dn

驱动板故障

自己看高二必修一

一、染色体（chromosome ）的组成成分 1.【染色体存在与细胞核中】，容易被碱性染料染成深色的物质。 2.【染色体由DNA和蛋白质组成】 3.染色体是遗传物质DNA的载体 4. 【基因是DNA上能够控制生物性状的片断】 二、在体细胞中，染色体成对存在，其中一条来自父方，一条来自母方。 在生殖细胞中，染色体是成单出现的。

很好的问题. 生物体要对抗种类繁多,结构未知的抗原,无法在在生命的最初就预设所有的抗体基因.解决的办法就是靠抗体基因在淋巴细胞发育过程中发生重排,产生多种组合.然后有效的组合被筛选出来,大量表达.这也是现在人工制备抗体的原理.

如何将PubMed上的文章导入EndNote 经实验以下方法100%适用于EndNote X3~ EndNote X5！！！ 这里以《Differential activation of host cell signalling pathways through infection with two variants of influenza A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) in MDCK cells》文献举例说明。 1. 通过http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/进入pubmed主页；搜索上述目标文献； 2. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=differential%20activation%20of%20host%20cell%20signalling%20pathways%20through%20infection%20with%20two%20variants# 即目标文献地址，如下图3. 单击上图绿色框内“√”，将出现以下对话框，如下图如蓝色框中所示，在“Choose Destination ”选项处单击选中“File”；这时系统才会自动出现“Format”选项，单击绿色按钮，选中“MEDLINE”（NOTE：这步顺序不能颠倒~~嘻嘻即使亲想颠倒系统也不允许~~），单击“Create File”，亲将得到一个“.txt”文件。 4. 打开EndNote X5 →File →Import →File →出现下图界面在“Import Option”的下拉菜单中选择“Other Filter”→系统将自动出现一新对话框“Choose An Import Filter”→在该对话框中单击选择“PubMed（NLM）”→ 单击“Choose”→系统自动进入如下界面→单击“Choose”加入下载的目标文献“.txt”（NOTE：系统默认文件名为pubmed-result）→单击“Impor”→大功告成！！！嘻嘻我们滴目标文献就添加进去咯，如下图！！happy~~

如何在Endnote中导入中文参考文献: 一、中文全文数据库 主要是万方（Wanfang）、中国知网（CNKI）、维普（VIP）数据库。 经过更新，这三大数据库都已经能够直接导出Endnote格式的参考文献，所以不再需要对应的过滤器（Filter）来导入文献。 从这三个数据库向Endnote导入中文参考文献的流程如下： 1，选中相应文献 2，点击与“导出参考文献”意思类似的按钮 3，导出的参考文献格式选择“Endnote” 4，点击“导出”，将相应TXT格式文件保存至电脑 5，点击Endnote Import按钮，对相应选项进行设置 6，点击“Import”按钮，成功 二、中文文摘数据库 主要是Sinomed（原CBM）。Sinomed数据库还未能导出Endnote格式的参考文献，需要特定的filter。楼主制作了一个，放在附件里，下载后解压，将CBM.enf放在安装路径EndnoteFilters文件夹里，例如Endnote安装在C盘Program Files里的，具体路径就是C:Program FilesEndnoteFilters。 从Sinomed向Endnote导入中文参考文献的流程如下： 1，选中相应文献 2，点击“结果输出”按钮，对应选项按下图设置 3，点击“确定”，将相应TXT格式文件保存至电脑 4，点击Endnote Import按钮，按下图对相应选项进行设置 5，点击“Import”按钮，成功 总结：对于Wanfang、CNKI、VIP三个中文全文数据库，直接导出Endnote格式的参考文献，用Endnote自带的Endnote Import做为过滤器导入。而对于Sinomed这个中文文摘数据库，导出“文摘”格式参考文献，用楼主提供的CBM过滤器导入。两者“Text Translation”均选“No Translation”。

1、在PubMed中按照正常步骤查询到所需文献之后，在“Sendto”后面的下拉菜单里寻file”，“Format”下拉菜单里选MEDLINE，导出为文本文件；2、打开EndNote，在File菜单里寻Import”，打开导入对话框；3、“Importdatafile”为将要导入的文本文件，“Imp

不同的下游实验对于DNA结构的完整性有所区别。 如PCR、Southern杂交这一类实验基本保证所需片段的完整，而二代测序实验为了获得全面的序列信息对DNA的完整性要求更高。 去除对下游实验中酶分子有抑制作用的有机溶剂和高浓度金属离子 将蛋白质、多糖、多酚等生物大分子的污染降到最低 去除其他核酸（如RNA对后续实验的影响） 血液、动物组织、培养细胞、鼠尾等 特点：细胞数量较多、样本成分相对单一 血清、血浆、鼻咽拭子、痰液、支气管/肺泡灌洗液、腹水、病毒、粪便、FFPE样本等 特点：细胞数量少、样本成分复杂 普通植物：拟南芥、小麦、玉米、水稻等 特点：存在细胞壁这样的保护结构、细胞内部还有液泡、叶绿体等细胞器成分相对复杂 多糖多酚类植物：水果果肉、植物种子等 特点：多糖与核酸理化性质一致、多酚氧化后易于核酸结合，影响DNA的提取 细菌:革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌等）、革兰氏阴性菌（大肠杆菌等） 特点：有细胞壁，有的细菌还有鞭毛和荚膜 真菌：酵母、真菌菌丝等 特点：存在以多糖为主要成分的细胞壁、细胞内部成分相对复杂 新鲜样本中受到内源性核酸酶影响相对最小，得到DNA质量相对更好。 投入过多样本，后续样本裂解不充分从而影响DNA提取情况，还会引入过多杂质及内源性核酸酶。 对于含有多糖多酚等次生代谢产物的衰老叶片可在4℃黑暗环境下饥饿1-2天；进行低温或冷冻保存可以避免内源性DNA酶对样本中的DNA进行一个降解。 -20℃短期保存（1-3个月），-70℃长期保存；福尔马林固定时间8-24h内为宜，样本存放时间不宜超过1年；FFPE样本保存温度4℃，建议不超过3年。 长时间使用福尔马林进行固定，里面有效成分甲醛会引起生物大分子之间形成广泛的亚甲基交联桥使DNA分子脆性增加，在剪切力的作用下，DNA分子容易断裂，同时DNA与蛋白质之间经广泛交联之后，可形成牢固的复合物，这样也阻止蛋白酶对组织的消化，从而影响DNA的提取。 可使用不同抗凝剂的抗凝管进行采集和保存；避免反复冻融，4℃短期保存3-4天，-20℃下可最多保存2年，-70℃下长期保存：全血、白细胞、血凝块、血清或血浆。 液氮研磨或匀浆 液氮研磨（最推荐） 研磨充分又保证样本处于低温条件下避免DNA降解 DNA存在于含有细胞核的白细胞中，而大量存在的红细胞会引入更多杂质和核酸酶，所以需要提前使用红细胞裂解液对红细胞进行去除。 贴壁细胞胰酶消化处理再做收集 悬浮细胞只要离心弃上清 溶菌酶破壁处理 如金黄色葡萄球菌加入一定量的溶菌酶在37℃条件下孵育30min就可完成破壁的处理 酶解破壁或液氮冻融或超声裂解法 脱蜡处理（二甲苯或矿物油类的物质进行脱蜡处理） CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）是一种阳离子去污剂，可以溶解细胞膜，与核酸结合形成在高盐环境下可溶的复合物。 1.Tris-Hcl (PH8.0) 提供一个缓冲环境，防止核酸被破坏 2.EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子，抑制DNase活性 3.Nacl提供一个高盐环境，使DNA充分溶解于液相中 4.CTAB裂解细胞，与核酸结合形成在高盐环境下可溶的复合物 SDS法（十二烷基硫酸钠）是一种阴离子去垢剂，高温（55-60℃）裂解细胞，蛋白变性，染色体离析，在高盐环境下或降低温度后蛋白、多糖等结合形成的复合物沉淀，释放核酸。 在氢氧化钠（PH12-12.6碱性环境）和去污剂SDS的作用下细胞破裂，细菌蛋白质和染色体DNA变性，双链DNA氢键断裂，DNA变性。加入酸性高盐缓冲液后PH恢复中性，共价闭合环状质粒DNA复性速度快于线性的染色体DNA。细菌蛋白质、破裂的细胞壁和变性的染色体DNA会相互缠绕成大型复合物被SDS包盖。之后复合物沉淀下来，质粒DNA留在上清中。 含有Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中加热至100℃使细菌裂解。通过加热破坏细菌外壁的同时有助于解开DNA链的碱基配对，并使蛋白质和染色体DNA变性。温度下降后，闭环DNA形成超螺旋分子，离心时留在上清中。 酚/氯仿抽提去除蛋白质，之后使用乙醇或异丙醇沉淀DNA 通过离心柱上的吸附膜，特异性吸附DNA 通过磁珠表面修饰（硅基质）从而特异性吸附核酸 检测原理：核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统，能吸收紫外光，最大吸收波长是260nm。 优点：操作简便、迅速 缺点：无法区分DNA、RNA、降解核酸、游离核苷酸及其他杂质，易得到浓度虚高值 常见仪器：Nanodrop、Onedrop 检测原理：采用荧光染料与特异的靶分子结合后发出荧光，仪器接收荧光值转化为浓度数据。 优点：灵敏度较高，操作简便 缺点：成本高，价格较贵；无法直接区分降解核酸 OD260：核酸的吸光度 OD280：蛋白质的吸光度 OD260/OD280 =1.7-1.9 说明纯度很好 OD260/OD280 <1.7 表明可能有蛋白质残留 OD260/OD280 >1.9 表明DNA可能存在部分降解，建议进行完整度检测或存在RNA残留 判断有无RNA、蛋白残留。1%-2%琼脂糖，上样1-3ul 判断DNA有无降解。1%-2%琼脂糖，上样1-3ul 通过胶图中DNA条带情况来判断 完整的基因组DNA条带单一且明亮，无任何拖尾或弥散。 出现不同程度的降解，胶图中可看到不同程度的拖尾或弥散。降解越严重弥散越亮，片段大小会越小。 保存形式：建议分装保存，避免DNA反复冻融，影响DNA的完整性。 保存液： 短期保存：对下游实验中离子浓度要求比较高的——PH为弱碱性的无菌水。 对离子浓度要求不高的——TE缓冲液（Tris、EDTA）。 长期保存：乙醇。 保存温度：-20℃/-80℃下可长期保存，4℃下保存时间最好不超过14天。 1.尽可能选择新鲜的样本，减少内源酶的作用 2.样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准 3.样本保存时尽可能的避免反复冻融 4.选择合适的处理方式并进行充分的样本前处理 5.前处理结束后在样本解冻前添加裂解液 6.需对样本进行充分裂解 7.正确添加所需试剂种类及使用量，样本量增加时裂解液也需成倍增加 8.对得到的DNA产物进行分装保存，避免反复冻融且保存时间不易太久 1.事先了解好提取样本中DNA含量水平 2.样本中发生DNA的降解，产量也会有所下降 3.选择合适的前处理及裂解方式（如延长裂解和沉淀DNA的时间等），并尽可能的将样本中的DNA完全释放出来 4.使用柱式试剂盒对DNA产物洗脱的时候，要尽可能的覆盖整个吸附膜；进行二次洗脱也可增加产量 5.使用沉淀法提取DNA时，可以在沉淀之前加入1/10体积的醋酸钠（PH5.2）有助于DNA沉淀 1.样本投入量不要太多，投入太多杂质也多以及后续裂解也不完全 2.样本应进行充分裂解，特别是对于一些比较复杂、含有较多杂质（多糖、多酚等）的样本需进行特殊处理 3.RNA残留：使用RNase对RNA进行处理，处理时间不宜太短（5min左右） 4.蛋白残留：使用蛋白变性剂或蛋白酶K 沉淀法分层吸取上清(DNA)时注意不要吸到下层沉淀蛋白 1.抽提液中加入防止酚类氧化的试剂：β-巯基乙醇，抗坏血酸，半胱氨酸，二硫苏糖醇等 2.加入易与酚类结合的试剂：如PVP(聚乙烯吡咯烷酮)，与酚类有较强的亲和力，可防止酚类与DNA的结合 1.高盐法：用高浓度的Na+、K+改变多糖的溶解特性，使其脱离水相进入有机相，然后用酚仿抽提去除 2.低浓度乙醇和醋酸钾溶液可以共同沉淀多糖 3.PVP/PVPP类物质对多糖的去除也有一定作用 1.质粒拷贝数 低拷贝质粒：pBR322、pACYC及其衍生载体、pSC101及其衍生载体、SuperCos、pWE15等 高拷贝质粒：pTZ、pUC、pBS、pGM-T等 低拷贝质粒适当增加样本投入量 2.菌种问题：保存时间、抗性筛选 如保存时间过久，提取质粒之前，这个质粒已经丢失，这种情况可选择活化，涂布平板培养后，重新挑选新的菌落来进行液体培养 3.选择合适的前处理及裂解方式，并尽可能的将样本中的DNA完全释放出来 4.使用柱式试剂盒对DNA产物洗脱的时候，要尽可能的覆盖整个吸附膜；进行二次洗脱也可增加产量 1.菌种收集时间 对于老旧菌种所含有的开环质粒的量明显高于属于对数生长期的菌种的。根据使用菌种生长情况找到对数生长期。一般来说对数生长期是生长速率常数最大，细胞分裂所用的代时最短的时候就是对数生长期。 2.胞内酶含量很高的宿主菌 先去除胞内酶，再提取质粒 3.变性裂解的时间不宜过长，也会对质粒完整性造成影响 4.碱裂解法加入中和液后操作应该轻柔(裂解时间不宜超过5min） 杂质有3种 1.RNA残留 使用RNase对RNA进行消化处理 2.基因组DNA残留 温和操作 在裂解或中和过程中，操作过于剧烈而导致基因组DNA的断裂 3.蛋白残留 使用蛋白变性剂或蛋白酶K进行消化 碱裂解法将中和后的体系置于4℃一段时间，使蛋白质残留沉淀下来更少 中和均匀彻底，将蛋白与试剂充分融合

太专业了很麻烦,目前技术不成熟

双螺旋模型的意义，不仅意味着探明了DNA分子的结构，更重要的是它还提示了DNA的复制机制：由于腺膘呤总是与胸腺嘧啶配对、鸟膘呤总是与胞嘧啶配对，这说明两条链的碱基顺序是彼此互补的，只要确定了其中一条链的碱基顺序，另一条链的碱基顺序也就确定了。因此，只需以其中的一条链为模版，即可合成复制出另一条链。 它的成功测定，开创了现代生物学的新时代．具体的资料请到：http://baike.baidu.com/view/217753.htm

细胞与相应的转染方法要合适～质粒最好大多是超螺旋结构～

通过生物学、物理学和化学等方法使外源裸露DNA进入受体细胞，并在受体细胞内稳定维持和表达的过程称为转化。如果外源DNA分子是病毒（噬菌体）的DNA或cDNA，那么把此过程也称为转染。（1）直接转化法：有的微生物细胞在不加任何处理的情况下就能直接摄取外源DNA，只要外源DNA与这样的细胞混合，在适宜的条件下悬浮培养，就能完成外源DNA的转化。（2）化合物诱导转化法：用二价阳离子（如Mgsuperscript2+superscript、Casuperscript2+superscript、Mnsuperscript2+superscript）处理某些受体细胞，可以使其成为感受态细胞，即处于能摄取外源DNA分子的生理状态的细胞。采用这种转化方法，1μg质粒DNA可以获得5×10superscript6superscript7×10superscript7superscript个被转化的菌落（转化子），这是实验室中常用于微生物的一种转化方法。（3）接合转化法：接合转化是通过供体细胞同受体细胞间的直接接触而传递外源DNA的方法。该转化系统一般需要三种不同类型的质粒，即接合质粒、辅助质粒和运载质粒（载体）。这三种质粒共存于同一宿主细胞，与受体细胞混合，通过宿主细胞与受体细胞的直接接触，使运载质粒进入受体细胞，并在其中能稳定维持。现在常把接合质粒和辅助质粒同处于一宿主细胞（辅助细胞），再与单独含有运载质粒的宿主细胞（供体细胞）和被转化的受体细胞混合，使运载质粒进入受体细胞，并在其中能稳定维持。也有把接合质粒和运载质粒同处于一宿主细胞，再与单独含有辅助质粒的宿主细胞和被转化的受体细胞混合进行转化的。由于整个接合转化过程涉及到3种有关的细菌菌株，因此称为三亲本接合转化法，此方法主要用于微生物细胞的基因转化。（4）激光微束穿孔转化法：此方法是利用直径很小、能量很高的激光微束（laser：microbeam）聚焦成微米级的微束照射受体细胞，利用其热损伤效应可导致细胞膜的可逆性穿孔。根据这一原理，在荧光显微镜下找出合适的细胞，然后用激光光源替代荧光光源进行照射，导致细胞膜穿孔，处于细胞周围的外源DNA分子随之进入细胞。这种方法操作简便快捷，基因转移效率高，无宿主限制，可适用于各种植物细胞、组织、器官的转化操作，并且由于激光微束直径小于细胞器，可对线粒体和叶绿体等细胞器进行基因操作，但该方法因仪器昂贵，转化率较低，故有待于进一步研究和完善。（5）超声波处理转化法：由于超声波频率高、波长短，因而在传播过程中具有定向性好、能量大、穿透力强等特征。超声波法转化（ultrasonic：transformation）法就是利用低声强脉冲超声波的生物学效应击穿细胞膜造成通道，从而使外源DNA进入细胞。此转化途径可以避免脉冲高压对细胞的损伤作用，有利于原生质体的存活。超声波处理转化法的转化率较高，并且利用超声波处理可以避免使用电穿孔转化时高电压脉冲对细胞的损伤，有利于细胞存活，目前主要用于微生物细胞的基因转化。此外，该法具有操作简便、设备便宜、不受宿主范围限制等优点。（6）脂质体介导转化法：脂质体（liposome）法是根据生物膜的结构和功能特征，用磷脂等脂类化学物质合成的双层膜囊将DNA或RNA包裹成球状，导入原生质体或细胞，以实现遗传转化的目的。脂质体法有两种具体方法：其一是脂质体融合法（liposome：fusion），先将脂质体与原生质体共培养，使脂质体与原生质体膜融合，而后通过原生质体的吞噬作用把脂质体内的外源DNA或RNA分子高效地转入到植物的原生质体内，最后通过原生质体培养技术，再生出新的植株；其二是脂质体注射法（liposome：injection），通过显微注射把含有外源遗传完整的脂质体注射到植物细胞以获得转化。（7）电击法：电击法（eletroporation）也称电穿孔法，其原理是利用高压电脉冲作用在原生质体上“电激穿孔”，形成可逆的瞬间通道，从而促进外源目的基因的摄入。随着技术的改进，并与化学法结合，目前该法的转化率可高达1.2%。（8）磷酸钙转染法：磷酸钙转染法的依据是有的动物细胞能捕获黏附在细胞表面的DNA—磷酸钙沉淀物，使DNA转入细胞。基本操作过程为：将待转染的外源DNA同CaClsubscript2subscript混合制成CaClsubscript2subscript·DNA溶液，逐滴加入到不断搅拌的Hepers—磷酸钙溶液中，形成DNA—磷酸钙共沉淀复合物，然后用吸管将沉淀复合物黏附在哺乳动物单层培养细胞的表面上，保温几小时后，用新鲜培养液洗净细胞，再用新鲜培养基继续培养，直至外源基因表达。

细菌没染色体

ANA抗核抗体；DSDNA抗双链DNA；SM粘蛋白 ；可提取性核抗原包括（ULRNP核糖核蛋白SSA抗干燥综合症ASSB抗干燥综合症B）；ASO抗链球菌溶血素“O”；RF类风湿因子常用来自身免疫性疾病诊断

大提质粒和小提质粒的基本原理是一样的，都是通过一定的方法（如加碱裂解）使在细菌内大量扩增的质粒释放出来，然后经过去蛋白去RNA等一系列步骤纯化DNA，最终将DNA提取出来。区别：1.大提用于大量菌液的提取，100ml-500ml 均可，而小提用的菌液量很少，一般1.5-5ml。2.一般试剂盒中大提比小提多了溶菌酶、异丙醇（回收沉淀核酸）、含一定量PEG的氯化物（回收质粒DNA）及乙酸铵等，其作用及目的都是有利于细菌的裂解和质粒的纯化，所以大提的产物比小提的量多很多，而且纯度很高。3.小提一般用于质粒鉴定和对纯度要求不是很高的实验，大提用于质粒的大量提取和转染等纯度要求很高的实验。

质粒DNA纯化的试验原理：溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合，进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加，作为补偿，将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后，超螺旋度大为增加， 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限，可继续结合更多溴化乙锭，直至达到饱和( 每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子) 。由于染料的结合量有所差别，线状和闭环DNA分子在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同。多年来，氯化铯－溴化乙锭梯度平衡离心已成为制备大量质粒DNA 的首选方法。然而该过程既昂贵又费时，为此发展了许多替代方法。其中主要包括利用离子交换层析、凝胶过滤层析、分级沉淀等分离质粒DNA和宿主DNA的方法。尽管这些方法大多数均被束之高阁，但其中最好的方法，也应是聚乙二醇分级沉淀法。从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多，其分离的依据可利用分子大小不同，碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好，既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA，由于DNA片段较大易于损伤断裂，因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA，且具有纯度高、步骤少、方法稳定且获得的质量DNA是超螺旋构型等特点。对于高拷贝数质粒，用少量制备法抽提质粒DNA就有足够量可用于基因操作。质粒DNA纯化的试验步骤：测量DNA溶液的体积，按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液（10mg/ml溶于水）；立即将溴化乙锭溶液（漂浮在表层）与DNA－氯化铯溶液混匀， 溶液的终密度应为1.55g/ml（溶液的折射率为1.3860）溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内（如用锡箔完全包裹的瓶子），于室温保存。室温下用Sorvall SS34头（或与其相当的转头）以8000rpm离心5min， 浮在溶液上面的水垢状浮渣是溴化乙锭和细菌蛋白所形成的复合物。用巴斯德吸管或带大号针头的一次性注射器将浮渣下的清亮红色溶液转移到离心管中。用轻石蜡油加满管的其余部分并封口。以20℃对所得的密度梯度以45 000rpm离心16h（VTi65 转头）、 以45 000rpm离心48h（Ti50转头）、以60 000rpm离心24h（Ti65转头）或者以60 000rpm离心24h（Ti70.1转头）。普通光照下，在梯中心可见两条DNA区带， 上部区带材料通常较少，由线状的细菌（染色体）DNA和带切口的环状质粒DNA组成：下部区带则由闭环质粒DNA组成。管底部深红色的沉淀是溴化乙锭RNA复合物，位于CsCl溶液和石蜡油之间的是蛋白质。Beckman Quick-Seal离心管中的CsCl－溴化乙锭梯度可容纳4mg 闭环质粒DNA而不至超负荷。如有更大量的质粒存在，将扩展为一条宽带，并与染色体DNA相重叠。这种问题只有在质粒复制达到极高水平时才会出现，只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷，可收集整个DNA区高产水平时才会出现，只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷，可收集整个DNA区带，用CsCl溶液（ρ=1.58g/ml）将体积调到15ml，在两个离心管中再度离心，使DNA达到平衡。收集DNA带。将21 号皮下注射针头插入管的顶端以使空气进入，为尽量减少污染的机会，首先用18号皮下注射针头按下述方法收集上部的区带（杂色体DNA）：用乙醇小心擦拭管外壁以除去任何油脂，然后将一块Soctch胶带贴于管外壁。穿过Soctch胶带将18号皮下注身针头（其斜面向上）插入管中，以便使针头的斜面开口恰好位于染色体DNA区带之下并与该区带相平行。将粘稠状DNA收集到一次性使用的管内，用造型粘土块封住皮下注射针头的末端并将第2根针头留于原处。 穿过Soctch 胶带插入第3根皮下注射针头（18号），将下部的质粒DNA区带收集到玻璃或塑料管中。

SSB能降低DNA的Tm。（） A.正确 B.错误 正确答案：

单链结合蛋白（SSB，single strand DNA-binding protein）：又称DNA结合蛋白，是DNA复制所必须酶。DNA解旋后，DNA分子只要碱基配对，就有结合成双链的趋向。SSB结合于螺旋酶沿复制叉方向向前推进产生的单链区，防止新形成的单链DNA重新配对形成双链DNA或被核酸酶降解的蛋白质。ssb作用时表现协同效应，保证SSB在下游区段的继续结合。它不像聚合酶那样沿着复制方向向前移动，而是不停的结合，脱离。

A、根据题干中“双螺旋解开后会产生一段单链区，DNA结合蛋白（SSB）能很快地与单链结合”，说明SSB不是一种解开DNA双螺旋的解旋酶，A错误； B、根据题干信息可知，SSB与单链的结合将利于DNA复制，B错误； C、根据题干信息可知，SSB与DNA单链既可结合也可分开，C正确； D、根据题干信息可知，SSB是一种DNA结合蛋白，故与单链的结合不遵循碱基互补配对原则，D错误． 故选：C．

2kb

博凌科为 的 Pfu DNA Polymerase（含预混Mg2＋的10×Pfu Buffer）, 超纯高保真耐热DNA聚合酶 Pfu DNA Polymerase 是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Polymerase 基因的大肠杆菌中表达并经多次过柱纯化分离出来的。由于Pfu 有3"-5"的外切酶活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错误， 而传统的Taq DNA Polymerase却不能。 其它高温DNA Polymerase 如：Vent，Deep Vent，Tli，UITma 等虽具有校正功能，但Pfu 是目前已发现的所有耐高温DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu DNA聚合酶比普通Taq DNA 聚合酶热稳定性更好，95℃1 小时仍保持90％以上活性。适用范围用于DNA 的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析（SNP）和末端补平等。活性定义1 单位(U) Pfu DNA Polymerase 活力定义为在74℃、30 分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/ 引物，将10 nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。质量控制检测SDS-PAGE 检测纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。主要技术参数有3"-5"外切核酸酶活性，无5"-3"外切核酸酶活性，DNA 扩增时延伸速度低于Taq酶，一般情况下Pfu酶的延伸速度为每分钟0.5-1 kb。Pfu 酶的热稳定性比Taq 酶好，对于GC 含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对Pfu 酶的活性无影响。其PCR产物为平端，可加A处理再与TA载体连接或使用平末端克隆载体。保存条件: -20℃保存

　　主要区别：Pfu聚合酶只用于DNA片段拼接　　DNA聚合酶是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5"端点开始复制到3"端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。　　PfuDNA聚合酶，又称Pfu聚合酶，或Pfu酶，是在嗜热的古核生物火球菌属内发现的，一类能在活体内进行DNA复制的酶。该酶含有2个蛋白亚基(P45和P50),为多聚体,分子量约为90kDa。该酶同时具有5"-3"聚合酶活性和3"-5"外切核酸酶活性,因此在聚合反应中可纠正错误掺入的碱基,忠实性极高。体外实验中，在聚合酶链反应中，使用Pfu聚合酶可以快速，高保真的扩增DNA片段。

Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3"端A突出，其PCR产物的克隆有两种方案。　　1. PCR前引物进行5"端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。　　2. 将产物3"末端加A后再与T-Vector连接。　　3. 由于Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配置反应体系，并最后加入Pfu酶。

与其它在PCR反应中使用的聚合酶相比，Pfu聚合酶有着出色的热稳定性，以及特有的“校正作用”。与TaqDNA聚合酶不同，PfuDNA聚合酶具有3"-5"外切酶的即时校正活性，可以即时的识别并切除错配核苷酸。因此，使用PfuDNA聚合酶进行PCR反应，比使用Taq聚合酶有较低的错配突变几率，保真性更高。Pfu聚合酶正逐渐取代Taq聚合酶，成为使用最广的PCR工具。商业化的Pfu聚合酶试剂，其出错率是100万到130万个碱基对出现一个错配，使用PCR每扩增1kb的DNA片段会产生2.6%的突变产物。但缺点是，Pfu聚合酶的效率较低。一般来说，在72° C扩增1kb的DNA时，每个循环需要1到2分钟。而且使用Pfu聚合酶进行PCR反应，会产生钝性末端的PCR产物。Pfu聚合酶常常用于保真性要求较高的DNA合成中。有报道说，Pfu聚合酶与Taq聚合酶联合使用，既能达到Pfu聚合酶的高保真性，又能发挥Taq聚合酶的快速聚合活性。补充：此酶催化DNA合成的忠实性比Taq酶高12倍，最适延伸温度为72~78摄氏度，PfuDNA聚合酶耐热性极好，97.5摄氏度时的半衰期大于3小时。在无dNTP时，PfuDNA聚合酶会降解模板DNA，因此反应时一定要最后加入该酶到反应的混合物中。由于该酶加入低盐缓冲液。20mmol/LTris.HCl,pH8.2,10mmol/LKCl,6mmol/L硫酸铵1.5mmol/L氯化镁0.1%Triton X-100,10ng/ulBSA退火温度比Taq酶低，约在37~45摄氏度之间，加入1%~5%甘油，或者DMSO可以提高该酶催化的PCR产量。一般耐热DNA聚合酶扩增片段长度小于5kb，是PCR技术应用受到一定限制。Boehringer公司新近推出一种Expand 长片段扩增系统，其扩增片段可长达40kb。

PfuDNA聚合酶（Pfu DNA polymerase），又称Pfu聚合酶，或Pfu酶，是在嗜热的古核生物火球菌属内发现的，一类能在活体内进行DNA复制的酶。该酶含有2个蛋白亚基(P45和P50),为多聚体,分子量约为90kDa。该酶同时具有5&#39;-3&#39;聚合酶活性和3&#39;-5&#39;外切核酸酶活性,因此在聚合反应中可纠正错误掺入的碱基,忠实性极高。体外实验中，在聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）中，使用Pfu聚合酶可以快速，高保真的扩增DNA片段。Sso7d是来源于Sulfolobus solfataricus的一种双链DNA结合蛋白,与DNA聚合酶融合后,聚合酶的进行性得到了显著的提升,而其对聚合酶催化活性和热稳定性没有影响。

伦敦和纽约：朗文，第二届

Select All-->Export Citation-->Format:里选择ENDNOTE，Export type里选择Citation & Abstract，Submit.

主要提一下CTAB法提取植物基因组DNA原理。 1 将植物组织置于2 mL离心管，加入2颗灭菌钢珠，液氮冷冻，球磨仪研碎； 2 加入800 μL CTAB提取缓冲液，65℃水浴1 h，期间每隔15 min颠倒混匀若干次； 说明：CTAB（十六烷基三甲基溴化铵，Hexadecyl trimethyl ammonium Bromide），是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜并能与核酸形成复合物，具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提，去除蛋白、 多糖、酚 类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。 Tris-HCl 提供缓冲环境，防止核酸被 破 坏。 EDTA 抑制DNase活性。 NaCl 提供高盐环境，使DNA充分溶解。 β-巯基乙醇 抗氧化剂，去除酚、糖，能与酚形成络合物，也可与糖结合。 3 加入800 μL苯酚：氯仿：异丙醇（25:24:1），上下颠倒混匀，12000 rpm离心10 min，将上层水相转移至新的2 mL离心管； 4 加入等体积氯仿：异丙醇（24:1），上下颠倒混匀，12000 rpm离心10 min，将上清转移至新的1.5 mL离心管； 说明：原理同上一步，抽提更彻底。 5 加入0.6倍体积异丙醇，-20℃沉淀30 min以上； 说明：异丙醇用来沉淀DNA，沉淀所需体积小，但难挥发。 6 12000 rpm离心10 min，弃去上清，加入75%乙醇洗涤两次； 说明：其实乙醇也可用于DNA的沉淀，其虽易挥发，但所需体积大，因此普遍使用异丙醇沉淀，然后用乙醇洗涤除去残留的异丙醇。另外，DNA不溶于乙醇，但CTAB和一些蛋白质可溶，低温乙醇还可抑制DNase活性，降低分子运动，易于DNA沉淀。 7 真空干燥仪干燥40 min左右，加水溶解DNA。

大脑残公园？

DN600含义是公称内径600mm

荧光定量pcr仪是怎样测试dna，rna的普通的基因扩增仪（PCR仪）只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多，而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果，还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病，品种分子标记筛选，甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。但是，某些需要定量的实验就必须用到实时定量PCR了。比如检测某些病原物的数量（血液乙肝病毒复制程度），特定基因的表达量（比如结合反转录做的RNA定量分析），某些基因在染色体组中拷贝数（以前往往使用southern blot技术）等等。荧光定量PRC一般不需要对扩增产物进行电泳分析，操作相对简单些，但是耗材实在是贵。简单来说，看有没有用普通PCR仪，看有多少用荧光定量PCR

作为遗传的基本单位和细胞工程蓝图的基因以及基因表达的调控相继被认识，它们都是从相应的基因中产生的、分子免疫学，使得单抗在临床上的应用受到限制，生命科学家首先想到能否在某些与人类利益密切相关的方面打破自然遗传的铁律。目前人们已获

DNFchina.exe这个文件floating point support not loaded（你的这个文件没有装入，所以不支持） 所以你如果安装器还在的话就重新安装到同一个文件夹里，然后已有的文件他会跳过，没有的他就会加进去，那样DNFchina.exe就有了

Sadm+Sdnc+Samd=Sabcd3*a/2+3*(4-a)/2+xy/2=3*46+xy/2=12xy=12y=12/xx大于等于3小于等于5

其实 我是一个比较孤独的男孩子 每天一个人等待得我ZTS疯掉向你表白呢~

小结 ： 1） 通过100例去势抵抗性前列腺癌转移灶全基因组、全甲基化组、全转录组测序，发现了新的驱动基因改变。这些改变只有通过整合的全基因组方法才能检测到。 2） 建立CMP甲基化分子分型(CpG methylator phenotype)，22%肿瘤TET2, DNMT3B, IDH1和BRAF高甲基化区域和体细胞突变与CMP分型相关。 3）良性前列腺癌、局部前列腺癌、转移性趋势抵抗性前列腺癌DNA甲基化图谱明显差异，提示甲基化作为肿瘤进展程度筛查指标的可能性。 4）前列腺癌驱动基因AR, MYC和ERG基因间区的甲基化修饰和RNA表达显著相关。 5）第一个转移性前列腺癌多组学大型综合研究，全面概述甲基化在转移性去势抵抗性前列腺癌中的重要调控作用。 虽然DNA甲基化是基因表达的关键调控因子，但转移型癌症的全基因组甲基化状况从未被检测。通过对100例抗去势前列腺转移瘤的WGBS与WGS和RNA-seq，我们发现了影响驱动基因的改变，而这些改变只能通过整合WGS的方法检测到。值得注意的是，我们观察到22%的肿瘤表现出一种新的表观基因组的亚型，这种亚型与TET2、DNMT3B、IDH1和BRAF中的高甲基化和体细胞突变有关。我们还鉴定了部分基因间区，其甲基化与致癌驱动基因如AR、MYC和ERG的表达量相关。最后，我们表明在癌症发展过程中差异甲基化优先出现在体细胞突变热点和潜在的调控区域。本研究是在转移性肿瘤中，整合了全基因组、全基因甲基和全转录组测序的进行分析，全面概述了甲基化在转移性抗去势前列腺癌中的重要调控作用。 胞嘧啶残基DNA甲基化是一种普遍存在的表观基因组调控机制。DNA甲基转移酶在鸟嘌呤(CpG二核苷酸)附近的胞嘧啶核苷酸的5碳上加一个甲基，生成5mC核苷酸。除了富含CpG的低甲基化区域(HMRs)外，大多数CpG二核苷酸都被甲基化，这些区域被称为islands, shores (±2u2009kb around islands) and shelves (± 2u2009kb around shores4). 这些区域经常位于基因调控位点，如启动子或增强子。异常的甲基化与肿瘤发生有关，并且肿瘤和良性组织之间的甲基化的差异已经在许多肿瘤类型中被报道。尽管肿瘤中CpG岛的高甲基化也有所报道，但肿瘤细胞在CpG岛的甲基化经常比正常细胞少。【本文研究关于肿瘤中低甲基化区域与癌症致癌基因影响】 每个样本的HMR总数从24,388到85,474。样本间的变异多发生在启动子和CpG岛、shores ， shelves区间外，主要发生在基因body和调控区域，如转录因子结合位点，增强子区域，抑制子区域。HMR越多的肿瘤，基因组拷贝数改变频率明显更高。 DNA甲基化主要发生在基因启动子区域的CpG岛。然而，在97,747 个 recurrent HMR (rHMRs)中，有74%位于CpGislands, shores，shelves 之外。我们推断recurrent 基因间的HMRs可能与调控位点有关。事实上，88% recurrent的HMR位点与假定的调节区域重叠。对rHMRs进行无监督的聚类，确定了具有独特模式的甲基化肿瘤亚群。其中有一个cluster包括以前被诊断为治疗诱发的小细胞神经内分泌癌的肿瘤(t-SCNC),此癌症特征是AR信号减少，神经内分泌标记蛋白表达升高和明显的甲基化特征。我们还鉴定了一种新的mCRPC亚型(图1b)，在rHMRs中甲基化水平显著高于其他所有簇和较少的HMR. 这些肿瘤在CpGislands, shores，shelves上均具有较少的HMR，被认为 CpG methylator phenotype (CMP)。通过聚类重采样表明聚类结果稳定性。CMP肿瘤很少有ETS家族相关的基因融合。CMP亚型与活检的解剖部位无显著相关性。一个包含所有复发低甲基化位点、良性前列腺和原发性前列腺肿瘤样本的t分布随机邻居包埋图显示，通过t-SNE可视化显示 CMP肿瘤、良性前列腺肿瘤和t-SCNC肿瘤形成单独的簇。 一些CMP肿瘤在TET2、IDH1和BRAF中存在互斥突变。与非CMP肿瘤相比，CMP肿瘤中TET2、IDH1、BRAF和DNMT3B突变富集<br />与先前在肿瘤中观察到的高甲基化表型一致，并不是所有的CMP肿瘤都有一个某个突变的基因，其可以影响甲基化过程。除DNMT3B和TET2外，DNMT和TET家族基因均未发现体细胞突变。在CMP或非CMP组中，肿瘤纯度与明显的甲基化模式无关。 很大区域的表观遗传激活和抑制是指在PCa中，由于表观遗传的一致性变化，如组蛋白修饰或DNA甲基化，导致含有多个基因的基因组区域同时被激活或抑制的现象。我们确定了14个候选的远程相互作用，其中两个(7p15.2和16q13)与之前确定的远程表观遗传沉默区域重叠。 部分甲基化区域(PMDs)是甲基化不完全缺失的基因组区域。PMD频率与HMR频率呈中度相关。然而，在良性前列腺、原发性前列腺癌和mCRPC样本中，含有PMDs的基因组比例(21% - 61%)没有显著差异。但与良性前列腺组织相比，原发性前列腺癌和mCRPC中PMDs的甲基化水平较低。在mCRPC中，基因组PMD比例与肿瘤纯度(P = 0.68)、总突变数(P = 0.30)或拷贝数改变百分比没有显著相关性。和乳腺癌中一样，发现PMD区域比基因组非PMD 区域，有更高的突变风险。 接下来，我们确定了DNA甲基化谷(DMVs)，即与激活组蛋白标记H3K4me3或抑制组蛋白标记H3K27me3相关的，区间很宽的低甲基化区域。mCRPC样品中DMVs的数量从几百个到超过20,000个不等。H3K27me3相关的DMVs甲基化倾向于动态变化，多硫复合体在维持DMVs的抑制状态发挥重要作用。DMV频率较低的肿瘤中，DMVs与H3K4me3更加相关，但存在很多DMVs的肿瘤中，H3K4me3和H3K27me3信号的比例几乎相等。 研究表明，高表达基因的通常启动子处于低甲基化，基因body处于高甲基化。启动子区域甲基化与基因表达负相关，而基因body甲基化呈现正相关。我们鉴定了与10 kb以内与基因表达相关的rHMRs，并将这些表达相关的低甲基化区域HMRs命名为eHMRs。负相关的eHMRs(70%)主要位于转录起始位点(TSS)；最强烈的正相关(总数的30%)在基因体的3端，这和之前研究类似。为了研究远端调控元件，我们拓宽了EHMR搜索范围（1Mb）。通过在原发性前列腺肿瘤中H3K27ac峰来确定候选增强子。 在FDR设定为0.05下，10412个基因至少与一个增强子关联，11928个基因至少与一个EHMR关联。研究表明距离TSS距离越近，甲基化与基因表达关系越紧密。 我们发现，与前列腺良性样本相比，mCRPC中雄激素关键应答基因，包括AR、KLK3(编码前列腺特异性抗原)、NKX3-1、FOLH1(编码前列腺特异性膜抗原)、SCHLAP1和PIK3CA，均表现出启动子低甲基化。与前列腺良性样本相比，我们在mCRPC肿瘤中未观察到肿瘤抑制子TP53或RB1的启动子高甲基化。同时，许多先前报道的高甲基化前列腺癌基因(例如，GSTP1)，在mCRPC中也是差异甲基化区域。 许多基因具有PCa特异性表达的特征，但是基因组序列没有改变。为了检测甲基化影响pca特异性基因疾病特异性表达的模型，我们进行了无偏倚分析，比较了所有基因的eHMR相关强度及其表达变异性。与其他基因相比，PCa 特异性表达的基因与甲基化有更强的关联。 DNA甲基化可能和体细胞突变协同改变基因表达量。51,708个基因中的15,014个基因表达与局部DNA拷贝数改变、突变或结构变异显著相关(29%)，与10,118个基因的局部甲基化显著相关(19.5%)。在10118个基因的表达与甲基化相关的基因中，4735个基因与甲基化和突变同时相关，5383个基因仅与甲基化相关。甲基化可以提升基因表达预测的模型。部分AR相关的基因，表现出不受DNA改变影响，而受到甲基化影响，比如KLK3 ，NKX3-1。这一发现支持了甲基化在mCRPC中雄激素通路激活中的作用。 我们和其他人之前已经确定了一个远端AR增强子区域，其中DNA拷贝数扩增与AR表达升高相关。我们在AR附近发现了多个eHMRs，包括AR启动子、先前鉴定的AR增强子和AR的上下游位点。尽管AR promoter 在其他组织中都处于低甲基化。但是鉴定出来的eHMR 只是在mCRPC 中低甲基化，在原发性PCa,和良性肿瘤中并未发现。7个eHMR中的5个与H3K27ac或HOXB13，FOXA1，AR或ERG的结合位点共定位。此外，AR和ERG ChIA PET数据表明，许多基因座之间存在长程染色质相互作用，这支持了这些基因座之间的物理相互作用的可能性。在基于eHMR数量预测AR表达的线性模型中，AR表达与低甲基化eHMR基因座数量呈正相关。 在81％的mCRPC样品中会出现AR gene body或上游增强子的拷贝数扩增。扩增的eHMR基因座数AR表达呈正相关。这些数据与一个模型相一致，在这个模型中，雄激素剥夺治疗的选择性压力有利于多个增强因子的大量扩增，从而驱动mCRPC中的AR表达。在非t- scnc， mCRPC样本中，低甲基化区域是局部存在的，eHMR区域低甲基化和拷贝数关系不密切。 大约一半的前列腺癌存在由ERG编码的致癌转录因子过表达定义。在PCa中，ERG表达量是可以忽略的，除非ERG启动子被融合基因激活。ERG主要的融合基因是ar调控的基因TMPRSS2，融合使TMPRSS2启动子接近ERG基因体，将ERG转化为ar驱动的基因。融合使TMPRSS2启动子接近ERG基因体，将ERG转化为ar驱动的基因。在TMPRSS2 ERG融合阳性肿瘤中，ERG表达水平差异很大，从AR表达水平和突变状态预测ERG表达的线性模型拟合不理想。我们推测，当融合存在时，TMPRSS2启动子或上游区域的甲基化可能影响ERG的表达。我们在TMPRSS2上游识别了与HOXB13、FOXA1、AR或ERG的TFBS共定位的rHMRs。这些位点的低甲基化频率在融合阳性和融合阴性样本中是相似的。然而，仅在融合阳性样本中，这些位点的甲基化与ERG表达呈负相关，这与TFBS甲基化调节下游融合基因表达的模型一致。只有在融合阳性肿瘤中，TMPRSS2上游所有rHMRs的甲基化显著提高了ERG表达量的预测。这些数据表明，TMPRSS2上游调控区域的甲基化导致了该亚型产生。 在38%的mCRPC样本中癌基因MYC扩增。MYC基因拷贝数扩增与MYC表达呈中度相关。据报道，基因PVT1下游的远端增强子通过物理DNA DNA相互作用调节MYC。VCaP ChIA PET数据显示PVT1与MYC之间存在DNA相互作用。我们在MYC启动子和PVT1中观察到与MYC表达相关的rHMRs。这些rHMR改进了预测MYC表达的模型的拟合度，该模型优于仅使用MYC拷贝数的模型。增强子甲基化已被证明调节增强剂的活性，这为这一观察提供了一个合理的解释。总之，这些发现支持了甲基化可能影响关键PCa驱动的活动的模型。 在比较良性前列腺癌和原发性前列腺癌，以及原发性前列腺癌和mCRPC时，我们使用了公开的WGBS数据和局部PCa样本11来识别差异甲基化区域(DMRs)。原发性前列腺癌的甲基化程度明显低于良性前列腺癌。此外，mCRPC样品的甲基化程度明显低于原发性PCa。在良性PCa和原发性PCa的DMRs中，55%与原发性PCa和mCRPC的DMRs重叠。 癌症中的整体低甲基化可能导致基因组不稳定。当比较mCRPC 差异甲基化位点，发现HMR区域有很高的体细胞突变率。DMR内部的突变率比外部高58.5%(每Mb有6.77和4.28个突变)，这表明基因组的某些区域更频繁地受到突变和甲基化的影响。最后，我们测试了差异甲基化是否在整个基因组的调控区域优先发生。当我们检查推定的调控区域（以AR，ERG，FOXA1，HOXB13和H3K27ac ChIP-seq标记）差异甲基化时，与良性前列腺组织相比，HMR更容易在调控区域进行富集。 在这里，我们对100个肿瘤样本和10个配对的良性癌旁样本，并对这些样本进行了较深的WGS和RNA-seq，对含WGBS的mCRPC的甲基化进行了全球分析。这些数据确定了一个新的mCRPC的表观遗传亚型，AR的新的基因间调控区域，以及在AR、ERG、MYC和其他重要的PCa驱动因子调控中体细胞和表观改变之间的相互作用。我们还证明了整体甲基化改变可以用来区分 良性前列腺癌、原发性前列腺癌和mCRPC。我们发现体细胞突变和假定的调控区域经常位于差异低甲基化区域。 虽然PCa的基因组和转录组亚型已经被报道，但我们确定了一个新的mCRPC的表观遗传CMP亚型，其特征是在CpGislands, shores，shelves内外都存在高甲基化。我们认为这种现象类似于在其他肿瘤类型中描述的CpG岛甲基化表型(CIMP)。mCRPC CMP亚型富集了TET2、BRAF和IDH1的突变，这些突变在其他癌症类型中与CIMP亚型相关。在癌症基因组图谱中，IDH1突变与CpG岛高甲基化相关。目前的研究不能确定我们观察到的任何突变是否会驱动甲基化变化。先前对TET2和DNMT3B突变的实验研究表明，它们的影响可能因组织类型和基因组区域而不同，需要使用表型研究来阐明CMP表型的机制。mCRPC CMP亚型具有潜在的治疗意义，因为甲基化抑制剂如5-azacytidine和5-aza-2-脱氧胞苷是FDA批准的抗肿瘤药物。体外数据和临床数据表明，高甲基化肿瘤可能受益于这些治疗. 我们的结果强调了癌症相关的低甲基化在mCRPC中致癌驱动基因过表达中的重要性。AR是前列腺癌的主要驱动因子和治疗靶点。近年来的研究发现了AR基因body的扩增和AR上游的增强子. 我们发现，在这些假定的AR增强子区域中，基因间eHMRs与mCRPC中的AR表达量相关。许多假定的增强子区域与转录因子结合位点重叠。这些增强子距离AR基因较远，但该区域呈现复杂的DNA loop，可能使这些位点接近AR启动子。MYC PVT1相互作用是远程顺式增强子和甲基化相互作用的另一个例子.已知在肿瘤中,远端增强子可激活癌基因，这些数据强调了在mCRPC发病机制中,甲基化、转录因子、DNA改变和基因组三维结构之间的复杂相互作用。 因为转移性Pca(mCRPC)和原发性PCa的WGBS样本少,甲基化差异研究受到了限制，未来的工作将整合大量的原发性PCa样本中的WGS、WGBS和RNA-seq数据，这将有助于更稳健地分析晚期疾病期间DNA甲基化变化的方式，并更好地捕获原发性PCa的分子异质性。对其他mCRPC队列的数据整合，将使我们了解稀有的突变对甲基化的影响。

这种情况提示有肝脏损害，考虑有肝脏的纤维化，这是慢性乙型肝炎导致的结果。建议你做肝脏穿刺活检，做组织学检查，如果组织学检查显示肝脏有二级以上炎症，就需要进行抗病毒治疗。如果你不做检查的话，也应该进行抗病毒治疗。

歌曲名:It Came Upon A Midnight Clear_The First Noel歌手:Babyface专辑:Christmas With Babyface-EPICwritten by R.S. Willis (1850) / Traditional (1833)performed by BabyfaceIt came upon the midnight clearThat glorious song of oldFrom angels playing near the earthTo touch their harps of goldPeace on the Earth could will two menFrom Heaven"s all-gracious KingThe world in solemn stillness layTo hear the angels singAnd I hear them singingSing, I do hear them singingThe first noel the angel did sayWas to certain poor shepherds in fields as they layIn fields where they lay, they keeping their sheepOn a cold winter"s night that was so deepNoel, noel, noel, noelBorn is the King of IsraelNoel, noel, noel, noelBorn is the King of IsraelThey looked up and saw a starShining in the east beyond them farNoel, noel, noel, noelBorn is the KingBorn is the KingBorn is the King of Israel我爱ZYK~~http://music.baidu.com/song/1160030

这样吧，你点下我回答的签名处进入我们平台后点击在线咨询，有专业的工程师为您解答

由于ABCD是正方形，且AE=BF=CM=DM,所以边AN=BE=CF=DM,所以三角形AEM、BFE、CMF、DNM是全等直角三角形；可推出EF=FM=MN=NE,角EFM=FMN=MNE=NEF=90°。所以四边形EFMN是正方形。

私我

good night

这是一个英文问候语的缩写：Good night,意思是：晚安。因为发音一样，所以写成了一个单词：gudnite[ɡud nait]gud=good[ɡud]nite=night[nait],发音是一样的。相关拓展：类似的情况还有，简单的比如u=you,r=are，r u ok?=are you ok?多出现在非正式的聊天信息中。

==晚安~nite是night的简写~论坛常用~

Sanger法测序是酶法测序

DNA片段应选择哪一种测序方式测序有DNA测序和RNA测序，之前比较早的测序是以芯片为基础，现在常用的是二代测序，全基因组的测序以及RNA-seq，目前比较高级的还有单细胞测序。随之而来的是第三代测序技术， 第三代测序技术则是基于纳米孔的单分子读取技术,这种方法读取数据更快、有望大大降低测序成本。DNA测序的测序原理：DNA测序是指分析特定DNA片段的碱基序列，也就是腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）与鸟嘌呤的（G）排列方式。快速的DNA测序方法的出现极大地推动了生物学和医学的研究和发现。其原理是化学试剂处理末段DNA片段，造成碱基的特异性切割，产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物，经凝胶电泳分离。化学切割反应：包括碱基的修饰修饰的碱基从其糖环上转移出去在失去碱基的糖环处DNA断裂。另一个原理是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。

DNA测序的测序原理： DNA测序是指分析特定DNA片段的碱基序列，也就是腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）与鸟嘌呤的（G）排列方式。快速的DNA测序方法的出现极大地推动了生物学和医学的研究和发现。 其原理是化学试剂处理末段DNA片段，造成碱基的特异性切割，产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物，经凝胶电泳分离。化学切割反应：包括碱基的修饰修饰的碱基从其糖环上转移出去在失去碱基的糖环处DNA断裂。 另一个原理是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。

给个比较容易理解的也比较专业的网站开开眼界吧

DNA测序（DNAsequencing，或译DNA定序）是指分析特定DNA片段的碱基序列，也就是腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）与鸟嘌呤的（G）排列方式。RNA测序则通常将RNA提取后，反转录为DNA后使用DNA测序的方法进行测序。目前应用最广泛的是由FrederickSanger发明的Sanger双脱氧链终止法（ChainTerminationMethod）。新的测序方法，例如454生物科学的方法和焦磷酸测序法。Sanger测序法Sanger（桑格）双脱氧链终止法是FrederickSanger于1975年发明的。测序过程需要先做一个聚合酶连锁反应（PCR）。PCR过程中，双脱氧核糖核酸可能随机的被加入到正在合成中的DNA片段里。由于双脱氧核糖核酸多脱了一个氧原子，一旦它被加入到DNA链上，这个DNA链就不能继续增加长度。最终的结果是获得所有可能获得的、不同长度的DNA片段。目前最普遍最先进的方法，是将双脱氧核糖核酸进行不同荧光标记。将PCR反应获得的总DNA通过毛细管电泳分离，跑到最末端的DNA就可以在激光的作用下发出荧光。由于ddATP,ddGTP,ddCTP,ddTTP（4种双脱氧核糖核酸）荧光标记不同，计算机可以自动根据颜色判断该位置上碱基究竟是A，T，G，C中的哪一个[2]。454生物科学和焦磷酸测序法454测序法由454生物科学发明，是一个类似焦磷酸测序法的新方法。2003年向GenBank提交了一个腺病毒全序列[3]，使得他们的技术成为Sanger测序法后第一个被用来测生物基因组全序列的新方法。454使用类似于焦磷酸测序的方法，有着相当高的读取速度，大约为5小时可以测两千万碱基对[4]。

这个要讲的话比较多，你可以找一本基因工程原理的书看一下

目前普遍应用还是Sanger的方法。下代基因测序主要用于对已知序列的再测，或者较短序列的测序。下代测序主要的三个平台是454，Illumina，SOLiD。具体技术去搜百度知道~~~第三代测序虽然现在网上出来了，但是可应用读还需要时间考量。

这位是搞分子生物学的吗?DNA测序的方法有很多种. 目前最常见的是双脱氧终止法了. 在测序用的缓冲液中含有四种dNTP及聚合酶. 测序时分成四个反应, 每个反应除上述成分外分别加入2,3-双脱氧的A, C, G, T核苷三磷酸(称为ddATP, ddCTP, ddGTP, ddTTP), 然后进行聚合反应. 在第一个反应物中, ddATP会随机地代替dATP参加反应一旦ddATP加入了新合成的DNA链, 由于其3位的羟基变成了氢, 所以不能继续延伸. 所以第一个反应中所产生的DNA链都是到A就终止了; 同理第二个反应产生的都是以C结尾的; 第三个反应的都以G结尾, 第四个反应的都以T结尾, 电泳后就可以读出序列了. 也许这样说你不一定明白. 举一个例子, 假如有一个DNA, 互补序列是GATCCGAT, 我们试着做一下: 在第一个反应中由于含有dNTP+ddATP, 所以遇到G, T, C三个碱基时没什么问题, 但遇到A时, 掺入的可能是dATP或ddATP, 比如已合成到G, 下一个如果参与反应的是ddATP则终止, 产生一个仅有2个核苷酸的序列: GA, 否则继续延伸, 可以产生序列GATCCG, 又到了下一个A了. 同样有两种情况, 如果是ddATP掺入, 则产生的序列是GATCCGA, 延伸终止, 否则可以继续延伸, 产生GATCCGAT.所以在第一个反应系统中产生的都是以A结尾的片段: GA, GATCCGA,同理在第二个反应中产生的都是以C结尾的片段: GATC, GATCC,在第三个反应中产生的都是以G结尾的片段: G, GATCCG在第四个反应中产生的都是以T结尾的片段: GAT, GATCCGAT, 电泳时按分子量大小排列, A反应的片段长度为2, 7; C反应的为4, 5; G反应的为1, 6; T反应的为3, 8, 四个反应的产物分别电泳, 结果为 8 7 6 5 4 3 2 1A | |C | |G | |T | |我们可以从右向左读, 为GATCCGAT, 至此, 测序完成(上面这个图在百度知道中显示不正常, 因为百度知道的网页用的是比例字体, 你如果想看它, 拷贝到记事本中, 用等宽的字体来看).不知你有什么不清楚的没有? 我是搞分子生物学的, 欢迎讨论

第一代DNA测序：双脱氧终止法即sanger测序法。Sanger法是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，并且在每个碱基后面进行荧光标记，产生以A、T、C、G结束的四组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从而获得可见的DNA碱基序列。第二代DNA测序：边合成边测序在Sanger等测序方法的基础上，通过技术创新，用不同颜色的荧光标记四种不同的dNTP，当DNA聚合酶合成互补链时，每添加一种dNTP就会释放出不同的荧光，根据捕捉的荧光信号并经过特定的计算机软件处理，从而获得待测DNA的序列信息。第三代DNA测序：单分子测序用一种聚合酶将DNA的复制限制在一个微小的间隙中，给各种碱基加上荧光示踪标记，当碱基合成DNA链时，这些荧光标记就会发出不同颜色的闪光，根据闪光颜色就可识别出不同的碱基。要具体理解测序原理，请自己查询更详细的资料，以上为大体框架，sanger测序法是最老的测序法，沿用了几十年，到目前依然没有过时。二代测序是目前市面上最流行的测序，与一代相比，具有高通量、廉价的特点。三代测序目前仍处于试验阶段，将比二代测序更高通量，更廉价。

PCR循环测序法是将PCR扩增和核酸序列分析技术相结合,从而形成的一种测定核苷酸序列的研究方法,也称作线性扩增测序.该方法采用PCR仪加热使DNA模板变性,在TaqDNA聚合酶作用下,以温度循环模式在模板上进行多轮的双脱氧核苷酸测序反应,线性扩增标记的DNA分子.PCR循环测序法与以往的测序方法相比,其优点在于：大大减少所需的模板量；能提高测序反应产生的信号,降低了操作的复杂性,且聚合酶的用量减少；可在小量制备的模板上进行筛选反应；高温下进行的测序反应使DNA聚合酶催化的聚合反应能够通过模板二级结构的区域；双链闭环DNA可以直接作为反应模板应用,不用作预先碱变性处理.由于PCR循环测序法能够简单、快速地检测特定序列,因此, PCR循环测序法在核酸序列分析研究中受到广泛的重视.

superb 谐音 苏 pe 博kindness 谐音 刊德尼斯lyrical 谐音 哩蕊括尔

原理是阻抗适配网络，作用是减少外界干扰。emidn就是电源滤波器，电源滤波器的工作原理是阻抗适配网络：电源滤波器输入、输出侧与电源和负载侧的阻抗适配越大，对电磁干扰的衰减就越有效；电源滤波器的作用是滤除外界电网的高频脉冲对电源的干扰，同时也起到减少开关电源本身对外界的电磁干扰。电源滤波器的应用场景：1、机电设备：机械手、伺服控设备、光纤激光切割机、智能控制器、雕刻机、LED贴片机等。2、家用电器设备：变频空调、变频冰箱、变频洗衣机、电磁加热器、全自动扫地机等。

DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解而使杂质沉淀或者相反以达到分离目的DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小在DNA溶解度最低时DNA从溶液中析出而其他杂质还留在溶液中达到粗提取的目的

可以的 去试试吧

简单点说，VPN可以实现在虚拟隧道的技术实现专线的功能，又具本地访问公网的特点！ 也就是说你访问服务端网络走的是虚拟专线LAN，加密安全，访问其他公网仍旧使用本地路由器IP出去访问！VPDN也是VPN的一种，它的特点就是专线接入，使其完全属于服务端网络之中！访问其他公网时候是以服务端网络为出口出去的！ 这个就是其明显的特点，国税系统就是典型的VPDN网络，它完全是私有的，拨入后无法使用外网！

1、含义上的区别VPN，是虚拟专用网络，属于远程访问技术，利用公用网络架设专用网络。VPDN，是虚拟专有拨号网络业务，是在中国宽带互联网基础上开放的基于拨号方式的虚拟专有网络业务。2、工作原理上的区别VPN工作原理是根据规则确定对数据加密还是直接传输；对需要加密数据，进行加密并附上数据签名，加上新的数据报头重新封装；将封装后的数据包通过隧道在公共网络上传输；数据包到达目的VPN设备后，将其解封，核对数字签名无误后，对数据包解密。VPDN工作原理是向用户提供采用PSTN、ISDN、XDSL、电缆或无线以拨号方式接入中国宽带互联网，采用专用的网络加密和通信协议，可以使企业在公共网络上构建一条虚拟的、不受外界干扰的专用通道，从而安全访问企业网内部数据资源的业务。3、应用上的区别VPN在企业网络中有广泛应用。在公用网络上建立专用网络，进行加密通讯。VPDN应用于企业、政府部门等远程接入和移动办公；企业利用中国电信网络组建最大范围的企业外联网；互联网接入服务商（ISP）、应用服务提供商（ASP）利用公共平台开展增值业务。参考资料来源：百度百科-VPN参考资料来源：百度百科-VPDN

通过公网建立专用连接 ，访问专用服务器，需要公网运营商提供支持。

高音R2C低音F6。

因纽特人的海洋女神SEDNA（赛德娜）的传说这个意思，虽说我也没读过这篇课文地说，呵呵！

1寸

DN10英寸换算是3/8寸，外径A系列径是17.1；B系列是15。简介：管件是将管子连接成管路的零件。根据连接方法可分为承插式管件、螺纹管件、法兰管件和焊接管件四类。多用与管子相同的材料制成。有弯头(肘管)、法兰、三通管、四通管(十字头)和异径管(大小头)等。弯头用于管道转弯的地方;法兰用于使管子与管子相互连接的零件，连接于管端，三通管用于三根管子汇集的地方;四通管用于四根管子汇集的地方;异径管用于不同管径的两根管子相连接的地方。基本定义：管件英文(Pipe fitting)是管道系统中起连接、控制、变向、分流、密封、支撑等作用的零部件的统称。钢制管件均为承压管件。根据加工工艺不同，分为四大类，即对焊类管件(分有焊缝和无焊缝两种)、承插焊和螺纹管件、法兰管件。建筑行业发展前景：中国已经是世界上最大的建筑材料生产国和消费国。主要建材产品水泥、平板玻璃、建筑卫生陶瓷、石材和墙体材料等产量多年居世界第一位。同时，建材产品质量不断提高，能源和原材料消耗逐年下降，各种新型建材不断涌现，建材产品不断升级换代，沧州管道装备制造业基础雄厚。现有生产企业3200多家，其中规模以上(销售收入500万元以上)企业222家，从业人员12.4万人。主要产品有各种特钢、不锈钢、碳钢等多种口径的无缝钢管、低中高压锅炉管、石油钻探管等钢管;各种三通、四通、阀门、异径管等弯头管件;各种不锈钢法兰、锻造法兰;各种管架、仪表、石油防井喷器等管道配件;各种聚乙烯管、聚丙烯管等塑料管道，共16大类370多个品种3500多种规格。制造工艺主要采用热轧直缝焊、螺旋双面埋弧焊、锻打、锻压、中频推制、冷成型、热挤压等，管道最大加工直径2020毫米。产品广泛应用于市政、石油化工、西气东输、船舶及核电等工程领域，年设计加工能力2500万吨。2010年规模以上企业实现工业增加值130亿元，同比增长31.7%，占全部规模以上企业增加值的16.1%。沧州管道装备制造业正向"三上"(上规模、上水平、上装备)和"三高"(高端、高压、高附加值)的目标迈进，力促管道装备制造业能力达到3000万吨。沧州将成为国内外知名的"管道装备制造与研发基地"和"管道装备之都"。"十一五"规划基建投资已棋至中盘，公路、铁路等基础设施建设投资的爆发增长和普通民用建筑投资的平稳增长，使建筑行业正处在景气上行阶段。同时，在建设节能社会和国家加强自主创新能力的背景下，节能和技术创新主题将是行业的发展热点。

3/8寸，dn10的管件是3/8寸，详细参见GB/T 28708-2012表1。

DN10英寸换算是3/8寸，外径A系列径是17.1；B系列是15。简介：管件是将管子连接成管路的零件。根据连接方法可分为承插式管件、螺纹管件、法兰管件和焊接管件四类。多用与管子相同的材料制成。有弯头(肘管)、法兰、三通管、四通管(十字头)和异径管(大小头)等。弯头用于管道转弯的地方;法兰用于使管子与管子相互连接的零件，连接于管端，三通管用于三根管子汇集的地方;四通管用于四根管子汇集的地方;异径管用于不同管径的两根管子相连接的地方。基本定义：管件英文(Pipe fitting)是管道系统中起连接、控制、变向、分流、密封、支撑等作用的零部件的统称。钢制管件均为承压管件。根据加工工艺不同，分为四大类，即对焊类管件(分有焊缝和无焊缝两种)、承插焊和螺纹管件、法兰管件。建筑行业发展前景：中国已经是世界上最大的建筑材料生产国和消费国。主要建材产品水泥、平板玻璃、建筑卫生陶瓷、石材和墙体材料等产量多年居世界第一位。同时，建材产品质量不断提高，能源和原材料消耗逐年下降，各种新型建材不断涌现，建材产品不断升级换代，沧州管道装备制造业基础雄厚。现有生产企业3200多家，其中规模以上(销售收入500万元以上)企业222家，从业人员12.4万人。主要产品有各种特钢、不锈钢、碳钢等多种口径的无缝钢管、低中高压锅炉管、石油钻探管等钢管;各种三通、四通、阀门、异径管等弯头管件;各种不锈钢法兰、锻造法兰;各种管架、仪表、石油防井喷器等管道配件;各种聚乙烯管、聚丙烯管等塑料管道，共16大类370多个品种3500多种规格。制造工艺主要采用热轧直缝焊、螺旋双面埋弧焊、锻打、锻压、中频推制、冷成型、热挤压等，管道最大加工直径2020毫米。产品广泛应用于市政、石油化工、西气东输、船舶及核电等工程领域，年设计加工能力2500万吨。2010年规模以上企业实现工业增加值130亿元，同比增长31.7%，占全部规模以上企业增加值的16.1%。沧州管道装备制造业正向"三上"(上规模、上水平、上装备)和"三高"(高端、高压、高附加值)的目标迈进，力促管道装备制造业能力达到3000万吨。沧州将成为国内外知名的"管道装备制造与研发基地"和"管道装备之都"。"十一五"规划基建投资已棋至中盘，公路、铁路等基础设施建设投资的爆发增长和普通民用建筑投资的平稳增长，使建筑行业正处在景气上行阶段。同时，在建设节能社会和国家加强自主创新能力的背景下，节能和技术创新主题将是行业的发展热点。

DN10英寸换算是3/8寸，外径A系列径是17.1；B系列是15。简介：管件是将管子连接成管路的零件。根据连接方法可分为承插式管件、螺纹管件、法兰管件和焊接管件四类。多用与管子相同的材料制成。有弯头(肘管)、法兰、三通管、四通管(十字头)和异径管(大小头)等。弯头用于管道转弯的地方;法兰用于使管子与管子相互连接的零件，连接于管端，三通管用于三根管子汇集的地方;四通管用于四根管子汇集的地方;异径管用于不同管径的两根管子相连接的地方。基本定义：管件英文(Pipe fitting)是管道系统中起连接、控制、变向、分流、密封、支撑等作用的零部件的统称。钢制管件均为承压管件。根据加工工艺不同，分为四大类，即对焊类管件(分有焊缝和无焊缝两种)、承插焊和螺纹管件、法兰管件。建筑行业发展前景：中国已经是世界上最大的建筑材料生产国和消费国。主要建材产品水泥、平板玻璃、建筑卫生陶瓷、石材和墙体材料等产量多年居世界第一位。同时，建材产品质量不断提高，能源和原材料消耗逐年下降，各种新型建材不断涌现，建材产品不断升级换代，沧州管道装备制造业基础雄厚。现有生产企业3200多家，其中规模以上(销售收入500万元以上)企业222家，从业人员12.4万人。主要产品有各种特钢、不锈钢、碳钢等多种口径的无缝钢管、低中高压锅炉管、石油钻探管等钢管;各种三通、四通、阀门、异径管等弯头管件;各种不锈钢法兰、锻造法兰;各种管架、仪表、石油防井喷器等管道配件;各种聚乙烯管、聚丙烯管等塑料管道，共16大类370多个品种3500多种规格。制造工艺主要采用热轧直缝焊、螺旋双面埋弧焊、锻打、锻压、中频推制、冷成型、热挤压等，管道最大加工直径2020毫米。产品广泛应用于市政、石油化工、西气东输、船舶及核电等工程领域，年设计加工能力2500万吨。2010年规模以上企业实现工业增加值130亿元，同比增长31.7%，占全部规模以上企业增加值的16.1%。沧州管道装备制造业正向"三上"(上规模、上水平、上装备)和"三高"(高端、高压、高附加值)的目标迈进，力促管道装备制造业能力达到3000万吨。沧州将成为国内外知名的"管道装备制造与研发基地"和"管道装备之都"。"十一五"规划基建投资已棋至中盘，公路、铁路等基础设施建设投资的爆发增长和普通民用建筑投资的平稳增长，使建筑行业正处在景气上行阶段。同时，在建设节能社会和国家加强自主创新能力的背景下，节能和技术创新主题将是行业的发展热点。

DN10英寸换算是3/8寸，外径A系列径是17.1；B系列是15。简介：管件是将管子连接成管路的零件。根据连接方法可分为承插式管件、螺纹管件、法兰管件和焊接管件四类。多用与管子相同的材料制成。有弯头(肘管)、法兰、三通管、四通管(十字头)和异径管(大小头)等。弯头用于管道转弯的地方;法兰用于使管子与管子相互连接的零件，连接于管端，三通管用于三根管子汇集的地方;四通管用于四根管子汇集的地方;异径管用于不同管径的两根管子相连接的地方。基本定义：管件英文(Pipe fitting)是管道系统中起连接、控制、变向、分流、密封、支撑等作用的零部件的统称。钢制管件均为承压管件。根据加工工艺不同，分为四大类，即对焊类管件(分有焊缝和无焊缝两种)、承插焊和螺纹管件、法兰管件。建筑行业发展前景：中国已经是世界上最大的建筑材料生产国和消费国。主要建材产品水泥、平板玻璃、建筑卫生陶瓷、石材和墙体材料等产量多年居世界第一位。同时，建材产品质量不断提高，能源和原材料消耗逐年下降，各种新型建材不断涌现，建材产品不断升级换代，沧州管道装备制造业基础雄厚。现有生产企业3200多家，其中规模以上(销售收入500万元以上)企业222家，从业人员12.4万人。主要产品有各种特钢、不锈钢、碳钢等多种口径的无缝钢管、低中高压锅炉管、石油钻探管等钢管;各种三通、四通、阀门、异径管等弯头管件;各种不锈钢法兰、锻造法兰;各种管架、仪表、石油防井喷器等管道配件;各种聚乙烯管、聚丙烯管等塑料管道，共16大类370多个品种3500多种规格。制造工艺主要采用热轧直缝焊、螺旋双面埋弧焊、锻打、锻压、中频推制、冷成型、热挤压等，管道最大加工直径2020毫米。产品广泛应用于市政、石油化工、西气东输、船舶及核电等工程领域，年设计加工能力2500万吨。2010年规模以上企业实现工业增加值130亿元，同比增长31.7%，占全部规模以上企业增加值的16.1%。沧州管道装备制造业正向"三上"(上规模、上水平、上装备)和"三高"(高端、高压、高附加值)的目标迈进，力促管道装备制造业能力达到3000万吨。沧州将成为国内外知名的"管道装备制造与研发基地"和"管道装备之都"。"十一五"规划基建投资已棋至中盘，公路、铁路等基础设施建设投资的爆发增长和普通民用建筑投资的平稳增长，使建筑行业正处在景气上行阶段。同时，在建设节能社会和国家加强自主创新能力的背景下，节能和技术创新主题将是行业的发展热点。

dn代表什么管子DN是管道系统元件公称尺寸的字母标识。在相关标准中的定义为：公称尺寸?nominalsize用于管道系统元件的字母和数字组合的尺寸标识，由字母DN和后跟的无量纲的整数数字组成。注1：这个无量纲数字与端部连接件的孔径或外径等特征尺寸直接相关。注2：除相关标准中另有规定外，DN后跟的无量纲数字不代表测量值，也不应用于计算。以上内容源自国家标准GB/T1047-2019《管道元件公称尺寸的定义和选用》。下面为本标准中截图：管子规格尺寸表大全水管规格尺寸主要是20mm，培拍25mm，32mm，40mm，50mm，63mm，75mm，90mm，110mm这几种常用尺寸。对于房屋装修的业主来说，要用到的其实也就是20mm和25mm的，整个家庭管道系统中，这两个就可以满足家庭用水了。32mm，40mm，50mm，63mm，75mm，90mm，110mm这些大口径的管材，是工程上才用得到的。这就是我们所有的管材尺寸的列表，以及不同尺寸的用处了。当然，对于新房装修的业主来说，仅仅了解水管型号尺寸是远远不够的。最重要的，亏中余我们还要了解管道系统的大致构成。家装管道系统大致由给水系统、排水系统、燃气系统、暖气系统等不同的管道系统组成。而我们的给水系统，又分为冷热销滚水系统，冷热水系统在安装的时候，冷热水管是不能走一个槽的，因为冷热水管要承受的水压不同，如果走一个槽，轻微的会造成水管损坏、渗漏，需要维修；严重的可能会造成水管爆裂、重新返工的后果。请点击输入图片描述DN是塑料管还是钢管DN表示公称直径。公称通径是管路系统中所有管路附件用数字表示的尺寸，公称通径是供参考用的一个方便的圆整数，与加工尺寸仅呈不严格的关系。公称通径用字母“DN”后面紧跟一个数字标志。公称通径，又称平均外径。这是缘自金属管的管璧很薄，管外径与管内径相差无几，所以取管的外径与管的内径之平均值当作管径称呼。De是指外直径，DN是指公称直径，dn是公称外径。扩展资料管子的直径可分为外径、内径、公称直径。管材为无缝钢管的管子的外径用字母D来表示，其后附加外直径的尺寸和壁厚，例如外径为108的无缝钢管，壁厚为5MM，用D108*5表示，塑料管也用外径表示，如De63,其他如钢筋混凝土管、铸铁管、镀锌钢管等采用DN表示，在设计图纸中一般采用公称直径来表示，公称直径是为了设计制造和维修的方便人为地规定的一种标准，也叫公称通径，是管子的规格名称。管子的公称直径和其内径、外径都不相等，例如：公称直径为100MM的无缝钢管有102*5、108*5等好几种，108为管子的外径，5表示管子的壁厚，因此，该钢管的内径为=98MM，但是它不完全等于钢管外径减两倍壁厚之差。公称直径是接近于内径，但是又不等于内径的一种管子直径的规格名称，在设计图纸中所以要用公称直径，目的是为了根据公称直径可以确定管子、管件、阀门、法兰、垫片等结构尺寸与连接尺寸，公称直径采用符号DN表示，如果在设计图纸中采用外径表示，也应该作出管道规格对照表，表明某种管道的公称直径，壁厚。参考资料来源：百度百科-公称直径DN管径尺寸对照表管径尺寸对照表如下图：表中DN的值=De的值-0.5*管壁厚度。注意：这既不是外径也不是内径。表中Φ表示普通圆的直径；也可表示管材的外径，但此时应在其后乘以壁厚。如：Φ25×3，表示外径25mm，壁厚为3mm的管材。对无缝钢管或有色金属管道，应标注“外径×壁厚”。例如ф108×4，ф可省略。中国、ISO和日本部分钢管标准采用壁厚尺寸表示钢管壁厚系列。对这类钢管规格的表示方法为管外径×壁厚。例如ф60.5×3.8。扩展资料：如果管道材料为混凝土及其他预制或是现场浇筑的材料，管壁较厚，此时就不能取外径和内径的平均作为管径值，此种情况，需要注明内径外径，不能模糊称为管径。水、煤气输送钢管、铸铁管和塑料管等管材，应标注公称直径“DN”；在涉及壁厚的情况下也可以使用De来标注。参考资料来源：百度百科-管径DN管道;?????DN代表的是焊接钢管。DN指的是管道的公称直径，是外径和内径的平均值，例如水、煤气输送钢管、铸铁管、钢塑复合管和聚氯乙烯管等管材，都要在上面标注公称直径“DN”。DN是什么管子??????在工业中，管子是非常常见的，而管子的直径可以分为外径、内径、公称直径等，通常会用英文字母来表示，所以我们在使用的时候也应该弄清楚，以免造成使用错误的情况。??????大多数习惯性用DN来标注焊接钢管。DN指的是管道的公称直径，是外径和内径的平均值，一般DN的值=De的值×管壁厚度。??????像是水、煤气输送钢管、铸铁管、钢塑复合管和聚氯乙烯管等管材，都要在上面标注公称直径“DN”，例如DN15、DN50等等，这样标注会更加的简洁明了。

　　DN代表的是焊接钢管。DN指的是管道的公称直径，是外径和内径的平均值，例如水、煤气输送钢管、铸铁管、钢塑复合管和聚氯乙烯管等管材，都要在上面标注公称直径“DN”。 　　DN是什么管子 　　在工业中，管子是非常常见的，而管子的直径可以分为外径、内径、公称直径等，通常会用英文字母来表示，所以我们在使用的时候也应该弄清楚，以免造成使用错误的情况。 　　大多数习惯性用DN来标注焊接钢管。DN指的是管道的公称直径，是外径和内径的平均值，一般DN的值=De的值-0.5×管壁厚度。 　　像是水、煤气输送钢管、铸铁管、钢塑复合管和聚氯乙烯管等管材，都要在上面标注公称直径“DN”，例如DN15、DN50等等，这样标注会更加的简洁明了。

水暖图纸上管子的De,DN分别表示的意思 是管道外径和管道公称直径，De是英文外径Diameter External的缩写，DN是英文公称直径Diameter Norminal的缩写。

DN是什么英文缩写我到是不知道~！中国企业港的网址是www.dn.cn也许那个CN可能是代表他们的意思吧~！

细菌同时具有DNA及RNA，但病毒只有一种核酸物质(DNA or RNA)，所以依照病毒其拥有核酸的不同，将病毒分类为DNA Viruses 及 RNA Viruses 这两大类。 DNA Viruses 中，举几个较为大家所认识的有归类在Papovaviridae(巴波法病毒科)中的Pailloma virus(HPV)其6,11型会造成俗称菜花的尖性湿疣；其16,18型则是造成子宫颈癌的元凶。 另外Herpesviridae(疱疹病毒科)中Herpes simplex virus (HSV)可引起唇疱疹及生殖器疱疹；Varicella-zoster virus (VZV)会造成水痘及俗称皮蛇的带状疱疹。 而Poxviridae(痘病毒科)中有已经被世界卫生组织(WHO)宣布已经绝迹的Smallpox virus(天花病毒)，还有Vaccinia virus(牛痘病毒)。Hepadnaviridae(肝炎病毒科)最有名的是Hepatitis B viruses (B型肝炎病毒)。 RNA病毒种类较多，常见的有Enteroviruses(肠病毒)、Polioviruses(小儿麻痹病毒)、Hepatitis A viruses (A型肝炎病毒)、Rabies virus(狂犬病病毒)、Dengue virus (登革热病毒)、Japanese encephalitis virus (日本脑炎病毒)Coronaviruses(冠状病毒-SARS即属於此病毒科)、Hantavirus (汉他病毒)、HIV(爱滋病病毒)、Influenza virus (流行性感冒病毒)、Mumps virus (腮腺炎病毒)、Measles virus (麻疹病毒)、Rubella virus (德国麻疹病毒)...等。 所以您提问的德国麻疹是由RNA病毒引起的，德国麻疹疫苗目前使用的是MMR三合一活性减毒疫苗，所谓的MMR即Mumps virus (腮腺炎病毒)、Measles virus (麻疹病毒)、Rubella virus (德国麻疹病毒)三种病毒的缩写。 希望以上资讯能帮助到您~

病毒跟细菌不一样，细菌同时具有DNA及RNA，但病毒只有一种核酸物质(DNA or RNA)，所以依照病毒其拥有核酸的不同，将病毒分类为DNA Viruses 及 RNA Viruses 这两大类。DNA Viruses 中，举几个较为大家所认识的有归类在Papovaviridae(巴波法病毒科)中的Pailloma virus(HPV)其6,11型会造成俗称菜花的尖性湿疣；其16,18型则是造成子宫颈癌的元凶。另外Herpesviridae(疱疹病毒科)中Herpes simplex virus (HSV)可引起唇疱疹及生殖器疱疹；Varicella-zoster virus (VZV)会造成水痘及俗称皮蛇的带状疱疹。而Poxviridae(痘病毒科)中有已经被世界卫生组织(WHO)宣布已经绝迹的Smallpox virus(天花病毒)，还有Vaccinia virus(牛痘病毒)。Hepadnaviridae(肝炎病毒科)最有名的是Hepatitis B viruses (B型肝炎病毒)。RNA病毒种类较多，常见的有Enteroviruses(肠病毒)、Polioviruses(小儿麻痹病毒)、Hepatitis A viruses (A型肝炎病毒)、Rabies virus(狂犬病病毒)、Dengue virus (登革热病毒)、Japanese encephalitis virus (日本脑炎病毒)Coronaviruses(冠状病毒-SARS即属於此病毒科)、Hantavirus (汉他病毒)、HIV(爱滋病病毒)、Influenza virus (流行性感冒病毒)、Mumps virus (腮腺炎病毒)、Measles virus (麻疹病毒)、Rubella virus (德国麻疹病毒)...等。所以您提问的德国麻疹是由RNA病毒引起的，德国麻疹疫苗目前使用的是MMR三合一活性减毒疫苗，所谓的MMR即Mumps virus (腮腺炎病毒)、Measles virus (麻疹病毒)、Rubella virus (德国麻疹病毒)三种病毒的缩写。希望以上资讯能帮助到您~

西德尼·谢尔顿( 1917年2月11日–2007年1月30日)是一位美国作家。 他的电视作品跨越20年的期间，他创建了帕蒂·杜克显示( 1963–66 )，一部音乐剧( 1965–70 )和哈特哈特( 1979–84 )，但他在他50岁，开始写作后，成为最著名的畅销小说，如游戏高手( 1982 )，午夜的另一面( 1973 )和天使的愤怒( 1980 )。 他是有史以来最畅销的小说作家。

DNF搬砖用同步器老惩罚到底是哪的问题???有没工作室的大神给俺说下...不能用同步器。dnf搬砖手动用同步器会被封号的，这个在DNF的玩家协议里明确表示禁止使用。同步器是一款外接纯硬件的信号分发设备，以黑锋狼王同步器为列：内置同步算法，可以将鼠标键盘信号模拟8分道，同步传输。答案是：毫无疑问会检查的，有的人说，跟IP地址没有很大关系，某某某一条线32开什么事没有，我之前的短文已经论述了，并并不是已经出后果了才叫出毛病，仅仅还没有到要惩罚的红线罢了。和轩氏的没法兼容。黑锋狼王的性价比还可以，该有的功能都有，使用也比较稳定，和轩氏同步器录制器都能兼容，价格也最实惠。反正市面上主流的3大品牌，就这3个了，想搬砖的朋友可以根据自己的需要来选择。dnf同步器怎么防制裁首先打开百度搜索，输入dnf关键字，查看搜索结果，如下如图所示。进入到dnf官网之后，点击图片中箭头所指的按钮，如下如图所示。然后在左边的快速入口处找到在线客服。使用第三方软件（一空四同步器）都有可能会被封号的，这个在DNF的玩家协议里有的；四台电脑用的一根网线，一个网线就是一个IP，一个IP下登录太多的号，腾讯就认定你是工作室，即使没开挂，也会被封。dnf使用同步器很大可能是会造成封号的。因为使用的是同一IP，一个IP一下登陆太多的号，系统就会认定其是工作室，管其有没开挂，直接永久，使用第三方软件都有可能会被封号的，这个在DNF的玩家协议里有的。dnf同步器会不会封号1、不能用同步器。dnf搬砖手动用同步器会被封号的，这个在DNF的玩家协议里明确表示禁止使用。同步器是一款外接纯硬件的信号分发设备，以黑锋狼王同步器为列：内置同步算法，可以将鼠标键盘信号模拟8分道，同步传输。2、使用此同步器会封号。使用第三方软件(同步器)都有可能会被封号的，这个在DNF的玩家协议里有的，所以使用同步器是会被封号的，不建议使用。建议不要用这种多开同步器，因为有时候系统会认定为外挂，直接将你的号给封了。3、使用第三方软件（一空四同步器）都有可能会被封号的，这个在DNF的玩家协议里有的；四台电脑用的一根网线，一个网线就是一个IP，一个IP下登录太多的号，腾讯就认定你是工作室，即使没开挂，也会被封。4、dnf同步器封号原理是同一IP造成DNF封号。硬件同步器主要是影响游戏的平衡性。5、根据游戏了解，虚拟机同步器封地下城还是严重的。dnf使用同步器很大可能是会造成封号的，这还是很严重的，毕竟都无法玩游戏了，这个在DNF的玩家协议里有的。6、不会，同步器是纯硬件设备，将键盘鼠标信号同时同步的传输到各个受控的电脑，不会被检测的。但是入手同步器也应该注意几点：1，精准性，有的同步器不带精准模式，鼠标容易不同步。硬件同步器封号原理1、dnf同步器封号原理是同一IP造成DNF封号。硬件同步器主要是影响游戏的平衡性。2、一般来说，4台电脑用硬件同步器刷dnf4个号是不会封号的。但如果你用的太过分了肯定会被封的（封号最多也只能封1个月，最少24小时）。3、其次因素：“硬件配置同步器”。第三因素：“合理的游戏玩法”。4、不会，同步器是纯硬件设备，将键盘鼠标信号同时同步的传输到各个受控的电脑，不会被检测的。但是入手同步器也应该注意几点：1，精准性，有的同步器不带精准模式，鼠标容易不同步。60永久同步器封号么不会，同步器是纯硬件设备，将键盘鼠标信号同时同步的传输到各个受控的电脑，不会被检测的。但是入手同步器也应该注意几点：1，精准性，有的同步器不带精准模式，鼠标容易不同步。会封号。根据规定安装作弊修改器或专用外挂软件、使用含有非法功能的第三方辅助插件都属于违规行为。问道是北京光宇华夏科技有限责任公司运营的一款2D回合制网络游戏，于2006年4月22日开始公测。会被封号。根据查询相关资料显示，多名玩家评论说使用同步器会被封号且是永久封号。同步器是指用一套键盘、鼠标同一时间控制多台电脑，且数据完全同步。dnf使用同步器很大可能是会造成封号的。因为使用的是同一IP，一个IP一下登陆太多的号，系统就会认定其是工作室，管其有没开挂，直接永久，使用第三方软件都有可能会被封号的，这个在DNF的玩家协议里有的。

随着科技的不断发展，经过不断的努力，实现了在碱基编辑器上直接 DNA 进行化学反应，来精准编辑基因进行自由替换

《The Midnight Mayor》（Griffin, Kate）电子书网盘下载免费在线阅读链接: https://pan.baidu.com/s/1kre6Y8HN_y3IvQiOLrIgyA 提取码: yhev书名：The Midnight Mayor作者：Griffin, Kate出版年份：2010-3页数：432内容简介：It"s said that if the ravens ever leave the Tower of London, then the Tower will crumble and the kingdom will fall. As it happens, that"s not so far from the truth ...One by one, the magical wards that guard the city are failing: the London Wall defiled with cryptic graffiti, the ravens found dead at the Tower, the London Stone destroyed. This is not good news. This array of supernatural defences - a mix of international tourist attractions and forgotten urban legends - formed a formidable magical shield. Protection for the City of London against ...well, that"s the question, isn"t it? What could be so dangerous as to threaten an entire city? Against his better judgement, resurrected sorcerer Matthew Swift is about to find out. And if he"s lucky, he might just live long enough to do something about it ...

DNA is present in all cellular organisms and in viruses. It contains the genetic information of the organism. DNA, the abbreviation for Deoxyribonucleic Acid, consists of two antiparallel chains (double helix) consisting of sugar, a phosphate-unit and 4 different bases. The two chains are held together by hydrogen bonds between base pairs, while the sugar-phosphate backbone is on the outside. The sugar-phosphate backbone stays the same within a strand, whereas the bases can differ between Adenine, Thymine, Guanine and Cytosine. The order of the bases in the double-chain determines the genetic code, that means the order and the distribution of the bases is responsible for all heritable traits of an organism. It is a very precise code, and a mistake in even a single letter of the DNA code can have disastrous consequences. A unit (sequence of nucleotides) of the double-helical chain, responsible for a certain trait, is called a gene.