紫外分光光度计和紫外可见分光光度计的区别
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linshaozhang200 共回答了11个问题
|采纳率90.9%- 紫外分光光度计测的是分子在紫外光区的吸收强度,荧光分光光度计测的是吸收光能量后处于激发态的分子发出的辐射(即分子荧光).
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|采纳率94.7%首先本质区别是:紫外分光光度计主要做定量分析,通常用作物质鉴定、纯度检查,有机分子结构的研究.
红外分光光度计主要做定性分析,推测化合物的类型和结构.
检测波长范围完全不一样.
红外分光光度计一般指的是指2.5-50微米(对应波数4000--200厘米-1)之间的中红外光谱,这是研究研究有机化合物最常用的光谱区域.红外光谱法的特点是:快速、样品量少(几微克-几毫克),特征性强(各种物质有其特定的红外光谱图)、能分析各种状态(气、液、固)的试样以及不破坏样品.红外光谱仪是化学、物理、地质、生物、医学、纺织、环保及材料科学等的重要研究工具和测试手段,而远红光谱更是研究金属配位化合物的重要手段.1年前查看全部
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|采纳率94.1%光谱带宽越小理论上说输出的单色光纯度越纯,但是光谱带宽越小会导致单色器输出的光的能量以平方倍数减少,如果用2nm时能量为1 那么 1nm时能量只有1/4 0.1nm时能量只有1/400 这对于仪器的设计要求很高,信号小了,噪声不变,信噪比下降,所以测量数据准确性会有影响.所以做测试不要追求过小的带宽,够用就好.
还有你的液相色谱仪紫外检测器的光学器件有可能是CCD的,一般一个时刻同时能读出所有所有波长数据的都是CCD的,对于CCD这种结构的光学系统的光谱带宽不可能做的很小.原因是CCD一般最大不会超过512-1024线,190-1100nm的光带打到这1024个点上一般1个点上就是一个多nm的宽度,再保守些就是4-8nm了1年前查看全部
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|采纳率100%1.调整 (1) 在接通电源前,应对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固,接地线通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源.(2) 将灵敏度旋钮调至“1”档(放大倍率最小).调波长调节器至所需波长.(3) 开启电源开关,指示灯亮,选择开关置于“T”,调节透光率[100%T]旋钮使数字显示[100.0]左右,预热20min .根据溶液浓度大小,选择液层厚度合适的吸收池.2.校正 (!)打开吸收池暗室盖(光门自动关闭),调节[0% T]旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上吸收池盖,将参比溶液置于光路,使光电管受光,调节透光率[100% T] 旋钮,使数学显示为“100.0”.(2)如果显示不到“100”,则可适当增加电流放大器灵敏度档数,但应尽可能使用低档数,这样仪器将有更高的稳定性.当改变灵敏度 后必须重新校正“0”和“100”.(3)按(1)连续几次调整“00.0”和“100.0”后,如将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使数字显示为“.000”,即可进行下面吸光度A的测量;如将选择开关置于“C”,将标准溶液推入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值,即可进行下面浓度c的测量.3.测定 (1) 吸光度A的测量.将要测A的试样溶液推入光路,显示值即为待测样品的吸光度值A.(2) 浓度c的测量.将要测c试样溶液推入光路,即可读出待测样品的浓度值c.4.结束 测量完毕,关闭电源,将各调节旋钮恢复至初始位置.取出吸收池洗净,晾干,存于专用盒内.注意事项:(1) 使用前,使用者应该首先了解本仪器的结构和原理,以及各个旋钮之功能.(2) 仪器接地要良好,否则显示数字不稳定.(3) 如果大幅度改变测试波长时,在调整“00.0”和“100”后稍等片刻(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后,重新调整“00.0”和“100”即可工作.(4) 仪器左侧下角有一只干燥剂筒,应保持其干燥,发现干燥剂变色应立即更新或烘干后再用.(5) 当仪器停止工作时,关掉电源,电源开关需同时切断,并罩好仪器 希望以上对你有所帮助.1年前查看全部
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我检测的是水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量 要求的含量大于80%wxm7511年前1
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|采纳率93.8%你没有说明检测时所用的波长,所以不能具体判定,但是如果用UV的话很有可能是比色皿的原因.石英玻璃可以完全透过紫外光和可见光(200~1000mn),普通玻璃都不能透过紫外光(200~360mn),但可以透过可见光(360~1000m...1年前查看全部
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闲人闲处闲 共回答了14个问题
|采纳率92.9%可以这样放:
1、原吸(隔壁为气相)
2、气相,将来可把液相放这儿(如没有房间的话)
3、天平一起放吧(百分之一的可放在样品处理间)
4、分光光度计可与酸度计、浊度仪、离心机等一起.
5、微波最好放在通风柜里,或者与马富炉、烘箱一起放
6、纯水机如也用来制备洗涤用水的话放在洗涤室,否则放在常规理化检测室吧
7、气瓶最好一起放,要离原吸与气相最近.
反正原吸和气相最好不要放在一起,因为原吸的操作对环境温度有影响
如果想了解更多的实验室仪器,可以到专业的仪器网站看看,像维库仪器仪表网就不错1年前查看全部
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有没有加RNase分解RNA?
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1)荧光分光光度计有两个单色器,而紫外只有一个单色器
2)荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的,而紫外是成一条直线的.
除了以上两点之外还有两点区别:3)荧光分光光度计是以氘灯做为光源,而紫外是以氢灯或氘灯作为紫外区光源,钨灯或卤钨灯作为可见光区的光源
4)荧光分光光度计的比色皿是四壁均为光学面,而紫外仅为两面为光学面.
(其实上面四点可以自己整合为两点的)1年前查看全部
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x053.1透过率、吸收度测量
a.暗电流调零:开启电源后,若试样室盖未打开,将显示提示符P.1(请做第一步骤操作),打开试样室盖直到接触检测开关,提示符P.1消失,显示暗电流值.如果它的绝对值小于5.0,则两秒内自动归零,否则可调节面板上之0%T旋钮.
b.调整参比讯号(100T/OA):微机所显示的提示符为P.2(请做第二步操作).将T—A—C旋钮开关置T/A,参比溶液放进1号试样槽并移入光路,关闭试样室盖,显示参比讯号强度,调整狭缝和光楔(试样槽拉手左面之100%T旋钮),使显示数在90.0—119.9%T或相应A值范围以内,2秒以内将自动调整为100%T/OA.
x05 c.比色皿误差校正:为校正比色皿的系统误差,要求在同一次测量过程中,比色皿与槽位编号一一照应.将使用的比色皿盛参比溶液放进试样槽,移入光路,所显示的T(或A值)就反映了该与1号槽中比色皿之间的配对误差.按一下ADJ(Adjust)校正键,则误差数据存入微机并自动校正为100%T/OA.这项操作在每次开机后只需作一次,若所用的比色皿配对性很好,可免去这一步骤.开机时,校正系数初始值为1,即相当于不校正.
d.用同比色皿盛被测溶液放进同一试样槽,则显示校正后的透过率或吸光率.
x053.2浓度测量
a.标准对照法
b.按3.1节(1)—(3)操作.
x05c.将标准浓度的样品放如光路.
x05 d.旋钮开关至C,分别按三个浓度置数键,使显示数与已知浓度值一致,浓度值仅取其三为有效数字,小数点位置自定义.
e.将被测式样移入光路,则显示样品的浓度(比色皿误差已校正).
3.2标准曲线法(标准曲线为直线)
a.按3.1节(1)—(3)操作.
x05b.旋钮至A,调整光楔使A值变化至标准曲线高端某一点的坐标A0.
c.旋钮至C,按浓度置数键显示数与对应于A0的浓度值C0一致.
d.重新调整对比讯号后按(1)之(4)操作.
x053.3测试完毕,依次关闭主机电源开关,电气箱开关,拔下电源插头,盖上护罩.
x053.4认真填写使用操作记录.1年前查看全部
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1、光源不同:可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯+氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件.这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端.也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了.
2、光学器件的不同:由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件.同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了.
3、接收器的不同:由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了.多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了.1年前查看全部
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以所含铁离子是多少为例:
参比溶液与测量溶液就相差铁离子含量,在测量之前要用不含铁离子的参比溶液扫描,调整仪器后(调100的过程),然后再测量含铁离子溶液的比色皿,这样测量溶液中的铁离子会形成自己特定的峰值,次峰值与数据库里基准峰值对比就可以得出溶液所含量了.如果数据库中没有铁离子的曲线,你还要自己先用不同铁离子浓度的溶液做工作曲线,然后进行测量.1年前查看全部
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michaelkolin 共回答了23个问题
|采纳率91.3%1.工作曲线的绘制:分别取0、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL、铁标准溶液(Fe0.01mg/mL)于7个50mL容量瓶中,加水至约20mL,加入0.5mL硫酸溶液(1:35),加入3mL抗坏血酸溶液(20g/L)、5mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH4.5)、2mL邻菲啰啉溶液,用水稀释至刻度,摇匀,于室温下放置15min,在分光光度计510nm处,用1cm比色皿,以空白调零测得吸光度,以测得的吸光度为纵坐标,相对应的Fe 质量(ug)为横坐标绘制工作曲线.
2.测定:称取样品1-10ml于250mL高型烧杯中,加入硝酸-高氯酸(4:1)20-30mL盖上表面皿,置于电热板上加热消化至溶液无色透明为止,取下冷却至室温,用(1:3)氨水或(1:35)硫酸调pH值接近2,转移至50mL容量瓶中,加入3mL抗坏血酸溶液(20g/L)、5mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH4.5)、2mL邻菲啰啉溶液,用水稀释至刻度,摇匀,于室温下放置15min,在分光光度计510nm处,用1cm比色皿,以空白调零测得吸光度.1年前查看全部
- 如何用紫外分光光度计测DNA浓度
steelpad2s1年前1
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电影眼睛 共回答了18个问题
|采纳率94.4%首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些.它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器.
核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA.核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm.每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同.定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数.如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig.测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度.测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液.然而,实验并非一帆风顺.读数不稳定可能是实验者最头痛的问题.灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大.
事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度.如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%(1A).这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动,都是正常的.另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液,如TE,可大大稳定读数.样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素:由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品.这些小颗粒的存在干扰测试效果.为了最大程度减少颗粒对测试结果的影响,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值最好在0.1-1.5A.在此范围内,颗粒的干扰相对较小,结果稳定.从而意味着样品的浓度不能过低,或者过高(超过光度计的测试范围).最后是操作因素,如混合要充分,否则吸光值太低,甚至出现负值;混合液不能存在气泡,空白液无悬浮物,否则读数漂移剧烈;必须使用相同的比色杯测试空白液和样品,否则浓度差异太大;换算系数和样品浓度单位选择一致;不能采用窗口磨损的比色杯;样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积等多个操作事项.
除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm.纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0.A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子.纯样品,A320一般是0.
分光光度计的重要配件—— 比色杯
比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯.根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等.一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定.因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯.而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品.
由于另外测试的样品量不同,所以一般分光光度计厂家提供不同容积的比色杯以满足用户不同的需求.目前市场已经存在一种既可用于核酸、紫外蛋白质定量,亦可用于蛋白比色法测定的塑料杯,样品用量仅需50μl,比色杯单个无菌包装,可以回收样品.如Eppendorf UVette®塑料比色杯,是目前比色杯市场上一个革新.随着生命科学以及相关学科发展,对此类科学的实验研究提出更高的要求,分光光度计将是分子生物学实验室不可缺少的仪器,也成为微生物、食品、制药等相关实验室的必备设备之一.
当然,随着科技的发展,现在比色杯已经不是使用分光光度计时的必备物品.目前国外Nanodrop公司(现已被Thermo Fisher公司收购)生产的ND1000分光光度计与旧式分光光度计相比,已经可以做到无需稀释样品,无需使用比色杯,每次测量仅需1-2μl样品即可完成测量.1年前查看全部
- 可以用紫外分光光度计测氯离子含量吗?有没有具体的方法.
teddybear5001年前1
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wazzxfe125 共回答了14个问题
|采纳率78.6%不能直接测,因氯离子在190nm以上无紫外吸收.
最好用摩尔法滴定.1年前查看全部
- 你好我想问怎么用紫外分光光度计测自制五水硫酸铜溶液中铜离子的浓度?
你好我想问怎么用紫外分光光度计测自制五水硫酸铜溶液中铜离子的浓度?
常温下是溶在海水中的 ,我想知道溶液暴露在空气中放置24、48、72、96小时后 铜离子浓度会不会降低7573881年前1
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爱吃肉松的七分 共回答了18个问题
|采纳率100%做一个梯度浓度的硫酸铜溶液,制作标准曲线,然后测样,计算就可以了.1年前查看全部
- 紫外分光光度计可以测甲醇/水溶液中甲醇的浓度吗
dulang1234561年前1
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mary_dhl 共回答了23个问题
|采纳率91.3%一般紫外好像不行,因为一般紫外都是测定共轭体系价电子的跃迁,所以甲醇好像不行1年前查看全部
- 紫外分光光度计测量DNA在260和280纳米的吸光度的意义及区别?
wang3173961年前1
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阿罗男 共回答了16个问题
|采纳率87.5%DNA的碳环结构使它在OD260处有特异吸收,对标准样品来说,浓度为1μg / ml时,当OD260=1时,dsDNA浓度约为50μg / ml
ssDNA浓度约为37μg / ml
RNA浓度约为40μg / ml
经验值:
纯DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;<1.6,表明有蛋白质、酚等污染)
纯RNA:1.7 <OD260/OD280<2.0(<1.7时表明有蛋白质或酚污染;>2.0时表明可能有异硫氰酸残存)1年前查看全部
- 大片断DNA分子可以用紫外分光光度计测定浓度吗
anyway_sh1年前1
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古佑客栈 共回答了18个问题
|采纳率88.9%可以.DNA的碱基在260nm处有吸收.用紫外分光光度计测260nm处DNA分子的OD值,就能通过朗伯-比尔定律OD=εlc换算出浓度.式子里l是吸收光路的长度;c是浓度,单位一般用μg/ml;ε是吸光系数,双链DNA一般取0.02ml/(μg·cm),单链DNA因为增色效应,ε要大一些,取0.05ml/(μg·cm).
如果知道一个DNA片段的碱基数,还可以换算出DNA片段的物质的量浓度.1年前查看全部
- 紫外分光光度计可不可以用来测定自配五水硫酸铜溶液中的铜离子?
李子树上1年前1
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贝壳_129 共回答了21个问题
|采纳率85.7%可以,不过需要配置标准溶液进行标准曲线的确定 用水作参比溶液1年前查看全部
- 紫外分光光度计测花椒中麻味素含量波长是多少
ok2121f1年前1
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moonson521 共回答了21个问题
|采纳率90.5%254nm1年前查看全部
- 紫外分光光度计能否测定丙酮溶液中的偶联剂KH550的浓度?
luanyichao1年前1
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forrest_w 共回答了13个问题
|采纳率92.3%用比色法1年前查看全部
- 紫外分光光度计和原子分光光度计光路结构区别,为什么
deyudeyu1年前1
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iisic 共回答了25个问题
|采纳率92%测的东西不一样么,紫外主要用紫外和可见两个区域,原子需要用到红外1年前查看全部
- 原子吸收分光光度计、原子发射光谱仪、原子荧光光谱仪、紫外分光光度计在仪器结构设计上有何不同?
Polo_li1年前2
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看中的油画 共回答了32个问题
|采纳率90.6%准确的来说,不是仪器的结构有何不同,而是仪器的工作原理有本质上的不同,激发源不同,特征谱线不同,采集分析的检测器也有区别1年前查看全部
- 紫外分光光度计od是什么意思
007start1年前2
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huoyan163 共回答了13个问题
|采纳率84.6%OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,OD=lg(1/trans),其中trans为检测物的透光值.
光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系.1年前查看全部
- 不同紫外分光光度计对同一溶液的吸收光度曲线为什么接近相同
biz猪头1年前1
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aibaobao82 共回答了20个问题
|采纳率95%紫外吸收光谱曲线本是物质的特征之一,但不同紫外分光光度计的精度、狭缝宽度有所不同,故得到的吸收光谱曲线精细轮廓略有不同,最大吸收波长也因波长精度不同而略有差异.1年前查看全部
- 如何用紫外分光光度计检测水中铬的含量
如何用紫外分光光度计检测水中铬的含量
谢了upupupandup1年前1
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lincom 共回答了15个问题
|采纳率86.7%在一组100ml容量瓶中,加入 0、1.00、2.00、4.00、7.00、10.00ml铬标准溶液(2mg/L).
分别加入1ml硫酸溶液(1+1),加水至约90ml,加3ml二苯碳酰二肼乙醇溶液,用水稀释至刻度,摇匀.
使用分光光度计,在540nm波长下,用3cm吸收池,以水为参比测量其吸光度.
以铬含量为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,绘制工作曲线.1年前查看全部
- 你们好,有谁知道用722紫外分光光度计怎样测铁的含量,有没有标准参数
我也潜水1年前1
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liujia8223 共回答了16个问题
|采纳率75%在pH=2~9的溶液,Fe2+与邻二氮菲(Phen)生成一种稳定的橘红色螯合物Fe(Phen)32+,其稳定常数为2.0×1021,εmax=1.1×104 mol×L-1×cm-1.邻二氮菲与Fe3+也能生成配位比为3:1的淡蓝色螯合物,在显色前要用盐酸羟氨将Fe3+全部还原为Fe2+.
用邻二氮菲法测定铁时,在测定前要加入盐酸羟氨溶液,目的是将溶液中所有的铁全部转化成二价铁,以防止三价铁干扰测定.若盐酸羟氨溶液若不是新配制的,则三价铁不能全部转化成二价铁,所测铁的含量偏小.
测定方法,先用以上方法作出不通浓度含量的标准曲线,然后取待测液在用光度法对比,在曲线上找到待测液的浓度.1年前查看全部
- 简述紫外分光光度计在生命科学中的应用
2502889521年前1
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沉mur_aa 共回答了15个问题
|采纳率93.3%我是学生物技术的,所以在实验中常用于测核酸和蛋白质浓度,因为核酸中含有共轭的碱基,蛋白质中含有一些芳香族氨基酸(含有共轭双键),蛋白质与核酸的浓度在260 nm处与紫外吸收波长成正比,蛋白质在280nm处有吸收峰,有公式计算:DNA浓度(ng /µL)=OD260×50×稀释倍数
当OD260/OD280< 1.8,表示蛋白质含量较高
当OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量较高
当OD260/OD280=1.2.0,表示DNA较纯1年前查看全部
- 总氮的测定,采用碱性过硫酸钾紫外分光光度计测定,取待测液2ml到100ml容量瓶定容,
总氮的测定,采用碱性过硫酸钾紫外分光光度计测定,取待测液2ml到100ml容量瓶定容,
取稀释液于50ml比色管定容至25ml再加入25ml碱性过硫酸钾,请问稀释倍数是多少呢?billsoflading1年前1
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辰令 共回答了12个问题
|采纳率83.3%2ml 到100ml 稀释50倍
25ml到 50ml 稀释2倍
加在一起就是50*2=100倍1年前查看全部
- uv-2800型紫外分光光度计吸光度波动大如何调整?
victercn1年前1
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36Dzzvvvv 共回答了11个问题
|采纳率90.9%是紫外区(190-339nm)不稳定,还是可见区(340-1100nm)不稳定?
紫外区不稳定的话,不放样品是否稳定,不放样品也不稳定需要换氘灯.
可见区不稳定的话可能是钨灯坏了.
如果你的仪器使用好几年了,首先需要确定的是否是灯坏了.
你还可以选择“校刻系统”一次,看自检过程中是否有提示.
最好可以和厂家联系获得帮助.1年前查看全部
大家在问
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