mer

链接: https://pan.baidu.com/s/1oJFPnfIZwBiz9EK_dqN9PA 提取码: h5kg导演: 克林特·伊斯特伍德编剧: 杰森·霍尔主演: 布莱德利·库珀 / 西耶娜·米勒 / 卢克·葛莱姆斯 / 凯尔·加尔纳 / 杰克·麦克道曼 / 山姆·贾格 / 基尔·奥唐纳 / 艾瑞克·克罗斯 / 布莱恩·哈利塞 / 科里·哈德里克 / 玛内特·帕特森 / 埃里克·拉丁 / 纳维德·内加班 / 阿萨夫·科恩 / 萨米·谢伊克类型: 动作 / 传记 / 战争制片国家/地区: 美国语言: 英语 / 阿拉伯语上映日期: 2014-11-11(AFI影展) / 2015-01-16(美国)片长: 132分钟 讲述了克里斯·凯尔（布莱德利·库珀 Bradley Cooper 饰）原本是一名普通美国牛仔，“911”事件以后他以30岁的高龄参加了海豹突击队，并成为了伊拉克战场上的一名优秀狙击手。参军之后克里斯认识了塔雅（西耶娜·米勒 Sienna Miller 饰），两人很快结婚生子，但是随着克里斯的多次出征伊拉克，两人的家庭发生了很多问题。战场上的克里斯十分优秀，被队友称呼为“传奇”，恐怖分子以高额奖金请职业狙击手猎杀他，但屡次都未得手，可是身边的队友却一个个遭遇不测，虽然妻子三番五次恳求他退伍，但是他抱着为队友复仇的信念最后一次出征

机匣，枪机组件，护木，枪托，瞄具，握把，弹匣，发射机组件，差不多就这几大部分了枪管

克里夫兰轮船意味着什么

Cleveland steamer意思是克利夫兰的轮船。翻译是在准确（信）、通顺（达）、优美（雅）的基础上，把一种语言信息转变成另一种语言信息的行为。翻译是将一种相对陌生的表达方式，转换成相对熟悉的表达方式的过程。其内容有语言、文字、图形、符号和视频翻译。其中，在甲语和乙语中，“翻”是指的这两种语言的转换，即先把一句甲语转换为一句乙语，然后再把一句乙语转换为甲语；“译”是指这两种语言转换的过程，把甲语转换成乙语，在译成当地语言文字的过程中，进而明白乙语的含义。二者构成了一般意义上的翻译，让更多人了解其他语言的含义。

没有，merry christmas第一次总在荧幕上，我记得就是那个圣诞快乐，劳伦斯先生的电影。而且这种欢快中夹杂寂寞感的选举，怎么会用到千寻那里去啊……

Merry Christmas是圣诞快乐的意思。Merry Christmas美 [mu025bru026a kru026asmu0259s]短语Merry Christmas Mr Lawrence 圣诞快乐劳伦斯先生。A Merry Christmas 快乐的圣诞节。Merry Christmas Everyone 祝各位圣诞快乐。例句Merry Christmas, little girls!圣诞快乐，小姑娘们！扩展资料：相关介绍：merry有快乐、愉快的意思，christmas则表示圣诞节。圣诞节（Christmas）又称耶诞节，译名为“基督弥撒”，它源自古罗马人迎接新年的农神节，与基督教本无关系。在基督教盛行罗马帝国后，教廷随波逐流地将这种民俗节日纳入基督教体系，同时以庆祝耶稣的降生。

Merry.Christmas,.Mr.Lawrence.Cd1.avi下载地址: http://www.rayfile.com/files/9835f6d9-07ba-11de-9bd8-0019d11a795f/Merry.Christmas,.Mr.Lawrence.Cd2.avi下载地址: http://www.rayfile.com/files/afb022f5-07c2-11de-bd4b-0014221b798a/没字幕，我也在找字幕呢。

楼主在百度上面搜“射手网”，去那下字幕，这是专门下载字幕的网站，我刚试了下，有你这部电影的字幕。希望能帮到你O(∩_∩)O~

意思就是圣诞快乐。

圣诞快乐圣诞快乐

根据英国作家劳伦斯（Laurens Van Der Post）的真人真事小说《种子与播种者》（Seed and the Sower）改编的电影《圣诞快乐，劳伦斯先生》（Merry Christmas,Mr Lawrence），又译《俘虏》，讲述1942年在印度尼西亚爪哇岛日军战俘集中营对残暴的军国主义、不可一世的民族主义、懦弱的武士道精神都进行了反思和否定；对正义、自由和博爱的向往和讴歌的故事。 残酷的日军队长原上士在圣诞之夜，因同性恋之谊释放了英军战俘劳伦斯和杰克，并对其说了一声“劳伦斯，圣诞快乐。”（Merry Christmas,Mr Lawrence）四年后的圣诞节，战争结束不久劳伦斯在狱中又见到了原上士，两人现在身份互换，不觉感慨万千。当劳伦斯离去之前，原上士再次向劳伦斯说了一声：“圣诞快乐，劳伦斯先生！” 《Merry Christmas Mr. Lawrence》这首曲子是坂本龙一为大岛渚的同名电影谱写的，是他电影配乐的处女作，也是他最经典的作品之一。电影原声中同时收录坂本龙一与前JAPAN乐团主唱David Sylvian合作的歌曲版，但被命名为《Forbidden Colours》，如诗般的歌词配以空灵婉转的旋律，不禁使人身心涤荡。 《Merry Christmas,Mr. Lawrence》大抵算得坂本龙一的传世绝唱（这也是一个人一辈子里不可回避的一首歌，如果你没有听过，那你的生命也死掉了四分之一），美丽琴音里流淌着生命永远无法选择的宿命的悲剧感，对人性纯粹的追求与矜持，对异样情欲的纠缠与否认，对真理信念的盲目与回避...所有这些有时沉重得无以承受，有时又是那般虚弱无力，孰对孰不对的选择更是令人应接不暇、心力交瘁。当面对死去的人们只留下或深或浅的记忆，所有生命的美丽化作一句"圣诞快乐"，然后满天飞舞起洁白的雪花，飘落这世间每个干净与不干净的角落。 这首曲子挺好听哦

thank you I love you

如果我没有猜错的话应该是圣诞快乐劳伦斯先生即merrychristmas,mrlawrence这可是首名曲这首曲子是坂本龙一为大岛渚的同名电影谱写的，是他电影配乐的处女作，也是他最经典的作品之一。你去听听吧很不错！另外你提到陈奕迅，其实陈奕迅的那首好聚好散的开头就是运用的同样的旋律，同样的还有宇多田光的merrychristmas,mrlawrence。希望能够帮到你

哎~~这个我也正想要了。。。。前两天一直在听UTADA的这个主题曲

这应该属于嵌入式系统范围。MSP430内部有一个中断向量表，只要往里面对应向量（实际也是某地址）填相应函数的首地址，该中断发生时，就能根据填入的函数首地址自动跳转到该函数。#pragmavector=这句话就是给这个中断向量表进行赋值的。#pragmavector=PORT1_VECTOR表示给这个向量表中的外部端口中断所对应的地址进行赋值，并赋值为函数voidPort_1(void)的首地址。其中，关键字__interrupt则表示这个函数是中断服务函数这种特殊函数。

A step-down transformer has a turns ratio less than 1 . 降压变压器的匝数比小于1。 A pnear differential transformer has three coils . 一个直线差动变压器有三个线圈。 The magic cores of transformers and other apparatus are laminated . 把变压器及其它仪器的磁心分层。 The transformer isolates the transistors with regard to d-c bias voltage . 变压器可在两个晶体管之间隔离直流偏压。 The process by which the transformer is enabled to draw the requisite amount of power is as follows . 使变压器能够从电源输入必要数量的功率的过程如下。 It is difficult to produce a very high voltage directly, by a bination of transformer and rectifier . 用变压器和整流器相配合直接得到很高的电压是困难的。 Fig. 9 shows schematically the apppcation of a differential transformer to measurement of pquid column height . 应用差动变压器测定液柱高度大致如图9所示。 The transformer substation survived the blast with relatively minor damage to the essential ponents . 经爆震波袭击后未被毁坏的变电站的重要组件受到较小的损坏。 Several distributor transformers had fallen from the poles, and secondary wires and service drops were down . 几个配电变压器从电线杆上摔下来，副线及吊饰也垂下来。 Only transformer couppng can contribute to the voltage gain of an amppfier by virtue of a stepup turns ratio . 只有放大器耦合方能通过开压匝数比提高变压器电压增益。 The differential transformer secondary windings are connected in subtractive series so that the output is zero at balance . 差功变压器的次级线圈接成反向串联，以便在平衡时输出为零。 Verification regulation of transformers turn ratio test sets 变压比电桥检定规程 Specification for flameproof transformers for use in mines 矿山用防火变压器规范 66kv double windings , on - load tap - changing transformer 66kv双绕组有载调压变压器 Instrument transformers - electronic current transformers 仪表变压器.电流变压器 Field testing of relaying current transformers 继电器用的电流变压器现场测试指南 Multi - channel dc dc converters inductors transformers 磁性元件- *** t电感器变压器 Transformer design keep pace with dc dc converter technology 转换器技术同步发展 Design of pulse transformer for 10kv igbt sopd switch 固体开关的脉冲变压器设计 Verification regulation of instrument transformer test set 互感器校验仪检定规程 Transformers , distribution , dry - type over 600 volts 干式600v以上变压器配电系统 Oil - immersed transformer series pad - mounted transformer series 油浸式变压器系列 Technology parameter of scb10 10kv power transformer Scb10系列10kv级电力变压器 With cigar pghter device and transformer of any car 可配置汽车点烟器及变压器。 A step - down transformer has a turns ratio less than 1 降压变压器的匝数比小于1 。 Terminal markings for power transformers and reactors 变压器和电抗器的端子标记 Transformers ; oil trap dn 25 ; requirements and test 变压器.集油槽dn25 .要求和试验 Occurs when transformer configuration is not pleted 转换器配置未完成时发生。 Welding transformers for portable spot welding machines 便携式点焊机用焊接变压器 Research on regeneration technology for transformer oil 变压器油再生技术的研究 110kv three windings , on - load tap - changing transformer 110kv三绕组有载调压变压器 Dry type transformer series with non - enveloped windings 非包封线圈干式变压器系列 Transformer cabis custom design available 变压器柜根据用户要求配置相应设备 Dry type transformer series with non - enveloped windings 非包封线圈干式变压器系列 When a transformer is needed as part of a connection , the 当连接中需要转换器时， 220kv three windings , on - load tap - changing transformer 220kv三绕组有载调压变压器 Guide for loading mineral - oil - immersed transformers 矿物油浸式变压器的加载指南 Corrosion - proof and oil - immersed type power transformer 防腐蚀型油浸式电力变压器 Low voice of high class wreath type power transformer 高级低噪声环型功率变压器 66kv double windings , off - load tap - changing transformer 66kv双绕组无载调压变压器 Guide for loading mineral - oil - immersed transformers 矿物油浸式变压器的加载指南 Technology parameter of scb10 35kv power transformer Scb10系列35kv级电力变压器 Safety requirements for portable arc welding transformers 小型弧焊变压器安全要求 Instrument transformers - inductive voltage transformers 仪表变压器.感应变压器 500kv three windings , on - load tap - changing transformer 500kv三绕组无载调压变压器 Used in power - transfer transformer and choke coils 转换电源用变压器和扼流圈。 Use the transformer with the controller 912v ac用随机配置的变压器，初级电压220v

变压器型号：交流220输入，交流12伏出。尺寸：E型长148MM X宽18MM多绕组变压器

【答案】：C此处讲的是“我的父母和五岁的儿子坐在观众席上”，A)和B)的意思是“出现”和“缺席”，D)的意思是“在现场”，意思合理但结构不合理，应是“intheirpresence”。

去酷狗上可以下的

歌曲名:Summertime歌手:Ella Fitzgerald&Louis Armstrong专辑:The Complete Ella And Louis On Vervesummertimeand the livin" is easyfish are jumpin"and the cotton is highoh your daddy is richand your ma is good lookingso hush little babydon"t you cryone of these morningyou"re going to rise up singingand you"ll spread your wingsand fly to the skybut till that morningthere"s nothing can harm you babywith mammy and daddystandin" byone of these morningyou"re going to rise up singingand you"ll spread your wingsand fly to the skybut till that morningthere"s nothing can harm you babywith mammy and daddystandin" byhttp://music.baidu.com/song/7560007

一、关键词只是卖家精灵的一个模块，还有选品、选市场、产品监控而魔词只有关键词。二、魔词实际比卖家精灵贵，因为它支持一个大区（美国、欧洲）就要79美金/月。三、我验证过卖家精灵的准确率比魔词高，可以这样验证：关键词的准确性、完整性、及时性，是评估一款关键词工具-数据部分的三大基础指标。先说关键词准确率的评估方法。1、对照亚马逊ARA数据亚马逊ARA数据（BrandAnalytics数据）是亚马逊对品牌卖家和VC卖家免费公开的一份大数据。最开始是2018年对VC卖家付费开放高级版，2018年年底分批次对品牌卖家免费公开（直到现在，也不是所有的品牌卖家有访问权限）。因为卖家精灵是ALLDepartments(不限类目)的关键词的月度数据，所以在打开亚马逊BrandAnalytics后，选择：Departments:?Amazon.com报告范围：Monthly然后找到“搜索频率排名”相似的两个词，比如：搜索频率排名在10万名左右的：tvlightstripcandlecontainers下图是ARA数据截图（取自亚马逊美国站2019.11月数据），以及它们在卖家精灵11月份关键词搜索量的截图2、对照关键词的内在属性比如iPhoneX在2017年9月13开发布会，2017年11月3日上市的，所以iphonexcase应该从那时候开始起步的。huaweiP30pro手机是2019年3月底在美国上市。下图是该两个关键词在卖家精灵的历史走势。3、参考GoogleTrends这个方法不太准，因为Google是信息搜索，而亚马逊是商品搜索。对于购买决策较长的商品，比如电视、冰箱，用户经常会先在Google了解商品信息，然后才考虑亚马逊购买。而某些商品是直接购买的，可能两者历史趋势比较接近，比如：christmastree。提示：Google?Trends是周数据，选择的是：Google购物搜索。以上三种方法，并没有评估关键词搜索量的准确率，都是把关键词搜索量当做搜索指数。那么，如何评估关键词搜索量绝对值的准确率呢？因为卖家精灵关键词在2019年6月前（包括6月份），都是亚马逊内部真实数据，2019年6月后才是基于大数据预测的，但预测准确率整体90%左右。可以将这两个时间点前后的数据进行对比，比如那种传统非季节性产品，如garlic?press（压蒜器）。特别说明：亚马逊各站点前200最热关键词的搜索量，预测误差较大（可能有上下30%误差），请谨慎参考。当然，如果您有渠道拿到亚马逊内部关键词大数据，进行对比是最靠谱的。

要说以上两种我都没用用过，说到关键词工具我只用JungleScout：《JungleScout关键词搜索和ASIN反查功能详解》关键词排名监控通过关键词搜索器获得原始词表，并保存到 “我的关键词列表”后，只需输入一个产品ASIN，调出词表，便能监测到该ASIN的各种关键词在自然流量下的排名，对PPC广告调整非常有借鉴意义。反查竞品关键词数据让产品及Listing在竞品中脱颖而出，从而提升销量，反查ASIN关键词很重要。深度反查及分析竞品关键词数据，如监控竞品关键词的广告排名、搜索量趋势、相关度排名以及PPC花费，可以将运营效率提升5倍以上！查看关键词历史搜索趋势在关键词搜索器里，可以查到某关键词两年内的历史搜索量变化趋势。图表可呈现过去30天或90天某关键词的搜索趋势变化，方便直观地了解该关键词的总体热度趋势和季节性变化，为优化PPC广告设置和产品详情页提供重要参考。

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歌曲名:Pride歌手:Robert Palmer专辑:The Very Best Of The Island YearsPride作曲编曲演奏：HIGH and MIGHTY COLOR<Gundam SEED DESTINY> OP2歌：HIGH and MIGHTY COLOR儚(はかな)く散(ち)った光が仆らを今呼び覚(さ)ます悲しみは音(おと)を立(た)て消えるあの场所から...彷徨うさだめ微(かす)かに笑颜 触(ふ)れて抱き合うこの瞬间深く爱する勇気と希望 强く感じる この记忆が络(から)み合う心と心を繋(つな)いで动(うご)き出(だ)している辉く光が照らし仆らを今呼び起(お)こす立(た)ち上(あ)がり音(おと)を立(た)て刻(きざ)むあの场所から…消(け)さない伤迹(きずあと)孤独と 不安 揺れて存在(そんざい)から远ざかるそして震(ふる)える背中(せなか)に爪(つめ)を立(た)てて确かめている深い绝望(ぜつぼう)が袭(おそ)う闇(やみ)に沈(しず)んだ夜でも祈りさえ届くなら永久(とわ)に信じ続けよう确かな夸(ほこ)りを胸に仆らは导(みち)かれていく翼(はね)広げ飞立(とびだ)とう强く描(えが)いた空辉く光が照(て)らし仆らを今呼び起(お)こす响(ひび)き合う音(おと)を立(た)て刻(きざ)むこの场所から...永久(とわ)に信じ続けて...http://music.baidu.com/song/9334567

ayu的有,东方神起的歌没听过!!!

这2本书都是介绍c++基本语法的，基本上书里的所有的代码示例都是处理文本文字，通过这些示例讲授c++的语法和部分c++标准程序库的使用。c++ primer(第5版)由于出得比较晚所以教授的c++是基于新标准c++11的。C++ primer(第6版)由于出得比较早，只是提到了部分新标准C++11的内容。总体上来看这两本书都是c++入门书籍，不过可以认为这2本书都不是程序设计入门书籍。也就是说这2本书如果你学过其他程序设计语言，有一定的编程基础，要来学C++，这2本书就是入门书籍。但是由于这2本书一上来就教授C++的使用，如果读者是对计算机不够了解，没有什么编程经验的话，比较难上手，原因在于C++语言涉及从底层硬件到高层语言特性的跨度比其他语言大，语法也比较多，在还不是很了解计算机的时候很可能被大量术语干扰，这也是C++语言特性的问题，并不是这2本书讲的内容是C++中多么深奥的部分，这2本书讲解的都是基础。

就是正向引物和反向引物。。。

没看过effective c++，现在在看c++ primer感觉有难度，有很多后面的东西，还是看effective c++吧

引物设计有3 条基本原则：首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA 聚合反应(即错配)。引物设计应注意如下要点：1 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。2 引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3"端相似性较高的序列，否则容易导致错配。引物3"端出现3 个以上的连续碱基，如GGG 或CCC，也会使错误引发机率增加[2]。3 引物3"端的末位碱基对Taq 酶的DNA 合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率，末位碱基为A 的错配效率明显高于其他3 个碱基，因此应当避免在引物的3"端使用碱基A[3][4]。另外，引物二聚体或发夹结构也可能导致PCR 反应失败。5"端序列对PCR 影响不太大，因此常用来引进修饰位点或标记物[2]。4 引物序列的GC 含量一般为40-60%，过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。5 引物所对应模板位置序列的Tm 值在72℃左右可使复性条件最佳。Tm 值的计算有多种方法，如按公式Tm＝4(G+C)＋2(A+T)，在Oligo 软件中使用的是最邻近法(the nearest neighbor method)。6 u2206G 值是指DNA 双链形成所需的自由能，该值反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性。应当选用3"端u2206G 值较低（绝对值不超过9），而5"端和中间u2206G 值相对较高的引物。引物的3"端的u2206G 值过高，容易在错配位点形成双链结构并引发DNA 聚合反应[6]。7 引物二聚体及发夹结构的能值过高（超过4.5kcal/mol）易导致产生引物二聚体带，并且降低引物有效浓度而使PCR 反应不能正常进行[8]。8 对引物的修饰一般是在5"端增加酶切位点，应根据下一步实验中要插入PCR 产物的载体的相应序列而确定。

Primer Premier 6破解版安装介绍1、打开Primer Premier下载软件压缩包文件，点击“PP624Installer.exe”根据提示完成原版安装即可，在没有注册的情况下是进入不了Primer Premier 6界面的：2、关闭软件，将crack文件夹下的patcher.jar文件复制到Premier 6安装根目录下…httpDP80DMIUpdaterDMPPDM624文件夹中。默认目录为：C:Program FilesPrimer Premier 6.243、在开始菜单—运行中输入CMD，打开命题提示符窗口4、用CD命令定位至目录：7、然后在光标后输入：java -jar patcher.jar ，回车即可破解成功，如下图所示：特别说明Primer Premier 6运行需要在本机安装JRE环境，没有安装的用户可以通过

估计你买C++ PRIMER这本书也是被网络上很多人忽悠的,中国人就这样，自己上当以后,也希望别人也上当,这样他的心理就平衡.另一个原因则是现有的C++程序员不希望程序员队伍扩大化,这样他们的生存就有压力,所以他们推荐后来者学习C++都使用C++ PRIMER,这样很多人就会感觉C++太难了,我无法掌握,从而放弃C++.说C++ PRIMER难,不好懂,倒不是因为他讲得有多经典,有多专业,而是他能把一个简单的问题复杂化,难----不等于----------专业另外,推荐一本C++好书,叫<零起点学通C++>,全面专业又好懂,里面还附带视频讲解,看过视频的人很多,至今还没有一个看不懂的.大大降低了C++的难度,而且很关键的是:彻底撕开C++神秘的面纱,不再人为地制造难度,因此让你对C++越来越感兴趣.

设计引物的时候已经用到了两条链吧，一条链设计前引物，另一条设计后引物。RT-PCR得到的是双链cDNA，所以用mRNA设计或者用互补链设计都可以啊，因为着两条链都会用到，只要把U换成T，是绝对可以P出来的。

【答案】：是指与克隆载体上多克隆位点外侧一段序列互补的寡核苷酸。因为任何待测序的DNA片段插入多克隆位点，都可以用该段寡核苷酸作引物来引发测序反应。所以称之为通用引物。

有一定基础了吧 先写些小游戏 如俄罗斯方块 贪吃蛇 然后写推箱子（算法有意思） 然后五子棋AI（要一般人下不过） 然后象棋AI(一般人下不过) 做完这些 你就很牛拉！ 以上东西都包括图形学 算法 还有就是很激发人的兴趣与激情！ 加油！补充资料到处都是论坛qq群不局限于书有网络不利用哎~~还有个很好资源linux

M有摩尔每升的意思。10M就是10mol／L但是，一般引物是不会这么高的浓度滴，应该是10mM，正好是引物的工作浓度。

polyolefin指的是聚烯烃 是一种高分子至于primer应该是底漆 处理剂什么的他俩连一块是什么意思 楼主自己揣摩

除了rmvb的 大部分都支持

题主是否想询问“PrimerPremier5怎么粘贴不上复制好的序列”？系统未升级。PrimerPremier5是一款分子生物学试验常用的PCR引物设计软件，用户在使用时，出现粘贴不上复制好的序列的问题，是由于用户使用时该系统未升级导致，只需要删除该软件，重新下载即可。

Primer-BLAST是NCBI的引物设计和特异性检验工具。Primer-Blast介绍Primer-BLAST，在线设计用于聚合酶链反应（PCR）的特异性寡核苷酸引物。Primer-BLAST可以直接从Blast主页（这个工具整合了目前流行的Primer3软件，再加上NCBI的 Blast进行引物特异性的验证。Primer-BLAST免除了用另一个站点或工具设计引物的步骤，设计好的引物程序直接用Blast进行引物特异性验证。并且，Primer-BLAST能设计出只扩增某一特定剪接变异体基因的引物–an important feature for PCR protocols measuring tissue specific expression（注：没办法准确的翻译，只好作罢，汗！）。Primer-BLAST有许多改进的功能，这样在选择引物方面比单个的用 Primer3和NCBI BLAST更加准确。Primer-BLAST的输入Primer-BLAST界面包括了Primer3和BLAST的功能。提交的界面主要包括三个部分：target template（模板区）, the primers（引物区）, 和specificity check（特异性验证区）。跟其它的BLAST一样，点击底部的“Advanced parameters”有更多的参数设置。模板（Template）在“PCR Template”下面的文本框，输入目标模板的序列，FASTA格式或直接用Accession Number。如果你在这里输入了序列，是用于引物的设计。Primer-BLAST就会根据你输入的序列设计特异性引物，并且在目标数据库（在specificity check区选择）是唯一的。引物（Primers）如果你已经设计好了引物，要拿来验证引物的好坏。可以在Primer Parameters区填入你的一条或一对引物。并且选择好验证的目标数据库（在specificity check区选择）。根据需要可设置产物的大小，Tm值等。特异性（Specificity）在specificity check区，选择设计引物或验证引物时的目标数据库和物种。这一步是比较重要的。这里提供了4种数据库：RefSeq mRNA, Genome (selected reference assemblies), Genome (all chromosomes), and nr (the standard non-redundant database)。前两个数据库是经过专家注释的数据，这样可以给出更准确的结果。特别是，当你用NCBI的参考序列作为模板和参考序列数据库作为标准来设计引物时，Primer-BLAST可以设计出只扩增某一特定剪接变异体基因的特异引物。selected reference assemblies 包括以下的物种： human, chimpanzee, mouse, rat, cow, dog, chicken, zebrafish, fruit fly, honeybee, Arabidopsis, 和 rice。Nr数据库覆盖NCBI所有的物种。实例分析用人尿嘧啶DNA糖基化酶(uracil-DNA glycosylase genes, UNG, GeneID: 7374)的两个转录本序列作为一个例子来分析。UNG1的序列长一点（NM_003362），UNG2的序列短一点（NM_080911，注：拿这两个基因的序列ClustalW一下就可以了）。这里用UNG2的序列设计引物，选择RefSeq mRNA database，物种是Human，其它默认。结果如下图A-B所示，设计的引物只能扩增出UNG2。看上面的图，把“Allow primer to amplify mRNA splice variants”这个选项给勾上，出现的结果如下图-C所示，新的引物也可以扩增出UNG1（注：我试了一下，不能得到预期的结果，可能参数没设对）。

【答案】　理论并不等于实践，能扩出来目的片段的引物就是好引物。我Blast以后，在primer5中间按照文献给出的引物序列、位置、长度去查找引物在primer5软件中的评分以及发卡、二聚体。情况。然后发现文献中给出的引物在primer5中的评分都不是很高，一般只有70左右哦。当然，你也可以选择另一个 file——open——dna sequence 去open一个新的文件。在接下来的界面里 复制你的序列，于是就将序列导入了点击search 进入下图界面开始设计引物 在此图中有6个部分，红色数字标示 1区，包括三部分，可以选择设计pcr引物，测序引物和杂交探针 2区，搜寻模式，包括正链，反链等，我们一般选最后一项pairs，出来一组引物 3区，引物的范围，上游引物所在范围，下游引物所在范围 4区，pcr 长度，根据需要设置 5区，引物长度，这个是调整的重点，前面是长度，后面是± 6区，选择模式，一般选auto，也可以手动下面是一个设计 我选择了 正链位于1-400内 负链位于500-910内 产物长度100-600 引物长度为20±1bp 输入后，出现下图界面 共有1000多条引物 点击ok

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不是免费的，但可以破解激活，在现如今花钱买软件的人不多，你懂得，具体安装激活方法如下：http://jingyan.baidu.com/article/b24f6c8239a7aa86bfe5da81.html

primer5打开没有gene界面，需要重新打开。其主要界面同样也是分为序列编辑窗口(Genetank)，引物设计窗口(PrimerDesign)，酶切分析窗口(RestrictionSites)和纹基分析窗口(Motif)。但是并没有生成我们期望的captures文件夹以及快照文件，所以当你需要布局快照时候取消此选项，重新打开layoutinspector。

primerbank里的引物可以直接用，用法如下：第一步：新建序列（或者通过Open直接打开序列） 第二步：确定你要设计引物的起始位点,双击下面的序列可以选中一段（暂时先不要管引物长度） 第三步：选择作为上游引物Select->Forward Primer,然后你会发现下面的序列上有相关引物。首先一定要确保“Exon junction span”选项设置为“primer must span an exon-exon junction”,这是为了排除DNA污染。Tm值要在60℃左右,且正反引物的值要接近,不能差太远。

C++内容主要是类和面向对象，没有对话框，常用控件，框架窗口界面设计，文档和视图，图形和文本

这不是和网上讲的是一样的吗

c++primer是按照标准写得，非常详细，相当于语法手册了；effective c++是一些常见的问题，非常经典；应该有一定基础了再去看effective c++会收获比较大，所以c++primer是有必要先看的；c++primer比plus难一些，看看比较好~

c primer plus虽然是一部很经典的书籍，但是他所讲述的内容是适用于大部分C的理论。基本上不会针对某一种编译器该怎么写，有一个比较清晰的代码。这种基础理论对于新手来说，可能切入的太快，太直接。令人觉得云山雾罩。primer[英][u02c8prau026amu0259(r)][美][u02c8pru026amu025a]n.底漆; 启蒙读本; 入门书; 复数：primers易混淆单词：Primerplus[英][plu028cs][美][plu028cs]prep.（表示运算）加; （表示包容）外加; [口语]和; （表示数目）在零（度）以上; n.加号; [数学]正量; 好处; 附加物; adj.加的; 正的; 附加的; 比所示数量多的; 复数：plussespluses易混淆单词：PLUS

首先在设计引物的时候,要注意避免产生引物二聚体.现在的引物设计都会有一个dimer的选项,可以看出你设计的引物是否会发生二聚体.如果会形成二聚体,并且序列不能有大的变动,那就注意一下在3"端别发生dimer的互补. 其次,在PCR时提高退火温度可。

primer不是隔离么……就是饰底乳，用在foundation（粉底液）前

步骤如下：1、找到Primer3的站点。你不用记住这个站点，但是要记住“Primer3”这个词，然后打开GOOGLE首页，输入Primer3，跳出来的第一个项目就是了“Primer3Input0、4、0”，网址是http：//frodo、wi、mit、edu/。2、贴上模板序列。进入Primer3站点，可以看到一个引物设计的界面。（如下图）在“Pastesourcesequencebelow(5"->3"?”下面的大空框里面把你的模板序列粘帖进去。注意是5"->3"方向的，数字或者空格都没关系，软件会自动过滤的。3、重要参数设定。首先是“ProductSizeRanges”，如果你不希望软件给你随便做的话，首先要调整的就是这个参数。默认的参数实际上是从100到1000，这个你得自己改，如果你希望产物的大小符合你的预期，尽可能把范围改小，比如480-500，具体看情况调整。第二个参数是“PrimerSize”，默认值一般可以用，但是，当你用熟了这个软件，你自己就知道该怎么改了。第三个参数是“PrimerTm”这个和PrimerSize差不多。4、Pickprimers：点一下这个按钮，符合你大小预期的primer就出来了，看看Primer3Output的界面，多么漂亮！你要的primer出来了，而且有primer在序列上的位置比对图，还要primer本身的信息，包括位置，长度，Tm，GC含量，任何位置互补碱基数，3"端互补碱基数，以及引物序列，（注意，下游引物是5"->3"），还要产物大小，两引物间任意互补碱基数，两引物间3"端互补碱基数等。如果引物尚在参数设定的范围内，但还不是最佳，将会给出警告。5、引物设计检验：可以仅仅设计一对引物，只要在Pickleftprimer或者Pickrightprimer前面的勾勾掉一个就可以。也可以自己定义引物，放在Primer框里，（注意，下游引物的书写反向仍然是5"->3"）如果符合设定的条件，软件将对给出引物评分，同时给出警告信息，根据警告信息可以适当对自定义引物做些调整即可，警告信息也让你做实验的时候心中有数。对于文献发表的引物，最好都要检查一下，这样就可以避免被别人有意无意误导。至于RT-PCR所用的引物，最好是使得产物跨过内含子，这样避免潜在DNA对RT-PCR的干扰。实际做引物的时候，要把内含子都去掉，仅仅把外显子序列放入源序列框中，并且通过自定义引物设计的方法，使上下游引物分别全部或者部分落在不同外显子上。至于如何快速识别内含子和外显子以及电子PCR，将另做说明。

如何利用Primer6.0进行引物的设计？1.首先,选取目的基因序列,对格式没有什么要求,只需要将目的基因序列复制就可以。2.打开File目录下的New,选择Sequence。这里的另一个Project选项是导入文件的方式,也就是将目的基因以文件形式保存的可以直接导入文件。一般通过复制的方式会更方便。3.打开Sequence后,会弹出粘贴框,只需要将刚刚复制的基因序列粘贴上即可,然后点击下方的Add。4.选择上方的红蓝双向箭头的按钮进行引物设计,在设计开始前可以更改设计的参数,包括搜索的碱基范围、引物的长度,碱基数,设计结果显示的引物对数等。5.设置完参数后,点击下方的Search,软件开始分析设计,完成后,点击OK。设计结果就会在下面显示出来。6.结果中蓝色为前引物,红色为后引物,Rating是对引物的综合评价分数,在上方也会显示引物的优劣,最好的为Best,中等为Good,最次的为Poor。一般选择引物都为Best或Good,其它显示均是无法使用的。7.在右边还有两个选项,AllPrimers可以查看可选择的多对不同引物。可以根据需要选择合适位置和适当产物长度的引物。选择后需要点击下方的Replace才能替换。8.AllStructers则可以查看当前选定引物的结构,如发夹结构,引物二聚体和重复碱基等。9.引物选定完成后,点击下方的引物序列,再右键会弹出复制信息选项,进而将设计好的引物导出。也可以直接以文件的形式将结果导出。premierprimer6.0产物长度为9000多的引物怎么设计呀？引物的设计其实和一般的差不多,这么长的PCR主要还是取决于模板的好坏,不知道楼主你的模板是什么来源,基因组DNA的话,建议多做几组不同来源的模板,当然这里引物如果不好的话失败的概率肯定比同样引物不好的情况下P小片段的要高。引物的话还是尽量得分上85吧我觉得,不行的话就往目的片段两端走走。这么长的片段建议楼主选择强效高保真的酶,比如KODplus,这是我们这里用过的最好的酶。不过价钱也是偏高的。据报道这种酶的保真度是taq酶的80倍,另外最长能够P出20kb的序列。当然这是在非常好的情况下。同时也可以在反应体系中添加2-5%的DMSO,这样可以帮助扩增。如果实在不行的话楼主也可以考虑做overlappingPCR,把片段分为2-3个部分来P,不过这样工作量就会大不少。希望能够帮到你~有问题一起讨论解决哦~如何应用primerprimer6.0设计引物引物设计有3条基本原则:首先引物与模板的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构,再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应(即错配)。引物设计应注意如下要点:1引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-2

　　进入软件genetank窗口file---new----DNA sequence进入序列输入版块control+v输入序列改变序列选择AS菜单　　进入primer引物设计进入search点OK系统自引物　　选需要（评）要克隆基则primer菜单手设计

首先引物要跟模板紧密结合，其次引物与引物之间不能有稳定的二聚体或发夹结构存在，再次引物不能在别的非目的位点引起DNA聚合反应(即错配)。围绕这几条基本原则，设计引物需要考虑诸多因素，如引物长度（primerlength），产物长度（productlength），序列Tm值(meltingtemperature)，ΔG值(internalstability)，引物二聚体及发夹结构（duplexformationandhairpin），错误引发位点（falseprimingsite），引物及产物GC含量（composition），有时还要对引物进行修饰，如增加限制酶切点，引进突变等。我喜欢Primer5.0，，纯属个人喜好，Oligo6功能也很强大！！

首先打开软件左上角来操作file——new——dnasequence这一项可以把你复制的序列粘贴进去当然，你也可以选择另一个file——open——dnasequence去open一个新的文件。在接下来的界面里复制你的序列，于是就将序列导入了点击search进入下图界面开...

当然第四版了。

The exterior metal surface of the unit shall be treated with hot zinc spray of minimum 50 micron thickness. Then it shall be painted with primer of 50 micron minimum thickness and a 100 micron minimum thickness undercoating. Then it shall be painted with a gloss or semi gloss paint of minimum 50 micron thickness. The ultimate dry film thickness shall not be less than 300 microns.Alternatively, galvanized exterior metal surface as per BS EN ISO 1461 painted with a gloss or semi gloss paint of minimum thickness 50 microns is also acceptable.一个基本的经验法则要记住：底漆总是底漆，但底漆并不总是底漆。俄亥俄州克利夫兰市舍温威廉姆斯公司（sherwin williams co.）建筑涂料产品经理安德鲁基宁（andrew kinnen）表示，底漆是底漆类别的一个子集，起着特殊的作用。不好意思哈，现在我还只是了解这个的阶段。 但两个是不一样的

1、打开Primer5，并在左侧的“Task”栏中选择需要导出结果的任务。2、在任务窗口中选择“Report”选项卡，然后单击“ExportReport”按钮。如果使用的是试用版，则需要先激活软件才能导出报告。3、在弹出的“ExportReport”窗口中，可以选择要导出的报告类型和格式，并指定导出文件的位置和名称。4、点击“Export”按钮，等待几秒钟直到导出过程完成。5、打开导出的文件，查看或打印报告结果。

primer-blast结合.呵呵

最理想的引物就是hairpin、 dimer、crossdimer都为None的引物对。search结果是按各引物对的质量由高到低排序。所以排名最前的引物结果分析几乎都是none。而用direct select无异于大海捞针所以几乎都有found出现。2.search也可以选择sense 和 anti-sense。pairs是有2个引物的，但一次只能显示一个，按左上角的S或A按钮就可以切换查看sense 和antisense 了。

Primer5.0

引物设计和序列关系比较大，有些序列容易设计引物，有些序列很难设计引物评分低的引物也可以试试。不同软件之间也是有差异的用primer6设计的引物，评分在100，用beacon design评价引物的时候，评分可能只有80

首先打开软件 左上角来操作 file——new——dna sequence 这一项可以把你复制的序列粘贴进去 当然，你也可以选择另一个 file——open——dna sequence 去open一个新的文件。在接下来的界面里 复制你的序列，于是就将序列导入了点击search 进入下图界面开始设计引物 在此图中有6个部分，红色数字标示 1区，包括三部分，可以选择设计pcr引物，测序引物和杂交探针 2区，搜寻模式，包括正链，反链等，我们一般选最后一项pairs，出来一组引物 3区，引物的范围，上游引物所在范围，下游引物所在范围 4区，pcr 长度，根据需要设置 5区，引物长度，这个是调整的重点，前面是长度，后面是± 6区，选择模式，一般选auto，也可以手动下面是一个设计 我选择了 正链位于1-400内 负链位于500-910内 产物长度100-600 引物长度为20±1bp 输入后，出现下图界面 共有1000多条引物 点击ok

一、出版时间不同1、C Primer Plus：是2005年2月人民邮电出版社出版的图书，作者Stephen Prata，译者云巅工作室。2、C++ Primer Plus：是2015年人民邮电出版社出版的图书，作者是 [美]普拉塔（Prata,S.）。二、语言不同1、C Primer Plus：是C语言的经典教材。2、C++ Primer Plus：是C++语言的经典教材。三、内容不同1、C Primer Plus：全书共17章。第1、2章学习C语言编程所需的预备知识。第3到15章介绍了C语言的相关知识，包括数据类型、格式化输入输出、运算符、表达式、流程控制语句、函数、数组和指针、字符串操作、内存管理、位操作等等，知识内容都针对C99标准。2、C++ Primer Plus：全书分17章和10个附录，分别介绍了C++程序的运行方式、基本数据类型、复合数据类型、循环和关系表达式、动态内存分配、继承、代码重用、友元、异常处理技术、string类和标准模板库、输入/输出等内容。参考资料来源：百度百科-c++PrimerPlus参考资料来源：百度百科-c primer plus

base 和 primer都有帶 spf的 其實基本上是差不多的 bb cream其實算foundation希望采纳

用primer和测序公司算的tm值测序公司算的准。测序公司有保障，会多次计算，利用多个软件测算。测算，汉语词汇，意思是推测计算。《人民日报》1981.1.9："据测算，我国1980年的社会商品购买力大约比1979年增加了200亿元。"《文汇报》1983.2.5："有的店领导组织力量进行测算拟订承包指标"。

1.首先，选取目的基因序列，对格式没有什么要求，只需要将目的基因序列复制就可以。2.打开File目录下的New，选择Sequence。这里的另一个Project选项是导入文件的方式，也就是将目的基因以文件形式保存的可以直接导入文件。一般通过复制的方式会更方便。3.打开Sequence后，会弹出粘贴框，只需要将刚刚复制的基因序列粘贴上即可，然后点击下方的Add。4.选择上方的红蓝双向箭头的按钮进行引物设计，在设计开始前可以更改设计的参数，包括搜索的碱基范围、引物的长度，碱基数，设计结果显示的引物对数等。5.设置完参数后，点击下方的Search，软件开始分析设计，完成后，点击OK。设计结果就会在下面显示出来。6.结果中蓝色为前引物，红色为后引物，Rating是对引物的综合评价分数，在上方也会显示引物的优劣，最好的为Best，中等为Good，最次的为Poor。一般选择引物都为Best或Good，其它显示均是无法使用的。7.在右边还有两个选项，AllPrimers可以查看可选择的多对不同引物。可以根据需要选择合适位置和适当产物长度的引物。选择后需要点击下方的Replace才能替换。8.AllStructers则可以查看当前选定引物的结构，如发夹结构，引物二聚体和重复碱基等。9.引物选定完成后，点击下方的引物序列，再右键会弹出复制信息选项，进而将设计好的引物导出。也可以直接以文件的形式将结果导出。

修复。1、用其他的Primer premier 5.0安装。2、修复操作：“开始菜单”–“运行”–“cmd”–在黑框里输入“for %1 in (%windir%system32*.dll) do regsvr32.exe /s %1 ”回车。重启。3、借助第3方软件的修复功能：内存不能为read修复工具。

退火温度，碱基数目20个左右，不要有形成发夹结构的碱基序列，GC含量要大于60%。

打开primer premier 5.0——File——New—— DNA Sequence——COPY 特异序列到GeneTank——Primer——Search——PCR Primers，Pairs—— 设定Sense primer和Antisense primer的范围及PCR产物大小范围——设定引物长度（primer length）——Automatic——OK——Search complete后点OK——在Search Results里选择引物对。——改变参数，再次搜索——找到最适的引物

Primer Premier 6.0界面没有Primer Premier 5那么明了，设计引物的话还是建议你用Primer Premier 5.

一、创建具有管理员权限的Command命令行快捷方式（因为windows 7 cmd默认不是以管理员权限运行，所以一定要改成以管理员权限运行才有用）。1、在桌面空白地方，点击鼠标右键，选择“新建”→“快捷方式”2、弹出创建快捷方式窗口，输入cmd.exe的路径及文件名，如图输入cmd.exe可执行文件的地址C:WindowsSystem32cmd.exe，如果系统安装在其它驱动器，则加以相应修改，设置好点击“下一步”；3、这里随便设置快捷方式的名称，比如kjcmd，或是不动采用默认的，设置完成后，点击“完成”。4、桌面上会生成一个kjcmd的快捷方式，在cmd图标上点击鼠标右键，选择“属性”；5、选择“快捷方式”选项卡，点击其中的“高级”按钮，如图：6、打开cmd快捷方式的高级属性后，在“用管理员身份运行”前打钩，并点击“确定”7、到这里，cmd命令行已经具有管理员执行权限，如果双击运行，将会弹出UAC（用户帐户控制）警告，只需要点击确认即可。二、去官网下载primer premier 6.0三、去java官网下载并安装java.四、安装primer premier 6.0五、下载primer premier 6.0补丁crack六、解压crack，把里面的patcher文件复制到下列目录（如果不是安装在c盘，盘符相应改动）：C:Program FilesPrimer Premier 6.0httpDwww.premierbiosoft.comP80DMIUpdaterDMPPDM600七、点击第一步建好的cmd快捷方式八、输入cd C:Program FilesPrimer Premier 6.0httpDwww.premierbiosoft.comP80DMIUpdaterDMPPDM600（鼠标右键黏贴，不能用ctrl+v）九、再输入“java -jar patcher.jar”回车十、OK,结束 其实WIN7向下兼容很多程序只不过需要以管理员身份运行才行你那个不是软件的问题，是需要做一些小修改希望对你有所帮助 所有涉及到的下载，不是我不想发给你实在是发网址帖子要被审核你其实按关键词直接百度搜索就可以下载了

你先运行Primer 打开GeneTank按钮，再点Active Product 左下角就有你的机器代码，再点Primer Keygen生成激活码，搞定

方法/步骤1打开下载的软件，如图所示，上方PP500Installer为primer主程序，下面Primer Keyen为注册激活程序；2等待程序解压、载入内存；3点击Yes开始安装，直至安装结束；4运行primer主程序（桌面上没有生成快捷方式的话，请在c:windows下面找到安装文件夹，双击primer5程序打开，或者单击 开始 键——桌面左下角那个窗户图标，输入primer，在弹出的程序快捷方式中找到primer5，打开）在主界面找到“activate”，记住出来的机器码，如53；运行注册激活程序Primer Keyen，输入机器码，单击generate以生成注册码，并将生成的激活码，如8277，填入primer主程序的激活框中，完成注册激活，即可正常使用primer5程序了；END注意事项请安装在默认程序位置：C:Program FilesPrimer Premier 5，其它位置出现过激活出错、无法激活，去激活等问题；32位系统请安装32位软件，64位系统请安装64位软件；win7/xp系统没问题；win8级更高级别系统，可能运行时偶尔会有报错，请忽略；

区别在于前者的主语接近边缘，后者的主语位于边缘。ontheedgeof濒于,几乎,在边缘,（在桌子边上有一个杯子）。heisreadingabookontheedgeofthechair.他正坐在椅子边上看书.attheedgeof强调边缘和细节,与边缘更近更精确（在桌子边上有一只苍蝇）。you"relivingattheedgeofacliff,son.你是生活在悬崖边上，孩子

Primer Premier软件的主要功能分四种，即引物设计、限制性内切酶位点分析、DNA基元（motif)查找和同源性分析功能。前三种为其主要功能。此外，该软件还有一些特殊功能，其中最重要的是设计简并引物，另外还有序列＂朗读＂、DNA与蛋白序列的互换、语音提示键盘输入等等。其他特点：Primer Premier软件还可以针对模板DNA的来源以相应的遗传密码规则转换DNA和氨基酸序列。软件共给出八种生物亚结构的不同遗传密码规则供用户选择。有纤毛虫大核（Ciliate Macronuclear）、无脊椎动物线粒体（Invertebrate Mitochondrion）、支原体（Mycoplasma）、植物线粒体（Plant Mitochondrion）、原生动物线粒体（Protozoan Mitochondrion）、一般标准（Standard）、脊椎动物线粒体（Vertebrate Mito-chondrion）和酵母线粒体（Yeast Mitochondrion）。

你最好看清楚是不是MAKE UP PRIMER一类，也有些护肤品会这么写比如眼部底霜之类的。如果是我之前说的那个，那就是妆前乳。这个在你化妆之前用，就是说粉底液之前。

因为实验失败。根据查询分子生物学显示，因Premier5是一款分子生物学试验常用的PCR引物设计软件，使用不合适的PCR引物容易导致实验失败，所以primer5有事会出不了结果。primer5最新版是一款由加拿大Premier公司推出的引物设计应用软件，primer5官方版软件为用户提供了pcr，测序引物等设计。