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h呵呵真巧我刚买了这款，适用于新手

Melanie的音标为：英 [u02c8melu0259ni]，美 [u02c8melu0259ni]。Melanie是美国ParamountMusic于2011年推出的女子演唱组合成员之一，其他成员有闵素雅（Min So A）、Juliane、黄蒂雅（Tia）。2011年8月18日，Chocolat发行首支单曲《Syndrome》正式出道，并于12月15日发行第一张迷你专辑《The First Mini Album》。2012年发行第二首单曲《The Second Single Album》。2013年6月11日发行第三首单曲《The Third Single Album》。特长：唱歌，啦啦队舞。兴趣：唱歌、跳舞、画画。儿时的梦想：成为世界级的歌手。性格：可爱幽默，什么事都能做的很好。喜欢的东西：拉面年糕、泡菜汤。将来的决心：“一定会很努力成为得到大家的肯定的歌手，希望能以我的歌感动更多的人，这就是我的梦想。”双语例句：1、Melanie seemed in a paralysis of terror and only stared into his face.媚兰好像吓傻了，两眼直直地看着他的脸。2、Kim turns on Melanie with such sudden ferocity that Melanie is taken aback.金姆突然对梅勒妮惹火了，她的凶猛甚至使梅勒妮吃了一惊。3、This prompts Lindsay and Melanie to ask Brian to sign the adoption papers.这促使林赛和梅勒妮要求布赖恩在抚养协议书上签字。4、Melanie:Oh,Scarlett,you"re so sweet to worry about Ashley like this for me.梅兰妮：斯佳丽，你为了我而这样子担心希礼，你真好。5、Melanie lay so still and white Scarlett thought she must be dead.媚兰躺在那里，脸色惨白，寂无声息，思嘉觉得她准是死了。6、Blinking in the sunlight,her eyes fell on Melanie and she gasped horrified.她在阳光下眨着眼睛，偶尔瞧见了媚兰，顿时吓得喘息起来。7、Jeff enters the kitchen and sees Melanie putting cans of beer in the fridge.杰夫走进厨房，看到梅勒妮正在往冰箱里放几听啤酒。8、As for success in family life,women can learn Melanie"s trust,respect and love.在家庭生活方面可学习梅拉妮对丈夫的信任、尊重以及拥有一颗无限的爱心。9、David and Melanie are the son and daughter of John and Sarah.大卫和麦兰妮是约翰和莎拉的儿子和女儿。10、Melanie: Hush,Captain Butler. You must not tell me these things,It"s not fit.玫兰妮：别说了，巴特勒船长。你不该和我说这些，这不好。

有而有而有而

你好,omni-shield是一种面料的意思 一种面料,专业防污科技等新型产品

Techlite（超轻缓震科技）具有超强的吸震功能，且持久耐用，减轻足部负担。OMNI-GRIP（鞋底抓地力科技）专利耐磨橡胶大底抓地力强，防滑效果好omni-shield 一种面料，专业防污科技等新型产品

felt在英语中的发音是/felt/。felt是一种纤维材料，主要由动物毛或人造纤维制成。它通常用于制作帽子、衣物、鞋子和家居装饰等物品。felt最早出现在古代，人们使用羊毛、马毛等动物毛制作成的毡子来制作各种物品。经过几千年的发展，现代felt的制作工艺已经非常成熟。felt的制作过程一般包括清洗、剪毛、制毯、晾干等步骤。最终生产出的毯子质地柔软、弹性好、保温性能强。felt不但具有良好的外观和手感，而且对环境具有很好的适应性，舒适、安全，使人们在不同场合中更加舒适自在。制成的衣物则具有保暖性、舒适性和防风性能，非常适合在寒冷和潮湿的天气中穿着。felt还可以用于制作鞋子，由于它的柔软弹性和保暖性很强，非常适合在冬季使用。此外，felt还可以用于制作各种家居饰品，如垫子、桌布、装饰品等。总之，felt是一种多用途的材料，其良好的外观和触感，以及出色的保暖、弹性等特点，使其成为制作帽子、衣服、鞋子和家居装饰等物品的理想材料之一，广泛应用于各种场合。其他用途还可以与其他材料结合，发挥新的应用价值。例如，Felt与木材相结合，可以制成具有良好隔音效果的家具。此外，Felt与多种环保材料结合，可以制作环保产品，如环保包装。

omni-channel是什么意思：全渠道。Omni-channel 即“全渠道”，由 Multi-channel 这个概念演变而来。牛津词典对“Omni-channel”的解释是：Denoting or relating to a type of retail which integrates the different methods of shopping available to consumers (e.g. online, in a physical shop, or by phone).即为展示或者设计一种零售方式：为整合不同消费模式，如线上线下或者电话销售。当然，这个解释并不是特别完整。在解释 Omni-channel 之前我们先来回顾什么是“Multi-channel”。基于字面理解，Multi-channel 译为“多渠道”。可以简单理解为，零售商开始同时进行多渠道零售。例如，原来的线下零售商开始扩展线上零售渠道，例如建立官方网站，在第三方平台建立网店（如亚马逊 / 淘宝等平台）等。

星特朗omni目镜配件非常丰富，不输专业的配置，光是一个不锈钢的三脚架，我觉得就值300多了。 核心配件是自带了3个目镜、1个增倍镜、1个天顶镜、1个非球面镜和1个寻星镜。辅助配件上也有托盘、手机支架等。 倍数不是很大，里面还带有一个十字标记，它的作用是帮助人快速找到观测物体，然后通过目镜观看。

ELS文件夹的上一级是Globalization，完整路径是C:WindowsGlobalizationELS；Sorting文件夹与ELS文件夹在同一目录下，完整路径是C:WindowsGlobalizationSorting。

welcomeknee膝盖;welcome欢迎;toe脚趾，knee和toe都是身体部位，welcome不是

歌曲名:I BELIEVE歌手:Yu-ri Tanaka专辑:J-POP カバー伝说 mixed by DJ FUMI★YEAH!I used to think that I could not go onAnd life was nothing but an awful songBut now I know the meaning of true loveIm leaning on the everlasting armsIf I can see it, then I can do itIf I just believe it, theres nothing to itI believe I can flyI believe I can touch the skyI think about it every night and daySpread my wings and fly awayI believe I can soarI see me running through that open doorI believe I can flyI believe I can flyI believe I can flySee I was on the verge of breaking downSometimes silence, it can seem so loudThere are miracles in life I must achievehttp://music.baidu.com/song/59470921

空调honeywell是美国的品牌。霍尼韦尔公司总部位于美国新泽西州莫里斯镇。霍尼韦尔是一家国际性从事自控产品开发及生产的公司，公司成立于一八八五年，有超过百年历史的国际公司，一九九六年，被美国"财富"杂志评为最受推崇的20家高科技企业之一。扩展资料：霍尼韦尔公司的发展历程：霍尼韦尔国际公司的历史可以追溯到1885年，那时一个名为Albert Butz的发明家取得了熔炉标准仪和报警器的专利。他于1886年4月23日成立了Butz电表仪公司，几个星期之后，他又发明了一个既简单又灵活的装置，命名为"damper flapper."1893年，过去的联合热控制公司更名为电子热控制公司（EHR）。1904年，一名年轻的工程师Mark Honeywel正在努力完善热发电机性能。两年之后，他创立了霍尼韦尔热技术公司，专门研制热水加热的发电机。1912年，HER公司扩展了业务范围，更名为Minneapolis热控制公司（MHR）。四年之后，MHR公司申请了第一家电子摩托车的专利，由Underwriters实验室批准。1927年，MHR公司和霍尼韦尔热技术公司合并，形成了Minneapolis霍尼韦尔控制公司，成为最大的高质量原子钟的最大制造商，随后收购了这个领域中的其他一些公司。公司的名称在1963年正式更改为霍尼韦尔国际公司，不过与40年前的霍尼韦尔公司已经有了很大的不同。六年后，美国宇航员Neil Armstrong 和Edwin "Buzz" Aldrin登上了月球，所使用的就是霍尼韦尔国际公司的产品。1986年，由于收购了Sperry航空航天公司，霍尼韦尔国际公司在航空航天工业的地位显著地提高了，迅速地成为了世界最具影响力的航空电子设备的综合制造商。参考资料来源：百度百科-霍尼韦尔

是一家营业额达300多亿美元的多元化高科技和制造企业，在全球，其业务涉及：航空产品和服务，楼宇、家庭和工业控制技术，汽车产品，涡轮增压器，以及特殊材料。霍尼韦尔公司总部位于美国新泽西州莫里斯镇。在中国也有公司。望能采纳。

trip指短途的快节奏旅行，而travel指长途跋涉的旅行(包括步行及坐车)。

I Don"t Believe in the Devil歌手：Erik Corona所属专辑：A Minimal Story作曲 : T. Magnussons

泄露者发布了英特尔第 14 代酷睿移动 CPU 系列的平台概述图。 该图列出了第14代核心移动CPU系列（称为流星湖（MTL））的最重要细节。这是我们第一次了解所有三个产品系列：H，P和U，每个产品代表不同的功率段。 这也是我们第一次了解到第三个CPU内核被列为LP E-Core（可能意味着低功耗高效内核）。关于超低功耗小内核的谣言已经流传了一段时间，但这意味着英特尔确实在其架构中实施了第三种类型的内核，有点类似于ARM架构的方法，ARM架构也有3个内核。 根据这些新信息，Meteor Lake-H和Meteor Lake-P都将具有多达14个核心（列为6 + 8，因此尚不清楚是否添加了LP E-Cores），而Meteor Lake-U将限制为12个核心。此外，新架构正式支持DDR5-5600或LPDDR5/LPDDR5X-7467内存。DDR5 标准版最多支持 96GB 内存，LPDDR5 类型支持 64GB 内存。 该图片还提到了新的英特尔 Xe-LPG 架构，该架构基于文章后面列出的 Xe2-HPG。MTL H/P/U 集成 GPU 将具有多达 128 个执行单元。对于独立GPU，Meteor Lake系列将为PCIe Gen5接口提供多达8个通道，但此功能将是H（ 游戏 ）Meteor Lake移动CPU独有的。

英文原文：hello,I"m Zoom英式音标：[hu0259u02c8lu0259u028a; he-] , [au026am] [zum] 美式音标：[hu025bu02c8lou02cc hu0259-] , [au026am] [zum]

Hello. I am Zoom. [h

immediately强调立即、迅速，两件事情之间的间隔很短He lay down and was asleep immediately.他躺下就睡着了。promptly强调反应快，敏捷的、迅速的She promptly seized the opportunity his absence gave her.她立即抓住了因他不在场给她创造的机会

prompt 快速。We need prompt react.主动timely 及时。We need the timely react.被动

immediately强调立即、迅速，两件事情之间的间隔很短Helaydownandwasasleepimmediately.他躺下就睡着了。promptly强调反应快，敏捷的、迅速的Shepromptlyseizedtheopportunityhisabsencegaveher.她立即抓住了因他不在场给她创造的机会

黄河就是 the Yellow River或者是Huang He River。长江是the Yangtze River

roguelite和roguelike的区别如下所示。1. 释义区别:- Roguelite: Roguelite是指那些在游戏设计上受到Roguelike游戏启发的游戏，但相较于传统的Roguelike游戏更多地采用了一些娱乐元素和进化机制，使得游戏变得更加容易和可进化。- Roguelike: Roguelike是一类游戏，其特点是随机生成的地牢、回合制的游戏进程和永久死亡的机制。例句:- Roguelite: 《Dead Cells》是一款具有roguelite元素的动作冒险游戏。- Roguelike: 《Dungeon Crawl Stone Soup》是一款经典的roguelike游戏。2. 用法区别:- Roguelite: Roguelite游戏通常会引入一些元素，比如角色永久升级、装备收集、能力树等，以改善游戏的可玩性和回放价值。- Roguelike: Roguelike游戏通常采用传统的随机生成地牢、回合制战斗、永久死亡等机制。例句:- Roguelite: 《Hades》是一款roguelite游戏，你可以通过不断挑战来提升英雄的能力。- Roguelike: 《NetHack》是一款经典的roguelike游戏，每个游戏的地牢都是独一无二的。3. 使用环境区别:- Roguelite: Roguelite游戏在设计上更注重易上手和娱乐性，适合新手和喜欢挑战的玩家。- Roguelike: Roguelike游戏更加注重策略和深度，适合喜欢困难挑战和探索的玩家。例句:- Roguelite: 《Slay the Spire》是一款非常受欢迎的roguelite策略卡牌游戏，适合不同类型的玩家。- Roguelike: 《Angband》是一款经典的roguelike游戏，对于喜欢挑战的玩家来说是个不错的选择。4. 形象区别:- Roguelite: Roguelite游戏通常有较为夸张的角色形象和多样化的地牢设计，以吸引玩家的眼球。- Roguelike: Roguelike游戏一般更偏向于传统的ASCII艺术风格，注重游戏系统和机制。例句:- Roguelite: 《Enter the Gungeon》是一款roguelite射击游戏，你将在游戏中与各种奇怪形象的敌人战斗。- Roguelike: 《Caves of Qud》是一款roguelike游戏，采用了像素风格的ASCII艺术设计。5. 影响范围区别:- Roguelite: Roguelite游戏的影响范围更广，逐渐成为一种流行的游戏类型，吸引了更多的玩家和开发者。- Roguelike: Roguelike游戏的影响范围相对较小，但在游戏发烧友和独立游戏开发者圈内有一定的影响力。

欺诈领主《RogueLords》攻略不知如何解决，为此小编给大家收集整理欺诈领主《RogueLords》攻略解决办法，感兴趣的快来看看吧。欺诈领主《RogueLords》攻略前期战斗能选恐慌的都优先选恐慌，恐慌每次升级都能选一次装备并能提升拿到紫色技能几率，还能触发各种恐慌效果，像精英战触发一次恶魔模式不消耗或者给两件装备的效果都很爽。肉盾角色很适合拿造成双倍伤害只能用两次技能的那件装备，特别是莉莉丝叠高被动双倍伤害非常炸。减恶魔力上限到30点的装备越早拿越好，因为不管你上限多少都会变成30点，但是拿到之后还能再触发增加上限的效果。三个紫色同技能升级并不容易，但是只要20魂死神就能把紫色技能升级成金色，合理规划碰死神的路线来升级技能。个人推荐的通关配置：1~3章玛丽+德古拉+无头，核心角色玛丽，利用玛丽的镜子机制创造大伤害，搭配各种行动力加成装备成型后乱杀，唯一难点是有一组要生命和灵力同时空才死的那组精英，最好给玛丽提前准备好灵力输出技能，不然会打的很吃力。德古拉充能工具人，无头肉盾工具人，没啥好说的哈。3~5章安息日男爵+白女妖+无头或莉莉丝，核心角色男爵，利用男爵的各种崩溃DEBUFF技能来输出，尽量找到阴森渗流和恶灵抓紧这个技能，一个每回合稳定加崩溃伤害一个群体上崩溃，配合溃烂加成的装备成型后男爵输出巨高并且都是AOE。白女妖需要分配的行动力少，开场上个面具就能稳定输出和补刀，还有减怪物输出能力，两个肉盾各有千秋，但是个人更推荐无头，莉莉丝的嘲讽和男爵的阴森渗流都是发起者效果，两者有点冲突。6~7章赫卡特+白女妖+莉莉丝，这个配置打起来有点墨迹但是很好过这两章的关底BOSS，核心思路是利用白女妖的互换这个技能搭配赫卡特的夜行仪式来形成永动效果，赫卡特每回合都能稳定全团回灵力，白女妖互换可以把灵力和血条互换，这两人也都有限制怪输出能力，成型后很难被打死。白女妖只需要带输出的苦难面具就好，面具越早升到金色会越好打，赫卡特的夜之仪式也是越早升到金色越好打。第6章关底BOSS只要赫卡特能上手星穹连线这个技能可以无视BOSS的惩罚效果硬杀。第7章BOSS需要有输出，光靠回血磨是磨不过的，所以白女妖一定要能找到幽灵冲击这个技能，这个技能可以一直提升面具输出，后期BUFF叠高了面具一回合可以打几百点。莉莉丝在这配置里不光是肉盾，莉莉丝的被动配合白女妖面具会叠的很快，被动叠高了伤害非常高。这配置还有个实用性不高的小技巧，有件装备是每杀一个怪给6点魂，有一组精英可以无限召小怪，只要你队伍永动机效果成型，有耐心的话可以无限刷魂。

这些游戏分别有邪恶冥刻，吸血鬼生存者，挺进地牢，月风魔传：不死之月，骷髅：英雄杀手；这一类型游戏的特色有场景的设置比较新颖，玩游戏的时候体验感很棒，非常的刺激。

roguelite和roguelike的区别如下所示。1. 释义区别:- Roguelite: Roguelite是指那些在游戏设计上受到Roguelike游戏启发的游戏，但相较于传统的Roguelike游戏更多地采用了一些娱乐元素和进化机制，使得游戏变得更加容易和可进化。- Roguelike: Roguelike是一类游戏，其特点是随机生成的地牢、回合制的游戏进程和永久死亡的机制。例句:- Roguelite: 《Dead Cells》是一款具有roguelite元素的动作冒险游戏。- Roguelike: 《Dungeon Crawl Stone Soup》是一款经典的roguelike游戏。2. 用法区别:- Roguelite: Roguelite游戏通常会引入一些元素，比如角色永久升级、装备收集、能力树等，以改善游戏的可玩性和回放价值。- Roguelike: Roguelike游戏通常采用传统的随机生成地牢、回合制战斗、永久死亡等机制。例句:- Roguelite: 《Hades》是一款roguelite游戏，你可以通过不断挑战来提升英雄的能力。- Roguelike: 《NetHack》是一款经典的roguelike游戏，每个游戏的地牢都是独一无二的。3. 使用环境区别:- Roguelite: Roguelite游戏在设计上更注重易上手和娱乐性，适合新手和喜欢挑战的玩家。- Roguelike: Roguelike游戏更加注重策略和深度，适合喜欢困难挑战和探索的玩家。例句:- Roguelite: 《Slay the Spire》是一款非常受欢迎的roguelite策略卡牌游戏，适合不同类型的玩家。- Roguelike: 《Angband》是一款经典的roguelike游戏，对于喜欢挑战的玩家来说是个不错的选择。4. 形象区别:- Roguelite: Roguelite游戏通常有较为夸张的角色形象和多样化的地牢设计，以吸引玩家的眼球。- Roguelike: Roguelike游戏一般更偏向于传统的ASCII艺术风格，注重游戏系统和机制。例句:- Roguelite: 《Enter the Gungeon》是一款roguelite射击游戏，你将在游戏中与各种奇怪形象的敌人战斗。- Roguelike: 《Caves of Qud》是一款roguelike游戏，采用了像素风格的ASCII艺术设计。5. 影响范围区别:- Roguelite: Roguelite游戏的影响范围更广，逐渐成为一种流行的游戏类型，吸引了更多的玩家和开发者。- Roguelike: Roguelike游戏的影响范围相对较小，但在游戏发烧友和独立游戏开发者圈内有一定的影响力。

今日，由BadMudStudio研发，bilibili游戏独家代理发行的暗黑国风动作roguelite游戏《暖雪》，正式在Steam平台上线首个免费DLC《烬梦》，新DLC将延续游戏本体的高水准，带来全新剧情与“梦魇世界“新玩法，5个新Boss，6种真、假结局，30+全新梦魇秘籍和多种衍生秘籍组合等等，海量新内容等待你的解锁！11月8日前，《暖雪》游戏本体还将保持-25%的史低折扣，心动不如行动！打破无尽梦魇，结局真假难辨！在《烬梦》DLC上线后，所有通关一周目的玩家与佛堂中央发光的金剑对话，即可开启梦魇世界挑战。玩家需在这个时空混淆的梦魇世界中，击败新的敌人诳语者并成功逃离梦魇，角色新增清明值属性，玩家从离开佛堂开始，清明值就会伴随时间流逝，当清明值耗尽时玩家将直接陷入梦魇而亡。为了对抗梦魇保持清醒，玩家需要通过强化「清明佛尊」来增强清明值，此外玩家还能获得DLC新增的数十种梦魇神兵、梦魇秘籍来增强自身，但是与强大力量相伴的是更深层次的梦魇污染，较高的梦魇等级只会让你倒在击败诳语者之前。最后，切记诳语者们阴险狡诈，它们会布下陷阱，引导你走向虚假的结局，继续沉沦在无尽梦魇之中！全新神兵秘籍，多种战斗流派！在无尽梦魇中，新增的梦魇神兵和梦魇秘籍，将会为玩家的战斗提供巨大的助力，游戏新增30+条梦魇神兵词条和33种梦魇秘籍，通过梦魇神兵和梦魇秘籍的自由搭配，你可以解锁数多种全新的战斗流派，获得和游戏本体阶段完全不同的爽快动作体验。此外，梦魇神兵和梦魇秘籍的组合搭配只是第一阶段，玩家可以在后续的战斗过程中，通过清明法印对梦魇秘籍进行强化。《烬梦》DLC一共新增99种清明法印，游戏中每清空一个房间，就能从房间内的「三寐诡像」处小概率获得全新的清明法印奖励，每一个梦魇秘籍都会对应3个清明法印的强化，而这将为角色的成长解锁更多新的可能！挑战更高难度，解锁额外福利！梦魇世界是一个混乱扭曲的黑暗世界，玩家在游戏中获得各种梦魇道具的强化都会逐步提高自身的梦魇等级，这将带来大量负面BUFF的惩罚，增加游戏难度，但在梦魇等级设定之外，游戏仍然提供了更高的难度挑战。在梦魇世界中每击杀一个诳语者即可永久解锁一枚梦魇之火，点亮它游戏难度将更上一层楼，喜爱挑战高难度的玩家千万不要错过。最后，《暖雪：烬梦》DLC还为各位铲雪官发放额外福利，新DLC的每位NPC伙伴都新增了一套皮肤，拥有全新的角色立绘，部分皮肤还有独特增益效果，玩家可以在击败诳语者后开启梦魇宝箱随机获得，你会是梦魇世界的欧皇玩家吗？独特的东方奇幻暗黑手绘画风，辅以Rogue要素和流畅的动作体验，《暖雪》在Steam平台上现已累计获得高达90%的特别好评。今日，《暖雪：烬梦》DLC正式免费更新，DLC内容含金量十足，新玩法挑战与趣味性并存，相信一定会让喜爱rogue游戏的新老玩家们满意！新的征程已然开启，新的故事正在发生，欢迎各位铲雪官进入游戏进行挑战，逃离梦魇世界寻回真实！Ps：感兴趣的玩家可以关注游戏相关官方渠道、加入官方Q群获取游戏最新动态。《暖雪》移动版本也在紧锣密鼓的开发中，游戏已获得手游版号，有兴趣的玩家可以预约关注。

roguelite和roguelike的区别如下所示。1. 释义区别:- Roguelite: Roguelite是指那些在游戏设计上受到Roguelike游戏启发的游戏，但相较于传统的Roguelike游戏更多地采用了一些娱乐元素和进化机制，使得游戏变得更加容易和可进化。- Roguelike: Roguelike是一类游戏，其特点是随机生成的地牢、回合制的游戏进程和永久死亡的机制。例句:- Roguelite: 《Dead Cells》是一款具有roguelite元素的动作冒险游戏。- Roguelike: 《Dungeon Crawl Stone Soup》是一款经典的roguelike游戏。2. 用法区别:- Roguelite: Roguelite游戏通常会引入一些元素，比如角色永久升级、装备收集、能力树等，以改善游戏的可玩性和回放价值。- Roguelike: Roguelike游戏通常采用传统的随机生成地牢、回合制战斗、永久死亡等机制。例句:- Roguelite: 《Hades》是一款roguelite游戏，你可以通过不断挑战来提升英雄的能力。- Roguelike: 《NetHack》是一款经典的roguelike游戏，每个游戏的地牢都是独一无二的。3. 使用环境区别:- Roguelite: Roguelite游戏在设计上更注重易上手和娱乐性，适合新手和喜欢挑战的玩家。- Roguelike: Roguelike游戏更加注重策略和深度，适合喜欢困难挑战和探索的玩家。例句:- Roguelite: 《Slay the Spire》是一款非常受欢迎的roguelite策略卡牌游戏，适合不同类型的玩家。- Roguelike: 《Angband》是一款经典的roguelike游戏，对于喜欢挑战的玩家来说是个不错的选择。4. 形象区别:- Roguelite: Roguelite游戏通常有较为夸张的角色形象和多样化的地牢设计，以吸引玩家的眼球。- Roguelike: Roguelike游戏一般更偏向于传统的ASCII艺术风格，注重游戏系统和机制。例句:- Roguelite: 《Enter the Gungeon》是一款roguelite射击游戏，你将在游戏中与各种奇怪形象的敌人战斗。- Roguelike: 《Caves of Qud》是一款roguelike游戏，采用了像素风格的ASCII艺术设计。5. 影响范围区别:- Roguelite: Roguelite游戏的影响范围更广，逐渐成为一种流行的游戏类型，吸引了更多的玩家和开发者。- Roguelike: Roguelike游戏的影响范围相对较小，但在游戏发烧友和独立游戏开发者圈内有一定的影响力。

rogue全称是Roguelike，欧美国家对一类游戏的统称，是角色扮演游戏（RPG）的一个子类（Roguelike-RPG）。二十世纪八十年代初，由Michael Toy和Glenn Wichman两位软件工程师共同在UNIX系统上开发，大型机上运行的游戏。Roguelike是电子角色扮演游戏（RPG游戏）的一个子类。标志性特征有：在随机生成的地牢中探索、回合制、基于图块的图像（tile-based graphics）以及角色的永久死亡。大部分Roguelike游戏的背景根植于一个完全的奇幻世界，受到了如龙与地下城等桌上角色扮演游戏的影响。特点生成随机性每一次新开局游戏都会随机生成游戏场景，敌人，宝物等不同事物。而玩家的每一次冒险历程也都将是独一无二，不可复制的。更有甚者，只要玩家愿意的话，可以让玩家连扮演的角色都设置成随机生成的。例如敌人，武器，甚至只是一个角色的皮肤或者场景中的河流等。进程单向性当你在玩一款Roguelike游戏时，存档功能的唯一作用就是记录你当前的游戏进度，每当存档被读取时，对应的进度就会被清空，直到你进行下一次存档。

roguelike游戏的始祖《rogue》中,主人公是什么样子的如下：rogue全称是Roguelike，欧美国家对一类游戏的统称，是角色扮演游戏（RPG）的一个子类（Roguelike-RPG）。二十世纪八十年代初，由Michael Toy和Glenn Wichman两位软件工程师共同在UNIX系统上开发，大型机上运行的游戏。Roguelike是电子角色扮演游戏（RPG游戏）的一个子类。标志性特征有：在随机生成的地牢中探索、回合制、基于图块的图像（tile-based graphics）以及角色的永久死亡。大部分Roguelike游戏的背景根植于一个完全的奇幻世界，受到了如龙与地下城等桌上角色扮演游戏的影响。特点：生成随机性每一次新开局游戏都会随机生成游戏场景，敌人，宝物等不同事物。而玩家的每一次冒险历程也都将是独一无二，不可复制的。更有甚者，只要玩家愿意的话，可以让玩家连扮演的角色都设置成随机生成的。例如敌人，武器，甚至只是一个角色的皮肤或者场景中的河流等。进程单向性当你在玩一款Roguelike游戏时，存档功能的唯一作用就是记录你当前的游戏进度，每当存档被读取时，对应的进度就会被清空，直到你进行下一次存档。

我是用360关的。当然你也可以用任务管理器-进程，去结束它。游戏卡顿首选要查看电脑硬件是否出现问题，电脑使用久了硬件会有损耗，其硬件性能会有所降低，达不到新买电脑时的性能，即达不到硬件最佳性能，而游戏又在不停的更新，对硬件的要求越来越高，此消彼涨后就容易出现以前玩游戏流畅现如今却卡顿。另外，CPU、电源、显卡的散热风扇用久了，会附着很多灰尘，散热器的风道被堵后也会影响散热，进而影响硬件性能的发挥，最终导致游戏卡顿，当CPU温度过高的时候，就会自动降频来降温，这样就导致了电脑整体性能下降，当电脑整体性能接近或低于最低配置时，游戏内就会自然出现卡顿现象。解决方案：用优化大师进行系统优化。关闭高负荷的运行程序、后台运行程序，最好是只留下系统运行和游戏这两个运行程序。6个月定期清理机箱内灰尘，一至两年更换一次风扇，定期更新显卡、主板、声卡等驱动程序，定期更换CPU散热硅胶，有条件的可增设CPU散热设备，游戏内降低显示效果、分辩率等特效。

能。这个是一些游戏的网络助手，用来检测当前网络状态的。lol也会有这个东西。可以在windows任务管理器关闭。网络助手这是一款网络助手工具软件，可以方便快速的查询到手机的2G/3G网卡和 WIFI 网卡的 Mac 地址和 IP 地址，还可以检测当前网络速度。所谓“文件”，就是在我们的电脑中，以实现某种功能、或某个软件的部分功能为目的而定义的一个单位。文件有很多种，运行的方式也各有不同。一般来说我们可以通过文件名来识别这个文件是哪种类型，特定的文件都会有特定的图标（就是显示这个文件的样子），也只有安装了相应的软件，才能正确显示这个文件的图标。文件是与软件研制、维护和使用有关的资料，通常可以长久保存。文件是 软件 的重要组成部分。在软件产品研制过程中，以书面形式固定下来的用户需求、在研制周期中各阶段产生的规格说明、研究人员作出的决策及其依据、遗留问题和进一步改进的方向，以及最终产品的使用手册和操作说明等，都记录在各种形式的文件档案中。文件是对软件中另一组成部分──程序的解释和说明，是对研制过程进行管理的重要手段。管理人员通过文件来确立不同研制人员或小组之间的工作联系，调整研制周期各阶段之间的衔接关系，并根据所产生的文件检查和控制研制工作的进度。文件也是使用、理解和维护软件所不可缺少的重要资料。文件就是在我们的电脑中，以实现某种功能、或某个软件的部分功能为目的而定义的一个单位。文件：电脑中的文件可以是文档、程序、快捷方式和设备。文件是由文件名和图标组成，一种类型的文件具有相同的图标，文件名不能超过255个字符（包括空格）。文件是指存储在外部介质上的数据的集合。

yxq_nethelper是：网络感染性病毒，感染了几乎所有的exe文件。处理感染性病毒要特别谨慎，因为很多杀毒软极不是修复文件而是直接删除。解决方案用优化大师进行系统优化。关闭高负荷的运行程序、后台运行程序，最好是只留下系统运行和游戏这两个运行程序。6个月定期清理机箱内灰尘，一至两年更换一次风扇，定期更新显卡、主板、声卡等驱动程序，定期更换CPU散热硅胶，有条件的可增设CPU散热设备，游戏内降低显示效果、分辩率等特效。网络病毒的来源主要有两种：一种威胁是来自文件下载。这些被浏览的或是通过FTP下载的文件中可能存在病毒。而共享软件（public shareware)和各种可执行的文件，如格式化的介绍性文件（formatted presentation)已经成为病毒传播的重要途径。并且，Internet上还出现了Java和Active X形式的恶意小程序。另一种主要威胁来自于电子邮件。大多数的Internet邮件系统提供了在网络间传送附带格式化文档邮件的功能。只要简单地敲敲键盘，邮件就可以发给一个或一组收信人。因此，受病毒感染的文档或文件就可能通过网关和邮件服务器涌入企业网络。

elowyl 用英语可以组成 yellow

解决办法：编辑jetty根目录下 start.ini 和 添加 "--module=jmx"原因：因为在9.07的时候默认情况是设置了 "OPTIONS=jmx"，换到 9.1版本就删除了，你把上面那个配置加上就好了。ps：jmx是一个为应用程序植入管理功能的框架（通俗点说就是管理配置用的）

打开后另存为，选择存为Excel格式就可以了

el-menu-item遍历后台传回的数据时，设置:index="item.name" 会报错如下： 解决办法： index的值不能有空格，并且是字符串类型，我上面是自己接受到数据遍历添加的一个下标，把他转为字符串就不会报错了

英语“lovemelovemydog”的意思是？ 1.爱屋及乌 2.相互友爱 正确答案：爱屋及乌 lovemelovemydog直接翻译的意思为：爱我就爱我的狗。 引申意思为：爱屋及乌。

首先你要创建一个菜单，再在acitvity里调用。比如，在res下创建 一个目录menu（右击res，选择New，在New的子菜单中选择directory，命名为menu），再在menu下创建一个菜单资源文件resource menu file（右击menu，在new的子菜单中选择resource menu file）再在这个文件里用<item android:id="@+id/add"android:title="添加"/><item android:id="@+id/del"android:title="删除"/>类似这样

elmenuitem默认选中不生效步骤：1、路由跳转，NavMenu子菜单没有vif，加刷新。2、路由跳转，NavMenu有些子菜单会加上vif，权限控制时候经常发生，刷新。3、由跳转过来，选中失效。

页面跳转是刷新页面，肯定会回到初始状态，一般是做的内置框架，就是将你的页面设定在一

关于Element-UI中el-menu，则给其他标签添加点击事件改变 default-active 的值无法使el-menu-item高亮显示的问题因为这是element中两个不相关联的组件，无法通过组件内的方法去实现这个需求。我采用vuex状态机来实现。为三个导航栏绑定点击事件，点击的时候去改变状态机里的state数据。然后再相应的页面里，调用updated狗子函数，当页面更新的时候，从状态机里从新取出showIndex的值。这时候就发现，点击顶部导航栏的时候，对应的内容区侧边栏导航对应的item也高亮了，实现了这个需求。

mood通常这么用：i"mnotinmood/i"minmood.是我心情很糟/我心情很好的意思。feeling常常指对某种事物的感觉。it"smyfeeling.

1 feeling [04fi:li07]n.知觉I"ve lost all feeling in my hands.我的双手失去了知觉。感觉, 感触She had an uneasy feeling that they were still following her.她有一种他们仍在跟踪她的感觉。态度, 看法There seems to be a general feeling that the election will be held in June.似乎普遍的看法是这次选举将在六月份举行。同情, 体谅She has no feeling for the suffering of others.她对别人的痛苦没有同情心。激情He spoke with feeling(s) about the high rate of unemployment.他针对高失业率慷慨陈词。感情, 情绪His abrupt reply hurt our feelings.他粗鲁的回答伤了我们的感情。2 mood [mu:d]n.心情, 情绪You must change your mood.你一定要改变你的情绪才行。语气3 spirit [04spirit]n.精神, 心灵Cancer destroyed her body but not her spirit.癌症摧残了她的身体, 却摧毁不了她的精神。神灵, 幽灵He was one of the spirits in heaven.他是天国的精灵之一。情绪; 心情He felt in excellent spirits when he arrived home.他回到家里时情绪非常好。酒精; 烈酒The grocer sells wine and spirits.这位食品商出售葡萄酒和烈性酒。vt.秘密地带走The fact is that Paul kidnapped him and spirited him back to Russia.事实是, 保罗绑架了他并把他秘密地带回俄罗斯去了。

When I am stressed, I often play table tennis for a while. It"s not only a kind of good sports but also a good way to release my stress. When I play tabel tennis, I always forget all my worries.It can bring me lots of happiness. After playing table tennis, I often feel relax and refresh.祝你学习进步，更上一层楼！(*^__^*)

ELISA法是现代医学临床免疫诊断的重要方法，它的基本原理是：使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性，再使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定各类抗原，也可用于测定抗体。比如现代检测的各类病毒、寄生虫等抗原抗体、激素、肿瘤标志物还有一些毒物药物都是通过该项技术进行测定的。在这种测定方法中有3种必要的试剂： 固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和酶作用的底物。麻烦采纳，谢谢!

概念上有本质不同，不过结果都是一个目的，可以借鉴阻断ELISA：又叫竞争ELISA,我以间接竞争ELISA为例介绍!首先包被猪瘟人工抗原4度过夜,3%脱脂牛奶封闭1H后,加入你需要检测的猪瘟样品及猪瘟提纯标准抗原50微升,再加入猪瘟抗体50微升,混匀,反应1H,再加入酶标记的抗猪瘟抗,反应1H,加入底物显色,根据标准曲线,及OD值,得出样品中的含量,样品中猪瘟含量越高,OD值越小!液相阻断：ELISA其实就是将抗体（兔抗血清）包被在ELISA板中,于此同时将待检血清做几个稀释度和已知抗原在反应板中反应；4°过夜,然后将ELISA板中包被的抗体弃掉,洗板；将反应板中一定量的反应液加入ELISA板中,37°1h；然后弃液,洗板,加入一定量的一抗（豚鼠抗血清）,与所剩抗原结合,37°1h；然后弃液,洗板,加入一定量的酶标二抗（兔抗豚鼠血清+酶标记物）,37°1h；然后弃液,洗板,加入配好的显色液,37°显色10-20分钟左右,加入终止液读数.

直接法——检测Ag将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量。优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。缺点：实验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。 间接法——检测Ab用已知抗原包被，加入待测血清，再加酶标二抗，加底物显色。优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性。缺点：交互反应发生的机率较高。 双抗体夹心法——检测Ag将已知抗体连接在固相载体上，待测抗原与抗体结合后再与酶标二抗结合，形成抗体-待测抗原-酶标二抗的复合物，复合物的形成量与待测抗原成正比。适用于某些大分子的具有至少双表位的抗原，而不能用于小分子半抗原的检测。优势：高灵敏、高专一性，抗原无须事先纯化。缺点：抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。暂时就补充这么些，你也可以问问中洪博元的技术人员还有哪些好方法。

临床上用ELISA测HBsAg的原理是（） A.双抗体夹心法B.间接法C.双抗原夹心法D.竞争法E.捕获法正确答案：A

【答案】：B在双抗体夹心法测抗原时，针对抗原两个不同决定簇的单抗分别做固相和酶标，测定时标本和酶标同时加入的技术为双位点一步法，此示意图即为该原理。

包被抗原后加入待测抗体，反应后洗板，加入酶标二抗，反应后再洗板，加入底物显色。间接Elisa方法主要用来检测抗体，例如我们对动物进行免疫后要检测抗血清的效价的话，就可以用间接Elisa方法来测。

当抗原材料中的干扰物质不易除去，或不易得到足够的纯化抗原时，可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗HBc 　　ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。 http://www.shjmsj.com/

这是我们试剂盒上的说明书：采用间接ELISA方法检测：用包被抗原为合成多肽抗原和基因工程抗原（包括HCV病毒结构区核心抗原和非结构区抗原）。待测样本加入已包被抗原的反应孔内孵育，若标本中含有抗HCV抗体，则该抗体与微孔内抗原形成抗原抗体复合物，加入酶结合物，经孵育后，酶结合物连接至抗原抗体复合物上，在TMB底物参与反应的情况下产生显色反应。

抗体通常是结合在固相载体上，抗原与固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是抗原蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的相互作用。这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等地影响。载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。

口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测方法检测针对病毒衣壳蛋白的抗体，可用于不同动物免疫效果的评估工作。其原理是先将待检血清与一定量抗原结合，占据抗原位点，然后再用已知量的阳性血清与抗原结合，最后通过检测抗原结合阳性血清的多少反推出待检血清中特异性抗体的数量，由于该试验使用酶标抗体不受待检血清来源动物种类的影响，所以适应于各种动物（猪、牛、羊）血清的检测。

目的探讨温度、孵育时间、振荡对ELISA法检测HBsAg的影响,以期进一步优化检测条件。方法采用HBsAg含量约为1ng/mL的血清标本,在4种不同条件(37℃振荡、37℃不振荡、25℃室温震荡、25℃室温不振荡)下的3个不同反应时间(10、20、30min)测定HBsAg,记录吸光度值。结果除10min37℃不振荡和25℃不振荡差异无统计学意义(P0.05)外,其余各组差异都有统计学意义(P0.05)。结论37℃振荡20min为ELISA检测HBsAg的较佳条件。

在进行ELISA实验时，为了获得更加精确的浓度检测结果，需要控制实验中液体的移动速度，而拍干水可以有效地帮助控制液体的流动速度，从而获得更加准确的实验结果。因此，在进行ELISA实验中，拍干水是一个非常重要的步骤。

血凝抑制试验有血凝素(HA)的病毒能凝集人或动物红细胞，称为血凝现象，血凝现象能被相应抗体抑制称为血凝抑制试验，一种测定抗原或抗体的技术。即加入特异性抗体或特异性抗原后，使原有的血凝反应被抑制。正常值试验后的结果呈阴性。临床意义异常结果：相应抗体与病毒结合后，阻止病毒表面HA与红细胞结合，常用于正粘病毒、副粘病毒及黄病毒等的辅助诊断、流行病调查，也可用于鉴定病毒型与亚型。需要检查的人群：新生儿和孕妇者有需要，和带有相关病毒的患者，以做医疗的测定。酶联免疫吸附剂测定酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay（简写ELISA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定（ELISA）为免疫学中的经典实验，本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。

你是不是说的这个血清HIV-1抗体检测：第一代试剂：使用HIV全病毒裂解物为抗原，应用间接法原理检测HIV抗体。如日本富士公司生产的HIV-PA试剂。第二代试剂：使用在细菌或真菌中表达的人工重组或化学合成多肽HIV抗原，应用间接法原理检测HIV抗体。基因重组通常易于在培养基中生产大量同源性抗原，产品为单一目的基因而非多样性抗原混合，特异性高于第一代试剂。第三代试剂：使用合成多肽HIV抗原（少数用重组抗原），应用双抗原（或双抗体）夹心法原理检测HIV抗体（或抗原）。由于标记HIV抗原可同时检测血清中HIV-1 IgG、IgM、 IgA抗体，此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。第四代试剂：此类试剂在第三代试剂盒基础上，将针对P24抗原的抗体与HIV-1抗原一起包被固相载体，可同时检测HIV-1 IgG、IgM、 IgA抗体和P24抗。ELISA已经发展到第四代，敏感度几乎100%特异度99.7%以上，在方法学上，不但检测血液，也可检测唾液与尿液，有常规的方法也有快速的方法。可以一滴血一分钟即出现反应。

抗体 抗原 抗体 显色 就这么简单

没学过

ELISA双抗体夹心法 原理 ELISA双抗体夹心法(enzyme linked immunosorbent assay——sandwich technique)的原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量。生物帮有相关介绍。编码RNA http://doc.bio1000.com/show-3399.html

①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

1.直接法（directelisa） 将抗原直接固定在固相载体上，参加酶符号的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。优势：操作手续简略，因无须运用二抗可防止交互反响。缺陷：实验中的一抗都得用酶符号，但不是每种抗体都适合做符号，费用相对进步。2.间接法（indirectelisa） 此测定办法与直接法相似，不一样在于一级抗体没有酶符号，改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。优势：二抗能够加强信号，并且有多种挑选能做不一样的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保存它最多的免疫反响性。缺陷：交互反响发作的机率较高。3.双抗体夹心法（sandwichelisa） 被检测的抗原包被在两个抗体之间，其间一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量；或不符号，再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要当心选择，才可防止交互反响或竞争一样的抗原联系部位。优势：高活络、高专一性，抗原无须事前纯化。缺陷：抗原必定得具有两个以上的抗体联系部位。4.竞争法（competitiveelisa） 样本里的抗原（自在抗原）和纯化并固定在固相载体上的抗原（固定抗原）一同竞争一样的抗体，当样品里的自在抗原越多，就能够联系越多的抗体，而固定抗原就只能联系到较少的抗体，反之亦然。经清洁过程，洗去自在抗原和抗体的复合物，只留下固定抗原和抗体的复合物，拿来与只要固定抗原的对照组成果相比拟，依据呈色区别就可计算出样品里的抗原含量。优势：可适用比拟不纯的样本，并且数据再现性很高。缺陷：全体的敏感性和专一性都较差。bim试剂盒为您提供！

把抗原或抗体在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面，测定时将受检样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物，反应结束时，固相载体上酶标抗原或抗体被结合量即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例，洗涤除去反应液中其他物质，加u03bb酶反应底物后，底物即被固相载体上的酶催化变为有色产物，通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中被测物质含量。

正相反。一般酶和抗体是化学键连接的。阳性对照中，抗体和抗原结合导致抗体的固定化（也就是说结合到板子上了），与抗体连接的酶就一并固定化了，所以再往酶标板中加入底物，酶就发挥作用显色了。阴性对照中，抗原没有，所以抗体不能固定化，随之没有酶的固定化，所以加入底物不显色。

elisa双抗体夹心法原理elisa双抗体夹心法(enzymelinkedimmunosorbentassay——sandwichtechnique)的原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量。生物帮有相关介绍。编码rnahttp://doc.bio1000.com/show-3399.html

原理LISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。加入酶标记的抗原或抗体，通过反应也结合在固相载体上。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据呈色的深浅进行定性或定量分析。酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。特点某些分泌型蛋白，用siRNA 干扰后可以用ELISA 进行检测。ELISA法酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。编码RNA http://doc.bio1000.com/show-3399.html

上海科艾博生物（COIBO）科技生物学检测试剂盒、进口常规生化试剂、抗体、化学试剂、药典级试剂、标准品、血清等产品，覆盖分子生物学、生物化学、细胞生物学、免疫学、蛋白组学、生物制药与诊断试剂从大的方面说ELISA属于酶免疫技术。 免疫酶技术是将酶作为标记物，标记抗体或抗原后，与相应的抗原或抗体发生反应，通过标记酶相应底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量的检测依据。目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验（ELISA），如果要分类的话，它属于异相固相酶免疫技术。所谓异相是指在检测时不需要将酶标记抗原抗体和游离抗原抗体分开，所谓固相就是指的ELISA的96孔板固相载体了。看下面均相酶免疫测定的原理图：ELISA的主要原理很简单，有这么三个， 1、包被 抗原或者抗体能以物理性吸附于固相载体表面，可能原理是蛋白质和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，吸附之后能保持抗原抗体反应等免疫活性； 2、标记 抗原或者抗体可通过共价键与酶连接成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特点； 3、显色 酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或者抗体结合后，也被固定在固相载体上，加入酶的底物之后可出现显色反应，根据反应的颜色深浅可计算抗原或者抗体的相对含量。ELISA 实验设计根据检测对象的不同，我分别给童鞋们介绍抗原的检测方法设计和抗体的检测方法设计。抗原的检测设计 1、双抗夹心法 针对至少2个抗原决定簇的多价抗原。首先介绍一下抗原决定簇，抗原决定簇就是决定抗原性的特殊化学基团，也叫抗原表位，理论上一个抗原决定簇能诱导产生一种单克隆抗体（可能有童鞋又要问单克隆抗体是神马东东了，以后介绍啊）。由6－12氨基酸或碳水基团组成，它可以是由连续序列（线性表位）组成或由不连续的蛋白质三维结构（构象表位）组成。临床上具有2个抗原决定簇的多价抗原有很多，比较常见有HBsAg、AFP、HCG等大分子抗原。检测步骤也简单，就是包被、洗涤、加样、洗涤、加样、洗涤、显色。具体说来是先将纯化的相应抗体包被在固相载体上，再加入待测样品，若其中含有待测抗原就会与固相抗体结合，洗掉杂质后，再加入酶标记的检测抗体进行反应，洗掉多于的酶标抗体后，加入底物显色，显色与否以及颜色的深浅就代表了待测抗原是否存在以及相对含量了，简单吧。对于双抗夹心法检测大分子抗原要注意几点，1.固相抗体和酶标检测抗体一定是分别针对待测抗原的两个不同抗原决定簇，不然两个抗体就会为争同一个决定簇而打架，会出现假阴性的不良结果；2.如果检测的样本是血清，就要注意风湿病患者体内内风湿因子RF这种奇葩异种抗体的存在，它能够神奇地结合固相抗体和检测抗体，造成假阳性的不良结果；3.包被的固相抗体含量一定是高于样品中的抗原含量，不然检测到的含量会比实际含量低；4.如果有童鞋想高端省事一些，将待测样品与酶标检测抗体同时加入固相载体，在酶标检测抗体高于样品中的待测抗原的情况下，会出现假阴性结果，这种现象书本叫钩状效应。 2、竞争法 针对小分子抗原。这种方法也可以用于大分子抗原，只是相对双抗夹心法这种强悍的策略，竞争法完全没有优势，所以竞争法只在检测小分子这个边缘地带发挥余热了。临床上主要用于T3、T4、孕酮等激素以及药物等。检测步骤与双抗夹心法更简单，包被、洗涤、加样、洗涤、显色，少了一步加样的过程，但是设计上复杂一些，首先将纯化的相应抗体包被在固相载体上，然后每组样本需要分两组，一组同时加入事先混匀好的酶标检测抗原和样本的混合物，一组只加入酶标记抗原，两组颜色只差便是待测抗原的含量，有点晕啊。对于竞争法也需要注意一点，酶标记抗原和待测样本一定要事先混匀好，然后同时加入固相载体，不然会造成不公平竞争，检测出现偏差；抗体的检测设计 就方法来说，有间接法、双抗原夹心法、竞争法和捕获法四种设计。 1、 间接法，这个是检测抗体最常用也最简单的方法。操作步骤与双抗夹心一样，只是包被是纯化的相应抗原而不是抗体了，加入样品后洗涤，再加入的酶标记抗抗体，然后显色，颜色深浅与样品中待测抗体的浓度正相关。这个间接法的原理和步骤与双抗夹心一样一样的，为了区分就把包被抗原检测抗体叫做间接法了，以此类推，之前的双抗夹心法也可以叫做直接法，命名其实就是这么回事，规则多了就容易让人糊涂。间接法也有一些自己的特点，1.酶标记抗抗体可选择性检测抗体的亚型，可用于鉴别感染时期，如果是IgM那么提示感染早期；2.酶标抗抗体检测抗体特异性不高，容易产生假阳性，如果封闭不完全，可出现全板阳性，挺吓人的。临床上常用该方法检测抗HCV抗体、抗HEV抗体、抗CMV抗体、抗HSV抗体、抗沙眼衣原体抗体等等。2、 双抗原夹心法，这个完全是山寨双抗夹心法的。原理和步骤也与双抗夹心一样一样的，与间接法相比，具有优越的灵敏度和特异性，但不是很常用，因为就目前的技术条件，想得到能用于ELISA检测的纯化抗原还是有一定的难度。临床上常用于检测HIV抗体初筛，TP抗体和抗HBs抗体等，这些检测对特异性和灵敏度，准确性都要求特别高。3、 竞争法，和检测抗原设计的竞争法完全一致，临床上用的不多，我仔细总结了一下两个很具有代表性的，也各具特点。1、抗HBc抗体，检测方法与抗原相同，包被抗原之后，分两组，一组加入预先混匀的酶标抗体和待测样品，一组只加入酶标抗体，两组的显色之差可代表待测抗体的相对含量，需注意的是待测抗体与酶标抗体是同一物质；2、抗HBe抗体检测，方法与抗原竞争法设计稍有区别，包被的抗HBe抗体后，检测也分两组，一组先加入酶标HBeAg再立即加入待测样品，一组只加酶标HBeAg，两组显色之差代表待测抗体的相对含量，这种设计中包被抗体和待测抗体是同一物质。值得注意的是混合组不是事先混匀再加入，而是先加入待测抗体后再加入酶标抗原。所有的这些复杂的注意事项确实很容易把人搞晕，但是童鞋们只需要记住一条，竞争很残酷，我们就要想尽一切办法保证竞争的公平性，这样就不会错。4、 捕获法，这种方法比较少用，由于具有识别抗体类型的优点，仅用于需要早期诊断的急性感染或者具有爆发性感染的疾病，如HAV-IgM、HBc-IgM、ToRCH等等。原理还是逃不脱经典的双抗夹心，具体方法是先包被能识别抗体类别的抗抗体，洗涤后加样品，再洗涤，加酶标记抗原，洗涤后显色，这些步骤闭上眼睛都能写出来。最后说两句，与抗原检测不同，抗体检测的设计不是根据抗体的结构特点了，这么多种设计方法，童鞋们用的时候就会选择障碍了，掌握2个原则，1.实验要求，如果需要特异性和准确性特别高，那肯定是双抗原夹心法，要求马马虎虎，那就间接法，如果要明确抗体类型，最好的选择就是捕获法了；2.实验成本，与纯化抗体不一样，有时候想要获得纯化的抗原是非常困难的，更别说两种不同的纯化抗原了，所以双抗原夹心法临床上用的并不多。ABS-ELISA顺便说一下ABS-ELISA设计，其实是和上面说的一样的，通过亲和素-生物素系统（ABS）方法显色反应，增加检测灵敏度而已，但是增加操作步骤与实验成本，而且现在单克隆抗体的技术越见成熟，抗体特异性和亲和力大大提高，灵敏度已经不是问题，所以这些次等装备已经不常用。结果判定最后和童鞋说说ELISA结果判定，分定性和定量两种。对于定性试验，参比阴、阳性对照的吸光度，以P/N或者S/CO比值形式报告。1. P/N比值是指（待测样本-空白对照）/（阴性样本-空白对照），一般以P/N≥2.1判为阳性，或许求知欲旺盛的童鞋会问，那么竞争法用P/N比值怎么判，呵呵，这里先不说，卖个乖，你可以百度或者私信我啊；2. S/CO比值，S是待测样本吸光度值，CO为CUT-OFF值，通常取值阴性对照平均值的2.1倍。S/CO比值≥1为阳性，竞争法S/CO比值≤1为阳性。定量检测没有什么可说的，老老实实做标准曲线，既锻炼实验操作能力，又可作为实验内部参照。 记得有这么个规定，定性检测不能目测判断，要凭借酶标仪检测，定量要在每次实验都得与待测样本相同实验条件下绘制标准曲线，有一难度，但是为了对实验负责，你就从了吧。

和western相同 抗体标记蛋白 然后显色

原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。ELISA技术作为免疫标记技术（包含免疫荧光技术，免疫放射技术，免疫酶技术和免疫胶体金技术）中的一种，已广泛应用于科研和临床实验中，具有快速，定性或者定量甚至定位的特点。ELISA可用于测定抗原，也可以测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：1、固相的抗原或抗体；2、酶标记的抗原或抗体；3、酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检验方法。扩展资料在ELISA实验方法中，比较常见的方法有双抗体夹心法，竞争法，间接法，双抗原夹心法，捕获法。双抗体夹心法，其基本原理是将一定量的包被抗体以物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入无关蛋白载体封闭未结合位点，然后加入待检标本，通过加入检测抗体，酶标记第二抗体后用TMB底物显色，微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈正相关。参考资料来源： 东莞市疾病预防控制中心—常用ELISA实验原理

ELISA实验原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。ELISA实验步骤及注意事项:1、固相载体选择聚苯乙烯：具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性。聚氯乙烯：聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。良好的ELISA板应该是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之间、同一板各孔之间性能相近。2、包被①板孔的选择：ELISA级别的微孔板。②抗体选择：选择支持ELISA实验的抗体，根据推荐浓度稀释或摸索最适浓度。③包被缓冲液：pH9.6碳酸盐缓冲液或pH7.2磷酸盐缓冲液。④包被温度：2-8 ℃过夜包被或室温（37℃）包被2h。⑤包被浓度：包被浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化。一般包被浓度为10ug/ml-20ug/ml。3、封闭①包被之后一定要立即封闭（封闭非特异性抗体）。②选择效果较好的封闭剂（细胞培养级BSA、Tween等）。4、加样及孵育①加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。②孵育的时间及温度参考试剂盒说明书。如有条件，建议加样孵育时使用shaker震荡仪，推荐轨道直径3mm，转速在500±50rpm。③检测抗体、酶标物的稀释比例、孵育温度、孵育时间严格根据说明书提示。④洗板对于ELISA来说，是极其关键的一步，保证ELISA的特异性。⑤封板膜一定要一次一换，切勿二次甚至多次使用，以防交叉污染。5、显色和终止①使用前需检查，底物在加入96孔板之前应为无色透明。②显色底物需现配现用，避免污染。③孵育时间，说明书上为参考范围，具体需要根据实验条件自行摸索。可参考标曲浓度最大孔的颜色，变为蓝色较明显时即可。

有英文版，名字是Mechanical and Metal Trades Handbook暂无下载

原理：利用抗原能吸附到固相载体表面的特性，使抗原抗体反应在固相载体表面进行的免疫酶技术，从而简化了抗原抗体结合物分离的手续。基本步骤：1包被：既是把抗原或抗体吸附到固相反应板上；2抗原抗体反应；3酶促反应。

ELISA双抗体夹心法 原理 ELISA双抗体夹心法(enzymelinkedimmunosorbentassay——sandwichtechnique)的原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量。生物帮有相关介绍。组织染料http://product.bio1000.com/100066/

原理是把抗原（或抗体）结合到固相载体上。Elisa是酶联免疫吸附测定的英文，能够通过抗原抗体相结合进行免疫反应测定的一种方法。检测hbcab和hbeab的方法原理是把抗原（或抗体）结合到固相载体上，并将抗原（或抗体）与某种酶连接成酶标记。

包被板上的成分有很强的阴离子吸附功能，包被液的PH为9.6，可以使被包被的蛋白质为碱性，因此可以牢固吸附在包被孔中

酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。1971年Engvall和Perlmann发表了该方法用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。间接法测抗体（indirect elisa）间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下：（1）将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原：洗涤除去未结合的抗原及杂质。（2）加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合，在洗涤过程中被洗去。（3）加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体，可用酶标羊抗人IgG抗体。（4）加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量。本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。

液相阻断ELISA其实就是将抗体（兔抗血清）包被在ELISA板中,于此同时将待检血清做几个稀释度和已知抗原在反应板中反应；4°过夜,然后将ELISA板中包被的抗体弃掉,洗板；将反应板中一定量的反应液加入ELISA板中,37°1h；然后弃液,洗板,加入一定量的一抗（豚鼠抗血清）,与所剩抗原结合,37°1h；然后弃液,洗板,加入一定量的酶标二抗（兔抗豚鼠血清+酶标记物）,37°1h；然后弃液,洗板,加入配好的显色液,37°显色10-20分钟左右,加入终止液读数.

缺点：1只是诊断的辅助手段，特异性和灵敏性有待提高。 2操作过程有些繁琐，反应血药时间，不能一蹴而就。