琼脂糖凝胶电泳检测dna原理
琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验原理琼脂糖凝胶电泳是分离、纯化、鉴定DNA片段的典型方法,其特点为简便、快速。DNA片段琼脂糖凝胶电泳的原理与蛋白质的电泳原理基本相同,DNA分子在高于其等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。DNA分子在电场中通过介质而泳动,除电荷效应外,凝胶介质还有分子筛效应,与分子大小及构想有关。对于线形DNA分子,其电场中的迁移率与其分子量的对数值成反比。核酸分子是两性解离分子,pH3.5是碱基上的氨基解离,而三个磷酸基团中只有一个磷酸解离,所以分子带正电,在电场中向负极泳动;而pH8.0-8.3时,碱基几乎不解离,而磷酸基团解离,所以核酸分子带负电,在电场中向正极泳动。琼脂糖和电泳的简介:琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳糖和1,4连结的3,6-内醚-L-半乳糖交替连接起来的长链。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。电泳是指带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。
苹果官网序列号dnqwvgzpgry8
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石蜡标本提取DNA为什么要加UNG (如图,石蜡表本提取DNA的前部分步骤,在第五步为什么要加入U
如何从石蜡组织切片(FFPE)中提取DNA这个要根据你的实验目的和想要达到的效果来选择,各有千秋。我之前因为实验问题,在网上咨询过中洪博元,我整理一些给你参考下:1.从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片,而那些稳定的抗原,能经受住石蜡切片的的考验,一般来讲也可以用冰冻切片来做,总得来讲,对于既可以用冰冻切片也可以用石蜡切片检测的抗原,用石蜡切片检测的染色效果要比冰冻切片好一些。2.从研究目的来看。石蜡切片对组织细胞的定位很准确,而长期冻存组织的冰冻切片可能因冰晶的形成破坏组织细胞形态的结构,并造成抗原的弥散,从而定位不准确。3.从抗原的保真性来看。冰冻切片对抗原的保真很好,而石蜡切片在组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等过程中可能会对抗原的性质造成影响。4.从操作步骤的繁琐程度看。染色过程冰冻切片简单,而石蜡切片要求脱蜡入水、抗原修复等过程,比较繁琐。5.总之,石蜡切片对标本的长期保存较合适,且组织细胞形态结构保持好;而冰冻切片适合对新鲜组织的制片,然后立即固定、染色效果较好,且免疫荧光中可以相对避免石蜡自发荧光的干扰。
吴志强(英文名DavidNg)的介绍
吴志强,(英文名David Ng),华裔新闻工作者,美国《纽约每日新闻》报的执行总编,该报社的第三号人物。这一职务是华裔在美国重要媒体中出任的最高职位。
核酸检测说白了就是dna检测?
你这智商真的是够死了 核酸和DNA有什么关系 那是rna好不好 也是病毒的rna不是你的
DNA是什么的载体
遗传信息
dnp为什么作为减肥药?为什么对人体有害被明今禁止
因为DNP可促进细胞代谢速率而增加能量的消耗起到减轻体重的作用,但是Dnp有明显的副作用,使其不能作为减肥药物。
OLT、ODN、ONU、汇聚层交换机、用户之间是怎么连接的?连接完以后接传输网的什么设备
PC(pppoE拨号)---ONU(路由一体机)----ODN----OLT----agg switch----BAS----CR----IDCOLT如果在镇上,BAS如果在城市, OLT----BAS可以直接用OTN链接。 如下:OLT---OTN----OTN----BAS
OLT、ONU、ODN,是先什么东西?
OLT光线路终端,一般在运营商机房内安装使用;ONU光缆线路单元,在用户端使用,一般安装在楼道单元内。ODN光分配网络,包括主干光缆,光分器,光交箱,用户光缆皮线等。
ODN布放中,OLT布放位置的三种选择是什么?它们分别有什么特点?
ODN的设计中,按照你问的,OLT放置位置可以有以下三种位置放置:1、中央机房(覆盖全区域、用户密度小)2、前端分机房(覆盖部分区域)3、小区分机房(覆盖小区域、用户密度大)
Randy Newman的《Rednecks》 歌词
歌曲名:Rednecks歌手:Randy Newman专辑:Songbook, Volume IRedneckLamb of GodSacramentLamb of God - RedneckSo goddamn easy to write this,You make it spill on the page.So drunk on yourself, self-righteous,The laughing stock of your own fucking sage.But I ain"t one to call names,Or throw stones in a house of glass.You try me.This is a motherfucking invitationThe only one you could ever need.This is a motherfucking invitation.You try me.Just one time you got a reason,Heard you had nothing to lose.A pied preacher for the pin-eyed congregation,It must be easy to lose.But I ain"t one of those names,Or throw stones in a house of glass.You try me.This is a motherfucking invitationThe only one you could ever need.This is a motherfucking invitation.You try me.You can tell the same lie a thousand times,But it never gets anymore true,So close your eyes once more and once more believeThat they all still believe in you.Just one time.This is a motherfucking invitationThe only one you could ever needThis is a motherfucking invitationJust one timeThis is a motherfucking invitationYou try meJust one timeYou try meJust one timeYou try meYou try mehttp://music.baidu.com/song/1063857
dnf剑魂OGC键位好用
不好用。dnf剑魂OGC键位不好用,dnf剑魂技能快捷键位:A裂波斩、S上挑、D里鬼、Shift逆转反击、Q流心术、W、地裂波动剑、E抓头、R破军、T格挡、F1拔刀斩、F2猛龙、F3幻影剑舞、其它手按。剑魂主要连招技能:浮空连:里鬼剑、上调后跳斩、银光落刃、十字斩、空中连斩、破军。浮空连看起手,开始不熟练的时候你可以只用空中连斩穿插,熟练后在考虑技能CD浮空保护等因素下使用其他技能。
请问swordnewnew是什么意思?
sword new new翻译为:新剑。
LudwigMeidner出生于哪里
LudwigMeidner外文名:LudwigMeidner职业:美术设计代表作品:街道合作人物:KarlGrune
三链DNA是几级结构
(转)DNA是由脱氧核苷酸的单体聚合而成的聚合体,DNA的单体称为脱氧核苷酸,每一种脱氧核苷酸由三个部分所组成:一分子含氮碱基+一分子五碳糖(脱氧核糖)+一分子磷酸根,DNA都是由C、H、O、N、P五种元素组成的。 单个的核苷酸连成一条链,两条核苷酸链按一定的顺序排列,然后再扭成“麻花”样,就构成脱氧核糖核酸(DNA)的分子结构。原核细胞的染色体是一个长DNA分子。真核细胞核中有不止一个染色体,每个染色体也只含一个DNA分子。不过它们一般都比原核细胞中的DNA分子大而且和蛋白质结合在一起。DNA分子的功能是贮存决定物种的所有蛋白质和RNA结构的全部遗传信息;策划生物有次序地合成细胞和组织组分的时间和空间;确定生物生命周期自始至终的活性和确定生物的个性。除染色体DNA外,有极少量结构不同的DNA存在于真核细胞的线粒体和叶绿体中。DNA病毒的遗传物质也是DNA。 RNA 其中rRNA是核糖体的组成成分,由细胞核中的核仁合成,而mRNA tRNA 在蛋白质合成的不同阶段分别执行着不同功能。 mRNA是以DNA的一条链为模板,以碱基互补配对原则,转录而形成的一条单链,主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达,是遗传信息传递过程中的桥梁 tRNA的功能是携带符合要求的氨基酸,以连接成肽链,再经过加工形成蛋白质 具体请参阅高中生物第二册,遗传部分 RNA指 ribonucleic acid 核糖核酸 核糖核苷酸聚合而成的没有分支的长链。分子量比DNA小,但在大多数细胞中比DNA丰富。RNA主要有3类,即信使RNA(mRNA),核糖体RNA(rRNA)和转移RNA(tRNA)。这3类RNA分子都是单链,但具有不同的分子量、结构和功能。 在RNA病毒中,RNA是遗传物质,植物病毒总是含RNA。近些年在植物中陆续发现一些比病毒还小得多的浸染性致病因子,叫做类病毒。类病毒是不含蛋白质的闭环单链RNA分子,此外,真核细胞中还有两类RNA,即不均一核RNA(hnRNA)和小核RNA(snRNA)。hnRNA是mRNA的前体;snRNA参与hnRNA的剪接(一种加工过程)。自1965年酵母丙氨酸tRNA的碱基序列确定以后,RNA序列测定方法不断得到改进。目前除多种tRNA、5SrRNA、5.8SrRNA等较小的RNA外,尚有一些病毒RNA、mRNA及较大RNA的一级结构测定已完成,如噬菌体MS2RNA含3569个核苷酸。 1965年R.W.霍利等测定了第 1个核酸——酵母丙氨酸转移核糖核酸的一级结构即核苷酸的排列顺序。此后,RNA一级结构的测定有了迅速的发展。到1983年,不同来源和接受不同氨基酸的tRNA已经弄清楚一级结构的超过280种,5S RNA 175种,5.8S RNA也有几十种,以及许多16S rRNA、18S rRNA、23S rRNA和26S rRNA。在mRNA中,如哺乳类珠蛋白mRNA、鸡卵清蛋白mRNA和许多蛋白质激素和酶的mRNA等也弄清楚了。此外还测定了一些小分子RNA如sn RNA和病毒感染后产生的RNA的核苷酸排列顺序。类病毒RNA也有5种已知其一级结构,都是环状单链。MJS2RNA、烟草花叶病毒 RNA、小儿麻痹症病毒RNA是已知结构中比较大的RNA。 除一级结构外,RNA分子中还有以氢键联接碱基(A对U;G对C)形成的二级结构。RNA的三级结构,其中研究得最清楚的是tRNA,1974年用X射线衍射研究酵母苯丙氨酸tRNA的晶体,已确定它的立体结构呈倒L形(见转移核糖核酸)。 RNA 一级结构的测定常利用一些具有碱基专一性的工具酶,将RNA降解成寡核苷酸,然后根据两种(或更多)不同工具酶交叉分解的结果,测出重叠部分,来决定RNA的一级结构。举例如下: AGUCGGUAG 牛胰核糖核酸酶 高峰淀粉酶核糖核酸酶T1 (RNase A) (RNase T1) AGU+C+GGU+AG AG+UCG+G+UAG 牛胰核糖核酸酶是一个内切核酸酶,专一地切在嘧啶核苷酸的3′-磷酸和其相邻核苷酸的5′-羟基之间,所以用它来分解上述AGUCGGUAG9核苷酸,得到AGU、C、GGU和AG4个产物。而核糖核酸酶 T1是一个专一地切在鸟苷酸的3′-磷酸和其相邻核苷酸的5′-羟基之间的内切核酸酶,它作用于上述9核苷酸,则得到AG、UCG、G和UAG4个产物。根据产物的性质,就可以排列出9核苷酸的一级结构。 除上述两种核糖核酸酶外,还有黑粉菌核糖核酸酶(RNase U2),专一地切在腺苷酸和鸟苷酸处,和高峰淀粉酶核糖核酸酶T1联合使用,可以测定腺苷酸在RNA中的位置。多头绒孢菌核糖核酸酶(RNase Phy)除了CpN以外的二核苷酸都能较快地水解,因此和牛胰核糖核酸酶合用可以区别Cp和Up在RNA中的位置。 生物功能和种类 20世纪40年代,人们从细胞化学和紫外光细胞光谱法观察到凡是 RNA含量丰富的组织中蛋白质的含量也较多,就推测RNA和蛋白质生物合成有关。RNA 参与蛋白质生物合成过程的有 3类:转移核糖核酸(tRNA)、信使核糖核酸(mRNA)和核糖体核糖核酸(rRNA)。
DNA复制中,RNA引物的作用?
电风扇vgdf
DNA和RNA所含无机酸的名称分别是什么
a. DNA是由脱氧核苷酸的单体聚合而成的聚合体。 b. DNA的单体称为脱氧核苷酸,每一种脱氧核苷酸由三个部分所组成:一分子含氮碱基+一分子五碳糖(脱氧核糖)+一分子磷酸根,DNA都是由C、H、O、N、P五种元素组成的。 c. DNA的含氮碱基又可分为四类:鸟嘌呤(Guanine)、胸腺嘧啶(Thymine)、腺嘌呤(Adenine)、胞嘧啶(Cytosine) d. DNA的四种含氮碱基组成具有物种特异性。即四种含氮碱基的比例在同物种不同个体间是一致的,但在不同物种间则有差异。 e. DNA的四种含氮碱基比例具有奇特的规律性,每一种生物体DNA中 A(腺嘌呤脱氧核苷酸)=T(胸腺嘧啶脱氧核苷酸 )C(胞嘧啶脱氧核苷酸)=G(鸟嘌呤脱氧核苷酸)。 A与T之间以两个氢键相连,C与G之间以三个氢键相连。核糖核酸(简称RNA) RiboNucleic Acid 由至少几十个核糖核苷酸通过磷酸二酯键连接而成的一类核酸,因含核糖而得名,简称RNA。RNA普遍存在于动物、植物、微生物及某些病毒和噬菌体内。RNA和蛋白质生物合成有密切的关系。在RNA病毒和噬菌体内,RNA是遗传信息的载体。RNA一般是单链线形分子;也有双链的如呼肠孤病毒RNA;环状单链的如类病毒RNA;1983年还发现了有支链的RNA分子。 结构 1965年R.W.霍利等测定了第 1个核酸──酵母丙氨酸转移核糖核酸的一级结构即核苷酸的排列顺序。此后,RNA一级结构的测定有了迅速的发展。到1983年,不同来源和接受不同氨基酸的tRNA已经弄清楚一级结构的超过280种,5S RNA 175种,5.8S RNA也有几十种,以及许多16S rRNA、18S rRNA、23S rRNA和26S rRNA。在mRNA中,如哺乳类珠蛋白mRNA、鸡卵清蛋白mRNA和许多蛋白质激素和酶的mRNA等也弄清楚了。此外还测定了一些小分子RNA如sn RNA和病毒感染后产生的RNA的核苷酸排列顺序。类病毒RNA也有5种已知其一级结构,都是环状单链。MJS2RNA、烟草花叶病毒 RNA、小儿麻痹症病毒RNA是已知结构中比较大的RNA。 除一级结构外,RNA分子中还有以氢键联接碱基(A对U;G对C)形成的二级结构。RNA的三级结构,其中研究得最清楚的是tRNA,1974年用X射线衍射研究酵母苯丙氨酸tRNA的晶体,已确定它的立体结构呈倒L形(见转移核糖核酸)。
ENDNOTE x如何导出Endnote数据库为RIS格式的文本文档
你好在edit 栏目中有output stile,选new stile,再找RIS格式,选中即可,最后从file中输出即可你要是在Endnote帮助中搜一下,就会找到答案如果我的回答没能帮助您,请继续追问。
endnote 怎么打开ris
如果安装好了,双击就可以如果这样不行进入endnote,导入,注意各种过滤器,格式等等
通过百度学术求助,下载的文献是RIS格式,按照网友的回答,我尝试使用了endnote和filevi
ris格式的文献可以用endnote软件打开,endnote可以去网上下载一个破解版的,然后点击File→Import→File,再在Duplicated选项里选择RIS格式文件就可以。或者用Word好像可以直接打开,,我刚才不小心在Word2010里打开了一个ris文件,竟然预览成功了。。。
我的EndNote7为什么导入不了IEEE下载的downloadCitations.RIS
这是因为你的import option选择有误。具体步骤:打开EndNote,并选择一个数据库,依次选择「File」→「Import」→「File」,打开导入对话框。Import File:选择刚才导出的文件,如downloadCitations.RISImport Option:选择Reference Manager (RIS)。Text Translation:选择No Translation望采纳,谢谢
endnote为什么导入ris后,import reference里什么都没有
在EndNote安装完成后,要想使用EndNote在论文中插入我们需要的参考文献,首先需要将对应参考文献的引文信息(这里的引文信息指的是包含一篇文献的作者,年份,标题,期刊等出版信息的文件,并不是我们下载下来阅读的PDF)导入到EndNote中。导入方法一共有四种,包括手动输入,联机下载,PDF识别导入,以及网络数据库导入。本篇文章主要介绍如何从PDF以及网络数据库导入我们所需要的引文信息。需要说明的是,EndNote对英文文献的支持较好,所以在接下来我主要使用英文文献进行演示。当然,EndNote也可以支持中英文献的混排,到EndNote的基本使用方法都讲完以后,我会专门出一期讲如何使用EndNote进行中英文献的混排。1、PDF识别导入PDF识别导入,是在我们有这篇文献的PDF原文时经常使用的导入方法。EndNote可以自动识别PDF中的引文信息,并生成相应的信息,存到EndNote的文献库中。注意通过PDF识别导入的时候,有点年份较早的文献可能会发生识别信息不全,甚至无法识别的情况,因此,通过PDF识别导入具有一定的局限性。操作方法:在EndNote菜单栏中依次选择“File—Import—File...”,在弹出的对话框窗口中,点击Choose,打开文件浏览窗口,找到PDF的存放位置;导入选项(Import Option)选择PDF,然后点导入(Import)按钮。这样这篇文献的引文信息就被成功导入。当我们需要导入的文献很多时,可以对不同的文献进行分组,以更方便地去查找和管理相应的文献。首先在“My Groups”上右键选择“Create Group”创建分组,然后将导入的文献直接拖拽至对应的分组即可。2、网络数据库导入网络数据库导入,是指从网络数据库中直接下载包含作者、年份、标题等引文信息的文件,并将其导入EndNote中。常见的文件格式包括ENW,RIS,CIW,TXT等。下载途径包括期刊官网,Web of Science,中国知网,百度学术或者谷歌学术。01期刊官网从期刊官网下载的最权威,信息最为准确。首先访问论文的官网地址,然后在网页中找到Citation或者是类似“引号”的按钮,点击下载对应的ENW文件或者RIS文件。下图分别为Springer官网和Elsevier官网的示范
什么叫DNA克隆技术?
就是复制DNA,PCR扩增技术算一项
简述DNA重组与分子克隆化基本原理与过程
(一)外源DNA和质粒载体的连接反应 外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5"磷酸和相邻的3"羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5"磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口(图1.8),当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5"磷酸和3"羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化,这两种酶就是大肠杆菌DNA连接酶和T4噬菌体DNA连接酶。实际上在有克隆用途中,T4噬菌体DNA连接酶都是首选的用酶。这是因为在下述反应条件下,它就能有效地将平端DNA片段连接起来。 DNA一端与另一端的连接可认为是双分子反应,在标准条件下,其反应速度完全由互相匹配的DNA末端的浓度决定。不论末端位于同一DNA分子(分子内连接)还是位于不同分子(分子间连接),都是如此。现考虑一种简单的情况,即连接混合物中只含有一种DNA,也就是用可产生粘端的单个限制酶切割制备的磷酸化载体DNA。在加作用的底物。如果反应中DNA浓度低,则配对的两个末端同一DNA分子的机会较大(因为DNA分子的一个末端找到同一分子的另一末端的概率要高于找到不同DNA分子的末端的概率)。这样,在DNA浓度低时,质粒DNA重新环化将卓有成效。如果连接反应中DNA浓度有所增高,则在分子内连接反应发生以前,某一个DNA分子的末端碰到另一DNA分子末端的可能性也有所增大。因此在DNA浓度高时,连接反的初产物将是质粒二聚体和更大一些的寡聚体。Dugaiczyk等(1975;同时参见Bethesda Res,Lab.出版的Focus第2卷,第2、3期合刊)从理论上探讨了DNA浓度对连接产物性质的影响。简而言之,环化的连接产物与多联体连接产物的比取决于两个参数:j和i。j是DNA分子的一个末端在同一分子的另一末端附近的有效浓度,j的数值是根据如下一种假设作出的:沉吟液中的DNA呈随机卷曲。这样,j与DNA分子的长度成反比(因为DNA越长,某一给定分子的两末端的越不可能相互作用),因此j对给定长度的DNA分子来说是一个常数,与DNA深度无关。j=[3/(3πlb0)]3/2其中l是DNA长度,以cm计,b是随机卷曲的DNA区段的长度。b的值以缓冲液的离子强度为转移,而后者可影响DNA的刚度。 i是溶液中所有互补末端的深度的测量值,对于具有自身互补粘端的双链dna而言,i=2NoMx10-3末端/ml这里No是阿佛伽德罗常数,M是DNA的摩尔浓度(单位:mol/L)。理论上,当j=i时,给定DNA分子的一个末端与同一分子的另一末端,以及与不同分子的末端相接触的可能性相等。因而在这样的条件下,在反应的初始阶段中,环状分子与多联体分子的生成速率相等。而当j>i时,有利于重新环化;当i>j,则有利于产生多联体。图1.9显示了DNA区段的大小与连接反应混合物中j:i之比分别为0.5、1、2和5时所需DNA浓度之间关系(Dugaiczyk等,1985)。现在考虑如下的连接反应混合物:其中除线状质粒之外,还含有带匹配末端的外源DNA片段。对于一个给定的连接混合物而言,产生单体环状重组基因组的效率不仅受反应中末端的绝对浓度影响,而且还受质粒和外源DNA末端的相对浓度的影响。当i是j的2-3倍(即末端的绝对浓度足以满足分子间连接的要求,而又不致引起大量寡聚体分子的形成时)外源DNA末端浓度的2倍时,有效重组体的产量可达到最大。这些条什下,连接反应终产物的大约40%都是由单体质粒与外源DNA所形成的嵌合体。当连接混合物中线性质粒的量恒定(j:i=3)而带匹配末端的外源DNA的量递增时,这种嵌合体在连接反应之末的理论产量。 涉及带粘端的线状磷酸化质粒DNA的连接反应应包含: 1)足量的载体DNA,以满足j:i>1和j:i<3。对一个职pUC18一般大小的质粒,这意味着连接反应中应含有载体DNA为20-60μg/ml。 2)末端浓度等于或稍高于载体DNA的外源DNA,如外源DNA浓度比载体低得多,在效连接产物的数量会很低,这样就很难别小部分带重组抽粒的转化菌落。这种情况下,可考虑采用一些步骤来减少带非重组质粒的背景菌落。如用磷酸酶处理线状质粒DNA或发迹克隆策略以便通过定向克隆的方法构建重组质粒。 (二)粘端连接 1)用适当的限制酶消化质粒和外源DNA。如有必要,可用凝胶电泳分离片段并(或)用碱性磷酸酶处理质粒DNA。通过酚:氯仿抽提和乙沉淀来纯化DNA,然后用TE(pH7.6)溶液使其浓度为100/ml。 2)按如下所述设立连接反应混合物: a.将0.1μl载体DNA转移到无菌微量离心管中,加等摩尔量的外源DNA。 b.加水至7.5μl,于45℃加温5分钟以使重新退炎的粘端解链,将混合物冷却到0℃。 c.加入:10xT4噬菌体DNA连接酶缓冲液 1μl T4噬菌体NDA连接酶 0.1Weiss单位 5mmol/L ATP 1μl 于16℃温育1-4小时 10xT4噬菌体DNA连接酶缓冲液 200mmol/L同Tris.Cl(pH7.6) 50mmol/K MgCl2 50mmol/L二硫苏糖醇 500μg/ml牛血清白蛋白(组分V.Sigma产品)(可用可不用) 该缓训液应分装成小份,贮存于-20℃。 另外,再设立两个对照反应,其中含有(1)只有质粒载体;(2)只有外源DNA片段。如果外源DNA量不足,每个连接反应可用50-100ng质粒DNA,并尽可能多加外源DNA,同时保持连接反应体积不超过10μl。可用至少3种不同方法来测定T4噬菌体DNA连接酶的活性。大多数制造厂商(除New England Biolabs公司外)现在都用Weiss等,11968)对该酶进行标化。1个Weiss单位是指在37℃下20分钏内催化1mmol32P从焦磷酸根置换到[γ,β-32P]ATP所需酶时,1个Weiss单位相当于0.2个用外切核酸酶耐受试验来定义的单位(Modrich和Lehman,1970)或者60个粘端单位(如New England Biolabs公司所定义)。因此,0.015Weiss单位的T4噬菌体DNA连接酶在16℃下30分钟内可使50%的λ噬菌体HindⅢ片段(5μg)得以连接。在本书中,T4噬菌体DNA连接酶一律用Weiss单位表示。par 目前提供的T4噬菌体DNA连接酶均为浓溶液(1-5单位/μl),可用20mmol/L Tris.Cl(pH7.6)、60mmol/L KCl、5mmol/L二硫苏糖醇、500μg/ml牛血清白蛋白、50%甘稀释成100单位/ml的浓度置存。处于这种浓度并在这种缓冲液中的T4噬体DNA连接酶于-20℃保存3个月可保持稳定。 3)每个样品各取1-2μl转化大肠杆菌感受态细胞。 (三)平端DNA连接 T4噬菌体DNA连接酶不同于大肠杆菌DNA连接酶,它可以催化平端DNA片段的连接(Sgaramella和Khorana,1972;Sgaramella和Ehrlich,1978),由于DNA很容易成为平端,所以这是一个极为有用的酶学物性。有了这样的物性,才能使任何DNA分子彼此相连。然而,相对而言,平端连接是低效反应,它要求以下4个条件: 1)低浓度(0.5mmol/L)的ATP(Ferretti和Sgaranekka,1981)。 2)不存在亚精胺一类的多胺。 3)极高浓度的连接酶(50Weiss单位.ml)。 4)高浓度的平端。 1.凝聚剂 在反应混合物中加入一些可促进大分子群聚作用并可导致DNA分子凝聚成集体的物质,如聚乙二醇(Pheiffer和Zimmerman,1983;Zimmerman和Pheiffer,1983;ZimmermanT Harrison,1985)或氯化六氨全高钴(Rusche和Howard-Flanders,1985),可以使如何取得适当浓度的平端DNA的总是迎刃而解。在连接反应中,这些物质具有两作用: 1)它们可使平端DNA的连接速率加大1-3个数量级,因此可使连接反应在酶DNA浓度不高的条件下进行。 2)它们可以改变连接产物的分布,分子内连接受到抑制,所形成的连接产物一律是分子间连接的产物。这样,即使在有利于自身环化(j:i=10)的DNA浓度下,所有的DNA产物也将是线状多聚体。par 在设立含凝聚剂的连接反应时,下列资料可供参考。 (1)聚乙二醇(PEG8000) 1)用去离子水配制的PEG8000贮存液(40%)分装成小份,冰冻保存,但加入连接反应混合物之前应将其融化并使其达到室温。在含15%PEG 8000的连接反应混合物中,对连接反刺激效应最为显著。除PEG 800和T4噬菌体DNA连接酶以外,其他所有连接混合物的组分应于0℃混合,然后加适当体积的PEG 8000(处于室温),混匀,加酶后于20℃进行温育。 2)连接混合物中含0.5mmol/L ATP和5mmol/L MgCl2时对连接反应的刺激效应最为显著,甚至ATP浓度略有增加或MgCl2浓度略有降低,都会严重降低刺激的强度(Pheiffer和Zimmerman,1983)。 3)浓度为15%的PEG 8000可刺激带粘端的DNA分子的连接效率提高至原来的10-100倍,反应的主产物是串联的多联体。 4)PEG 8000可刺激短至8个核苷酸的合成寡聚物的平端连接,在这一方面,它与氯化六氨合高钴有所不同。 (2)氯化六氨合高钴 1)氯化六氨合高钴可用水配成10mmol/L贮存液贮存于-20℃,它对连接反应的刺激具有高度的浓度信赖性。当连接反应混合物中盐深度为1.0-1.5μmol/L时,其刺激作用最大。氯化六氨合高钴可使平端连接的效率大约提高到原来的50W部,但只能使端连接的效率提高到原来的5倍(Rusche和Howard-Flanders,1985)。 2)在单价阳离子(30mmol/L KCl)存在下,它对平端连接仍有一定的刺激作用,但此时连接产物的分布有所改变。连接产物不再是清一色的分子间连接产物,相反,环状DNA将点尽优势。 3)与PEG 8000不同,氯化六氨合高钴不能显著提高合成寡核苷酸的连接速率。 (四)质粒载体中的快速克隆 质粒克隆中最慢的步骤是所需的外源DNA片段和相应质粒DNA区段的电泳纯化,下面的操作方案[由S.Michaelis(个人通讯)根据Struhl(1985)的方法修订而成]是从纯化的凝胶中回收琼脂糖块,熔化后直接进行质粒和外源DNA的连接。这一方法寻平端连接和粘端连接都同样奏效,但需大量的连接酶,而且效率要比标准操作方案约低一个数量级。 1)用适当的限制酶消化外源DNA,其量应足以产生约0.2μg的靶片段。反应体积应为20μl或更小。在另一管中,用相应的限制酶消化约0.5μg载体DNA,总反应体积为20μl或更小。如载体DNA带相同的端,应用磷酸处理如下:用限制酶消化完全后,加2.5μl 100mmol/L Tris.Cl(pH8.3)、10mmol/L ZnCl2,加0.25单位牛小肠碱性磷酸酶,于37℃温育30分钟。 2)通过琼脂糖凝胶电泳分离目标片段。务必用低熔点琼脂糖灌制凝胶,务必用含溴化乙锭(0.5μg/ml)的1xTAE作为电泳缓冲液而不是常规的0.5xTBE来配制凝胶并进行电泳。 3)在长波长紫外照射下检查凝胶,根据目标条带的相对荧光强度估计所含DNA的量(见附录E)。用刀片切出目标条带,尽可能少琼脂糖的体积(通常40-50μl)。将切下凝胶片分别放入作好标记的各个微量离心管中。 4)于70℃加热10-15分钏,使琼脂糖熔化。 5)合并熔化的小份凝胶并放到加温至37℃的中一管中,共终体积应不超过10μl,外源DNA与质粒载体的摩尔比应接近2:1。 用另外两个管设立两个对照连反应,一个只含质粒载体,另一个只含外源DNA片段。 6)将3个管于37℃温育5-10分钟,然后每管加10μl用冰预次的2xT4噬体DNA连接酶混合物,在琼脂糖凝固前,充他混匀各管内容物,于16℃温育12-16小时。 2xT4噬菌体DNA连接酶混合物可制备如下: 1mol/L Tris.Cl(pH7.6) 1.0μl 100mmol/L氯化镁 1.0μl 200mmol/L三硫苏糖醇 1.0μl 10mmol/L ATP 1.0μl 水 5.5μl T4噬菌体DNA连接酶 1Weiss单位 混匀后放置于冰浴上。 7)连接反应行将结束时,取出贮存于-70的3管各200μl的冻存大肠杆菌感受态细胞 8)于70℃中热10-15分钟重新溶化连接混合物中的琼脂糖。 9)立即从每管连接混全物中取出5μl加到200μl大肠杆菌感受态细胞中,小心摇晃,快速地混匀内容物。从剩下每管连接混合物中分别再取5μl重复以上步骤,将转化混合物在冰浴上放置30分钟。 10)完成转化方案的其余各步 分子克隆化是在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。克隆(clone,clon)一词源于希腊文Klon,原意为树木的枝条。在生物学中其名词含义系指一个细胞或个体以无性繁殖的方式产生一群细胞或一群个体,在不发生突变的情况下,具有完全相同的遗传性状,常称无性繁殖(细胞)系;其动词(clone,cloned,cloning)含义指在生物体外用重组技术将特定基因插入载体分子中,即分子克隆技术。将DNA片段(或基因)与载体DNA分子共价连接,然后引入寄主细胞,再筛选获得重组的克隆,按克隆的目的可分为DNA和cDNA克隆两类。cDNA克隆是以mRNA为原材料,经体外反转录合成互补的DNA(cDNA),再与载体DNA分子连接引入寄主细胞。每一cDNA反映一种mRNA的结构,cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布。特点是:①有些生物,如RNA病毒没有DNA,只能用cDNA克隆;②cDNA克隆易筛选,因为cDNA库中不包含非结构基因的克隆,而且每一cDNA克隆只含一个mRNA的信息;③cDNA能在细菌中表达。cDNA仅代表某一发育阶段表达出来的遗传信息,只有基因文库才包含一个生物的完整遗传信息。分子克隆化-方法 (1)DNA片段的制备:常用以下方法获得DNA片段:①用限制性核酸内切酶将高分子量DNA切成一定大小的DNA片段;②用物理方法(如超声波)取得DNA随机片段;③在已知蛋白质的氨基酸顺序情况下,用人工方法合成对应的基因片段;④从mRNA反转录产生cDNA。(2)载体DNA的选择:①质粒:质粒是细菌染色体外遗传因子,DNA呈环状,大小为1-200千碱基对(kb)。在细胞中以游离超螺旋状存在,很容易制备。质粒DNA可通过转化引入寄主菌。在细胞中有两种状态,一是“紧密型”;二是“松驰型”。此外还应具有分子量小,易转化,有一至多个选择标记的特点。质粒型载体一般只能携带10kb以下的DNA片段,适用于构建原核生物基因文库,cDNA库和次级克隆。②噬菌体DNA:常用的λ噬菌体的DNA是双链,长约49kb,约含50个基因,其中50%的基因对噬菌体的生长和裂解寄主菌是必需的,分布在噬菌体DNA两端。中间是非必需区,进行改造后组建一系列具有不同特点的载体分子。λ载体系统最适用于构建真核生物基因文库和cDNA库。M13噬菌体是一种独特的载体系统,它只能侵袭具有F基因的大肠杆菌,但不裂解寄主菌。M13DNA(RF)在寄主菌内是双链环状分子,象质粒一样自主制复,制备方法同质粒。寄主菌可分泌含单链DNA的M13噬菌体,又能方便地制备单链DNA,用于DNA顺序分析、定点突变和核酸杂交。③拷斯(Cos)质粒:是一类带有噬菌体DNA粘性末端顺序的质粒DNA分子。是噬菌体-质粒混合物。此类载体分子容量大,可携带45kb的外源DNA片段。也能象一般质粒一样携带小片段DNA,直接转化寄主菌。这类载体常被用来构建高等生物基因文库。(3)DNA片段与载体连接:DNA分子与载体分子连接是克隆过程中的重要环节之一,方法有:①粘性末端连接,DNA片段两端的互补碱基顺序称之为粘性末端,用同一种限制性内切酶消化DNA可产生相同的粘性末端。在连接酶的作用下可恢复原样,有些限制性内切酶虽然识别不同顺序,却能产生相同末端。②平头末端连接,用物理方法制备的DNA往往是平头末端,有些酶也可产生平头末端。平头DNA片段可在某些DNA连接酶作用下连接起来,但连接效率不如粘性末端高;③同聚寡核苷酸末端连接。④人工接头分子连接,在平头DNA片段末端加上一段人工合成的、具有某一限制性内切酶识别位点的寡核苷酸片段,经限制性内切酶作用后就会产生粘性末端。连接反应需注意载体DNA与DNA片段的比率。以λ或Cos质粒为载体时,形成线性多连体DNA分子,载体与DNA片段的比率高些为佳。以质粒为载体时,形成环状分子,比率常为1∶1。(4)引入寄主细胞:常用两种方法:①转化或转染,方法是将重组质粒DNA或噬菌体DNA(M13)与氯化钙处理过的宿主细胞混合置于冰上,待DNA被吸收后铺在平板培养基上,再根据实验设计使用选择性培养基筛选重组子,通常重组分子的转化效率比非重组DNA低,原因是连接效率不高,有许多DNA分子无转化能力,而且重组后的DNA分子比原载体DNA分子大,转化困难。②转导,病毒类侵染宿主菌的过程称为转导,一般转导的效率比转化高。(5)克隆的选择:①直接筛选:有些载体带有可辨认的遗传标记,能有效地将重组分子与本底区分。例如:有些λ噬菌体携带外源基因后形成的噬菌斑就会从原来的混浊变为清亮;还有些载体分子携带外源基因后,形成的菌落或噬菌斑的颜色有明显变化,如蓝色变为无色;有些λ噬菌体能侵染甲菌而不能侵染乙菌,携带外源DNA片段后便能侵染乙菌,因此乙菌释放的噬菌体均为重组分子。②间接筛选:有引起载体分子带有一个或多个抗药性标记基因,当外源DNA插入到抗药基因区后,基因失活,抗性消失。如一质粒有A和B两个抗药性基因,当外源基因插入到B基因区后,便只抗A药而不抗B药。因此能在A药培养基上正常生长而不能在B药培养上生长的便是重组分子。③核酸杂交:广泛用于筛选含有特异DNA顺序的克隆。方法是将菌落或噬菌斑“印迹”到硝酸纤维膜等支持物上,变性后固定在原位,然后与标记的核酸探针进行杂交。阳性点的位置就是所需要的克隆。④免疫学方法:如果重组克隆能在宿主菌中表达,就可以用特异的蛋白质抗体为探针,进行原位杂交,选择特异的克隆。分子克隆化-重要意义 分子克隆技术是70年代才发展起来的,它的出现和应用开辟了分子遗传学研究的新领域,打开了人类了解、识别、分离和改造基因,创造新物种的大门。它的成就对于工业、农牧业和医学产生深远影响,并将为解决世界面临的能源、食品和环保三大危机开拓一条新的出路。在医学方面,利用分子克隆技术已将胰岛素,人、牛和鸡的生长激素、人的干扰素、松驰素、促红细胞生长激素、乙型肝炎病毒抗原和口蹄疫病毒抗原的基因制成工程菌,利用发酵工业进行了大规模生产。还可提高微生物本身所产生的蛋白酶类和抗生素类药物的产量。在基因治疗方面。通过遗传工程看到癌细胞具有逆转为正常细胞的可能性,例如SV40病毒引起的小鼠肿瘤细胞,在温度高时可逆转为正常细胞。为治疗半乳糖血症,用带有大肠杆菌乳糖操纵子的λ噬菌体去感染半乳糖血症患者的离体培养细胞,发现这种细胞的半乳糖苷酶达到了正常水平,并确实能代谢半乳糖。在工业生产方面,以分子克隆技术为主体的基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程,四者紧密联系、常综合利用。许多化学试剂如丙烯酸、己二酸、乙二醇、甲醇、环氧乙烷、乌头酸和水杨酸等都可能利用分子克隆技术得到产品。在环境保护方面,人们根据需要进行基因操作,将某种微生物的基因转入另一微生物,创造一些对有害物质降解能力更强的新菌种,以分解工业污水中的有毒物质。在食品工业方面,细菌可为人类生产有价值的蛋白质、氨基酸和糖等。在农业生产方面,植物遗传工程对提高农作物的产量、培育新的农作物品种提供了可能。有许多外源基因导入植物获得成功。
浏览器DNT功能指什么
就是禁止跟踪 就是有上网的隐私有DNT他跟踪不到
管道焊接方面DNT是什么意思?
无损探伤检测 简称:无损检测 英文名称 Non-destructive testing (简称NDT) NDT (Non-destructive testing),就是利用声、光、磁和电等特性,在不损害或不影响被检对象使用性能的前提下,检测被检对象中是否存在缺陷或不均匀性,给出缺陷的大小、位置、性质和数量等信息,进而判定被检对象所处技术状态(如合格与否、剩余寿命等)的所有技术手段的总称
Quotes on Friendship and Kindness
A real friend is one who walks in when the rest of the world walks out. A friend is someone who knows all about you and still loves you. A loyal friend laughs at your jokes when they are not so good, and sympathizes with your problems when they are not so bad. True friendship is like sound health, the value of it is seldom known until it be lost. Do not walk in front of me, I may not follow. Do not walk behind me, I may not lead. Walk beside me and be my friend. You have two hands. One to help yourself, the second to help others. Since I was young, I have always known this: Life damages us, every one. We can not escape that damage. But now, I am also learning this: We can be mended. We mend each other. Kindness is like snow; it beautifies everything it covers. Service to others is the rent you pay for your room here on earth. All for one and one for all. Kindness is the language which the deaf can hear and the blind can see. Carry out a random act of kindness, with no exception of reward, safe in the knowledge that one day someone might do the same for you.
买到了盒CSHDNA的测试盒,全是英文,哪位好心人可以说下注意事项和使用方法
因为是检测血样中的Y染色体,所以其他事件影响很小,注意没有艾滋病等先天性缺陷或者基因变异导致的疾病,还有某些药物可能会影响测试结果,请咨询医嘱。使用方法很简单,取2滴血样,用吸管滴入测试孔,然后加裂解液,然后等2-5分钟看就可以了,两条就是有,一条就是没有。
DNA,RNA,TNA是什么工作的,它们能否互换吗,它们关系是什么?
核酸分为两种:DNA和RNA。DNA的全称就是脱氧核糖核酸,RNA的全称是核糖核酸,核酸是生物的遗传物质,基本单位是核苷酸.DNA是染色体的主要成分,主要在细胞核,还有线粒体、叶绿体;RNA主要在细胞质中.不同生物,DNA、RNA的序列是不同的.转录是在原核和真核细胞中以DNA为模板合成RNA的过程。没有TNA,倒是有tRNA,它是RNA的一种,主要用于蛋白质合成时氨基酸的转运。
cdn的加速原理
将用户源站的内容缓存到不同地区、不同运营商的CDN节点上,从而让访问者实现就近访问。比如:源站在北京联通。那么广东电信的访问者访问源站就可能会很慢,而使用CDN以后,广东电信的访问者就会被解析到广东电信的CDN节点,这样速度就会快很多。假如所访问的内容是动态的,CDN无法缓存的,那么当请求被解析到CDN节点时,它又会临时向源站发请求,得到结果后再返回给访问者。(此时:CDN节点是电信的,源站是联通的,加速效果就可能不太理想。但是如果此时CDN节点是双通的,或者多线路的,那么加速还是会有效果的,起码解决了跨运营商的问题)
DNA指纹技术应用了什么原理?
简单的说,就是利用了在人的基因组中大量重复出现,而且在人与人之间有明显差别的片段来辨别不同的人,方法就是电泳啦。现在主要被用在犯罪嫌疑人的认证中,灵敏度很高。
dna的leader和trailer是干嘛的?
leader和trailer一般指mRNA的头和尾部非翻译区,也分别称为5"和3‘非翻译区。“The sequence at the 5′ end, preceding the initiation codon, is the leader sequence. The sequence following the termination codon, at the 3′ end, is called a trailer. They are also referred to as 5′ and 3′ untranslated regions, respectively. ”这些序列会转录,但不翻译。 一般在这些区域会包含mRNA的重要调控元件,例如基因mRNA的3"非翻译区存在一些micRNA的靶点,受到调控。
HP LaserJet 400 M401dn忘记密码怎么办,请说明详细步骤
找一个U盘,制作一个老毛桃U盘启动,开机设置为U盘启动,进去后有清除密码这一项
惠普m451dn彩色打印机出现59.9错误代码
在添加打印机之前,首先找到网络打印机的驱动程序并安装到本机,因为后面要用到这个驱动程序,装完驱动之后可以把刚才安装的打印机删掉。这时候就可以开始添加打印机了,打开控制面板里的设备和打印机,然后选择添加打印机:在打开的窗口里选择添加本地打印机,这个是很多人没有想到的。然后点下一步:在打开的选择打印机端口窗口选择创建新窗口,端口类型:Local Port,点下一步:这时候会弹出端口名对话框,在里面输入网络打印机的网络地址,可以查看网络邻居来确定对方共享的打印机的地址,然后点下一步:会打开安装打印机驱动程序窗口,因为在这之前我们已经安装过了这个型号的打印机驱动,所以只需要按照品牌和型号选择即可:这时候会提示你已经安装了驱动程序,保持不变点下一步即可,随后一直点下一步下一步,最好点完成就会成功添加好打印机了,可以打印个测试页试试,成功了!
HP425DN出现59.A0错误怎么回事
HP425DN出现59.A0错误通过59.A0这个报错代码看是机器马达的硬件故障提示信息。只连接电源线然后再开机,打印机是否能就绪,如果还是不行,建议您联系当地维修中心,由专业的维修人员帮您现场检查维修一下。您可以通过以下链接:http://www8.hp.com/cn/zh/support-drivers/esupport/ascpps.html查询当地的维修中心联系方式。
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在肺炎双球实验中为什么不用死的S型细菌的DN A 加入到活的R型细菌中
这只是书上这么写,你以为做实验就真那么简单,实际操作中会走很多弯路,可能一辈子都做不出一个实验,特别是这种经典实验。没人敢保证但是做实验时他没有像你所说的这样操作。只不过在写书,写论文时这部分对实验结果没什么作用,就省略了。
如何安装hp laserjet 2055dn打印机
下载驱动安装
dn高攻雷神加点
1、应你的提问,纯输出雷神(男人没有奶); 2、解释技能加点原因: 2.1:12级雷电之手,输出固定的2000+魔攻,并且好的雷神可以合理运用雷电之手卡位,适当位置的雷电之手,可以承受伤害,输出亦十分高; 2.2:4级盾挡:盾挡自从和谐之后,此技能已经是十分鸡肋的技能,不过作为高防法师,格挡还是不可或缺,所以4级足够应对所有情况; 2.3:5级雷暴满级暴风:我个人对雷暴的看法就是高硬直技能,输出比较一般,而且使用条件比较严格,尽管2转之后有冲击流,但在雷暴与暴风之间选择,我还是选择了暴风;因为我竟然会用雷电之手拉一堆怪聚集一起,侧滑到中间放暴风,伤害很客观,但BOSS战就十分不给力... 这个看楼主你了; 3、加点佩戴的纹章: 3.1:连锁闪电(20%伤害);(BOSS战最给力神技之一,CD短,伤害高,在BOSS面前拍一下.. 爽..); 3.2:雷电之手(减cd)(这让雷电之手卡位来得更及时); 3.3:神圣暴风(20%伤害);群攻DPS 3.4:天堂审判(20%伤害);群秒DPS 4、装备: 4.1:如果楼主是土豪可以忽略我,我说的是平民选择:50蓝双武器,双戒子!这附魔成本远低于A级,双戒子的致命一击也很是给力,强化费用也比较低,起码你之前全身是智慧装,换两把50蓝,强化8之后上3300+很容易,致命一击也有5000+ 。 以上皆为转载,只为解答你的问题
压缩空气管道dn50以上是否一定要用法兰连接
压空管道安装:将管子、管件、阀件等,按设计要求安装就位,使压缩空气保持规定的工作压力输送到用户的施工作业。安装程序有管材选用、管子加工、管道敷设、管道连接、管道试验和管道吹扫等。管材选用压缩空气管道常用的管材为无缝钢管。管道系统内设置阀门、减压装置、排油水器、补偿器、配气器及计器仪表等,均按设计图纸进行选用和加工。管材及管件需进行外观检查。高压管道的管材要使用磁力探伤等方法进行无损检验。管材在加工前要进行除锈和涂防锈漆,阀类应进行清洗、研磨和水压试验。管子加工包括管子切割和撤弯等。(1)管子切割。公称直径n在50mm以下的管子和仇在50mm以上的高压管子均采用机械或手工切割,中低压大管径(Dg>50mm)管子采用火焰切割。(2)管子掇弯。可采用冷拭或热撤方法,管径Dg≤150mm采用冷撤管径Dg>150mm采用热搋。无冷拭机具时小管径管子也可用热拭。大管径的弯管多采用切一焊方法加工。管道系统的“П”型补偿器多采用拭制,其弯曲半径为3~4倍管直径,急弯弯头为1.5倍管直径。撤制补偿器的椭圆率、壁厚减薄率、波浪度和角度偏差均应符合技术规范的要求。管道敷设分架空敷设、地沟敷设和埋地敷设。敷设前要按图纸核对位置,把管子及附件运到现场,将管子加工时残留在管内的焊渣、砂石、破布等杂物清理干净。(1)架空敷设。厂区架空管道常与煤气管道、热力管道等共架,安装时要按施工方案统一安排,一般在煤气管道安装固定后,采用自行吊装机械与其他工业管道同时吊装。管道吊装前,在地面组对成30m长的管段,涂刷防锈漆和第一道面漆。室内架空管道一般沿墙和柱敷设,可借助车间内桥式起重机、电葫芦吊装到车间走台,再用人工安装就位。无此条件时也可用链式起重机吊装。管道穿墙和楼板时要埋设套管。(2)地沟敷设。管道地沟分通行地沟、半通行地沟和不通行地沟。在通行地沟敷设时,将管子从地沟的吊装口送入地沟并沿沟底排列,在沟内组对,用链式起重机或人工吊装就位。在半通行地沟和不通行地沟敷设时,一般在地面组对,待地沟内支架安装好后,将管道放入地沟内,进行连接固定,待管道试验合格后,进行涂装,最后加地沟盖封闭。(3)埋地敷设。管道敷设前按设计要求进行防腐处理,在地面组对后,用自行起重机械或人工方法吊装。管道搬运和吊装时要注意保护防腐层。管道在沟内连接、试验和吹扫合格后,对所有管道的焊口和已经损坏的防腐层都要进行防腐处理,检查合格后方可回填。管道连接管道吊装就位后进行找正和调整,待达到标高、中心线和坡度均正确无误后,即进行连接固定。室外管道均采用焊接,管径不大于50mm的管子一般用气焊,管径大于50mm的管子采用电焊,高压管道均采用电焊或氩弧焊。室内管径不大于50mm的中低压管道可采用螺纹连接,管道与阀门、附件和设备采用法兰连接或螺纹连接。管道固定前对补偿器进行预拉伸,拉伸量为设计膨胀量的1/2。从干管引出支管时必须从干管上部开出三通口,防止干管内的冷凝水、油污进入支管和设备。高压管道开三通口采用钻孔,不得用火焰切割。管道试验管道试验分强度试验和严密性试验。(1)强度试验。试验介质用清洁水或压缩空气。水压试验压力为工作压力的1.25倍,气压试验压力为工作压力的1.15倍。(2)严密性试验。试验介质用压缩空气,试验压力(Ps)等于工作压力(P)。在试验过程中,当压力达到下述值时应进行外观检查:Ps<0.2MPa,当达到00.6Ps时;Ps≥0.2MPa,当达到0.3Ps和0.6Ps时。若检查没有发现泄漏和异常情况,即可升压至试验压力,保持24h,计算每小时平均泄漏率(A)。式中P1、T1为试验开始时的绝对压力和温度;P2、T2为试验结束时的绝对压力和温度。当A≤1%时为合格。管道吹扫管道试验合格后或通气前,用压缩空气进行吹扫,把安装过程中残留在管内的焊渣、铁屑、泥土、破布等杂物吹扫干净,防止通气时进入仪表和设备。
你好,我想问下HP CP5525DN打印机报 49.38.03 error 错误。麻烦指导下!
您好,感谢您选择惠普产品。color Laserjet cp5525打印机,出现49的报错原因较多。如果机器开机就是此报错,重启无效,有可能是固件或主板方面的问题导致的。可以尝试升级固件测试,但是固件升级有一定风险,如果失败,机器硬件方面会有影响,请慎重操作。升级时请注意打印机的电源线和数据线务必不能断开,升级过程中不要打印作业。如果升级无效,建议您联系维修中心检查一下机器的硬件。您可以登录下述链接查询维修中心:http://www8.hp.com/cn/zh/support-drivers/esupport/ascpps.html如果是在打印过程中出现的49的报错,驱动,通讯以及打印的文档等方面均有可能有问题。可以尝试调节驱动设置试一下在控制面板—打印机和传真,右键点击驱动图标,选择打印首选项,在高级选项卡中选择将Truetype字体下载为软字体,TrueType字体作为位图发送选择已启用如果调节驱动设置无效,可以尝试安装postscript的驱动再试一下。如果是打印个别文档出现此报错,也不排除是文档自身的问题导致的。
HP2055DN打印机经常出现49 ERR 43B0531 TURN OFF THEN ON的错误代码,如何解决?
您好,感谢您使用惠普产品:49报错和硬件或者软件都有关系,具体按照下面步骤检查一下:如果出现49这个讯息,请您先关机,然后再重新开机,看错误是否会重复出现,1.如果故障重复出现,说明是机器安装的附件引起的,请您关机,把机器上加装的所有附件都取下来,比如内存,字库条,网卡,硬盘,双面打印器,等等,全部都拿下来,然后开机,看故障是否还出现(注意,这里指的附件不是您购买机器的时候自带的附件,而是如果您后来有自己加装的附件,如果没有额外加,可以忽略这点),(1)如果机器在“孤立”的情况下还有故障,我们对打印机做恢复出场设定的动作(操作之前保存好打印机ip地址,避免清除),直接在打印机上操作,a. 按下 OK。b. 按下向下箭头 以选择Service(服务),然后按下 OK。c. 按下向下箭头 以选择Restore defaults(恢复默认值),然后按下 OK。,这个动作以后如果还有问题,说明是打印机硬件问题,需要维修,您可以通过以下链接来进行维修站的查询。http://h10025.www1.hp.com/ewfrf/wc/document?lc=zh-hans&dlc=zh-hans&cc=cn&docname=c02068671(2)如果机器在“孤立”的情况下开机后故障消除,请一个一个把您卸下来的附件重新装回去,然后看安哪个附件的时候出现报错,就是这个零件的问题2.如果您重新开机以后这个信息没有了,那您打印一个测试页看看是否已经正常,在就绪状态下,按一下OK键,按方向键选择Reports,按OK确定,再按方向键选择Config Report,就能打印出来测试页了,如果打印机自身测试页能够正常打印,说明打印机没有硬件问题,可能是您用的软件或者是打印的文件复杂引起的,您可以换其它的软件来打印一些比较简单的文件,找到问题出在哪里,可以有下面几个解决方法:1)如果您会经常打印图档,建议您用ps的驱动2)右键驱动选择打印首选项,高级,选择直接打印到打印机3)您查看一下您打印机的属性-打印首选项-高级-看看里面有没有 truetype字体,选择将truetype字体作为位图(或者叫做下载软字体作为轮廓字)4)降低档的分辨率,或者分批发送打印命令。如果以上信息对您有帮助,建议采纳,方便后来客户解决相同的问题。如果还有问题,建议继续追问,告诉我们问题出现在以上哪步,以及电脑操作系统是什么,我们收到以后会针对您的问题,继续帮您解答。
国产蓝瑟和菱帅有什么区别?型号都是DN7160或DN7161么?
东南汽车旗下的菱帅(Lioncel)全面换代,更名蓝瑟(Lancer),挂上三菱标志。真的改名换标就国际同步了么?通过以下的图片、参数对比,让你了解菱帅、东南蓝瑟、最新款Lancer的关系和区别。 一、相关背景 三菱LANCER车系历经多代,经久不衰,完全得益于在世界拉力锦标赛上叱诧风云的LANCER EVOLUTION这个专业赛车版本。父凭子贵,因此LANCER也成了优越动力和操控性的代名词。 看看日本LANCER悠久的历史: 1973年:第一代Lancer诞生 1979年:第二代Lancer 1982年:第三代Lancer 1983年:第四代Lancer 1988年:第五代Lancer 1991年:第六代Lancer 1995年:第七代Lancer 2000年:第八代Lancer 目前国际市售款式 2005年:第九代Lancer 法兰克福车展上亮相,即将推出。 台湾中华汽车与日本三菱合资,从第五代LANCER开始引进,一直到目前正在销售的第八代。中华汽车对第八代蓝瑟改进吸收后,于2003年开始生产现在的GLOBAL LANCER(民用版)和Virge iO(运动版),Virge iO在发动机和内饰等全面跑车配置,因此和国内蓝瑟不具备可比性。以下比较我们都以台湾产的第八代蓝瑟(GLOBAL LANCER)代表国际同步的蓝瑟。 东南汽车于2003年引进台湾中华的第六代蓝瑟改款车型,取名菱帅,英文名称叫LIONCEL,虽然菱帅经过对车架外形的改造升级,但也仅仅只能算是一个六代半的蓝瑟。按照台湾中华汽车和三菱的协议,当台湾生产的车型到更新换代的时候,原来的车型专利就全部转让给中华,因此鉴于台湾中华汽车对六代蓝瑟拥有完全的自主专利权,将这种车型引进大陆生产,不用再付给三菱授权费。这就是最终引进了这款当时已经很落后车型的原因。 鉴于中国市场巨大的空间和潜力,以及消费者对正宗三菱蓝瑟的认可,此番三菱正式直接入股东南汽车,与中华汽车平分东南汽车50%的股份,而不再是做中华汽车背后的巨人,合资后代给我们的第一个车型就是三菱蓝瑟。当初LIONCEL和LANCER在叫法上非常接近,也表明了菱帅和三菱蓝瑟的血缘关系。所以在菱帅车型时期,很多国内车主就自行换标为三菱。这次官方换标更名,正式认主归宗。但是真的就给我们带来了国际同步的最新车型吗? 二、参数对比 车型 东南菱帅 东南蓝瑟 台湾蓝瑟 (Global Lancer) 推出时间 2003年 2006年 2003年 动力匹配 1.6L 1.6L 1.6L 1.8L 车身重量(kg) 1130 1130 1190 1270 尺 寸 长度(mm) 4430 4400 4500 宽度(mm) 1700 1700 1695 高度(mm) 1410 1415 1430 轴距(mm) 2500 2500 2600 前轮距(mm) 1450 1450 1470 后轮距(mm) 1460 1460 1470 引 擎 动 力 型号 三菱4G18 三菱4G18 三菱4G18 三菱4G93 产地 东安发动机 东安发动机 台湾 台湾 排气量(cc) 1584 1584 1584 1834 凸轮轴形式 SOHC SOHC SOHC DOHC 最大功率 (kw/rpm) 73/6000 73/6000 81/6000 103/6000 最大马力 (PS) 100 100 110 140 最大扭矩 (N.m/rpm) 136/4500 136/4500 142/2750 170/5000 压缩比 9.5 9.5 10.0 10.5 变 速 箱 类型 MT AT MT AT AT 挡位 5速 4速 手自一体 5速 4速 手自一体 6速手自一体 技术 F5M41 INVECS-II F5M41 INVECS-II INVECS-III 车 身:由于沿用菱帅底盘,因此可以看到菱帅和东南蓝瑟的底盘尺寸毫无区别,无论是轴距还是轮距都比台湾蓝瑟小一号。 发动机:虽然东南三菱声称蓝瑟的发动机在菱帅的基础上重新调校过,但是根据官方数据来看,无论是功率还是扭矩都毫无区别;而台湾版的蓝瑟则有1.6/1.8L两种排量,即便1 .6L车型发动机都同为三菱4G18,但是比国产的东安4G18还是在参数上高出一头。 变速箱:东南菱帅和蓝瑟均有手动挡和手自一体两种,台湾只有手自一体一种。单就同为使用INVECS智慧型进化自排系统(电脑自动侦测最佳调节最佳换档时机),手自一体SPORTS MODE变速箱作比较,东南的是4速手自一体INVECS二代;而台湾蓝瑟已经用上了INVECS三代六速手自一体无段变速系统。 三、图片对比 菱帅 蓝瑟 台湾蓝瑟 虽然东南蓝瑟完全沿用菱帅的底盘,但是在车头外形上则完全具备了台湾的第八代蓝瑟的轮廓特征。 菱帅 蓝瑟 台湾蓝瑟 菱帅和蓝瑟的侧面线条和尾部结构保持了完全一致,这次升级几乎不用改变原有外壳模具,蓝瑟的尾灯仍然是扇型结构,但已经换上LED照明灯,寿命更长,对指令反应速度更快。就尾部而言东南蓝瑟和台湾蓝瑟的区别就是最大的了。 菱帅 蓝瑟 台湾蓝瑟 对比菱帅,蓝瑟的内饰焕然一新,三辐方向盘采用真皮带气孔,防滑透气;配以银色装饰,更具质感和运动性。但细看后不难发现中控台的结构实际上并没有变化,只是重新整合了面板布局,出风口改为更富运动感的圆形,手动空调由转盘改为旋钮式,以及整体性更好的2DIN音响。比起台湾蓝瑟的布局和配置,根本就不是一个数量级上的竞争对手。 菱帅 蓝瑟 台湾蓝瑟 在发动机舱上,菱帅和蓝瑟的布局和走线上完全一样,但是蓝瑟加装了带有硕大三菱标志的发动机护罩,这到是三者中做的最好的,也很对口国人的爱好;但是台湾蓝瑟原车配置高流量进气系统,已经替喜欢改装的车迷省了一步,也是台湾同型4G18发动机动力更好的原因之一。 小结: 通过以上对比,我们不难看出,东南蓝瑟本质上应该说是一款换标改壳的菱帅,与国际同步的三菱Lancer差别还很大。这就带出了第二个话题。 这款蓝瑟值得买吗? 虽然东南蓝瑟在外形上很接近于台湾的第八代蓝瑟,但是在一些细节上还是有很多区别和差距的,我们来详细对比一下: 蓝瑟 台湾蓝瑟 东南蓝瑟的中网是单独加装的,而台湾蓝瑟有着标准的三菱家族脸谱,中网是和保险杠一体的,视觉上整体性更强;在中网内隔上也有区别,东南版是横向的,台湾版采用更具动感的斜栅式设计;另外台湾版还在引擎盖上沿三菱标志引申出一条肌力线,使整个车头显得刚劲有力。 蓝瑟 台湾蓝瑟 东南蓝瑟尾灯为24颗LED,单块扇型尾灯,配以后备箱盖上的装饰性红色反光板。 台湾版尾灯为58颗LED,两块式四原组合尾灯。 蓝瑟 台湾蓝瑟 东南蓝瑟的侧转向灯由菱帅的椭圆造型改为更具动感的刀刃型。台湾版的侧转向灯则集成在后视镜上,此外后视镜还具备了大陆同级车型少有的电动折叠功能。 蓝瑟 台湾蓝瑟 在方向盘上,台湾版配置相当高,各种功能键一应俱全。 蓝瑟 台湾蓝瑟 东南蓝瑟统一配置的手动空调和单碟CD。台湾版配置了7寸屏幕除了播放VCD,还可通过设置在尾箱牌照框上方的摄像头,实现全彩监控倒车,音响则配置前置磁带,后置(尾箱)6碟CD/VCD,此外还配备了可视恒温空调,以及蓝牙通讯系统。 蓝瑟 台湾蓝瑟 台湾蓝瑟配备六挡手自一体变速箱,比东南蓝瑟多一个Ds运动挡位。 蓝瑟 台湾蓝瑟 东南蓝瑟的最高配车型也只是配备了手动调节座椅,而台湾版则配置了无级电调功能。 再对比一下价格: 菱帅 蓝瑟 台湾蓝瑟 目前市场执行价格 7.98-9.98万元 10.28-12.28万元 48.9-54.9万新台币 (折合人民币12.2-13.7万元) * 菱帅价格为目前剩余车辆市售价格,之后东南会保持双品牌战略,同时生产菱帅和蓝瑟,菱帅将以低配主攻8万元以下市场,价格还会进一步走低。 东南蓝瑟由九十年代技术的六代半蓝瑟改进而来的,配以接近国际同步的八代蓝瑟的外形;更有甚者,同期推出的三菱菱绅MPV只是更换了车身标志,方向盘上仍然还是东南鹰头标,未免三菱对自己的品牌过于自信。 与其说三菱给国内用户带来了蓝瑟,还不如说是推出了06款换标菱帅,因为此蓝瑟与国际同步的八代蓝瑟实在相差太远。无论是从底盘,动力,还是丰富的配置都比台湾的八代蓝瑟差了一大截。
惠普2055dn打印机网络连接打印机时出现网口灯不亮,怎么回事?
网线接口是不是松动了,重新连接一下
DNangel意义
DNA.因为大助会因为DNA.问题变成DARK.
HP P2055DN一直显示正在初始化 两个灯(一绿一黄)一直闪烁
hp laserjet P2055dn打印机液晶屏上显示正在初始化 两个灯(一绿一黄)一直闪烁这是打印机无法进入就绪状态,不排除是打印机硬件有问题导致的。1、只连接电源线,数据线都拔掉然后再开机2、可以将打印机初始化试试,但是打印机上之前的所有设置会被清掉,并且硬件有问题的情况下,初始化后有可能会造成机器无法启动的问题,以下是初始化方法:关机,按向上箭头和取消键的同时打开打印机,屏幕会出现Permanent Storage init的显示时放手,初始化完成后,打印机恢复到就绪状态。3、上面的方法操作后机器还是不能就绪,不排除机器硬件有问题了,建议您联系当地维修中心,由专业的维修人员帮您现场检查维修一下。您可以通过以下链接:http://www8.hp.com/cn/zh/support-drivers/esupport/ascpps.html查询当地的维修中心联系方式
数l列题 已知 Dn-bDn-1=a(Dn-1-bDn-2) 求 Dn的通项
若a,b都不为零设 an = dn+1 - b*dn则 a1 = d2 - b*d1an = a1 * a^(n-1)dn - b * dn-1 = (d2 - b*d1) * a^(n-2)b * dn-1 - b^2 * dn-2 = (d2 - b*d1)* a^(n-3) * b......b^(n-3) * d3 - b^(n-2) * d2 = (d2-b*d1) * a * b^(n-3)累加dn = (d2 - b*d1)*a*b^(n-3)*(1-(a/b)^n)/(1-a/b) + b^(n-2)*d2若a=0,b不等于0dn = d1 * b^(n-1)若a不等于0,b=0dn = d1 * a^(n-1)若a=0, b=0dn = 0PS: d1 d2 应该是已知的吧
如图,在矩形ABCD中,对角线BD的垂直平分线MN与AD相交于点M,与BD相交于点N,连接BM,DN.
这个是平行线之间两条直线相交的一个性质。其实画图之后很容易知道。平行线和交点位于平行之间的两条直线可以构成两个三角形。由两个内错角相等可以知道两个三角形相似,因此对应的边比例相等。不过这个能不能直接使用就不清楚了。不过我觉得这个证明似乎有些问题。我觉得那里的BM=DM直接由垂直平分线的性质就可以得到了,那样证太麻烦,而且没有找到点子上。你应该由那个比例以及OB=OD得出OM=ON,得对角线互相平分得出四边形是平行四边形,然后由对角线垂直得到菱形
英文系统里中文全是乱码,我玩dnf想打补丁全用不了
我没用过英文系统,但是补丁用的挺熟你下的补丁的名字里面是否有中文存在?实际上你只要把那些中文改成数字就能用了,系统能识别的。不过那样我不觉得是最好的办法个人建议是这样比如说你下载的补丁是这样一个文件:sprite_character_mage_effect蛋疼蛋疼蛋蛋疼.NPK而实际上游戏程序里面就有这样一个文件:sprite_character_mage_effect.NPK那么你可以改成后面这样的名字:sprite_a_character_mage_effect.NPK这样之后就可以用了,而且这样改名之后,你如果某一天觉得补丁看腻了,想删掉,就可以很容易的找出来当然咯,上面说的一切只建立在我个人的经验上,对于是否适用于英文系统,我把握比较大,但没法百分百保证。试试呗,如果还是不行,把你改完名字的文件删掉就可以咯
在如图所示的几何体中,四边形ABCD是菱形,ADNM是矩形,平面ADNM⊥平面ABCD,P为DN的中点. (1)求证:B
(1)见解析(2)E为AB的中点时,有AP∥平面NEC (1)证明:联结AC,因为四边形ABCD是菱形,所以AC⊥BD.又四边形ADNM是矩形,平面ADNM⊥平面ABCD,平面ADNM∩平面ABCD=AD,AM⊥AD,所以AM⊥平面ABCD.因为BD平面ABCD,所以AM⊥BD.因为AC∩AM=A,所以BD⊥平面MAC.又MC平面MAC,所以BD⊥MC.(2)当E为AB的中点时,有AP∥平面NEC.取NC的中点S,联结PS,SE. 因为PS∥DC∥AE,PS=AE= DC,所以四边形APSE是平行四边形,所以AP∥SE.又SE?平面NEC,AP?平面NEC,所以AP∥平面NEC.
奔图P3225DN亮红灯怎么解决?
首先你可以查一下是不是你的那个灯有问题,如果有问题的话建议你换别的。
DN:愿你走过人生的坎坷,从此一路坦途
DN这两个字母似乎和我有不一样的缘分,它是我第一个喜欢的姑娘名字的缩写,同时也是你名字的缩写。 我曾有一件上面写着DN字母的T恤,白色呢子,黑色的字,细细读下去,这是一段故事。 ——前言 遇见DN那天,是来公司签协议,空荡荡的市场部里只坐着一个姑娘,那就是你,笑的灿烂如花,我向你问好,你对着我笑,那一刻,就像笑容融进了骨子里。 那时候,你的微信名字还叫JJ,头像还是那个大大的黄色笑脸表情包。 一切都是那么自然。 直到Y先生的出现,我才知道,缘分在我命运里曾划过一个圈,而今,写了一个句号。 Y先生是我的大学同学,室友,他当时没有合适的工作,问我公司怎么样,我告知他,公司虽小,五脏俱全,人员不多,但却融洽,他来了,却带走了你。 你生日那天,一开始我不知道,只是听公司领导略微提起,所以中午趁着下班时间,去楼下买了个小蛋糕,希望表明自己的心意,却没想阴错阳差,Y先生认为他刚进公司,要搞好关系,学着我也买了一块,从此牵了你的手,而我那句话再也没能说出口。 DN,你可知道,我恨自己当时的不勇敢,明明可以开口,却碍于这样的理由,错过了你,也错过了自己。 前一段时间,你来我的城市找我,陪着你散步在华灯初上的大学校园里,我感叹,世事无常,为何不早点遇见你,而你笑着对我说,可能缘分就是这样,你肯定会遇到命中注定的那个姑娘。 这一刻的你,笑的虽如同初见,但却已淡尽了沧桑。 是啊,已过了两年,Y先生在WX买了房,和你开心的住在一起,这样的日子,或许才是你想要的吧。 打开手机,看到Y先生给我发的微信,CPP去了你的城市散心,照顾好她。 你们依然如此甜蜜,却没想到,我仍未放下,明明你已有归宿,却还在妄想。 Y先生是知道我喜欢你的,因为我和他提过,在他和你表白的那个夜晚,在他欣喜若狂告诉我的时候,我回了一句,你可知道,你抢走了我心里的女孩? 但那时已成定局,我已无力挽回。 五月,夏花般绚烂的季节,我得到了你和Y先生分手的消息。 原因,他劈腿。 DN,你可知道,在你打电话给我,说要删了关于Y先生的一切,包括我的时候,我杀了他的心都有。 抛下手头的工作,匆匆的和领导请了假,我买了晚上最晚的那一班车,来到了你的城市,这是我第一次遇见你的地方,也是埋葬了你和Y先生爱情的地方。 走出车站的那一刻,看到你的一瞬间,我清晰的捕捉到了你脸上的泪痕,对不起,我来晚了,真的,我心疼你,就像被针刺。 我们一起走过古运河的南长街,在星爸爸里促膝长谈,在辛香汇里吃着冰沙,我笑着和你说,别怕,我在,陪你度过这段时间。 但其实心里在想,我还有机会,两年前的阴差阳错,此时此刻还可以弥补,来得及,肯定来得及。 尽管你强颜欢笑,但我却知道,这个笑容和两年前不一样,充满了苦涩和悲伤,而非快乐和甜美。 那两天,我们玩得很开心,你需要发泄,而我需要一个机会,一个再次握住你的机会。 电影院里正在热播记忆大师,我们去看,这一刻我感觉到,你还是你,那个单纯的你,看到杀人的场景会害怕,看到精彩的场景会乐不可支,有两次,我偷偷的牵住了你的手,在你耳边轻轻地说,别怕,有我在,这个片段一点都不可怕,你看嘛。 一面窃喜的同时,一面有受着良心的谴责,在这个节骨眼上,这样是不道德的,这不是你,你不是一向自诩为君子吗,趁虚而入的小人。 DN,如果能再次走进你的生活,重新开始,那我宁愿自己是个小人,彻头彻尾的小人。 一个人要忘记另一个人实在太难了,你努力了两个月,我陪着你聊了两个月,从生活细节,到人生哲学,DN,你却还是忘不了Y先生。 后来我提议,不如出去玩吧,痛痛快快的玩一场。 地点,定在了苏州,因为你说,苏州你熟悉。 你答应我的那一刻,我暗暗窃喜,机会来了,这就是重新开始的机会。 去苏州的前几天,突然忙了起来,学校里正好在准备暑假班,忙的天昏地暗,平日里也少了联系,但我一直在准备,做着去苏州的计划。 你我约定,从不同的城市出发,在观前街相遇,然后直奔苏州乐园,开始一次欢乐之旅。 再见你,明显的,你瘦了,可见这两个月,你吃了多少苦过得多不容易。 我一直都很害怕游乐场,因为恐高,但为了你,我愿意克服,因为在喜欢的人面前,谁都是勇者。 去坐风火流星锤的时候,我跟你说,害怕可以握住我的手,因为我在。 我希望给你这份安全感,却没想到,你紧紧的抓着铁杆,一直没有放手,风呼啸过耳边的时候,我听见你大喊:Y先生,我要忘记你,我要过我自己的生活。 果然,他还在你的记忆里。 我努力的给你讲着好玩的事情,说着生活里的点点滴滴,却没想,你突然说,这里,我和他也走过。 我心里不禁黯然,原来你熟悉苏州,是因为你们来过,走过你们来时的路,想在这里画上句号。 从苏州乐园出来,回酒店休息了会儿,你给我发信息,想去平江区的猫的天空之城,给未来的自己写一封信。 走在姑苏小城里,忽然间下了小雨,我们随着人潮,找到了这个地方。 选好明信片,买好邮票,你我分别写下只言片语,给未来一年后的自己,临到要存放的时候,你和我展颜一笑,不许偷看我的。 这一刻你的笑,好似重新回到了从前。DN,从苏州回来后,我一直在想,或许是我放不下,对你的喜欢,而你现在只希望,能安定的生活,忘记某个人。 昨晚你给我发了一篇文章,是你朋友写的,里面提到了我,X先生。 那一刻我忽然悟了,我和Y先生就像XY轴,相互垂直,当你和Y先生有交集的时候,恰恰和我是平行的,这就是执念吧,尽管你和Y先生已无交错,但我依然还是那根孤独的X轴。 谢谢你,让我遇到你,正如一次回忆,画上了句号。 去苏州之前,我下了一个决定,如果这次和你能回到原点,我一定抛下这里的一切去WX找你,可是这次,我却发现我们之间有很多不一样的地方,就像我无意间说过的一句话,或许朋友比恋人要长久。 而你的希望亦是如此吧。 你和我说,其实我们一开始就不适合。 你和我说,你喜欢一个人,会不顾一切的爱上,见到的时候,就会蹦到他身上。 你和我说,在很多小细节上,你都拒绝了我,那是因为你真的愧疚,明明给不了我什么承诺,就不想去接受我对你的好。 你和我说,不悔梦归处,只恨太匆匆,匆匆的你,匆匆的我,匆匆的Y先生,很多次你都心疼我,越心疼就越内疚,因为你能体会到喜欢一个人有多累,被自己的执念累死。 这首诗送给你,愿你一直记得我,同时也希望走过人生的坎坷,从此一片坦途。 彻悟后,便去水中捞月 沿途花事轻浮 我在起点和终点前两全其美 却无法禅定于子夜琴声 片刻之间 已被一缕清风绣在水面 PS:原诗出处——仓央嘉措
苹果手机序列号DNPSFCWDHG86什么意思。求大神告知
? 徽州女人 ( 2006) ? 将装修进行到底 ( 2004) ? 康熙王朝 ( 2000)? 良心无悔 ( 2009) ? 祈望 ( 2008) ? 天娇 ( 2002)
dn如何渲染输出
点设计 -----属性---有画布大小你设定好了,再渲染
ps pvc dn600和dl铜200*200是什么意思
PVC即聚氯乙烯,它是世界上产量最大的塑料产品之一,价格便宜,应用广泛,聚氯乙烯树脂为白色或浅黄色粉末,单独不能使用,必须经过改性。PVC为无定形结构的白色粉末,支化度较小,对光和热的稳定性差。根据不同的用途可以加入不同的添加剂,聚氯乙烯塑料可呈现不同的物理性能和力学性能。在聚氯乙烯树脂中加入适量的增塑剂,可制成多种硬质、软质和透明制品。PVC树脂粉各型号。在我国其中最为常见的为SG-5,然后就是SG-3、SG-7、SG-8等。那么各个型号是靠什么区分呢,工业上常用粘度或K值表示PVC的平均分子量(或平均聚合度),也就是PVC分子链的长短,来决定并区分树脂的牌号和相应加工参数。树脂的分子量和制品的物理机械性能有关。PVC树脂是一种非结晶的线性高分子化合物,其相对分子质量愈大,粘数就越高分子量越高,制品的拉伸强度、冲击强度、弹性模量越高,但树脂熔体的流动性与可塑性下降。通常用粘数来表示聚合物分子量大小,划分聚合物型号。下面我们来分析一下各个型号的特点:首先是3型的PVC。相对于5型来说,生产3型PVC所需反应时间长、聚合温度高,对辅料的添加要求高,生产成本比5型要高50-100元/吨不等。3型PVC纯度要高、鱼眼少、易吸塑,具有耐高温、绝缘性、制品质地软等特点,主要用于生产软制品如电线电缆、农用薄膜、输送带、日用塑料制品等。再者是SG-7/SG-8与SG-5型的PVC。这三种树脂生产工艺基本相同,生产装置完全一样。其主要差别在于助剂配方、聚合反应温度、反应压力等方面。在反应温度、反应压力方面。SG-8型树脂的已基本达到聚合釜的工作压力极限,反应要求条件较为苛刻,对操作、安全、技术、人员素质等方面要求更加严格,并且树脂质量更加难以控制。在产品质量方面。SG-8与SG-7树脂的主要差异在粘数,其他指标差异不大,在生产上比生产SG-7型树脂危险系数更大。生产成本上SG-8型树脂SG-7型树脂基本相同,会比SG-7型稍微高一点,多数企业表示SG-8成本略高于SG-5,但不同企业成本价差略有差异。需要与其他型号转产的企业表示,SG-8型成本要略高于SG-5型100-150元/吨之间,但有专线生产的企业表示SG-8与SG-5成本相差不大。PVC的应用范围较为广泛,因需求不同而采用不同的型号。例如:SG5(K-65、S1000)应用于管材、型材、板材等,而SG3(K-70、S1300)多为软质品多应用于制造软管、电线电缆、薄膜、鞋材、玩具、汽车配件。SG7、SG8(K-60、S800、S700)则多用于制造管件、片材、容器等。原则上说,型号越高,产品硬度越大。
DN公顷直径的意思,,还有PN,PS,PT的关系,PN公顷压力,PS实验压力,PT工作压力
钢管公称压力用PN表示,钢管工作压力用PT表示,钢管设计压力用PE表示,钢管试验压力用PS表示,试验压力>公称压力>设计压力>工作压力。
dn怎么导出jpg格式
Adobe Photoshop转换格式步骤: 1、打开Photoshop软件。 2、把DNG格式的照片直接拉进PS中。 3、打开图片后,点击PS左上角的文件,再点击储存为。 4、储存的时候,选择JPEG格式。 5、选择格式之后,点击保存就可以了。
dn新建看不到画布
dn新建看不到画布有以下方法。1、首先,打开PS,然后打开一个有很多组的PSD文件。2、选择移动工具后,在图层栏选择图层组7,直接拖到新建画布上去。移动工具没有选择自动选择,这样鼠标左键点住要移动的图层组7的任意位置才可以拖过去,记得是鼠标左键点住不松手,不是点击。3、选择了自动选择,这里在自动选择后面选择的是组,直接拖过去。4、在自动选择后面选择的是图层,拖的时候就要按住键盘的CTRL键,然后鼠标左键点住要移动的图层组7的任意位置拖过去。5、鼠标右键点击,找到复制组,再点击。6、在文档里找到新建画布的画布,点击确定,图层组7就移动(复制)到新建画布里了。
管子上标有pN,DN,D代表什么意思?
PN 是可受压力 DN 是外径 D就是内径
改为同义句1.The basket is full of flowers → 2.Toms didn‘t breakfast and went school in a huryy→
1.The basket is full of flowers. → The basket is filled with flowers.2.Toms didn"t have breakfast and went to school in a hurry. → Tom hurried to school without (having) breakfast.注:( )表示可以省略不写。
农杆菌转化法是将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,T-DNA具有可整合到受体细胞染色体DNA上
靠最旁边的基因就可以了,同源重组
杆菌转化法仅仅是T-DNA进入受体细胞?农杆菌是否也进入受体细胞?
选B.农杆菌只是在细胞外注入T-DNA,不会进入细胞。
如何测定重组DNA在受体细胞中的拷贝数
主要方法:【1】导入植物受体细胞:(1)农杆菌转化法。农杆菌是土壤中的一种微生物,在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力.农杆菌进入植物细胞后,其Ti质粒上的T-DNA会转移到受体细胞染色体的DNA上,是目的基因进入植物细胞。(2)花粉管通道法:在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道,将外源DNA导入受精卵细胞,并进一步地被整合到受体细胞的基因组中,随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。该方法于80年代初期由我国学者周光宇提出,我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株,技术简单,不需要装备精良的实验室,常规育种工作者易于掌握。(3)基因枪法:该法又称粒子轰击(particle bombardment),高速粒子喷射技术(High-velocity particle microprojection)或基因枪轰击技术(gene gun bombardment),是由美国Cornell大学生物化学系John.C.Sanford等于1983年研究成功。主要适用于单子叶植物。但转化效率较低。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒(金粒或钨粒),将DNA吸附在表面,以一定的速度射进植物细胞,由于小颗粒穿透力强,故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组,从而实现稳定转化的目的。【2】导入动物受体细胞:显微注射法:显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearrangement)、缺失(deletion)、复制(duplication)或易位(translocation)等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。【3】导入微生物受体细胞感受态法:先用Ca离子处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境DNA分子的生理状态,这种细胞为感受态细胞,后将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中,在一定温度下促使感受态细胞吸收DNA分子
常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有几种
常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有几种主要方法:【1】导入植物受体细胞:(1)农杆菌转化法。农杆菌是土壤中的一种微生物,在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力.农杆菌进入植物细胞后,其Ti质粒上的T-DNA会转移到受体细胞染色体的DNA上,是目的基因进入植物细胞。(2)花粉管通道法:在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道,将外源DNA导入受精卵细胞,并进一步地被整合到受体细胞的基因组中,随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。该方法于80年代初期由我国学者周光宇提出,我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株,技术简单,不需要装备精良的实验室,常规育种工作者易于掌握。(3)基因枪法:该法又称粒子轰击(particle bombardment),高速粒子喷射技术(High-velocity particle microprojection)或基因枪轰击技术(gene gun bombardment),是由美国Cornell大学生物化学系John.C.Sanford等于1983年研究成功。主要适用于单子叶植物。但转化效率较低。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒(金粒或钨粒),将DNA吸附在表面,以一定的速度射进植物细胞,由于小颗粒穿透力强,故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组,从而实现稳定转化的目的。【2】导入动物受体细胞:显微注射法:显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearrangement)、缺失(deletion)、复制(duplication)或易位(translocation)等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。【3】导入微生物受体细胞感受态法:先用Ca离子处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境DNA分子的生理状态,这种细胞为感受态细胞,后将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中,在一定温度下促使感受态细胞吸收DNA分子
农杆菌转化法的步骤中T-DNA是怎么进入受体细胞的
通过侵染植物伤口进入细胞
农杆菌转化法的步骤中T-DNA是怎么进入受体细胞的
根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti(Tumour inducing)质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA(Transferring DNA),农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代,这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。科研人员将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后通过细胞和组织培养技术,再生出转基因植株。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中,近年来,农杆菌介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用。
农杆菌转化法的步骤中T-DNA是怎么进入受体细胞的
人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后通过细胞和组织培养技术,再生出转基因植株.根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中.因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系.
将dna分子导入细菌细胞的方法有哪几种
主要方法:【1】导入植物受体细胞:(1)农杆菌转化法。农杆菌是土壤中的一种微生物,在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力.农杆菌进入植物细胞后,其Ti质粒上的T-DNA会转移到受体细胞染色体的DNA上,是目的基因进入植物细胞。(2)花粉管通道法:在授粉后向子房含目的基因的DNA溶液,利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道,将外源DNA导入受精卵细胞,并进一步地被整合到受体细胞的基因组中,随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。该方法于80年代初期由我国学者周光宇提出,我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株,技术简单,不需要装备精良的实验室,常规育种工作者易于掌握。(3)基因枪法:该法又称粒子轰击(particle bombardment),高速粒子喷射技术(High-velocity particle microprojection)或基因枪轰击技术(gene gun bombardment),是由美国Cornell大学生物化学系John.C.Sanford等于1983年研究成功。主要适用于单子叶植物。但转化效率较低。基因枪根据动力系统可分为火引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒(金粒或钨粒),将DNA吸附在表面,以一定的速度射进植物细胞,由于小颗粒穿透力强,故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组,从而实现稳定转化的目的。【2】导入动物受体细胞:显微法:显微法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量针,将外源基因片段直接到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearrangement)、缺失(deletion)、复制(duplication)或易位(translocation)等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。【3】导入微生物受体细胞感受态法:先用Ca离子处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境DNA分子的生理状态,这种细胞为感受态细胞,后将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中,在一定温度下促使感受态细胞吸收DNA分子
高中生物,写tdna可以吗
注意,人家问得是“耐盐基因的载体”,这一载体通常考虑质粒。再来看看农杆菌转化法的原理:农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物和裸子植物的受伤部位(受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞),并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti(Tumour inducing)质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA(Transferring DNA),农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代,这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。科研人员将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后通过细胞和组织培养技术,再生出转基因植株。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中,近年来,农杆菌介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用。
请问,有人知道这个网站http://7758258.w32.cndns.com/seng/1.htm上所说的活动么?
告诉你一个方法你试一试 在腾讯网上 能不能进入这个网站在可口可乐网上能不能进入这个网站如果不能 那就是假的 我看这是一个假冒的 官方网站而且和官方网站相连 我说你可能不信 你可以自己试一试
DNF可以用TLE符号么(就是昵称右上角那个小的tel)怎么打?
可以的 本人江苏一剑圣角色就用的
光伏材料中TPT,EVA,PVB,PET,DNP有什么区别
1、PVB与EVA EVA 需要两层;通过层压机高温加压,冷却后即为一体,是起固定和粘接作用。PVB是建筑材料,耐候性好很多,但是价格也是EVA的3倍以上。EVA是单晶硅封装主流,对于非晶硅而言,我们选择PVB来封装。2、TPT、PET、DNP区别。 为了使太阳能电池保持最佳工作状态并维持25年的使用寿命,所用背板材料必须具有抗紫外线、水汽阻隔、耐气候等特性。TPT、PET、DNP都只是太阳能电池背膜的一种代名词而已,对太阳电池起到很好的保护作用。 太阳电池背膜主要分为含氟背膜与不含氟背膜两大类。其中含氟背膜又分双面含氟(如TPT)与单面含氟(如TPE)两种;而不含氟的背膜则多通过胶粘剂将多层PET胶粘复合而成。 TPT是是指使用杜邦公司的TEDLAR(商品名)PVF膜作为太阳能背膜的两面,中间加上一层透明的PET进行复合,即TEDLAR+PET+TEDLAR,因此得名TPT。 通过胶粘剂将多层PET胶粘复合而成的不含氟背膜从材料本身特性上就无法满足商用晶硅太阳电池组件25年的湿热、干热、紫外等环境考验与使用要求,也就很难适合用于晶硅太阳电池组件的封装。 DNP背板最外层采用了具有优秀耐水性的PET,然后是DNP独有的高度耐久性粘结剂贴层,最终实现了产品优秀的耐久性能。一般企业用的是EVA+PET。
45 ELL,WELD,BW,R=1.5DN,Q235B,HG/T21631-II,S-STD 管件的东西,怎么翻译啊!
45度弯头,ell是ellbow的缩写;BW是 butt weld的缩写,意思是对接焊缝;R=1.5DN是说弯头的曲率半径是公称通径的1.5倍,材料为Q235B;后边的我就不会了,不好意思。
蒸馏水、双蒸水、去离子水、超纯水、无菌水、DEPC水、无DNase与RNase
蒸馏水:distilled water, dH2O,用蒸馏方法得到的水,离子、有机物很少; 双蒸水:double distilled water,蒸馏两遍的水,离子、有机物比蒸馏水更少; 去离子水:deionized water,diH2O,用离子交换树脂去掉了大部分离子,但有机物等仍然存在; 成本:dd水>蒸馏水>去离子水纯净度Ultrapure water, 超纯水:UP水,去离子水、蒸馏水再加过滤、反渗透等方法去除几乎所有非水离子和有机物等。良好的超纯水可以代替甚至超过ddHO; 无菌水:通过各种方法灭菌后得到的水,蒸馏水、dd水、超纯水处理过程中是无菌的,但所有水随着储存时间的延长、器材使用时间的延长和处理不当,都可能重新滋生菌; DEPC水:是用DEPC(diethyl pyrocarbonate)处理过并经过高温高压灭菌的超纯水,不含DNA、RNA和蛋白质; 无DNase与Rnase:无RNase水,通过各种方法过滤或灭活了RNase的水, DEPC水是一种无RNase水。
dnf里能用另外一个QQ号上的Q币往这个号上冲点卷么?
可以,但是上面回答有问题,商城不可以的,必须加好友7天然后用赠送系统赠送,根本不是用qb给另外一个号冲点卷.正确的方式是登陆官方网站,点充值页面,登陆号上有qq币的账号,再在qbq点冲点卷页面填上要冲给的账号就可以给填写的账号冲点卷了.