在革兰氏染色发中乙醇脱色处理原理是什么?

细菌是一类没有细胞核膜和细胞器膜的单细胞微生物，另一类是古细菌(archaea)。细菌是最古老，数量最多的生物，经常存在于土壤中，水中及大多数多细胞生物的体内和体外。根据细胞壁的组成成分，细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。“革兰氏”来源于汉斯·克里斯蒂安·革兰，他发明了革兰氏染色。革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。 细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。 另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。所以染色时的条件要严格控制。例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。

原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。乙醇是细胞膜上的脂类物质溶解，产生细胞膜间隙，使结晶紫与碘复合物洗出来，番红复染后呈现红色

原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

　　细菌的细胞小而透明，在普通的光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色。利用单一染料对细菌进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构，这就对简单染色，简单染色后再进行革兰氏染色，可以更容易区分革兰氏阳性和革兰氏阴性菌。 革兰氏染色法的基本步骤是：先用初染剂结晶紫进行初染，再用碘液媒染，然后用乙醇(或丙酮)脱色，最后用复染剂(如番红)复染。经此方法染色后，细胞保留初染剂蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌；如果细胞中初染剂被脱色剂洗脱而使细菌染上复染剂的颜色(红色)，该菌属于革兰氏阴性菌。　　原理： 革兰氏染色法所以能将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性，是由这两类细菌细胞壁的结构和组成不同决定的。实际上，当用结晶紫初染后，像简单染色法一样，所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色。碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫一碘的复合物，从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成，壁厚、类脂质含量低，用乙醇(或丙酮)脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。革兰氏阴性菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂含量高，所以当脱色处理时，类脂质被乙醇(或丙酮)溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的红色。

革兰氏染色原理：G＋菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

革兰氏阴性菌的细胞壁则是多层结构,从内到外依次是：薄薄的肽聚糖层,脂蛋白层/周质层,磷脂层和脂多糖层.革兰氏阴性菌的肽聚糖结构也和革兰氏阳性菌的有所不同,肽链是直接交联在一起的.

革兰染色法由丹麦病理学家Christain Gram于1884年创立，是细菌学中很重要的鉴别染色法，因为通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。百度一下吧，百度百科有详细介绍亲采纳

步骤：初染(结晶紫→水洗→媒染(路革氏碘液)→水洗→脱色(95%酒精)→复染(潘红)→水洗→干燥、镜检原理：细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前二步结果是一样的，但在G+细胞中，乙醇还能能使厚的肽聚糖层脱水，导致孔隙变小，由于结晶紫和碘的复合物分子太大，不能通过细胞壁，保持着紫色。在G-细胞中，乙醇处理不但破坏了胞壁外膜，还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜，于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来，当再用衬托的染色液复染时，显现红色。红色染料虽然也进入已染成紫色的G+细胞，但被紫色盖没，红色显示不出来。

1、涂片环节，不能涂得太厚，否则染色脱色都会有影响；2、干燥环节，要将菌体固定住，还不能烧变形；3、脱色环节，这是最最重要的，要掌握好乙醇的量和速率，脱色太过容易使阳性菌检出假阴性，脱色不足容易使阴性菌检出假阳性。未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。扩展资料：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色。而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。革兰氏染色原理尚不肯定，可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因素有关。致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、碳疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌。百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等均属革兰氏阴性。参考资料来源：百度百科——革兰氏染色

枯草杆菌的提纯和染色过程中，革兰氏染色法被用来观察菌体的染色性质和细菌形态。这种方法的基本原理是，细菌细胞壁的成分之一是类脂物质，它可以被碱性染料染色，而革兰氏染料是一种广泛使用的碱性染料，可以用于观察细菌细胞壁的结构和成分。具体来说，枯草杆菌的革兰氏染色过程分为以下几个步骤：涂片：将枯草杆菌涂抹在载玻片上，然后在显微镜下观察。漂洗：用缓冲液冲洗载玻片，以去除多余的染料。滴定：将适量的革兰氏染料滴在载玻片上，等待几分钟使其溶解。染色：将涂有染料的载玻片放入培养皿中，然后将培养皿放入37 ℃的温水中，使染料扩散并均匀地涂在细菌表面。水洗：用清水冲洗载玻片，直到载玻片变干。干燥：让载玻片自然风干，防止出现晕染现象。观察：观察染色后的枯草杆菌形态和结构，确定其是否符合实验要求。通过革兰氏染色法，我们可以观察到枯草杆菌的形态和结构，从而更好地理解细菌的生物学特性和生态学作用。同时，这种方法也可以用于快速筛选出对某种染料敏感的细菌，以及检测某些细菌的抗药性状况。

革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色；而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态,细胞壁孔径大,不能阻止溶剂透入,因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色.虽然如此,革兰染色的差异并不能完全认为是化学的差别,也因物理结构不同结果不同,例如酵母菌细胞壁的成份完全和细菌不同,但具有革兰染色阳性反应.

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第一部分 实验的目《环境微生物学及实验》实验课是我院环境科学专业学生必修的一门重要的基础实验课，是学生进入我院实验室的第一门实验课。《环境微生物学及实验》实验的目的是使学生掌握微生物学的基本实验方法和技术，正确的使用实验的仪器设备，在学生头脑中建立无菌概念和掌握无菌操作技能是最重要的内容，是学生进行后续课实验和研究的基础。在目前的实验室条件和有限学时的情况下，得到微生物实验技术的基本操作和技能训炼，培养学生动手操作能力和创新能力。通过微生物学实验课教学，加深理解和巩固课堂所学的知识，熟悉微生物学实验的基本操作技术，了解微生物实验的基础知识。通过微生物学实验培养学生观察、思考、分析问题、解决问题的能力，养成实事求是、严肃认真的科学态度、创新精神、创新思维和创新能力。我们在二十年微生物学实验教学经历的基础上，参考国内兄弟院校和国外有关教材，总结、综和各方面的经验，编写了本实验指导书，力求在各个实验里安排尽量多的微生物实验基本操作和微生物学知识点。本实验指导书书主要内容包括：微生物个体和菌落形态观察、染色方法、培养基制备和灭菌、无菌操作、微生物检测和分离、生理生化反应、影响微生物生长的因素和污染物微生物降解实验，水中微生物分布调查等内容。同时也注意和环境微生物学的联系与区别。整个实验课中贯穿了显微镜使用——三种灭菌方法——无菌操作——环境工程微生物菌种分离筛选鉴定、选育——污染物分解和调查这一主线。微生物学需掌握的基本操作在实验中得到训练，同时加深了学生对所学微生物学基本概念的理解。实验设计贴近生活，可以大大提高同学们学习微生物学的兴趣。实验内容与目录如下：实验一 光学显微镜的使用及示教片的观察实验二 微生物的染色技术及细菌的观察实验三 原生动物、微型后生动物、藻类和活性污泥的观察实验四 培养基的制备和灭菌实验五 细菌淀粉酶和过氧化氢酶定性实验及其生化特征观察实验六 纯种微生物的分离、转种和培养实验七 有机污染物质的生物降解实验*实验八 污染土壤和水体中细菌总数的测定**注：实验六、实验七、实验八选做其一。第二部分 微生物学实验室规则微生物学实验的对象大多为环境微生物，其中某些微生物对人体具有危害性，因此要求进入实验室后必须严格遵守以下实验室规则：1.进入实验室应先穿白大衣，离开实验室时要脱下白大衣，反折放回原处，不必要的物品不得带入实验室，必须带入的书籍和文具等应放在指定的非操作区，以免受到污染。无菌操作时必须戴口罩，并不得开电风扇。2．进入实验室进行实验前应先洗手，避免手上的分秘物，食物油，护肤用品和沾染的微生物等对实验造成污染。3．实验室内禁止饮食、抽烟，不得高声说笑或乱走乱串。4．各种实验物品应按指定地点存放，用过的器材必须经消毒处理，禁止随意放于桌上或冲入水槽。5．须送恒温生化培养箱培养的物品，应做好标记（标明姓名、编号、日期、培养时间）后送到指定地点。6．实验过程中如发生意外事故时，禁止隐瞒或自作主张不按规定处理，应立即报告老师进行正确的处理。如有传染性、腐蚀性的材料污染桌面、地面等，应立即用0. 2%-0. 5% “84”消毒液浸泡污染部位，作用5～10min后方可抹去。如手被活菌污染也应使用上述消毒液浸泡5～10min或肥皂清洗后，再以自来水反复冲洗干净，必要时去卫生所或医院就医。7．爱护室内仪器设备，严格按操作规则使用。节约使用实验材料，不慎损坏了器材等，应主动报告老师进行处理。8．实验完毕，应物归原处、将台面整理清洁，将实验室打扫干净。最后以肥皂洗手后方可离开实验室。第三部分 实验内容实验一、光学显微镜的使用及示教片的观察实验项目性质：基础验证性实验所属课程名称：《环境微生物学及实验》实验计划学时：4学时一、实验目的 1. 学习并掌握油镜的原理和使用方法。 2. 复习普通台式显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。 二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常 被称为复式显微镜。它们由机械装置和光学系统两大部分组成。在显微镜的光学系统中，物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。而在普通光学显微镜通常配置的几种物镜中，油镜的放大倍数最大，对微生物学研究最为重要。与其他物镜相比，油镜的使用比较特殊，需在载玻片与镜头之间加滴镜油，这主要有如下二方面的原因： 1. 增加照明亮度 油镜的放大倍数可达 100 Χ，放大倍数这样大的镜头，焦距很短，直径很小，但所需要的光照强度却最大。从承载标本的玻片透过来的光线，因介质密度不同（从玻片进入空气，再进入镜头），有些光线会因折射或全反射，不能进入镜头，致使在使用油镜时会因射入的光线较少，物像显现不清。所以为了不使通过的光线有所损失，在使用油镜时须在油镜与玻片之间加入与玻璃的折射率（ n=1.55 ）相仿的油镜（通常用香柏油，其折射率 n=1.52）。 2. 增加显微镜的分辨率 显微镜的分辨率或分辨力 (resolution or resolving power) 是指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力。从物理学角度看，光学显微镜的分辨率受光的干涉现象及所用物镜性能的限制，分辨力D可表示为：D=λ/2N.A，式中λ= 光波波长； NA= 物镜的数值孔径值。 光学显微镜的光源不可能超出可见光的波长范围（ 0.4--0.7 μ m ），而数值孔径值则取决于物镜的镜口角和玻片与镜头间介质的折射率，可表示为：NA=n × sin α式中α为光线最大入射角的半数。它取决于物镜的直径和焦距，一般来说在实际应用中最大只能达到 120 O ，而 n 为介质折射率。由于香柏油的折射率（ 1.52 ）比空气及水的折射率（分别为 1.0 和 1.33 ）要高，因此以香柏油作为镜头于玻片之间介质的油镜所能达到的数值孔径值（NA 一般在1.2-1.4）要高于低倍镜、高倍镜等干镜（ NA 都低于 1.0）。若以可见光的平均波长 0.55 μm来计算，数值孔径通常在0.65左右的高倍镜只能分辨出距离不小于0.4μm的物体，而油镜的分辨率却可达到 0.2 μ m 左右。三、实验器材 1. 菌种：枯草芽孢杆菌（ Bacillus subtilis ）染色玻片标本。青霉（Penicillium sp.）的水封片等（教师可根据具体情况选用菌种）。 2. 溶液或试剂：香柏油、乙醇：乙醚混合液 3. 仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸等。 四、操作步骤 1. 观察前的准备 （1） 显微镜的安置：置显微镜于平整的实验台上，镜座距实验台边缘约3-4cm 。镜检时姿势要端正。 取放显微镜时应一手握住镜臂，一手托住底座，使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提；且不论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察，以减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或记录。 （2） 光源调节：安装在镜座内的光源灯可通过调节电压以获得适当的照明亮度，而使用反光镜采集自然光或灯光作为照明光源时，应根据光源的强度及所用物镜的放大倍数选用凹面或凸面反光镜并调节其角度，使视野内的光线均匀，亮度适宜。 （3）根据使用者的个人情况，调节双筒显微镜的目镜，双筒显微镜的目镜间距可以适当调节，而左目镜上一般还配有曲光度调节环，可以适应眼距不同或两眼视力有差异的不同观察者。 （4） 聚光器数值孔径值的调节：调节聚光器虹彩光圈值与物镜的数值孔径值相符或略低。有些显微镜的聚光器只标有最大数值孔径值，而没有具体的光圈数刻度。使用这种显微镜时可在样品聚焦后取下一目镜，从镜筒中一边看着视野，一边缩放光圈，调整光圈的边缘与物镜边缘黑圈相切或略小于其边缘。因为各物镜的数值孔径值不同，所以每转换一次物镜都应进行这种调节。 在聚光器的数值孔径值确定后，若需改变光照强度，可通过升降聚光器或改变光源的亮度来实现，原则上不应再通过虹彩光圈的调节。当然，有关虹彩光圈、聚光器高度及照明光源强度的使用原则也不是固定不变的，只要能获得良好的观察效果，有时也可根据不同的具体情况灵活运用，不一定拘泥不变。 2. 显微观察 在目镜保持不变的情况下，使用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的。一般情况下，特别是初学者，进行显微观察时应遵守从低倍镜到高倍镜再到油镜的观察程序，因为低倍数物镜视野相对大，易发现目标及确定检查的位置。 （1） 低倍镜观察 金黄色葡萄球菌染色标本玻片置于载物台上，用标本夹夹住，移动推进器使观察对象处在物镜的正下方。下降 10 Χ物镜，使其接近标本，用粗调节器慢慢升起镜筒，使标本在视野中初步聚焦，再使用细调节器调节图象清晰。通过玻片夹推进器慢慢移动玻片，认真观察标本各部位，找到合适的目的物，仔细观察并记录所观察到的结果。 在任何时候使用粗调节器聚焦物像时，必需养成先从侧面注视小心调节物镜*近标本，然后用目镜观察，慢慢调节物镜离开标本进行准焦的习惯，以免因一时的误操作而损坏镜头及玻片。 （2） 高倍镜观察 低倍镜下找到合适的观察目标并将其移至视野中心后，轻轻转动物镜转换器将高倍镜移至工作位置。对聚光器光圈及视野亮度进行适当调节后微调细调节器使物像清晰，利用推进器移动标本仔细观察并记录所观察到的结果。 在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后，转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦的状态，这种现象称为物镜的同焦 (parfocal) 。利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片。 （3） 油镜观察 高倍镜或低倍镜下找到要观察的样品区域后，用粗调节器将镜筒升高，然后将油镜转到工作位置。在待观察的样品区域加滴香柏油，从侧面注视，用粗调节器将镜筒小心地降下，使油镜浸在镜油中并几乎与标本相接。将聚光器升至最高位置并开足光圈，若所用聚光器的数值孔径值超过 1.0 ，还应在聚光镜与载玻片之间也加滴香柏油，保证其达到最大的效能。调节照明使视野亮度合适，用粗调节器将镜筒徐徐上升，直至视野中出现物像并用细调节器使其清晰准焦为止。 有时按上述操作还找不到目的物，则可能是由于油镜头下降还未到位，或因油镜上升太快，以至眼睛捕捉不到一闪而过的物像。遇此情况，应重新操作。另外应特别注意不要因在下降镜头时用力过猛，或调焦时误将粗调节器向反方向转动而损坏镜头及载玻片。 3. 显微镜用毕后的处理 （1） 上升镜筒，取下载玻片。 （2） 用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸蘸少许二甲苯（香柏油溶于二甲苯）擦去镜头上残留的油迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。 （3） 用擦镜纸清洁其他物镜及目镜；用绸布清洁显微镜的金属部件。 （4） 将各部分还原，反光镜垂直于镜座，将物镜转成“八”字形，再向下旋。同时把聚光镜降下，以免接物镜与聚光镜发生碰撞危险。 五、实验报告 1.分别绘出你在低倍镜、高倍镜和油镜下观察到的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌及青霉的形态，包括在三种情况下视野中的变化。同时注明物镜放大倍数和总放大率。 六、思考题 1、用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？ 2、试列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？ 3、什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？ 4、影响显微镜分辨率的因素有哪些？ 5、根据你的实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察。 实验二、微生物的染色技术及显微镜观察实验项目性质：基础验证性实验所属课程名称：《环境微生物学及实验》实验计划学时：4学时一、细菌的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征，巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明，在普通的光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色。利用单一染料对细菌进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构。此法操作简便，适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。常用碱性染料进行简单染色，这是因为在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下更易于识别。常用作简单染色的染料有美蓝、结晶紫、碱性复红等。 当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细菌所带正电荷增加，此时可用伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料染色。 染色前必须固定细菌。其目的有二：一是杀死细菌并使菌体粘附于玻片上；二是增加其对染料的亲和力。常用的有加热和化学固定两种方法。固定时尽量维持细胞原有的形态。 3 材料 3.1 菌种 枯草芽孢杆菌12～18h营养琼脂斜面培养物、金黄色葡萄球菌约24h营养琼脂斜面培养物、大肠杆菌24h营养琼脂斜面培养物、面包酵母琼脂斜面培养物。实验教师可根据具体情况提供合适的菌种。3．2 染色剂 吕氏碱性美蓝染液(或草酸铵结晶紫染液)，石炭酸复红染液。 3.3 仪器或其他用具 显微镜，酒精灯，载玻片，接种环，玻片搁架、双层瓶(内装香柏油和二甲苯)，擦镜纸，生理盐水或蒸馏水等。 4 流程 涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→镜检。 5 步骤 5.1 涂片 取两块洁净无油的载玻片，在无菌的条件下各滴一小滴生理盐水(或蒸溜水)于玻片中央，用接种环以无菌操作，分别从枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌和大肠杆菌斜面上挑取少许菌苔于水滴中，混匀并涂成薄膜。若用菌悬液(或液体培养物)涂片，可用接种环挑取2～3环直接涂于载玻片上。注意滴生理盐水（蒸馏水）和取菌时不宜过多且涂抹要均匀，不宜过厚。 5.2 干燥 室温自然干燥。也可以将涂面朝上在酒精灯上方稍微加热，使其干燥。但切勿离火焰太近，因温度太高会破坏菌体形态。5.3 固定 如用加热干燥，固定与干燥合为一步，方法同干燥。 涂片、干燥和热固定。5.4 染色 将玻片平放于玻片搁架上，滴加染液1～2滴于涂片上(染液刚好覆盖涂片薄膜为宜)。吕氏碱性美蓝染色1～2min，石炭酸复红(或草酸铵结晶紫)染色约1min 。 5.5 水洗 倾去染液，用自来水从载玻片一端轻轻冲洗，直至从涂片上流下的水无色为止。水洗时，不要水流直接冲洗涂面。水流不宜过急、过大，以免涂片薄膜脱落。 5.6 干燥 甩去玻片上的水珠自然干燥、电吹风吹干或用吸水纸吸干均可以（注意勿擦去菌体）。 5.7 镜检 涂片干后镜检。涂片必须完全干燥后才能用油镜观察。 6 结果 绘制单染色后观察到的大肠杆菌和藤黄微球菌的形态图。 二、革兰氏染色法 1 目的 1.1 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。1.2 学习掌握革兰氏染色技术，巩固学习光学显微镜油镜的使用方法。 2 原理 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家Christain Gram氏创立的，革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类。革兰氏染色法是细菌学中最重要的鉴别染色法。革兰氏染色法所以能将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性，是由这两类细菌细胞壁的结构和组成不同决定的。实际上，当用结晶紫初染后，像简单染色法一样，所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色。碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫一碘的复合物，从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成，壁厚、类脂质含量低，用乙醇(或丙酮)脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。革兰氏阴性菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂含量高，所以当脱色处理时，类脂质被乙醇(或丙酮)溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的红色。 3 材料 3.1 菌种 大肠杆菌（Escherichia coli）约24h营养琼脂斜面菌种一支，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）约16h牛肉膏琼脂斜面菌种一支。 3.2 染色剂 结晶紫染色液、卢戈氏碘液、95%乙醇、石炭酸复红液。3.3 仪器或其他用具 显微镜、擦镜纸、接种环、载玻片、酒精灯、蒸馏水、香柏油、二甲苯。 4 流程 涂片→干燥→固定→染色（初染→媒染→脱色→复染）→镜检。 5 步骤 5.1 涂片 5.1.1 常规涂片法 取一洁净的载玻片，用特种笔在载玻片的左右两侧标上菌号，并在两端各滴一小滴蒸馏水，以无菌接种环分别挑取少量菌体涂片，干燥、固定。玻片要洁净无油，否则菌液涂不开。 5.2 初染 滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)于两个玻片的涂面上，染色1～2min ，倾去染色液，细水冲洗至洗出液为无色，将载玻片上水甩净。 5.3 媒染用卢戈氏碘液媒染约l min ，水洗。 5.4 脱色 用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加95%的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗，终止脱色，将载玻片上水甩净。 革兰氏染色结果是否正确，乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节。脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌，脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌。脱色时间一般约20～30s。 5.5 复染 在涂片上滴加番红液复染约2～3min ，水洗，然后用吸水纸吸干。在染色的过程中，不可使染液干涸。 5.6 镜检 干燥后，用油镜观察。判断两种菌体染色反应性。菌体被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌（G+），被染成红色的为革兰氏阴性菌（G-）。5.7 实验结束后处理 清洁显微镜。先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少许二甲苯擦去镜头上的残留油迹，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯。染色玻片用洗衣粉水煮沸、清洗，凉干后备用。 三、实验结果 1 根据观察结果，绘出两种细菌的形态图。 2列表简述两株细菌的染色结果(菌的形状、颜色和革兰氏染色反应)。

革兰氏染色是大家检测过程中常用到的基本技能之一，也是辅助我们鉴别菌种种类的基础方法之一。但大家在日常的革兰氏染色过程中有没有发现过这样的问题：明明是革兰氏阴性菌，怎么我的染色结果是阳性呢？或者怎么阳性菌被我染成阴性了呢？为什么会产生这样的偏差？革兰氏染色是一项经典的细菌鉴别手段，自19世纪80年代丹麦的医师GRAM创立起，至今已经近一个半世纪，仍旧在细菌的检测和鉴定分类上被广泛应用着。在我国，GB 4789系列的国标中很多致病菌的检测也都需要进行革兰氏染色，可见其重要性。甚至可以说没有精准掌握革兰氏染色的微生物检验员，不会是一个合格的检验员。革兰氏染色的原理：细菌细胞通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物， 革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而 革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。革兰氏染色的步骤：涂片、晾干、固定、染色、水洗、媒染、脱色、复染。此处不加赘述。影响革兰氏染色结果准确性的关键因素：1.试剂影响。这是我们首先应该确保的，我们使用的试剂必须是有效的。 实验室应当建立有效的试剂管理程序，从试剂的验收到存放、使用、过期后的废弃处理都应有严格规定，确保我们使用的试剂是有效的。工欲善其事必先利其器，这也是我们试验成功最基础的一环。2.染色菌的选择。菌龄对革兰氏染色结果的影响是十分大的。 我们染色过程中选择的菌应该是处于活跃生长期，这样的细菌活性强，生理特征明显，所以染色的结果准确度高，一般情况下不会出现误差。培养时间较长的革兰氏阳性菌，由于细胞老化，甚至有部分菌在染色之前就已经死亡或者自行溶解了，造成细胞壁通透性增加，就会呈现出假阴性。以金黄色葡萄球菌为例，金葡是典型的革兰氏阳性菌，有人曾经统计过培养至不同时间的金葡的革兰氏染色结果，结果表明，在金葡活跃期的22h-26h之间，染色结果的准确率基本可以达到100%，而超过26h之后，准确率就开始下降，培养至36h时，准确率大概会下降30%左右。所以我们在染色时，一定要选择处于活跃期、活性较强的菌落，在检测过程中一定要严格的在国标要求的时间段内进行染色试验，不能提前或者延后。3.涂菌的状态。在染色最初的涂布中，在挑取菌体后应该在无菌水上涂成薄薄的菌膜。而在涂布过程中，若是菌体堆积，也会极大影响染色结果的准确性。 菌落堆积过多，往往菌体之间变得毫无缝隙，而其细胞壁的成分影响造成了脱色的情况不佳，容易产生假阳性的结果。同时，在初染、媒染及复染的过程中，应将染液覆盖整个菌膜，避免一部分菌染色而另一部分菌没有染色。因此在涂片过程一定要将菌膜涂得少而均匀，这样才能达到最佳效果。4.媒染时间。媒染时间对革兰氏阴性菌的染色结果有很大影响。 由于媒染时间过长，结晶紫在碘液长时间作用下过分牢固结合在菌体细胞壁上，影响了酒精的脱色效果，从而会导致这种假阳性的效果。以典型的革兰氏阴性菌大肠埃希氏菌为例，有人做过统计，媒染时间严格控制在40s-60s之内，染色结果准确率基本可达到100%，而超过60s准确率会有一定的降低，若媒染超过100s，准确率甚至可降低接近20%左右。因此在媒染过程中一定要注意媒染时间，控制在50-60s为宜。5.酒精脱色。酒精脱色也是一个对结果影响较大的操作过程。革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌最主要的差异是细胞壁肽聚糖层厚度和结构，革兰氏阴性菌细胞壁肽聚糖层很薄，脂多糖含量高因此在酒精脱色时，细菌细胞壁的多糖成分会被酒精溶解，增大了细胞壁的通透性，结晶紫及碘复合物就很快被酒精洗脱，之后就会被沙黄复染呈红色；而阳性菌肽聚糖层厚，脂多糖少，酒精只能起到脱水效果而无法进入，这样结晶紫和复合物就无法洗脱出来使细胞呈紫色。 因此，酒精脱色时间短，脱色效果不佳，会导致阴性菌菌体内的结晶紫和复合物不能有效的全部洗脱出来，就会出现明显的误差，使阴性菌出现假阳性。而洗脱时间过长，也会导致阳性菌的细胞壁被酒精破坏，导致细胞内的紫色被洗脱，呈现假阴性。因此洗脱时间也是革兰氏染色的关键环节。洗脱时间应当严格控制在20s-30s之间，同时保证洗脱效果。

微生物学中最重要的染色方法。其机制直到在该方法发明100年后才得到了确切的证明。1983年，T.Beveridge等人用铂代替革兰氏染色原有媒染剂碘的作用，再用电镜观察到结晶紫与铂复合物可被细胞壁阻留，从而证明了革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌主要由于其细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性（脱色能力）的不同，正由于这一物理特性的不同才决定了最终染色反应的不同。

脱色环节脱色不足会把革兰氏阳性菌染成阴性菌，脱色过度会把阴性菌染成阳性菌。

同学你好。是可以分辨的。因为在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋），被酒精脱色为革兰氏阴性菌。最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。了解下原理吧革兰氏染色原理：G＋菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色. 乙醇是细胞膜上的脂类物质溶解,产生细胞膜间隙,使结晶紫与碘复合物洗出来,番红复染后呈现红色

1、涂片环节，不能涂得太厚，否则染色脱色都会有影响；2、干燥环节，要将菌体固定住，还不能烧变形；3、脱色环节，这是最最重要的，要掌握好乙醇的量和速率，脱色太过容易使阳性菌检出假阴性，脱色不足容易使阴性菌检出假阳性。未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。扩展资料：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色。而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。革兰氏染色原理尚不肯定，可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因素有关。致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、碳疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌。百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等均属革兰氏阴性。参考资料来源：百度百科——革兰氏染色

革兰氏染色阳性呈兰紫色，阴性呈桃红色。以此判断将菌种放在载波片上，按1结晶紫（1-2min）2碘酒(1min)3酒精(30-50sec)4砂黄(1min)的顺序染色.其中每步都要用水洗，并用吸水纸擦干

在一般情况下，当物体的温度升高时，物体的体积膨胀、密度减小，也就是通常所讲的“热胀冷缩”现象。然而水在由0摄氏度温度升高时，出现了一种特殊的现象。在温度由0摄氏度上升到4摄氏度的过程中，水的密度逐渐加大；温度由4摄氏度继续上升的合过程中，水的密度逐渐减小；水在4摄氏度时的密度最大；水在0摄氏度至14摄氏度的范围内，呈现出“冷胀热缩”的现象，称为反常膨胀。水的反常膨胀现象可以用氢键、缔合水分子理论予以解释。

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承兑汇票是许诺一定期限后将资金付给收款人。打个比方，如果A把一批货卖给B，B开出一个承兑汇票给A，期限是3个月还是1年好呢？3个月的话，风险小，1年，到期不支付的风险大。。。所以要有期限啦。。假如你是收款人A，那么你也不希望期限太长。

水的反常膨胀对水生物的生存至关重要。水生物（或水生态系统）以水底生物为基础，其中既包括动物，也包括植物和微生物。如果水不存在反常膨胀，那么当水结冰成为固态时，是从水底开始的，这就会使水中和水面生物失去生存的基础，使以水底生物为基础的水生生态系统停止运行，甚至崩溃。而正是因为水的反常膨胀，使水成为固态时，是从水面开始的，并将水面以外的低温与水下相隔离，使冰面以下的水体温度大大高于水面以外的气温，既保证了水不会全部成为固态（需要有足够的水深和水体面积），也保证了水下生态系统继续正常运行，确保水生物的生存。

问题一：长椅的英文怎么写 bench 问题二：这种椅子用英文怎么说 hanging chair 问题三：凳子用英语怎么说 Chair 一般指的是餐厅里的那种的凳子，四角凳 Stool 通常指三脚的凳子或者圆的凳子 Bench 公园里的那种木头的，没有靠背的长板凳，也可以使水泥的 虽然你不要椅子的单词但是chair这个单词不但有椅子的意思，还有其中一种凳子的意思，希望能帮到你~:-D 问题四：椅子用英语怎么说 chair 好评啊！！！！！谢谢！！ 问题五：在椅子下面 用英语怎么说？ under the chair 问题六：凳子用英文怎么说 凳子分好几种呢，不知道你指的是哪一种？Chair 一般指的是餐厅里的那种的凳子，四角凳 Stool 通常指三脚的凳子或者圆的凳子 Bench 公园里的那种木头的，没有靠背的长板凳，也可以使水泥的 Couch 指的是躺椅，可以是软的，也可以是竹子编的那种 Sofa 沙发 问题七：椅子的英语怎么说 回答和翻译如下 ： chair 椅子

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是内外机的连接管，制冷时，制冷剂从细管流出室外机，进入室内机，然后再通过粗管从室内机回到室外机

　　kms激活到底安全与否分析如下： 　　1、如果是KMS虚拟服务器激活不会有安全问题。因为激活后不需要保持KMS的进程，这样软件就不会有可乘之机。 　　2、但是如果是一些需要通过持续运行才能保持系统激活状态的软件就可能有安全问题，因为用户不能删除或停止这些软件，否则激活会失效，这个特性会有安全隐患。 　　拓展资料：Key Management Service（简称：KMS），这个功能是在Windows Vista之后的产品中的一种新型产品激活机制，目的是Microsoft更好的遏制非法软件授权行为（盗版）。

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中文名称：硝基甲烷； 化学式：CH3NO2中文同义词：硝基甲烷；一硝基甲烷；硝甲烷；硝酸甲烷；硝基甲烷, 98+%；硝基甲烷(备库)；硝基甲烷(55%的甲醇溶液,约8.7MOL/L)；硝基甲烷(易制爆)； 英文名称：Nitromethane； 英文同义词：NM;NITROCARBOL;AKOS BBS-00004260;CH3NO2;methane,-nitro-;Methane,nitro-;Nitrofuel;Nitrometan； EINECS号：200-876-6； Mol文件：75-52-5.mol； CAS号：75-52-5； 分子结构：

我感觉只是一个奇怪的梦而已，没有必要想的太多，想多了会影响心情的。

本教程和大家一起来分享一下质量效应3三个结局，希望对各位玩家有帮助。第一次通关后确实有迷茫之感，料想中的好莱坞式大胜利结局没有出现，取而代之的是三个“莫名其妙”的选择。没有一个是完美的，MassRelay都要被摧毁，主角都要死掉，Anderson都救不了，Citadel上芸芸众生都无法保存。也难怪很多网友喷剧情狗血了我们希望的结局是怎么样的?经过所有人们的努力，Crucible制造接近完成，主角攻入Cerberus总部消灭IllusiveMan并获取催化剂，在包括剩余的Cerberus醒悟人员们的帮助下，Crucible完成。然后经过激战，人们夺回了Citadel，无数舰队通过牺牲自己保护Crucible，将其安装在Citadel上，Crucible开火，将所有Reaper消灭殆尽。废墟中的人们起身欢呼，虽然损失巨大，但是却争来了希望。本来以为死掉的主角一行从Citadel的废墟中走出，故事划上了一个完美的句号。如果有这么一个结局，玩家在通关之后会非常振奋。各种指责不会再有，如同观看完一个类似阿凡达的好莱坞大片一样。好评如潮，ME系列也算是获得了一个巨大的成功。但是这是我们的看法，而制作人员们却看到了更好的结局，虽然一开始不会讨人们喜欢，但是却比使用一个俗套的好莱坞结局更适合一个史诗般的科幻巨作。静下心来，体验完所有的结局后在慢慢思考，你也会发现：ME3的结尾三个结局，确实是让本作成为系列顶峰的神来之笔首先，我们从Reaper说起从ME1到2，甚至包括3的绝大部分，主题就是：Reaper是不折不扣的大坏蛋，五万年收割一次有机文明的行为使得他们同我们形同水火，所以我们所有的努力都是要为了摧毁Reaper。但是事实呢?并非如此，Reaper五万年收割一次的目的，非但不是为了消灭有机生命，反而恰恰是为了保护。Reaper之所以这么做，是因为一个简单的三段论得到的答案(由Catalyst亲口所说)：有机生命一定会造出比他们自己强大的机械生命。机械生命一定会背叛且摧毁他们的创造者结论：有机生命一定会被自己创造的机械生命毁灭解决这个问题的答案，就是Catalyst发现的Solution，就是Reaper们的真正目的：每五万年消灭一次发达的有机生命，将他们制成Reaper得以保存，留下较落后的有机文明并给他们腾出生存空间。从而有机文明才不会被自己制造的机械生命毁灭，才能繁衍后代生生不息所以，Reaper们的努力，其目的却是和ME1+2+3大多数游戏所灌输的相反的。也怪不得很多玩家一下接受不了，从而认为剧情狗血了我们再看看系列中的另一个大反派：Cerberus直到最后，不管是主角还是Anderson都认为，theIllusiveMan想要控制Reaper的行为，是完全的对权力的渴求，对有机生命的亵渎，对及其自私异想天开的行为。theIllusiveMan一定要为此付出代价，theIllusiveMan一定要被消灭。但是最后揭示的结果呢，却和Reaper的目的类似：theIllusiveMan的目的真真正正是为了保证人类的最好选择：控制Reaper。打断循环，同时因为掌握强大的Reaper力量，能避免有机文明造出机械文明从而导致自我毁灭。世人没能看到theIllusiveMan的用心良苦，连主角也是在最后同Catalyst交流后才认识到：theIllusiveMan的选择确实是最好的保护有机生命，也能从某种意义保护他们不被毁灭的最佳选择。包括主角在内的各个文明，无论是高度发达的Asari还是极度聪明的Salarian，还是历经风雨的主角，相比theIllusiveMan而言，都是井底之蛙。但是也不能完全说theIllusiveMan是好人，虽然他看到了众人看不到的最佳选择，但是他因此而付出的代价太重，为此牺牲了太多，走的太远，而且目的也是仅仅保证人类文明的生存，最主要的是，和主角对着干了。所以难逃悲惨的命运“Shepard，我希望在你眼中的地球，和在我眼中的一样：是那么的完美”他对人类的爱，从这一句话中，流露的淋漓尽致混乱和秩序：如果你能从前文理解我的意思，那么也应该能理解Reaper为什么要追求他们的“秩序”而要尽量避免“混乱”了Reaper是机械生命，所有结论都是基于冰冷的逻辑(参考前面的三段论)和精确的计算，但是如果一个文明发展的太前进，那么就会脱离Reaper的计算范围，从而导致他们所说的“混乱”要保存有机生命，还要让一切严格的处于自己的控制之下。五万年收割一次高等有机文明的解决方案，对于Reaper来说是最好的也是唯一的方案。但是正如Catalyst所说：主角站在他面前，就已经“证明了Reaper的解决方案不再适合了”为什么要这么说?因为在Reaper的计算中，有机生命永远也不会有机会站在Catalyst面前。而这一结论已经被众人和主角的努力推翻了。正如有一天人们发现1+1不等于2了，那么2+2=4这样的推论将会全部被证明是错误的本着保护有机生命，但是已经不知道如何选择的Reaper来说(已经他们的计算结论已经被证明是错误的)，只能将最后的选择，交给主角来完成。最后三个结局的选择：结局1(红光)：摧毁所有的机械生命在主角的幻觉中，Anderson毫不迟疑的举枪摧毁了Reaper的控制中枢。因为Anderson在三部曲的全部努力，就是为了摧毁Reaper，一个军人的尊严，勇气和气概。在举枪摧毁Reaper的时候表现的淋漓尽致。但是摧毁中枢还会导致全银河所有类型的机械生命的毁灭，包括Geth，包括EDI。可以看做是Reaper们当时留下的后门：如果某个有机文明在Reaper的意料之外制造出了连Reaper都抵挡不了的机械生命，那么就要靠这条途径大家来个鱼死网破。也看出了Reaper们为了保护有机生命的用心良苦。有机生命，正如他们的诞生那样，是一个充满奇迹和充满巧合的过程，如梦幻一般的，几个碳原子意外的走到了一起，一道生物电奇迹般的发射了出去，后来居然有了自我复制的能力...有机生命诞生于无法想象的奇迹，其本身就可以说是诞生于混沌。而使用机械生命冷冰冰的数理逻辑来管理他们，本来就是不符合常理的。有机生命，就应该由他们自己来决定自己的道路，是走向升腾也罢，是自生自灭也罢，这是有机生命的命运，是他们命中注定在诞生一刻就已决定的道路。就算是最后一定要完结，但是也曾经辉煌过，灿烂过。正如我们每个人的一生一样。选择了这个这局的主角，如同Anderson一样，聚集起生命最后的力气，义无反顾的举枪射击，伴随着巨大的爆炸，Reaper的控制中枢被摧毁了。地球上的Reaper纷纷倒下，人们欢呼雀跃。摧毁机械生命的红色脉冲以毁灭MassRelay为代价，传播到了银河系的每一个角落。也许有机生命终有一天会被自己制造的机械生命毁灭，但也许不会，“总有一条其他的途径”。正如Anderson所说，不再有Reaper阴影的严格控制，有机生命从此获得了真正的自由。这个自由，这个希望，是有机生命存在的本质意义。结局2(蓝光)：控制Reaper在主角的幻觉中，theIllusiveMan站在电光四闪的Reaper控制台前，燃烧着自己的身体，放弃曾经的一切。换取对Reaper的控制。Geth不会死，战后他们会继续帮助Quarian重建他们的家园，从而书写机械和有机生命和谐共处的美好篇章(根据玩家的选择而定)。EDI不会死，她和Joker的故事才刚刚开始。一切像是回到了以前的样子，Reaper不再是大家的威胁，反而成了黑暗中默默守护有机生命的保护神。这些曾经的Prothean，曾经的任何一个高等有机生命们，将会在主角的领导下。看着自己的孩子们滚打摸爬，创造出属于他们自己的一片天空。单纯的Reaper因为冰冷逻辑的限制，并不具备看守更高等有机文明的能力了，但是主角可以。如果说结局一是将有机生命放归到属于他们自己的混乱之中，那么蓝光结局就是给他们加了一道额外的保护。看似是混乱的，但是实际是秩序的。这个选择看起来确实是最完美的，以前的都会被保留，而不再会有毁灭(至少在有机文明制造出比Reaper还强的机械文明前不会)。不但人类得到了生存的机会，每一个银河系里面的有机生命。都有了继续发展下面的希望。Genophage被治愈但是不必担心Krogan的反噬，因为他们如果继续坚持鲁莽则科技会受限制，没有MassRelay的他们已经不再是银河的威胁。Asari和Turian会收复他们的母星。Balarian也有了继续延续下去的希望。这个结局，这个选择，在所有的有机文明之中，只有一个人曾经看到了，那个人就是theIllusiveMan选择了这个结局的主角，如同theIllusiveMan一样，虽然受到重重阻挠，但是义务反顾，被电退后还是用尽最后的力气抓住了控制台的把手，从而被分解，曾经的一切都失去了，但是换取的，却是全银河，无论是有机生命，还是机械生命的希望和保护。地球上的Reaper停止攻击，纷纷起飞离开，人们举枪欢呼。以MassRelay的毁灭为代价，蓝色的光芒传播到了银河每一个Reaper的身上。结局3(绿光)：融合全银河的有机和机械生命这是人们没有看到的选择，这是主角没有看到的选择，这是连theIllusiveMan都没有看到的选择，甚至连Reaper们也是在有了Crucible的帮助下才看到了这一条道路。这是一个只有Reaper才能勉强理解的选择。有机生命和机械生命间不再有分歧，因为大家本质都一样了，以后还有没有冲突是一个未知数，新的生命们走向何方也是一个未知数，银河系的未来也是一个未知数，和生命相关的一切都被改变了。即便是给上一万年，Reaper和有机生命们都未必能揣测出这样的融合，这样的大进化会绘制一个怎么样的未来。谁创造了Reaper?为什么Reaper要采取如此极端的手段来保护有机生命?为什么Reaper要不断的尝试吸收有机文明改造自己?一切问题的答案，似乎都指向了那一点——Reaper的制造者们的最终目的，就是让Reaper以保护有机生命为前提，不断的磨砺他们。谁都不知道Crucible最早是谁创造的，只知道经过无数的轮回的改进，现在已经十分完善了，为什么Reaper们没有尝试摧毁Crucible?那是因为，Reaper的创造者们的目的，就是要找到一条有机生命和机械生命融合的最终方案，那就是游戏中的第三种结局，绿光结局。选择了这个结局的主角，丢下手中的武器，在重伤的情况下，居然奔跑了起来，跃入了Crucible的能量光束中。Crucible的光芒，携带者主角的灵魂，扫过了激战中的Reaper和人类，大家纷纷挺火，曾经的Reaper起飞离开，但是人们也没有举枪欢呼。一眨眼的功夫，一切都变了，一切都改变了。所有的关于生命的概念都被颠覆了。一个崭新的篇章，生命的篇章展开了。

英文文献的影响因子的看法如下：查询外文期刊影响因子我们可以用Web of Science数据库查找,该库是是获取全球学术信息的重要数据库。一、期刊的影响因子是什么？期刊的影响因子(Impact factor，IF)，是表征期刊影响大小的一项定量指标。也就是某刊平均每篇论文的被引用数，它实际上是某刊在某年被全部源刊物引证该刊前两年发表论文的次数，与该刊前两年所发表的全部源论文数之比。计算公式：IF(k)= (nk-1+nk-2) / ( Nk-1+Nk-2)。二、如何查询期刊影响因子首先，查询影响因子要知道具体的查询地址，外文期刊和中文期刊的查询地址不同。1、查询外文期刊影响因子，可使用外文数据库Web of Science中的JCR，其中JCR Science Edition 用于查询自然科学类期刊，JCR Social Sciences Edition用于查询人文社会科学类期刊。2、查询中文期刊的影响因子，可使用中国学术期刊（光盘版）电子杂志社和中国科学文献计量评价中心联合推出的《中国学术期刊综合引证报告》（万锦_主编，科学出版社）。有需要的读者请到图书馆咨询部查询。其次，查询影响因子必需知道期刊缩写名，这个有很多规则，具体如下：1、单个词组成的刊名不得缩写部分刊名由一个实词组成，如Biomaterials，nature，science等不得缩写。2、刊名中单音节词一般不缩写英文期刊中有许多单音节词，如FOOD，CHEST，CHILD，这些词不得缩写。如医学期刊hearand lung, 缩写为Heart Lung,仅略去连词and.但少数构成地名的单词，如NEW，SOUTH等，可缩写成相应首字字母。如New England Journal of Medcine,可缩写为N Engl J Med,不应略为New Engl J Med，South African Journal of Surgery可缩写为S Afr J Surg,不可缩写为South Afr J Surg.另外，少于5个字母(含5个字母)的单词一般不缩写，如Acta,Heart,Bone,Joint等均不缩写。

1、armchair [ɑmte(r)] n. 扶手椅。2、bed [bed] n. 床。3、bookcase [bkkes] n.书架；书柜。4、chair [te(r)] n. 椅子。5、chest of drawers 五斗橱；衣柜。6、cot [kt] n. 婴儿床；幼儿床。7、cupboard [kbd] n. 橱柜；食物柜。8、desk [desk] n.书桌；写字台；办公桌。9、drawer [dr:(r)] n.抽屉。10、fireplace [faples] n.壁炉。11、furniture [fnt(r)] n.家具。12、lampshade [lmped] n.灯罩。13、mattress [mtrs] n.床垫。14、shelf [elf] n.架子；搁板。15、sofa [sf] n.沙发。16、stool [stul] n. 凳子。17、table [tebl] n. 桌子。

kilometers，千米、公里的意思 ，即kilometer的复数。kilometer，英文单词，名词，作名词时译为[计量] 公里；[计量] 千米。短语搭配：Kilometer zero 公路原点 ; 爱欲从零开始 ; 公里为零 ; 爱情零距离。双语例句：1、They went to a bar about kilometer away.他们走了约一公里来到一家酒吧。2、The scale of this map is one centimeter to the kilometer.这个地图的比例是用一厘米代表一公里。3、The railway tunnel runs one kilometer.这个铁路隧道长一公里。

评测分数24万+。宏碁nitroan51545跑分评测鲁大师评测分数24万+，宏碁暗影骑士擎AN515，这个分数目前运行主流的各种大型网游LOL、吃鸡都很流畅。宏碁nitroan51545游戏笔记本电脑，笔记本电脑配备了15.6英寸IPS显示屏，FHD分辨率，144赫兹刷新率和3毫秒响应时间。这款笔记本电脑配有全尺寸键盘和4区RGB背光。

热带不结冰，那里的鱼不需要水的这个特性。

抖音女声ohwuwuwu叫《Momve your body》。《Move Your Body》是一首由Sia第七张专辑《This is acting》中的第四首歌曲。由Alan Walker配合制作电音。《Move Your Body》这首歌曲的旋律带给人们的是全方位的听觉享受，使人能够产生高尚的想法，让人难以忘记。创作背景在《1000 Forms of Fear》取得成绩后，希雅·富勒重拾自信，她把写给别人但他们不要的弃歌整理出一张专辑发行，由于这张专辑的歌都是以别人的视角而写，不是她的真实想法，像《Reaper》这样的歌跟她都没有一点共鸣，所以她将这张专辑取名为“This Is Acting”（直译为这是在演戏）。但是专辑中的《One Million Bullets》是唯一不是给别人写的歌，希雅·富勒表示，这首歌就像她的孩子一样。《Alive》是阿黛尔·阿德金斯和希雅·富勒的合写的一首歌曲，原本是给阿黛尔·阿德金斯演唱，但最后她还是放弃了这首，所以希雅·富勒最终是以阿黛尔·阿德金斯的视角演唱的这首歌；而《Bird Set Free》起初是为音乐喜剧电影《完美音调2》创作的，被弃掉后蕾哈娜曾试录过这首歌，后又转手给阿黛尔·阿德金斯灌录，但还是被弃掉了。蕾哈娜曾考虑演唱《Cheap Thrills》、碧昂丝·吉赛尔·诺斯曾考虑演唱《Footprints》，但是她们都放弃了这些歌；《Summer Rain》是希雅·富勒写给克里斯蒂娜·阿奎莱拉的女儿的，歌名和她女儿同名。《Reaper》是希雅·富勒和坎耶·维斯特合写给蕾哈娜的，但是坎耶·维斯特和蕾哈娜从来没有出现过。希雅·富勒是根据坎耶·维斯特的笔记写下了这首歌，她只感觉副歌很有趣。她的经纪人要求专辑必须收录这首歌，希雅·富勒于是就照做了。

杂志社不同，编辑的任务也不相同。但基本上是以下工作职责： 1.在主任领导下，根据杂志的编辑工作计划结合所分管的栏目进行策划、通联、组稿、采访； 2.负责杂志英文目次和稿件英文关键词、摘要的翻译和校订； 3.负责稿件的初审编辑加工与校对； 4.参与杂志的质量评价及相关的学术活动组织工作； 5.承担广告征集和发行工作任务； 6.完成领导交办的其他工作。

NitroBoxTool是一种专为Cinema4D(或称C4D)硬面建模而设计的工具，它能很好地帮助用户快速地完成模型的制作，并能很好地满足用户对C4D硬面建模的需求。这款软件很轻巧，但功能很强，别看它只是一个简单的插件，但软件很强大，它可以帮助你在C4D中快速地完成建模，在完成建模的同时，还可以对模型进行一些编辑操作，比如挖洞，挤出，道教等，可以给你一种自由控制的感觉，让你更快地完成建模。在设计过程当中，经常会使用到c4d的一些插件软件！而很多的设计师朋友们面对市面上这么多的c4d插件往往会不比较疑惑到底哪一个c4d插件比较好用呢？想要了解的就不要错过了~c4d建模插件NitroBoxTool简介：NitroBoxTool是一个非常专业的C4D硬面建模插件，它可以很方便地帮助你在c4d上建模，操作也很简单，可以很方便地进行克隆镜像，还有样条等！它是一个强大的C4D硬表面建模工具。NitroBoxTool是一个建模插件，它可以简化日常硬表面建模任务。这个插件可以让你用场景中的2D部件把形状分成模型。这种超直观的方法可以快速地制作出复杂的形状。这个插件也可以让用户控制圆角的范围，包括一个按钮可以立即添加和编辑倒角来模拟边框...c4d建模插件NitroBoxTool优点：一、直观傻瓜操作：只要创建物体，然后简单地拖拽，就能完成模型制作，非常快捷方便。二、支持边缘光滑度调节：它可以为你的曲线增加光滑度，无论是直线还是曲线都可以改变。三、全局倒角或局部倒角：无论是为模型边缘设置全球倒角，还是为某个模型设置独立倒角半径，都可以轻松实现，一切由你控制。四、轻松复制：建模细节可以轻松复制到其他区域，从而快速实现批量挖洞或细节处理。五、镜像功能：支持在镜像功能下，沿X、Y轴或平面镜像同时建模多个区域。六、实体选项：任何用于挖洞的物体都可以生成实体模型，用于进一步修改和制作，实体模型本身也可以编辑。七、支持多种建模元素：支持放置任何物体、曲线、网格、基本元素、超自由互动建模。c4d建模插件NitroBoxTool安装操作方法：首先，将“NitroBoxTool”复制文件夹粘贴到C4D插件安装目录plugins下面接着，重新启动C4D顶部的菜单栏插件(扩展)下，就可以了其实，选择好一款c4d插件对于制作设计过程当中是取到很大的影响作用的！如果各位设计师朋友们想要很好的设计出想要的效果，那么选择NitroBoxTool就可以！关于分享就到这里，更多c4d知识点资讯尽在~

水是在0到4摄氏度才反常膨胀，结冰后体积反倒增大，是因为冰的特殊结构造成的。因为水分子之间可以形成氢键，水结冰以后，从无序结构到形成六元环的立体结构，六元环的立体中间有空心，所以水结冰以后，体积是增大的。水是在0到4摄氏度才反常膨胀是因为随着温度的降低，水的结构逐渐从无序变为有序，为结冰做准备。

一般来讲不看什么样的声卡的前提诸如：maya44 创新0060 icon之类。实现reaper机架闪避，需要在机架内建立一条音频轨当做播放轨，把需要播放的音频文件拖到此轨道中。然后再在此轨道上加上支持侧链压缩器，然后发送到你reaper机架的人声效果轨 这样一说话就会对播放轨道实现压缩功能 也就实现了所谓闪避效果。具体可以百度“maya44 cubase 实现闪避”这类文章来参照 虽然机架不一样，但原理是一样的。也有一些声卡可以按照对应型号 设定通道来实现闪避，而大多一般不能像 创新声卡挂载 kx驱动那样。直接加载所谓“闪避效果”那样简单实现！

功能区最小化 可将Nitro Pro 9功能区最小化以增加工作区。此功能适合以及分辨率较低的笔记本电脑和早期显示器。 如需将功能区最小化：执行以下一项操作： l 在功能区的任何位置或其任何按钮上右击，然后从菜单选择功能区最小化 l 点击功能区右上部分查找字段旁的功能区最小化按钮功能区滑入应用程序框内。如需将隐藏功能区恢复：执行以下一项操作： l 在功能区的任何位置或其任何按钮上右击，然后取消选择功能区最小化 l 点击功能区右上部分查找字段旁的功能区最小化按钮。 这将切换功能区的可见状态，使其返回完整尺寸。 如需查看最小化的功能区： 点击任何选项卡 此将临时显示选项卡及其按钮组。他们将在您使用按钮或在 PDF 中点击后隐藏。

1、这是冰结构的特殊性造成的，为保持稳定结构，冰中水分子键角增大，通过氢键形成正四面体的结构，其中的孔洞增加，因此体积增大。冰的密度比水小，冰的密度0.9g/cm3，水的密度是1g/cm3。2、根据密度=质量÷体积，水凝固成冰，质量不变，密度变小，则体积变大。3、一般物体都是温度升高时体积增大，温度降低时体积减小。水在4℃以上，热胀冷缩，即温度升高体积增大，温度降低体积减小。但水在0℃～4℃之间，却出现反常膨胀现象，热缩冷胀，即温度升高体积减小，温度降低体积增大。更多关于水结成冰为什么会膨胀，进入：https://m.abcgonglue.com/ask/d5caa41616112574.html?zd查看更多内容

我们在安装系统之后都是需要激活的，如果是正版的激活，费用太高。所以一般会选择激活工具激活，不过最近有网友问了kms激活到底安全不安全？这也是不少朋友的问题，kms激活怎么样呢？kms激活安全吗？下面我们来看看kms激活的缺点。KMS激活方法弊端如下：KMS全称Key Management Service。说出来你可能不信，KMS其实是微软官方认可的激活方法。KMS出现的原因：Windows XP和Server 2003要想避开激活机制的最好办法就是去下载VOL版或者MSDN的操作系统，只要输入正确的序列号，甚至有的根本不需要序列号，安装完以后也根本不用激活，并且只要运行一个脚本程序，一个免费的正版Windows就诞生了。为什么我们能这么容易的下载到MSDN或VOL版的XP和2003?其实Windows XP系列系统的MSDN版是Microsoft内部使用的系统，而VOL版是企业版，所以都不需要激活。然而这些版本最终被泄露，导致XP的盗版风无法停住，即使WGA也无能为力。但是在Vista时代，Microsoft早已吸取了这个教训，所以Vista根本没有VOL版，而为企业设计的Windows Vista Enterprise也照样需要激活，并且还有了一个特殊的激活机制——KMS。KMS，即通过系统管理员(System Administrator)使用一个批量激活密钥(也就是大家经常看到的Volume Key，Vol密钥，设置一个激活服务器(Activation Server)，并在每一个客户机上安装KMS的客户端，就可以进行批量激活和管理，极大的减少了工作量。而使用激活工具则会利用局域网和KMS服务器，在网上下载一个VMWare KMS服务器的虚拟机镜像，然后用VMWare调试使虚拟机能和主机连成局域网，再每180天一次激活，就可以让系统保持激活状态。还有，这几个版本的系统试用期总共有180天，快到期的话可以用一个脚本延长，最多延长3次，每次60天，达到激活目的。这种激活方法的弊端就是：成功激活后，你的电脑就会变成团队电脑。KMS工具开发者就是管理员。不要不以为然，管理员能够执行的操作权限非常高，拷贝个数据收集个信息简直是小菜一碟，更厉害的还能直接reset你的系统而保留KMS的权限。说不定，哪天KMS的开发者不开心，就帮你清空一下电脑。以上就是小编带来的kms激活到底安全不安全的全部内容，希望可以提供帮助。关键词：kms激活到底安全不安全,kms激活怎么样,kms激活安全吗