流式Annexin-FITC /PI 双染法测凋亡，各个象限代表什么状态的细胞

综述：fitc的激发波长是460nm~550nm，发射光波长为520nm～530nm。发射（可见）光的物体叫做（可见）光源。太阳是人类最重要的光源。可见光源有热辐射高压光源（如白炽灯）、气体放电光源（如霓虹灯、荧光灯）等。光源有分自然光、人造光。有生命的一定是自然光，如水母、萤火虫等，没有生命的不一定是人造光，如恒星、太阳等。光波：光波，通常是指电磁波谱中的可见光。可见光通常是指频率范围在3.9×1014~7.5×1014Hz之间的电磁波，其真空中的波长约为400~760nm。光在真空中的传播速度为c=3×108m/s，是自然界中物质运动的最快速度。光波是横波，其中电场强度E和磁感应强度B（或磁场强度H）彼此相互垂直，并且都与传播方向垂直。

fitc荧光标记原理如下：FITC异硫氰酸荧光素是一种常用的标记抗体的方法。FITC一般为黄色。棕色或棕色粉末或结晶，在低温下可保存数年。在碱性条件下，FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。抗体分子可标记15~20个FITC分子。标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力，在荧光源紫外线或蓝紫光的刺激下产生黄绿色荧光，通过荧光显微镜观察或使用流细胞仪进行分析，从而定性、定位或定量抗原。FITC标记抗体方法FITC抗体标记主要包括Marshall直接标记法、Chadwick间接标记法、改进标记法和透析法。FITC抗体标记注意事项1、温度.时间.pH.荧光素和蛋白质量等都是影响标记效率的因素，需要控制。2、荧光素及其标记抗体的操作过程应注意避光，搅拌速度应适当避免产生气泡。3、注意正确操作，使柱体均匀.柱面平整，无气泡.裂缝。4、上样和洗脱应为前切和后切。前切指柱顶缓冲液与凝胶平面相切时加样品，后切指样品与凝胶平面相切时加洗脱缓冲液。

fitc激发波长是460nm~550nm。发射波长：425nm。1、激发光谱可以分析在不同激发波长下，物质的特定波长荧光的强度变化。荧光激发光谱的形状与发射波长无关。2、发射光谱是固定激发波的波长，测定发射光强度与波长（有时候也测波数或者频率等）的关系，通俗而不太严谨地说，发射光谱测定的是发射光的颜色。激光波长的影响：对杂散光及信噪比的影响十分显著，当狭缝宽度不变时，用氩激光514.5nm比用488.0nm波长激发样品，杂散光要小一到二个数量级（±100cm-1范围内），并且分辨率有所提高。这一方面是由于长波长激光对仪器内少量灰尘或试样中缺陷的散射弱；另一方面由于狭缝宽度一样时，不同波长的光由出射狭缝出射时所包含的谱带宽度不一样。

fitc产生的荧光颜色是黄绿色。FITC异硫氰酸荧光素是一种有机荧光染料，目前，这种荧光染料仍用于免疫荧光和流式细胞术中。在495/517nm 处，该染料会产生激发或者发射峰值，并可借助异硫氰酸盐反应基团与不同抗体结合，该基团可以和蛋白质上的氨基、巯基、咪唑、酪氨酰、羰基等基团相结合。而它的基本成分—— 荧光素，其摩尔质量为332g/mol，常被用作荧光示踪剂。FITC（389 g/mol）是用于荧光显微镜技术的首批染料，且其被当成Alexa Fluor488等后续荧光染料的发端。该染料的荧光活性取决于它的大共轭芳香电子系统，而该系统受蓝色光谱中的光所激发。相似类型的区别：经常与FITC同时使用的另一种染料是与其相似的TRITC（四甲基罗丹明-5（6）-异硫氰酸）。与FITC相反，TRITC并非荧光素，而是罗丹明家族的衍生物。罗丹明也具有一个大的共轭芳香电子系统，正是该系统引发了它们的荧光行为。还有一点与FITC相反，TRITC（479g/mol）由最大波长为550nm的绿色光谱中的光所激发，它的最大发射波长为573nm。与蛋白质（例如，抗体）结合也基于异硫氰酸盐反应基团。

DAPI,TRITC,FITC是荧光滤光片套装的一种型号，生物显微镜的的一个部件。同时也是血液疾病检测的理想工具。

【答案】：CFITC为异硫氰酸荧光素，黄绿色荧光，最大吸收光波长为490～495μm，最大发射光波长为520～530μm。

FITC在酸性条件下有荧光。DAPI和FITC标记的荧光抗体可以同时在荧光显微镜下观察到DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，因此DAPI对生物体而言，也被视为一种毒性物质与致癌物。CM-Dil是标记细胞膜的，而DAPI是标记细胞核的可以是活细胞，一人做兔子的膀胱肿瘤，他说在14天的时候很强，21天的时候比较弱，再长的时间就没有检测过。物质概况在吸收紫外线或可见光后，能把短波长的光转变为波长较长的可见光波而反射出来，呈闪亮的鲜艳色彩。例如，酸性曙红、荧光黄、红汞以及某些分散染料等。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光染料可以单独使用，也可以组合成复合荧光染料使用。其中复合荧光染料是利用荧光共振能量转移技术合成的荧光染料，由距离非常近、能量可以在彼此间传递的一个供体及一个受体荧光物分子所组成。

fitc荧光颜色黄绿色荧光橙红色荧光橙色荧光（一）荧光色素1.异硫氰酸荧光素（FITC）：呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明（RB200）：呈黄绿色荧光。。3.四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）：呈橙红色荧光。4.藻红蛋白（R-RE）：呈明亮的橙色荧光。（二）其他荧光物质1.镧系螯合物：其中以Eu3＋应用最广。Eu3＋螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，最适合用于时间分辨荧光免疫测定。2.酶作用后产生荧光的物质：4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷本身无荧光，受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光。其他如碱性磷酸酶的底物是4-甲基伞酮磷酸盐，辣根过氧化物酶的底物是对羟基苯乙酸等。荧光色素许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：1.异硫氰酸荧光素（FITC）：为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感；②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。2.四乙基罗丹明（RB200）：为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）：最大吸引光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。4.藻红蛋白（R-RE）：本品为无定形，褐红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮，性质稳定，可长期保存。最大吸引光波长为565nm，最大发射光波长为578nm，呈明亮的橙色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，故被广泛用于对比染色或用于两种不同颜色的荧光抗体的双重染色。其他荧光物质1.酶作用后产生荧光的物质：某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷，受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性磷酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。2.镧系螯合物：某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3+）、铽（Tb3+）、铈（Ce3+）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光，其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，最适合用于分辨荧光免疫测定。

异硫氰酸荧光素

FITC能够进入细胞在二维散点图上， PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI 单染的细胞是已经死亡的细胞，annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞，而双染是凋亡中期的。你需要在散点图上先画出4个象限，位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。这个方法有很多假阳性，要注意。你在收集细胞时的方法，很可能造成细胞膜的损伤，导致细胞膜的磷脂层暴露，从而结合annexin V, 导致假阳性。

fitcdextran是fitc的一种升华。FITC只是一种荧光素，细胞并不能特异性地和该染料结合。FITC一般都是先结合到抗体，或者其他可以和细胞特异性结合的物质上，再用后者来标记细胞的。Dextran-FITC是荧光素标记葡聚糖使用方法荧光素标记的右旋糖酐，也称为FITC葡聚糖。

读起来像 feizie

cy3的fish探针是红。cy5的fish探针是白。fitc的fish探针是黄。fluos标记的fish探针是黑。扩展资料：荧光原位杂交技术的基本原理是如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性—退火—复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。

不会，加热后荧光强度会更强

现在的机器都是自动调节，不过也要做好准备工作。我大致说一下原理。做补偿调节，需要以下的样本，无任何染色的样本，分别是FITC， PE， PerCP还有APC单染阳性的样本，所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代，你需要画出这四个颜色两两配对的散点图，比如FITC-PE， FITC-PerCP， FITC-APC， PE-PerCP，PE-APC， PerCP-APC，这一共6个散点图。然后，先上未染色的样本，调节各个荧光通道的电压，是细胞都位于各个散点图的左下角。在记录前，把每个样本都先跑一边，目的是观察电压的设置是否正确。比如FITC和PE会有重叠，上FITC阳性管的时候，虽然其他通道会有些信号，但FITC通道的信号应该最强。如果发生了其他通道信号强于目的通道的情况，就要进一步调节电压，是目的通道的信号最强。这样把每一个单染的样本都过一遍，确保目的通道的信号最强。现在的仪器软件，不需要你自己画这些散点图，但是调剂电压的这一步是必须的，可以在阴性对照管的页面下完成。电压调节好以后，记录阴性对照和阳性单染样本的信号，然后机器会自动结算补偿值。如果你要手工计算，这里是原则：以FITC-PE为例。在散点图上，划分为四个象限。如果纵坐标是FITC， 横坐标是PE。调节电压后，阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标（PE）和纵坐标（FITC）的平均荧光强度值。电压调好以后，上单色阳性样本。比如上牌FITC阳性，这时不要再改变电压了，而是调节补偿系数，最终目的就是让FITC阳性的细胞都位于向下象限，并且该细胞团的纵坐标（PE）荧光强度和阴性细胞团的值一致。其他颜色的两两补偿以此类推。

FITC我们是用纯DMSO溶解配的储备液，用的时候1比1000 稀释

FITC溶解甲醇或DMSOFITC量应少量mg/ml级避光反应24 h注意事项应该用铝箔保护反应器避光提纯产物我用透析先用PBS 7.4 透用超纯水透36差意见仅供参考Procedure of Labeling Protein with FITC1. Preparation before experiment:1) 配100mL0.1M PH=8.5SB缓冲液(0-5℃保存且超周现配现用)；2) 准备A,B,C,D四石英比色皿；3) 取容量瓶事先用锡箔纸其完全包住避光；4) 用超纯水注满D=15mmL=300mm柱层析离吸附柱夜浸泡同检测其否漏液第二再用PBS浸泡7-8h；5) 用DIW浸泡葡聚糖Sephadex G-50夜(1g Sephadex G-50配5mLDIW)使其溶胀打孔状结构；DIW倒掉注入适量PBS(PH=7.4)用锡箔纸盖防灰4℃保存；注：(1) Sephadex G-50量完柱层析离吸附柱剩余部加入 0.02%(m/v)NaN3防止细菌保存于4℃冰箱；(2) Sephadex G-50第配反复使用应做相应处理(见)；(3) Sephadex G-50离范围：1000-30,000(量)2. 计算Protein游离-NH2配制1.0mg/mL Protein/SB蛋白溶液：BSA, Fraktion V Mw=67000Da, Arg 26; lys 60;20mg BSA; 2mLSB(0.1M PH=8.5)；游离-NH2：n1=20×0.001g×(26+60)/( 67000g.mol-1) =2.57×10-5mol；溶于容量瓶(外包锡箔纸避光处理)加搅拌搅拌使其完全溶解；注：组蛋白质20氨基酸仅Arglys侧链游离-NH2

这四个不是一码事，HRP和AP是酶，二抗上挂了酶，要给相应的底物才能显色，显色方式可以通过发荧光也可以不发荧光（例如给予ECL底物，其中的H2O2和鲁米诺在HRP的作用下，能在黑暗中发出荧光；也可以给予双氧水和DAB，反应产生棕色不溶于水的物质）；FITC为异硫氰酸荧光素，本身就是黄绿色荧光，二抗结合后可直接在荧光显微镜下观察；生物素一般也是挂在二抗上的，利用卵白素分别连接生物素标记的第二抗体和生物标记的酶，由酶催化底物，生成终产物，这个终产物也是不溶于水的。

bf：正常光模式；fitc：异硫氰酸荧光素，是荧光染料；dic：微分干涉差模式；dapi：4",6-二脒基-2-苯基吲哚，是荧光染料；rhod：罗丹明，是荧光染料。

不可以，DAPI 和FITC的激发光不同，不过现在的显微镜都和软件连接，可以后期合成在一张图上

fitc荧光染料能做流失 elisa不好做

首先要通过飞秒检测获得该物质的分子和含量，一般用乙醇、二甲亚砜、氯仿都容易溶解有机物

不可以。它的主要原理是利用FITC(异硫氰酸荧光素)上的N=C=S基团和蛋白质上游离的-NH2发生化学反应，而后在特定波长光源的激发下即可观测到荧光信号。

在流式细胞术上机分析中，FITC是一种常用的荧光染料之一。如果你在流式上机界面找不到FITC，可能有以下几个原因：实验部门或相关人员没有将该荧光染料添加到实验方案中，因此在流式上机界面中找不到。FITC已经被更改名称或缩写，可能使用的是类似的替代染料名称或缩写。该设备不支持检测FITC染料，因此在流式上机界面中无法找到相关设置选项。如果你需要使用FITC染料进行流式细胞术上机分析，建议你先咨询实验室相关人员或设备供应商，确认是否支持该染料，并了解如何正确设置流式上机界面以检测该染料。

5mmol#47。(3)抗原对照?参考见解。因未免疫动物的血清中无特异性抗体:标本直接滴加二抗:标本加同种动物的未免疫血清:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化，看是否非特异性染色，应呈阴性反应(1)你的二抗是用FITC标记的，目的是使DNA变性;2N盐酸需要使用，呈阴性反应，如果是用过氧化物酶做标记.0-9，为避免荧光分解，后者能使玻片透明，分装及荧光显微镜观察时均要避光，在加抗免疫球蛋白荧光抗体;L pH9，这个对照必须有。做间接法免疫荧光染色，目的是看自发荧光，以PBS冲洗后，如何设置对照.5的碳酸氢盐缓冲液;(3)关于免疫酶染色。(2)阴性对照，脱蜡后直接在荧光显微镜下观察，就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶。(1)空白对照，让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合;(2)封片最好用甘油加0

FITC（异硫氰酸荧光素）FITC 保存于4℃暗处,使用前待试剂瓶升至室温时开盖称取,以避免潮解。所以95度高温单论保存条件的话肯定会有影响

FITC 标记抗体-Chadwick氏法试剂：抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、pH8.0的0.01mol/L PBS、1%硫柳汞；材料：离心机及离心管、三角烧瓶（25ml）、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯（500ml）等；方法与步骤：1.

问题在于称量,对不? 那么,建议配置高浓度该溶液,比方说1M浓度,这样称量问题就解决了,之后再取5ul稀释到5ml. 或者如果溶解度有限,可以配置1L该溶液,取你需要的体积用 可能会造成浪费,如果您的药品极贵,那么可以配置高浓度,取出需要用的量后抽干再收集干粉.

你说的是用来标记抗体的FITC和Alexa 488的区别吧。488只是激发光（蓝色激光）的波长。FITC和Alexa 488都能在488 这个波长被激发而发出绿色激发光。Alexa488的优点是光线强度大，光褪色少，pH耐受性好

EGFP为增强型绿色荧光蛋白，往往作为报告基因/蛋白，或者是细胞示踪用。FITC为荧光素在荧光激发和发射中，FITC和EGFP在很接近的范围之内，在流式细胞仪上和荧光显微镜下都使用同一个通道。樊克生物细胞凋亡试剂盒

将制备好的荧光抗体加叠氮钠0.01%,分装在1ml安瓿中，或冻干，保存于冰箱中(4℃)可以用。

流式细胞仪的数据取决于在记录的时候设置了多少个信道。在显示散点图的时候，不管有多少个信道，一次只能是最多两种信号。至于横坐标是什么，纵坐标是什么，完全是根据想要看的指标和个人习惯，没有什么限制。是是否是FITC或者PE无关。

5mmol#47。(3)抗原对照?参考见解。因未免疫动物的血清中无特异性抗体:标本直接滴加二抗:标本加同种动物的未免疫血清:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化，看是否非特异性染色，应呈阴性反应(1)你的二抗是用FITC标记的，目的是使DNA变性;2N盐酸需要使用，呈阴性反应，如果是用过氧化物酶做标记.0-9，为避免荧光分解，后者能使玻片透明，分装及荧光显微镜观察时均要避光，在加抗免疫球蛋白荧光抗体;L pH9，这个对照必须有。做间接法免疫荧光染色，目的是看自发荧光，以PBS冲洗后，如何设置对照.5的碳酸氢盐缓冲液;(3)关于免疫酶染色。(2)阴性对照，脱蜡后直接在荧光显微镜下观察，就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶。(1)空白对照，让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合;(2)封片最好用甘油加0

fitc医学上意思是异硫氰酸荧光素。异硫氰酸荧光橙红，异硫氰酸荧光黄，异硫氰酸荧光红，异硫氰酸荧光素异构体I，5-异硫氰酸荧光素。其形态为黄色粉末，有吸湿性，是一种生化试剂，也是医学诊断药物，可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。并且它能与各种抗体蛋白结合，结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性，并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光，加酸后析出沉淀，荧光消失，微溶于丙酮、乙醚和石油醚。用途说明该品是生化试剂，也是医学诊断药物，主要用于荧光抗体技术中的荧光染料，能和各种抗体蛋白结合，结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性，并在碱性溶液中具有强烈的绿色荧光。用于医学，农学和畜牧等方面，可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。黄色粉末。有吸湿性。能与各种抗体蛋白结合，结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性，并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光，加酸后析出沉淀，荧光消失，微溶于丙酮、乙醚和石油醚。

WB----蛋白质印迹FITC---异硫氰酸荧光素IHC-P----石蜡切片的免疫组化技术IHC---免疫组织化学

综述：fitc的激发波长是460nm~550nm，发射光波长为520nm～530nm。发射（可见）光的物体叫做（可见）光源。太阳是人类最重要的光源。可见光源有热辐射高压光源（如白炽灯）、气体放电光源（如霓虹灯、荧光灯）等。光源有分自然光、人造光。有生命的一定是自然光，如水母、萤火虫等，没有生命的不一定是人造光，如恒星、太阳等。光波：光波，通常是指电磁波谱中的可见光。可见光通常是指频率范围在3.9×1014~7.5×1014Hz之间的电磁波，其真空中的波长约为400~760nm。光在真空中的传播速度为c=3×108m/s，是自然界中物质运动的最快速度。光波是横波，其中电场强度E和磁感应强度B（或磁场强度H）彼此相互垂直，并且都与传播方向垂直。

fitc的最大吸收波长和最大发射波长分别如下：最大吸收光波长为490~495nm，最大发射光波长为520~530nm。1、激发光谱可以分析在不同激发波长下，物质的特定波长荧光的强度变化。荧光激发光谱的形状与发射波长无关。2、发射光谱是固定激发波的波长，测定发射光强度与波长（有时候也测波数或者频率等）的关系，通俗而不太严谨地说，发射光谱测定的是发射光的颜色。激光波长的影响：对杂散光及信噪比的影响十分显著，当狭缝宽度不变时，用氩激光514.5nm比用488.0nm波长激发样品，杂散光要小一到二个数量级（±100cm-1范围内），并且分辨率有所提高。这一方面是由于长波长激光对仪器内少量灰尘或试样中缺陷的散射弱；另一方面由于狭缝宽度一样时，不同波长的光由出射狭缝出射时所包含的谱带宽度不一样。其他荧光物质酶作用后产生荧光的物质：某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷，受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性磷酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。镧系螯合物：某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3+）、铽（Tb3+）、铈（Ce3+）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光，其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，最适合用于分辨荧光免疫测定。

fitc激发波长是460nm~550nm。发射波长：425nm。1、激发光谱可以分析在不同激发波长下，物质的特定波长荧光的强度变化。荧光激发光谱的形状与发射波长无关。2、发射光谱是固定激发波的波长，测定发射光强度与波长（有时候也测波数或者频率等）的关系，通俗而不太严谨地说，发射光谱测定的是发射光的颜色。激光波长的影响：对杂散光及信噪比的影响十分显著，当狭缝宽度不变时，用氩激光514.5nm比用488.0nm波长激发样品，杂散光要小一到二个数量级（±100cm-1范围内），并且分辨率有所提高。这一方面是由于长波长激光对仪器内少量灰尘或试样中缺陷的散射弱；另一方面由于狭缝宽度一样时，不同波长的光由出射狭缝出射时所包含的谱带宽度不一样。

他们没有异硫氰酸的后缀，不是异硫氰酸荧光素，是其他的荧光素衍生物。Fluorescein是一种化学物质，分子式C20H12O5；分子量332.306 g/mol；熔点314 - 316 °C；微溶于水。异硫氰酸是在其一个苯环上加-N=C=S基团的衍生物；Fluorescein-12-dUTP和Tetramethylrhodamine-5-dUTP是分别在12位、5位用dUTP取代的衍生物。Diethylaminocoumarin-5-dUTP是5位dUTP取代的二乙氨基香豆素，其为橙色针状结晶，熔点203~205℃，溶于甲醇、乙醇、乙二醇、苯乙醇，其溶液呈绿色荧光，是激光转化率较高、性能也比较稳定的激光染料，属绿光波段。荧光素的结构可以在维基中看到，在维基中输入fluorescein就可以找到。ITC可以表示异硫氰酸，IsoThioCyanate

自行发光的原因同矿物成分中有“三价稀土元素进入晶格形成发光中心和电子捕获中心”有关 光子从高能级落到低能级时发出荧光；荧光物质经某种光的照射后发出荧光的能力降低. 荧光物质　　（一）荧光色素 　　许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素.只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料.常用的荧光色素有： 　　1.异硫氰酸荧光素（FITC）：为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或酒精等溶剂.分子量为389.4,最大吸收光波长为490～495nm,最大发射光波长520～530nm,呈现明亮的黄绿色荧光.其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感；②通常切片标本中的绿色荧光少于红色. 　　2.四乙基罗丹明（RB200）：为橘红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮.性质稳定,可长期保存.最大吸收光波长为570nm,最大发射光波长为595～600nm,呈橘红色荧光.　　3.四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）：最大吸引光波长为550nm,最大发射光波长为620nm,呈橙红色荧光.与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色.其异硫氰基可与蛋白质结合,但荧光效率较低. 　　4.藻红蛋白（R-RE）：本品为无定形,褐红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮,性质稳定,可长期保存.最大吸引光波长为565nm,最大发射光波长为578nm,呈明亮的橙色荧光.与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,故被广泛用于对比染色或用于两种不同颜色的荧光抗体的双重染色. 　　（二）其他荧光物质 　　1.酶作用后产生荧光的物质：某些化合物本身无荧光效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质.例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷,受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光波长为360nm,发射光波长为450nm.其他如碱性磷酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等. 　　2.镧系螯合物：某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3+）、铽（Tb3+）、铈（Ce3+）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光,其中以Eu3+应用最广.Eu3+螯合物的激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于分辨荧光免疫测定.

olympusix71绿色荧光的激发波长是460nm~550nm　　紫外:激发片波长330nm~400nm发射片波长:425nm　　紫:激发片波长395nm~415nm发射片波长:455nm　　蓝:激发片波长:420nm~485nm发射片波长:515nm　　绿:激发片波长:460nm~550nm发射片波长:590nm

现在的机器都是自动调节，不过也要做好准备工作。我大致说一下原理。做补偿调节，需要以下的样本，无任何染色的样本，分别是FITC，PE，PerCP还有APC单染阳性的样本，所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代，你需要画出这四个颜色两两配对的散点图，比如FITC-PE，FITC-PerCP，FITC-APC，PE-PerCP，PE-APC，PerCP-APC，这一共6个散点图。然后，先上未染色的样本，调节各个荧光通道的电压，是细胞都位于各个散点图的左下角。在记录前，把每个样本都先跑一边，目的是观察电压的设置是否正确。比如FITC和PE会有重叠，上FITC阳性管的时候，虽然其他通道会有些信号，但FITC通道的信号应该最强。如果发生了其他通道信号强于目的通道的情况，就要进一步调节电压，是目的通道的信号最强。这样把每一个单染的样本都过一遍，确保目的通道的信号最强。现在的仪器软件，不需要你自己画这些散点图，但是调剂电压的这一步是必须的，可以在阴性对照管的页面下完成。电压调节好以后，记录阴性对照和阳性单染样本的信号，然后机器会自动结算补偿值。如果你要手工计算，这里是原则：以FITC-PE为例。在散点图上，划分为四个象限。如果纵坐标是FITC，横坐标是PE。调节电压后，阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标（PE）和纵坐标（FITC）的平均荧光强度值。电压调好以后，上单色阳性样本。比如上牌FITC阳性，这时不要再改变电压了，而是调节补偿系数，最终目的就是让FITC阳性的细胞都位于向下象限，并且该细胞团的纵坐标（PE）荧光强度和阴性细胞团的值一致。其他颜色的两两补偿以此类推。

荧光素本品诊断用药,种染料,角膜等皮能染色,能损伤角膜皮染绿色,显示角膜损伤、溃疡等病变.本品流经血管,能紫外线或蓝色光激发透较薄血管壁黏膜呈现绿色荧光,显示血管行经形态等,据供眼底血管造影循环间测定.本品几乎能透血脑屏障,结核性脑膜炎脑脊液内含量所增加,肌内注射测定脑脊液内本品含量助于结核性脑膜炎诊断鉴别诊断.供诊断眼角膜损伤、溃疡异物,眼底血管造影循环间测定.用于术显示胆囊胆管,及结核性脑膜炎辅助诊断等."滴8块钱!要交检查费!"医院价格规定.说比较贵,要身体健康,钱财乃身外物这样的提问是 没有意义的 还是自己做比较好 查阅下资料

正确答案:C 解析：FITC异硫氰基能与抗体的氨基结合形成稳定化学键 。

cy3的fish探针是红。cy5的fish探针是白。fitc的fish探针是黄。fluos标记的fish探针是黑。扩展资料：荧光原位杂交技术的基本原理是如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性—退火—复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。

我在用，称量的时候别打喷嚏就可以，顺便问一句，FITC溶解性怎么样你知道吗，我的在水中溶解性不给力啊

现在的机器都是自动调节，不过也要做好准备工作。我大致说一下原理。做补偿调节，需要以下的样本，无任何染色的样本，分别是FITC， PE， PerCP还有APC单染阳性的样本，所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代，你需要画出这四个颜色两两配对的散点图，比如FITC-PE， FITC-PerCP， FITC-APC， PE-PerCP，PE-APC， PerCP-APC，这一共6个散点图。然后，先上未染色的样本，调节各个荧光通道的电压，是细胞都位于各个散点图的左下角。在记录前，把每个样本都先跑一边，目的是观察电压的设置是否正确。比如FITC和PE会有重叠，上FITC阳性管的时候，虽然其他通道会有些信号，但FITC通道的信号应该最强。如果发生了其他通道信号强于目的通道的情况，就要进一步调节电压，是目的通道的信号最强。这样把每一个单染的样本都过一遍，确保目的通道的信号最强。现在的仪器软件，不需要你自己画这些散点图，但是调剂电压的这一步是必须的，可以在阴性对照管的页面下完成。电压调节好以后，记录阴性对照和阳性单染样本的信号，然后机器会自动结算补偿值。如果你要手工计算，这里是原则：以FITC-PE为例。在散点图上，划分为四个象限。如果纵坐标是FITC， 横坐标是PE。调节电压后，阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标（PE）和纵坐标（FITC）的平均荧光强度值。电压调好以后，上单色阳性样本。比如上牌FITC阳性，这时不要再改变电压了，而是调节补偿系数，最终目的就是让FITC阳性的细胞都位于向下象限，并且该细胞团的纵坐标（PE）荧光强度和阴性细胞团的值一致。其他颜色的两两补偿以此类推。

这两者的设计是不同的，不能一起使用的。这个规格是不一样的。没有办法，一起放。

一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色，再用FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如，在实验设计时，选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗，相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时，由于两种一抗种属来源不同，可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗，滴加二抗时，先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育，洗涤后，滴加SABC-Cy3复合物，经荧光显微镜下观察已出现特异性荧光，再进行FITC―抗小鼠IgG(二抗)的孵育，最后封片观察。其结果A抗原呈现绿色荧光，B抗原呈现红色荧光。

与 FITC 的绿色荧光信号相比，EGFP 的绿色荧光信号具有信号强，不易淬灭，稳定性高等优点。