dn

mgb.jdng是乔丹的

这两条款式的区别基本上有个小小的改动，基本上还是没有太大的级别。

WDM(Win32 Driver Model)，即Win32驱动程序模型，是Microsoft力推的全新驱动程序模式，旨在通过提供一种灵活的方式来简化驱动程序的开发。在实现对新硬件的支持上，减少并降低了所必须开发的驱动程序的数量和复杂性。除了通用的平台服务和扩展外，WDM还实现了一个模块化的、分层次的微型驱动程序结构。 WDM驱动的主要特点是可以让不支持多音频流的声卡支持多音频流，不使用音频线直接听音乐CD等。DS好像是介于主机和音箱之间的解码装置～还有什么样的声卡是输入WDN？ 选购声卡的时候，上面会标注声卡的参数～直接看就可以了。。

大喊大叫大家记得记得

这些电泳实验时常用的Marker：电泳时和目的片段一起跑胶，同maker片段位置相近的DNA大小相当。DNA：脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic acid的缩写），又称去氧核糖核酸，是染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。EB（溴化乙锭）：含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团，它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用；在凝胶成像仪中呈现紫色，进而判断目的片段大小等。Loading buffer：缓冲液里的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用，显示电泳的进程，以便我们适时终止电泳；缓冲液里的甘油成分可以加大样品密度，使样品密度大于TAE，从而沉降到点样孔中，防止样品飘出点样孔。

电泳时marker选择方法：如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比较合适.如果分子量很大,例如在几k,就可能会选择向lamda HindIII这样最大到23K的marker.否则凝胶浓度不合适,marker条带分不开,影响对你目标分子分子量的判断.以前我们在实验室用得最多的是2000,和15000的marker,能覆盖大部分分子量的检测.100bp DNA ladder是由10条PCR扩增片段混合而成的。

不是在样品里加marker，marker是一些标准长度的DNA，加在样品旁边的空里，给样品的DNA长度做一个比对

PCR实验本身中不需要加入marker,但是在PCR过后跑电泳的时候需要加入marker.用来对比PCR产物的大小,看看产物的电泳条带是不是符合你的预期的。PCR中加marker的原因：marker是人为的把一系列已知大小的DNA（或已知质量的蛋白,当然PCR中用的是DNAmarker不是蛋白marker）混合在一起,在电泳的时候对照用.跑完电泳之后,会看到marker的有几条清楚的条带,而每条的大小都是可以在这个marker的说明书上查到的.所以,条带对照,就大体知道你需要的条带的大小范围了。PCR：PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5"-3")的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。marker：标记（Marker），染色体上一个可以被识别的区域（比如限制性内切酶的酶切点，基因的位置等）。标记的遗传能够被检测出来。标记可以是染色体上有表达功能的部分（比如基因），也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分。

DNA标签 就是做了标记的DNA

1. marker是分子量标准 你要知道电泳时 分子量越小的跑得越快 这样的你的酶切产物电泳后形成的条带 就可以对照marker知道是多大分子量的了2. loading dye 一般用溴酚蓝或二甲苯青 和混在上样缓冲液里 和 样品一起点到点样孔中，电泳过程中 dye也会往前移动。在特定浓度的凝胶里 dye的迁移率会和特定的分子量dna速度一样。目的是为了知道电泳跑到什么时候可以停止，起指示作用的。 否则一大块胶 没有指示dye，你也不知道改跑到什么时候 还得跑跑就得紫外照照

蛋白marker是用于蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳中衡量样品分子量大小的标尺，其中混合有已知分子量的蛋白，通过电泳条带所对应的蛋白marker的区间来判断分子量。同理DNA Ladder是用于核酸琼脂糖凝胶电泳衡量样品分子量大小的标尺，用法同蛋白marker。

一般来说，不行如果琼脂糖凝胶电泳，蛋白marker完全不能替代DNAmarker如果是聚丙烯凝胶电泳，蛋白marker也应该完全不能替代DNAmarker，因为DNA用的聚丙烯凝胶的浓度和蛋白用的浓度差别挺大的，且蛋白电泳时一般还是两层不同浓度的凝胶；而且电泳的缓冲液不同。望采纳！

PCR实验本身中不需要加入marker,但是在PCR过后跑电泳的时候需要加入marker.用来对比PCR产物的大小,看看产物的电泳条带是不是符合你的预期的。PCR中加marker的原因：marker是人为的把一系列已知大小的DNA（或已知质量的蛋白,当然PCR中用的是DNAmarker不是蛋白marker）混合在一起,在电泳的时候对照用.跑完电泳之后,会看到marker的有几条清楚的条带,而每条的大小都是可以在这个marker的说明书上查到的.所以,条带对照,就大体知道你需要的条带的大小范围了。PCR：PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5"-3")的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。marker：标记（Marker），染色体上一个可以被识别的区域（比如限制性内切酶的酶切点，基因的位置等）。标记的遗传能够被检测出来。标记可以是染色体上有表达功能的部分（比如基因），也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分。

电泳时marker选择方法：如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比较合适.如果分子量很大,例如在几k,就可能会选择向lamda HindIII这样最大到23K的marker.否则凝胶浓度不合适,marker条带分不开,影响对你目标分子分子量的判断.以前我们在实验室用得最多的是2000,和15000的marker,能覆盖大部分分子量的检测.100bp DNA ladder是由10条PCR扩增片段混合而成的。

哪里来的词？DNF的技能不都是用中文的么？我猜这个应该是漫游的技能，“表演时间”很有可能是疯狂屠戮

在6KV和10KV等级中变压器一般就2种 dyn11和yy0 35KV及以上的是ynd11的多 主要原因是我国在低压电（380、220V系统）的安全规范中要求中性点必须接地，所以在常规10KV/0.4kv的变压器400v侧肯定是yn接线方式，明白了吗。

Temper用于硬度是指回火后硬度，Hardness是原来硬度。 Hardness 也可以是指淬火后硬度，也就是硬化工艺。

我滴嗨！！

是想问这条命令在交换机下的意思吗？-------------------------------------------------------------dns resolve命令用来开启动态域名解析功能。undo dns resolve命令用来关闭动态域名解析功能。缺省情况下，动态域名解析功能处于关闭状态。需要注意的是，本命令既用于IPv4 DNS，又用于IPv6 DNS。----------------------------------------------

都不是 56k那是调制解调技术的早期产品,通过电话线中的模拟信号传递,在通过程控交换机处理;而现在的ADSL部分只是同过电话线传递, 终端进行信号分离不经过程控交换机,可以电话和上网两不误 adsl----asdl分离---电话线----adsl分离---www _________| ___________________| _________电话机 ____________程控交换---电话网早期的56k已经淘汰了 被ADSL代替

可能是吧

pcr扩增dna实验报告结果分析是延伸”三步反应的多次循环，使DNA片段在数量上呈指数增加，从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段。在环境检测中，靶核酸序列往往存在于—个复杂的混合物如细胞提取液中，且含量很低。利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5"-3")的方向合成互补链。实验分析PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性最好的定量方法，已得到全世界的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。以上内容参考：百度百科——聚合酶链式反应（ PCR扩增）

什么是ADSL中国电信宽带ADSL业务是一种利用现有普通电话线，为您提供高速数据传输的宽带接入业务。******ISDN :ISDN（Integrated Service Digital Network，整合服务数字网络）是一种应用了10年的数字电话连结系统。这一系统可以让整个世界的点对点连结同时进行数据传输。ISDN是最早为人们接受的宽带上网方式，除了具备 128Kbps的传输速率外，ISDN 也能让使用者一边上网，一边讲电话。这对于上网成痴，但电话也很多的使用者而言，提供了很大的吸引力。ISDN 的最早概念是在1972年由 CCITT（Consultative Committee for International Telephone and Telegraph）组织正式提出，普遍应用则是随后四、五年间的事。它的目的在于利用同一通信网络，提供使用者多样化的服务，并解决多项服务同步并行的问题。简单的说，就是让使用者可以用一条ISDN 电话线同时上网、打电话或是传送影像等。由于价格中等，ISDN 可以说是最早进入个人宽带上网的服务。ISDN 电话线和一般家用电话最大的不同点在于它是"数字"的，而一般家用电话线则是"模拟"的。正因为使用“数字”传输，除了具有比一般家用电话线较快的传输速率外，即使在打一般语音电话时，也能享受更多的附加服务，例如来电显示、通话时间、多方通话等。ISDN 提供了两个数字通道，称之为B 通道。每个B 通道可以提供64Kbps 的传输速率，分开使用时，使用者可以利用一个B 通道连上网际网络，并同时使用另一个B 通道打电话、收发传真等。如果两个B 通道合用，就可以提供128Kbps 的传输速率，这也是ISDN 最快的传输速率。需要注意的，在ISDN技术词汇中，“K”代表1000，而不是通常的计算机词汇中的1024(210)。因此，64 Kbps带宽的通道代表数据传输速率为64,000 bps(比特/秒)。严格说起来，ISDN 不能算是为了解决使用者接入带宽不足而流行的产品，因为其传输速率最快也只有128Kbps 而已。然而除了上网外，有更多的 ISDN 用户是看上它具备语音与资料传输同时使用的特性。因此点对点的通讯是ISDN 相当吃香的范畴，例如跨县市公司的视讯会议系统、医院的远程医疗系统或是学校的远程教学等。****PSTN:公共交换电话网络（PSTN）是是一种全球语音通信电路交换网络，包括商业的和政府拥有的。它也指简单老式电话业务（POTS）。它是自Alexander Graham Bell发明电话以来所有的电路交换式电话网络的集合。如今，除了使用者和本地电话总机之间的最后连接部分，公共交换电话网络在技术上已经实现了完全的数字化。在和因特网的关系上，PSTN提供了因特网相当一部分的长距离基础设施。因特网服务供应商（ISPS）为了使用PSTN的长距离基础设施，以及在众多使用者之间通过信息交换来共享电路，需要付给设备拥有者费用。这样因特网的用户就只需要对因特网服务供应商付费。

百度知道上都有！isdn http://baike.baidu.com/view/31449.html?wtp=tt pstn http://baike.baidu.com/view/50639.html?wtp=tt adsl http://baike.baidu.com/view/659.html?wtp=tt hfc http://baike.baidu.com/view/74091.html?wtp=tt FTTB http://baike.baidu.com/view/59391.html?wtp=tt

现在普遍采用的是ADSL。PSTN是指打电话的网，ISDN由于速度太慢现在已经不采用了。

RNA：艾滋病病毒，烟花草病毒，SARS 病毒DNA：狂犬病病毒

MYB转录因子以保守的DNA结合域为共同特征,是植物最大的转录因子家族之一,广泛参与植物代谢调控。本文根据植物中MYB转录因子的DNA保守结构域,通过RT-PCR和RACE的方法从大豆品种吉林3号的叶片中分离得到了2个MYB基因GmMYBJ6和GmMYBJ7,并对其结构特征和表达特性进行了分析鉴定。基因组DNA序列分析表明,两个基因都含有两个内含子;酵母系统检测表明,两个基因均具有转录激活活性;β-半乳糖甘酶活性分析表明,内含子的存在使两个基因的转录激活活性明显降低;实时荧光定量PCR检测结果显示,GmMYBJ6在大豆中的表达受ABA、GA3和NAA的诱导,而GmMYBJ7的表达则受ABA和NAA的诱导;半定量RT-PCR分析表明,两个基因在大豆的根、茎、叶、花和未成熟种子中均有表达。GmMYBJ6和GmMYBJ7为典型的R2R3-MYB转录因子新基因;他们在大豆中的表达可能与ABA和NAA的信号转导途径有关。（附加：老兄，你的问题好难啊！！）

pstn和isdn是两个不同的概念，pstn是一种传输层协议，而isdn是一种网络层协议。因此，在pstn的基础上只能实现isdn，这是不正确的。实际上，通信系统由多个层次组成，包括物理层、数据链路层、网络层、传输层和应用层。不同层次的协议分别负责不同的功能，如物理层负责数据的传输和物理连接的建立，数据链路层负责数据的封装、解封装和帧检错等，网络层负责数据的传输和路由选择等，传输层负责数据的可靠传输和流量控制等，应用层负责数据的处理和应用逻辑的实现。因此，在实际的通信系统中，通常会采用多层协议的设计，以实现更加灵活和可靠的通信系统。同时，不同层次的协议也可以相互配合，以实现更加复杂和高效的通信功能。

口蘑大陆特么的

TAE中酸是乙酸而TBE 中酸是硼酸他们的区别在于TAE缓冲容量小，但是溶解度大，易于储存TBE缓冲容量大，但是溶解度小，不易长期储存，易产生沉淀。这2中缓冲液中，TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较他两种缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TBE当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用，并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收电泳中使用。 根据片段的不同选择不同的配胶可以达到更好的效果

TAE是使用最广泛的缓冲液。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小，长时间电泳（如过夜）不可选用，除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。就看你的DNA样品的片段大小和实验的时间问题来综合选择了

QPalette pal; pal.setColor(QPalette::WindowText, QColor(0,255,0)); lcdNumber->setPalette(pal);关键点是QPalette::WindowText，我也是试了好久才发现的，这里的WindoText换成其他就不行……希望对你有帮助。

召唤少吧，元素魔道多些 力法不多难练

歌曲名:Get Low歌手:Sydney Samson专辑:F*** Me, I"m Famous 2012Lil Jon & The Eastside Boyz Ft. Elephant Man, Busta Rhymes & Ying Yang Twins - Get Low (Remix)Elephant Man: Eastside Boyz (Yep! Atlanta Georgia) mayday!!!Good to go (The dirty south again!)Elephant Man, Likkle Jon, Busta RhymesAlright, weh we fi do wid di dance!!!!(Give dem di dance now, buss di dance now)Shizzle, Jamaica, New York, Eastside Boyz (You know come on!)Aiyyo Likkle Jon, Busta! Oonu ready fi tek di dancefloor, alrightThis a now fi do then, do thenDance and tek it to dem, to demSignal di plane now fi do then, do thenDance and tek it to dem, to demPon di river yuh fi do then, do thenDance and tek it to dem, to demDi higher level yuh fi do then, do thenYuh dance and tek it to dem, to dem, come on!!!!Kaine:3,6,9 damn she"s fine hopin she can sock it to me 1 mo timeGet low, Get low , Get low, Get low, Get low, Get low, Get lowD-Roc & Kaine:To the window, to the wall, (to dat wall)Till the sweat drop down and fall (AND FALL)To all them females crawl (crawl)To all skeet skeet skeet skeet skeet skeet! to all skeet skeet goddam (Goddam)To all skeet skeet skeet skeet skeet skeet! to all skeet skeet goddam (Goddam)Lil" Jon:Hey! Hey! Let me see you get, a get low (You Scared!)Turn your body yo the, to the flo" (You scared!)Let me see you get, a get low (You Scared!)Turn your body to the, to the flo" (You scared!)Shake that thang girl, shake it fast girlShake that thang to the left to the right girlShake that thang girl, shake it fast girlShake that thang to the left to the right girlLet me see you just, back, back, back it up (Awww shooo!!!)Back, back, back it up (Awww shooo!!!)Back, back, back it up (Awww shooo!!!)Back, back, back it up (Awww shooo!!!)Let me see you just stop (Oh!) wiggle with it (Yeah!)Stop (Oh!) wiggle with it (Yeah!)Stop (Oh!) wiggle with it (Yeah!)Stop (Oh!) wiggle with it (Yeah!)Elephant Man:Gal shake up yuh booty, when yuh shake it up yuh get mi rudeyWouldn"t mind fi see yuh get nudeyMiss cutie cutie, love di way yuh wine and how yuh moveyDem gal deh can wine trust me and dem waistline groovyWine around like a blue movieTek it to dem Keisha and SusieHey! Do di pon di river do di pon di river hey!Do di higher level do di higher level hey!Signal di plane signal di plane hey!Alright give dem a run just give dem a run hey!Shake yuh booty yuh fi shake it slowRotate like di tire dem a Texaco (Whoa)Everywhere yuh go man just step pon yuh KsoJust fi get yuh ting dem a promise yuh pesoDem a seh yuh hype and wonder how yuh stay soMake monkey face, gal go down slowTic tac toe we got dem all in a rowGet rich and get mad nuh bodda hold him JoeBig up Danger Voo dem a tornadoDo di dance, alright, come onKaine:3,6,9 damn she"s fine hopin she can sock it to me 1 mo timeGet low, Get low , Get low, Get low, Get low, Get low, Get lowD-Roc & Kaine:To the window, to the wall, (to dat wall)Till the sweat drop down and fall (AND FALL)To all them females crawl (crawl)To all skeet skeet skeet skeet skeet skeet! to all skeet skeet goddam (Goddam)To all skeet skeet skeet skeet skeet skeet!to all skeet skeet goddam (Goddam)Busta Rhymes (Elephant Man):I"m comin through with a thick crew playa (Waddup!)You can"t believe I"m on this (What!) too playa (Waddup!)I"m a sit and watch your girl put it on me (Waddup!)I love it when you got your ass clappin for me (Waddup!)Your big ass cover the back of my harley (Waddup!)Ass from the front to the back of the party (Waddup!)That"s right (Yeah girl) that"s it (Come on!)Get low shorty shake that (Waddup!) (Come on!)If you ain"t got learned get it down packed mamiWith all that ass you got sittin on your back mamiNow all my shorties need to get in lineI said because I"m only gonna tell you one more timeCause if that ass kind of stocky and fatKaine & D-Rok:3,6,9 damn she"s fine hopin she can sock it to me 1 mo timeGet low, Get low , Get low, Get low, Get low, Get low, Get lowD-Roc & Kaine:To the window, to the wall, (to dat wall)Till the sweat drop down and fall (AND FALL)To all them females crawl (crawl)To all skeet skeet skeet skeet skeet skeet!to all skeet skeet goddam (Goddam)To all skeet skeet skeet skeet skeet skeet!to all skeet skeet goddam (Goddam)Elephant Man:This a now fi do then, do thenDance and tek it to dem, to demSignal di plane now fi do then, do thenDance and tek it to dem, to demPon di river yuh fi do then, do thenEndLil Jon & The Eastside Boyz Ft. Elephant Man, Busta Rhymes & Ying Yang Twins - Get Low (Remix)http://music.baidu.com/song/14950477

您好感谢您选择HP产品有线连线，网络设置方法：连接网线，点击屏幕第一行第二个选项（设置选项）-网络设置-ipv4配置方法-手动-设置ip即可。如果有疑问，请及时追问，如果此回答能帮助到您，请及时采纳，谢谢。

TdR 是细胞DNA合成不可缺少的前体, 但向培养基中加入过量的TdR, 能形成过量的三磷酸腺苷, 后者能负反馈抑制其他核苷的磷酸化, 从而抑制DNA合成。

前几天我也为这个问题困扰 现在解决了 tdr是合成胸腺嘧叮核苷酸的原料 但是在高浓度时反而抑制核苷酸的合成 脉冲标记用的是低浓度的 阻断用的是高浓度的 明白了吧 顺便问一下你也考细胞吗

如何选择最佳的全血DNA、RNA提取方法？从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了，提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析，可供选择的方法非常多，乱花渐欲迷人眼，如何选择最适合的方法，成了很多人实验开始前最难以抉择的事情。我们从两个方面，层层剥茧，分析最佳的实验方法。1、 全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝剂的采血管进行采血，抗凝剂一般有EDTA和肝素，EDTA更好一些，不会影响下游的反应，如果没有采血管，也可以自己添加抗凝剂EDTA，提前准备0.04M的EDTA溶液，每5ml的血液中加入0.4ml配好的EDTA溶液，颠倒混匀即可。保存于-20℃至-80℃，一般2-3年内均可以提取，保存时间越短，提取的质量越高，最好在2个月内提取。II. DNA提取方法的选择：全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两种（比如Qiagen、Promega、Bioteke；摒弃酚氯仿手提的方法，时间长毒性大），原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了N多型号，让人不知如何去选择，但从原理和操作步骤看，基本就是离心柱和溶液型两种。一般来说，离心柱（DP1801）的提取纯度高一些，但是处理量小（0.1-1ml）、得率略低；溶液型(DP2101或DP2201)的提取量大（1-10ml）得率也高于离心柱。医院的血液标本一般在2ml以上，一般选择溶液型的方法提取.在说到国产和进口差别的时候，很多人以为进口一定比国产的好，我们觉得没有最好，只有更好！在不断的进行试验优化之后，全血基因组DNA提取试剂盒DP2101或DP2201开创了第三代技术，不需要蛋白酶K消化，进口的都是要借助蛋白酶K的啊！DP2101或DP2201减少了蛋白酶K现配现用的麻烦和消化的时间，而且提取量和稳定性更好。III. 非抗凝血（凝固血）能否提取？答案是肯定的，而且一点都不麻烦，提取效果和抗凝血没有差别！在你找遍了进口的所有品牌都找不到后，回过头来您才发现原来他就在身边，百泰克的凝固血基因组DNA提取试剂盒已经有很多忠实的用户。2、 全血RNA如何提取I. 全血RNA提取过程哪些是RNA降解的因素？全血中RNA酶是非常丰富的，RNA在没有保护的状态下很容易降解！哪些是状态RNA不受保护呢，比如红细胞裂解液裂解红细胞的过程，红细胞裂解液是低浓度的平衡盐溶液，没有抑制RNase的成份，这时候RNA不受保护；DNA酶消化的时候RNA也不受保护，这个时候也没有抑制RNase的成份。II. 什么样的提取方法更好？我们在选择方法的时候要倾向于对RNA全程有保护的方法！一般的方法都是先用红细胞裂解液裂解红细胞，然后从白细胞提取核酸，还要经过DNA酶的消化去除DNA，这种并不是最好的方法，过程中有很多RNA降解的因素。所以直接裂解法是最好的方法，将采集的血液迅速加入3倍体积的裂解液RLS——RP4001血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)的裂解液，迅速颠倒混匀。裂解液RLS含有强烈的蛋白变性剂，能迅速变性蛋白，是RNase变性，不能对RNA降解。裂解后的混合液还可以用来运输，以避免RNA降解，这个方法成为博奥生物制作表达谱芯片RNA运输和提取

对原代培养的细胞，可以采用一下方法：非病毒载体，选择比较好的转染试剂，QIAGEN的superfect转染试剂，对原代细胞还可以。采用电转。理论上任何细胞都可以通过电转，不足之处：需要电转仪器，缓冲液非常有讲究，不同细胞条件要自己摸索，细胞电转后，状态很不好。DEAE-葡聚糖：这是早在1965年出现的转染方法。带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体可以结合带负电的DNA分子，使得DNA复合物结合在带负电的细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克，也可能是细胞内吞作用使得DNA复合体进入细胞。DEAE-葡聚糖仅限于瞬时转染，可重复性好，转染时要除掉血清。磷酸钙共沉淀转染：最早在1973年开始采用。氯化钙+DNA+磷酸缓冲液按一定的比例混和，形成极小的磷酸钙-DNA复合物沉淀黏附在细胞膜表面，借助内吞作用进入细胞质。沉淀颗粒的大小和质量对于转染的成功至关重要，pH值、钙离子浓度、DNA浓度、沉淀反应时间、细胞孵育时间乃至各组分加入顺序和混合的方式都可能对结果产生影响，重复性不佳。此法较易得到稳定转染，但转染原代细胞比较困难。电穿孔法：通过短暂的高电场电脉冲处理细胞，沿细胞膜的电压差异会导致细胞膜的暂时穿孔。DNA被认为是穿过孔扩散到细胞内的。电脉冲和场强的优化对于成功的转染非常重要，因为过高的场强和过长的电脉冲时间会不可逆地伤害细胞膜而裂解细胞。理论上说电穿孔法可用于各种细胞，且不需要另外采购特殊试剂，但需要昂贵的电转仪。此法每次转染需要更多的细胞和DNA，因为细胞的死亡率高。每种细胞电转的条件都需要进行多次优化。脂质体法：中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。脂质体法始于1987年，此法的出现使得转染效率、转染的稳定性和可重复性大大提高。阳离子脂质体细胞毒性相对较高，对不同的细胞可能会干扰细胞的代谢。非脂质体的脂质：新一代的脂质体技术，其与DNA结合形成胶束结构而非简单的双层膜结构，使DNA的传递更有效且细胞毒性明显降低。活化的树状聚合物：该聚合物的高度树状分枝形成球形结构，借助每个球体无数活化的氨基末端凝聚在DNA上形成较为致密的结构，并吸附在细胞膜上，经内吞进入细胞。活化的氨基可以调节胞内溶酶体pH值，抑制降解活性，使DNA稳定存在。转染效率高，毒性低，可重复性好。血清的存在能显著提高转染效率。病毒介导的感染：感染需要将目的基因克隆到特定的病毒体系中，经过包装细胞的包装得到改造后的病毒，再进行感染。优点是转染效率特别高，尤其是难以转染的原代细胞、活体细胞。

本来从血浆中提取DNA就不是很容易，要借助提取试剂盒，各种试剂盒之间也存在着差异，我用过的biog系列的DNA提取纯度还是挺高的。

肯定不行,因为从血液中提取的DNA来源于白细胞,只有白细胞才有细胞核,所以血液成分中必须有白细胞,血清中不含血细胞,所以不行.

RNA提取后有没有必要用DNA酶处理主要和你的用途有关。如果仅仅是扩某个基因，那就无所谓。如果是定量RT-PCR，则最好DNA酶处理一下，或者引物需跨exon. 比如用QIAGEN的RNase-free的DNase处理的，不是加了DNase就结束了，为了去除DNase（蛋白）和buffer等可能影响到后期操作的因素，所以酶解了DNA后必须纯化RNA（QIAGEN的纯化柱），这样得到的RNA才用于定量实验。即使这样，在做real-time PCR时都要加一管仅加RNA的作为阴性对照（排除DNA的污染）。

OMEGA 大型质粒提取试剂盒 比较理想是进口的，价格比较便宜，比国内的质量好多了 回收率较qiagen的都高可直接应用于亚克隆，鸟枪法文库制备等研究

冻干的样本，会影响DNA和RNA的提取质量从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了，提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析，可供选择的方法非常多，乱花渐欲迷人眼，如何选择最适合的方法，成了很多人实验开始前最难以抉择的事情。我们从两个方面，层层剥茧，分析最佳的实验方法。 1、 全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝剂的采血管进行采血，抗凝剂一般有EDTA和肝素，EDTA更好一些，不会影响下游的反应，如果没有采血管，也可以自己添加抗凝剂EDTA，提前准备0.04M的EDTA溶液，每5ml的血液中加入0.4ml配好的EDTA溶液，颠倒混匀即可。保存于-20℃至-80℃，一般2-3年内均可以提取，保存时间越短，提取的质量越高，最好在2个月内提取。II. DNA提取方法的选择：全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两种（比如Qiagen、Promega、Bioteke；摒弃酚氯仿手提的方法，时间长毒性大），原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了N多型号，让人不知如何去选择，但从原理和操作步骤看，基本就是离心柱和溶液型两种。一般来说，离心柱（DP1801）的提取纯度高一些，但是处理量小（0.1-1ml）、得率略低；溶液型(DP2101或DP2201)的提取量大（1-10ml）得率也高于离心柱。医院的血液标本一般在2ml以上，一般选择溶液型的方法提取.在说到国产和进口差别的时候，很多人以为进口一定比国产的好，我们觉得没有最好，只有更好！在不断的进行试验优化之后，全血基因组DNA提取试剂盒DP2101或DP2201开创了第三代技术，不需要蛋白酶K消化，进口的都是要借助蛋白酶K的啊！DP2101或DP2201减少了蛋白酶K现配现用的麻烦和消化的时间，而且提取量和稳定性更好。III. 非抗凝血（凝固血）能否提取？答案是肯定的，而且一点都不麻烦，提取效果和抗凝血没有差别！在你找遍了进口的所有品牌都找不到后，回过头来您才发现原来他就在身边，百泰克的凝固血基因组DNA提取试剂盒已经有很多忠实的用户。2、 全血RNA如何提取I. 全血RNA提取过程哪些是RNA降解的因素？全血中RNA酶是非常丰富的，RNA在没有保护的状态下很容易降解！哪些是状态RNA不受保护呢，比如红细胞裂解液裂解红细胞的过程，红细胞裂解液是低浓度的平衡盐溶液，没有抑制RNase的成份，这时候RNA不受保护；DNA酶消化的时候RNA也不受保护，这个时候也没有抑制RNase的成份。II. 什么样的提取方法更好？我们在选择方法的时候要倾向于对RNA全程有保护的方法！一般的方法都是先用红细胞裂解液裂解红细胞，然后从白细胞提取核酸，还要经过DNA酶的消化去除DNA，这种并不是最好的方法，过程中有很多RNA降解的因素。所以直接裂解法是最好的方法，将采集的血液迅速加入3倍体积的裂解液RLS——RP4001血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)的裂解液，迅速颠倒混匀。裂解液RLS含有强烈的蛋白变性剂，能迅速变性蛋白，是RNase变性，不能对RNA降解。

原理：1. DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。准备工作：制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g／mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500 mL烧怀中，注入新鲜的鸡血（约180 mL），用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。（也可以用离心机离心2 min（转速1000转/分）。用吸管吸去上清液。方法步骤：1．提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min2．溶解DNA：3．析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢4．过滤：取黏稠物5．再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。3 min6．过滤：取滤液。7．提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5 min8．DNA的鉴定：沸水浴5min要是其他用途你就在看看七他人的回答好了。

55℃水浴保温15分钟~30分钟

一般提取的就是口腔脱落的细胞，需要注意的是提取前要最少半个小时不能喝水，吃东西，不然会影响提取的效果，提取检测的话，是有专门的试剂盒的，我有用过BIOG，QIAGEN的，效果都还不错。

RNA提取后有没有必要用DNA酶处理主要和你的用途有关。如果仅仅是扩某个基因，那就无所谓。如果是定量RT-PCR，则最好DNA酶处理一下，或者引物需跨exon. 比如用QIAGEN的RNase-free的DNase处理的，不是加了DNase就结束了，为了去除DNase（蛋白）和buffer等可能影响到后期操作的因素，所以酶解了DNA后必须纯化RNA（QIAGEN的纯化柱），这样得到的RNA才用于定量实验。即使这样，在做real-time PCR时都要加一管仅加RNA的作为阴性对照（排除DNA的污染）。

高中生物里边用的方法原理：1. DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。准备工作：制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g／mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500 mL烧怀中，注入新鲜的鸡血（约180 mL），用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。（也可以用离心机离心2 min（转速1000转/分）。用吸管吸去上清液。方法步骤：1．提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min2．溶解DNA：3．析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢4．过滤：取黏稠物5．再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。3 min6．过滤：取滤液。7．提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5 min8．DNA的鉴定：沸水浴5min要是其他用途你就在看看七他人的回答好了。

藻类总DNA提取方法应如何选择如何选择最佳的全血DNA、RNA提取方法？从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了，提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析，可供选择的方法非常多，乱花渐欲迷人眼，如何选择最适合的方法，成了很多人实验开始前最难以抉择的事情。我们从两个方面，层层剥茧，分析最佳的实验方法。1、 全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝剂的采血管进行采血，抗凝剂一般有EDTA和肝素，EDTA更好一些，不会影响下游的反应，如果没有采血管，也可以自己添加抗凝剂EDTA，提前准备0.04M的EDTA溶液，每5ml的血液中加入0.4ml配好的EDTA溶液，颠倒混匀即可。保存于-20℃至-80℃，一般2-3年内均可以提取，保存时间越短，提取的质量越高，最好在2个月内提取。II. DNA提取方法的选择：全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两种（比如Qiagen、Promega、Bioteke；摒弃酚氯仿手提的方法，时间长毒性大），原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了N多型号，让人不知如何去选择，但从原理和操作步骤看，基本就是离心柱和溶液型两种。一般来说，离心柱（DP1801）的提取纯度高一些，但是处理量小（0.1-1ml）、得率略低；溶液型(DP2101或DP2201)的提取量大（1-10ml）得率也高于离心柱。医院的血液标本一般在2ml以上，一般选择溶液型的方法提取.在说到国产和进口差别的时候，很多人以为进口一定比国产的好，我们觉得没有最好，只有更好！在不断的进行试验优化之后，全血基因组DNA提取试剂盒DP2101或DP2201开创了第三代技术，不需要蛋白酶K消化，进口的都是要借助蛋白酶K的啊！DP2101或DP2201减少了蛋白酶K现配现用的麻烦和消化的时间，而且提取量和稳定性更好。III. 非抗凝血（凝固血）能否提取？答案是肯定的，而且一点都不麻烦，提取效果和抗凝血没有差别！在你找遍了进口的所有品牌都找不到后，回过头来您才发现原来他就在身边，百泰克的凝固血基因组DNA提取试剂盒已经有很多忠实的用户。2、 全血RNA如何提取I. 全血RNA提取过程哪些是RNA降解的因素？全血中RNA酶是非常丰富的，RNA在没有保护的状态下很容易降解！哪些是状态RNA不受保护呢，比如红细胞裂解液裂解红细胞的过程，红细胞裂解液是低浓度的平衡盐溶液，没有抑制RNase的成份，这时候RNA不受保护；DNA酶消化的时候RNA也不受保护，这个时候也没有抑制RNase的成份。

透明胶状物很像DNA，你可别丢了。组织DNA比较大，质量好的话就是胶体状

血液游离DNA（又称血液循环DNA）是指血液中游离于细胞外的DNA，其来源主要有三：白细胞崩解释放的DNA、坏死组织特别是肿瘤组织释放入血液的DNA和感染病毒、细菌的DNA。近几年来，随着基因诊断技术的发展，游离核酸的应用价值越来越大，如优生筛查、肿瘤早期诊断、遗传病检测和病原体感染基因检测等。但血液中游离DNA含量一般较低，片段较小，不易提取，这大大影响了游离核酸的基因检测和各种研究的开展。 游离DNA提取方法一般有TRizol方法、离心柱法、磁珠法。其中，Trizol方法与离心柱相比，提取效果相当，但是因其对操作者带来的毒性，现在越来越被弃用。磁珠法比较适合机器自动化提取，如果没有核酸提取仪，只是使用磁力架配套提取，磁珠法的操作就比较麻烦且容易导致样本交叉污染。另外，根据研究，磁珠法的核酸提取得率不如离心柱法。如果要提取的游离核酸的量比较低，最好选择离心柱法。对于游离DNA含量较低的样本或比较珍贵的样本或样本总数不是很多的实验室，首选的核酸提取方法应是离心柱法。 离心柱法游离DNA提取原理主要是样本裂解后，DNA在高盐条件下与硅胶膜结合，再在低盐、高PH值时将DNA从硅胶膜上洗脱下来。面对各种品牌的离心柱法提取试剂盒，哪种才是最适合的呢？目前国内常用的离心柱法游离DNA提取试剂盒有国内品牌Biog、国际品牌Q、国内品牌T等。我们以下就几种游离DNA提取试剂盒进行比较。 [if !supportLists]一、[endif]有较高的提取得率。核酸提取得率的确定，常用的是使用紫外分光光度计的方法。但是，血清、血浆样本中游离核酸含量较低，如果直接用紫外法检测，得出的数值并不准确，而且多次测量的结果会变异很大。关于提取得率，Qiagen的研究数据是1ml正常血浆样本cfDNA得为7.35ng左右，但如果白细胞大量凋亡，血浆中的游离DNA量会有所增加，肿瘤病人血浆中的DNA会大幅增加。有些研究者提取血浆核酸后习惯于先用紫外检测浓度，发现紫外检测不出来或浓度很低时便认为提取失败，放弃后面进一步的实验，其实并不可取。我们可以把紫外读数作为参考，但是不能作为判断得率的唯一标准，最好还是要做个PCR或荧光定量。根据Qiagen公司的实验，血清血浆的量与提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通过增加血清或血浆的量来实现。一般地，做血浆或血清核酸提取，样本量最好在1ml以上。如果1ml或更大量样本得不到满意的检测结果，则应及时考虑更换提取试剂盒。目前国内常用的血浆核酸提取试剂有国际品牌Q、国内品牌T、国产品牌Biog等，我们实验室使用下来，Biog的核酸提取得率较高，1ml肺癌病人血浆样本DNA得率在85ng左右，Q的得率在72ng左右，T的得率在63ng左右，基本上都能满足下游PCR实验的需求。当然，如此低的浓度直接测OD值不太容易，如果使用Nanodrop2000c，其检测下限为2ng/ul。如洗脱液为30ul，则需要1ml左右的血浆才能检测出来。显然，如果是健康人的血浆，1ml血浆的DNA浓度更低，紫外可能根本就检测不出来。因而，血浆DNA提取完成以后，最好直接做PCR，紫外检测的意义不大。 [if !supportLists]二、[endif]提取的核酸纯度高。核酸纯度一般根据OD260/OD280比值来判断。一般说来，试剂盒提取的DNA 其OD260/OD280比值应在1.6--1.8之间。如果提取的DNA溶液OD260/OD280比值小于1.6，通常说明有蛋白质或酚、多糖等的污染。如果提取的DNA溶液OD260/OD280>1.9,则表明有RNA污染。使用Q公司血浆DNA提取试剂盒提取的血浆DNA, OD260/OD280一般在1.7-1.9之间；使用Biog血浆游离DNA提取试剂盒提取的血浆DNA, OD260/OD280一般在1.6-1.9之间，使用T公司血浆DNA提取试剂盒提取的血浆DNA OD260/OD280比值也在1.6-1.9之间。Q公司提取DNA的纯度似乎优于国产试剂，但我们提取的DNA是用于PCR检测，结果并无明显影响。可能因为B公司血浆游离DNA提取试剂盒提取的血浆DNA量得率较高的原因，同样的DNA加样体积（2ul），Biog试剂盒提取的DNA 荧光定量PCR检测结果CT值要小于Q公司试剂盒提取的DNA。 [if !supportLists]三、[endif]操作简便性。操作简便性也是血浆DNA提取试剂选择的一个重要因素。操作过于复杂，不仅费时费力，还容易导致样本间的交叉污染，也容易损失样本。特别是用于临床检测或样本较多情况下的检测，操作复杂如果导致交叉污染会引起误诊，还会影响出检测报告的时间。因而，选用操作简便、流畅的提取试剂盒非常重要。就我们曾经用过的以上三种提取试剂盒来说，Q公司的血浆DNA提取试剂盒提取过程大约30min，从样本处理开始需要个10步骤；T公司血清/血浆游离DNA提取试剂盒整个提取过程需要约40min，从样本开始处理10个步骤；B公司的Biog血浆游离DNA提取试剂盒提取过程大约25min，从样本开始处理8个步骤，B公司的血浆游离DNA提取试剂盒在操作简便性上具有一定优势，更适合于较多样本的检测。据了解，该产品已通过药监局备案，也更适合临床样本的检测。 综合看来，与国外知名品牌相比，国产试剂盒在血浆DNA提取纯度上稍有不足，但在提取得率和操作简便性上基本没有区别，有些品牌还略有优势，可根据实验需求进行选择。对纯度要求较高的实验，可选择Q等国外知名品牌，如果对提取量要求较高或提取后主要进行PCR或分子杂交之类的实验，可考虑选择Biog等国产品牌。

真菌的细胞成分和植物是有差别的，这种专一性的植物DNA提取试剂盒不一定能提好真菌的DNA。如果有条件你最好是买专一性的真菌DNA提取试剂盒。不过植物DNA提取的CTAB法确实可以适用于真菌的DNA提取，但因为真菌菌丝体含有很多多糖，你需要参考下植物DNA提取中除去多糖的方法。一般的话就是提高CTAB抽提液盐离子含量，还有就是在CTAB抽提液中加入一定比例的PVP或者PVPP，浓度1～10%之间都可以，按照实际情况加。

有人用天根的植物RNA提取试剂盒提取过RNA提RNA一般注意：提取前材料的保存（新鲜材料,过夜处理的样品）,提取中对外源性的RNA酶的清除控制（离心管,PCR管,电泳槽,台面等的无RNA酶化处理）,提取后需要-80度保存.其次跑电泳时,注意电泳液最好用新鲜的,核酸染料等诸多因素.细菌总RNA提取试剂盒（ germs islation kit).对于外源性RNA酶的控制外源RNA酶清除剂,避免使用致癌物DEPC的危险方法就可简单操作清除耗材,台面,仪器等的外源RNA酶的降解作用.

植物DNA提取方法方法一：1.取两片幼嫩新鲜叶片，置于预冷的研钵中，倒入适量液氮，迅速研磨成粉末状，随后加入3ml预热的2%CTAB抽提缓冲液和50ul抗氧化剂2-巯基乙醇，继续研磨成略有流动性的糊状或粥状，转入1.5ml的离心管中，于65℃水浴锅中保温约60min。2.待混合物冷却至室温后加入等600ul的CI（氯仿：异戊醇=24：1）溶液混匀，轻轻颠倒离心管几次使管内混合物成乳浊液，常温下10000rpm离心10min,取上清液转入另一干净的离心管中。 3.重复步骤（2）一次。4.取步骤（3）上清液加入2.5倍体积无水乙醇，仔细混匀，-20冰箱30min以上，沉淀DNA 4℃，12000rpm离心10min。5.弃去上层有机溶剂，加500ul75%乙醇洗涤沉淀，4℃下8000rpm离心5min,弃去上清，洗涤沉淀3次。 6.倒置或者37度培养箱烘干。 7.加50ulTE缓冲液溶解DNA，于-20℃冷藏备用。方法二：1. 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液Ⅰ, 60℃水浴预热。2. 植物5-10g, 剪碎, 在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热的离心管中, 剧烈摇动混匀, 60℃水浴保温30-60分钟(时间长,DNA产量高), 不时摇动。3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 颠倒混匀(需带手套, 防止损伤皮肤)，室温下静置5-10分钟, 使水相和有机相分层(必要时可重新混匀)。4. 室温下5000rpm离心5分钟。5. 仔细移取上清液至另一50ml离心管,加入1倍体积异丙醇,混匀,室温下放置片刻即出现絮状DNA沉淀。6. 在1.5mleppendorf中加入1ml TE。用钩状玻璃棒捞出DNA絮团,在干净吸水纸上吸干,转入含TE的离心管中,DNA很快溶解于TE。7. 如DNA不形成絮状沉淀,则可用5000rpm离心5分钟, 再将沉淀移入TE管中。这样收集的沉淀,往往难溶解于TE,可在60℃水浴放置15分钟以上，以帮助溶解。8. 将DNA溶液3000rpm离心5分钟,上清液倒入干净的5ml离心管。9. 加入5μlRNaseA(10μg/μl), 37℃ 10分钟, 除去RNA(RNA对DNA的操作、分析一般无影响，可省略该步骤）。10. 加入1/10体积的3mol/L NaAc及2×体积的冰乙醇,混匀,-20℃放置20分钟左右,DNA形成絮状沉淀。11. 用玻棒捞出DNA沉淀,70%乙醇漂洗,再在干净吸水纸上吸干。12. 将DNA重溶解于1ml TE, -20贮存。13. 取2μlDNA样品在0.7% Agarose胶上电泳, 检测DNA的分子大小。同时取15μl稀释20倍, 测定OD260/OD280, 检测DNA含量及质量。方法三：植物DNA的SDS提取法：试验试剂： 1、研磨缓冲液：称取59.63gNaCl，13.25g柠檬酸三钠，37.2gEDTA－Na分别溶解后合并为一，用0.2mol/L的NaOH调至pH7.0，并定容至1000ml。2、10×SSC溶液：称取87.66gNaCl和44.12g柠檬酸三钠，分别溶解，一起定容至1000ml。3、1×SSC溶液：用10×SSC溶液稀释10倍。4、0.1×SSC溶液：用1×SSC溶液稀释10倍。5、Rnase溶液：用0.14mol/LNaCl溶液配制成25mg/ml的酶液，用1mol/LHCl，pH至5.0，使用前经80℃水浴处理5min（以破坏可能存在的Dnase）。6、氯仿－异戊醇：按24ml氯仿和1ml异戊醇混合。7、5mol/L高氯酸钠溶液：称取NaClO4·H2O 70.23g，先加入少量蒸馏水溶解再容至100ml。8、SDS（十二烷基硫酸钠）化学试剂的重结晶：将SDS放入无水酒精中达到饱和为止，然后在70～80℃的水浴中溶解，趁热过滤，冷却之后即将滤液放入冰箱，待结晶出现再置室温下凉干待用。9、1mol/LHCl。10、0.2mol/LNaOH。11、二苯胺乙醛试剂：1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中，添加1.5ml浓硫酸，装入棕色瓶，贮存暗处，使用时加0.1ml乙醛液〔浓乙醛：H2O＝1：50（V／V）〕。12、1.0mol/L高酸溶液（HClO4）。13、0.05mol/LNaOH。14、DNA标准液：取标准DNA25mg溶于少量0.05mol.L-1NaOH中，再用0.05mol/LNaOH定容至25ml，后用移溶管吸取此液5ml至50ml容量瓶中，加5.0ml1mol/LHClO4，混合冷却后用0.5mol/LHClO4定容至刻度，则得100μg/ml的标准溶液。

原理： 1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。 2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。 3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。 方法步骤： 1．提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min 2．溶解DNA： 3．析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢 4．过滤：取黏稠物 5．再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。3 min 6．过滤：取滤液。 7．提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5 min 8．DNA的鉴定：沸水浴5min 大学

<!DOCTYPE html> <html lang="zh"> <head> <meta charset="UTF-8" /> <meta name="viewport" content="width=device-width, initial-scale=1.0" /> <meta http-equiv="X-UA-Compatible" content="ie=edge" /> <title>Document</title> <!-- 引入样式 --> <link rel="stylesheet" href="https://cdn.jsdelivr.net/npm/vant@2.1/lib/index.css"> <!-- 引入组件 --> <script src="https://cdn.jsdelivr.net/npm/vue/dist/vue.min.js"></script> <script src="https://cdn.jsdelivr.net/npm/vant@2.1/lib/vant.min.js"></script> </head> <body> <div id="app"> <van-button type="default">默认按钮</van-button> <van-button type="primary">主要按钮</van-button> <van-button type="info">信息按钮</van-button> <van-button type="warning">警告按钮</van-button> <van-button type="danger">危险按钮</van-button> </div> </body> <script> var app = new Vue({ el: "#app", data: { }, methods: { }, created() { }, }) </script> </html>Toast.success("抄底成功"); 或者：this.$toast("提示)

sadnessandsorrow　　作曲：增田俊郎　　原名：哀と悲，sadnessandsorrow为英文名　　乐器：尺八，三味线，小提琴，吉他，钢琴。　　出处：火影忍者ost1　　介绍：火影忍者里的经典配乐，想必看过火影的人都会被其哀伤的旋律所感动，从刚开始低沉的弦乐再到悠远尺八，再转而动人的钢琴声，再到三味线，最后再转为钢琴清晰的哀诉，日本传统乐器与现代乐器的完美结合，使整首音乐透出浓浓的哀伤，正如乐曲名所传达的。在火影忍者中多次出现，尤其是白之死章节，将白身世的凄苦和白死的悲伤渲染的淋漓尽致，催人泪下，那一幕也成为无数火影迷唏嘘不已的经典。

sorrow 更强烈

你猫没开无线？笔记本搜到的是别人的，改下信道试试

DNS 是域名系统 (Domain Name System) 的缩写；另在化工领域、运动领域及流体力学领域有其他含义。PDP，是DEC公司生产的小型机系列的代号。PDP是“ProgrammedDataProcessor”（程序数据处理机）的首字母缩写。在计算机发展的初期，整个计算机产业就已发展到了相当的规模，但是计算机只有一些资金雄厚的公司和机构才能用的起，因为那时的计算机都是庞然大物，功能强大而复杂（当然不能与现代计算机相比）。1960年，DEC推出了首个以阴极管为监视器的小型机产品PDP-1设备。PDP-1简化了大型机的功能，而且价格低廉。1965年推出了世界上第一台真正意义的小型计算机PDP-8。随后，DEC又推出了世界上首款采用晶体管的小型机PDP-8/1。1970年，DEC推出了第一款16位小型机PDP-11。（美国工业协会评为“70年代最具影响力的技术产品”）。PDP系列计算机使DEC公司成为了小型机时代的领头羊。由于小型机的推广，降低计算机产品的使用成本，使得更多的人获得了接触计算机的机会，大大促进了计算机产业以及相关行业的发展，并直接促进了个人计算机（PC）的发展。尽管DEC公司因为推动计算机大众化而获得成功，DEC却因为反对个人计算机的出现而遗憾的成为了历史的笑柄。随着比小型机还小型化的苹果等大批个人计算机出现时，DEC业绩一落千丈。20世纪90年代后，DEC被康柏电脑收购（康柏最终被惠普收购）。

DNS 是域名系统 (Domain Name System) 的缩写；另在化工领域、运动领域及流体力学领域有其他含义。PDP，是DEC公司生产的小型机系列的代号。PDP是“ProgrammedDataProcessor”（程序数据处理机）的首字母缩写。在计算机发展的初期，整个计算机产业就已发展到了相当的规模，但是计算机只有一些资金雄厚的公司和机构才能用的起，因为那时的计算机都是庞然大物，功能强大而复杂（当然不能与现代计算机相比）。1960年，DEC推出了首个以阴极管为监视器的小型机产品PDP-1设备。PDP-1简化了大型机的功能，而且价格低廉。1965年推出了世界上第一台真正意义的小型计算机PDP-8。随后，DEC又推出了世界上首款采用晶体管的小型机PDP-8/1。1970年，DEC推出了第一款16位小型机PDP-11。（美国工业协会评为“70年代最具影响力的技术产品”）。PDP系列计算机使DEC公司成为了小型机时代的领头羊。由于小型机的推广，降低计算机产品的使用成本，使得更多的人获得了接触计算机的机会，大大促进了计算机产业以及相关行业的发展，并直接促进了个人计算机（PC）的发展。尽管DEC公司因为推动计算机大众化而获得成功，DEC却因为反对个人计算机的出现而遗憾的成为了历史的笑柄。随着比小型机还小型化的苹果等大批个人计算机出现时，DEC业绩一落千丈。20世纪90年代后，DEC被康柏电脑收购（康柏最终被惠普收购）。

APN http://baike.baidu.com/view/668.htmDNS http://baike.baidu.com/view/22276.htmPDP http://baike.baidu.com/view/89547.htm 自己慢慢看！

管道图纸VENT-DN20代表排放管道公称直径20毫米，因为VENT是英文批发的意思，一般指高点气体排放，而排液英文是drain。

中国移动提出的ABCDNETS对应8大核心要素，具体如下：A : Artificial Intelligence (AI)，人工智能B : Blockchain，区块链C : Cloud Computing，云计算D : Big Data，大数据N : Network，网络E : Edge Computing，边缘计算T : Internet of Things (IoT)，物联网S : Security，安全

B 名词辨析。situation情况，形式，情景；in poor condition情况不好；position职务，地位;身份;位次；direction方向，指导；结合句意可知B正确。句意：因为糟糕的天气Lina没有能够准时到那儿，而且，他的汽车的情况不好。

　　jcg路由器ddns怎么设置？相信很多人都想知道吧？以下是我为您整理的jcg路由器ddns怎么设置相关资料，欢迎阅读！ 　　jcg路由器ddns怎么设置 　　1.首先打开浏览器输入192.168.1.1，这里的`ip一般路由器的说明书都会写。输入密码，点击确定。 　　2.再申请一个花生壳域名，去花生壳网站申请，填好信息，点击确定，之后屏幕就会显示你申请的域名。 　　3.然后再点击应用那个图标，就会跳转到应用，那一栏，能看到路由的好多功能。 　　4.点击DDNS服务，进入之后将原来在花生壳上申请的域名写入，点击登录就可以看到。正在登陆。 　　5.登陆成功后会显示，你在花生壳上申请的域名。 　　6.打开cmd，输入nslookup ****.6655.la 　　就可以看到动态域名解析出的IP地址

A 试题分析：本题考察的是现在进行时的一个特殊的用法，现在进行时和always连用表示赞扬，或者批评的感情色彩。句义：你总是让你的儿子长时间看电视，你看，莫里斯先生打电话说他昨天没有完成家庭作业。根据句义可知本题表示的是批评的语气。故A正确。

dna复制的基本机理为了保证遗传的稳定性，在每次细胞分裂之前，遗传信息载体必须精确地复制自己。过去的概念认为遗传信息的载体就是dna，现在发现许多病毒的遗传信息载体是rna而不是dna。因此，本章除了对dna的复制作详细的论述外，对rna的复制也加以阐述，以期对遗传信息的复制有个全面的了解。1953年，watson和crick在提出dna双螺旋模型时就指出，由于互补碱基的配对原则，在dna复制时，只要双链dna解开，以每一条链为模板以合成其互补链，即可形成两个与亲代完全一样的dna分子。dna复制的基本过程正如watson和crick所预测的那样，但是在dna复制中涉及了许多细胞成分。dna的复制过程大体上可以分为复制的启动，复制的延伸，和复制的终止三个阶段。dna由两条螺旋的多核苷酸链组成，两条链的碱基通过a:t和g:c之间的氢键联结在一起。在复制过程中首先两条链间的氢键破裂并使双链解旋和分开，然后以每条链为模板，按碱基互补配对原则(a:t，g:c)，由dna聚合酶催化合成新的互补链，结果由一条链成为互补的两条链，这样新形成的两个dna分子与原来的dna分子的碱基序列完全相同。在此过程中，每个子代dna的一条链来自亲代dna，另一条链则是新合成的。这种复制方式称此过程中，每个子代dna的一条链来自亲代的dna，另一条链则是新合成的。这种复制方式称为半保留复制(semiconservationreplication)。1958年meselson和stahl的实验首次有力地支持了半保留复制方式。他们先将大肠杆菌放在15nh4c1培养基中生长15代，使几乎所有的dna都被15n标记后，再将细菌移到只含有14nh4c1的培养基中培养。随后，在不同的时间取出样品，用十二烷硫酸钠(sds)裂解细胞后，将裂解液放在csc1溶液中进行密度梯度离心(140000g，20小时)。离心结束后，从管底到管口，溶液密度分布从高到低形成密度梯度。dna分子就停留在与其相当的csc1密度处，在紫外光下可以看到形成的区带。14n-dna分子密度较轻(1.7g/cm3)，停留在离管口这较近的位置;15n-dna密度较大停留在较低的位置上。当含有15n-dna的细胞在14nh4c1培养液中培养一代后，只有一条区带介于14n-dna与15n-dna之间，这时在15n-dna区已没有吸收带，说明这时的dna一条链来自15n-dna，另一条链为新合成的含有14n的新链。培养两代后则在14n-dna区又出现一条带。在14nh4c1中培养的时间愈久，14n-dna区带愈强，而14n-15ndna区带逐渐减弱，但始终未出现其他新的区带。按照半保留复制方式培养两代，只能出现14n-15ndna两种分子，而且随着代数的增加14n-dna逐渐增加。meselson和stahl的实验完全证实了保留复制的设想。

是指单双链。RNA本质是一条单链，但不可以用静止的孤立地观点看问题，RNA在生物体中的存中是会形成局部双螺旋（按碱基互补配对链内形成双螺旋）。正如DNA一样，你看DNA不都是双链的嘛，但是在生物体内它是经常与蛋白质结合在一起的。

“五撇到三撇”指的是DNA分子的复制方向。DNA分子是通过3，5磷酸二脂键连接的，所以DNA的方向是根据DNA链上两端的基团来确定3"端带有－OH（羟基）基团，而5"端则是－P（磷酸）基团。以复制点一侧的DNA复制为例。在RNA引物的引导下，DNA聚合酶催化子链沿5"→3"方向延伸。在3"→5"模板链上，DNA新链按碱基互补原则沿5"→3"方向连续复制，合成的子链称为前导链（leading strand）。核苷酸之间的连接方式是：一个核苷酸的5′位磷酸与下一位核苷酸的3′-OH形成3′，5′磷酸二酯键，构成不分支的线性大分子，其中磷酸基和戊糖基构成DNA链的骨架，可变部分是碱基排列顺序。扩展资料：半不连续复制：DNA双螺旋由两条方向相反的单链组成，复制开始时，双链打开形成一个复制叉。两条单链分别作为模板，各自合成一条新的DNA链。由于DNA分子中一条链的走向是5"→3"方向，另一条链的走向是3"→5"方向，而且生物体内的DNA聚合酶只能催化DNA从5"→3"的方向合成。所以DNA复制时，其中一条链是连续合成的，另外一条链是不连续合成的。参考资料来源：百度百科-DNA的结构与功能参考资料来源：百度百科-DNA的复制

DNA的复制一条链是连续复制,而另一条链是半不连续复制. 原因是DNA的链增长方向是5"到3".模板链一条是5"到3",另一条是3"到5",由此可知两条链不可能以同样的步骤复制,因为复制是边解链边解旋同时复制. 先导链（leading strand）：DNA复制时,与复制叉向 前移动的方向一致,以3"→5"链为模板,按5"→3"方向连续合成的一条链 先导链按 dUMP 片段连续复制 后随链按Okazaki 片段不连续复制 冈崎片段(Okazaki fragment): DNA复制不连续合成链中形成的短DNA片段. 先导链直接合成而后随链先合成冈崎片段再由连接酶联起来. 你看生物化学或分子生物学上就有.写的很清楚.

“五撇到三撇”指的是DNA分子的复制方向。DNA分子是通过3，5磷酸二脂键连接的，所以DNA的方向是根据DNA链上两端的基团来确定3"端带有－OH（羟基）基团，而5"端则是－P（磷酸）基团。以复制点一侧的DNA复制为例。在RNA引物的引导下，DNA聚合酶催化子链沿5"→3"方向延伸。在3"→5"模板链上，DNA新链按碱基互补原则沿5"→3"方向连续复制，合成的子链称为前导链（leading strand）。核苷酸之间的连接方式是：一个核苷酸的5′位磷酸与下一位核苷酸的3′-OH形成3′，5′磷酸二酯键，构成不分支的线性大分子，其中磷酸基和戊糖基构成DNA链的骨架，可变部分是碱基排列顺序。扩展资料：半不连续复制：DNA双螺旋由两条方向相反的单链组成，复制开始时，双链打开形成一个复制叉。两条单链分别作为模板，各自合成一条新的DNA链。由于DNA分子中一条链的走向是5"→3"方向，另一条链的走向是3"→5"方向，而且生物体内的DNA聚合酶只能催化DNA从5"→3"的方向合成。所以DNA复制时，其中一条链是连续合成的，另外一条链是不连续合成的。参考资料来源：百度百科-DNA的结构与功能参考资料来源：百度百科-DNA的复制

根据中心法则,DNA转录成mRNA,mRNA翻译成蛋白质.其中mRNA只能从一条DNA链,根据碱基互补配对转录形成一条RNA链,这条链叫anti-sense strand无义链或者叫template strand模板链.因为它与mRNA序列互补.mRNA与另一条链序列相同,除了T被U取代

真核生物：在细胞核内，DNA转录成成熟mRNA（可翻译）和不成熟mRNA（不可翻译）。原核生物：在细胞质基质中，转录翻译同时进行。RNA转录成mRNA。

e

因为DNA polymerase不能从头开始复制DNA，而DNA Primase可以先合成一个短链的RNA然后提供3"的复制端（最短为两个）。原因有好几个，例如细胞核里大量分布的是dNTP而非dNMP，所以从头开始复制会导致最上端有个高能磷酸键，而由于DNA本身很稳定所以这一端不好处理。ps提醒题主所有的生化理论与机制都是根据实验结果推出来的，所以我提到的这些“结论”都是因为DNA polymerase的反应中心需要镁离子和新添加dNTP的磷酸相互作用来激活其与已合成链的3"-OH反应，但是这个活性中心需要大于等于3个（两个已有的和一个新加的）脱氧核苷酸残基。如果将来人们在海底（或者外太空？）找到了一种生物不用RNA primer，这个理论就作废了。

RNA有3‘OH是一个原因,最主要的是 RNA 是单链,而且容易被降解.机体选择RNA 做引物是为了避免错配,因为即使引物RNA的碱基序列出现差错,可以很容易被降解,然后通过DNA的修复功能即可复制出正确的序列,是一种保护机制.如果是DNA 做引物则不容易被降解.我们体外对DNA进行扩增时则是使用的DNA引物,因为DNA引物不容易被降解.DNA polymerase 5"端到3"端延伸的特性决定了总有拖后腿的一条链（lagging stand）。解旋之后，双链需要‘同速"完成 DNA 复制，不然就像坏了的拉链，卡在某处。2006年一篇很有趣的文章发现 primase合成 RNA primer 使得leading strand 放慢脚步。

反义链和有义链（sense strand）在以前的概念和现今的使用之间存在有一些混乱，从概念上说在基因的DNA双链中，转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链（template or sense strand），而转录时不能作为mRNA合成模板的那条单链叫有义链，但为了使用上的方便，现今通常将mRNA看作是有义分子（sense molecule）而将与mRNA序列一致的DNA单链（假定DNA中的T替代mRNA的U）标为有义链，在文献中，这条与mRNA序列一致的DNA单链序列被用作基因序列。该序列的5"端称之为上游（upstream）3"端称之为下游（downstream）。

1．半保留复制：DNA在复制时,以亲代DNA的每一股作模板,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链,这种现象称为DNA的半保留复制(semiconservative replication).DNA以半保留方式进行复制,是在1958年由M. Meselson 和 F. Stahl 所完成的实验所证明. 2．有一定的复制起始点：DNA在复制时,需在特定的位点起始,这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段,即复制起始点（复制子）.在原核生物中,复制起始点通常为一个,而在真核生物中则为多个. 3．需要引物(primer)：DNA聚合酶必须以一段具有3"端自由羟基（3"-OH）的RNA作为引物,才能开始聚合子代DNA链.RNA引物的大小,在原核生物中通常为50～100个核苷酸,而在真核生物中约为10个核苷酸. 4．双向复制：DNA复制时,以复制起始点为中心,向两个方向进行复制.但在低等生物中,也可进行单向复制. 5．半不连续复制：由于DNA聚合酶只能以5"→3"方向聚合子代DNA链,因此两条亲代DNA链作为模板聚合子代DNA链时的方式是不同的.以3"→5"方向的亲代DNA链作模板的子代链在聚合时基本上是连续进行的,这一条链被称为领头链(leading strand).而以5"→3"方向的亲代DNA链为模板的子代链在聚合时则是不连续的,这条链被称为随从链(lagging strand).DNA在复制时,由随从链所形成的一些子代DNA短链称为冈崎片段(Okazaki fragment).冈崎片段的大小,在原核生物中约为1000～2000个核苷酸,而在真核生物中约为100个核苷酸.