用三氯乙酸-丙酮沉淀法提取杨树蛋白,电泳时无条带,不知道是什么原因,这个实验应该注意什么,

袍子2022-10-04 11:39:541条回答

用三氯乙酸-丙酮沉淀法提取杨树蛋白,电泳时无条带,不知道是什么原因,这个实验应该注意什么,
电泳系统没问题,marker正常.第一次做这个实验,准备用提取的蛋白做Western.

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wilielly 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%: 用这个方法复溶蛋白时很难完全溶解掉,样品处理很是个问题,应该是蛋白浓度不高.我做过类似的也是用这个方法,电泳出条带很浅甚至没有,很郁闷.; 1年前

三氯乙酸/丙酮沉淀法提取蛋白时,在离心后就把上清液扔了,上清液里面没有溶解了的蛋白质吗? 三氯乙酸/丙酮沉淀法提取蛋白时,在离心后就把上清液扔了,上清液里面没有溶解了的蛋白质吗? 为什么啊? 天牙吃海脚1年前1: brandy0401 共回答了19个问题 | 采纳率84.2%

蛋白都沉淀了
三氯乙酸是强酸,丙酮也能沉淀蛋白.二者一起作用,绝大多数蛋白都会沉淀出来.当然,也可能有某种特殊蛋白没有沉淀,但只要不是你要的就行.其实,没有什么万能的方法可以提取所有蛋白.

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除去多糖提取液中的蛋白质,用三氯乙酸,是让溶液终体积中的三氯乙酸为3%还是用3%的三氯乙酸往溶液中滴加呢? xiawa46969131年前1: 偶是小七共回答了25个问题 | 采纳率96%

用3%的三氯乙酸往溶液中滴加

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请问,使用100%三氯乙酸沉淀蛋白方法中,在三氯乙酸之前加入的去氧胆酸钠（DOC）的作用是什么? 基本无效1年前1: yrhome 共回答了20个问题 | 采纳率90%

防止蛋白质被破坏.起保护作用的.

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三氯乙酸的酸性大于乙酸,主要是由于（）的影响 三氯乙酸的酸性大于乙酸,主要是由于（）的影响 a、共轭效应 b、吸电子诱导效应 c、给电子诱导效应 d、空间效应 2725238731年前1: UND1 共回答了19个问题 | 采纳率94.7%

选b
氯离子的电负性远大于氢离子,三氯乙酸比乙酸更容易电离,极性明显.

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三氯乙酸与其他羧酸沉淀蛋白一样吗 三氯乙酸与其他羧酸沉淀蛋白一样吗 三氯乙酸能沉淀蛋白 其他羧酸可以吗 如果能,性质和效果一样吗 Mryi1年前2: jiangbh8185 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%

羧酸是一种弱有机酸.不能使蛋白质变性.但是在三氯乙酸中,由于三个氯原子都有吸电子作用,使得羧酸很容易丢失氢,这样酸性就大大增强了.
蛋白质只有在强酸强碱环境下才会聚沉,弱酸环境下不会.

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不明白100%三氯乙酸为什么要那么配制 不明白100%三氯乙酸为什么要那么配制 500g三氯乙酸用227ml水来溶解,所得溶液即100％(M/V)三氯乙酸溶液. 能不能给我解释下为什么这么配制,100%指的是什么,质量浓度还是? 笨笨的1年前1: lianxiaoyao 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%

所得溶液即100％(M/V),括号中应该是m/V,即三氯乙酸的质量比溶液的体积.
500g三氯乙酸用227ml水来溶解,所得溶液的体积为500毫升,那么就是
500/500=100%（m/V）
推算：三氯乙酸的密度比水大,500g三氯乙酸用227ml水来溶解后溶液的密度一定是727/500（g/ml）.

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什么物质易挥发乙醇易挥发么?乙酸乙挥发么?三氯乙酸乙挥发么?硝酸易挥发么?是不是能很容易闻到气味的物质都易挥发?闻到气味 什么物质易挥发 乙醇易挥发么?乙酸乙挥发么?三氯乙酸乙挥发么?硝酸易挥发么? 是不是能很容易闻到气味的物质都易挥发?闻到气味是因为挥发了么? 为什么盐酸易挥发而硫酸或浓硫酸就不宜挥发? 落叶中的紫絮1年前3: 东南竹箭共回答了13个问题 | 采纳率76.9%

1.易挥发的物质都是分子晶体----晶体有四类:原子晶体离子晶体分子晶体金属晶体----原子晶体离子晶体分子晶体中微粒间的相互作用分别是共价键离子键金属键,是化学键,是强相互作用,使微粒间的结合很牢固,使微粒...

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三氯乙酸和乙酸铅沉淀蛋白质的原理是 小女人_791年前1: zocrates 共回答了21个问题 | 采纳率85.7%

乙酸铅,铅离子是重金属离子,可导致蛋白质变性凝固,沉淀.
三氯乙酸,也是使蛋白质变性,沉淀.

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三氯乙酸与氯化钙会反应生成沉淀吗 yslr19661年前1: yk_ky3333 共回答了21个问题 | 采纳率85.7%

且不说三氯乙酸钙是不是沉淀,盐酸的酸性明显要比三氯乙酸强,所以复合反应不能发生.

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多酚氧化酶性质实验中三氯乙酸和硫脲有什么作用? llhhww391年前1: 篮麟共回答了18个问题 | 采纳率88.9%

三氯乙酸使蛋白质沉淀,使酶失活,失去催化能力.硫脲完全抑制酶活性

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酪蛋白溶液中加入三氯乙酸,怎么没有沉淀生成 射落雕儿无数1年前1: ztcbx 共回答了21个问题 | 采纳率81%

不过后来我加了盐酸进去,也没有沉淀生成,应该是酪蛋白出问题了:cry:wujia115(站内联系TA)也许是酪蛋白没有溶解.溶解酪蛋白时要加碱才好溶.例如：
0.5%酪蛋白溶液：称取酪蛋白（干酪素）0.25g放入50mL容量瓶中,加入约20mL水,再准确加入1mol/L NaOH 5mL,当酪蛋白溶解后,准确加入1mol/L乙酸5mL,最后加水稀释定容至50mL,充分摇匀.erping80(站内联系TA)ls,我加了0.1mol/L NaOH 10mL,用磷酸缓冲液定容的apple2001(站内联系TA)建议测下pH.
友情提醒,不要沾到三氯乙酸了,小心蜕皮：）bulebird(站内联系TA)配制酪蛋白溶液时,测酸性蛋白酶要加入几滴乳酸在沸水浴中进行溶解,一定要溶解至澄清状,溶解冷却至室温后要调节一下pH,要与所用缓冲液的pH基本一致.如果溶解充分,再加入三氯乙酸后还没有沉淀沉声的话,那肯定就是酪素的问题了.酪素有几种,并不是所有的酪素都适合用来测蛋白酶活性的,一定要选好了.

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酪蛋白溶液中加入三氯乙酸,怎么没有沉淀生成 娱乐8卦11年前1: 藏羚羊L 共回答了22个问题 | 采纳率90.9%

不过后来我加了盐酸进去,也没有沉淀生成,应该是酪蛋白出问题了:cry:wujia115(站内联系TA)也许是酪蛋白没有溶解.溶解酪蛋白时要加碱才好溶.例如：
0.5%酪蛋白溶液：称取酪蛋白（干酪素）0.25g放入50mL容量瓶中,加入约20mL水,再准确加入1mol/L NaOH 5mL,当酪蛋白溶解后,准确加入1mol/L乙酸5mL,最后加水稀释定容至50mL,充分摇匀.erping80(站内联系TA)ls,我加了0.1mol/L NaOH 10mL,用磷酸缓冲液定容的apple2001(站内联系TA)建议测下pH.
友情提醒,不要沾到三氯乙酸了,小心蜕皮：）bulebird(站内联系TA)配制酪蛋白溶液时,测酸性蛋白酶要加入几滴乳酸在沸水浴中进行溶解,一定要溶解至澄清状,溶解冷却至室温后要调节一下pH,要与所用缓冲液的pH基本一致.如果溶解充分,再加入三氯乙酸后还没有沉淀沉声的话,那肯定就是酪素的问题了.酪素有几种,并不是所有的酪素都适合用来测蛋白酶活性的,一定要选好了.

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