌DNA聚合酶I与---------无关。 　 　 （ ）A. DNA复制 B. DNA 修复C. 基因重组 D. 基因突变2、卫星DNA是一类： 　　 （　　）A. 高度重复的DNA序列 　　 B.中度重复的DNA序列C. GC丰富的DNA序列 　　　 D.不编码的RNA序列3、DNA连接酶催化的化学反应 　 　（　　）A、可以填补引物遗留下的空隙 B、水解引物C、向3`-OH末端加入dNTPD、生成磷酸二指键 E、生成氢键4、下列序列中的哪一个可能是mRNA：5`--AUAGGCGAU—3`的对应基因序列（　　）A. 3`--TATCCGCTA—5` B. 5`--ATCGCCTAT—3`C. 5`-- TATCCGCTA—3` D. 3`--UAUCCGCUA—5`5、用实验证实DNA半保留复制的学者是　　　　　　　　　　　　（　　）A.Watson和Crick B.KornbergC.Sanger D.NierenbergE.Meselson和Stahl6、点突变引起的后果是　　　　　　　　　　　　　　　　　　（　　）A、DNA降解 B、DNA复制停顿C、转录终止 D、氨基酸读码可改变E、氨基酸缺失7、tRNA和5s rRNA是由真核生物哪种酶催化转录产生的？　　　（　　）A、RNA聚合酶I B、逆转录酶 C.RNA聚合酶 D.RNA聚合酶全酶 E.RNA聚合酶Ⅲ8、识别转录起始点的是　　　　　　　　　　　　　　　　 　（　　） A、ρ因子 B、核心酶C、 RNA聚合酶的α亚基 D、σ因子E、dna B蛋白9、核酶（ribozyme）　　　　　　　　　　　　　　　　　 　（　　） A.是有催化作用的蛋白质 B.以NAD+为辅酶 C.有茎环结构和随后的寡聚U D.能催化RNA的自我剪接 E.是由snRNA和蛋白质组成的10、构成最简单的启动子的常见功能组件是　　　　　　　　 　（　　）A. TATA盒 B. CAAT盒 C. GC盒 D. 上游调控序列（UAS）E. 以上都不是11、原核生物和真核生物都有的rRNA是　　　　　　　　　　　（　　）A. 18s-rRNA B. 5s-rRNA C. 5.8s-rRNA D.28s-rRNA E. 16s-rRNA12、真核生物的TATA盒是　　　　　　　　　　　　　　　　　（　　）A、DNA合成的起始位点B、RNA聚合酶与DNA模板稳定结合处C、RNA聚合酶的活性中心D、翻译起始点E、转录起始点13、目前认为基因表达调控的主要环节是　　　　　　　　　　（　　）A. 基因活化 B. 转录起始 C. 转录后加工 D. 翻译起始 E. 翻译后加工14、cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在　　　　　　　（　　）A. 有葡萄糖及cAMP较高时 B. 有葡萄糖及cAMP较低时C. 没有葡萄糖及cAMP较高时 D. 没有葡萄糖及cAMP较低时E. 葡萄糖及cAMP浓度极高时15、顺式作用元件是指　　　　　　　　　　　　　　　　 　（　　）A. 基因的5`侧翼序列 B. 基因的3`侧翼序列 C. 基因的5`、3`侧翼序列D. 基因5`、3`侧翼序列以外的序列 E. 具有转录调节功能的特异DNA序列16、核糖体是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（　　）A. tRNA的三级结构形式 B. 参与转录终止，因为翻译紧接着转录之后C. 有转运氨基酸的作用 D. 遗传密码的携带者 E. 由rRNA和蛋白质构成17、在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指　　　　　　　　（　　）A. 建立单克隆抗体 B. 建立多克隆抗体 C. 构件重组DNA分子D. 无性繁殖DNA E.有性繁殖DNA 18、可识别并切割特异DNA序列的称　　　　　　　　　　　　（　　）A. 限制性核酸外切酶 B. 限制性核酸内切酶 C.非限制性核酸外切酶D. 非限制性核酸内切酶 E. DNA酶19、有关DNA序列自动化测定的不正确叙述是　　　　　　　　（　　）A. 用荧光代替了同位素标记 B. 激光扫描分析代替人工读序C. 基本原理与手工测序相同 D. 不再需要引物E. 需要与手工序列分析相同的模板20、哪些有关免疫球蛋白基因重排的叙述是正确的？　　　　　（　　）A. 所有物种中V基因的数目是相同的 B.J是恒定区的一部分C. 各部分连接时，将产生缺失和重排 D. 当一个等位基因中发生有意义的重排时，另一个等位基因也发生重排四、简答题：1、简述转座所引起的遗传学效应。（4分）2、简述切除修复DNA的过程。（4分）3、简述遗传密码（三联体密码）的兼并性（degeneracy）和摆动假设（wobble hypothesis）。（6分）4、什么叫原癌基因？原癌基因是通过什么途径活化的？（8分）5、简述人类基因组计划成果体现的四个图谱。（8分）五、分析问答题：1、假定你从一新发现的病毒中提取了核酸。请用最简单的方法确定：（1）它是DNA还是RNA？ （2）它是单链还是双链？(4分)2、Nirenberg等人是怎样利用核糖体结合技术进行遗传密码的破译的？（6分） 参考答案：、二、是非题：1、错 2、错 3、错 4、错 5、对 6、对 7、错8、对 9、错10、错三、选择题：1、D 2、A 3、D 4、A 5、E 6、D 7、E 8、D 9、D 10、A 11、B 12、B 13、B 14、C 15、D 16、E 17、D 18、B 19、D 20、C四、问答题：1、①转座引起插入突变②转座产生新的基因③转座产生染色体畸变④转座引起生物进化2、①特异核酸内切酶识别并结合于损伤部位，在DNA的5`端切断临近损伤部位的磷酸二酯键②在5`外切核酸酶作用下切除损伤部位。③以另一条完整的DNA链为模板，由DNA PolI在切口处催化局部的小段DNA的合成④DNA连接酶将所合成的新DNA片段与原来的DNA链连接起来，从而完成修复过程。3、遗传密码普遍存在与生物界中，由一种以上的密码子编码同一个氨基酸的现象称为遗传密码的兼并性。对应于同一氨基酸的密码子称为同一密码子。而遗传密码的摆动假设是由Crick于1966年为解释反密码子中某些稀有碱基的配对和许多氨基酸有两个以上的密码子的问题而提出的。它是指密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。4、是细胞内存在的一些对控制细胞生长和分化有关的基因，与病毒癌基因有广泛的同源性。若其发生突变，则可致癌。原癌基因活化途径：①点突变②LTR插入③基因重排④基因缺失⑤基因扩增。5、①遗传图，是指基因或DNA标志在染色体上的相对位置与遗传距离，常用基因或DNA片段在染色体交换过程中的分离频率—厘摩（cm）表示。所用遗传标记为RFLP、重复序列以及分散于基因组中的单个碱基的差异（单个核苷酸的多态性）。②物理图，是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对作为基本测量单位（图距）的基因组图。用STS技术绘制基因组物理图是目前为止最有效的方法。③转录图，也称cDNA图或表达序列标签图（EST），是用所得到的cDNA或EST筛选全长的转录本，并将该基因准确地定位于基因组上。④人类基因组的核苷酸序列图，是分子水平上最高层次的、最详尽的物理图。测定30亿个核苷酸组成的全序列，目前已基本完成。因此，人类基因组计划进入后基因组时代。五、分析问答题：1、①检测其有无U和T，若有U无T则为RNA，若有T无U则为DNA。②测算四种碱基的百分含量，若G与C的含量，A与T或U的含量相等则为双链，否则为单链。2、他们以人工合成的三核苷酸为模板，在含核糖体、AA-tRNA的适当离子强度的反应液中保温，然后使反应液通过硝酸纤维素滤膜，由于三核苷酸模板可与相对应的AA-tRNA结合于核糖体上，因体积大于滤膜而被滞留于膜上，游离的AA-tRNA可透过滤膜，这样就可将结合到核糖体上的AA-tRNA与未结合的AA-tRNA分开。用20种AA-tRNA作20组同样的实验，每组都含20种AA-tRNA和一种用C14标记的氨基酸，经分析滞留在膜上的AA-tRNA和氨基酸，即可推知氨基酸的密码子。

1、方向性：密码子的阅读方向是5到3端。2.简并性：除蛋氨酸和色氨酸只有一个密码子外，其它氨基酸都有好几组密码子。3.通用性：无论是病毒还是原核生物、真核生物，都共同使用一套密码字典，但有例外。4.连续性：在mRNA上，从起始密码子到终止密码子，密码子的排列是连续的，既没有重叠也没有间隔。5.有起始密码子和终止密码子。6.变偶性：密码的简并性只涉及第三位碱基，即同一个氨基酸的不同密码子中，前两个碱基均相同，第三个不同。

《现代分子生物学》的内容更核心,精炼.《分子细胞生物学》的内容更全面. 没有多大区别

期中考试试题一、 名词解释（每小题4分，共10题） 1.断裂基因 : 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因 2.RNA编辑 : 一：在初级转录物上增加、删除或取代某些核苷酸而改变遗传信息的过程。是一种遗传信息在RNA水平发生改变的过程，可使RNA序列不同于基因组模板DNA序列。 二：RNA分子加工时出现的修饰现象。mRNA因核苷酸的插入、缺失或替换而改变了源自DNA模板的遗传信息，翻译出不同于基因编码的氨基酸序列。 3. 转座子：转座因子中的一种。除含与转座有关的基因外，还含抗药基因、抗重金属基因和接合转移基因等，可赋予受体细胞一定的表型特征。 4. 顺式作用元件 ：DNA、RNA或者蛋白质中的一些特殊的核酸或氨基酸残基序列，只作用于与其连接在一起的靶，而不作用于不与其相连的靶。 5. 同工tRNA：能接受和携带相同氨基酸、但分子结构上有差异的转移核糖核酸(tRNA)。对应一种氨基酸的同工tRNA数目不等，有的可多至5～6种。6. 核酶：是具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂。核酶又称核酸类酶、酶RNA、 核酶类酶RNA。 它的发现打破了酶是蛋白质的传统观念。 7. SD序列 ：mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。SD序列在细菌mRNA起始密码子AUG上游10个碱基左右处，有一段富含嘌呤的碱基序列，能与细菌16SrRNA3"端识别，帮助从起始AUG处开始翻译。8. 移码突变 ：在基因编码区，核苷酸插入或缺失导致三联体密码子阅读方式的改变，从而使该基因的相应编码序列发生改变。9. 顺反子：编码单条多肽链的一个遗传功能单位，即转录单位10. 分子伴侣：一组从细菌到人广泛存在的蛋白质，非共价地与新生肽链和解折叠的蛋白质肽链结合，并帮助它们折叠和转运，通常不参与靶蛋白的生理功能。主要有三大类：伴侣蛋白、热激蛋白70家族和热激蛋白90家族。二、 简答题（每小题6分，共5题） 1.原核、真核基因组的特点（不确定）答：原核生物的DNA的编码区是连续的,真核生物DNA的编码区是间断的,即真核生物的DNA的编码区有内含子和外显子,复制时同时复制内含子和外显子,但翻译的最终结果是成熟的mRNA只携带外显子的遗传信息,内含子的遗传信息被切除.原核生物的DNA的编码区没有内含子和外显子一说,全部是有遗传意义的片断,是完全翻译1.真核生物基因组指一个物种的单倍体染色体组(1n)所含有的一整套基因。还包括叶绿体、线粒体的基因组。原核生物一般只有一个环状的DNA分子，其上所含有的基因为一个基因组。2、原核生物的染色体分子量较小，基因组含有大量单一顺序（unique-sequences），DNA仅有少量的重复顺序和基因。真核生物基因组存在大量的非编码序列。包括：.内含子和外显子、.基因家族和假基因、重复DNA序列。真核生物的基因组的重复顺序不但大量，而且存在复杂谱系。3、原核生物的细胞中除了主染色体以外，还含有各种质粒和转座因子。质粒常为双链环状DNA，可独立复制，有的既可以游离于细胞质中，也可以整合到染色体上。转座因子一般都是整合在基因组中。真核生物除了核染色体以外，还存在细胞器DNA，如线粒体和叶绿体的DNA，为双链环状，可自主复制。有的真核细胞中也存在质粒，如酵母和植物。 4、原核生物的DNA位于细胞的中央，称为类核（nucleoid）。真核生物有细胞核，DNA序列压缩为染色体存在于细胞核中。5、真核基因组都是由DNA序列组成，原核基因组还有可能由RNA组成，如RNA病毒。 2.试比较原核和真核细胞的mRNA的异同 答：A．真核生物5‘端有帽子结构大部分成熟没mRNA 还同时具有3"多聚A尾巴，原核一般没有；B．原核的没mRNA 可以编码几个多肽真核只能编码一个。C．原核生物以AUG作为起始密码有时以GUG，UUG作为起始密码，真核几乎永远以AUG作为起始密码。D．原核生物mRNA半衰期短，真核长。E．原核生物以多顺反子的形式存在，真核以单顺反子形式存在。 3.密码子的特点有哪些

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* 回复内容中包含的链接未经审核，可能存在风险，暂不予完整展示！ 中心法则：http://baike.b***.com/view/15948.html?wtp=tt由中心法则你可以知道重组的DNA可以表达新的蛋白，表达新的蛋白又可以调控DNA的转绿。我想我能给你提供的东西只有这么多。主要是你说的太大了。不好回答

首先要明确原核生物和真核生物DNA的差别，原核生物DNA链比真核生物短，这种短的原因在与原核生物DNA中没有内含子，因此原核生物转录时需要转录的片段内的所有碱基都会被翻译，而真核生物内含子区的碱基是不会翻译成相应的密码子的。

分子诊断的知识。PCR、核酸杂交、基因芯片都可以的。

本书介绍了现代分子生物学基本的、综合性的和一些最新的实验方法和技术，在此基础上为训练学生的综合素质和独立从事实验的能力，增加了探索性实验。全书共分为三篇。基础篇介绍了基因克隆与分析方法，训练学生从事分子生物学实验方法和操作技能。其中高通量基因克隆技术(GATEWAY cloning technology)使以往困难费时的实验变得简单易行，可以称为是基因克隆技术的重大革命。应用篇介绍了克隆基因在转基因植物及基因功能分析的具体应用。通过几个系统的综合性实验，不但提高学生的实验操作技能，更重要的是使学生在掌握方法的基础上，增强综合运用、实验设计及观察分析能力。其中以烟草脆裂病毒为载体通过基因沉默分析基因功能及酵母双杂系统，提供基因功能研究的新手段，使原来无法开展的一些研究得以进行。探索篇在前两部分基本训练的基础上，针对科研中可能会遇到的一些实际问题，独立设计解决问题的具体方案，并通过实验操作激励学生进入科研状态，提高学生的科研兴趣及解决实际问题的综合素质与能力。本书可以作为生物技术、生物工程专业本科生教材和相关学科科研人员的参考用书。

1　绪论1.1　引言1.2　分子生物学简史1.3　分子生物学的主要研究内容1.4　展望2　染色体与DNA2.1　染色体2.2　DNA的结构2.3　DNA的复制2.4　原核生物和真核生物DNA复制的特点2.5　DNA的修复2.6　DNA的转座3　生物信息的传递（上）——从DNA到RNA3.1　RNA转录的基本过程3.2　转录机器的主要成分3.3　启动子与转录起始3.4　原核与真核生物mRNA的特征比较3.5　终止和抗终止3.6　内含子的剪接、编辑、再编码及化学修饰4　生物信息的传递（下）——从mRNA到蛋白质4.1　遗传密码——三联子4.2　tRNA4.3　核糖体4.4　蛋白质合成的生物学机制4.5　蛋白质转运机制5　分子生物学研究法（上）——DNA、RNA及蛋白质操作技术5.1　重组DNA技术回顾5.2　DNA基本操作技术5.3　RNA基本操作技术5.4　SNP的理论与应用5.5　基因克隆技术5.6　蛋白质组与蛋白质组学技术6　分子生物学研究法（下）——基因功能研究技术7　基因的表达与调控（上）——原核基因表达调控模式8　基因的表达与调控（下）——真核基因表达调控一般规律9　疾病与人类健康10　基因与发育11　基因组与比较基因组学

现代分子生物学的建立和发展阶段 这一阶段是从50年代初到70年代初，以1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑开创了分子遗传学基本理论建立和发展的黄金。DNA双螺旋发现的最深刻意义在于：确立了核酸作为信息分子的结构基础；提出碱基配对是核酸复制、遗传信息传递的基本方式；从而最后确定了核酸是遗传的物质基础，为认识核酸与蛋白质的关系及其生命中的作用打下了最重要的基础。在些期间的主要进展包括： 遗传信息传递中心法则的建立。 在发现DNA双螺旋结构同时，Watson和Crick就提出DNA复制的可能模型。其后在1956年A.Kornbery首先发现DNA聚合酶；1958年Meselson及Stahl同位素标记和超速离心分离实验为DNA半保留模型提出了证明；1968年Okazaki（冈畸）提出DNA不连续复制模型；1972年证实了DNA复制开始需要RNA作为引物；70年代初获得DNA拓扑异构酶，并对真核DNA聚合酶特性做了分析研究；这些都逐渐完善了对DNA复制机理的认识。 在研究DNA复制将遗传信息传给子代的同时，提出了RNA在遗传信息传到蛋白质过程中起着中介作用的假说。1958年Weiss及Hurwitz等发现依赖于DNA的RNA聚合酶；1961年Hall和Spiege-lman用RNA-DNA杂增色证明mRNA与DNA序列互补；逐步阐明了RNA转录合成的机理。

现代分子生物学研究主要内容有:DNA重组技术(基因工程)基因表达的调控生物大分子的结构和功能研究基因组、功能基因组与生物信息学研究

现代分子生物学发展的基础是生物大分子。　　分子生物学是在分子水平上研究生命现象的科学。通过研究生物大分子(核酸、蛋白质)的结构、功能和生物合成等方面来阐明各种生命现象的本质。研究内容包括各种生命过程。比如光合作用、发育的分子机制、神经活动的机理、癌的发生等。　　生物大分子，特别是蛋白质和核酸结构功能的研究，是分子生物学的基础。现代化学和物理学理论、技术和方法的应用推动了生物大分子结构功能的研究，从而出现了近30年来分子生物学的蓬勃发展。

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现在对于新冠病毒的来源还没有具体说法，只是按照最新的研究报告称最早的病例来自美国

高效液相色谱法在物分析中的应用 【摘要】HPLC是目前生物分析中应用最广泛、发展最迅速的一种分析方法，但由于生物样品组分复杂、仪器缺陷，HPLC的应用受到诸多限制。【关键词】HPLC 生物分析 【引言】 HPLC是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。随着HPLC这一种分类分析技术的广泛应用，现在每天都有色谱工作者在研究使用HPLC。 【正文】 1 HPLC的发展简史 HPLC的发展始于20世纪60年代中后期，在经典液相柱色谱的基础上，引入气相色谱的理论和技术，应用于液相柱色谱系统的设计，同时机械、光学和电子等技术上的进步，也促使了HPLC的发展。20世纪70年代，微处理机技术用于液相色谱，进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。20世纪80年代新一代是智能色谱仪，能在12到24小时完成人们一周或一月的劳动目前HPLC已成为化学、药学、医学、生物化学、环保等科学领域中重要的分类分析技术，HPLC已广泛开展和应用，各大学、研究所和工厂的试验室中，它已作为一种常备仪器使用。 2 HPLC的分类 吸附色谱分配色谱离子色谱体积排阻色谱亲和色谱3 HPLC方法建立的步骤 了解样品的性质，明确分离目的。 是否需要特殊的HPLC步骤、样品预处理等。 选择检测器和检测器设置 选择液相色谱法；进行预实验；估计最佳分离条件 优化分离条件 检测出现的问题或所需的特殊步骤 论证方法使之进入常规实验室 4 HPLC在生物分析中的应用 HPLC在药物分析中的应用 HPLC是目前生物样品药物分析中应用广泛、发展迅速的一种分析方法，但由于生物样品组分复杂，特别是含大量蛋白质等大分子杂质，易引起柱头堵塞而升高柱压；另外试样中药物浓度较低，需进一步富集才能检出，都需要对试样进行适当的前处理，以使药物净化、富集。通常的方法是进行液液萃取，但存在诸如易产生乳化、杂质较多、回收率低、需要的样品量大等缺点。固相萃取是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理，使液体样品通过一吸附剂，保留其中某一组分，再选用适当溶剂冲去杂质，然后用少量溶剂迅速洗脱，从而达到分离、净化与浓缩的目的作为从生物样品中提取净化微量药物或其代谢产物的新方法，己被广泛地用于生物样品的检测中，其中尤以与技术结合用于生物样品的分析引人注目。 生物检测Raggi等 报道用SPE-HPLC 同时测定人血浆中氯氮平和其活性代谢物去甲氯氮平的含量，两者的绝对回收率均高于88%，优于其他方法，检测限为1ng/mlLacroix 等 建立了SPE-HPLC荧光检测法测定人血浆中的神经肌阻滞剂Mivacurium Chloride对映异构体及其代谢物，其检测灵敏度可达3.9ng/ml 。Moriyama 等 用C18 柱，仅用20ul血浆，同时测定抗癫痫药扑米酮及其活性代谢物苯乙基丙二酰和苯巴比妥。谭力等 建立了SPE-HPLC 测定依那普利血药浓度的方法，最低检测浓度为1.5ng/ml,Lu 等用SPE-HPLC 荧光检测法测定了血浆中痕量甲氨蝶呤和羟甲氨蝶呤，甲氨蝶呤的最低检出限为0.05ng/ml。Farin等用SPE-HPLC 检测人血浆中美洛哌平的含量，其检测限为0.02ug/ml 。由于美洛哌平的pH 快速变质而要求Ph4.5以上，而在这样的pH 条件下将导致蛋白质的不完全沉淀，增加柱压和污染柱子，必须在制样后1h 内进行HPLC检测。而用SPE ，因没有低的 pH条件限制，可以避免制样后须快速进样分析的限制。 HPLC法在四环类抗生素质控分析中的应用据文献报道，通用的四环类抗生素的色谱分析体系为反相色谱系统，流动相可概括为碱性流动相(Ph>7.5)和酸性流动相(Ph<2.5)。由于反相色谱填料在偏碱性条件下硅胶颗粒易溶解；在偏酸性条件下键合相易水解。故对四环类抗生素一直未采用HPLC法进行质量控制。近年来，伴随着色谱填料的发展，键合硅胶抗酸、碱的能力大大提高，得采用HPLC法控制四环类抗生素的产品质量成为可能。经比较，碱性流动相体系较酸性流动相体系更易得到较好的分析结果。四环素类抗生素为碱性抗生素，与硅胶填料上的硅醇基的相互作用较强，色谱峰易拖尾。故对不同牌号的色谱柱，由于填料封尾情况的差异，对其色谱峰形的影响不同，采用全封尾的色谱填料，如Kromasil C18等易得到较对称的色谱峰。 【小结】高效液相色谱法具有分离效能高、分析速度快、灵敏度高、色谱柱可以反复使用、流动相可选择范围宽、流出组分容易收集、适用范围广和安全。同时随着机械、光学和电子、计算机等技术上的进步，高效液相色谱法将得到极大发展，适用范围也将越来越广。生物科学的发展也离不开HPLC。 【参考文献】高效液相色谱法在抗生素质控分析中的应用气象 北京 2001NULL 分析化学 大连理工大学出版社 2004 张玉奎等译 实用高效液相色谱法的建立 华文出版社 北京 2001 何 华 倪坤仪 主编 现代色谱分析 化学工业出版社 北京 2004 王新春 阳长明 侯世祥 李章万 中国医院药学杂志 2001年第 21卷第 12期

可以啊！你可以进医院的检验科工作，因为在检验科也要做一些分子生物学的实验的，比如说，在验证乙肝验证的时候，是要做分子生物学的实验的！

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生物显微技术如何与分子生物学的相关研究进行交叉结合?请举例说明。如下：生物显微技术可以与分子生物学进行交叉结合，用于观察、研究和分析细胞内生物大分子的结构、功能、动态变化和相互作用等。具体而言，可以采用以下几种方法：荧光成像技术：通过在目标分子上引入荧光标记，可以利用荧光显微镜观察分子在活细胞和组织中的分布和定位情况，并研究分子之间相互作用的动态过程。共聚焦显微镜技术：该技术能够消除样品的散射光，并以光学切片方式获得具有高分辨率的三维图像，可用于研究大分子的亚细胞定位、3D结构和动力学行为等。电子显微技术：通过电子显微镜对生物大分子进行成像，可以在分子水平上观察细胞内分子的超微结构，如核糖体、线粒体、内质网、高尔基体等。切片成像技术：通过将组织或细胞切片后，再进行显微成像，可以获取更高分辨率的图像，也可以进行三维成像和高通量筛查。靶向代谢组学检测平台选上海敏心生物科技。上海敏心生物科技专业从事代谢组学相关的科研服务。现平台已拥有三大分析测试仪器，拥有数十种仪器，可根据客户的样品及实验方案提供仪器配置。参与多项国家科研项目的申请与实施。

疾控中心的话一般是菌落总数，大肠杆菌，有致病菌检验的也要做 分子生物技术没有吧 因为为了大众化 把相关的检验都普通化了，当然了 一些食品微生物的快速检验就用到了 酶联免疫 等分子技术了

所有分子实验吧。细胞培养，毒性检验，病毒中和实验，qPCR，免组，WB，SPR 流式？

PCR技术。分子生物学技术有PCR、分子克隆、核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序、DNA，RNA提取、转化外源DNA、体外转录、逆转录、cDNA文库构建、原位杂交等。

PCR仪、离心机、超净台、水浴锅、电泳仪

《分子生物学实验技术》本书是关于分子生物学实验技术的一部综合性著作。它全面覆盖了有关分子生物学实验技术的诸多领域，包含了生物大分子制备和分析常用技术、蛋白质与核酸的提取与分离、PCR技术、分子杂交与印迹技术、分子克隆技术、外源基因转移技术、蛋白质表达技术、分子标记技术、分子改造技术、测序及人工合成技术、基因组学技术、蛋白质组学技术、生物芯片技术、生物信息学技术、RNA研究技术等。

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这个要看导师做的课题了，有一些导师做植物bai，有些做微生物du，有些做细胞，有些做药物，有些做食品，从这些分类你zhi可以大致看出来做的侧dao重点了吧？基础医学院的分子生物学和偏向做神经、药物和内疾病研究的分子生物学方向应该都是需容要经常做动物实验的。

能说的详细点嘛，这可不好猜，难道是additional deletion?

X染色体,q是长臂,12.1/13是基因的定位,数值是厘摩,以距着丝点为准其优点是只需一步PCR,而无需电泳技术和标记技术,摆脱了分子生物学中电泳

甲醇常常用于分析试剂或者清除去油剂，有很大的毒性并易挥发。甲醇的毒性对人体的神经系统和血液系统影响最大，它经消化道、呼吸道或皮肤摄入都会产生毒性反应，甲醇蒸气能损害人的呼吸道粘膜和视力。急性中毒症状有：头疼、恶心、胃痛、疲倦、视力模糊以至失明，继而呼吸困难，最终导致呼吸中枢麻痹而死亡。慢性中毒反应为：眩晕、昏睡、头痛、耳鸣、视力减退、消化障碍。使用时要避免吸入其挥发的汽雾。要戴合适的手套和安全眼镜。而且一些有毒有害的物质千万不要随意丢弃，不要让收拾垃圾的阿姨大叔们遭受这种伤害，一定要有专门的处理方法。

科学领域中任何一门学科的形成和发展，一般很难准确地说明它是何时、何人创始的。分子生物学的产生和发展，同其它学科一样，经历了漫长而艰辛的过程，逐步走向成熟而迅速发展的道路。 1871年，Lankester就提出，生物不同种属间的化学和分子差异的发现和分析，对确定系统发生的关系，要比总体形态学的比较研究更为重要。后来，随着德国、美国生理化学实验室的建立和生物化学杂志的创办，促进了生物化学的发展。当生物化学深入到研究生物大分子时， 1938年Weaver在写给洛克菲勒基金会的报告中，首次使用了分子生物学(molecular biology)一词。他写道：“在基金会给予支持的研究中，有一系列属于比较新的领域，可称之为分子生物学……”。一年以后，研究蛋白质结构的Astbury使用了这个名词，以后它变得越来越普遍。特别是在1953年，Watson和Crick发表了著名论文“脱氧核糖核酸的结构”以后，DNA双螺旋结构的发现，促进了遗传学、生物化学和生物物理学的结合，推动了分子生物学的形成和迅速发展，使生命科学全面地进入分子水平研究的时代，这是生物科学发展史上的重大里程碑。1956年剑桥医学研究委员会率先建立了分子生物学实验室，1959年创刊了《分子生物学》杂志，1963年成立了欧洲分子生物学国际组织，分子生物学从而成为崭新的独立学科，带动着生命科学迅猛发展，成为现代自然科学研究中的重要领域。 在分子生物学的形成和发展过程中，有许多重大的发现和事件，具体情况如下： 1864年：Hoope-Seyler结晶并命名了血红蛋白。 1869年：Mieseher第一次分离了DNA。 1871年：Lankester首先提出生物不同种属间的化学和分子差异的发现与分析，对确定系统发生的关系，要比总体形态学的比较研究更为重要。 1926年：Sumaer从刀豆的提取物中得到脲酶结晶，并证明此蛋白质结晶有催化活性。同年，Svedberg创建了第一台分析用超高速离心机，并用其测定了血红蛋白的相对分子质量约为6.8X104。 1931年：Pauling发表了他的第一篇关于“化学键特性”的论文，详细说明了共价键联结的规律。后来，又建立了处理生物分子的量子力学理论。 1934年：Bernal和Crowfoot发表了第一张胃蛋白酶晶体的详尽的X-射线衍射图谱。 1941年：Astbury获得了第一张DNA的X-射线衍射图谱。 1944年：Avery提供了在细菌的转化中，携带遗传信息的是DNA，而不是蛋白质的证据。实验证明，使无毒的R型肺炎双球菌转变成致病的S型，DNA是转化的基本要素。8年后，1952年，Hershey和Chase又用同位素示踪技术证明T2噬菌体感染大肠杆菌，主要是核酸进入细菌内，而病毒外壳蛋白留在细胞外。烟草花叶病毒的重建实验证明，病毒蛋白质的特性由RNA决定，即遗传物质是核酸而不是蛋白质。至此，DNA作为遗传物质才被普遍地接受。 1950年：Chargaff以不同来源DNA碱基组成的精确数据推翻了四核苷酸论，提出了Chargaff规则，即DNA的碱基组成有一个共同的规律，胸腺嘧啶的摩尔含量总是等于腺嘌呤的摩尔含量，胞嘧啶的摩尔含量总是等于鸟嘌呤的摩尔含量，即[A]＝[T]和[G]＝[C]。 1951年：Pauling和Corey应用X-射线衍射晶体学理论研究了氨基酸和多肽的精细空间结构，提出了两种有周期规律性的多肽结构学说，即alpha螺旋和B-折叠理论。 1953年：这是开创生命科学新时代的第一年，具有里程碑意义的是Watson和Crick发表了“脱氧核糖核酸的结构”的著名论文，他们在Franklin和Wilkins X-射线衍射研究结果的基础上，推导出DNA双螺旋结构模式，开创了生物科学的新纪元。同年，Sanger历经8年的研究，完成了第一个蛋白质一胰岛素的氨基酸全序列分析。 随后，1954年Gamnow从理论上研究了遗传密码的编码规律；1956年Volkin和Astrachan发现了mRNA(当时尚未用此名)；1958年，Hoagland等发现了tRNA在蛋白质合成中的作用；Meselson和Stahl应用同位素和超离心法证明DNA的半保留复制；Crick提出遗传信息传递的中心法则。 1960年：Marmur和Dory发现了DNA的复性作用，确定了核酸杂交反应的专一性和可靠性；Rich证明DNA-RNA杂交分子与核酸间的信息传递有关，开创了核酸实际应用的先河。与此同时，在蛋白质结构研究方面，Kendrew等得到了肌红蛋白0.2nm分辨率的结构，Perutz等得到了血红蛋白0.55nm分辨率的结构。 1961年：这是分子生物学发展不平凡的一年。Jacob和Monod提出操纵子学说，发表了蛋白质合成中遗传调节机理的论文，此论文被誉为是分子生物学中文笔优美的经典论文之一。同年，Brenner等获得mRNA的证据；Hall和Spiegelman证明T2 DNA和T2专一性RNA的序列互补；Crick等证明了遗传密码的通用性。 1962年：Arber提出第一个证据，证明限制性核酸内切酶的存在，导致以后对该类酶的纯化，并由Nathans和Smith应用于DNA图谱和序列分析。 1965年：Holley等采用重叠法首先测定了酵母丙氨酰-tRNA的一级结构，为广泛、深入地研究tRNA的高级结构奠定了基础。 1967年：Gellert发现了DNA连接酶，该酶将具有相同粘末端或者平末端的DNA片段连接在一起。同年，Philips及其同事确定了溶菌酶0.2nm分辨率的三维结构。 1970年：Temin和Baltimore几乎同时发现了反转录酶，证实了Temin 1964年提出的“前病毒假说”。在劳氏肉瘤病毒(RSV)感染以后，首先产生的是含有RNA病毒基因组全部遗传信息的DNA前病毒，子代病毒的RNA是以前病毒的DNA为模板进行合成的。反转录酶已成为目前分子生物学研究中的一个重要工具。 1972年～1973年：重组DNA时代到来。Berg、Boyer和Cohen等创建了DNA克隆化技术，在体外构建成具有生物学功能的细菌质粒，开创了基因工程新纪元。与此同时，Singer和Nicolson提出生物膜结构的液态镶嵌模型。 1975年：Southern发明了凝胶电泳分离DNA片段的印迹法；Gruustein和Hogness建立了克隆特定基因的新方法；O"Farrell发明了双向电泳分析蛋白质的方法，为分子生物学的深入发展创造了重要的技术条件；Blobel等报导了信号肽。 1976年：Bishop和Varmus发现动物肿瘤病毒的癌基因来源于细胞基因(即原癌基因)。 1977年：Berget等发现了“断裂”基因；Sanger、Maxam和Gilbert创立了“酶法”“化学法”测定DNA序列的方法，标志着分子生物学研究新时代的到来。 1979年：Solomon和Bodmer最先提出至少200个限制性片段长度多态性(RFLP)可作为连接人整个基因组图谱之基础。 1980年：Wigler等通过与某个选择性标志物共感染，从而把非选择性基因导入哺乳动物细胞；Cohen和Boyer获得一项克隆技术的美国专利。 1981年：Cech等发现四膜虫26S rRNA前体的自我剪接作用，随后又证明前体中的居间序列(intervening sequence，IVS)有五种酶的活力。几乎在同时，Altman从纯化的RNase P中，证明催化tRNA前体成熟的催化剂是RNase P中的RNA。具有催化作用RNA(ribozyme)的发现，促进了RNA研究的飞速发展。 1982年：Prusiner等在感染搔痒病的仓鼠脑中发现了朊病毒(prion)。 1983年：Herrera-Estrella等用Ti质粒作为转基因载体转化植物细胞获得成功。 1984年：McGinnis等发现果蝇、非洲爪蟾等同源异形基因中的同源异形盒(homeobox)的核苷酸序列；Schwartz和Cantor发明了脉冲梯度凝胶电泳法；Simons和Kleckner等发现了反义RNA。 1985年：Saiki等发明了聚合酶链式反应(PCR)；Sinsheimer首先提出人类基因组图谱制作计划的设想；Smith等报导了DNA测序中应用荧光标记取代同位素标记的方法；Miller等发现DNA结合蛋白的锌指结构。 1986年：Dryja等发现成视网膜细胞瘤(Rb)基因是一种抑癌基因；Robin等采用X-光晶相学，证实了DNA结合蛋白的螺旋-转角-螺旋结构。 1987年：Mirkin等在酸性溶液的质粒中发现三链DNA；Burke等用酵母人工染色体(YAC)作载体克隆了大片段DNA；Hoffman等确定了Dnchenne肌肉萎缩病灶的蛋白产物是萎缩素(dystrophin)；Hooper等和Kuehn等分别用胚基细胞进行哺乳动物胚的转基因操作，取得重大进展。 1988年：Landsehalz等在对CyC3(细胞色素C基因调节蛋白)、癌基因产物(MyC、V-jun、V-fos)和CBP(CCAAT盒结合蛋白)的研究过程中，发现了结合区亮氨酸序列的周期性，提出DNA结合蛋白的亮氨酸拉链结构模型；同年，Whyfe等证明癌的发生是癌基因的激活和抑癌基因失活的结果。 1989年：Greider等首先在纤毛原生动物中发现了端粒酶(telomerase)是以内源性RNA为模板的反转录酶；Hiatt等首次报导了在植物中亦可产生单克隆抗体。 1990年：人类基因组计划(HGP)全面正式启动；Simpson等发现了对mRNA前体编辑起指导作用的小分子RNA(guide RNA)；Sinclair等在人类Y染色体上发现了新的性别决定基因-SRY基因。 1991年：由欧洲共同体(EC)组织17个国家35个实验室的147位科学家，以手工测序为主要手段，首先完成了第一条完整染色体(酵母3号染色体)的315kb的测序工作；Hake等首次报导在植物中发现含有同源异形盒基因；Blackburn等提出调节聚合序列[通式为(T/A)mGn，m＝124，n＝1~8]的单链DNA可形成分子内或分子间的四螺旋结构，起着稳定染色体的作用。 1993年：Jurnak等在研究果胶酸裂解酶时，发现一种新的蛋白质结构-平行B螺旋(parallel B helix)；Yuan等在哺乳类细胞内发现一种参与调节细胞凋亡并具有剪切作用的蛋白质-IL-1B转换酶(interlukin-1B-convertingenzyme，ICE)。 1994年：日本科学家在((Nature Genetics》上发表了水稻基因组遗传图；Wilson等用3年时间完成了线虫(Celegans)3号染色体连续的2.2Mb的测定，预示着百万碱基规模的DNA序列测定时代的到来。 1995年：Cuenoud等发现了具有酶活性的DNA；Tu等在E.coli中发现了具有转运与信使双功能的RNA-10 Sa RNA。 1996年：Lee等首次报导了酵母转录因子GCN4中的氨基酸片段能自动催化合成自我复制的肽；洪国藩等采用“指纹-锚标”战略构建了高分辨率的水稻基因组物理图谱，DNA片段的长度为120kb；Goffeau等完成了酵母基因组DNA全序列(1.25X10 7bp)的测定。 1997年：Wilmut等首次不经过受精，用成年母羊体细胞的遗传物质，成功地获得克隆羊-多莉(Dolly)；Willard等首次构建了人染色体(HACs)；Salishury等发现DNA一种新的结构形式-四显性组合，这可能是基因交换期间DNA联结的一种方式。 1998年：Renard等用体细胞操作获得克隆牛-Marguerife，再次证明从体细胞可克隆出遗传上完全相同的哺乳动物；GeneBank公布了最新人的“基因图谱98""，代表了30181条基因定位的信息；Venter对人类基因组计划提出新的战略-全基因组随机测序，毛细管电泳测序仪启动。 从以上所述分子生物学的发展中，可以看出20世纪是以核酸的研究为核心，带动着分子生物学向纵深发展。50年代的双螺旋结构，60年代的操纵子学说，70年代的DNA重组，80年代的PCR技术，90年代的DNA测序都具有里程碑的意义，将生命科学带向一个由宏观到微观再到宏观，由分析到综合的时代。

其曝光的时间因实验的具体方法和实验目的而异。在常规的PCR实验中，曝光时间通常是几秒钟到几分钟不等。在PCR实验中，DNA片段被扩增后，需要将PCR产物置于琼脂糖凝胶中进行电泳，以便观察扩增产物的大小和数量。在电泳过程中，使用紫外线照射琼脂糖凝胶，以激发DNA中的荧光素。荧光素在紫外线照射下会发出明亮的荧光，这样就可以看到琼脂糖凝胶上的DNA条带。在其他类型的分子生物学实验中，如Western blot和南方杂交等实验中，曝光时间也会有所不同。在Western blot实验中，曝光时间通常在几秒钟到几分钟之间，以便观察蛋白质的表达和定量。在南方杂交实验中，曝光时间通常需要数小时到数天，以便观察DNA探针与靶DNA的结合情况。

有毒。分子生物学实验室常见毒物：溴化乙锭EtBr，二甲基亚砜DMSO，丙烯酰胺Acrylamide，丙烯酰胺Acrylamide，苯甲基磺酰氟PMSF，二乙基焦碳酸酯DEPC。分子生物学实验室中研究对象主要是细胞，DNA，RNA和蛋白质。实验过程中我们常常要对这些实验对象进行观察，提取，裂解等操作。然而，要知道我们人体本身就是由细胞组成的，细胞内包括DNA，RNA，蛋白质。所以对这些实验对象进行操作时，使用的很多试剂也会对我们身体产生危害。

分子生物学它不象人体解剖学那样直观，不象生理学那样有条理化，更不象内外科那样有吸引力.很多医学大学生三羧酸循环学得很好，甚至很精，但对于后面的分子生物学，即基因信息传递一章却感到非常头痛，很多大五学生在考研时考虑到分值较小而干脆放弃对这一章的复习.其实大家只要强制自己静下心来花点时间先认真看好书本上分子生物学的第一章，即DNA的生物合成，当你对这一章看进去了，并且基本上看出了头绪，我相信你一定有信心有兴趣继续看下去，并且最好是连贯性地系统性地看后面的，争取一次性地看完分子生物学这一篇，用通俗的话说就是花大力气啃掉这块硬骨头.如果中途有特殊情况，那么间隔时间最好不要超过两天，否则你前面辛辛苦苦培养出来的兴趣将会消失的一干二净，你又将回到从前讨厌分子生物学的状态.分子生物学理论学习只有通过自己看书理解才能掌握。　　除了学习分子生物学理论外，分子生物学实验也很重要，只有通过分子生物学实验才能学到书上学不到的东西。因此，最好在大学阶段进入老师实验室，跟老师研究生学习分子生物学技术，那样才能更好地学好分子生物学理论。现在分子生物学实验发展非常快，如果只是看书根本掌握不到多少东西，如DNA、DNA提取、PCR、文库构建、测序等，在书上看着很复杂，而且印象还不深刻，如果进入实验室多做几次，其实这些实验是最基础的实验，而且不用看书都能自己做，原理非常复杂或高深难懂，但实际做起来也不是很难。

信号假说提出后得到许多实验的支持，其中最有力的一项实验结果是杂合蛋白研究的结果。黑猩猩的α-球蛋白是一种在游离核糖体上合成并存在于胞质溶胶中的可溶性蛋白，科学家在编码该蛋白的基因上接上一段编码E.coli分泌蛋白β-半乳糖透性酶（β-lactamase）的信号序列DNA， 然后将该基因加入到无细胞的转录和翻译体系中，并加入从狗组织中分离的ER膜，研究结果发现，杂合蛋白出现在ER腔中，而且信号序列被切除了。这一研究结果不仅证实了信号假说的正确性，也揭示了信号序列的一个重要特性：信号序列没有特异性，并且原核生物的信号序列在真核生物中也是有效的。

实验室重视与国内外同行的交流。聘请国内外著名学者作为顾问参与指导实验室的研究方向。多年来，出访来访的学术活动每年约有100多人次。与国外有密切学术联系合作研究的科研院校十多个，它们主要分布在欧美发达国家。近些年实验室举办过多次国际学术讲习班，主讲者来自世界著名科研单位，学员也有相当一部分来自世界各地。通过上述一系列的交流活动，不仅促进了实验室的科研工作，也扩大了实验室在国际同行中的影响。紧密结合“人口与健康”这一国家重大需求，为防治人类重要疾病、培养生物新品种提供理论依据，建成一个在分子生物学领域从事基础研究的实验室，跻身国际前列，并为我国国民经济建设作出贡献历来是实验室的总体发展目标。国家组织专家对实验室进行的四次评估所给予的鼓励激励着全室成员更加努力地投身于科学创新，同时在酝酿联合兄弟实验室在适当的时候争取成为国家实验室，以便在更高层次上为国家做出更大的贡献。

1）完成氨酰-tRNA合成酶的结构，许多合成酶都是在此第一次克隆的。蛋白质-RNA的系统研究已扩展到哺乳动物的信号识别粒子和许多与mRNA相互作用的蛋白质。（2）病毒的RNA，如流感和狂犬病，目的是了解它们是如何复制和组合的。（3）真核细胞转录因子蛋白-DNA复合物晶体。最近，把重心放在T蛋白/DNA复合体和第一个Stat/DNA复合体的结构确定。EMBL格勒诺布尔分站参加欧洲结构蛋白质组项目，并积极与其他机构结成联合体：法国格勒诺布尔的结构生物学联合体PSB（Partnership for Structural Biology）和病毒寄主细胞相互作用研究单位UVHCI（Unit of Virus Host Interactions）。UVHCI创建于2007年1月，它的两个合作伙伴是：法国国家科学研究中心CNRS（French National Center for Scientific Research）和约瑟夫·傅立叶大学（格勒诺布尔一大）UJF（University Joseph Fourier）。在PSB框架下，EMBL格勒诺布尔分站不仅建设了专门用于解析海量蛋白质结构、功能和结晶的基础设施和设备，还与ILL合作，成立了生物分子氘化实验室D-Lab。中子光源在生物学研究方面的巨大优势是可“目击”氢原子，而同步辐射的X射线很难检测。大分子结构与功能之间的关系错综复杂，从作为单一原子存在时的生物功能，到作为一个组装体，或与其他分子结合的复合体时的生物功能不尽相同。氢原子的“目击”观察可为各层次氢原子的组织结构提供独一无二的信息资料。在生物大分子中，几近一半是由氢原子组成的。因此氢原子对构成生物大分子有着举足轻重的作用。氢原子参与酶的催化反应是生命存在的基础。氘，即重氢（质量约为氢的2倍），氘化是指对氢原子进行同位素分离，以替代氢原子。选择性地氘化氢原子并替代它，可对分子内部结构进行更细致入微的分析。氘化生物大分子是极其困难的，但这正是D-Lab所做的工作。它充分利用中子光源的优势，成为全球独一无二的中子源在生物领域的应用基地。

It should not be a problem, as long as you do not work on isotopes. Also, wear gloves to handle toxic chemicals.

指细胞离体培养

分子这边主要有DNA，RNA提取，单克隆构建，PCR扩增，文库构建，应该每个公司具体的都不太一样，我们公司是周末经常加班，而且是义务加班，希望能够帮到你 来自职Q用户：向女士看你做那个领域的了，现在都是一代二代测序，提取之类的，做多了就觉得烦，看你应聘的公司是什么样的，我现在在一家小公司，天天加班还没有加班费 来自职Q用户：李女士

你可以到百度百科里面查找，会有详细的介绍的

由于它具有带强负电荷的理化特性，能干扰血凝过程的许多环节，在体内外都有抗凝血作用。其作用机制比较复杂，主要通过与抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）结合，而增强后者对活化的Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ和Ⅻ凝血因子的抑制作用。其后果涉及阻止血小板凝集和破坏，妨碍凝血激活酶的形成；阻止凝血酶原变为凝血酶；抑制凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白。

最好不要做。。。怀孕期间就不应该进实验室。。。分子实验相对于化学和材料毒性是小很多 但是依旧会接触到有毒物质。。。其实应该在准备怀孕的时候就不要进实验室才对。。。

按要求应该灭菌。不过我有时灭，有时不灭，没发现有什么问题。

分子生物学操作中会涉及一系列仪器，使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项，是使后继实验事半功倍的一个必要准备。 冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中，都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究中必需的重要工具。 使用方法： 1.离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 2.打开电源开关，按要求装上所需的转头，将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上（离心筒须与样品同时平衡），关闭机盖。 3.按功能选择键，设置各项要求：温度、速度、时间、加速度及减速度，带电脑控制的机器还需按储存键，以便记忆输入的各项信息。 4.按启动键，离心机将执行上述参数进行运作，到预定时间自动关机。 5.待离心机完全停止转动后打开机盖，取出离心样品，用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。 注意事项： 1.机体应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线。 2.开机前应检查转头安装是否牢固，机腔有无异物掉入。 3.样品应预先平衡，使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。 4.挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏，以免腐蚀机腔或造成事故。 5.擦拭离心机腔时动作要轻，以免损坏机腔内温度感应器。 6.每次操作完毕应作好使用情况记录，并定期对机器各项性能进行检修。 7.离心过程中若发现异常现象，应立即关闭电源，报请有关技术人员检修。 附：相对离心力与每分钟转速的换算 离心机的转速，在以前实验资料中一般以每分钟多少转来表示。由于离心力不仅为转速函数，亦为离心半径的函数，即转速相同时，离心半径越长，产生的离心力越大。因此仅以转速表达离心力是不够科学的，近年来主张用相对离心力（RCF）来表示比较合理。现在国际资料中，已改用相对离心力来表示。 两者的互换公式如下： PCR扩增仪: 目前各公司提供的PCR仪操作方法各有不同，按其操作说明进行操作。 值得提出的是，在使用一定时期后，样品孔的实际温度与仪器显示温度有时会有较大差异，应当请厂商的技术支持人员校对仪器的各项性能。 数字式酸度计： 一、 准备工作 1.仪器应平放在符合使用环境的工作台上，依视觉角度支起支架。 3.pH值的定位测量法： （一）二点定位法（高精度测量方法） (1) 连接好电极线路，将参比电极及活化满24h以上清洁的PH电极移入第一标准缓冲液pH1中（例pH1=4.00），待仪器响应稳定后，调节定位旋钮至仪器显示为“0.00”； (2) 将电级系统从第1种标准液中取出，用去离子水冲洗干净后以滤纸吸干电级表面水份，移入第2种标准液（例pH2=9.18）中，仪器响应稳定后，调节斜率旋钮，使仪器显示为（△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18）此后斜率旋钮不可再动，除非更换电极系统； (3) 斜率调节完成后，重新调节定位旋钮，使仪器显示第2种标准液的实际pH值（9.18），至此2点定位结束； (4) 将电极从第2种标准液中取出冲洗、吸干后移入待测溶液中，仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。 （二）一点定位法（粗略测量法） (1) 将温度补偿旋钮调至溶液温度值； (2) 向左将斜率补偿旋钮旋转至头； (3) 将电级系统移入标准液中（一点法仅用一种标准液，如pH=4.00时），调节定位旋钮使仪器显示“4.00”； (4) 取出电级冲洗吸干水分后移至待测溶液中，仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。 三、温度的测量 1.将功能选择拨至温度档。 2.将温度探头插入插孔，并将温度探头置于环境条件或溶液中，仪器响应稳定后仪器显示值即为环境条件或溶液温度值。 四、注意事项 1.认真做好仪器使用前准备工作。 2.仪器通电后或测量过程中出现显示不稳或乱跳现象，应切断电源进行检查，如电压、预热时间及电极系统等是否正常。 3.使用不同电极应注意排除离子的干扰，选择好盐桥，必要时应使用离子强度固定剂。 4.电极系统从第1种溶液取出移入第2种溶液之前，须用

第一篇 常用分子生物学实验技术及原理第一章 载体第二章 分子生物学中常用的工具酶第三章 电泳第四章 真核生物基因组文库的构建第五章 eDNA文库的构建第六章　DNA序列测定第七章　PCR基因扩增第八章　基因表达第九章 印迹法及分子检测第十章 克隆化DNA的定点突变第十一章 mRNA差异显示技术第二篇　学生实验实验一 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA的转化实验二 质粒DNA的提取及其定性定、量分析实验三 琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验四　PCR基因扩增及扩增产物的回收实验五　DNA重组实验六 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测实验七 蛋白质印迹实验八 哺乳动物基因组DNA的分离和分析实验九 植物基因组DNA的提取实验十 大肠杆菌基因组DNA的提取实验十一 植物总RNA的提取实验十二 RT—PCR（反转录一聚合酶链反应）实验十三　PCR法差异显示mRNA实验十四 利用聚合酶链反应（PCR）定点突变实验十五 寡核苷酸介导的定点突变实验十六 Southern杂交实验十七 双脱氧链终止法测定DNA序列实验十八　DNA核苷酸序列分析——银染色法附录一、常用核酸、蛋白质换算数据二、氨基酸符号及相应密码子三、常见市售酸碱的浓度四、离心机转速与相对离心力的换算五、常用电泳缓冲液及凝胶加样缓冲液六、常用限制酶酶切位点及缓冲液七、分子生物学常用试剂和缓冲液的配制八、常用细菌培养基和抗生素溶液九、x光底片的冲洗方法十、溴化乙锭溶液的净化处理

目前，分子生物学飞速发展，分子生物学相关的理论和技术已深入到生命科学的各个领域，一些常用的技术，如基因组DNA的分离纯化，质粒DNA的抽提及纯化，RNA的提取，PCR扩增，Southern blot等成为分子生物学研究的强有力工具，为分子生物学的发展起了巨大的推动作用，然后，这些实验操作技术都涉及到氯仿、DEPC、同位素等有毒有害或具放射性的物质，对环境和人身安全也造成巨大的威胁。因此，弄清这些有害有毒物质的作用，加强实验室安全管理，建立良好的制度和处理，保证分子生物学实验室成为真正的科研阵地。放射性物质的处理：放射性同位素技术具有灵敏、简便和廉价等优点，在分子生物学实验室应用普遍，但由于放射性同位素的辐射会给人体造成损伤，如果使用不当或操作不规范，会造成环境污染，甚至损伤人员。在进行同位素操作时一定要注意个人防护，包括使用隔离、专用衣帽手套及防护背心、挡板等。对放射性同位素的污染进行安全性教育，实行责任到人的做法，对放射性物质统一保管、集中存放、集中处理的做法。在定购同位素时，根据需要量进行订购。α-31p半衰期为14.5天，在southern blotting应用较广，是危害较大的放射性物质。DNA杂交时，在探针标记、洗膜等几个阶段都涉及同位素。对含α-31p固体废物，放入铁皮箱10个半衰期(约半年)后埋到指定的地点：对于含α-31p浓度较高的液体废物(如首次洗膜液)，在厚实的朔料桶放置8个半衰期后倒入专用的下水道；含α-31p浓度较低的液体废物(如二、三次洗膜液)，则直接倒入专用的下水道。 4.3常见的有毒物质的处理：溴化乙锭、Trizol、丙烯酰氨、DEPC、甲酰氨等毒性高、环境危害大的物质，分类收集后统一处理。 4.3.1 EB(Ethidiunl bromide，溴化乙锭)：EB是一种强烈诱变剂并有中度毒性，应戴手套操作，对于含有EB的溶液也不应直接倒下水道，用后妥善净化处理：EB含量大干0.5μg/ml溶液先用水将EB浓度稀释至0.5μg/ml以下，每100ml溶液加入100mg活性碳。不时轻轻摇荡混匀，室温放置1小时，滤纸过滤将活性碳与滤纸密封在塑料袋中作为有害废物丢弃。或用专用一次性染料清除袋(Gene有限公司)吸附过夜，再焚烧袋子即可。EB接触物，如抹布、枪头等埋入地下。 4.3.2 Trizol：提取组织和细胞RNA的一种重要试剂，在提取RNA时一定要在通风进行。如皮肤接触Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，废液埋入地下。 4.3.3 DEPC(Diethylprocarbonate，二乙基焦碳酸酯)：RNA酶的强抑制剂，一种潜在的致癌物质。操作时戴口罩。在通风橱中进行。沾到手上立即冲洗，废液通过废液道排泄。 4.3.4 CHCl3(ChIoroform，氯仿)：常用于DNA和RNA提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺激作用和腐蚀性，易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行，废液收集后埋入地下。 4.3.5 Acrylamide(丙烯酰胺)：DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行，聚合后的聚丙烯酰胺凝胶没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千万不要倒入下水道。

目前，分子生物学飞速发展，分子生物学相关的理论和技术已深入到生命科学的各个领域，一些常用的技术，如基因组DNA的分离纯化，质粒DNA的抽提及纯化，RNA的提取，PCR扩增，Southern blot等成为分子生物学研究的强有力工具，为分子生物学的发展起了巨大的推动作用，然后，这些实验操作技术都涉及到氯仿、DEPC、同位素等有毒有害或具放射性的物质，对环境和人身安全也造成巨大的威胁。因此，弄清这些有害有毒物质的作用，加强实验室安全管理，建立良好的制度和处理，保证分子生物学实验室成为真正的科研阵地。放射性物质的处理：放射性同位素技术具有灵敏、简便和廉价等优点，在分子生物学实验室应用普遍，但由于放射性同位素的辐射会给人体造成损伤，如果使用不当或操作不规范，会造成环境污染，甚至损伤人员。在进行同位素操作时一定要注意个人防护，包括使用隔离、专用衣帽手套及防护背心、挡板等。对放射性同位素的污染进行安全性教育，实行责任到人的做法，对放射性物质统一保管、集中存放、集中处理的做法。在定购同位素时，根据需要量进行订购。α-31p半衰期为14.5天，在southern blotting应用较广，是危害较大的放射性物质。DNA杂交时，在探针标记、洗膜等几个阶段都涉及同位素。对含α-31p固体废物，放入铁皮箱10个半衰期(约半年)后埋到指定的地点：对于含α-31p浓度较高的液体废物(如首次洗膜液)，在厚实的朔料桶放置8个半衰期后倒入专用的下水道；含α-31p浓度较低的液体废物(如二、三次洗膜液)，则直接倒入专用的下水道。 4.3常见的有毒物质的处理：溴化乙锭、Trizol、丙烯酰氨、DEPC、甲酰氨等毒性高、环境危害大的物质，分类收集后统一处理。 4.3.1 EB(Ethidiunl bromide，溴化乙锭)：EB是一种强烈诱变剂并有中度毒性，应戴手套操作，对于含有EB的溶液也不应直接倒下水道，用后妥善净化处理：EB含量大干0.5μg/ml溶液先用水将EB浓度稀释至0.5μg/ml以下，每100ml溶液加入100mg活性碳。不时轻轻摇荡混匀，室温放置1小时，滤纸过滤将活性碳与滤纸密封在塑料袋中作为有害废物丢弃。或用专用一次性染料清除袋(Gene有限公司)吸附过夜，再焚烧袋子即可。EB接触物，如抹布、枪头等埋入地下。 4.3.2 Trizol：提取组织和细胞RNA的一种重要试剂，在提取RNA时一定要在通风进行。如皮肤接触Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，废液埋入地下。 4.3.3 DEPC(Diethylprocarbonate，二乙基焦碳酸酯)：RNA酶的强抑制剂，一种潜在的致癌物质。操作时戴口罩。在通风橱中进行。沾到手上立即冲洗，废液通过废液道排泄。 4.3.4 CHCl3(ChIoroform，氯仿)：常用于DNA和RNA提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺激作用和腐蚀性，易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行，废液收集后埋入地下。 4.3.5 Acrylamide(丙烯酰胺)：DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行，聚合后的聚丙烯酰胺凝胶没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千万不要倒入下水道。

类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火(复性）--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至40~60℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下，于72℃左右，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

包含了生物大分子制备和分析常用技术、蛋白质与核酸的提取与分离、PCR技术、分子杂交与印迹技术、分子克隆技术、外源基因转移技术、蛋白质表达技术、分子标记技术、分子改造技术、测序及人工合成技术、基因组学技术、蛋白质组学技术、生物芯片技术、生物信息学技术、RNA研究技术等.

兄弟难道还想混装？

1.无需 灭菌，常温放置。2.没灭过，不知道。

孵育就是几种化合物或有机大分子混在一起在特定条件下放置一段时间。

需要，你做感受态啊，涂板啊什么都需要无菌啊