col

阅读 / 问答 / 标签

high school 和college的区别

在美国highschool指高中从9年级指12年级college就是泛指大学有两年制四年制两种一般不用university只是在说大学名字的时候用比如NYUNewYorkUniversityFushenginNYC

color run是什么

color run 甩色.网络释义 颜色赛跑 颜色赛跑(Color Run)下载就来口袋巴士(ptbus.com),这里有颜色赛跑..基于29个网页-相关网页 彩色跑 彩色跑(Color Run)是一项娱乐项目,2011年发源于美国,跑步距离为5公里,在途中经历数个不同颜色的站点,参赛者身上被喷满不同颜色的粉末。基于10个网页-相关网页 色彩跑酷 这款 色彩跑酷(Color Run) 是一款小清新风格的跑酷游戏,颜色识别障碍者、密集恐惧症患者、强迫症患者这款游戏基本是不适合你们的。基于8个网页-相关网页 彩色路跑 民进党籍立委薛凌今天在立法院财委会质询指出,近年全民疯路跑,路跑多元化、娱乐化,例如彩色路跑(Color run),僵尸路跑、万圣节路跑的费用都不低,却没收娱乐税;一些有教育意义如「人体艺术探索馆等却收娱乐税,是否该重新检讨,以符合....专业释义 颜色赛跑 颜色赛跑(Color Run)下载就来口袋巴士(ptbus.com),这里有颜色赛跑..基于29个网页-相关网页 彩色跑 彩色跑(Color Run)是一项娱乐项目,2011年发源于美国,跑步距离为5公里,在途中经历数个不同颜色的站点,参赛者身上被喷满不同颜色的粉末。基于10个网页-相关网页 色彩跑酷 这款 色彩跑酷(Color Run) 是一款小清新风格的跑酷游戏,颜色识别障碍者、密集恐惧症患者、强迫症患者这款游戏基本是不适合你们的。基于8个网页-相关网页 彩色路跑 民进党籍立委薛凌今天在立法院财委会质询指出,近年全民疯路跑,路跑多元化、娱乐化,例如彩色路跑(Color run),僵尸路跑、万圣节路跑的费用都不低,却没收娱乐税;一些有教育意义如「人体艺术探索馆等却收娱乐税,是否该重新检讨,以符合...基于5个网页-相关网页短语Gas Color Show Run 显示运行 color run-length 彩色游程 The Color Run 彩色跑 ; 彩色路跑 The Color Run Vancouver 跑出色彩温哥华 basic run color 基本运行颜色 更多收起网络短语材料科学 甩色

the color will run

color will run 的意思是 (织物上的染料)渗色 句子是说 你要用冷水洗这条衬衫,否则它会渗色 所以 B 是最佳选择.

color run是个啥

彩色跑色彩跑酷

The Color Run 所用到的彩色粉末是什么物质?有害吗

color run的色粉主要原料是食用级的玉米淀粉和色素。在食用的条件下对人无害,但是大量吸入无疑会造成肺部损害。 刚刚看过她答案的知友应该还记得这篇文章

为什么年轻人喜欢The Color Run

  温版“The Color Run”是一次成功的公益创新。它吸引了周末在电脑前玩游戏的宅男和在网上淘宝的宅女,很多年轻的情侣手拉手慢跑快走,他们说要一起享受这份绚丽浪漫;它吸引了很多家庭从郊县赶来参加“亲子活动”,家长们说要让孩子体验健康的生活方式 和公益爱心教育。  温版“The Color Run”超高人气也给公益事业启发。在许多人的印象中,我们的公益事业,大多是煽情的、催人泪下的,有时候甚至是非常沉重的。这样的方式,并不是说不可取,只是说,有时候我们的公益理念,也是可以“转个弯”的。公益不是坐在家里等捐款,关键是要深入社会肌理,掌握人的心理,主动而智慧地触及人们的心灵。温版“The Color Run”正是以这样一种更接地气,更能让全民参与进来 ,更具娱乐精神的慈善方式出现了。  身处社会转型期和互联网时代的我们,的确需要更多的“公益创新”和“慈善创意”,设计出更多喜闻乐见、能够走进人们心灵的创意活动。像温版“The Color Run”这样的创新之举,既能做好公益又能给人带来快乐,何乐而不为呢?

college vs high school 高中和大学的区别

以加拿大为例说明college vs high school 的区别1. 入学点: high school 公立中学一年两个入学点:2月,9月 college私立国际学院(高中)入学点比较灵活,一般一年有5-6个入学点,1月,4月,7月,9月,11月等(时间会根据不同学校稍有区别) 2. 学费加生活费: 两者的学费和生活费差别不大,基本都在20000-25000加币/年3. 课程设置: high school 公立中学以本地公民或移民居多,在课程设置上对外国学生和本地学生一视同仁,没有特殊照顾,一般下午两三点就放学了,学校组织的活动比较少,课程难度对留学生而言挑战性大,毕业证含金量高。如果学生学习能力不错,有一定的自理能力,年级较低,选择公立中学能充分享受加拿大教育系统的优势,居于较高的起点,为将来进入加拿大或世界名校铺平道路;

The Color Run 是怎样的一个活动

The Color Run,又称“地球上最欢乐的5公里跑”,是一个独特的色彩主题的跑步活动,宣传健康、快乐、个性。目前The Color Run是美国境内最大型的跑步系列活动,自创办以来,彩色跑飞速发展。2014年,The Color Run在全球50多个国家举办了超过300场跑步活动。

The Color Run 是怎样的一个活动

The Color Run,又称“地球上最欢乐的5公里跑”,是一个独特的色彩主题的跑步活动,宣传健康、快乐、个性。目前The Color Run是美国境内最大型的跑步系列活动,自创办以来,彩色跑飞速发展。2014年,The Color Run在全球50多个国家举办了超过300场跑步活动。

thecolorrun是什么意思

褪色

collocation和phrase的区别

collocation和phrase的区别:1、意思不同collocation:作名词时意为“搭配;配置;排列”。phrase:作名词时意思是“短语,习语, 措辞, 乐句”,作及物动词时意思是“措词,将(乐曲)分成乐句”。2、词性不同collocation:作名词。phrase:作名词、动词。collocation的短语搭配boundary collocation [数] 边界配置。Virtual Collocation 虚拟的同地办公;虚拟配置。regular collocation 固定搭配;常用搭配。collocation rule 组配规律;连语规律。free collocation 自由搭配。color collocation 色彩搭配。deviational collocation 变异搭配。collocation pattern 搭配模式。restricted collocation 受限搭配。

歌帝梵和Pierre Marcolini巧克力哪个好?

歌帝梵在国内知道的人比较多,但是吃过Pierre Marcolini巧克力的人应该都会更喜欢Pierre Marcolini家的,每颗巧克力都是纯手工制作的,口感非常细腻又有层次感。创始人是“世界甜点冠军”,曾经多次获得各种甜品大赛的奖项。包装也是好看到上头,完全是更高级的选择。我的答案可行吗?可行就采纳吧

Basement Jaxx colse your eyes的歌词

Basement Jaxx feat. Linda LewisClose Yours Eyesi know it all seems like we"re losing our mindswe got shampoo and warfare all over the headlinesi know it"s all hap and violence-cracyand i never seem to mention the likes of you and mei know it seems like we"re losing our mindsand things ain"t gonna get betteri know it seems like we"re losing our mindsbut we can"t change this, that"s just the way it isclose your eyes, it"s all just noises in your headclose your eyes, it"s all just noises in your headand you and her can move mountainsall i can but lick and biteand the danger keeps on callingbut it"s all right cuz we got each otheri know it seems like we"re losing our mindsand things ain"t gonna get betteri know it seems like we"re losing our mindsbut we can"t change this, it"s just the way it isclose your eyes, it"s all just noises in your headclose your eyes, it"s all just noises in your headclose your eyes, it"s all just noises in your headclose your eyes, it"s all just noises in your headit"s all just noises in your headit"s all just ...it"s all just noises in your headit"s all just ...是这个~

what time can open the air conditioning? the weather is so cold 这句语法对不

语错误少修版本应该:whencanweturnontheairconditionerit"ssocold第问句没主语根据语境我加主语we我第二问句表达候用whattime情况比较少般whattime指非具体间点或者间段般用几点几或者期答比候班类问题候空调种问题式用when比较别扭第三airconditioninging形式词名词形式指空调设备调节温度作空调本身空调应该airconditioner第四open词指物理打作比打窗打箱于器械类打应该turnon直译接通意思第四想表达气冷应该说it"ssocold其实问题式英语问题候直译像其实外听奇怪weather词指气气象般用坏形容weatherissocold用外听像说今气象冷种语境十奇怪确表达主语般用itit"ssocold直译意真冷啊实际主语没具体意义完善句说句哦其实部候现说英语错误都式英语问题候直接翻译其实劲文词几意思英文所翻译程直接文表达式翻译同意思英文单词表达像weather问题主要外习惯用表达式跟我差别种东西要慢慢积累啦加油哦

I am cold.I am sweet. I am made of milk and suger. What am I?

- I am c old.I am sweet. I am made of milk and suger. What am I? - icecream冰淇淋- I am spicy.I come from India.You eatme with rice. What am I?- curry咖喱

谁能帮我写一份关于大学生英语三分钟的演讲稿啊,谢谢.题目是 the responsibility of our college students

Ladies and Gentlemen , Good afternoon! I"m very glad to stand here and give you a short speech. today my topic is “youth”. I hope you will like it , and found the importance in your youth so that more cherish it. First I want to ask you some questions: 1、 Do you know what is youth? 2、 How do you master your youth? Youth Youth is not a time of life, it is a state of mind ; it is not rosy cheeks , red lips and supple knees, it is a matter of the emotions : it is the freshness ; it is the freshness of the deep springs of life .Youth means a temperamental predominance of courage over timidity of the appetite , for adventure over the love of ease. This often existsin a man of 60 more than a boy of 20 . Nobody grows old merely by a number of years . We grow old by deserting our ideals. Years wrinkle the skin , but to give up enthusiasm wrinkles the soul .Worry , fear , self –distrust bows the heart and turns the spirit back to dust . Whether 60 of 16 , there is in every human being ‘s heart the lure of wonders, the unfailing childlike appetite of what"s next and the joy of the game of living . In the center of your heart and my heart there"s a wireless station : so long as it receives messages of beauty , hope ,cheer, courage and power from men and from the infinite, so long as you are young . When the aerials are down , and your spirit is covered with snows of cynicism and the ice of pessimism, then you are grown old ,even at 20 , but as long as your aerials are up ,to catch waves of optimism , there is hope you may die young at 80. Thank you! 大学生英语演讲稿八译文 青春 青春不是指岁月,而是指心态。粉嫩的脸,红润的唇,矫健的膝并不是青春。青春表现在意志的坚强与懦弱。想象的丰富与苍白、情感的充沛与贫乏等方面。青春是生命深处清泉的喷涌。 青春是追求。只有当勇气盖过怯弱、进取压倒苟安之时,青春才存在。果如此,则60见之长者比20岁之少年更具青春活力。仅仅岁月的流逝并不能使他们衰老。而一旦抛弃理想和信念,则垂垂老也。 岁月只能使皮肤起皱。而一旦丧失生活的激情,则连灵魂枯老,使人生枯如死水,毫无活力。 60岁长者也好,16岁少年也罢,每个人的内心深处都渴望奇迹,都如孩子一般眨着期待的双眼,期待着下一次,期待着生活的情趣,你我灵魂深处都有一座无线电中转站------只有你我年轻,则总能听到希望的呼唤,总能发出喜悦的欢呼,总能传达勇气的讯号,总能表现出青春的活力……… 一旦青春的天线倒下,你的灵魂即为玩世不恭之雪、悲观厌世之冰覆盖;即使你年方20.其实你已垂垂老也。而只要你青春的天线高高耸起,就可以随时接收到乐观的电波-----即使你年过八旬,行将就木,而你却仍然拥有青春,你仍然年轻。 谢谢!

NicolaFiore人物简介

NicolaFioreNicolaFiore是一名演员,主要代表作品有《UntitledChristmasEveProject》、《SheWolfRising》等。外文名:NicolaFiore职业:演员代表作品:《SheWolfRising》合作人物:MarcLeland

every,love,colour,i连词成句怎么连?

every,love,colour,i连词成句怎么连?I love every colour.我喜欢每种颜色。

高二必修五第一单元课后 If you were Nicolaus Copernicus, wou

如果你是尼古拉斯·哥白尼,你会隐藏你的理论这么多年?

nicolaus copernicus怎么读

nicolaus:尼古拉斯copernicus: [ ku0259u"pu0259:niku0259s ]哥白尼

TheColourofTheNight的中文歌词

Colour of the wind 风之彩 You think you own whatever land you land on 也许你认为无论在哪里, The earth it just the death thing you can claim, 大地只是寂静的匍匐在你脚底, But I know every rock and tree and creature 但我知道大树、动物甚至岩石, Has a life, has a spirit, has a name 都有自己的生命、灵魂和名字。 You think the only people who are people 很多人就象你所了解的, Are the people who look and think like you 都是有着同样想法的你, But if you walk the footsteps of a stranger, 但如果跟着我在丛林中寻觅, You"ll learn the things you never knew, you never knew. 你会收获意想不到的新东西。 Have you ever hear the wolf cry to the blue corn moon ? 你没有听到过蓝色月光下野狼的哭嗥? Or ask the grinning bobcat why he grinned 你不知道张牙舞爪的山猫有时候会笑? Can you sing with all the voices of the mountain ? 你能唱出山的声音吗? Can you paint with all the colours of the wind ? 你能画出风的颜色吗? Can you paint with all the colours of the wind ? 你能画出风的颜色吗? Come run the hidden pine trail of the forest 来吧让我们走进那片松树林里, Come taste the sun-sweet berries of the earth 品尝最充足阳光雨露的甜果子, Come roll inall the riches all around you 你看你的周围都是珍宝, And for once never wonder what they" re worth 多得永远不知道有多少。 The rainstorm and the river are my brothers 暴雨和河流是我的兄弟, The heron annf the other are my friend 苍鹭和水獭是我的朋友, And we are all connected to each other 其实我们彼此都紧密相系, In the circle, in a hoop that never ends. 就象一个没有结束的圈子 Have you ever the wolf cry to the blue corn moon ? 你没有听到过蓝色月光下野狼的哭嗥? Or let the eagle tell you where he" s been ? 也不知道盘旋翱翔的山鹰飞得有多高? Can you sing with all the voices of the mountain ? 你能唱出山的声音吗? Can you paint with all the colours of the wind ? 你能画出风的颜色吗? Can you paint with all the colours of the wind ? 你能画出风的颜色吗? How high does the sycamore grow ? 梧桐树能长得有多高? If you cut it down, then you" ll never know 假若你砍倒它,你将永远无法知道, And you"ll never hear the wolf cry to the blue corn moon 也听不到蓝色月光下野狼的哭嗥。 For whether we are white or copper skinned, 无论你是白肤色或黄皮色, We needed to sing with all voices of the mountain , 我们都需要唱出山的声音, Need to paint with all the colour of the wind 画出风的颜色。 You can own the earth and still all you"ll own is earth until 只要让我们在大地上紧紧地拥抱着, You can paint with all the colours of the wind. 就能唱出山的声音,画出风的颜色。

colour of the wind的歌词?

you think you own whatever land you land onthe earth is just a dead thing you can claimbut i know every rock and tree and creaturehas a life has a spirit has a nameyou think the only people who are peopleare the people who look and think like youbut if you walk the footsteps of a strangeryou"ll learn things you never knew you never knewhave you ever heard the wolf cryto the blue corn moonor asked the grinning bobcat why he grinnedcan you sing with all the voices of mountaincan you paint with all the colors of the windcan you paint with all the colors of the windcome run the hidden pine trails of the forestcome taste the sun-sweet berries of the earthcome roll in all the riches all around youand for once never wonder what they"re worththe rainstorm and the river are my brothersthe heron and otter are my friendsand we are all connected to each otherin a circle in a hoop that never endshave you ever heard the wolf cryto the blue corn moonor let the earle tell you where he"s beencan you sing with all the voices of mountaincan you paint with all the colors of the windcan you paint with all the colors of the windhow high does the sycamore growif you cut it down then you"ll never knowand you"ll never hear the wolf cryto the blue corn moonfor whether we are white of copper-skinnedwe need to sing with all the voices of mountainwe need to paint with all the colors of the windyou can own the earth and stillall you"ll own is earth untilyou can paint with all the colors of the wind

求《风中奇缘》中《colour of the wind》歌词

词曲:Alan Menken/Stephen Schwartz 演唱:陈慧珊You think you own whatever land you land onThe Earth is just the dead thing you can claim But I know every rock and tree and creature Has a life, has a spirit, has a name Thinking only people who are people Are the people who look and think like you But if you walk the footsteps of a stranger You learn things you never knew You never knew Have you ever heard the wolf cry to the blue corn moon? or let the eagle tell you where he"s been Can you paint with all the voices of the mountain?m Can you paint with all the colors of the wind? Can you paint with all the colors of the wind? I come the hidden pinetrails of the forest Come taste the sun-sweet berries of the earth Come roll in all the riches all around us And for once never wonder what they"re worth The rainstorm and the rivers are my brothers Yhe heron and the otter are my friends We are all connected to each other In a circle in a hoop that never ends How high does the sycamore grow If you cut it down then you"ll never know And you"ll never hear the wolf cry to the blue corn moon Or whether we are white or copper-skinned We need to paint with all the voices of the mountain Need To paint with all the colors of the wind You can own the Earth and still all you"ll own is earth Until you can paint with all the colors of the wind

Colour of the wind歌词大意?

You think you own whatever land you land on 你认为你拥有一切你到过的地方, The earth it just the death thing you can claim, 大地只是寂静的匍匐在你脚底, But I know every rock and tree and creature 但我知道大树、动物甚至岩石, Has a life, has a spirit, has a name 都有自己的生命、灵魂和名字。 You think the only people who are people 你所谓的人们 Are the people who look and think like you 都是和你同样的想法 But if you walk the footsteps of a stranger, 但如果你和我一起在陌生的地方散步, You"ll learn the things you never knew, you never knew. 你会收获意想不到的新东西。 Have you ever hear the wolf cry to the blue corn moon ? 你没有听到过蓝色月光下野狼的哭嗥? Or ask the grinning bobcat why he grinned 你不知道张牙舞爪的山猫有时候会笑? Can you sing with all the voices of the mountain ? 你能唱出山的声音吗? Can you paint with all the colours of the wind ? 你能画出风的颜色吗? Can you paint with all the colours of the wind ? 你能画出风的颜色吗? Come run the hidden pine trail of the forest 来吧让我们奔入那片松树林里, Come taste the sun-sweet berries of the earth 来品尝最充足阳光雨露的甜果子, Come roll inall the riches all around you 你看你的周围都是珍宝, And for once never wonder what they" re worth 多得永远不知道有多少。 The rainstorm and the river are my brothers 暴雨和河流是我的兄弟, The heron annf the other are my friend 苍鹭和水獭是我的朋友, And we are all connected to each other 其实我们彼此都紧密相系, In the circle, in a hoop that never ends. 就象一个永不结束的轮回 Have you ever the wolf cry to the blue corn moon ? 你没有听到过蓝色月光下野狼的哭嗥? Or let the eagle tell you where he" s been ? 也不知道盘旋翱翔的山鹰飞得有多高? Can you sing with all the voices of the mountain ? 你能唱出山的声音吗? Can you paint with all the colours of the wind ? 你能画出风的颜色吗? Can you paint with all the colours of the wind ? 你能画出风的颜色吗? How high does the sycamore grow ? 梧桐树能长得有多高? If you cut it down, then you" ll never know 假若你砍倒它,你将永远无法知道, And you"ll never hear the wolf cry to the blue corn moon 也听不到蓝色月光下野狼的哭嗥。 For whether we are white or copper skinned, 无论你是白肤色或黄皮色, We needed to sing with all voices of the mountain , 我们都需要唱出山的声音, Need to paint with all the colour of the wind 画出风的颜色。 You can own the earth and still all you"ll own is earth until 只要让我们在大地上紧紧地拥抱着, You can paint with all the colours of the wind. 就能唱出山的声音,画出风的颜色。 .

colour与color的区别

colour与color的区别在写法、使用习惯和起源上。1、color是美式英语的写法,而colour是英式英语的写法。美式英语:She differs from her sister in the color of her eyes.她与她姐姐眼睛的颜色不同。英式英语:Run some clean water through and then you"ll see its true colour.让一些清水从中流过,你就会看出它的真正颜色了。2、使用习惯不同。color更倾向于书面用语,文学色彩重一点,colour更偏向于口语。英语写作更多的是使用color。With a nice dark colour, the wine is medium to full bodied.这种葡萄酒色泽深暗悦目,是中等浓郁至浓香型的。英语口语中,更喜欢使用colour来表示颜色的五彩缤纷。I wanted the front garden to be a blaze of colour.3、起源不同。color源自法国:古法语主要形容肤色,法国古铜色,更强调“可见的颜色,某物的颜色”。colour源自英国:含义是“隐藏内在”更强调隐藏色彩。总而言之,现在color和 colour 主要是英式英语和美式英语上的区别,意思的差别并不是很大,在用法上color更侧重于指各种颜色,colour则强调由于紧张而引起的情绪(脸色)变化。color主要是接副词或[者介词,在句子中作宾语成分,指具体“颜色”时,是可数名词,泛指“颜色”时,是不可数名词。colour由“脸色”转化成动词,可以表示“脸红”,多用于口语。

请教:The colour of the shirt will run.中的run如何理解?

相当于fade褪色

color和colour的区别英语

1、color和colour的区别只是拼写上的不同,前者是美式英语的写法,后者是英式英语的写法,意思都一样。 例句: ①She differs from her sister in the color of her eyes. 她与她姐姐眼睛的颜色不同。 ②The color of the curtains clashed with the color of the carpet. 窗帘的颜色与地毯的颜色不协调。 ③She tinted each flower in her paintings a different color. 她将画里每一枝花都画成不同的颜色。 ④Run some clean water through and then you"ll see its true colour. 让一些清水从中流过,你就会看出它的真正颜色了。 ⑤With a nice dark colour, the wine is medium to full bodied. 这种葡萄酒色泽深暗悦目,是中等浓郁至浓香型的。 扩展资料 相关短语: ①color in填色,用颜色填 ②color image彩色图像 ③color printing彩印 ④skin color肤色 ⑤bright color明亮的颜色 ⑥color difference色差,色彩差异 ⑦color matching配色;调色;色彩匹配;调整色差 ⑧color space彩色空间,色空间 ⑨color fastness[化]色牢度 ⑩natural color自然色;天然色;本色

The colour might run和the colour might go的区别?

The colour might run和the colour might go的区别:The colour might run表示 颜色会 深浅不定(不同的颜色混合的结果)the colour might go表示颜色会 逐渐褪去,变淡。不是混色。开心快乐每一天!

color和colour的区别

color和colour的区别如下:1、color是美式英语的写法,而colour是英式英语的写法。美式英语:She differs from her sister in the color of her eyes.她与她姐姐眼睛的颜色不同。英式英语:Run some clean water through and then you"ll see its true colour.让一些清水从中流过,你就会看出它的真正颜色了。2、使用习惯不同。color更倾向于书面用语,文学色彩重一点,colour更偏向于口语。英语写作更多的是使用color。With a nice dark colour, the wine is medium to full bodied.这种葡萄酒色泽深暗悦目,是中等浓郁至浓香型的。英语口语中,更喜欢使用colour来表示颜色的五彩缤纷。I wanted the front garden to be a blaze of colour.3、起源不同。color源自法国:古法语主要形容肤色,法国古铜色,更强调“可见的颜色,某物的颜色”。colour源自英国:含义是“隐藏内在”更强调隐藏色彩。color和colour的相关介绍:1、color与colour的区别:两者词性不同、用法不同、侧重点不同。在词性上,color有名词和动词两种词性,colour有名词、动词和形容词三种词性。在用法上,color后可接副词或介词,在句中充当宾语,colour则多在句中充当谓语。在侧重点上,color侧重表示各种颜色,colour侧重表示由于紧张而引起的情绪或脸色变化。2、总而言之,现在color和colour主要是英式英语和美式英语上的区别,意思的差别并不是很大,在用法上color更侧重于指各种颜色,colour则强调由于紧张而引起的情绪(脸色)变化。3、color主要是接副词或[者介词,在句子中作宾语成分,指具体“颜色”时,是可数名词,当其泛指“颜色”时,是不可数名词。colour由“脸色”转化成动词,可以表示“脸红”,多用于口语。

The colour run是什么意思

运行的颜色

关于capture 17.2生成网表报错PCB Footprint" -hpath "HPathForCollision,一直找不到原因。求助各位网友

cis 设计了个简单的原理图,只有一个电阻,命

一个可以在E.coli DH-5中表达蛋白质的载体应该包括哪些必需部分?

还有抗性筛选位点,比如氨苄Amp、卡那霉素Kana等等……

DNA连接酶除了E·coliDNA连接酶和T4DNA 连接酶

DNA连接酶的种类有很多,用的较多的是E·coliDNA连接酶和T4DNA 连接酶。从大肠杆菌中获得的DNA连接酶只能连接具有互补配对粘性末端的双链,对平末端效果不佳,T4DNA连接酶具有较好的平末端双链连接的作用。 E·coliDNA连接酶所有从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶的称。酶的命名是有规律的。所以不能笼统的根据来源叫。

E.coliDNA复制中都需要哪些蛋白

DNA解旋酶,DNA聚合酶

lac-e.coli是什么

大肠杆菌乳糖操作子。

在培养基中仅提供乳糖作为唯一碳源,在下列情况下,E.Coli.的命运如何?试分析原因。

(1)操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合,关闭转录,不能运用乳糖,所以将死亡。 (2)结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合,将持续表达,因此大量增殖。 (3)CAP位点基因突变 存活,增殖减弱。不能形成cAMP-CAP复合物,不能促进转录,但正常转录不受影响。

大肠杆菌E.coli JM109与BL21(DE3)各有什么特点?在分子生物学里面的主要用途是什么?

E.coli Electro-Cells E.coli Electro-Cell JM109 制品名 TaKaRa Code 包装量 价格(人民币元) E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 μl×10支) 300 ■ GenotypeE.coli JM109recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1, Δ(lac-proAB)/F"[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ ΔM15]■ 细胞浓度1~2×1010 Bacteria/ml ■ 保存-80℃■制品说明用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌,从而导致DNA转入大肠杆菌内的转化方法称为电穿孔法。电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一,比Ca2+处理的感受态细胞的转化效率高,在转化少量DNA时,特别能发挥其特有的威力。TaKaRa使用独自开发的菌体培养法,制作出了效果极佳的E.coli Electro-Cell JM109。 ■细胞种类α-互补性选择宿主E.coli JM109E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时, 由于载体DNA产生的LacZα多肽和JM109 F"编码的lacZΔM15的结合,显示β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)。利用这一特性,可以很容易鉴别重组体菌株。因为具有F"质粒,除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外,也可作为M13载体DNA的宿主,调制单链DNA。■质量标准 使用10 pg的质粒DNA进行转化时:50 μl E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid转化时产生的菌落数>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid F"质粒的稳定性检测对E.coli JM109使用pUC19 DNA进行电穿孔法转化后,在含有100 μg/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上,产生的白色菌落在1%以下。 50 μl的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 μg/ml的Ampicillin L-琼脂平板培养基上不产生菌落。 --------------------------------BL21(DE3)pLysS细菌菌株 BL21(DE3)pLysS细菌菌株可以表达T7控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。BL21(DE3)pLysS对λDE3(1)是溶源性的。λDE3含有T7噬菌体基因I,编码的T7 RNA聚合酶受lac UV5启动子的控制。BL21(DE3)pLysS含有pLysS质粒,他携带编码T7溶菌酶基因。在T7启动子控制下,T7溶菌酶降低靶基因的背景表达但并不干扰由IPTG诱导的表达水平。包装: P9811 500μlhttp://www.promega.com/tbs/tb095/tb095.pdf

什么e.coli的fmet-trnafmet只能结合在核糖体小亚基的p位点而不是a 位点,但其它氨

蛋白质的合成过程在蛋白质合成过程中,mRNA从5′→3′阅读,而肽链从N-端向C-端合成。(一)氨基酸的活化氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的作用下,活化成氨酰-tRNA(氨基酸以高能酯键与tRNA的3′-末端腺苷酸的2′或3′的羟基相连的)。AA + tRNA + ATP---AA~tRNA + AMP + PPi氨酰-tRNA合成酶有氨基酸和tRNA两种底物的专一性结合位点。每一种tRNA只专一携带一种氨基酸,而一种氨基酸可分别被几种tRNA专一携带(因为有密码子简并现象)。氨基酸一旦与tRNA结合成AA- tRNA,进一步的去向就由tRNA来决定。tRNA凭借自身的反密码子与mRNA上的密码子相识别,而把所携带的氨基酸定位在肽链的一定位置上。 各种氨酰-tRNA都具备后,就可以进行蛋白质的合成 (二)多肽链的起始合成参与起始的成分:IF1,IF2,IF3,核糖体的小、大亚基,mRNA,fMet-tRNAf,GTP。起始过程:1、IF1,IF3,30S小亚基,mRNA结合并定位;2、GTP,IF2,fMet-tRNAf加入,形成30S起始复合物;3、IF1,IF2,IF3,GDP,Pi释放,50S大亚基加入,形成70S起始复合物。 至此,起始过程完成,fMet-tRNA位于核糖体上的P位点(给位,即肽酰-tRNA结合位点),而A位点(受位,即氨酰-tRNA结合位点)空着,用于接受下一个AA-tRNA。(三)肽链的延伸此阶段包括氨酰tRNA进入核糖体A位点(进入)、肽键的形成(转肽)和核糖体在mRNA上移位(移位)三个步骤。这三步每重复一次,肽链上就增加一个氨基酸,直到mRNA上的终止密码出现在核糖体的A位时为止。1、进入开始延伸过程时,fMet-tRNAf位于核糖体上的P位点,而一个能与AUG后的密码子互补AA-tRNA进入A位点。具体过程:1、AA-tRNA与EF-Tu-GTP结合生成复合物Tu-GTP-AA-tRNA;2、复合物进入A位,GTP水解,EF-Tu-GDP从核糖体上释放, AA-tRNA留在A位;3、在EF-Ts帮助下,EF-Tu-GDP重新形成EF-Tu-GTP,以便于下一轮反应。2、转肽AA-tRNA的游离氨基与fMet的羧基形成肽键,此过程在肽酰转移酶催化下进行。反应后fMet转移到A位点,形成fMet-AA-tRNA,而P位点留下一空载的tRNAf3、移位在延伸因子EF-G(又称移位酶)帮助下,核糖体在mRNA上移动一个密码子的距离,结果使A位点的fMet-AA-tRNA移到P位,P位的tRNAf移出了核糖体,而A位点空出,以便于接受下一分子AA-tRNA。这样,一轮反应结束,肽链延长了一个氨基酸单位。紧接着进行下一轮延伸,直至肽链合成终止。(四)肽链合成的终止和释放肽链的合成过程同时也是核糖体沿mRNA 5′→3′方向移动,并翻译mRNA上密码子的过程。当核糖体移到终止密码子时,没有对应终止密码的氨酰-tRNA可以进入A位,终止因子进入A位,肽链合成停止。有三种终止因子(RF1、RF2、 RF3)参与终止步骤:RF1:识别终止密码UAA、UAG ;RF2:识别UAA、UGA;RF3:促进RF1、RF2的识别 。、RF2结合到核糖体后,使肽酰转移酶构象转变,表现出水解酶活力,催化肽酰基与tRNA的酯键水解,合成的肽链便从核糖体上释放下来。空载的tRNA接着从核糖体上脱落,核糖体便解离成50S和30S两个亚基离开mRNA,一条多肽链的合成便告结束。四、肽链合成后的加工肽链合成后多数还要经过加工处理,才能变为有生物活性的蛋白质分子,这个过程称为翻译后加工作用,内容包括:1、剪切由氨肽酶将N-端fMet(Met)以及多余氨基酸的切除。2、剪接将蛋白质分子内多余的片段切除3、氨基酸的修饰修饰方式多种多样,如:磷酸化、羟基化、糖基化、甲基化、乙酰化等等。4、二硫键的形成在专一性的氧化酶催化下,特定的Cys-SH之间连接形成二硫键。5、与辅基或辅酶结合对于结合蛋白质,与辅基或辅酶结合后才表现出活性。6、形成特定的构象,亚基间的聚合 我现在正在学生物化学,这个是生物化学上的蛋白质的合成步骤。比较专业化,希望能对你有所帮助。

人的基因组比e,coli基因组大约1000倍,但基因的数目仅为e,coli的10倍,解释为什么

(1)操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合,关闭转录,不能运用乳糖,所以将死亡。 (2)结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合,将持续表达,因此大量增殖。 (3)CAP位点基因突变 存活,增殖减弱。

在培养基中仅提供乳糖作为唯一碳源,在下列情况下,E.Coli.的命运如何?试分析原因。

培养什么菌的? 一般比如大肠杆菌有M9培养基,酵母有合成培养基

一、请设计一个实验区分E. coli 和Staphylococcus aureus, 简述实验过程和实验原理。

?这两个一培养不就看出来了么,菌落不一样。革兰氏染色,大肠杆菌红色,金黄葡萄球菌紫色看看形态也不一样的,大肠杆菌,金黄葡萄球菌

DNA连接酶是什么,和E. coliDNA连接酶有什么区别?

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶:从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶:一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶:一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶:T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶-AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶:只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架,即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链,对平末端效果不佳。2、T4连接酶:分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源:百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源:百度百科-DNA连接酶

衰减作用如何调节E.coli中色氨酸操纵子的表达?

大肠杆菌的的色氨酸合成系统操纵子,其从启动基因开始至转录衰减区附近所转录的信使RNA(mRNA),在细胞内色氨酸浓度高过一定程度时,则在该位置终止,但在色氨酸浓度低时,则通过该点进行mRNA的合成。在此操纵子中,最初的结构基因是从mRNA5′末端数第163个碱基开始的,而转录衰减区存在于稍前方,即约在第130个碱基附近。在此区域的前面,有产生由14个氨基酸所成的小肽的信息,其中有2个为色氨酸的遗传信号。所以当色氨酸缺乏时,此肽的合成在该位置迟滞以至完全停止,而妨碍参与肽合成核糖体向衰减区接近。反之当色氨酸浓度高时,则核糖体接近该区域,随之在mRNA上的衰减区(有回文结构)形成与转录终止相适应的二级结构,转录停止。在其它操纵子上也有同样的小肽的信息,例如组氨酸操纵子在16个氨基酸中有7个为组氨酸的遗传信号,而苯丙氨酸操纵子在15个中有7个为苯丙氨酸的遗传信号。这样氨基酸合成系统的操纵子,利用翻译机制来监测其操纵子所合成的氨基酸的浓度,即具有根据这浓度而确定mRNA是否继续合成的机制。

为什么质粒接合实验用E.coli C600?

可能是E.coli C600比较容易筛选吧,含有Rifampicin抗性。。。

E. coliDNA连接酶和T4 DNA连接酶有什么区别?

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶:从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶:一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶:一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶:T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶-AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶:只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架,即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链,对平末端效果不佳。2、T4连接酶:分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源:百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源:百度百科-DNA连接酶

为什么E. coliDNA连接酶可以连接DNA?

1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶,其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头,使之形成粘性末端之后,再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异,但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料:粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是,它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用,形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是,利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶,它能够将核苷酸(通过脱氧核苷三磷酸前体)加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA,以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中,DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段,称之为poly(dA)尾巴。反过来,如果在反应混合物中加入的是dTTP,那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly(dT)尾巴。因此任何两条DNA分子,只要分别获得poly(dA)和poly(dT)尾巴,就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法(homopolymertail-joining),简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物(linker),是指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端,用多核苷酸激酶处理使之磷酸化,然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子,这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法,将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头,是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后,便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子,而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造,可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源:百度百科-DNA连接酶参考资料来源:百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源:百度百科-T4-DNA连接酶

E. coliDNA连接酶和t4 DNA连接酶是一个东西吗?

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶:从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶:一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶:一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶:T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶-AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶:只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架,即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链,对平末端效果不佳。2、T4连接酶:分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源:百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源:百度百科-DNA连接酶

E.coliDNA连接酶和T4连接酶的区别

1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶,其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头,使之形成粘性末端之后,再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异,但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料:粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是,它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用,形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是,利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶,它能够将核苷酸(通过脱氧核苷三磷酸前体)加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA,以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中,DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段,称之为poly(dA)尾巴。反过来,如果在反应混合物中加入的是dTTP,那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly(dT)尾巴。因此任何两条DNA分子,只要分别获得poly(dA)和poly(dT)尾巴,就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法(homopolymertail-joining),简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物(linker),是指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端,用多核苷酸激酶处理使之磷酸化,然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子,这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法,将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头,是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后,便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子,而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造,可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源:百度百科-DNA连接酶参考资料来源:百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源:百度百科-T4-DNA连接酶

试比较E.Coli的F+,F-,Hfr和F’菌株的异同,并图示四者间的联系.

如图.

E. coliDNA连接酶是什么?

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶:从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶:一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶:一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶:T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶-AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶:只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架,即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链,对平末端效果不佳。2、T4连接酶:分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源:百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源:百度百科-DNA连接酶

T4和E.coli的基因组几乎全部由单一序列组成,但是T4基因组的Cot1 2值比E.coli的低37.5倍,为什么?

【答案】:尽管两个基因组都由独特序列的DNA组成,E.coli的基因组约大25倍,因而每条变性的E.coliDNA链复性得花费更长的时间来寻找其正确的互补链。

E.Coli染色体的复制能否称θ型复制

可以。大肠杆菌也是从一个复制起点开始双向复制,形成θ形

怎样对野生型e.coli诱变,来筛选e.coli的苯丙氨酸高产菌株?并说明其中的遗传学和酶学原理。

筛选工业高产菌株一般从以下几个方面入手:1.筛选营养缺陷型菌株原理是解除了代谢途径中的协同反馈,这里选择酪氨酸营养缺陷型菌株,使得代谢支路受到阻遏,只要在培养基中加入少量酪氨酸,苯丙氨酸就可大量合成。2.筛选抗结构类似物突变株原理是解除阻遏或抗反馈抑制,对氟苯丙氨酸是苯丙氨酸的结构类似物,因此,对氟苯丙氨酸抗性菌株所产生的苯丙氨酸也不能与阻遏蛋白或变构酶结合,这样必然会在有苯丙氨酸存在的情况下,细胞仍然不断的合成苯丙氨酸,使其得到过量积累,这就是抗阻遏或抗反馈突变株。3.筛选温度敏感型突变株比如e.coli最适温度是37,突变后由于某酶结构改变,使得在37度下失活,等同于37度下的营养缺陷型,原理同第一条。

真核生物的基因在E.coli中如何表达

必须是mRNA反转录的DNA或类似的DNA基因,必须与大肠杆菌启动子、RBS序列、SD序列、起始密码子正确拼接、应该还有大肠杆菌终止子。最后还要转入大肠杆菌中才可能正确表达。

E.coliDNA连接酶和T4连接酶的区别

E·coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶 只能连接粘性末端 而平末端则要交给T4DNA连接酶了 它可以连接粘性末端也可以连接平末端

在培养基中仅提供乳糖作为唯一碳源,在下列情况下,E.Coli.的命运如何?试分析原因。

(1)操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合,关闭转录,不能运用乳糖,所以将死亡。 (2)结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合,将持续表达,因此大量增殖。 (3)CAP位点基因突变 存活,增殖减弱。不能形成cAMP-CAP复合物,不能促进转录,但正常转录不受影响。

衰减作用如何调节E.coli中色氨酸操纵子的表达?

简单的说,就是通过RNA的二级结构对翻译进行调控: 该操纵子位于MRNA的前导序列内,前导序列有4个位点1、2、3、4,他们1和2,2和3,3和4之间都能形成剪辑互补配对的2级结构。而基因的核糖体结合位点位于区域4。(1234按照5`到3` 一次编号)。前导序列1能编码一段前导肽,该位点内有连续的2个色氨酸密码子。 当高浓度色氨酸存在时,色氨酸-TRNA是负载的,可以为该位点提供充足的翻译原料。这时,核糖体可以顺利通过区域1,停留在区域2上,此结构导致区域1和2不能互补配对,而3和4配对,导致4区域的核糖体结合位点被屏蔽,以至于无法翻译基因信息。 而当细胞内色氨酸缺乏时,就没有足够的色氨酸-TRNA渗透进正在1位点翻译的核糖体内,核糖体停留在1位点,暴露2位点,这样2和3就互补配对形成2级结构,从而导致4位点暴露,从而开启核糖体结合位点,使基因得以表达。 嗯,大概就是这样子。。。不妨用纸笔画画图,就明白了。上个图给你看

线虫的培养基 为什么要用尿嘧啶缺陷型的E.coli

由于尿嘧啶缺陷型大肠杆菌(E. coli) OP50是尿嘧啶缺陷性,只能从,涂布于NGM(Nematode Growth Media)中获取尿嘧啶,无法自身合成。所以生长速度会比普通的大肠杆菌慢很多,这样既可以提供线虫食物,又不会过度生长。线虫一般从卵到成虫需要3天时间,而且湿度,氧气,以及各种环境因素会制约线虫的生长。所以需要营养合成缺陷型菌种为其食物

E.coli细胞能在不同的碳源中生长,当细菌在以下物质存在条件下生长时,乳糖操纵子的转录速率如何变化?

【答案】:当葡萄糖和乳糖同时存在时,乳糖操纵子以低水平进行转录。因为阻遏物与别乳糖(乳糖的一个异构体)形成复合物,别乳糖-阻遏物复合物不能与乳糖操纵子的启动子区城结合,从而使该阻遏物不能阻止转录起始。$缺少乳糖的条件下,将不会有别乳糖生成,乳糖阻遏物与乳糖操纵子启动子区结合,阻止转录。$当乳糖作为唯一的碳源时,该乳糖操纵子以最大的速率转录,在别乳糖存在的条件下,转录也是可能发生的,因为乳糖阻遏物不能结合乳糖操纵子的启动子区城。同样在缺少葡萄糖的条件下,转录速率也增加,因为cAMP产物增加,有更多的CAP-cAMP结合乳糖操纵子的启动子区城,促进转录,使细胞在乳糖作为可利用的唯一碳源时合成大量的酶来维持生长。

e.coli是什么微生物

E.coli(大肠杆菌)是一种常见的细菌,属于革兰氏阴性菌。它存在于人和动物的肠道中,有些菌株对人体有益,但也有一些具有致病性。E.coli在环境中易于生存和繁殖,可以通过污染的食物或水传播给人类,引起食物中毒和胃肠道感染。尽管大多数E.coli菌株对人体无害,但某些菌株产生肠毒素,可引发严重的健康问题,如腹泻、腹痛和发热等。因此,正确处理食品、保持卫生和良好的个人卫生习惯对预防E.coli感染至关重要。

想要十分钟和love is colour blind的歌词

十分钟译音: just one ten minutes nei ga xi gei jia xi ga su jia nang nei su gei su ga wu ga nang jia do baby da nen lei nve gei hen du lei duo wei jia na yong gei nei da ta ga wa nei ka jia su joe yi jia na ong neng lve jiong bang o jia ge lve suo gong jo jiu neng sa lang du ke su geng ji yo wa nong weng jiu ku ni yun nuo ga ke xi po jo ku nia ga jia nve bi yo ku xi po nang de ji yu he duo song ga ni na po ni song ga hei na jo suo i"m telling you oh na geng yo ni ku gei a ni jo que yo wang sa xi yuong nong nei gei po gei ni ming yo i see nuoye ki nve nong qi gen guo wu nong koo mio kuo ong sei ni suo ti a jia nong duo qi ha guo baby nong peng ju duo ye a pa ha duo yi sai guo na nong ta la ku nve wa na pi gei yo jia ma da jo time song ga ni a nve ga ho ha jia na kve wa suo gui ga qi o ni ga qie neng guo ya mo wa suo xi po nve nun de ji na que o de po o ji de ma nuo jo de mo te ji yu he duo song ga ni na po ni song gang hei na jo suo i"m telling you oh na geng yo ni ku gei a ni jo que yo wang sa xi yuong nong nei gei que gei ni ming yo just one ten minutes nei ga xi gei nong xi ga mo dong gei teng na wu ku nve ga o guo yi suo baby pu nu nen siu ti que sun o gi nong ha ji nei gei wa pa yi jie nangs na a ma ba duo kui jia na ROP:&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& in to the life juse be your side yong de the ge tuo ne te xi ma nuo duo lee dan la ma lu hei happy you awawy wei feixiang is right to call sang la e but ji but nuo na guo call ji sing but guo nang mio mo du o dong guo nu hei &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& nuoye ki nve nong qi gen guo wu nong po mio por gong sei ni suo ti a jia nong duo qi ha guo baby nong peng ju duo ye a pa ha duo yi sai guo na nong ta la ku nve wa na pi gei yo jia ma da jo just one ten minutes nei ga xi gei jia xi ga su jia nang nei su gei su ga wu ga nang jia do baby da nen lei nve gei hen du lei duo wei jia na yong gei nei da ta ga wa nei ka jia su joe yi jia na love is colour blindti:Love Is Color Blind] [ar:Sarah Connor ] [al:Key To My Soul] [by:puwei(www.jpwy.net)] [00:00.00]Love Is Color Blind [00:25.37]It don"t matter if you"re black [00:28.79]white or yellow, if you"re brown or red [00:31.22]let"s get down to that [00:33.03]love is color-blind Verse 1: [00:37.10]I remember when [00:39.26]I was a child and couldn"t understand [00:42.19]people having fun [00:44.67]discriminating all the different ones [00:48.69]mama just used to say [00:51.05]when you grow up you"ll maybe find a way [00:54.13]to make these people see [00:55.97]that everything I do comes back to me Bridge: [00:59.99]You gotta live your live [01:03.44]we"re all the same, no one"s to blame [01:06.17]they gotta live their lives [01:08.72]just play the game and let love reign Chorous: [01:13.29]It don"t matter if you"re black [01:16.34]white or yellow, if your brown or red [01:18.77]let"s get down to that [01:20.92]love is color-blind [01:25.13]you"re my brother, you"re my friend [01:27.61]all that matters in the very end [01:31.08]is to understand [02:50.72][01:33.60]love is color-blind TQ: [01:35.56]I remeber as a young boy [01:37.42]I watched my neighbourhood go up in flames [01:39.62]I saw the whole thang thru tears of pain [01:42.14]and a situation"s rackin" my brain [01:44.37]I wish I could fly away and never come back again [01:47.66]we need some lvoe y"all [01:49.48]we need some real deal help from above y"all [01:51.44]I mean the kids watchin" [01:53.32]and I just can"t see it stoppin", I don"t understand [01:57.51]I mean we all bleed the same blood, man! Bridge: [02:01.16]You gotta live your life [02:02.66]better than our fathers did [02:04.00]let"s make some love, baby, have some kids [02:05.73]they gotta live their lives [02:07.65]and I don"t care what color they are, or u are, or we are [02:11.16]it"s all love, baby! [02:13.27]It don"t matter if you"re black [02:15.64]white or yellow, if your brown or red [02:18.70]let"s get down to that [02:21.60]love is color-blind [02:24.03]you"re my brother, you"re my friend [02:27.81]all that matters in the very end [02:30.93]is to understand [02:32.98]love is color-blind C-Part: [02:36.60]You have been my mother [02:37.79]you could have been my brother [02:39.30]what if you were my sister [02:40.69]if you were my father? [02:42.73]you could have been my fella [02:43.74]you could habe been my teacher [02:45.53]what if you were my friend? [02:47.03]would be so nice to meet ya [02:48.94]You have been my mother [02:49.96]you could have been my brother [02:51.50]what if you were my sister [02:52.73]if you were my father? [02:54.12]you could have been my fella [02:55.70]you could habe been my teacher [02:57.50]what if you were my friend? [02:58.90]would be so nice to meet ya Verse 2: [03:00.73]take it out to the world [03:03.20]tell every boy and every little girl [03:06.21]be proud of yourself [03:07.55]cause you"re as good as anybody else [03:12.38]put away your prejudice [03:15.03]open your mind, don"t need a stick to this [03:18.06]try to make this earth [03:21.04]a better place without a racial curse [03:25.28]Yeah, it"s time for some changes [03:52.43]It don"t matter if you"re black [03:54.87]white or yellow, if your brown or red [03:57.17]let"s get down to that [03:59.74]love is color-blind [04:04.27]you"re my brother, you"re my friend [04:06.83]all that matters in the very end [04:09.77]is to understand [04:12.72]love is color-blind [04:39.91]love is color-blind

ColinFoo是什么职业

ColinFooColinFoo是一名演员,代表作品有《斯坦·海尔辛》、《灰姑娘的歌舞情缘》等。外文名:ColinFoo职业:演员代表作品:《斯坦·海尔辛》合作人物:BoZenga

Décollage翻译

楼上的翻译真猛 完全看不懂歌名 起飞 别的就不知道了

求Cheryl Cole 《 Happy Hour 》的歌词中文翻译

How can I know what you mean If you never ask我怎么能了解你想表达什么如果你从来都不问How can I drive you crazy when I"ve got no gas我怎么能让你疯狂当我没有力气How can we be together when we"re so far apart我们怎么才能在一起当我们相隔那么远 You tell me that you love me then you go and break my heart你告诉我你爱我,然后你却你离开伤透我的心 I"ll admit that I"ve got problems我承认我有问题If you"ll say that you"ll help me solve them, yes如果你说你会帮助我解决这些问题,是 I realize some days I can be sweet and some I"m sour我知道有些天我反复无常 But I can"t help drink you up because you"re my happy hour但我不能把你喝光,因为你是我快乐的时光Just because正因为 I"m never happy when I"m sobered up当我清醒的时候我从来都是不开心的I"m only good if I can have a cup如果我能喝一杯我才会好起来Some days I"m sweet and some I"m sour有些日子,我反复无常But I can"t help drink you up because you"re my happy hour但我不能把你喝光,因为你是我的快乐时光 Only when只有当 You go away and I can"t get my fix你离开,我不能让自己恢复过来 I"m only good if I can have a sip如果我能喝一口我才会好起来Some days I"m sweet and some I"m sour有些日子,反复无常But I can"t help but drink you up because you"re my happy hour但我忍不住把你喝光,因为你是我的快乐时光 Why should I be your women when you"ve got two more当你已经有很多女人的时候你为什么还要我做你的女人Why should I say I do when I know you don"t当我知道你不想我说话的时候你为什么还要我说Why should I stay here when you are always gone当你总不在着的时候你为什么还要我留在这 And why should I be open with you when you stayed bottled up为什么我应该与你打开了,当您住瓶装 I"ll admit that I"ve got problems我承认我有问题If you"ll say that you"ll help me solve them, yes如果你说你会帮助我解决这些问题,是 I realize some days I can be sweet and some I"m sour我知道有些天我反复无常 But I can"t help drink you up because you"re my happy hour但我不能把你喝光,因为你是我快乐的时光Just because正因为 I"m never happy when I"m sobered up当我清醒的时候我从来都是不开心的I"m only good if I can have a cup如果我能喝一杯我才会好起来Some days I"m sweet and some I"m sour有些日子,我反复无常But I can"t help drink you up because you"re my happy hour但我不能把你喝光,因为你是我的快乐时光 Only when只有当 You go away and I can"t get my fix你离开,我不能让自己恢复过来 I"m only good if I can have a sip如果我能喝一口我才会好起来Some days I"m sweet and some I"m sour有些日子,反复无常But I can"t help but drink you up because you"re my happy hour但我忍不住把你喝光,因为你是我的快乐时光 You were all I ever needed你正是我所需要的You were all I ever had你正是我所拥有的You were all I ever wanted你正是我所梦想的But you were making me bad但是你让我脾气变坏You were my happy hour你是我的快乐时光 Sometimes I"m sweet, sometimes I"m sour, yeah有时我甜蜜,有时我很酸,是啊 Oh哦 Just because正因为 I"m never happy when I"m sobered up当我清醒的时候我从来都是不开心的I"m only good if I can have a cup如果我能喝一杯我才会好起来Some days I"m sweet and some I"m sour有些日子,我反复无常But I can"t help drink you up because you"re my happy hour但我不能把你喝光,因为你是我的快乐时光 Only when只有当 You go away and I can"t get my fix你离开,我不能让自己恢复过来 I"m only good if I can have a sip如果我能喝一口我才会好起来Some days I"m sweet and some I"m sour有些日子,反复无常But I can"t help but drink you up because you"re my happy hour但我忍不住把你喝光,因为你是我的快乐时光 Just because正因为 I"m never happy when I"m sobered up 当我清醒的时候我一点也不快乐 and I"m only good if I"m with you如果我和你在一起我才会好起来 Some days I"m sweet and some I"m sour有些日子,反复无常But I can"t help drink you up because you"re my happy hour但我不能把你喝光,因为你是我的快乐时光 Just because正因为 I"m never happy when I"m sobered up 当我清醒的时候我一点也不快乐 and I"m only good if I"m with you如果我和你在一起我才会好起来 Some days I"m sweet and some I"m sour有些日子,我反复无常But I can"t help drink you up because you"re my happy hour但我把你喝光,因为你是我的快乐时光

求一英文女声歌,开头lalalalalala, i just want to be colse to you什么的,还有you silent aways……

close 2 you

求 Nat King Cole 的法语歌词

歌曲名:Love歌手:Nat King Cole专辑:LentekriebelsArtist: Nat King ColeAlbum: MiscellaneousTitle: L-O-V-EL is for the way you look at meO is for the only one I seeV is very, very extraordinaryE is even more than anyone that you adore canLove is all that I can give to youLove is more than just a game for twoTwo in love can make itTake my heart and please don"t break itLove was made for me and youinstrumental interludeL is for the way you look at meO is for the only one I seeV is very, very extraordinaryE is even more than anyone that you adore canLove is all that I can give to youLove is more than just a game for twoTwo in love can make itTake my heart and please don"t break itLove was made for me and youLove was made for me and youLove was made for me and youhttp://music.baidu.com/song/60760203

求翻译just like fire burning out the way.watch this madness coloul charade.

Just like fire, burning out the way如同星星之火 顺势燎原Watch this madness, colorful charade看透所有疯狂而看似美好的假面这首歌是电影《爱丽丝梦游仙境2:镜中奇遇记》主题曲Just Like Fire

求Keyshia Cole的《last night》歌词中文

昨晚,我不能得到答案。尝试拨打,但我的自尊心不让我拨号。我坐在这里,无话可说我感觉,我想像孩子一样。我知道你能听见我我知道你能感觉到我我绝对不能没有你上帝,请让我更好我希望我是不一样的我如果我告诉你一次,我告诉你两次,你可以看到它在我的眼睛里。我哭喊,什么也没有说。你的一切我想成为。如果你只能看到,你的心属于我。我是多么爱你,我怀念你的触摸。来 释放我,我将永远是你的,亲爱的,你会带走我的痛苦吗需要你,你需要我。这是如此明显,我永远不会让你离开,我将永远爱你的。我会...如果你只能看到,你的心属于我。我如此爱你,我怀念你的触摸。来 释放我,我将永远是你的,亲爱的,你会带走我的痛苦吗。参考连接:http://tieba.baidu.com/p/783420583

求一首英文歌名,里头最后几句词是i begging you,color me ,color me ,let me

同问,请问找到了吗?

AE CS4装了插件Colorista_II 出现问题 AFter Effect 错误:效果插件“Colorista ii”启动时发生错误

你在plagin里面找到Colorista ii 先把这个插件卸载了,再看下安装条件 他既然有这提示 就表示你安装错位置了,我看你说插件也是32位的 系统也是32位的 跟系统应该没关系

关于The colour of life的英语作文 初一水平的

Life is colourful. In my view, life is green.Green stands for hope. Life is gold. Gold is the colour of the sun which give us light and warmth. Life is purple, Purple means romantic. Life is red for life is full of changes. Life shouldn"t be black and white, Try to enjoy your life!

frontiers in oncology怎么看第几作者

只有第一作者。基础医学院病理学系研究生胡小媛为第一作者,王宁副教授为论文通讯作者。Frontiers-in-Oncology于2017年获得首个影响因子,分区在肿瘤学领域位于JCR二区。

frontiers in oncology分配编辑几天

frontiers in oncology分配编辑需要30天到90天不等。SCI期刊,名字叫作Frontiers in OncologyISSN,2234,943X,是期刊界的流量明星,备受国人青睐。该刊由瑞士Frontiers Media S,A出版社出版的Frontiers系列刊物之一,于2010年建刊发行。编辑的含义报刊杂志的编辑,应该是给投稿人的文章进行修改,整理,润色的人。像专栏作家,报纸上的小说连载作家都是撰稿人。撰稿人是为新闻单位撰写某一专门领域文章的人士,有特约撰稿人和一般撰稿人两类。一般撰稿人指与新闻单位没有聘约关系。但经常,自动提供某一领域稿件的作者。特约撰稿人指新闻单位正式约请的,专门为该机构撰写某类文章的人士,他们多为某个部门,单位的领导人或某一领域的专家,学者。

Suntory三得利Milcolla蜜露珂娜 胶原蛋白粉 什么时候喝最好?

这些我都没听过。早上。睡前选择一个时间段就行的。姐姐喝的carena

Suntory三得利milcolla胶原蛋白,日版和台版的区别?

吸收好销售量高的德版呃。名字叫carena

求英国诗人Samuel Taylor Coleridge的一首著名的叙事诗《THE RIME OF THE ANCIENT MARINER》

柯尔律治:《老水手行》/《老水手的摇曲》 第 一 部 这老年水手站在路旁, 来三个,他拦住一个。 “你胡子花白,你眼神古怪, 拦住我为了什么? 新郎的宅院敞开了大门, 我是他家的亲眷; 客人都到了,酒席摆好了, 闹哄哄,欢声一片。” 他手似枯藤,勾住那客人: “从前有条船出海——” “去你的!放开我!白胡子蠢货!” 他的手随即松开。 他眼似幽魂,勾住那客人—— 那客人僵立不动, 乖乖地听话,像三岁的娃娃: 老水手占了上风。 客人在一块石头上坐下来—— 没法子,他只能静听; 这目光灼灼的老年水手 把往事叙述分明: “人声喧嚷,海船离港, 兴冲冲,我们出发; 经过教堂,经过山冈, 经过高高的灯塔。 太阳从左边海面升起, 仿佛从海底出来; 它大放光明,在天上巡行, 向右边沉入大海。 太阳一天比一天更高。 中午正对着桅顶——” 客人止不住捶胸顿足, 他听到箫管齐鸣。 新娘子脸儿红得像玫瑰, 她来了,进了厅堂; 一班歌手走在她前头, 点头晃脑地吟唱。 客人止不住捶胸顿足, 没法子,他只能静听; 这目光灼灼的老年水手 把往事叙述分明: “海上的暴风呼呼刮起, 来势又猛又凶狂; 它抖擞翅膀,横冲直撞, 把我们赶向南方。 帆船飞奔,暴风狂吼, 斜了桅杆,湿了船头; 我们一个劲儿向南逃走—— 像被人追赶的逃犯 脚踩着追兵幽幽的黑影, 低着头拼命逃窜。 起了大雾,又下了大雪, 天色变,冷不可支; 漂来的浮冰高如桅顶, 绿莹莹恰似宝石。 雪雾弥漫,积雪的冰山 明亮却阴冷凄清; 人也无踪,兽也绝种, 四下里只见寒冰。 这边是冰,那边也是冰, 把我们围困在中央; 冰又崩又爆,又哼又嚎, 闹得人晕头转向。 冰海上空,一只信天翁 穿云破雾飞过来; 我们像见了基督的使徒, 喜滋滋向它喝彩。 我们喂的食它从未吃过, 它绕船飞去飞回。 一声霹雳,冰山解体, 我们冲出了重围! 可意的南风在后边吹送; 信天翁跟着这条船, 听水手一叫,它就来到—— 来啄食也来游玩。 接连九晚,云遮雾掩, 它停在帆樯上歇宿; 接连九夜,苍白的淡月 映着苍白的烟雾。” “愿上帝搭救你吧,老水手! 你怎么惊魂不定?” “我弯弓搭箭,一箭离弦, 信天翁送了性命!” 第 二 部 如今太阳从右边升起, 仿佛从海底出来; 蒙着一层雾,它半藏半露, 向左边沉入大海。 可意的南风照旧吹送; 少了那可亲的旅伴: 再没有海鸟一叫就到—— 来啄食也来游玩。 我行凶犯罪,看来只怕会 连累全船的弟兄; 他们都念叨:全靠那只鸟 引来了阵阵南风。 “你怎敢放肆,将神鸟射死! 是它引来了南风。” 不暗也不红,威严庄重, 金灿灿太阳涌出; 众人又念叨:全怪那只鸟 惹来了沉沉烟雾。 ‘你干得真好,射死了妖鸟! 是它惹来了烟雾。" 好风吹送,浪花飞涌, 船行时留下纹路; 这幽静海面,在我们以前 从来没有人闯入。 南风停了,帆篷落了, 阴惨惨,死气沉沉; 我们找话说,无非想冲破 海上难堪的沉闷。 中午,滚烫的紫铜色天上, 毒日头猩生似血, 它端端正正对准了桅顶, 大小如一轮圆月。 一天又一天,一天又一天, 船停着,纹丝不动; 就像画师画出的一条船 停在画出的海中。 水呀,水呀,处处都是水, 泡得船板都起皱; 水呀,水呀,处处都是水, 却休想喝它一口。 连海也腐烂了!哦,基督! 这魔境居然显现! 黏滑的蠕虫爬进爬出, 爬满了黏滑的海面。 夜间,四处,成群,飞舞, 满眼是鬼火磷光; 海水忽绿、忽蓝、忽白, 像女巫烧沸的油浆。 有人在梦中得到确息: 是雾乡有雪国的神怪 一路将我们追逼折磨, 他藏的九口寻深海。 一连多少天滴水不沾, 舌头也连根枯萎; 人人都哑了,说不出话了, 喉咙像灌满煤灰。 全船老少一齐瞪着我, 那眼神何等凶暴! 我脖子底下没挂十字架, 却挂着那只死鸟。 第 三 部 日子真难过!喉咙像着火! 眼睛都木了,呆了。 日子真难过!受这等折磨! 眼睛快睁不开了。 勉强睁开眼,我望见西边 有什么东西来了。 起初像小小一粒斑点, 随后像一团雾气; 游动着,不断游动着,终于 显出固定的形体。 斑点,雾气,固定的形体, 游来了,越游越近; 它颠簸摇摆,左弯右拐, 像闪避水下妖精。 喉咙已焦枯,嘴唇也变乌, 不透气,哭笑两难; 都成了哑巴,都站着不动! 我咬破胳臂,嘬血润喉咙, 才喊出:‘是船!是船!" 喉咙已焦枯,嘴唇也变乌, 他们张着嘴倾听; 一听说是船,谢天谢地! 都喜笑颜开,还连连吸气, 仿佛在开怀畅饮。 ‘快瞧呵!"我喊,‘它不再拐弯! 它来救我们出险; 海上没有风,也没有潮水, 它却直挺挺向前!" 西边的海波红如烈火, 黄昏已近在眼前; 西边海波上,临别的太阳 又圆又大又明艳; 那船形怪物急匆匆闯入 我们与太阳之间。 一条条杠子把太阳拦住, (愿天国圣母垂怜!) 像隔着监狱铁栏,露出 太阳滚烫的大脸。 哎呀!(我的心急跳不停!) 那条船来得好快! 那就是帆吗——像缕缕轻纱, 夕照里闪着光彩? 像铁栏一样拦住太阳的 可是那船的肋条? 船上就只有那一个条子? 还是有两个,另一个是‘死"? ‘死"可是她的同僚? 嘴唇红艳艳,头发黄澄澄, 那女子神情放纵; 皮肤白惨惨,像害了麻风; 她是个精魅,叫‘死中之生", 能使人热血凝冻。 那条船过来,和我们并排, 船上两个在押宝; ‘这一局已定!是你输我赢!" 她说着,吹三声口哨。 残阳落水,繁星涌出, 霎时间夜影沉沉; 怪船去运,声闻海面, 顷刻便消失无痕。 我们边听边斜眼张望; ‘恐怖"在心头喝我的血浆, 仿佛在杯中喝酒! 帆上的露水滴落下来, 灯下的舵手脸色刷白, 星光暗,夜色浓稠; 一钩新月从东边升起, 有一颗亮星,不偏不倚, 在新月脚下勾留。 星随月走,满船的水手 来不及哼叫一声, 都疼得乱扭,都将我诅咒—— 不用嘴而用眼睛。 两百个水手,一个不留, (竟没有一声哼叫) 扑通扑通,一叠连声, 木头般一一栽倒。 魂魄飞出了他们的皮囊—— 飞向天国或阴间! 一个个游魂掠过我身旁, 嗖嗖响,如国响箭!” 第 四 部 “你叫我心惊胆怕,老水手! 你的手这般枯瘦! 你又细又长,胸色焦黄, 像海沙起棱起皱。 我怕你,你眼神好似幽魂, 你的手焦黄枯萎!” “别怕,别怕,贺喜的客人! 我是个活人,不是鬼。” 我孤孤单单,独自一个 困守着茫茫大海, 却没有一位天神可怜我, 痛苦塞满了心怀。 这么多一表堂堂的汉子 都死了,木然僵卧; 成千上万条黏滑的蠕虫 却活了下来,还有我。 我看看腐烂发霉的大海, 扭头把视线移开; 我看看腐烂发霉的船板, 船板上堆满尸骸。 我两眼朝天,待要祷告, 祷词还不曾出口, 便听得一声歹毒的咒语, 我的心顿时凉透。 我闭上眼睛,老也不敢睁, 眼球跳动如脉搏; 不敢睁,怕的是天和海,海和天 闷沉沉的逼压我困乏的两眼, 还有死尸围着我! 死者肢体上冷汗已消失, 身躯不腐也不臭; 瞪我的眼神仍然恶狠狠, 一如临终的时候。 孤儿的诅咒可以把亡魂 从天堂拖下地府; 而死者眼中发出的诅咒 却更加可惊可怖! 受这等磨折,我求死不得, 有七天七夜工夫! 月亮姗姗登上了天宇, 一路上从不停留; 一两颗星星在她的左右, 陪着她静静遨游。 月光就像四月的白霜, 洒遍闷热的海面; 而在船身的大片阴影中, 着魔的海水滚烫猩红, 像炎炎不熄的烈焰。 那大片阴影之外,海水里 有水蛇游来游去: 它们的路径又白又亮堂; 当它们耸身立起,那白光 便碎作银花雪絮。 水蛇游到了阴影以内, 一条条色彩斑斓: 淡青,浓绿,乌黑似羽绒, 波纹里,舒卷自如地游动, 游过处金辉闪闪。 美妙的生灵!它们的姿容 怎能用口舌描述! 爱的的泉水涌出我心头, 我不禁为它们祝福: 准是慈悲的天神可怜我, 我动了真情祷祝。 我刚一祈祷,胸前的死鸟 不待人摘它,它自己 便掉了下来,像铅锤一块, 急匆匆沉入海底。 第 五 部 睡眠呵!天下无人不爱你, 你性情多么温驯! 赞美圣母玛利亚!她亲自 把你从天国送到了人世, 让你溜入我心魂。 甲板上那些空空的水桶, 早搁到一边去了; 梦中见桶里接满了露水, 我一觉悟醒来,下雨了。 嘴唇是湿的,喉咙是凉的, 身上衣裳也湿透; 梦中我想必喝了不少, 醒后更喝个不休。 我走动,仿佛在腾云驾雾, 身轻如一片羽毛—— 莫非我已在梦中死去, 这游魂上了九霄? 我听见咆哮的风声:风起了, 还不曾刮到近旁; 而这些又薄又脆的帆篷 已在风声里摇晃。 高空里突然热闹非凡! 来去匆匆的闪电 恰似百十面火旗飘舞! 惨白的星星跳进跳出, 忽而亮,忽而不见。 风声越来越高昂尖锐, 帆篷呼啸如蓑草; 一块乌云泼下了雨水, 月亮与乌云紧靠。 那块浓黑的乌云裂了缝, 月亮还在它旁边; 闪电劈下来,不留空隙, 像高山瀑布冲下平地, 又像陡急的河川。 那阵风总也吹不到船上, 船自己动了,往前开; 电光闪闪,月光惨惨, 死者们哼出声来。 他们哼,他们动,他们站起来, 不开口,不转眼珠—— 这等事梦中见了也怕, 醒着更觉得玄乎。 海上没有风,帆篷不动, 舵手却开船向前; 水手们又像往常那样, 一个个拉绳牵缆; 手脚都僵直,像木头家什, 鬼魂们驾一条鬼船! 我侄儿的尸骸与我并排, 两个人膝头相碰; 他与我合力拉一根绳子, 可是他一声不吭。” “你叫我心惊胆怕,老水手!” “沉住气,贺喜的客人! 死者们魂魄早已飞走, 并不是游魂又回到尸首, 是别有仙灵附身。 天一亮,他们就垂手歇息, 聚拢在桅樯四周, 徐徐唱出柔婉的歌声, 歌声又悠悠飘走。 听寰海周遭清歌缭绕, 这歌声飞向晨曦; 不久又缓缓飘回海面, 独唱与混声交替。 有时像是云雀的清音 从云端飘酒下来; 有时又像是百鸟啁啾, 都想让它们甜润的歌喉 响遍长空和大海。 时而像一片急管繁弦, 时而像笛音寂寞; 时而像天使高唱圣诗, 天庭也为之静默。 歌停了;但直到午刻为止, 帆篷还宛转吟哦, 那音调好比初夏六月里, 绿荫掩映的小河 彻夜向幽幽入睡的林木 哼一曲恬静的儿歌。 午前,海上没一点微风, 这船却安然行驶, 不急不忙,稳稳当当—— 水下有神怪驱使。 在九口寻深海,有一位神怪 从雾乡雪国开始 一路跟了来,如今是他在 推动这条船行驶。 帆篷在午刻终止了吟哦, 船行也骤然中止! 这时,太阳对准了桅顶, 把船固定在海面; 可是一会儿船就动起来, 步子又短又艰难—— 它一退一进,一回只挪动 船身长度的一半。 突然,船就像烈马脱缰, 猛一跳,向前飞驶; 热血咕嘟嘟冲上我脑门, 我倒下,不省人事。 昏迷中,我到底躺了多久, 不必说,不必细问; 我迷迷糊糊,还没醒过来, 耳边便听到,心里也明白 两个精灵在谈论。 一个说:‘凭基督名义,告诉我, 凶手是不是此人? 信天翁实在驯良无害, 即遭他利箭穿身! 那住在雾乡雪国的神怪 跟这船跟了许久; 他爱那海鸟,海鸟爱此人, 此人却是个凶手。" 另一个语调平静温婉, 如甘露滋润心头: ‘此人虽行凶,却已知悔罪, 他还会忏悔不休。" 第 六 部 第一个精灵 ‘说吧,说吧,再说几句吧, 回答我一个问题—— 这条船怎么走得这么快? 这海洋可曾出力?" 第二个精灵 ‘海洋温顺得像一名侍童, 不起风,也不起浪; 他安安静静,亮眼圆睁, 望着天上的月亮—— 月亮是向导,他向她请教, 仰仗她指点祸福; 你瞧瞧月亮:她俯视海洋, 那神情多么亲睦!" 第一个精灵 ‘海上不起浪,也不见风来, 船怎么走得这么快?" 第二个精灵 ‘在船在前面,大气被劈开: 后面,又合成一块。 飞上来,老兄!快飞上高空! 迟了只怕要误事; 等到这水手醒过来以后, 船就会慢慢行驶。" 我悠悠苏醒,船稳稳航行, 不冷不热的天气; 静静的暗夜,高高的淡月, 死者们站在一起。 密匝匝,死者们挤在一起, 甲板变成了灵堂; 两百双眼睛都向我紧盯, 那眼光寒似月光。 他们眼中的痛苦和诅咒 比生前丝毫未减; 我无法逃避他们的怒视, 也无法祷告苍天。 魔法终于解除了,我再度 望见碧蓝的海洋; 我放眼远眺,却再难见到 往日的清平气象。 对比一个人,胆怯心虚, 踏上了一条荒径, 侧身望一眼,再不敢回头, 只顾得拔脚逃命; 因为他知道有一名恶鬼 在背后牢牢跟定。 既没有声音,也没有动静, 一股风吹到我身边; 既不见水纹,也不见波影, 它不曾吹过海面。 拂动我头发,抚弄我面颊, 像吹过春郊绿野; 这股风夹杂着几分惊恐, 其实它温和亲切。 飞呀,飞呀,归船似箭, 却又安舒而平稳; 吹呀,吹呀,惠风拂面, 却只惠顾我一人。 美滋滋一场梦境!前方 那不是高高的灯塔? 那不是山冈?那不是教堂? 莫非我梦里回家? 船漂过暗滩,靠近港湾, 我哭着,祷告不停: ‘上帝呵!让我醒来吧,要么 就让我一睡不醒。" 港湾像镜子一般明净, 铺展得柔滑平匀; 月光洒布在港湾内外, 月影儿映在波心。 峭岩和岩上耸立的教堂 都在月光里闪耀; 高高的风向标稳定安详, 让静静月光朗照。 经月光浸染,这一片港湾 已变得银白雪亮; 蓦地里,红光闪闪的形影 纷纷涌现于水上。 那一群红色形影就在 离船不远的地方; 我望望甲板——哦,基督! 见到了什么景象! 见到了(我凭十字架起誓!) 甲板上尸身僵挺, 每具尸身上,都停着一位 红光遍体的仙灵。 这一群仙灵挥手不停, 好一派神奇景象! 红光闪闪,像红火盏盏 把信号传给岸上。 这一群仙灵挥手不停, 又全都默然无悟; 这肃静滋润了我的心魂, 好似雍容的乐曲。 我随即听到荡桨的声音, 听到领港人呼唤: 我掉头张望,只见水上 划来了一只小船。 领港人父子,一老一少, 正匆匆荡桨前来; 这满船尸首也妨碍不了 我这满腔的欢快! 我瞧见小船上还有一个人, 听嗓音,是那位隐者; 他正吟唱着林间野地里 他自己编的圣歌。 他会把信天翁血迹洗干净, 会帮我赎清罪恶。 第 七 部 海畔山坡上有一片林莽, 隐者就住在林间; 他唱的圣歌清朗而明快; 每逢水手们从海外归来, 他爱和他们谈天。 他清晨、午刻、黄昏都祈祷, 跪在膝垫上膜拜: 膝垫是老橡树一节残桩, 长满厚厚的青苔。 小船过来了,船上人说着: ‘这真是出鬼了! 刚才亮闪闪那些信号 怎么一下都没了?" ‘奇怪!"隐士说,‘我们呼唤过, 可他们全不搭理! 瞧这些破帆又瘪又干, 船板又歪又翘起! 这凄惨景象我从未见过, 除非是冬天,林子里 黄叶的残骸,一片片落在 溪水上,顺水浮漂; 簇簇常春藤让大雪罩着, 猫头鹰吃着狼崽,还朝着 树下的恶狼怪叫。" ‘老天爷!这里真像是有鬼!" 领港人叫道,‘我害怕。" 隐士却不慌不忙地说着: ‘怕什么!划吧,快划!" 划子挨近了这条大船, 我不动,也不开腔; 划子一靠拢这条大船, 便听得一声怪响。 响声在水下,越来越大, 越来越惊心动魄; 劈开波澜,猛撞大船, 船像铅锤般沉没! 这响声冲犯高空和大海, 震得我神志昏迷; 像淹了七天七夜的尸骸, 我在水面上浮起; 比做梦还快,醒了,我躺在 领港人小小划子里。 大船一沉没,便卷起旋涡, 划子也回旋摆荡; 一会儿四境都归于平静, 只山崖兀自回响。 我刚一开口,领港人立刻 叫一声,昏倒在地; 修行的隐士两眼朝天, 战兢兢祷告上帝。 我刚一拿桨,领港人儿子 便吓得神魂错乱; 他放声狂笑,笑个不了, 眼珠滴溜溜乱转; ‘哈哈!"他笑道,‘我明明见到, 敢情鬼也会划船。" 到底回来了!我踏上故乡 牢牢实实的地面! 隐士从小船蹒跚走下, 站不稳,腿软如绵。 ‘帮我赎罪吧,修行的善人!" 我向那隐士哀恳; 他画着十字,答道:‘你说呀! 快说!你是什么人?" 像周身骨架被掰开卸下, 我这时痛苦万状; 不得不如实讲我的故事, 讲完了才觉得松爽。 此后,说不准什么时刻, 那痛苦又会来临, 又得把故事再讲一遍, 才免得烈火攻心。 我如同夜影,四处巡行, 故事越讲越流畅; 谁该听故事,该听劝戒, 我看上一眼便能识别, 便对他从头细讲。 新郎的宅院欢声一片, 客人们喧哗鼓噪; 花园凉亭里,新娘和伴娘 唱着悠扬的曲调; 你听!钟声响了,告诉我 晚祷的时辰已到! 客官!我曾经独自一个 困守着茫茫大海: 那样荒凉,那样空旷! 仿佛上帝也躲开。 我觉得,和众多信徒一起 上教堂虔心祷告, 那滋味,比参加婚礼华筵 不知要胜过多少。 和众人一起走进教堂, 和众人一起祷告: 老人和幼儿,亲朋和伴侣, 快活的后生,俏丽的少女, 一齐向上帝弯腰。 再见吧,再见!贺喜的客官! 请听我一句忠告: 对人类也爱,对鸟兽也爱, 祷告才不是徒劳。 对大小生灵爱得越真诚, 祷告便越有成效: 因为上帝爱一切生灵—— 一切都由他创造。” 眼神清亮,胡子花白, 老水手转身走远; 贺喜的客人也默默离开, 再不去新郎的宅院。 他仿佛挨了当头一棒, 满腔兴致都消失; 到了第二天,他性情大变—— 变得又严肃,又懂事。英文版的太长了。一次发不上来。我用我的另一个账户曾经的回忆来给你再回答一次英文版的吧。要是选我的答案的话,就还是选兰雪茶这个号吧O(∩_∩)O~~~

Protocols in frame: eth:ip:udp:bootp在包解析时怎么解释

协议帧:ETH:ethnet以太网IP:IP是英文Internet Protocol的缩写,意思是“网络之间互连的协议”,也就是为计算机网络相互连接进行通信而设计的协议。UDP:UDP协议就是一种数据报协议(和TCP协议在传输方式和效果上有些区别),是一种传输协议.BOOTP:该协议是一个基于TCP/IP协议的协议,它可以让无盘站从一个中心服务器上获得IP地址,为局域网中的无盘工作站分配动态IP地址,并不需要每个用户去设置静态IP地址。使用BOOTP协议的时候,一般包括Bootstrap Protocol Server(自举协议服务端)和Bootstrap Protocol Client(自举协议客户端)两部分。

细胞复苏、 换液、传代、 冻存protocol

复苏 细胞复苏是指将冻存在液氮或-80℃的细胞解冻,恢复其生长的过程。操作原则:快!慢冻速融里的速融就是指细胞复苏过程。 步骤: 1、 准备工作:预热完全培养基。多少℃培养的细胞就预热到多少℃ 在生物安全柜/超净工作台中,准备好细胞培养瓶/皿,并在其中添加足量预热的完全培养基。 如果需要离心去除冻存细胞中的冻存液,此时也可以准备好 15ml 离心管,在管中添加1-2ml 预热的完全培养基。 2、 解冻细胞。 做法有 2 种选择: (1)从-80℃或液氮中取出冻存的细胞,迅速入 37℃水浴,轻摇解冻。冻存管口保持在水面上,以免水浴锅中的水进入管中。 如果冻存细胞的地方离细胞房水浴锅较远,可以准备一个干净的烧杯,烧杯中装 37℃ 水,带着烧杯去取细胞以实现迅速入水浴,或者路上利用体温手搓冻存管到达水浴 时如未充分解冻再投入水浴继续解冻。当冻存管中只剩一点小冰粒时,酒精棉擦拭冻存管外表面,移入生物安全柜/超净工作台。 (2)从-80℃或液氮中取出冻存的细胞,迅速酒精擦拭冻存管外表面,移入生物安全柜/ 超净工作台,向冻存管内加入适量预热的完全培养基,并轻轻吹打以促使细胞融化。这个做法适合冻存管中有足够空间以容纳新加入的新鲜培养基。自己可以尝试一下,哪种方法细胞融化速度快就用哪种方法。个人认为第 2 种快。 3、 接种细胞: 此时做法有 3 种选择: (1)如果是对冻存液成分耐受的细胞,可将冻存管中的细胞直接吸入准备好的培养瓶/皿, 轻轻十字摇晃混匀细胞,放入细胞培养箱。 (2)如果是对冻存液成分不耐受的细胞,将冻存管中的细胞吸入准备好的 15ml 离心管中,500g ×3min 离心,去除上清,1ml-2ml 预热的完全培养基重悬细胞沉淀并转移到准备好的培养瓶/皿。 (3)如果是对冻存液成分不耐受的细胞,用解冻细胞第 2 种方法的,可以直接用冻存管离心,500g ×3min 离心,去除上清,1ml-2ml 预热的完全培养基重悬细胞沉淀并转移到准备好的培养瓶/皿。 4、 第二天光镜下观察细胞。如果是带着冻存液一起接种的细胞应进行换液。 细胞换液 细胞换液是指去除旧的培养基,换成新的完全培养基以继续提供细胞充足的营养支持。当旧培养基 ph 值改变(含酚红的培养基通常是变酸发黄)时,需要及时进行换液。 步骤: 1、 准备工作: 预热完全培养基,酒精棉擦拭培养基瓶外表面后移入生物安全柜/超净工作台。 细胞培养箱中取出的细胞,酒精棉擦拭培养瓶/皿外表面,移入生物安全柜/超净工作台。可以稍等待,待生物安全柜中的循环风将试剂瓶和培养瓶的外表面吹拂几分钟后,拧开培养基瓶盖虚掩,拧开培养瓶瓶盖虚掩,培养皿盖不用拧。 如果是贴壁细胞,可以用全量换液法,直接吸去全部旧培养基,补充足量新鲜完全培养基。 如果是悬浮细胞,可以用半量换液法,即吸去一半旧培养基,补充新鲜完全培养基。(会损失一半细胞)。悬浮细胞如果不想损失细胞,那就需要将培养物转移到离心管中,离心去除旧培养基,再用新培养基重悬细胞沉淀。 不光细胞维持培养时需要进行细胞换液,一些实验操作也需要进行细胞换液。当换液操作是实验需要时,可能在添加新的培养基前需要 PBS 清洗细胞以去除旧培养基的影响, 新添加的培养基也可根据实验需求进行特殊配制,不一定是完全培养基。 细胞传代 是指将细胞培养物分出来,重新接种到新的培养瓶/皿内,使细胞重新获得足够的生长空间的过程。 对单层生长的 贴壁细胞 而言,当细胞汇合度为 80%左右时,细胞状态是最好的,此时适合进行传代。 预热完全培养基、DPBS、胰蛋白酶或其他可解离细胞的试剂,酒精棉擦拭瓶外表面后移入生物安全柜/超净工作台。 细胞培养箱中取出的细胞,酒精棉擦拭培养瓶/皿外表面,移入生物安全柜/超净工作台。可以稍等待,待生物安全柜中的循环风将试剂瓶和培养瓶的外表面吹拂几分钟后,拧开试剂瓶盖虚掩,拧开培养瓶瓶盖虚掩,培养皿盖不用拧。 吸去旧的培养基,DPBS 洗细胞 1-2 次,加入消化液(胰蛋白酶或含 EDTA 的胰蛋白酶或无动物成分来源的 TryplLE),轻轻晃动培养瓶/皿,使消化液能均匀布满所有细胞。 一些强贴壁的细胞,如果使用胰蛋白酶消化,可以用胰蛋白酶代替 DPBS 清洗细胞,并在 37℃进行消化(加上消化液后放进 37℃细胞培养箱)。 用含EDTA 的胰蛋白酶来消化细胞的话,消化速度会更快。 强贴壁细胞或用特殊的无血清培养基培养的细胞使用 TrypLE 消化。 细胞消化的同时可以准备新的培养瓶/皿,往培养瓶/皿中添加适量新鲜培养基。 当镜下观察贴壁细胞直接的连接松散,细胞有所变形,但还没有出现大片脱落时,吸去消化液,稍待一两分钟,让残留在细胞表面但是肉眼看不见的消化液进一步消化。 加入适量完全培养基,轻柔吹打细胞(用一层层“扫描”方式来吹打),不要忘了沿边“清扫”。胰蛋白酶可以被完全培养基中含的血清终止。 EDTA 无法被终止,因此含 EDTA 的胰蛋白酶消化的细胞,可以在加完全培养基吹打之前用DPBS 洗 1-2 遍。 TrypLE 无需终止,DPBS 稀释即可,因此也可以在加完全培养基吹打之前用 DPBS 洗 1-2 遍。 最好控制不要消化过度,细胞成片脱落。当细胞消化过度时,只能通过离心去除消化液了。 吹打细胞时注意轻柔,控制泡沫,以免对细胞造成太多的细胞损伤。吸不净,吹不净, 枪尖始终保持在液体中可以有效控制泡沫产生。 在加入新培养基吹打细胞时即可规划好,打算一盘细胞分成 N 盘,那就用 0.5N/1N ml 培养基进行细胞吹打。 将细胞吹打成细胞悬液后即可每个新瓶/皿接种 0.5 或 1ml,十字混匀后,送入细胞培养箱继续培养。 通常细胞可以 1:2、1:3、1:4 传。有些细胞不能传太稀,容易状态不好生长缓慢。 对悬浮细胞而言,因为不需要消化,传代过程比较简单,直接吸取一定量旧培养物接种到新培养瓶/皿即可。 细胞冻存 主要为了细胞保种,是指将细胞置于保护性液体中于低温中长期储存的技术。 对单层生长的 贴壁细胞 而言,当细胞汇合度为 80%左右时,细胞状态是最好的,此时适合进行冻存。 预热完全培养基、DPBS、胰蛋白酶或其他可解离细胞的试剂、DMSO 或无血清细胞冻存液,酒精棉擦拭瓶外表面后移入生物安全柜/超净工作台。 细胞培养箱中取出的细胞,酒精棉擦拭培养瓶/皿外表面,移入生物安全柜/超净工作台。准备无菌细胞冻存管和 15ml 离心管,移入生物安全柜/超净工作台。 准备程序冻存盒(恢复至室温)。如果使用添加异丙醇的程序冻存盒,注意异丙醇的量, 如不足,需添加,并且应该根据程序冻存盒说明书定期更换异丙醇。 按细胞传代的做法进行细胞消化,吸去消化液后,1-2ml 完全培养基吹打成单细胞悬液。对悬浮细胞而言,无需消化,直接进入下一步离心收集细胞。 将单细胞悬液转移到 15ml 离心管,500g×3min 离心,去除上清。 如使用无血清细胞冻存液,直接吸取无血清细胞冻存液重悬细胞,然后转移到冻存管中拧紧盖子。 如使用自制的细胞冻存液,需要先配制好细胞冻存液,方法如下: 优先使用培养该细胞的新鲜完全培养基配制,900ul 完全培养基+100ul DMSO=1ml 细胞冻存液(DMSO 含量 10%)。 DMSO 在加入培养基时会发热,务必提前配制好冻存液,以免过热损伤细胞。 对于娇弱的细胞,可配成 2×细胞冻存液,先使用一定体积新鲜完全培养基重悬细胞,再逐滴滴加等体积 2×细胞冻存液(DMSO 终浓度还是 10%),吹打混匀,转移到冻存管中。 自制细胞冻存液中的 DMSO 可适当降低,5%-10%都可以,胎牛血清可以提高至 20%。 在冻存一些比较娇弱的原代细胞时,冻存液中的完全培养基可以用胎牛血清替代,即冻存液中只含胎牛血清和DMSO。 冻存细胞的量可以参考传代时的比例,原则是让复苏的细胞有充足的生长空间。推荐使用内旋式细胞冻存管,比较安全。 有些细胞冻存管的管盖设计是特殊的,当第一次感觉拧紧时,此时并没有真正拧紧,可以进一步拧,直到第二次感觉到拧紧。推荐使用这样的冻存管,在温度变化发生热胀冷缩时不容易发生液体泄漏,减少污染的可能性。 使用无血清冻存液重悬的细胞,无需程序降温,直接塞-80℃冰箱降温,第二天转移到液氮中。 使用自配细胞冻存液的细胞,需放进程序冻存盒后再置于-80℃冰箱中,第二天转移到液氮中。 -80℃不适合长期保存冻存细胞(大概 1-2 年吧)。液氮中冻存的细胞十年之久都可以复苏成功。如需要更长期地保存细胞,应该定期复苏细胞后再次冻存。 程序冻存盒也可以自制,即使用大量脱脂棉花包裹冻存的细胞,或使用海绵包裹细胞。 :

communication protocol是什么意思

通信协议

请问;Network BOOT Protocol怎么设置啊?是PXE吗?

Network Boot Protocol:无盘启动协议,默认设置为“PXE”。 Boot Order:启动优先级 Int 19h:最高优先级。系统始终优先从网卡无盘启动 PnP/BEV(BBS):第二优先级。系统优先从BBS BIOS启动 ROM Disable:屏蔽BOOTROM。即不通过网卡启动 Int 18h:启动顺序按BIOS设置。如果固定为通过网络无盘启动,建议按默认值“Int 19h”,无须修改;如需在网络无盘启动和本地硬盘启动之间选择,则建议设置“Int 18h”。 Show Config Message:是否显示提示信息。默认设置为“Enable”。 Show Message Time:显示提示信息停留的时间。建议修改为3 Seconds节省启动时间。 设置好了开机重起这属于专业操作自己不会设置,最好缺省安装。可以用缺省的方法恢复以前的设置。硬件安装好,windows支持即插即用,自动安装参考资料只是一个厂家的提供的方法。供参考。不同的产品有不同的设置方法。购买产品,可以找厂家的技术支持或者看说明书
 首页 上一页  20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30  下一页  尾页