age

这种情况用数据线连接电脑，通过第三方软件救砖即可。具体操作方法如下：1，通过小米下载中心界面，如图所示，从中下载相应的手机线刷工具和对应版本的MIUI版本ROM；2，对下载所获取的ROM包进行解压，同时安装Miflash线刷工具，将解压包所在的目录地址复制到地栏中；3，接下来我们需要关闭小米手机，同时按电源键+音量+不放以进入Fastboot模式，如图所示，手机界面显示MI免卡通；4，将小米手机与电脑进行连接，点击"刷新“按钮，待小米手机成功识别后，点击”刷机“按钮即可自动完成线刷操作；5，待刷机操作完成后，小米手机将自动重启并完成系统的更新操作，同时将从云端完成数据的恢复，当然我们也可以借助如图所示的数据恢复工具进行恢复；6，此外，我们还可以通过小米助手完成小米手机的刷机操作，如图所示，直接将小米手机与小米助手进行连接，按提示进行操作即可完成小米手机的刷机操作。PS：刷机，升级系统。ROOT等失败之后，都能按以上方法操作。

解决方法：从你能解决的地方开始。调制解调器和路由路很容易出现故障。只要简单的重启一次，一般来说都能解决问题。1、首先，试着用另一台电脑连接网络，上一台电脑可能网卡出了故障。如果也不能，检查一下本地网络是否断开。如果本地网络已断开，则问题出在路由路上，重启一下或者更换一个新的路由路即可。2、其次，看看DSL调制解调器的报错灯是否亮着，如果是，关掉解调器并重启，或者你也需要关掉电脑，并拔掉各种设备，等上三十秒后，把它们重新连接至电脑然后再启动。3、采用上述方法后依然不奏效，试试在Windows系统里重新设置网络连接。在 Windows XP按照下述步骤，单击开始，运行，输入CMD并回车，然后输入ipconfig /renew并回车。或者你也可以右键单击系统托盘里的网络连接图标，然后选择修复选项。不过我发现前者更为有效。4、若经过此番折腾你的电脑依然连不上网，并且通常你是通过无线适配器上网的，那么试着通过 网线直接连接至路由器。还是不行？别管路由器了，看看能否通过解调器直接连接到其它电脑，这样有助于进一步查明问题的根源。此外仔细地检查所有的线缆，并 且，如果可能的话全部更换它们。5、还是不起作用？给你的宽带提供商打个电话吧，让他们检查一下周边地区是否存在同样问题。 (别忘了留意那些显而易见之处：如果你通过有线宽带上网，你是否检查过有线电视是否有信号？你付了有关费用吗？)有些服务提供商能够远程测试你的网络设 备；有时候ISP会向你的调制解调器发送重置信号。但到了此时你很有可能碰上网络本身的故障，这种情况通常都是暂时性的，不过报告故障并进行投诉——不断 地投诉——通常会帮助ISP更高效率地解决故障。避免问题重现：购买一些备用的网络连接设备——找找邻近朋友的Wi-Fi信号并征求他们的许可而使用，或者购买笔记本用的无线数据传输卡。甚至拥有一个ISP的拔号上网号码，在紧要关头让你也能登录互联网

按你描述的情况，可能的原因如下：1、电波的强烈干扰可引起掉线。由于移动通信是靠空中电波传播的，当空中某些电波对正在使用的电波产生干扰到一定程度时，使用信号噪声比下降到标准值以下，手机会自动关闭，便出现掉线。2、传播出现阻挡和建筑物的反射，对接收点电波产生干扰也会出现掉线。3、越区切换失败发生掉线，用户通话的话音信道需从原小区切换到新的服务小区，但新的服务小区的用户忙闲也是随机的，如果在切换时不是有效的话音信道可提供时，越区切换就会失败，造成手机掉线。如果通话时突然发生掉线，可移动变换一下位置，尽量避免在死角盲区使用。

你可以上卡西欧专柜去问

魔趣更本地化些

三个手指一起在屏幕上往下滑。

并不大 魔趣自带宙斯盾 管理应用 lineage可以去酷安下个 黑域 来管理应用https://download.lineageos.org

当然是打材料；做的。真.冥皇执行剑 不可掉落，不可转移

先解锁，然后刷第三方recovery，然后再卡刷lineage，就可以了。我就是这样刷的，可以帮你。

可以解的

解决方法：从你能解决的地方开始。调制解调器和路由路很容易出现故障。只要简单的重启一次，一般来说都能解决问题。 1、首先，试着用另一台电脑连接网络，上一台电脑可能网卡出了故障。如果也不能，检查一下本地网络是否断开。

优点1.首先来说，很贴近原生安卓，用惯了国产ROM之后感觉眼前一亮。2.很简洁，没有广告和垃圾软件什么的，所以内存占用很小。3.更新较官方系统来说较快，能更快地体验新的安卓系统特性。缺点1.因为不是官方发布的系统所以或多或少有bug。2.OTA更新要挂vpn（我用的就是，魔趣的话不知道）3.原生系统相较国内系统缺少人性化，各种日常设置（比如设置流量套餐什么的）更麻烦和简陋。从cm13就一直开始用到现在的感受，可能不全，也可能有不对的地方，希望以上总结对你有帮助。

系统自身不提供root：2.这样的情况就需要第三方软件来root，腾讯手机管家，豌豆荚，root大师等等。通过数据线连接电脑进行root，以root大师为例3.手机连接电脑。成功连接之后选择“一键ROOT”。4.ROOT过程中，手机会自动重启几次（切记不要拔出数据线）。中途手机会提示安装root需要的软件，点击安装随后手机会进入重启。5.ROOT成功。在手机的桌面里会有图标显示

具体方法如下：步骤1、在电脑端下载并安装安卓SDK，刷机失败后别说开机了，recovery都进不了，因此大部分操作无法在手机上完成，需要借助电脑端工具。注：安卓SDK即(Android Software Development Kit)软件开发工具包，是基于JAVA开发的。因此在电脑端安装SDK必须先为您的设备配置一下JAVA运行环境，否则SDK是无法安装的。安装程序会自动检测设备的JAVA运行环境，如果电脑没有配置JAVA将无法进行下一步安装。步骤2、安装手机adb驱动。adb即Android Debug Bridge，就是起到调试桥的作用。adb其实也是是Android sdk里的一个工具, 用这个工具可以直接操作管理安卓模拟器或者真实的安卓设备上一步安装完安卓SDK之后直接把手机通过USB连接到电脑，开启手机电源后正常情况下电脑会提示发现新设备，是否安装驱动程序，如果电脑没有提示，打开SDK选项中的extra中自行搜索安装即可。

Lineage里记录的信息是某个物种的分类地位，即它属于哪个门，哪个纲等等逐级说明。如：人的lineage：cellular organisms; Eukaryota; Opisthokonta; Metazoa; Eumetazoa; Bilateria; Coelomata; Deuterostomia; Chordata; Craniata; Vertebrata; Gnathostomata; Teleostomi; Euteleostomi; Sarcopterygii; Tetrapoda; Amniota; Mammalia; Theria; Eutheria; Euarchontoglires; Primates; Haplorrhini; Simiiformes; Catarrhini; Hominoidea; Hominidae; Homininae; Homo

虽然我也是天堂玩家，不过这个问题我也不知道呵呵，等待答案中

“谱系特有”，见http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-NJNY201306004.htm

一、准备　　需要用到的东西我已经帮大家全部准备好了，有我自己亲手制作的第三方库 ，在源码的根目录下建立个3rdparty文件夹，把文件解压进去就可以了。 　　解压好之后，要将3rdparty/bin文件夹添加到系统目录，这样才能让程序找到这些第三方库的dll。 　　然后是Visual Studio 2012，因为我的第三方库都是VS2012环境下编译的，所以用其他版本VS的请自行编译。 　　最后是CUDA和MKL了，MKL是可选的，大家可以去Intel官方申请，如果不用cpu模式的话其实也无所谓，在第三方库包中我还提供了openblas的库文件。二、编译　　编译非常简单，分为以下几步： 　　1、双击两个c++文件，和caffe_pb2.py这个python使用的文件。 　　2、打开./build/MSVC/MainBuilder.sln，打开之后切换编译模式至Release X64模式。如果打开之后显示加载失败，可能你的CUDA版本和我的不一致，我的是CUDA 6.5版，这时就要用记事本打开./build/MSVC/MainBuilder.vcxproj，搜索CUDA 6.5，把这个6.5换成你自己的CUDA版本，就可以正常打开了。 　　3、右键点击左边的MainCaller项目，选择属性，在C/C++选项卡中，把附加包含目录中的cuda include目录改成你自己的；在链接器选项卡中，，把附加库目录中的cuda library目录也改成你自己的。 　　4、点上边工具栏中的绿色三角编译吧。 　　 　　如果要用matlab wrapper来提取特征、观察训练好的权重的话呢，只需要把matcaffe项目里面的cuda、matlab目录修改成你自己的，然后编译，你就能从matlab/caffe文件夹里面找到一个叫caffe.mexw64的文件啦。 　　python的wrapper类似，把pycaffe项目里的目录改成你自己的，就能在python/caffe文件夹中生成_caffe.pyd的python dll文件。

不是家族的意思吧。。。1楼的还真会字面解释lineage是血统的意思究竟为什么会是天堂呢...可能是因为觉得这样好听不是有个日本卡通英文是Bleach吗?翻译出来还是死神呢Bleach是漂白粉的意思.....

lineage-specific duplications是谱系特异性重复。详细解释：lineage 英[u02c8lu026aniu026adu0292] 美[u02c8lu026aniu026adu0292] n. 血统，世系; [例句]They can trace their lineage directly back to the 18th century.他们的世系可以直接追溯到18世纪。specific 英[spu0259u02c8su026afu026ak] 美[spu026au02c8su026afu026ak] adj. 具体的; 明确的; 特种的; [免疫学] 特效的; n. 特效药; 特性; 细节; 显著的性质，特性; [例句]Massage may help to increase blood flow to specific areas of the body.按摩有助于增加身体特定部位的血液流量。duplication 英[u02ccdju:plu026a"keu026au0283n] 美[u02ccduplu026au02c8keu0283u0259n, u02ccdju-] n. 重复; 复制; 复本; 成倍; [例句]Try to avoid wasteful duplication of effort.尽量避免无用的重复劳动。

好。1、卡西欧lineage是一款中端手表，该手表质量非常好，而且价格非常实惠。2、该手表采用最新科技，所以其显示形式也是独特的，深受群众喜爱。

根据发音和词意来记。lineagen，血统，世系。line+-age。这里取line的引申义：家族，家系，血统。line（排列）+age（年龄）→按年龄排列的兄弟。

Lineage 一词最常用于指血统，意为“来自祖先的直系血脉”，这个词的翻译有很多版本，这里我参照微软官方文档，将其译作数据沿袭，如果你看到类似“数据血统”、“数据血脉”、“数据继承”、“数据谱系”等词汇，它们大概率都指向 Data Lineage。例句：1. Later, Kenobi appeared to Luke and revealed the truth of his lineage.后来，克诺比出现在卢克面前，透露了卢克的真实身世。2. His lineage is noble , has a pair of bright, sharp, smiling, tempting, able talk sweet words, let me intoxicating.他有着高贵的血统，有着一双明亮、犀利、笑眯眯、魅人、会说甜蜜的，令人陶醉的话语;

歌曲名:Pied Piper歌手:Public Image Ltd专辑:Plastic BoxPied Piper歌　： T.M.Revolution思い切って そのアヤシ気な扉を くぐってみなよオートロックの明日 闭まったら最期 もう开かない动け… 梦の音色に导かれ 姿カタチ拘らず谁の理解も届かない 孤高の辉きに灼かれたまえ名前だって所诠 数字と変わらない様な记号で混沌の雑音の中で 呼ばれるのが関の山君よ… アオいままの人であれ 失くすばかりがイイんだ渇いた手を伸ばしきる 鼓动がやがて何かをするだろうまだ间に合うよ 壁の向こうへ放っておけば 君の热いモノがホラ 零れ出ちゃうよおさまらないから 痛むんだろう? さあ 隠すのはやめて动け… 梦の音色に导かれ 姿カタチ拘らず谁の理解も届かない 孤高の辉きに灼かれたまえ君よ… アオいままの人であれ 失くすばかりがイイんだ渇いた手を伸ばしきる 鼓动がやがて何かをするだろう君なら… まだ间に合うよhttp://music.baidu.com/song/2922016

从释义，用法，使用环境，形象和影响范围五个维度分析litter和rubbish的区别，详细内容如下。1. 释义区别：- "litter" 指的是散落在地面上的垃圾，尤其指小碎片或零散的废弃物。- "rubbish" 指的是一般的垃圾、废物或无用物品。例句：- Please pick up the litter on the sidewalk. (litter)（请捡起人行道上的杂物。）- Throw the rubbish in the trash bin. (rubbish)（把垃圾扔进垃圾箱。）2. 用法区别：- "litter" 通常用作名词，描述地面上的散落物，也可以用作动词，表示乱丢、乱扔。- "rubbish" 一般用作名词，指各种废物或垃圾。例句：- The beach was littered with plastic bottles and food wrappers. (litter)（沙滩上散落着塑料瓶和食品包装纸。）- Please dispose of your rubbish properly in the designated bins. (rubbish)（请将垃圾正确地投放到指定垃圾箱中。）3. 使用环境区别：- "litter" 更常用于描述地面上的散落物，如公共场所、街道、公园等地方。- "rubbish" 更常用于描述垃圾桶、垃圾处理以及对废物的整体描述。例句：- Don"t litter in the park. Use the trash cans provided. (litter)（不要在公园里乱扔东西。请使用提供的垃圾箱。）- The rubbish truck comes every Monday to collect the household waste. (rubbish)（垃圾车每周一来收集家庭垃圾。）4. 形象区别：- "litter" 呈现出一种散乱和杂乱的形象，可能与不当的垃圾处理有关。- "rubbish" 呈现出一种一般性的垃圾或废物形象。例句：- The picnic area was left in a terrible litter, with food wrappers and empty bottles everywhere. (litter)（野餐区被弄得一片狼藉，到处都是食物包装纸和空瓶子。）- The rubbish piled up on the streets after the parade. (rubbish)（游行结束后，街道上的垃圾堆积如山。）5. 影响范围区别：- "litter" 更侧重于描述地面上的散落物，强调地面上产生的垃圾及其对环境的影响。- "rubbish" 更侧重于整体的废物处理问题，强调社会中废物的收集、运输和处理。例句：- The litter left behind by the tourists is damaging the natural beauty of the area. (litter)（游客留下的垃圾破坏了该地区的自然美景。）- Proper segregation and disposal of household rubbish are essential for effective waste management. (rubbish)（正确分类和处理家庭垃圾对于有效的垃圾管理至关重要。）

歌曲名:Sabotage歌手:Dog Food专辑:UnleashedLil Eddie-Sabotage Wade3CB制作Ohh, Ohh Yeah Yeah YeahYeah Yeah Yeah Yeah ,Oh Yeah Yeah Yeah Ohh YeahI Said He Got Mind On My MoneyAlways On The Road Different City DailySometimes When You Try To Call MeI Can"t Pick Up Right AwayUnderstand That Don"t Mean NothingThere"s No One Else Here For Me GirlSo Don"t Let Your So Call Friends Make You Mind Up For You.Chorus:You Are My rock My Whole World Would StuckIf You Let The Rumors Just Tear Us ApartBaby Look What We GotThat You Know My HeartBaby Only You Can Save Us.Don"t Let Them Sabotage, SabotageSabotage Everything We"ve Been Fighting ForSabotage, Sabotage, SabotageAll Our Love, Don"t Let Them Sabotage.When Your So Mad At MeTurning Off Your Phone Get Back At MeWhy, Can"t You See We Just Wasting More TimeAnd I"ve Been Missing You All NightAccuse Me To Know Your Crying And I Can"t Be By You SideTry To Remember The One You Fell In Love I promiseChorus:You Are My rock My Whole World Would StuckIf You Let the Rumors Just Tear Us ApartBaby Just Look What We GotThat You Know My HeartBaby Only You Can Save Us.Don"t Let Them Sabotage, SabotageSabotage Everything We"ve Been Fighting ForSabotage, Sabotage, SabotageAll Our Love, Don"t Let Em Sabotage.The End Without The Person you LoveI Know It Can Be Difficult YeahhBut I Just Can"t Imagine Living This Life Without YouSo Let Me Go.You Are My rock My Whole World Would StuckIf You Let the Rumors Just Tear Us ApartBaby Just Look What We GotThat You Know My HeartBaby Only You Can Save Us.Don"t Let Them Sabotage, SabotageSabotage Everything We"ve Been Fighting ForSabotage, Sabotage, SabotageAll Our Love, Don"t Let Em Sabotage.r&b~~~~http://music.baidu.com/song/15061440

LDD对0.25um短沟道器件的VT影响是比较大，LDD用HCI来确定。LDD确定后再调其他参数来meet电性要求。当然现实也不会这么简单，往往动一发而动全身。

《The Age of Pope》（Dennis, John）电子书网盘下载免费在线阅读链接: https://pan.baidu.com/s/1LJr4HdXd5Rm6xI647iTLQA 提取码: z2iw书名：The Age of Pope作者：Dennis, John页数：146内容简介：The Age of Pope by Dennis, John.

可能分区表有错误，尝试用diskgen修复即可

这是bios没有设置好的原因，.开机按delete键进入BIOS，进入高级配置页面（Advanced Setup Page）,找到Quick Boot项，设置为 Enabled.就会跳过自检 2.2000/xp的是用chkntfs /x后面加盘符,比如禁用d盘 chkntfs /x d: 你的计算机出现那些的意思是告诉你计算机正在对硬件进行第1/2/阶段的检测，共3个阶段。

SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二、三级结构。浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液，电极液选TRIS/甘氨酸。蛋白质带负电荷，因此一起向正极移动，其中氯离子最快，甘氨酸根离子最慢，蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大，超过蛋白，因此在后面形成低电导区，而电场强度与低电导区成反比，因而产生较高的电场强度，使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动，形成以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩成一中间层。

SDS-PAGE 电泳过程中常见问题以及解决方法 2 Q:SDS-PAGE 电泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS(

使样品充分变性，伸展，与SDS充分结合，成为雪茄状，这样分子量才能用marker计算，因为marker都是充分变性的。

聚丙烯酰胺的作用：丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体，其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否，与促凝剂及环境密切相关;制胶缓冲液：浓缩胶选择pH6.7，分离胶选择pH8.9，选择tris-HCL系统，具体作用后面介绍;TEMED与AP：促凝作用，加速聚丙烯酰胺的凝固;十二烷基硫酸钠(SDS)：阳离子去污剂，作用有四：去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠。生物帮上面有这方面的知识的， http://www.bio1000.com/reseach/zoology/ 动物学等科研进展,动物学研究,昆虫学,鱼类学,鸟类学,哺乳动物。

SDS是一种阴离子去垢剂，能让寡聚体蛋白中不同的亚基分离，而不能使二硫键打开。如果想让二硫键打开，必须要用2-巯基乙醇或过氧酸来处理。（二楼的回答还是比较准确的）常规PAGE又称Native-PAGE，是在不改变蛋白质的活性的基础上做的电泳，即不加入任何变性剂。

就是在检测硬盘

缩水是正常的,看你的说法应该是用垂直平板的电泳槽,那么梳子应该很大的,所以胶孔应该够用的,两面的胶孔就放弃吧!!!因为两边的胶孔受影响比较大,比如封闭玻璃板的凡士林等都会使胶面不均一的,另外就是气泡,但是我估计你应该知道排除气泡的

药品配制有问题，或者是药品失效了，重新配药品

sds分离靠的是在电场中蛋白质分子跟page的结合后的分子量大小从而在凝胶中跑的速度不同而分开的，分子筛是根据不同分子量的分子大小不同，从而进行蛋白质分离，达到测量分子量的目的的

SDS电泳就是指加了SDS的PAGE电泳

作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小,形状和电荷.而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白.这个技术首先是1967年由shapiro建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小,电荷因素可以忽视.SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二.三级结构.而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使绊胱氨酸残基间的二硫键断裂.在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的蛋白量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异.SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统,于连续缓冲系统相比,能够有较高的分辨率.浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带.当样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液,电级液选TRIS/甘氨酸.电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子.蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中.电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层.

聚丙烯酰胺凝胶电泳

1，提取蛋白的时候要充分超声粉碎，然后高速离心。吸取上清的时候不要触到沉淀。污染不一定是rna和dna，还有可能是胶里面有杂质。2.遇热膨胀过度，你可以在电泳槽里面安放冰槽，电泳液预先降温，同时降低电泳时的电流。还有配琼脂也要用缓冲液，而不是水，不然不导电。接触不好也会引起条带变形

蛋白质性质包括：稳定性（Stability），活性（Activity），分子量（MW），疏水性（Hydrophobicity），等电点（pI），二硫键（Disulfide linkage）SDS-PAGE时，因为SDS可以断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二、三级结构。所以和蛋白质的稳定性，活性，疏水性，等电点都没关系。而2-ME是还原剂，能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂，所以和二硫键也没有关系。综上所述SDS-PAGE电泳技术是根据蛋白质的分子量不同来分离蛋白质的。

sds为十二烷基硫酸钠，可以蛋白质形成棒状分子，page聚丙烯酰胺凝胶形成棒状结构的蛋白质分子的电泳速度就只于分子量有关，可以对样品中的蛋白质进行定性分析和粗略的定量分析同理也可用于核算

evolve stage 2运行不了，一般就两种情况：一种，是提示缺失可执行文件如果是这个提示，要确认下你的电脑系统是不是32位系统，这游戏只支持64位系统的；如果你的电脑是64位的话，可以在你的steam库上右键evolve stage 2游戏-属性-本地下载-检查游戏缓存文件完整性；自动更新完毕后，重启下steam就可以了如果你是win10系统64位，游戏从steam下载下来后，点击开始，没有任何动静，名字旁边显示正在运行，但是程序没有打开，过了一会就什么都没有显示，就是关闭了游戏一样。再点击还是一样的情况可以在你的steam库上：右键evolve stage 2游戏-属性-本地文件中的浏览本地-打开进化的根目录-打开“bin64_SteamRetail”文件，找到进化游戏图标的文件并右键-选择属性-兼容性“以win7运行”，直接在这个根目录下开始游戏另外，直连游戏可能会很卡，建议挂个海豚加速器比较好

分类: 教育/科学 >> 科学技术 解析: 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由shapiro建立，他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，电荷因素可以忽视。 SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二。三级结构。而强还原剂如巯基乙醇，二硫苏糖醇能使绊胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白原有的蛋白量，这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统，于连续缓冲系统相比，能够有较高的分辨率。 浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液，电级液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后，HCL解离成氯离子，甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷，因此一起向正极移动，其中氯离子最快，甘氨酸根离子最慢，蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大，超过蛋白，因此在后面形成低电导区，而电场强度与低电导区成反比，因而产生较高的电场强度，使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动，形成以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩成一中间层。

影响带电化合物”电泳“迁移率的内在因素有三点，即带净电荷的多少、分子量的大小和分子的形状。SDS-蛋白质复合物具有均一的电荷密度，相同的荷质比。据计算，结合到蛋白质上的 SDS的分子数目和蛋白质分子的氨基酸残基的比例值一般为 0.5。另外根据流体力学的研究，SDS-蛋白质复合物具有扁平而紧密的椭圆形或棒状结构，棒的短轴是恒定的，在 1.8nm 的数量级，与蛋白质的种类无关，棒的长轴是变化的，而长轴的变化正比于蛋白质的分子量。这说明 SDS 和蛋白质结合所形成的 SDS-蛋白质复合物消除了由于天然蛋白质形状的不同而对电泳迁移率的影响。当蛋白分子量在 15 kDa～200 kDa 时，电泳迁移率与分子量的对数呈直线关系，符合方程式：lgMr=K-bRm，其中 Mr 是蛋白分子量，K 是常数，b 是斜率，Rm 是相对迁移率。在电泳条件一定时，b 和 K 均为常数。故在SDS-PAGE中，由于 SDS 和蛋白质的结合，消除了蛋白质所带净电荷的多少和分子形状不同对电泳迁移率的影响，使其电泳迁移率在外界条件固定的情况下，只取决于蛋白质分子量的大小一个因素，因而使我们能通过已知分子量的标准蛋白质分子建立的分子量与迁移率的线性关系求得未知蛋白质的分子量。上面是我copy来的，参考资料我也不清楚。

电泳是利用物质带电性质而在电场下泳动的特性从而对物质进行分离的技术。影响因素主要是物质的带电荷的多少，物质的分子量大小，物质的空间形态等。SDS-PAGE主要用于变性蛋白质的分离和鉴定，主要特点是蛋白经SDS处理后均匀带电荷并形成线性的结构，从而在聚丙烯酰胺胶中的泳动只与蛋白的分子量大小有关。

蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠（SDS），大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS－复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而消除了蛋白质原有的电荷差别，使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量，而与蛋白质所带的电荷无关，在一定条件下，蛋白质的分子量的对数与电泳迁移率间呈负相关。操作步骤1、凝胶制备：用两块电泳玻璃板制成垂直板槽（不能漏胶），垂直放置。将配制好的分离胶溶液倒入，滴加入无离子水，待凝胶聚集后，倒出无离子水，用吸水纸吸干，倒入浓缩胶，再插入梳子。2、上样：分别取样品若干ml于离心管中，按1/1～1/5比例加入5×样品缓冲液，再沸水浴中加热3～5min，取出待用。用微量注射器分别吸取不超过30μl不同浓度的标准蛋白样品和试验样品注入样品槽。点样结束后，调节电泳仪电流到10mA（2～3mA/em），保持电流稳定不变，当溴酚蓝迁移到离分离胶底1～2cm时，即可停止电泳。3、染色：电泳完毕后，取出凝胶板，浸入染色液中，在37℃温箱中保温过夜。倒掉染色液，24h后，即可看到清晰的蛋白质条带。

森林不应该是The Forest吗，你后面那个英文又是进化2，不太懂

http://www.linuxsir.org/bbs/showthread.php?s=&threadid=106940对于LINUX不是特别熟悉 希望这个连接能给楼主点提示 帮不到你我也没办法了呵呵

1. stage 工作区2. working tree 工作目录树（文件）3. index索引4. HEAD头部（可能指内容上面的部份）

发包

一、原理及目的（略）二、试剂1、30%丙烯酰胺贮存液：29g丙烯酰胺和1g N,N"-亚甲双丙烯酰胺溶于100ml热水中，验证其pH值不大于7.0。置棕色瓶中，4℃保存。2、1.5mol/L Tris（pH8.8）溶液3、10% SDS溶液4、10%过硫酸铵：新鲜配制5、TEMED溶液：4℃保存6、1.0 mol/L Tris（pH6.8）溶液7、2×样品溶解液：2%SDS，5%巯基乙醇，10%甘油，0.02%溴酚蓝，0.01mol/L Tris-HCl（pH8.0）缓冲液。8、5×Tris-甘氨酸电极缓冲液：每1000ml该溶液中，含15.1g Tris，94g甘氨酸和50ml 10%（W/V）SDS贮存液。9、固定液：冰乙酸:甲醇:水=1:2:710、考马斯亮蓝R染色液：每100ml甲醇、水、冰乙酸混合物（9:9:2）中，溶解0.25g考马斯亮蓝R，过滤除去未溶物。11、脱色液：甲醇:水:冰乙酸=9:9:2注：1、2、5、6、7由教师提供，其余由学生自己配制，其中8可在凝胶凝固的过程中配制，9、10、11在电泳时配制。三、操作步骤：1、准备步骤1）将凝胶板依次用水、SDS、水、无水乙醇、水洗涤干净，然后使其自然风干或烘干。2）试样格（梳子）临用前用无水乙醇擦拭，让其挥发至干。3）灭菌枪头、eppendorf管。2、制备凝胶1）安装玻璃板、板条，并将玻璃板固定在电泳槽中，以5%琼脂封底。2）配制10%的分离胶（20ml）：依次将8ml蒸馏水，6.7ml 30%丙烯酰胺贮存液，5ml 1.5mol/L Tris（pH8.8）溶液，0.2ml 10% SDS溶液，0.2ml 10%过硫酸铵，0.008mlTEMED混合，立即灌胶。3）迅速在两玻璃板间隙中灌注分离胶，直至剩余的板宽比梳子长度多1cm。小心在胶上覆盖一薄层正丁醇。4）在分离胶聚合的过程（约40分钟）中，配制5%的积层胶（8ml）：依次混合5.5ml蒸馏水，1.3ml 30%丙烯酰胺贮存液，1.0ml 1.0 mol/L Tris（pH6.8）溶液，0.08ml 10% SDS溶液，0.08ml 10%过硫酸铵，0.008TEMED。TEMED应在灌胶前才加入。5）分离胶聚合完全后，倒去正丁醇，用蒸馏水冲洗胶面数次，用滤纸吸干胶面上的残余水。6）灌注积层胶，立即插入干净的梳子，避免产生气泡。7）积层胶聚合完全后，小心拔出梳子，用移液器吸取电极缓冲液清洗加样孔数次，以除去未聚合的丙烯酰胺。8）在上下电泳槽中加入足够的电泳缓冲液。3、样品的制备在蛋白溶液中加入等体积的2×样品溶解液，使蛋白的终浓度为3-4mg/ml，混合液在沸水浴中加热3分钟，冷却后即可上样。4、上样用微量进样器上样，每加入一种样品，应在下槽中洗涤加样器数次，最后在空白加样孔中加入等体积的SDS样品溶解液。5、电泳装好冷凝水系统，打开电源，初始电压为100-120V，当染料进入分离胶（这段时间约为20min）后，将电压提高到200-220V，继续电泳直至染料到达离凝胶底部1cm处。6、后处理1）固定：从电泳装置上卸下玻璃板，用镊子小心撬开玻璃板，除去积层胶部分，将分离胶移入固定液（固定液的量至少为胶体积的5倍）中固定，直至染料由蓝绿色变为黄色。2）染色：除去固定液，加入染色液（用量同上），室温染色8小时或60℃染色2小时。3）脱色：回收染色液，将凝胶浸泡于脱色液中，直至背景脱至无色，其间更换脱色液3-4次。四、结果绘制蛋白图谱，并对其进行必要说明。五、注意事项N,N"-亚甲双丙烯酰胺为神经毒性物质，可经皮肤直接吸收，使用时应避免其直接接触皮肤，必要时应戴手套。但其凝固后就变成无毒物质。

电泳法分离蛋白质是根据蛋白质的什么原理：一般是通过生化方法吧蛋白提取出来，蛋白质带有电荷么，是将混合样品中的蛋白质，其原理是第一向基于蛋白质pi不同用等电聚焦，电泳时的正极与负极都会发生电解反应，向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。是根据蛋白质的电荷不同即酸碱性质不同分离蛋白质混合物的方法。1、电泳：在外电场的作用下，带点颗粒将向着与其电性相反的电极移动，这种现象称为电泳。电泳技术可用于氨基酸、肽、蛋白质和核苷酸等生物分子的分析分离和制备。区带电泳是由于在支持物上电泳蛋白质混合物被分离为若干区带。电泳前用缓冲液浸润薄膜或滤纸等支持物或用缓冲液直接配置成凝胶，将待分离的蛋白质样品加在它的一端或中央，支持物的两端与电极连接，通电电泳。电泳完毕，各个组分分布在不同的区域，用显色剂（蛋白质可用考马斯亮蓝或氨基黑等染色）显色后可以显示出各个组分。氨基酸混合物特别是寡聚核苷酸混合物一次电泳往往不能完全分开。这种情况可以将第一次电泳分开的斑点通过支持介质间的接触印迹转移到第二个支持介质上，旋转90°，进行第二次电泳。这种方法称为双向电泳。2、聚丙烯酰胺凝胶电泳：以聚丙烯酰胺凝胶为支持物，一般制成凝胶柱或凝胶板，凝胶是由相连的两部分组成（小的部分是浓缩胶，大的部分为分离胶），这两部分凝胶的浓度、缓冲液组分和离子强度、ph以及电场强度都是不同的，即不连续性。电泳时样品首先在不连续的两相间积聚浓缩而成很薄的起始区带，然后再进行电泳分离。电泳有三种物理效应：1、样品的浓度效应；2、凝胶对被分离分子的筛选效应；3、一般电泳分离的电荷效应。3、毛细管电泳：高效毛细管电泳、毛细管区带电泳、自由溶液毛细管电泳、毛细管电泳，可分离氨基酸、肽、蛋白质、dna片段和核酸以及多种小分子，也可用于手性化合物的分离。毛细管减少了由于热效应产生的许多问题，可以提高热散失，有助于消除由于热引起的扩散增加而造成的对流和区带变宽，因此管中不需要加入稳定介质即可进行自由流动电泳。电泳迁移引起溶液中荷电分子向相反电荷的电极移动，虽然被分析样品因电泳迁移而分离，然而电渗作用使溶液向负极流动，而且电渗电流很强，其速度一般比样品的电泳速率答，因此所有的正、负离子和中性分子都被推向负极。对荷正电分子来说，电泳迁移和电渗流效果是一致的，而且移动最快，最先达到负极。随着被分离的分子接近负极，它们都将通过紫外检测器并把信号传递给记录仪。所得结果是被分离组分的紫外吸收对时间的峰谱。4、等点聚焦（ief）分离蛋白质混合物是在具有ph梯度的介质（如浓蔗糖溶液）中进行。在外电场作用下各种蛋白质将移向并聚焦在等于其等电点的梯度处，并形成一个很窄的区带。ph梯度制作一般利用两性电解质，它是脂肪族多胺和多羧类的同系物，它们具有相近但不相同的解离常数和等电点。在外电场作用下，自然形成ph梯度。5、层析聚焦：根据蛋白质的等电点差异分离蛋白质混合物的柱层析方法。原理：当用特种缓冲液滴洗填充在柱中的特种多缓冲交换剂时，就会在层析柱中自上而下自动的建立起连续的ph梯度；同时加在柱上端的蛋白质样品也随多缓冲液的展开按各自的等电点聚焦在相应的ph区段。并在展开过程中随ph梯度下移，蛋白质混合物的各组分先后从柱中流出，达到分离纯化的目的。

聚丙烯酰胺凝胶电泳（英语：polyacrylamidegelelectrophoresis，简称page）作用：用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称acr)和交联剂n，n"一亚甲基双丙烯酰胺(简称bis)在催化剂过硫酸铵(ap)，n，n，n"，n"四甲基乙二胺(temed)作用下，聚合交联向成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带，如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质，蛋白质样品电泳后，就应只分离出一条区带。聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（native-page）及sds-聚丙烯酰胺凝胶（sds-page）；非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。sds-page仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。该技术最初由shapiro于1967年建立，他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂（sds即十二烷基硫酸钠）后，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小（可以忽略电荷因素）。sds是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键，并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物，使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷，掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此，各种蛋白质sds复合物在电泳时的迁移率，不再受原有电荷和分子形状的影响，只是棒长的函数。这种电泳方法称为sds聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称sds—page)。由于sdspage可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度，因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度，如果被鉴定的蛋白质样品很纯，只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质，那么sds—page后，就只出现一条蛋白质区带。sds—page可分为圆盘状和垂直板状、连续系统和不连续系统。本实验采用垂直板状不连续系统。所谓“不连续”是指电泳体系由两种或两种以上的缓冲液、ph和凝胶孔径等所组成。

sds-page判定蛋白质的纯度:若该蛋白质是单肽链蛋白质，则电泳得到的只有一条蛋白带（两条色带：一条为溴酚蓝，一条为蛋白带）；若得出多条电泳带，则应该用非sds－page进行电泳，得出单一蛋白带则为单一蛋白质sds-page判定蛋白质的分子量：定义：r＝de/dor为迁移率，de为蛋白质电泳迁移距离，do为溴酚蓝电泳迁移距离则lgm=a-brm为蛋白质分子量，a、b为常熟，a、b可由标准蛋白质（已知分子量的蛋白质）的迁移率算出。若蛋白质为单肽链蛋白质，则m为其分子量；若蛋白质为多肽链蛋白质，则其分子量为各m之和

因为电池蛋白质通过这个可以监测出

key stage 基本学程key stage 2 基本学程第二级一般指幼二

sds-page凝胶电泳原理是根据检体中蛋白质分子量大小的不同，使其在电泳胶中分离。SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇，二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白－SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量，这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。sds-page凝胶电泳作用浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选Tris/HCl缓冲液，电极液选Tris/甘氨酸。电泳开始后，HCl解离成氯离子，甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷，因此一起向正极移动，其中氯离子最快，甘氨酸根离子最慢，蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大，超过蛋白，因此在后面形成低电导区，而电场强度与低电导区成反比，因而产生较高的电场强度，使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动，形成一稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩成一中间层。

jblstage2604c好一些。因为jblstage2604c音效比先锋170好一些，先锋170容易有噪音，而且不能调大音量，如果调大音量会出现刺刺的声音，所以jblstage2604c好一些。

sds-page凝胶电泳原理是根据检体中蛋白质分子量大小的不同，使其在电泳胶中分离。SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇，二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白－SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量，这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。sds-page凝胶电泳作用浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选Tris/HCl缓冲液，电极液选Tris/甘氨酸。电泳开始后，HCl解离成氯离子，甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷，因此一起向正极移动，其中氯离子最快，甘氨酸根离子最慢，蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大，超过蛋白，因此在后面形成低电导区，而电场强度与低电导区成反比，因而产生较高的电场强度，使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动，形成一稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩成一中间层。

作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。在电场的作用下，带电粒子能在聚丙烯凝胶中迁移，其迁移速度与带电粒子的大小、构型和所带的电荷有关。十二烷基磺酸钠（SDS）能与蛋白质的结合，改变蛋白质原有的构象，使其变成近似于雪茄烟形的长椭圆棒，其短轴长度一样，而长轴与分子量大小成正比。SDS-PGAE简介原理：将蛋白质溶液与SDS（十二烷基硫酸钠）混合，SDS为界面活性剂会破坏蛋白质的二级结构使其变性，并包覆变性蛋白质，使其带有一致的负电荷（大约每两个氨基酸一个SDS）和一致的形状（长条形）。如果没有SDS使其负电荷一致，可能会使有相近分子量的蛋白质。分布于不同的位置，此种电泳法为原态胶体电泳（Native-PAGE）。进行电泳时，分子量较小的较容易落下，相反的分子量较大的则卡在起点附近。虽然较大的电压可以缩短实验的时间，却会得到较模糊的结果，因此实验长达数个小时。以上内容参考：百度百科——SDS-PGAE

简单的说。刷各个阶段的ECU所需要的改装内容不同1段，简单的轮毂轮胎，刹车，尾端排气，进气等2段，全段排气，更好性能的刹车等3段，K04涡轮，大中冷，油冷等

可以。不再受原有电荷和分子形状的影响，只是分子量的函数，这种电泳方法称为SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳，SDS-PAGE测定蛋白质分子量的基本原理和主要步骤原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。

您要这道其中的原理就理解了。凝胶过滤时小分子进入凝胶的孔隙，大分子则直接洗脱，所以大分子先出来。电泳是利用蛋白质带电荷受到电场力和凝胶阻滞的作用，大分子当然跑得慢了。这两种胶是完全不同的，虽然中文翻译都叫胶

c盘损坏了 在自己修复 赶紧换个硬盘吧

SDS是一种阴离子去垢剂，能让寡聚体蛋白中不同的亚基分离，而不能使二硫键打开。如果想让二硫键打开，必须要用2-巯基乙醇或过氧酸来处理。原理：1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体（以后简称单体）在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物，是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需要的原料是：丙烯酰胺，亚甲基双丙烯酰胺（双体，用作交联剂）o在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有：二甲氨基丙腈（DMAPN）；过硫酸铵，四甲基乙二胺；过硫酸铵或加核黄素后用紫外光（波长 253．7毫微米）引发聚合。扩展资料：PAGE在生化中为聚丙烯酰胺凝胶电泳，是用来分离分子量大小不一样的物质，主要是利用就是用凝胶的密度差来达到分离不物质的目的，聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺在加速剂。四甲基乙二胺和催化剂过硫酸铵（ammonium persulfate (NH4）2S2O8，简称AP）或核黄素的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶，以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳。参考资料来源：百度百科-page

实验原理SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapir0建立，其原理：聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N，N"一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS)，N，N，N"，N"四甲基乙二胺(TEMED)作用下，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带，如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质，蛋白质样品电泳后，就应只分离出一条区带。SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键，并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物，使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷，掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异

可能是你上次在使用计算机时停电或非法关机。系统自检，如果你认为没什么问题，可以按回车键中止自检，启动电脑，

第一页，共65页。一、什么是SDS？十二烷基硫酸钠（sodiumdodecylsulfate,SDS)是一种阴离子去污剂。它在水溶液中以单体（monomer）和分子团（micellae）第二页，共65页。SDS的作用破坏蛋白质分子之间以及其他物质分子之间的非共价键，使蛋白质变性而改变原有的构象，保证蛋白质分子与SDS充分结合而形成带负电荷第三页，共65页。二、SDS-PAGE的基本原理（一）蛋白质分子的解聚样品介质和聚丙烯酰胺中加入离子去污剂和强还原剂后，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于

"(D:) stage 2" 可以理解为“修复（D:) 阶段 2”。

fixing (D:) stage 2的意思是电脑D盘出现了故障，需要进行处理。出现Fixing(D:)Stage1有两种原因，一个是操作系统问题，另一个是硬盘损坏。操作系统出现问题还比较好处理，但如果是硬盘损坏了所要花费的修理费用就会比较高了。解决方法：1、如果修复速度很慢或者卡死说明软件的占用过高或者是电脑硬件的问题，可以进行开启快速启动或者超快速启动来进行跳过全面检查。开机的时候按下del键，就可以进入到bios界面。在bios界面找一找，看到stepup或者是什么开机高级选项，只要是这种类型的，就开启快速检查或者是超级快速检查。然后保存设置，重新启动在开解界面就会出现按下任意键跳过全面检查，就可以正常登陆。2、如果是硬盘出现了问题，那么先查看自己的电脑在不在保修期内，或许可以省下一大笔钱。如果没在保修期内，那也只能认命乖乖拿去售后店维修了。到店检查维修，到店之后就有检修人员帮你出谋划策。

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主要就是看有没有sds，sds的作用相当与把蛋白质包一层膜，从而屏蔽电子大小带来的作用，蛋白质的移动速度只与该蛋白大小有关。

SDS-PAGE电泳可用于分离蛋白质和核苷酸 ，这里综述了SDS-PAGE实验原理、试剂和器材、以及实验操作步骤。一. 实验原理：SDS-PAGE是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子 量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折叠结构，并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子 量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后，电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。二. 试剂和器材：试剂：1. 5x样品缓冲液(10ml)：0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8)，5ml 50%甘油，2ml 10%的SDS，0.5ml巯基乙醇，1ml 1%溴酚蓝，0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周，或在-20℃保存数月。2. 凝胶贮液：在通风橱中，称取丙烯酰胺30g，甲叉双丙烯酰胺0.8g，加重蒸水溶解后，定容到100ml。过滤后置棕色瓶中，4℃保存，一般可放置1个月。3. pH8.9分离胶缓冲液： Tris 36.3g ，加1mol/L HCl 48ml，加重蒸水80ml使其溶解，调pH8.9，定容至100ml， 4℃保存。4. pH6.7浓缩胶缓冲液： Tris 5.98g ，加1mol/L HCl 48ml，加重蒸水80ml使其溶解，调pH6.7，定容至100ml， 4℃保存。5. TEMED(四乙基乙二胺)原液6.10%过硫酸铵(用重蒸水新鲜配制)7. pH8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液：称取Tris 6.0g，甘氨酸28.8g，加蒸馏水约900ml，调pH8.3后，用蒸馏水定容至1000ml。置4℃保存，临用前稀释10倍。8. 考马斯亮蓝G250染色液：称100mg考马斯亮蓝G250，溶于200ml蒸馏水中，慢慢加入7.5ml 70%的过氯酸，最后补足水到250ml，搅拌1小时，小孔滤纸过滤。器材：电泳仪 ，电泳槽，水浴锅，摇床。三. 实验操作;1. 样品制备将蛋白质样品与5X样品缓冲液(20ul+5ul)在一个eppendorf 管中混合。放入100℃加热5-10min，取上清点样。2. 分离胶及浓缩胶的制备① 将玻璃板、样品梳、Spacer用洗涤剂洗净，用ddH2O冲洗数次，再用乙醇擦拭，晾干;② 将两块洗净的玻璃板之间加入Spacer，按照Bio-Rad Mini Ⅱ/Ⅲ说明书提示装好玻璃板;③ 按如下体积配制10%分离胶8.0 ml，混匀：ddH2O 3.0 ml;1.0 mol/LTris-HCl pH=8.8 2.1 ml;30% Acr-Bis 2.8 ml;10% SDS 80 ul;10%AP 56 ul;TEMED 6 ul。④ 向玻璃板间灌制分离胶，立即覆一层重蒸水，大约20 min后胶即可聚合;⑤ 按如下体积配制6%浓缩胶3.0 ml，混匀：ddH2O 1.0 mol/LTris-HClpH=6.8 30% Acr-Bis;2.0 ml 400 ul 600 ul;10% SDS 10% AP TEMED;36ul 24ul 4ul。⑥ 将上层重蒸水倾去，滤纸吸干，灌制浓缩胶，插入样品梳;⑦ 装好电泳系统，加入电极缓冲液，上样20 u03bcl;⑧ 稳压200V，溴酚蓝刚跑出分离胶时，停止电泳，约需45 min～1hr.⑨ 卸下胶板，剥离胶放入染色液中，室温染色1～2 hr;加入脱色液，置于80 rpm脱色摇床上,每20 min更换一次脱色液(10 ml 冰乙酸;45 ml乙醇;45 ml蒸馏水)至完全脱净。聚丙烯酰胺凝胶具有分子筛效应，可根据蛋白亚基分子量不同将分离蛋白，SDS-PAGE电泳凝胶好坏直接关系到电泳能否成成，一般浓缩胶和分离胶的pH分别是6.7和8.9.

onstage3好。onstage3的低音扬声器最大功率为700瓦，采用高级材料制造可以提供更加清晰和精确的音质表现，而jbonstage2最大功率只有300瓦，则采用普通材料制造，音质表现相对较为普通。

主板电池拔了再装上去！

在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基磺酸钠）作为载体，在电泳时，蛋白质分子的迁移速度则主要取决于蛋白质分子大小，一种区分不同分子量蛋白的电泳。