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EMSA的原理是什么

2023-08-24 16:45:28
TAG: 原理 sa ms msa
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西柚不是西游

一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。

DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测 如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。

在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。

竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异), 和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

emsa实验原理

扩展资料

由于很多研究的TF不具有结合的特异性,所以即使发现TF和被研究的寡核苷酸探针结合,也不表示在体内该TF不能和其它寡核苷酸结合,运用一些生物信息学 软件,可以模拟表示TF与基因启动子区寡核苷酸结合的具体情况,发现TF可以和启动子区PUTATIVE 结合。

同时,由于EMSA在体外不能模 拟细胞内众多生物分子的相互作用,比如,某一TF在细胞内由于受到其它TF的协同或者修饰后才能与寡核苷酸结合的话,那么在体外是不能重现这一结果的。

参考资料来源:百度百科-EMSA (凝胶迁移)

北有云溪

其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合,电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢,即表现为相对滞后。该方法可用于检测DNA结合蛋白、RNA结合蛋白,并可通过加入特异性的抗体(supershift)来检测特定的蛋白质,并可进行未知蛋白的鉴定。生物体内DNA转录成RNA是基因表达的关键过程,基因表达调控主要发生在转录水平。近年来,基因分子生物学研究领域的趋势之一是逐渐从基因结构和功能分析转到基因顺式作用元件和转录因子及其转录调控机理上,对基因转录调控的研究将是今后相当长一段时期内功能基因组学研究的热点之一。

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凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异),和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

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emsa具体是什么样的生物学实验

EMSA全称是Electrophoretic Mobility Shift Assay,中文叫凝胶迁移实验或电泳迁移率实验,它是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术,可用于定性和定量分析。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合物在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理。首先让蛋白质与末端标记的核酸探针结合,然后在跑PAGE胶,结合了蛋白质的复合物比未结合蛋白质的探针电泳的速度要慢,这样,从PAGE胶的电泳结果就可以判断,该蛋白是否和特定序列结合或者该序列是否和蛋白结合。
2023-08-17 23:00:491

EMSA,谁做过?原理是什么啊?

没做过
2023-08-17 23:00:592

电泳迁移率变动(EMSA)实验原理

凝胶阻滞或电泳迁移率变动实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA) (来自《养鲤鱼》微信公众号) 1、为什么看不到迁移带? 1)蛋白样本提取质量不高,蛋白降解或者提取量不足。 2)样本中没有可以与探针结合的蛋白。 3)探针与蛋白无特异性的相互作用。 4)转膜效率低,蛋白或者探针未转移到膜上。 5)曝光或者成像时间过短。 在Super-Shift EMSA测定中看不到Super-Shift DNA/蛋白复合物带还可能有以下原因: 6)抗体没有工作。不是所有的抗体都可以用于Super-Shift EMSA,只有对非变性蛋白的表面抗原决定簇起反应的抗体才能够用于Super-Shift EMSA。 7)测定的活化的DNA/蛋白复合物中没有希望检测的构成成分存在。此时既看不到Super-Shift的带,也看不到DNA/蛋白复合物的量的减少。 8)使用的抗体过度稀释。一般10-20ul的反应液需要使用0.5-1ul原倍的抗体。 9)多抗与DNA/蛋白复合物形成大的聚集物而不进胶。在这种情况下,虽然看不到Super-Shift的带,但应当可以看到DAN/蛋白复合物的电泳带明显减少。 2、为什么实验背景高? 1)曝光或者成像时间过长。 2)封闭时间不足或者效率不高。 3)洗涤效果不佳 4)实验过程中膜没有一直处于湿润状态。 3、EMSA测定需要多少量的蛋白与标记的探针? 对每一个特定的结合蛋白和探针,所用的纯化蛋白,部分纯化蛋白,粗制核抽提液需作优化:一般所用纯化蛋白的量在20-2000ng间,可将蛋白:DNA的等摩尔比调整为蛋白的摩尔数是DNA的5倍;用粗制核抽提液,需要2-10ug蛋白形成特异的复合物。 部分纯化蛋白与粗制核抽提液应保存在-80℃、探针应保存在-20℃以防止降解。 无论探针或是结合蛋白都应避免多次冻融。 4、Poly(dI:dC),非特异性竞争DNA,特异性竞争DNA在EMSA测定中的作用? Poly(dI:dC)由肌苷和胞嘧啶组成。在EMSA反应中加入poly(dI:dC),可抑制粗制核抽提液中转录调节因子与标记探针的非特异结合。结合溶液中的poly(dI:dC)的用量需在正式实验前进行优化,一般用量大约在0.05mg/ml左右。当用纯化的蛋白作凝胶迁移反应时,不必一定加入poly(dI:dC),如加入,则普通反应中所用终浓度不超过50-100ng。对核抽提液,每2-3ug核抽提液用1 ug poly(dI:dC)。 为确定所形成的复合物的特异性,在含或不含增量的特异竞争DNA或非特异的竞争DNA时,作结合反应的竞争实验。一般,特异竞争探针是非标记的DNA,其序列与标记探针相同,故能与标记探针竞争与结合蛋白的反应。非特异竞争探针的长度组成和DNA探针相同,但序列不同。如果结合蛋白与标记探针的结合被特异竞争探针抑制,而不受非特异探针的影响表明靶结合蛋白的存在。特异与非特异性竞争DNA的用量也需优化或滴定,但竞争DNA通常是标记的探针用量的30-100倍(w/w)。 5、用什么凝胶条件将蛋白质/探针复合物和游离的探针分离开? 将结合蛋白或粗制核抽提液和目的探针结合,蛋白/探针复合物和游离探针可在非变性聚丙烯酰胺凝胶中经电泳分离。聚丙烯酰胺的浓度一般为6%,在特定条件下可用高或低的浓度。也可将TGE缓冲液(12.5mM Tris,pH8.3,95mM 甘氨酸,0.5mM EDTA)用于不稳定的蛋白/DNA复合物。在4℃进行结合和电泳实验以阻止不稳定复合物和探针的解离。 当带型不紧密出现拖尾时,表明复合物存在解离。凝胶必需完全聚合,以避免带型拖尾。如复合物不进入凝胶则表明所用的蛋白或探针过量,或盐的浓度过量不适用于这一反应。在含抽提液的带中不含游离探针或复合物,但只含探针的带中有探针表明抽提物有核酸或磷酸酶污染,应在抽提液中和结合反应中加入相应的抑制剂。
2023-08-17 23:01:071

转录因子与蛋白质怎么验证结合

转录因子和蛋白质结合的情况可以通过多种实验来验证。以下是常用的几种实验方法:1. Electrophoretic mobility shift assay (EMSA):通过电泳迁移实验可以观察到转录因子与DNA结合后,复合物的迁移速度会变慢。而加入竞争性DNA片段或者抗体等会破坏该结合,从而使复合物不稳定,以致迁移速度回到原来的状态。2. Chromatin immunoprecipitation (ChIP) assay:通过在细胞内部免疫沉淀转录因子及其结合到DNA上的小段染色质并清洗后,进一步检测其结合到靶基因上(序列分析)或者使用引物鉴定附着区域是否被转录因子组件包含。3. Yeast two-hybrid assay:此实验利用了酵母细胞中两个不同功能区蛋白(例如AD和BD)构建相互作用模型。将编码转录因子和其鉴定出的结合蛋白浸入到不同功能区的酵母中进行配对,如果有关联,则证明它们可以在活细胞中相互作用。这些实验都可以可靠地验证蛋白质与转录因子之间的结合关系。在实验室操作过程中,需要根据具体情况选择合适的实验方法,同时保证实验条件的严谨性和准确性。
2023-08-17 23:01:152

emsa凝胶迁移实验蛋白用量是多少?

在EMSA实验中,根据目的不同,所需使用的蛋白质量也会有所变化。通常情况下,蛋白的使用量为1-10微克之间。但是需要具体根据实验需要进行调整。EMSA凝胶迁移实验用于研究蛋白与核酸结合的实验技术。该实验以聚丙烯酰胺凝胶电泳为基础,利用电泳的原理来检测蛋白与DNA或RNA分子的配对情况。emsa实验蛋白用量1、蛋白用量的确定EMSA实验中,蛋白的使用量应该通过实验计算、考虑样品量和标准曲线绘制等操作来确定2、样品准备首先从生物样品中提取目标蛋白,并用SDS-PAGE对蛋白进行定量和纯化。通常情况下,可以将纯化后的蛋白样品以50-100微克/微升的浓度储存,并适当稀释用于实验分析。3、滴定法测定蛋白浓度滴定法常用于测定蛋白质的浓度,在EMSA实验的蛋白用量计算中也有重要作用。首先,需要准备一定浓度的荧光素化合物(如BCA),然后将标准蛋白和待定蛋白分别用不同的浓度稀释,添加适量的荧光素试剂,并根据颜色变化来测定样品蛋白质的浓度。4、选择适当的蛋白量经过滴定法测定蛋白质浓度之后,可以选择适当的蛋白量进行实验。在实验中,蛋白质的使用量通常在1-10微克之间。如果使用的蛋白过多,可能会影响实验结果,使得最终的检测信号过强,掩盖低浓度样品的信号。而使用的蛋白过少,则很难观察到目标蛋白和DNA或RNA结合的迁移带。5、实验过程中的注意事项在EMSA实验过程中,还需要注意一些重要的步骤和原则,以确保实验结果的可靠性和准确性。如样品预处理、电泳缓冲液的选择和pH值的调节等。此外,为了避免扰动实验结果,还需要注意实验条件的控制,如温度、湿度、时间和光照等因素。EMSA凝胶迁移实验中,蛋白的使用量通常在1-10微克之间,但需要具体考虑实验需求、样品量等情况进行调整。在实验过程中,还需要注意一些重要的步骤和原则,以确保实验结果的可靠性和准确性。
2023-08-17 23:01:221

EMSA实验步骤

EMSA实验实验背景高主要原因1)曝光或者成像时间过长。2)封闭时间不足或者效率不高。3)洗涤效果不佳。4)实验过程中膜没有一直处于湿润状态。使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三种波长四款紫外交联仪,主要包括VL-1000A系列紫外交联仪(365nm)、VL-1000B系列紫外交联仪(302nm)、VL-1000C系列紫外交联仪(254nm)、VL-3000系列紫外交联仪(三种波长)满足不同的科研需求。
2023-08-17 23:01:371

emsa凝胶迁移实验蛋白在胶孔滞留为什么?

EMSA 凝胶迁移实验检测的蛋白与其靶分子(通常是DNA或RNA)结合后形成的复合物在凝胶上出现了迁移减缓或者移动位置发生改变。一、蛋白在胶孔中滞留,可能是由于以下几个主要原因:1、胶溶液中存在高浓度的离子:高浓度的离子可以干扰蛋白与DNA或RNA的相互作用,从而影响迁移结果。2、蛋白与DNA或RNA的比例不恰当:如果加入的蛋白太多,会出现蛋白与DNA或RNA的比例失衡,导致蛋白在胶孔中滞留。3、组装复合物时间过长:如果组装复合物的时间过长,会导致复合物形成过程不完全或者不稳定,这也会导致蛋白在胶孔中滞留。4、蛋白稳定性不佳:如果蛋白质无法在凝胶电泳过程中保持稳定性,也会导致其在胶孔中滞留。蛋白质胶孔滞留问题的解决方法是:1、减少离子浓度2、调整蛋白与DNA或RNA的比例3、适当缩短组装复合物的时间,并检查蛋白的稳定性。4、在加载样品时,应尽量避免将蛋白团块直接加入凝胶孔中,而应该将其预先均匀混合。如果以上方法仍然不能解决问题,可能需要重新优化实验条件。
2023-08-17 23:01:441

EMSA实验为何需要设置许多组对照实验?目的何在?

每个对照组的目的:1. 看光有探针,没有其他成分时,探针的位置,应该位于最下方。不然说明探针里面有杂质,影响电泳2. 这个是看蛋白和探针的结合,是实验目的3. 看探针结合的特异性。如果冷探针可以竞争结合,阻碍了标记的探针,说明2中的结合是特异的4. 目的和3相同。突变的冷探针应该对2的结果没有影响5. 也是判断特异性,这次是看蛋白的特异性,和抗体结合后,就会有super-shift。如果没有,说明是其他的蛋白结合。
2023-08-17 23:02:071

如何做好nf-κb实验,心里路程

1.EMSA中一般都是用P标记的探针,具有放射性,要是用生物素标记的话,放射性就小了,但是花的钱就多了。这个实验要是样本不多的话,大约花费4000左右吧,最重要的是放射性的问题,必须有磷屏,否则没法做。2.首先说应该用磷酸化的P65抗体,一般都用santa cruz公司的。并且有分装的,420块钱100μl,你要是做得少的话可以选择分装的抗体。3.还有就是免疫组化也是可以的。还有一种更好的方法就是promega的双荧光素酶报告系统,采用海肾和萤火虫两种荧光素酶,一种报告目的基因,一种报告内参,很好的方法,但是很贵。总体来说,做EMSA和双荧光素酶是最好的方法,算是定量,但是EMSA有放射性,双荧光素酶比较贵。western和免疫组化只能用来半定量,但是做的人比较多,也能发高水平的杂志,相对来说比较简单,也省钱。
2023-08-17 23:02:151

生物标记emsa中可能出现探针生物素丢失吗

生物标记emsa中可能出现探针生物素丢失  EMSA结合反应:(1) 如下设置EMSA结合反应阴性对照反应:Nuclease-Free Water 7微升EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) 2微升细胞核蛋白或纯化的转录因子 0微升标记好的探针 1微升总体积 10微升样品反应:Nuclease-Free Water 5微升EMSA/Gel-Shift结合...  BAS-ELISA是在常规ELISA原理的基础上,结合生物素(B)与亲和素(A)间的高度放大作用,而建立的一种检测系统。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达到检测未知抗原(或抗体)分子的目的。
2023-08-17 23:02:221

EMSA实验的几点困惑求助

EMSA结合反应:(1) 如下设置EMSA结合反应阴性对照反应:Nuclease-Free Water 7微升EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) 2微升细胞核蛋白或纯化的转录因子 0微升标记好的探针 1微升总体积 10微升样品反应:Nuclease-Free Water 5微升EMSA/Gel-Shift结合
2023-08-17 23:02:302

急求:关于EMSA实验中纯蛋白溶剂的问题!

1. 避免缓冲液中有高浓度的电子供体基团,比如:NH4,甘氨酸,精氨酸,Tris,等等; 2. 各种缓冲液中不能有强螯合剂,如EDTA,EGTA,等等; 3. 各种缓冲液里不能有高浓度的强还原剂,,比如DTT,防止二价Ni被还原; 4. 不能含离子型的去垢剂,比如SDS,防止Ni流失; -1mM的PMSF,防止目的5. 在破碎细胞的时候建议加入蛋白酶抑制剂,比如0.1 蛋白被降解; 6. 缓冲液里可以加入甘油,防止蛋白之间由于疏水相互作用而发生聚集沉淀,甘油浓度最高可达50%(v/v) 7. 应避免含碳酸氢钠,柠檬酸等物质; 8. 缓冲液里NaCl的浓度应在300mM到2M之间; 9. 可加入变性剂促溶,盐酸胍(最高可6M),尿素(最高可8M) 10.可加入非离子型去垢剂,如Triton,Tween,NP40等,最高2%,可以减少背景蛋白污染和去除核酸污染组氨酸标签蛋白的纯化
2023-08-17 23:02:401

转录因子 预测后怎么做实验让后用荧光素酶实验及emsa,chip技术去

那这几种技术要同时用吗?ChiP与EMSA的区别是什么呢?
2023-08-17 23:02:492

急,麻烦翻译并且名词解释

多个核型多角体病毒 标记救援 反密码子摆动假说 棉铃虫核型多角体 代谢质粒 病毒附着蛋白 广泛宿主范围载体 实时PCR EMSA
2023-08-17 23:02:572

实验:EMSA 样品滞留点样孔问题

不会是loading buffer 出问题沉淀堵孔了吧一般不会的哦。。。。我没有做过,,猜测猜测……
2023-08-17 23:03:211

为什么德国爱慕莎EMSA的保温壶很多使用玻璃内胆,和不锈钢内胆比有什么区别么?

欧洲主流的保温壶都是用玻璃内胆的,玻璃内胆和市场中低端的玻璃内胆有以下区别 1、玻璃不能含重金属。 2、玻璃镀层须为纯银,加工不能使用石棉等危险物质。 3、 玻璃胆为人工制造,成本和耐用性大大提高。 4、人工制造的玻璃胆在内壁表层有许多不规则纹路和毛细微孔,饮品入内可以形成如紫砂壶相似原理的缓释氧化和保温的作用,因此人们喜欢直接用玻璃保温壶盛放咖啡和茶类饮品,而不是单纯的热水。 5、容量基本为1升至1.5升,设计原理是考虑到正常人3-5小时的饮料容量。避免‘老水"。 6、人工内胆对水中的重金属等杂质的吸附能力比不锈钢和机器玻璃胆有更好的表现,而且由于玻璃结晶自然形成,毛细孔弧度天然,更加容易清洗。 7、玻璃内胆无法和不锈钢内胆的强度相提并论,一般用于办公和居家使用。不锈钢内胆适合高强度和户外场合使用。 8、不锈钢内胆必须使用优质不锈钢,否则可能存在重金属或锈蚀的风险。
2023-08-17 23:03:311

带gst标签的融合蛋白可以用来做emsa吗

首先,你需要确定你的目的蛋白正确融合上了GST标签,建议先用anti-GST抗体对lysis上清做个western。当然如果你和你同学用的是同一个质粒的话,那么这一步就不必了。若标签没有问题,你在Flow Though里又可以在目标分子量大小处检到蛋白的话,那么出现这种情况只可能是glutathione、柱子以及buffer的问题。关注你所使用的GSH的保存条件、状态以确保没有被氧化;换一批Glutathione Sepharose 填料或用你同学用过的柱子试试;视情况对binding 的PH、盐浓度、DTT浓度做个优化 ,调整washing 及elution buffer glutathione 浓度。必要时甚至可以考虑更换缓冲体系。没有见到你的protocol所以不好更具体的说,但是需要强调的一点是,不要完全依赖protocol。不同的蛋白个性差异很大,同一个protocol做相同类型的不同的蛋白可能会得到完全不同的结果,因此很多时候对各个影响因素做若干水平的正交实验来确定一个符合实际需要的条件 是往往是必须的。
2023-08-17 23:03:381

emsa中的poly dI-dC多少钱?可否用其他代替

poly(dI:dC)(dI:dC),非特异性竞争DNA,特异性竞争DNA的功能是什么? 它由肌苷和胞嘧啶组成。由于其特定的结构,可抑制蛋白对标记探针的非特异结合,避免假复合物。 在凝胶迁移反应中加入poly(dI:dC)(dI:dC),可抑制粗制核抽提液中其它DNA结合蛋白结合,比如转录调节因子的非特异结合。当用纯化的蛋白作凝胶迁移反应时,不必一定加入poly(dI:dC)(dI:dC),如加入,则普通反应中所用终浓度不超过50-100ng。对核抽提液,每2-3ug核抽提液用1 ug poly(dI:dC)(dI:dC)。为确定所形成的复合物的特异性,在含或不含增量的非放射性的特异竞争DNA或非特异的竞争DNA时,作结合反应的竞争实验。一般,非放射性的特异DNA是非标记的DNA探针,非特异的竞争DNA ,长度组成和DNA探针相同,序列不同。用非放射性的特异DNA能竞争掉,而用非特异的竞争DNA不能竞争掉的复合物,表明目的蛋白和同位素标记探针的特异结合。非特异结合能用特异DNA和非特异的竞争DNA竞争掉。结合溶液中的poly(dI:dC)(dI:dC)的量需作优化,但一般用0.05mg/ml。非放射性的(特异或非特异)的竞争DNA的用量也需优化或滴定,但竞争DNA通常是同位素标记的探针的10-1000倍(w/w)。其他类型的竞争DNA如小牛胸腺DNA不能用...poly(dI:dC)(dI:dC),非特异性竞争DNA,特异性竞争DNA的功能是什么? 它由肌苷和胞嘧啶组成。由于其特定的结构,可抑制蛋白对标记探针的非特异结合,避免假复合物。 在凝胶迁移反应中加入poly(dI:dC)(dI:dC),可抑制粗制核抽提液中其它DNA结合蛋白结合,比如转录调节因子的非特异结合。当用纯化的蛋白作凝胶迁移反应时,不必一定加入poly(dI:dC)(dI:dC),如加入,则普通反应中所用终浓度不超过50-100ng。对核抽提液,每2-3ug核抽提液用1 ug poly(dI:dC)(dI:dC)。为确定所形成的复合物的特异性,在含或不含增量的非放射性的特异竞争DNA或非特异的竞争DNA时,作结合反应的竞争实验。一般,非放射性的特异DNA是非标记的DNA探针,非特异的竞争DNA ,长度组成和DNA探针相同,序列不同。用非放射性的特异DNA能竞争掉,而用非特异的竞争DNA不能竞争掉的复合物,表明目的蛋白和同位素标记探针的特异结合。非特异结合能用特异DNA和非特异的竞争DNA竞争掉。结合溶液中的poly(dI:dC)(dI:dC)的量需作优化,但一般用0.05mg/ml。非放射性的(特异或非特异)的竞争DNA的用量也需优化或滴定,但竞争DNA通常是同位素标记的探针的10-1000倍(w/w)。其他类型的竞争DNA如小牛胸腺DNA不能用于凝胶迁移反应,它们会带有目的蛋白的结合位点。
2023-08-17 23:03:461

EMSA的产品

一.Enjoyhot&cold冷暖相宜容器产品特有技术:EMSA高规格的多层晶钻隔热瓶胆 2层优质耐热玻璃/EDS-layers技术,全人工内胆制造。内胆内壁充分的极微小气穴,形成犹如紫砂原理的缓释效果,完美保持饮品原味2层纯银镀层,产生有效的热反射,安全无污染风险1层高真空,高效隔热一体成型 二.Enjoymobilelife怡享旅程器皿系列特有技术:专利的u201ePowerLoc“-Closure:单手按压式杯盖全拆卸清洁设计100%防漏高真空保温高标准选材工艺,全面符合欧盟儿童食品接触标准三.Freshnessguaranteed&organized易鲜生活储藏收纳系列特有技术:1.欧盟婴童食品接触安全材料工艺通过欧盟DINEN14350-2EU的严格要求,成为市场目前唯一通过此要求的食品保鲜容器。2.无缝一体成型密封系统l优势1:高密封压力,真正实现100%防漏。n大多数食物保存时间更长*.nEMSA独有的一体成型密封圈比普通双孔硅胶圈密封压力更大n蓝色胶圈与透明盒盖一体成型,不会剥落。l优势2:无缝,无细菌滋生空间n密封圈与盒体一体成型n加宽的密封设计,安全,方便清洗 n无缝,无细菌滋生的死角,100%无异味渗出l优势3:实用的细节设计,通过专业餐饮行业使用HACCP认证四.‘Prepare&servefreshness"易鲜生活餐厨工具特有技术l‘Turbo"加速,转速提高40%以上l‘Spacesaving"设计,节省空间70%l优良的选材和加工工艺,全面符合欧盟儿童食品安全标准l‘Allin1"整合设计,提供全面的餐厨解决方案五.‘Plants/flowerspresented&cared"多彩四季园艺养护特有技术l‘AQUA-COMFORT"自动供水技术l‘360spray"超细喷雾工艺l完整的色系搭配设计六.Esteras爱斯特拉户外园艺特有技术l‘AQUA-COMFORT"自动供水技术l超轻光纤喷涂技术lFreecare便捷养护设计lUVfree10年抗紫外工艺
2023-08-17 23:03:541

RSA中pkcs1的填充方法具体是什么?

简单点说pkcs1中的填充就是【00 01+若干ff+00+明文数据】总长度为模长,例如rsa1024为128字节。还是实际搞个rsa1024例子吧 00 01 FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF FF 00 30 21 30 09 06 05 2B 0E 03 02 1A 05 00 04 14 EC A2 4D 06 CE 34 6A A8 4E E5 61 E2 D4 4A D9 9F A4 0A 47 34最后的为实际数据30 21 30 09 06 05 2B 0E 03 02 1A 05 00 04 14 EC A2 4D 06 CE 34 6A A8 4E E5 61 E2 D4 4A D9 9F A4 0A 47 34
2023-08-17 23:04:103

EMSA的原理是什么

一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测 如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异), 和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。扩展资料由于很多研究的TF不具有结合的特异性,所以即使发现TF和被研究的寡核苷酸探针结合,也不表示在体内该TF不能和其它寡核苷酸结合,运用一些生物信息学 软件,可以模拟表示TF与基因启动子区寡核苷酸结合的具体情况,发现TF可以和启动子区PUTATIVE 结合。同时,由于EMSA在体外不能模 拟细胞内众多生物分子的相互作用,比如,某一TF在细胞内由于受到其它TF的协同或者修饰后才能与寡核苷酸结合的话,那么在体外是不能重现这一结果的。参考资料来源:百度百科-EMSA (凝胶迁移)
2023-08-17 23:04:191

EMSA的原理是什么

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异),和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。
2023-08-17 23:04:363

大牛帮帮忙:EMSA实验探针如何设计啊?

凝胶迁移实验1)什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验?凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异),和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。2)作这样的实验需要什么试剂?凝胶迁移实验需要的结合蛋白,可来源于纯化或部分纯化的蛋白,或粗的核和胞质抽提液。还必须制备同位素标记的DNA或RNA。一般,DNA核苷酸探针用g-32P和T4多核苷酸激酶来作末端标记,同位素标记的RNA用噬菌体RNA聚合酶和同位素标记的核苷酸在体外合成。Promega公司的Riboprobe?/sup系统(a,b)(目录号P1420,P1430,P1440,P1450,P1460)可用于同位素标记的RNA的体外合成,DNA5`末端标记系统(目录号U2010)用于制备DNA探针,结合反应所需的组分有:含盐的溶液(氯化镁,氯化钠,或氯化钾)、缓冲体系(Tris-HCl或HEPES)、还原剂(DTT)、甘油、非特异的竞争DNA(poly(dI:dC)?dI:dC),也可能含非离子去污剂。在结合蛋白和同位素标记的探针作用后,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物,随后将凝胶干燥并放射自显影,或用PhosphorImage?/sup分析。3)凝胶迁移实验系统提供了什么试剂?Promega公司提供一种凝胶迁移实验系统检测DNA结合蛋白,系统可作为这类实验的 一种正对照。系统包括目的寡核苷酸,对照DNA结合蛋白,结合缓冲液,用于寡核苷酸探针末端标记所需的试剂。Core 系统(目录号E3050)包括含重组AP2蛋白(AP2抽提液)的大肠杆菌抽提液和AP2的同源寡核苷酸。AP2抽提液是从表达AP2蛋白的大肠杆菌中提取的。另外,Core系统还含SP1同源寡核苷酸,凝胶迁移结合缓冲液(5′),和能作20次对照实验的HeLa核抽提液。Complete系统(目录号E3300)含另外5个双链寡核苷酸,分别是AP1、OCT1、CREB,、NF-kB、 TFIID结合位点的同源序列。这些寡核苷酸可以在末端标记后用作特异性探针,或在竞争实验中用作非特异性探针。参考凝胶迁移实验技术手册TB110获取更多的资料。4)成功进行凝胶迁移实验,需要优化哪些因素?凝胶迁移实验在理论上很简单也很快速,但要成功地进行凝胶迁移实验,需要优化一些参数,这主要受结合蛋白的来源和探针结合位点特点的影响。以下是需要优化的因素:抽提液的制备(核酸酶和磷酸酶污染会使探针降解),结合蛋白的浓度,探针的浓度,非特异性探针的浓度,缓冲液的配方和pH, 聚丙烯凝胶电泳的特点和电泳条件,保温时间和温度,载体蛋白,是否有辅助因子(比如锌,或镉等金属离子,或激素)。总之,反应总体积应最小(20ul)。为满足一般要求,结合缓冲液含4%甘油,1mMMgCl2, 0.5mMEDTA, 0.5mMDTT, 50mMNaCl, 10mMTris-HCl(pH7.5), 0.05mg/ml poly(dI:dC)?dI:dC,或10mMHEPES(pH7.9), 50mMKCl, 1mMDTT, 1mMEDTA, 10%甘油,0.05mg/ml poly(dI:dC)?dI:dC可作为优化实验的起始。参考凝胶迁移实验技术手册TB110获取更多的资料。5)提供了哪些同源的多核苷酸引物,这些引物的序列来源是什么?有各类dsDNA探针,它们含各种转录调控因子的同源结合位点。下表列出了所能提供的探针,和这些引物序列的出处。转录调控因子探针---------------------------------------探针名 目录号 序列(上链) 序列的出处Sp1 E3231,E3232 5`-ATT CGA TCG GGG CGG GGC GCG-3` SV40启动子(1)AP1 E3201 E3202 5`-CGC TTG ATG AGT CAG CCG GAA-3` 胶原酶基因TRE(2)AP2 E3211 E3212 5`-GAT CGA ACT GAC CGC CCG CGG CCC GT-3`人金属硫堇II a(3)基因NF-kB E3291, E3292, 5`-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-3`鼠Igk轻链基因(4)Oct1 E3241 E3242 5`-TGT CGA ATG CAA ATC ACT AGA A-3` Ig重链基因(5)CREB E3281 E3282 5`-AGA GAT TGC CTG ACG TCA GAC AGC TAG-3`大鼠生长激素抑制基因(6)TFIID E3221 E3222 5`-GCA GAG CAT ATA AGG TGA GGT AGG A-3`belta-1球蛋白启动子只列出了上链的序列,探针是双链,下链序列和上链序列配对。黑体字表明序列来源于指定的基因序列,转录调控因子结合的序列用下线表明。一般而言,周围的核苷酸是任意。6)在DNA探针的选择上,要考虑哪些重要因素?目的DNA的长度应小于300bp,以有利于非结合探针和蛋白DNA复合物的电泳分离。双链的合成的寡核苷酸和限制性酶切片段可在凝胶迁移实验中用作探针。如目的蛋白已被鉴定,则应用短的寡核苷酸片段(约为25bp),这样结合位点可和其他因子的结合位点区别开。长的限制性酶切片段可用于对推定的启动子/增强子区域内的蛋白结合位点定位。随后可用DNaseI 印迹对蛋白结合的特异区域在DNA序列水平上作出分析。7)用以下一些转录调节因子和HeLa细胞核抽提物可形成哪些复合物:AP1, AP2, CREB, NFkB, Oct1, Sp1, TFIID, TFIIB。当用HeLa细胞核抽提物作为结合蛋白的来源时,每1个转录调节因子和它相关的DNA同源序列结合形成特征型的结合形态。以下的文字描述了每一个单独的转录调节因子,包括识别的同源序列,因子的大小,特定的结合条件,以及和HeLa细胞核抽提物可形成的复合物的数目。1.AP1:AP1(激活蛋白1)是一个转录调节因子,它结合的同源序列为5`-TGAGTCA-3`。当基因的启动子区域存在AP1的结合位点时,这些基因可以被诱导,比如用佛波酯可诱导蛋白激酶C(2,7)。在细胞中,AP1形成c-Jun或Jun相关蛋白的同聚双体,或者形成c-Jun或Jun相关蛋白和c-Fos或Fos相关抗原(Fras)的异源双体。Fos蛋白自身不能形成同聚双体,并不能单独和AP1结合位点结合。c-Jun蛋白是一个40kDa的单体蛋白并通过亮氨酸拉链形成同聚双体。在HeLa细胞中,AP1的主要形式是c-Jun蛋白的同聚双体。在凝胶迁移实验中,形成一个特异的复合物。当作凝胶迁移实验测定AP1的活力时,除了基本的溶液组分外,应将0.01mg/ml poly(dI:dC)?dI:dC),100ug BSA, 5mMDTT加入到结合缓冲液中。如用纯化的蛋白,则用1-2ug的蛋白来检测迁移复合物。2.AP2:AP2是一个转录调节因子,可分别作为TPA-和cAMP诱导因子(10)。它是一个52 kDa的蛋白,识别的同源序列为5`-CCCCAGGC-3`或5`-GCCNNGGC-3`(3)。这个因子对视黄酸特别敏感,可能在形态发生中起着重要作用。HeLa细胞核抽提物和AP2同源DNA探针形成一个特定的复合物。用纯化的蛋白作凝胶迁移实验时,应用20-50ng的蛋白。3.CREB:CREB是一个37 kDa的转录调节因子,对cAMP应答,识别5`-T(G/T)ACGTCA-3`DNA同源序列(6,11)。它含亮氨酸拉链结构而形成同聚双体,相关的基本结构域和c-JunDNA结合结构域同源。当用HeLa细胞核抽提物时,能和CREB同源序列形成一个复合物。4.NF-kB:NF-kB最初被鉴定为在B细胞中和免疫球蛋白k轻链的增强子结合。但随后在非B-细胞的细胞质中被发现,形成NF-kB和IkB的复合物。最初在DNA结合蛋白复合物中分离的NF-kB是由p65(RelA)和p50构成的异源双聚体。其他分离的单体包括p49(也可称为p52),p75(c-Rel),p68(RelB)。p65,p68,p75单体起反式激活作用。p50,p49(p52)单体具有DNA结合活力,但只具有微量的反式激活作用。据报道p49和NF-kB的单体p65形成具有转录活力的异源双体,类似于p50/ p65异源双体。p49/ p65和p50/ p65异源双体在细胞质中受一种叫IkBa/MAD-3的抑制剂调节。IkB和p65单体结合,阻制了细胞核中的定位和DNA的结合。在体外高浓度的p65能形成同源双聚体,能和DNA微弱地结合。Poly(dI:dC)能抑制这一反应(14)。p49和p50也能形成同源双聚体,但在细胞中的浓度很低。通常,在作NF-kB的凝胶迁移实验时,在20ul的反应体积中,有溶于10 mM HEPES的0.28pmoles 的NF-kB9寡核苷酸(pH7.9), 50mMKCl, 0.2mMEDTA, 2.5mM DTT, 10%甘油, 0.05%NP-40。当用纯化的蛋白时,250-300ng足以形成凝胶迁移复合物,而需用10ug的HeLa细胞核抽提物。凝胶迁移复合物在室温中保温30分钟,在50mMTris(pH8.3)和38mM甘氨酸的7%聚丙烯酰胺凝胶电泳中分离凝胶迁移复合物。含考马斯兰和二甲苯蓝色素的加样溶液只能加入到阴性对照反应中,因这两种色素会加剧NF-kB复合物的解离。当用HeLa细胞核抽提物作为结合蛋白来源时,可形成两种序列特异的凝胶迁移复合物,即p50/p50同源双聚体和p50/ p65异源双聚体。在表达p49,p50,p65的细胞中,可检测到4个序列特异的凝胶迁移复合物(p49/ p49,p50/ p50,p50/ p65,p49/ p65),如果存在高浓度的p65,可检测到微量的p65/p65。下列试剂可加强NF-kB在体外的结合:mM的GTP,ATP,精胺,亚精胺,钡或钙离子,ng的Co+3(NH3)6(12)。5.OCT1:OCT1是OCT转录调节因子家簇中的一员,显然在哺乳细胞中存在比较广泛(5)。POU结构域包括POU-box和Homeo结构域。当用HeLa细胞核抽提物时,可检测到一个与OCT1同源探针形成的序列同源凝胶迁移复合物。6.SP1:SP1是一个O-糖基化的转录调节因子,它识别10个核苷酸长度的同源序列5`-GGGGCGGGGC-3`(1)。核心识别序列是5`-GGGGCGGG-3`。同核心序列相似的序列常存在于启动子中。SV40的早期启动子就是一个例子,它是第一个可以结合SP1的启动子。根据糖基化的不同,它的分子量在95-105kDa,DNA结合结构域中的三个锌指纹决定了序列的特异性。HeLa细胞核抽提物与SP1同源探针形成特异的凝胶迁移复合物。7.TFIID/TFIIB:TFIID和TFIIB是基本的转录调节因子,参与RNA聚合酶II启动子的基本的转录(16)。TFIID与真核启动子的TATA区域形成特异的DNA结合。TFIID由几个蛋白组成,而其中的TATA区域结合蛋白(TBP),参与TATA序列的结合。TFIID的其他的蛋白组分被称为TBP-相关因子(TAFs)。用TFIID探针寡核苷酸和HeLa细胞核抽提物,可得到一个微弱的凝胶迁移带,但很难确定为是TFIID序列特异凝胶迁移复合物。纯化的重组的TBP很难作凝胶迁移实验,这部分是由于TBP存在很强的正电荷,导致TBP/DNA复合物很难进入凝胶。纯化的TBP形成二聚体后不能结合DNA(17)。因此形成的二聚体可参与DNA结合。TFIIB不单独与DNA结合,但与TFIID结合后增强它与DNA的结合。TFIIB与预启动复合物结合后,致使RNA聚合酶II和TFIIF结合到转录启始区。故TFIIB在预启动复合物的形成中有重要作用。当用纯化的TFIID作凝胶迁移实验时,poly(dI-dC)不用加入结合反应中。结合缓冲液含10%甘油,20mMTris(pH8.0), 10mMMgCl2, 2mMDTT, 89mMKCl。对TFIID的凝胶结合实验中,可加入poly(dG:dC)?dG:dC。形成的复合物在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中分离,凝胶组分是:0.5′TBE, 6%聚丙烯酰胺凝胶(19:1丙烯酰胺:双叉),4mMMgCl2, 0.02%NP-40, 电泳缓冲液组分是:0.5′TBE,4mMMgCl2, 0.02%NP-40。当研究含TFIID和TFIIB的复合物时,应从结合缓冲液,凝胶,和电泳缓冲液中去除MgCl2。这些是一般的要求,用不同的细胞抽提物和TFIID、TFIIB形成复合物作凝胶迁移实验时,应对多种因素进行优化以达到理想的条件。8)在一次凝胶迁移实验中,用多少量的蛋白质或抽提物,和标记的DNA探针?对每一个特定的结合蛋白和探针,所用的纯化蛋白,部分纯化蛋白,粗制核抽提液需作优化,一般所用纯化蛋白的量在20-2000ng间,可将蛋白:DNA的等摩尔比调整为蛋白的摩尔数是DNA的5倍。用粗制核抽提液,需要1-20ug蛋白形成特异的复合物。所加入反应的探针的量是50,000-200,000cpm32P-标记的探针(高特异活性),反应体积为1-5ul。这相当于10-50fmoles的DNA探针。探针应保存在-20oC以防止降解,在合成或标记后1-2个星期内必需使用。无论探针或是结合蛋白应避免多次冻融。9)能用体外翻译法制备目的蛋白质吗?Promega没对所有的转录调节因子作这类测试。一般,用麦胚抽提物作哺乳细胞转录因子或DNA结合蛋白的体外翻译,兔网织红细胞溶裂解液可能含有内源哺乳细胞转录因子或DNA结合蛋白。但TNT?/sup>兔网织细胞溶解液系统(a,b,c,d)与TranscendTM 生物素标记的tRNA(目录号E3201)一同使用,翻译了转录调节因子AP1(c-Jun),它使AP1同源寡核苷酸(目录号E3201)产生的迁移效果和重组的AP1相同(18)。TNT?/sup>T7偶联的麦胚抽提物(b,c,d,e)在体外翻译了c-Rel。这一蛋白特异地使免疫球蛋白k轻链增强子探针产生迁移。在c-Rel结合反应中加入体外翻译的MAD-3(IkB家簇中一员)可干扰其相互作用。10)poly(dI:dC)?dI:dC),非特异性竞争DNA,特异性竞争DNA的功能是什么?它由肌苷和胞嘧啶组成。由于其特定的结构,可抑制蛋白对标记探针的非特异结合,避免假复合物。 在凝胶迁移反应中加入poly(dI:dC)?dI:dC),可抑制粗制核抽提液中其它DNA结合蛋白结合,比如转录调节因子的非特异结合。当用纯化的蛋白作凝胶迁移反应时,不必一定加入poly(dI:dC)?dI:dC),如加入,则普通反应中所用终浓度不超过50-100ng。对核抽提液,每2-3ug核抽提液用1 ug poly(dI:dC)?dI:dC)。为确定所形成的复合物的特异性,在含或不含增量的非放射性的特异竞争DNA或非特异的竞争DNA时,作结合反应的竞争实验。一般,非放射性的特异DNA是非标记的DNA探针,非特异的竞争DNA ,长度组成和DNA探针相同,序列不同。用非放射性的特异DNA能竞争掉,而用非特异的竞争DNA不能竞争掉的复合物,表明目的蛋白和同位素标记探针的特异结合。非特异结合能用特异DNA和非特异的竞争DNA竞争掉。结合溶液中的poly(dI:dC)?dI:dC)的量需作优化,但一般用0.05mg/ml。非放射性的(特异或非特异)的竞争DNA的用量也需优化或滴定,但竞争DNA通常是同位素标记的探针的10-1000倍(w/w)。其他类型的竞争DNA如小牛胸腺DNA不能用于凝胶迁移反应,它们会带有目的蛋白的结合位点。11)用什么凝胶条件将蛋白质/探针复合物和游离的探针分离开?将结合蛋白或粗制核抽提液和目的探针结合,蛋白/探针复合物和游离探针可在非变性聚丙烯酰胺凝胶中经电泳分离。聚丙烯酰胺的浓度一般为6%(30:1丙烯酰胺:双叉),在特定条件下可用高或低的浓度。PH, 聚丙烯酰胺的浓度, 丙烯酰胺:双叉丙烯酰胺的比会影响复合物在凝胶中的迁移。大多数蛋白用10-15伏的电压,解离快的蛋白用短时间和高的电压(30-35伏的电压),电泳时所用的TBE和TAE必需是新配制的,无沉淀。低的离子强度和丙烯酰胺基质的`箱子效果`有助于复合物的稳定。也可将TGE缓冲液(12.5mMTris,pH8.3, 95mM甘氨酸,0.5mMEDTA)用于不稳定的蛋白/DNA复合物。可在4oC进行结合和电泳实验以阻止不稳定复合物和探针的解离。加样样品液中的色素会导致不稳定复合物的解离,应用不含考马斯兰和二甲苯蓝的加样样品液。当带型不紧密出现拖尾时,表明复合物存在解离。凝胶必需完全聚合,以避免带型拖尾。如复合物不进入凝胶则表明所用的蛋白或探针过量,或盐的浓度过量不适用于这一反应。在含抽提液的带中不含游离探针或复合物,但只含探针的带中有探针表明抽提物有核酸或磷酸酶污染,应在抽提液中和结合反应中加入相应的抑制剂。目前可用高强度琼脂糖凝胶分离蛋白/探针复合物(Metaphor?/sup/agarose)。12)如何在一个特定的复合物中确定一个蛋白质的存在?部分纯化的蛋白或粗制核抽提液和一个特定的探针可形成一个或几个特异的蛋白复合物。多个复合物的存在表明蛋白降解,应在制备抽提液的溶液中和结合反应中加入蛋白酶抑制剂。确定复合物中蛋白的特征可能会困难,但有一些方法作这方面的研究。如有目的蛋白的抗体,可进行超迁移实验,抗体和蛋白/探针复合物中的蛋白结合,使复合物的迁移延迟,形成超迁移。增量的抗体加入到结合反应中。抗体可加入到蛋白和探针反应后,也可将抽提物与抗体结合后,再加入探针。取决于抗体的特定的抗原决定簇,前者有利于超迁移复合物地形成,后者阻止复合物的形成导致原复合物的强度的减少。在大多数实验中,应对抗体作滴定,先使抗体:蛋白的摩尔比为1:1,然后应需要增加抗体的量。当有纯化的蛋白时,可用它们和实验的带型迁移复合物比较。除超迁移实验外,复合物中蛋白的特征也可用UV交联和标记转移来分析。在均质标记的探针和细胞核抽提物保温后,用UV照射使复合物交联,随后用DNA酶降解未保护的探针。需用均质标记的探针,因DNA酶会从末端标记的探针中除去标记。和保护的几个核苷酸交联的蛋白在变性聚丙烯酰胺凝胶中经电泳分离,干燥,放射自显影。结合蛋白的分子量可和标准分子参照物比较。也可用目的蛋白的抗体对复合物作Western印迹分析(20)。如一个蛋白和DNA探针的特定序列结合,可用含保守结合序列的竞争寡核苷酸,以及突变体来确定它的特征。也可用定点突变将保守序列结合位点改变来研究复合物的形成。参考资料1. Briggs M R et al 1986 Science 234, 472. Lee W et al 1986 Cell 49, 7413. Williams T et al 1989 Genes Dev 2, 15574. Sen R and Baltimore D 1986 Cell 46, 7055. Parlsow T G et al 1984 Proc Natl Acad Sci USA 81, 26506. Montminy M R et al 1986 Proc Natl Acad Sci USA 83, 66827. Angel P et al 1987 Cell 49, 7298. Chiu R et al 1988 Cell 54, 5419. Rauscher F J et al 1988 Cell 52,47110. Imagawa M et al 1987 Cell 51, 25111. Berkowitz L A and Gilman M Z 1990 Proc Natl Acad Sci USA 87, 525812. Baeuerle P A 1991 Biochim Biophys Acta 1071, 6313. Duckett C S et al 1993 Mol Cell Biol 13, 131514. Urban M B et al 1991 EMBO J 10(7), 181715. Dynan W S and Tjian R 1983 Cell 35, 7916. Peterson M G et al 1990 Science 248, 165217. Coleman R A et al 1995 J Biol Chem 270, 1384218. Beckler G and Hurst
2023-08-17 23:04:531

EMSA实验蛋白为什么进不到PAGE胶内

单抗与多抗都可用于Super-Shift EMSA,但多抗可能与DNA/蛋白复合物形成大的聚集物而不进胶。在这种情况下,虽然看不到Super-Shift的带,但应当可以看到.
2023-08-17 23:05:012

请教有经验前辈,EMSA实验所需溶液的配方

1. 避免缓冲液高浓度电供体基团比:NH4甘氨酸精氨酸Tris等等;2. 各种缓冲液能强螯合剂EDTAEGTA等等;3. 各种缓冲液能高浓度强原剂比DTT防止二价Ni原; 4. 能含离型垢剂比SDS防止Ni流失;-1mMPMSF防止目5. 破碎细胞候建议加入蛋白酶抑制剂比0.1蛋白降解;6. 缓冲液加入甘油防止蛋白间由于疏水相互作用发聚集沉淀甘油浓度高达50%(v/v)7. 应避免含碳酸氢钠柠檬酸等物质;8. 缓冲液NaCl浓度应300mM2M间;9. 加入变性剂促溶盐酸胍(高6M)尿素(高8M) 10.加入非离型垢剂TritonTweenNP40等高2%减少背景蛋白污染除核酸污染组氨酸标签蛋白纯化没有意义建议自己下去查查资料
2023-08-17 23:05:211

请教有经验前辈,EMSA实验所需溶液的配方

1. 避免缓冲液中有高浓度的电子供体基团,比如:NH4,甘氨酸,精氨酸,Tris,等等;2. 各种缓冲液中不能有强螯合剂,如EDTA,EGTA,等等;3. 各种缓冲液里不能有高浓度的强还原剂,,比如DTT,防止二价Ni被还原; 4. 不能含离子型的去垢剂,比如SDS,防止Ni流失;-1mM的PMSF,防止目的5. 在破碎细胞的时候建议加入蛋白酶抑制剂,比如0.1蛋白被降解;6. 缓冲液里可以加入甘油,防止蛋白之间由于疏水相互作用而发生聚集沉淀,甘油浓度最高可达50%(v/v)7. 应避免含碳酸氢钠,柠檬酸等物质;8. 缓冲液里NaCl的浓度应在300mM到2M之间;9. 可加入变性剂促溶,盐酸胍(最高可6M),尿素(最高可8M) 10.可加入非离子型去垢剂,如Triton,Tween,NP40等,最高2%,可以减少背景蛋白污染和去除核酸污染组氨酸标签蛋白的纯化感觉这样的提问没有意义建议自己下去查查资料
2023-08-17 23:05:291

圆弧齿轮泵的特点有哪些

下面我们一起来看看圆弧齿轮泵的特点有哪些吧。1、圆弧齿轮油泵结构紧凑,以便使用管理和保养维护。2、圆弧齿轮油泵具有良好的自吸性,所以每次开泵前无须灌入液体工作。3、圆弧齿轮油泵的润滑油是靠输送的液体自动达到的,所以日常运转时无须另加润滑油。4、圆弧齿轮油泵在两啮合齿廓间是一点连续接触,因此彻底避免了发生困油现象,从而解决了困油现象所导致泵的振动、噪声、轴承负载增大等一系列问题。圆弧齿轮泵的优点圆弧齿轮泵采用了国际上认为最先进连续接触齿轮,可彻底淘汰渐开线齿轮输送泵。圆弧齿轮在两啮合齿廓间为一点连续接触,不会产生困油现象,彻底解决了渐开线齿轮泵因困油现象导致泵的振动、噪声、轴承负载增大等现象。拓展小知识知识点一、圆弧齿轮泵工作原理是什么圆弧齿轮泵工作时,两个齿轮、泵体,与前后盖组成两个封闭空间,当齿轮转动时,齿轮脱开侧的空间的体积从小变大,形成真空将液体吸入,齿轮啮合侧的空间的体积从大变小,而将液体挤入管路中去。吸入腔与排出腔靠两个齿轮的啮合线来隔开。齿轮泵的排出口的压力大小,完全取决于泵出处阻力的大小。知识点二、螺杆泵主要用于什么场合1、螺杆泵因其可变量输送、自吸能力强、可逆转、能输送含固体颗粒的液体等特点,在污水处理厂中,螺杆泵广泛地被使用在输送水、湿污泥和絮凝剂药液方面。2、螺杆泵由于结构和工作特性,能输送高固体含量的介质,流量均匀、压力稳定,低转速时更为明显,由于具有良好的变量调节性,因而可一泵多用,输送不同粘度的介质。3、螺杆泵的安装位置可以任意倾斜,适合输送敏性物品和易受离心力等破坏的物品。知识点三、螺杆泵的工作特点螺杆泵主要具有以下几个特点:结构简单、使用安全可靠、使用维护便利、出液持续平均、压力平稳,杂音和振动小,具有自吸能力,但螺杆加工比较麻烦。知识点四、什么是三螺杆泵螺杆泵是一种回转式容积泵,按螺杆多少,可分为单螺杆、双螺杆、三螺杆和多螺杆泵,三螺杆泵,就是有三根螺杆的螺杆泵,包括一根安插在泵缸中的主动螺杆和与其啮合的两根从动螺杆,三根互相啮合的螺杆,在泵缸内按每个导程形成为一个密封腔,造成吸排口之间的密封。知识点五、蠕动泵用途有哪些蠕动泵的任何一个使用场景都是为了处理流体(可以是任何有流动性的液体、也可以是固液混合体),蠕动泵的主要作用就是输送。蠕动泵的输送精度可以达到最高±0.5%,所以可以满足定量输送的需求,也可以满足定量分配的需求。从产品功能的层面来看,蠕动泵的用途主要就是:定量或计量输送,定量或计量分配。所以凡是有定量输送和分配需求的应用场景,都可以选用蠕动泵去满足应用需求。蠕动泵拥有优秀的性能和可靠性,所以应用非常广泛,能满足各种流程的应用需求,包括从实验科研、分析仪器到工业生产的众多领域中,所以蠕动泵的用处非常多,用途也非常广泛,主要有以下领域:1、分析仪器:色谱仪、原子荧光光度计。2、医疗行业:医疗设备和诊断试剂仪器。3、生物制药:包衣机、制粒制丸机、发酵罐、用于纯化、流体输送、分配灌装、高精度配液。4、实验科研:实验室和研究设备。5、食品饮料:现调饮料机、酸奶机、自助售卖机、智能奶茶机、调味品分配添加、啤酒行业。6、环境行业:水质分析仪器、质控仪、水质采样仪器、烟气分析仪。7、印刷包装:输送油墨和涂层溶剂、涂层和粘合剂。8、喷绘油墨:喷绘机、打印机。9、洗涤清洗:洗衣机、洗碗机。10、陶瓷工业:消除气孔、消泡剂的定量添加、陶瓷浆料。11、采矿:传送磨蚀性矿石和尾矿泥浆、过滤机供液、絮凝剂计量和化学品计量、矿石采样、泵送浓密机底流。12、工业应用:沙基胶体的计量、计量含磨蚀性涂层溶液、计量高粘度树脂、化学品再循环、涂料和油漆。13、纸浆和造纸行业:填料、纸浆前处理中的工艺、浆涂层的理想用泵、纸浆和造纸业的水和污水处理、精确的化学品和添加物定量输送、输送染色添加剂。14、家用电器:智能马桶、皂液器、消毒液机、扫地机、拖地机。15、工业机械:研磨机、玻纤纺纱机、光伏生产。
2023-08-17 23:00:241

机械设计制造及其自动化考研的科目有哪些

专业课这里详细说一下哦! 在我认识的学机械读研的人考的专业课有考一下几门: 1。力学类---理论力学 必学 专业基础课不能不学好哦!很多学校机械都考理力 如同济、南航 ---材料力学 选学 一些机电类涉及机械方面的专业也会考这门课 如同济是选考理论力学和材料力学的 2。机械专业类---机械原理 必学 很多学校机械都考机设 如东南 以后要吃机械的饭当然也要学通 ---机械设计 必学 偏设计类的机械专业喜欢考这门课 3。偏机械电子的专业还要加试《电工》这门课 先在开始先准备公共课的英语和数学,特别是数学,很多人都是死在这门课上。暑假好好复习数学和英语。专业课平时好好学,等暑假过后报考学校的专业课科目和指定参考书在网上公布后着手复习。
2023-08-17 23:00:262

罗茨风机启动时为什么要放空

罗茨风机启动时为什么要放空 罗茨鼓风机为高压型的鼓风机,如果电机功率转小,压力不是特别高,启动时也不需要放空,只要打开管道阀门,让气路保持畅通即可; 如果设备工作压力较高,电机比较大的,可以选择放空启动,通过减少风压来减少启动时的电流,让电机启动更为平稳些。等设备正常启动了,就可以切换为正常使用回路就好了。 厦门小钟 不放空是极度危险的错误操作,罗茨鼓风机有强制排气的性质。假设没放空,或者放空阀只打开了一点点,就会导致出气量不够,进气量太多,气体压缩在鼓风机转子腔内、鼓风机出口和阀门之间的管道。电机转速是一定的,也就是说,鼓风机的转速一定,排气量持续不变,排出气体持续在管道、转子腔内被压缩,压缩的气体越来越多,势必需要更大的力来做用于之前被压缩的气体,风机才能维持转速不变,OK那么这时候 ①电机!电机电压不变,转速不变,需求力更大,做功更多。电机功率↑,电流↑电流过大,保护系统制停. 无保护系统电机烧坏! ②风机!风机受到压缩气体产生的热量,热量无法及时排出!风机发热,软化、脆化风机机壳!风机同时受到两个外力1、电机对风机主轴、轴承的强扭力.2、内腔气压对风机机壳的向外推力.结合热量和作用力,风机炸裂,甚至爆炸都是存在的,机壳炸裂去维修的那些商家,比比皆是. ③系统管道,阀门.道理同②,阀门炸烂的,我都见过不少.法兰烧毁的,也是很多. OK就这么几点了. 罗茨风机启动时需要放空吗 不放空是极度危险的错误操作,罗茨鼓风机有强制排气的性质。假设没放空,或者放空阀只打开了一点点,就会导致出气量不够,进气量太多,气体压缩在鼓风机转子腔内、鼓风机出口和阀门之间的管道。电机转速是一定的,也就是说,鼓风机的转速一定,排气量持续不变,排出气体持续在管道、转子腔内被压缩,压缩的气体越来越多,势必需要更大的力来做用于之前被压缩的气体,风机才能维持转速不变,OK那么这时候 1、电机方面,电机电压不变,转速不变,需求力更大,做功更多。电机功率增大,电流升高,电流过大,保护系统制停.无保护系统电机有可能烧坏。 2、风机方面,风机受到压缩气体产生的热量,热量无法及时排出。风机发热,脆化风机机壳。风机同时受到两个外力。①电机对风机主轴、轴承的强扭力.②内腔气压对风机机壳的向外推力.结合热量和作用力,最严重的情况风机炸裂,甚至爆炸都是存在的,机壳炸裂去维修的真见过几个. 3、系统管道,阀门.道理同2,阀门炸烂的,我都见过不少.法兰烧毁的,也是很多.锦工风机为您解答,如想了解更多技术问题可登陆锦工风机官网或致电咨询我们。 罗茨风机为什么要水冷却? 当压力高于0.8ba时,需要加装水冷循环冷却系统, 是为了保护轴承及齿轮不受高温的影响而损坏,保证风机运行正常,延长使用寿命 为什么叫罗茨风机 罗茨风机属容积式风机,叶轮端面、风机前后端盖。原理是利用两个叶形转子在气缸内作相对运动来压缩和输送气体的回转压缩机。这种鼓风机结构简单,制造方便,广泛应用于水产养殖增氧、污水处理曝气、水泥输送,更适用于低压力场合的气体输送和加压系统,也可用作真空泵等。 罗茨风机是什么 罗茨风机的用途 罗茨风机的使用 罗茨是英文Roots的音译。其实罗茨风机是根据罗茨原理进行设计制造的一种设备,,属容积式鼓风机,具有强制输气特征。而罗茨原理的发明者是美国的Roots兄弟,哥哥:菲兰德·罗茨(Philander Roots),弟弟:弗朗西斯·罗茨(Francis Roots),为了纪念这个发明,所以将这个原理用他们的名字命名。当风机用于正压送风的情况下,我们叫做罗茨风机,如果用于负压抽吸,就叫做罗茨泵。 水产养殖为什么要安装增氧罗茨风机 罗茨鼓风机养殖应用中的优点 鱼虾、蟹这些都需要使用到增氧设备,罗茨风机在养殖应用中有着良好的效果。水产养殖行业使用增氧罗茨风机可以解决缺氧、浮头情况。 为什么水产养殖使用上罗茨风机?现在养鱼的也越来越多,从社会发明有鱼塘增氧后匡助养鱼用户解决到困扰题目,可能有些人对鱼塘增氧罗茨风机不太了解,不知道鱼塘增氧罗茨风机对于养鱼的用户得到什么帮助。鱼塘增氧罗茨风机是养鱼户不可缺少的渔业机械,使用增氧罗茨风机可以改善水质。增氧罗茨风机不仅供应鱼类所需要的氧气,更重要的是促进池内有机物的氧化分解,促进池水上下对流增加底层溶解氧,减少底层硫化氢、氨等有害物质。改善鱼类的栖息环境,进步体质,增强活力,促进出产进步产量。水质的改善比饵料环境更重要。养鱼(虾)先养水,说的就是这个道理。只有准确地使用,才能保证其施展最大作用。 钜虹我和大家介绍鱼塘增氧罗茨风机的特点 1、鱼塘增氧罗茨风机因为纳米曝气管超微细胞气孔产生的气泡,在水体中与水的接触面极大,上浮流速低,接触时间长,因而氧的传质效率极高。 2、充分活化水体:微孔曝气增氧装置,好似将水体变成亿万条小溪涌涌动弹,充足的溶氧使水体能够建立起天然的生态系统,让水变活起来。 3、恢复水体自我净化功能:微孔曝气增氧是水底增氧,而其他增氧是表层 增氧,而养殖水体主要是水底缺氧,水体底层沉积的肥泥、有机排泄物、剩余变 质的饵料等难解的有机物,会消耗大量的氧,而充足的微孔曝气增氧,使其转化为微生物溶解分解的有机物,使水体自我净化功能得以恢复。 4、因为采用微孔曝气增氧装置,氧的传质效率极高,使单位水体溶氧迅速达到4.6mg/L 左右,不到水车或叶轮增氧的四分之一能耗,可以大大节约养殖户的电费本钱。 5、实现生态养殖,保障养殖效益:持续补断的微孔增氧为水体提供了充足 的溶氧,水体自我净化能力得以恢复晋升,菌相、藻相天然平衡,构建起水体的天然生态,养殖种群的生存能力不乱进步,充分保障养殖效益。 6、安全性、环保性:微孔曝气增氧装置安装在岸上,安全机能好,不会给水体带来任何污染,其他增氧方式是在水中工作,轻易漏电,烧坏机器,对人体和鱼虾存在很大危害。 7、维护方便:罗茨风机轻便、耐用,维护简朴利便,节能环保,好维护。 厦门钜虹 为什么叫罗茨风机呢? 从英文roots blower翻译过来的。 roots: 美国的一个姓氏,roots兄弟发明的风机。 为什么要对罗茨风机进行节能改造 节能改造绿冷高科节能改造当然是为了节约用电到达节约用电成本。
2023-08-17 23:00:331

机械设计制造及其自动化考研要哪些科目

我也是机械设计制造及其自动化专业的,不过没考研,直接工作了~~这个专业课是由学校自己命题,所以你所报考的学校不一样考的科目就不用一样,具体的要看你所报考的学校了,但是主要是考以下的科目的一两科,当然也有考的多的。主要有:机械设计、机械原理、机械制造基础、工程力学(理论力学和材料力学)、机械制造工艺学等等。这些课程我们都学过,考研专业课比较容易。应该把重点放在英语和数学上。政治主要是背,现在的考研的辅导班一般都把重点扣的很准 只要按照辅导班的要求去做就没有问题 政治要是考自己复习的话会很麻烦 毕竟考的东西太多了(马哲、毛概、邓三、政经、世经、还有时事政治) 再说政治只要过线了就行了。对于我们理科生来说,我个人觉得最难得是英语。
2023-08-17 23:00:363

几个大型网站的创始人是谁?

百度是李彦宏,新浪是张朝阳……你就给这么点分。谁花大把时间给你找这些繁琐的资料啊
2023-08-17 23:00:384

罗茨鼓风机 安装使用说明

什么品牌的罗茨风机啊,你得先提供一下呢……
2023-08-17 23:00:422

什么是c/ntt,分析细菌,霉菌和酵母菌的c/n有何不同

在光学显微镜下观察时,细菌、酵母菌、霉菌的主要区别:.同等放大倍数下,细菌个体最小,只能看到外部基本轮廓即使在1600倍下,看上去也很小酵母菌在同等倍数下比较细菌大得多(10倍左右),但其外形和轮廓与细菌相似,最容易将二者混淆,但细菌中许多种类由于有鞭毛,会运动所以容易在视场内发现和区别,酵母菌不会运动,细胞大而且往往会产生芽孢、子囊孢子、假菌丝通过仔细观察也能区别开来;霉菌不仅个体较细菌大,而且是丝状的群体,所以在显微镜下最容易看到也不会与细菌、酵母君混淆。所以,在显微镜下观察三种微生物时,主要就是要掌握区别细菌和酵母菌的要点和方法。
2023-08-17 23:00:441

机械设计制造及其自动化专业考研考什么方向?

机械设计制造及其自动化专业有车辆工程、机械电子工程、材料加工工程、机械制造及其自动化、机械设计及理论等考研方向。机械设计制造及其自动化专业有车辆工程、机械电子工程、材料加工工程、机械制造及其自动化、机械设计及理论等考研方向。机械设计制造及其自动化考研科目分为公共科目和专业科目,公共科目主要考《思想政治理论》、《数学》、《英语》、《数学》;专业科目主要考《微机原理》、《材料力学》等。机械机械设计制造及其自动化专业。机械机械设计制造及其自动化专业设计制造及其自动化专业旨在培养适应社会发展需要,具备较扎实的自然科学基础和宽厚的机械专业知识以及较强的实践能力。具有创新意识、国际视野、团队合作精神和良好的沟通能力;具有较好的人文社会科学素养、较强的社会责任感、良好的职业道德,能在机械工程领域从事机械产品研发、设计、制造、项目管理等工作的复合型工程技术人才。机械设计制造及其自动化专业核心知识领域包括:机械设计原理与方法、机械制造工程原理与技术、机械系统中的传动与控制、计算机应用技术等。机械设计制造及其自动化专业毕业生就业主要在机械、汽车、航空航天、能源、化工、电子、材料、冶金等行业领域,从事机械领域内的设计制造、科技开发、应用研究、运行管理和经营销售等方面的工作。
2023-08-17 23:00:441

gta5中怎么选择midnight电台

《gta5》选择midnight电台方法如下:1、进入载具。2、在车上按Q是切换下一个电台,或者按着tab键再移动鼠标选择电台。3、在midnight电台处停止切换即可。
2023-08-17 23:00:441

蠕动泵常见故障如何解决

蠕动泵常见故障如何解决?下面我们一起来看吧!1、开机无响应如果蠕动泵接电后,开机没有响应,那么请按照以下顺序进行检查。(1)如果安装电路保护装置,确认该电路未跳闸;(2)确认电源插头插入正常工作的插座;(3)检查电源线是否插装牢固;(4)确认电源接口保险丝是否熔断。如果检查过后依旧没有响应,可以咨询厂家。2、泵开启但不能运行检查联轴节是否损毁,如果没有损毁,请切断电源,手动转动泵头,拨动滚轮,是否转动正常。3、泵传输的流量低或无流量优先考虑是否设置的流量过低,例如设置0.1ml时,滚轮几乎不动,测试时请设置较高的流量。其次,也可按照以下步骤进行检查:(1)检查供料是否正常;(2)检查管道是否缠绕或堵塞;(3)检查所有阀门是否开启;(4)检查软管是否位于转子中间位置;(5)查看软管是否有裂开或损坏情况;(6)查看运行方向;(7)检查泵头转子是否能灵活转动。4、外控无法控制不论是数显类型和液晶显示类型,均可在显示屏内看到外控图标是否已经切换成功,如已经成功,可检查外控线是否正确连接,信号源的设置是否正常。拓展小知识知识点一、蠕动泵泵头不转了怎么回事蠕动泵泵头停转主要是由于机械密封的失效性造成。机械密封失效的主要表现是泄露,泄露主要原因有:1、动静环密封面的泄露,造成的原因有端面不平,表面粗糙度未达到使用要求,表面有划伤的凹槽,表面有颗粒物质,造成两端面不平衡,从而有泄露的现象。2、安装不合格,补偿环密封圈泄露,主要原因有压盖变形、预紧力不均匀、安装方法不正确、不符合安装要求、密封圈的质量不合格,发生变形,会导致泄露。3、密封圈选择大了或者小了,都会导致泄露的发生。知识点二、螺杆泵主要用于什么场合1、螺杆泵因其可变量输送、自吸能力强、可逆转、能输送含固体颗粒的液体等特点,在污水处理厂中,螺杆泵广泛地被使用在输送水、湿污泥和絮凝剂药液方面。2、螺杆泵由于结构和工作特性,能输送高固体含量的介质,流量均匀、压力稳定,低转速时更为明显,由于具有良好的变量调节性,因而可一泵多用,输送不同粘度的介质。3、螺杆泵的安装位置可以任意倾斜,适合输送敏性物品和易受离心力等破坏的物品。知识点三、螺杆泵的工作特点螺杆泵主要具有以下几个特点:结构简单、使用安全可靠、使用维护便利、出液持续平均、压力平稳,杂音和振动小,具有自吸能力,但螺杆加工比较麻烦。知识点四、什么是三螺杆泵螺杆泵是一种回转式容积泵,按螺杆多少,可分为单螺杆、双螺杆、三螺杆和多螺杆泵,三螺杆泵,就是有三根螺杆的螺杆泵,包括一根安插在泵缸中的主动螺杆和与其啮合的两根从动螺杆,三根互相啮合的螺杆,在泵缸内按每个导程形成为一个密封腔,造成吸排口之间的密封。知识点五、蠕动泵用途有哪些蠕动泵的任何一个使用场景都是为了处理流体(可以是任何有流动性的液体、也可以是固液混合体),蠕动泵的主要作用就是输送。蠕动泵的输送精度可以达到最高±0.5%,所以可以满足定量输送的需求,也可以满足定量分配的需求。从产品功能的层面来看,蠕动泵的用途主要就是:定量或计量输送,定量或计量分配。所以凡是有定量输送和分配需求的应用场景,都可以选用蠕动泵去满足应用需求。蠕动泵拥有优秀的性能和可靠性,所以应用非常广泛,能满足各种流程的应用需求,包括从实验科研、分析仪器到工业生产的众多领域中,所以蠕动泵的用处非常多,用途也非常广泛,主要有以下领域:1、分析仪器:色谱仪、原子荧光光度计。2、医疗行业:医疗设备和诊断试剂仪器。3、生物制药:包衣机、制粒制丸机、发酵罐、用于纯化、流体输送、分配灌装、高精度配液。4、实验科研:实验室和研究设备。5、食品饮料:现调饮料机、酸奶机、自助售卖机、智能奶茶机、调味品分配添加、啤酒行业。6、环境行业:水质分析仪器、质控仪、水质采样仪器、烟气分析仪。7、印刷包装:输送油墨和涂层溶剂、涂层和粘合剂。8、喷绘油墨:喷绘机、打印机。9、洗涤清洗:洗衣机、洗碗机。10、陶瓷工业:消除气孔、消泡剂的定量添加、陶瓷浆料。11、采矿:传送磨蚀性矿石和尾矿泥浆、过滤机供液、絮凝剂计量和化学品计量、矿石采样、泵送浓密机底流。12、工业应用:沙基胶体的计量、计量含磨蚀性涂层溶液、计量高粘度树脂、化学品再循环、涂料和油漆。13、纸浆和造纸行业:填料、纸浆前处理中的工艺、浆涂层的理想用泵、纸浆和造纸业的水和污水处理、精确的化学品和添加物定量输送、输送染色添加剂。14、家用电器:智能马桶、皂液器、消毒液机、扫地机、拖地机。15、工业机械:研磨机、玻纤纺纱机、光伏生产。
2023-08-17 23:00:441

mclaren是什么品牌的车

作为迈凯轮旗下品牌,迈凯轮是一家高端汽车R&D生产和销售企业。它的创始人是布鲁斯·麦克拉伦,总部在英国霍金。迈凯轮涉及的不仅仅是跑车,还有世界一级方程式赛车,影响力很大。迈凯伦有几款车型在中国销售共有五款车型,均为跑车,包括硬顶跑车和硬顶敞篷系列。车型有迈凯伦540c、迈凯伦570、迈凯伦600lt、迈凯伦720s和迈凯伦gt。其中,迈凯伦720s匹配4.0升720马力v8发动机和七速湿式双离合变速箱,最高时速341公里。迈凯伦720s的底盘转向系统车辆采用停止后驱的驱动方式,前悬架类型为双横臂独立悬架,后悬架类型为双横臂独立悬架,采用电动液压助力转向方式,使用承载式车身,车辆前后制动器为陶瓷通风盘。百万购车补贴
2023-08-17 23:00:451

暖身贴会着火吗

暖身贴不会着火。暖身贴也叫做暖宝宝,反应原理为利用原电池加快氧化反应速度,将化学能转变为热能,它的主要成分是碳粉、NaCl固体、Fe2O3固体以及含镁铝的盐类。其中式NaCl是无色的立方结晶或细小结晶粉末,熔点为801℃,如果熔点达不到801℃是不会燃烧的,因此暖身贴不会着火。扩展资料:中国初期的暖贴多由贸易商从日本进口而来,随着国内市场需求的增加,巨大的利润空间、较低的政策壁垒吸引了众多的本土企业进军暖贴行业。2006年国内涌现出了较多品牌,日化企业利用其行业优势率先抢占日用品市场,赚取了第一桶金,但此时由于技术和国家政策缘故,导致部分企业夭折。2008年,中国的暖贴市场已渐入佳境,通过漫长的市场培育期,消费者的认知逐渐觉醒,消费习惯正在慢慢形成。很多公司利用其本身的渠道优势、科研优势、国家政策优势率先打开医用热敷理疗暖贴空白市场大门。据不完全统计,截止2008年底,国内暖贴生产厂家超过百家,年生产能力达1.81亿贴。参考资料来源:百度百科—暖宝宝参考资料来源:百度百科—nacl
2023-08-17 23:00:471

日本三大运营商的网络频段是多少

可以
2023-08-17 23:00:243

暖宝宝贴有副作用吗

1 从暖宝宝的发热原理看有无副作用 暖宝宝发热材料主要由铁粉、活性碳、蛭石、水、盐等材料构成。发热原理是铁粉自然养化,放出热量。正常情况下铁粉氧化是比较缓慢的,热量无法积累,在活性炭粉的作用下,铁粉和空气接触面积增大,所以产生了我们能感觉到的热量,盐和水也是为了加快铁粉氧化的,这一原理最早见于中医的理疗袋,用铁粉和醋来做理疗。 暖贴所用内袋是在无纺布上敷的一种可透气薄膜,它是以PE为载体,通过特殊工艺使透气膜形成独特的微孔结构。这些高密度分布在薄膜表面的特殊结构能像皮肤一样进行呼吸。从而使取暖袋内袋中的发热材料与内袋的两个面可以平整均匀的吸附在一起。形成一个完整的暖贴片。该透气膜透气量均匀性又决定了产品发热温度、保持时间等的稳定性。 2 从暖宝宝的反应原理来看有无副作用 暖宝宝的反应原理为利用原电池加快氧化反应速度,将化学能转变为热能。 为了使温度能够持续更长,产品使用了矿物材料蛭石来保温。 因为产品在使用前不能发生反应所以袋子材质要很特别,由原料层,明胶层和无纺布袋组成。无纺布袋是采用微孔透气膜制作的。它还得有一个常规不透气的外袋——明胶层。在使用时,去掉外袋,让内袋(无纺布袋)暴露在空气里,空气中的氧气通过透气膜进入里面。放热的时间和温度就是通过透气膜的透氧速率进行控制的。如果透氧太快,热量一下子就放掉了,而且还有可能烫伤皮肤。如果透氧太慢,就没有什么温度了。使用后为黑褐色固体,其中含碳粉、NaCl固体、Fe2O3固体以及含镁铝的盐类。 3 严格遵循暖宝宝使用方法避免副作用 1、贴于内衣的外侧,不要直接贴于人体皮肤上(肌贴型除外)。 2、晚上睡觉时不宜使用,防止低温烫伤。 3、避免真空塑料包装袋损伤或破坏,否则产品会失效。 4、若不慎接触到眼睛要立即用清水冲洗并就医,误食后要立即催吐并就医。 5、暖宝宝本来就是医用的,只要是真的,就不会有什么副作用的。几毛钱那种假的千万不要买,听说用的是工业铁粉。 6、低等劣质产品不能用。 综合以上所述,从暖宝宝的发热原理及反应原理来看,很明显的暖宝宝本身是没有副作用的,是一款便捷的取暖用品,关键在于人们的使用方法以及是否购买的正规产品,所以大家只要遵循了这两样要求,暖宝宝对人体是并没有副作用的! 4 冬季哪些人群适宜使用暖宝宝 1、爱美的女性,冬天街上随处可见上面一件大衣下面一条裙子打底裤的女生,看着都让人觉得冷,所以用暖宝宝既可以要风度也要了温度。 2、上学的小孩也可以用,贴在膝盖上或者放在口袋里,上课再也不会因为冷而不能集中精力听课了! 3、冬天老年人最怕冷,买一些送给老人,老人肯定喜欢而且觉得贴心实用,贴在腰上或者膝盖上再也不会觉得冷和痛! 4、经常骑车、骑摩托、开运输车的人更要用,冬天寒风大贴一片在膝盖上,不仅保暖而且有效预防风湿或减轻疼痛! 5、经常痛经的女性也可以用,腰部酸痛时使用可减轻或消除疼痛。 6、经常户外作业的人,比如滑雪、钓鱼、打猎、郊游、施工等,这些人群经常暴露在户外,贴暖宝宝能够有效的御寒。
2023-08-17 23:00:221

飞轮海的个人资料谁告诉我?

去他们的官方网站
2023-08-17 23:00:184

mclaren是什么车

迈凯轮英国超级跑车品牌,主要生产超级跑车和赛车
2023-08-17 23:00:172

蠕动泵的分类有哪些

蠕动泵的分类是怎样的呢?一起来了解一下吧。1、基本型蠕动泵它具备蠕动泵的基本控制功能,主要是控制蠕动泵的电位器调速。可按键调节、数码显示转速、启停、正反转、转速调节、掉电记忆、外控输入等功能,还设有全速键,可实现作用物地快速填充或是排空。2、流量型蠕动泵流量型的蠕动泵除具备基本型功能之外,还增加了流量显示、通讯、定时定量等功能。此类蠕动泵能通过校正功能来保证流体较高的精度,还可设置分配的参数,以此来实现自动分配灌装。3、分配型蠕动泵分配型的蠕动泵其实与流量型的非常相似,还具备了历史参数储存能,可及时调取常用参数设置,既方便又快捷。4、工业型蠕动泵此类蠕动泵采用大扭矩,免维护的直流无刷电机驱动,主要应用于工业生产过程中大流量传输的转速泵。5、防爆型蠕动泵防爆型的蠕动泵采用的也是大扭矩,免维护交流减速电机驱动,可以变频器调速。在传播粘稠液体或者传输对剪切特殊流体的时候效果更佳。6、定制型(OEM)蠕动泵定制型蠕动泵一般体积较小,适合精度不高的各种环境下的小流量液体输送。用户可根据自身设备的需求,设计不同的蠕动泵驱动电路配套使用。7、手持型蠕动泵手持型蠕动泵可实现野外取样、在线监测取样等,能充分保证取样的洁净,可采集高粘度液体、含颗粒液体分层取样,操作简便且易于清洗。拓展小知识知识点一、蠕动泵硅胶管的规格型号参数大全1、基本流量型蠕动泵硅胶管这些是用得较多的尺寸规格,在市场中也有明确的分类,因为它的壁厚规格较多,所以为了方便区别它们,有以下尺寸规格(均为内管*壁厚),13#蠕动泵硅胶管规格:0.8*1.6mm,14#管规格;1.6*:1.6mm,15#管规格:4.8*2.4mm,16#管规格:3.1*1.6mm,17#管规格:6.4*1.6mm,18#管规格:7.9*1.6mm,19#管规格:2.4*1.6mm,24#管规格:6.4*2.4mm,25#管规格:4.8*1.6mm,35#管规格:7.9*2.4mm,36#管规格。2、微小流量型蠕动泵硅胶管它没有通俗的称呼,但是蠕动泵硅胶管壁厚只有2种规格0.86mm和1mm,蠕动泵硅胶管规格有:0.13*0.86、0.5*0.86、0.86*0.86、1.52*0.86、2.06*0.86、2.4*0.86、2.79*0.86、3.17*0.86、3.17*0.86、1*1、2*1、3*1等11种规格,它们统称为微小流量型管,这些规格其承压可以达到连续0.1Mpa间隔0.1S。3、工业型蠕动泵硅胶管它一般不会用在制药方面,它的支持规格和壁厚普遍比较大,主要分为73#管规格:9.5(内径)*3.3(壁厚)、82#管规格:12.7*3.3mm、86#管规格;9.5*6.3mm、90#管规格;19*6.3mm、88#管规格;12.7*4.8mm、92#管规格。知识点二、螺杆泵主要用于什么场合1、螺杆泵因其可变量输送、自吸能力强、可逆转、能输送含固体颗粒的液体等特点,在污水处理厂中,螺杆泵广泛地被使用在输送水、湿污泥和絮凝剂药液方面。2、螺杆泵由于结构和工作特性,能输送高固体含量的介质,流量均匀、压力稳定,低转速时更为明显,由于具有良好的变量调节性,因而可一泵多用,输送不同粘度的介质。3、螺杆泵的安装位置可以任意倾斜,适合输送敏性物品和易受离心力等破坏的物品。知识点三、螺杆泵的工作特点螺杆泵主要具有以下几个特点:结构简单、使用安全可靠、使用维护便利、出液持续平均、压力平稳,杂音和振动小,具有自吸能力,但螺杆加工比较麻烦。知识点四、什么是三螺杆泵螺杆泵是一种回转式容积泵,按螺杆多少,可分为单螺杆、双螺杆、三螺杆和多螺杆泵,三螺杆泵,就是有三根螺杆的螺杆泵,包括一根安插在泵缸中的主动螺杆和与其啮合的两根从动螺杆,三根互相啮合的螺杆,在泵缸内按每个导程形成为一个密封腔,造成吸排口之间的密封。知识点五、蠕动泵用途有哪些蠕动泵的任何一个使用场景都是为了处理流体(可以是任何有流动性的液体、也可以是固液混合体),蠕动泵的主要作用就是输送。蠕动泵的输送精度可以达到最高±0.5%,所以可以满足定量输送的需求,也可以满足定量分配的需求。从产品功能的层面来看,蠕动泵的用途主要就是:定量或计量输送,定量或计量分配。所以凡是有定量输送和分配需求的应用场景,都可以选用蠕动泵去满足应用需求。蠕动泵拥有优秀的性能和可靠性,所以应用非常广泛,能满足各种流程的应用需求,包括从实验科研、分析仪器到工业生产的众多领域中,所以蠕动泵的用处非常多,用途也非常广泛,主要有以下领域:1、分析仪器:色谱仪、原子荧光光度计。2、医疗行业:医疗设备和诊断试剂仪器。3、生物制药:包衣机、制粒制丸机、发酵罐、用于纯化、流体输送、分配灌装、高精度配液。4、实验科研:实验室和研究设备。5、食品饮料:现调饮料机、酸奶机、自助售卖机、智能奶茶机、调味品分配添加、啤酒行业。6、环境行业:水质分析仪器、质控仪、水质采样仪器、烟气分析仪。7、印刷包装:输送油墨和涂层溶剂、涂层和粘合剂。8、喷绘油墨:喷绘机、打印机。9、洗涤清洗:洗衣机、洗碗机。10、陶瓷工业:消除气孔、消泡剂的定量添加、陶瓷浆料。11、采矿:传送磨蚀性矿石和尾矿泥浆、过滤机供液、絮凝剂计量和化学品计量、矿石采样、泵送浓密机底流。12、工业应用:沙基胶体的计量、计量含磨蚀性涂层溶液、计量高粘度树脂、化学品再循环、涂料和油漆。13、纸浆和造纸行业:填料、纸浆前处理中的工艺、浆涂层的理想用泵、纸浆和造纸业的水和污水处理、精确的化学品和添加物定量输送、输送染色添加剂。14、家用电器:智能马桶、皂液器、消毒液机、扫地机、拖地机。15、工业机械:研磨机、玻纤纺纱机、光伏生产。
2023-08-17 23:00:171

机械设计制造及其自动化考研科目

机械设计制造及自动化考研初试考政治、外语、数学一和专业课,专业课以报考院校当年公布的招生目录为主,每个学校的研究方向不同,考察内容不同。复试考试内容也与报考的专业方向有关。考研初试政治、英语和数学属于统考科目,政治和英语满分都是100分,数学一满分是150分,专业课满分也是150分,初试总分为500分。机械设计制造及其自动化专业有车辆工程、机械电子工程、材料加工工程、机械制造及其自动化、机械设计及理论等考研方向。机械设计制造及其自动化专业核心知识领域包括:机械设计原理与方法、机械制造工程原理与技术、机械系统中的传动与控制、计算机应用技术等。机械设计制造及其自动化专业毕业生就业主要在机械、汽车、航空航天、能源、化工、电子、材料、冶金等行业领域,从事机械领域内的设计制造、科技开发、应用研究、运行管理和经营销售等方面的工作。
2023-08-17 23:00:161

精密蠕动泵如何设置流量

精密蠕动泵是如何设置流量的?一起来看看小编今天的分享吧。1、根据流量参数来进行查询可以根据泵头和软管的型号,直接得到流量对应的转速。或者查找每转一圈所传输的液量,根据流量计算公式,计算出所需流量对应的转速,再调节转速即得到对应的流量。此方法可以粗略地设置转速及流量,操作简便,常用在很多类型的泵上。2、计算转速与流量的对应关系设定任意转速n1,测定一定时间t1传输的实际液量Q1,根据a=Q1/n1算出流量系数a,再根据公式n2=Q2/a算出所需转速n2,调节转速从而得到所需流量L1。这种方法所得流量精度较高,但操作复杂,适用于对流量和定量精度要求较高的泵,当外部工作条件发生变化或者长时间运行时,需及时进行流量校正,才能保持较高的流量精度。3、直接输入流量参数蠕动泵均采用高清液晶触屏显示及操作,只需先选择泵头及软管型号,然后直接输入流量参数即可。这种方法所得的流量精度高,只需根据提示即可完成,操作便利,智能化程度高。当工作条件发生变化或者长时间运行时,需要及时进行流量校正,才能保持较高的流量精度。泵与流量传感器形成闭环系统,即可全自动实时校正流量,实现长时间稳定的流量传输。拓展小知识知识点一、如何让蠕动泵流量输送变得更为准确些蠕动泵作为一款新型的产业用泵,因为其维护成本低廉,使用时间长等多种优点,越来越收到各行业的欢迎,但因为初次接触不太会使用,导致传输情况达不到自己想要的预期,下面分享一些使用技巧:1、注意吸程和扬程蠕动泵的吸程和扬程是影响流量的重要因素,吸程是指液面水平位置到泵头的垂直高度,而扬程就是泵头到液体出水口的垂直高度。过长的话会让蠕动泵的流量急速衰减。2、液体特性液体的种类和特性对蠕动泵的传输也有影响,尤其是黏稠性液体和含有颗粒物的液体,所以在正式投入生产环境前,可以根据说明书进行流量校准。3、流量大小因为蠕动泵的运行原理,所以不同的流量也会对精度有所影响,例如小流量的泵头和软管,流量就比较精准,但如果达到了YZ35甚至KZ50的泵头和所搭配的软管,那肯定也不会有太高的精准度了,如果对精准度的要求很高的话,小流量的泵头和软管是比较推荐的。4、维护日常使用时,注意软管的损耗,安装时注意软管放置的位置是否正确,这样可以大大延长软管的使用寿命,同样也能保证蠕动泵的流量传输更为精准。知识点二、螺杆泵主要用于什么场合1、螺杆泵因其可变量输送、自吸能力强、可逆转、能输送含固体颗粒的液体等特点,在污水处理厂中,螺杆泵广泛地被使用在输送水、湿污泥和絮凝剂药液方面。2、螺杆泵由于结构和工作特性,能输送高固体含量的介质,流量均匀、压力稳定,低转速时更为明显,由于具有良好的变量调节性,因而可一泵多用,输送不同粘度的介质。3、螺杆泵的安装位置可以任意倾斜,适合输送敏性物品和易受离心力等破坏的物品。知识点三、螺杆泵的工作特点螺杆泵主要具有以下几个特点:结构简单、使用安全可靠、使用维护便利、出液持续平均、压力平稳,杂音和振动小,具有自吸能力,但螺杆加工比较麻烦。知识点四、什么是三螺杆泵螺杆泵是一种回转式容积泵,按螺杆多少,可分为单螺杆、双螺杆、三螺杆和多螺杆泵,三螺杆泵,就是有三根螺杆的螺杆泵,包括一根安插在泵缸中的主动螺杆和与其啮合的两根从动螺杆,三根互相啮合的螺杆,在泵缸内按每个导程形成为一个密封腔,造成吸排口之间的密封。知识点五、蠕动泵用途有哪些蠕动泵的任何一个使用场景都是为了处理流体(可以是任何有流动性的液体、也可以是固液混合体),蠕动泵的主要作用就是输送。蠕动泵的输送精度可以达到最高±0.5%,所以可以满足定量输送的需求,也可以满足定量分配的需求。从产品功能的层面来看,蠕动泵的用途主要就是:定量或计量输送,定量或计量分配。所以凡是有定量输送和分配需求的应用场景,都可以选用蠕动泵去满足应用需求。蠕动泵拥有优秀的性能和可靠性,所以应用非常广泛,能满足各种流程的应用需求,包括从实验科研、分析仪器到工业生产的众多领域中,所以蠕动泵的用处非常多,用途也非常广泛,主要有以下领域:1、分析仪器:色谱仪、原子荧光光度计。2、医疗行业:医疗设备和诊断试剂仪器。3、生物制药:包衣机、制粒制丸机、发酵罐、用于纯化、流体输送、分配灌装、高精度配液。4、实验科研:实验室和研究设备。5、食品饮料:现调饮料机、酸奶机、自助售卖机、智能奶茶机、调味品分配添加、啤酒行业。6、环境行业:水质分析仪器、质控仪、水质采样仪器、烟气分析仪。7、印刷包装:输送油墨和涂层溶剂、涂层和粘合剂。8、喷绘油墨:喷绘机、打印机。9、洗涤清洗:洗衣机、洗碗机。10、陶瓷工业:消除气孔、消泡剂的定量添加、陶瓷浆料。11、采矿:传送磨蚀性矿石和尾矿泥浆、过滤机供液、絮凝剂计量和化学品计量、矿石采样、泵送浓密机底流。12、工业应用:沙基胶体的计量、计量含磨蚀性涂层溶液、计量高粘度树脂、化学品再循环、涂料和油漆。13、纸浆和造纸行业:填料、纸浆前处理中的工艺、浆涂层的理想用泵、纸浆和造纸业的水和污水处理、精确的化学品和添加物定量输送、输送染色添加剂。14、家用电器:智能马桶、皂液器、消毒液机、扫地机、拖地机。15、工业机械:研磨机、玻纤纺纱机、光伏生产。
2023-08-17 23:00:101

特别的什么片段写作文

1. 特别的为题作文精彩片段 那是一次期中考试后,我考了636f70793231313335323631343130323136353331333337623561个很差的分数。 真希望能有一个地缝让我钻进去。一想到妈妈可能会很生气地批评我的情景,我就害怕极了。 放学回到家,我就把试卷藏在了我的书柜里,然后便装作若无其事的样子写作业去了。晚上,妈妈回来了,她见我的神情有些不对劲,就关心地问:“怎么了,哪里不舒服吗?”我结结巴巴地回答:“没……没什么。” 没想到,妈妈真是神机妙算,忽然问我:“对了,考试成绩出来了吗?”我心里一惊!小心地问:“如果我考不好,您会说我吗?”妈妈好像明白了什么,她转身回到房间,拿出来一个盒子给我,说是给我的礼物。我疑惑地接过礼物,百思不得其解。 今天既不是我的生日,又不是什么特殊的日子,为什么要给我礼物呢?妈妈看见我一脸疑惑,笑着说:“只要拆开来看就行了。”于是,我打开了妈妈端着的盒子,竟然发现盒子下面有一个小洞,里面伸出的是妈妈的大拇指,拇指上还画着—个笑脸呢!妈妈又笑了,说:“如果你并没有付出的话,考了120分,妈妈也会生气。 但是只要你努力了,考得不好也没关系,继续努力就会有好成绩,妈妈相信你一定行!学习的路很长很长,妈妈相信我的好孩子能取得最后的好成绩!”我的心情很激动,也一下子开朗了许多。 谢谢您妈妈,您给了我一份最特别的礼物,不是什么物件,却是给我精神上最好的礼物。 2. 以特别的什么为题写一篇作文大全 我是这样的人 我走到镜子前,看着镜子中的他。我笑,他也笑,我朝他耸耸鼻子,他也 毫不客气地向我耸耸鼻子。他叫赵瑾璇,这个名字代表了他的父母对他的期望。 他非常爱读书,经常达到“废寝忘食”的地步,当然,这也是我的爱好。 记不清多少个中午,我因为看书而忘记了妈妈在饭桌上留下的饭菜。有一次, 妈妈让我到厨房拿擀面杖,我拿着书边走边看,到了厨房,我竟拿了一把菜刀, 妈妈吓了一大跳说:“璇璇,你要干什么?快把刀放下啊!”真弄的妈妈哭笑 不得。不管是走路、上厕所,一有点时间就抱起书看。大禹治水三过家门而不 入,诸葛亮神机妙算草船借箭,岳飞精忠报国,文天祥高唱正气歌,郑成功收 复台湾。。。。。。五千年历史长河幅幅壮丽景色印在我的脑子里,小小的我 感到了作为一名中国人的自豪和骄傲。这些震撼人的故事,像一面明镜,告诉 我什么是善,什么是恶,人应该怎样生,路应当怎样行u201eu201e 常言道:人无完人,金无足赤。再完美的人,也有所不足。我也不例外, 读书是优点,但缺点也少不了。我的缺点就是太坚持理念,有时也可以说是太 固执。 我如果认为一件事是对的,而且理由充足,就很少有人改变我的观点。有 一次,老师在课堂上提出了一个问题,经过我的反复思考,终于,我把手举得 高高的。老师叫起我后,回答完问题,老师很快回绝了我,对此,我非常不满, 然后摆出了我的理由,可老师却很不耐烦,甚至非常恼怒u201eu201e 这就是我,我就是这样的人,一个爱读书的人,一个固执的人,一个u201eu201e 的人,u201eu201e 3. 不用很和非常写的作文片段 没看懂。 1、风,悄悄的,把美梦埋葬,枕着一缕馨香恬然入眠。一份无法抑止的忧伤,一份永远痴缠的记忆,翻开一生的惆怅,那些遥远的往事,重复着久违难忘的铭心。蓦然回首,却恍若隔世! 2、俗话说:山不在高,有仙则名,水不在深、有龙则灵。九仙山就是这样一座充满神秘色彩的山。相传八仙过海之前路过此地,发现这里奇如黄山、秀如泰山、险如华山。但是山上光秃秃的,寸草不生,少了一份灵气。于是他们各显神通和山神一起齐心协力把这里变得风景秀丽宜人。人们为了感恩他们的功德就给这座山起名叫九仙山。 3、夜半醒来,凝视着窗台几株残败的菊花,感悟生命的短暂,精神的永恒,人情的冷暖。想到菊花之高洁,真的再没有理由怜闵眼前的这几束斑驳的菊花,人比黄花瘦的痛楚是每个人可以感受到的。 4、他的脸蛋圆圆的,皮肤细白细白的,一对忽闪忽闪的大眼睛,非常有神,红润润的小嘴巴里一颗牙也没有。两只胖乎乎的小手总是往嘴里塞,两只胖乎乎的小脚丫总是踢来踢去。 5、在人世间,爱是多种多样的,但唯有母爱是最朴实无华的。母亲们从来不求子女能回报她什么,只知尽心尽力的为儿女铺出一条道路,让他们走向光明,走向成功。而子女能够幸福,则是母亲最大的满足。 6、白白的栀子花像一颗颗银亮银亮的星星挂满了栀子树的枝头。有的才展开两三片花瓣,躲在绿叶哥哥身后,像一位位羞羞答答的小姑娘;有的花瓣全展开了,像一位美丽的少女;有的还是花骨朵儿,像熟睡的婴儿。 7、她,有着长长的棕色卷发,两弯浓密的眉毛,一双水汪汪的大眼睛,高挺的鼻子下面是可爱的嘴巴。她是负责任的老师,和蔼可亲的老师,又是一位很严厉的老师……几乎每个老师的优点她都包含了,她就是我最爱的老师——五年级的数学老师——袁老师。 8、手与手相握,相互支持,共同努力,创造最大的力量。当灾难来临时,让我握住你的手,共同迎接各种挑战;当灾难发生时,让我握住你的手,鼓励你坚持下去;当灾难过去后,让我握住你的手,一起分享成功的喜悦! 9、夏天,树叶长得葱葱茏茏,藉河风情线上更是热闹非凡,不仅有大人还有小孩,他们有的在给美丽的小金鱼喂鱼食,有的在绿树成荫的石径上锻炼身体,有的在翠绿的草丛中嬉戏,还有的在柳树姑娘的怀抱里聊天乘凉。 10、秋天是九寨沟最为灿烂的季节,五彩斑谰的彩装,如诗如画的翠山,如梦如幻的名水,金黄的桦叶,绛红的枫叶,殷红的野果,万紫千红,彩林倒映在清澈美丽的湖水中,波光粼粼。缤纷的落英在湖光流水间漂浮。悠远的晴空湛蓝碧净,自然中最美丽的景致尽收眼底。 4. 作文特别的什么 [特别的我作文]瞧,我有一头乌黑的头发,瓜子脸,一双圆溜溜的眼睛闪着智慧的光芒,特别的我作文。 一张樱桃小嘴可会说了。看起来显得非常活泼,而很少人知道我也很胆小。 我的胆小简直无药可救。记得小时候看见一只蟑螂爬到我的面前,我便大喊妈妈,妈妈冲过来才替我解了围。 就为这件事,我羞了好几回呢!我喜欢看书、写作文、说英语、画画、还喜欢跳舞、爬山等。我个子不高,显得非常瘦小。 因此,妈妈在我四岁的时候给我报了舞蹈培训班。刚开始,我不怎么喜欢学,渐渐地我喜欢上了舞蹈。 那是因为老师优美的舞姿引诱了我。于是,我便认真学着老师的每一个动作,每天都会在家练上一小会儿。 看,这就是我。一个既胆小又爱跳舞的女孩儿。 我很特别,因为从小我的吉祥二宝就伴随在我的身边。你一定感到很奇怪吧!吉祥二宝?什么东西?那就听我慢慢道来吧。 吉祥第一宝:身高四年级时,小徐把我和小鲁带到一位三年级同学面前,指着我们,对他说:看看这两个人,都像几年级的?三年级同学的打量打量了我和小鲁,说:我看嘛,这个较高一点的像三年级的,这个较矮一点的嘛,像一年级的。我心中一阵得意:呵呵,我还不是班中之最嘛!于是,这其实就以小鲁的尴尬告知了。 而另一起事就没这件事好受了,一起来听听吧。有一次,放学回家,走进电梯,一位阿姨也在里面。 我按了按钮,等待着电梯停在我家门口。这时,阿姨向我打开了话匣子:小朋友你家住在18层啊?嗯。 我答道。好像从来没见过你啊,小朋友?可能只是没有见过而已罢了,我住这儿都有一年多了。 你……上三年级了吧?阿姨问道。我很尴尬的一笑:我……上五年级了,中学生作文《特别的我作文》。 这时电梯正好到了阿姨所住的那个楼层。于是,这起事便以阿姨的离开与我的尴尬而告知了。 吉祥第二宝:近视没配眼镜的时候,上课老师在黑板上写的东西在我的眼里就像是在黑板上抹了一团团粉笔灰。过了一段时间,妈妈才带我去配眼镜。 到眼镜店,先查视力,结果令我和妈妈都大吃一惊:左眼三百度,右眼三百五十度!今年寒假回老家再去查,右眼的度数竟加深到了四百度。唉!我那特别的吉祥二宝,你们什么时候才能离我而去呢?我是女生,漂亮的女生;我是女生,爱哭的女生;我是女生,奇怪的女生……大家一定都听过徐怀钰的《我是女生》这首歌吧!但我不是歌中的那个女生,我不是天使,也不是魔鬼,我就是一个普通但很有个性的女生。 书呆子型女生说我是书呆子可一点也不为过,我是一个标准的书呆子。家里书柜中有一半的书是属于我的。 空的时候,我手里肯定有一本书,忙的时候,我也忙里偷闲的去和书约会一下。有一次,我发现了一本叫《天使在人间》的书,那本书可好看了。 可爱的妞妞,多边的凌子,一下子把我领进了一个奇妙的小说世界。不知不觉,输尿管通过大脑向我发出了信号,我拿着书快步走进了卫生间。 坐在马桶上,我又如饥似渴的读起了小说。好好,快出来!妈妈的叫喊声把我从小说世界拉回了现实生活。 一看钟,呀!我呆了,我足足在卫生间呆了半个小时,我赶紧灰溜溜地跑回了房间。野蛮型女生我的野蛮可是远近闻名的。 女生见了我大呼小叫,男生见了我缩头缩脑。别看我长得瘦骨伶仃的,大拿我可是功力十足啊!按现在网上流行的称呼,我算是个白骨精。 长大了真能成为一个白领、骨干、精英倒也很不错啊。白骨精可是个英雄人物啊!她有非凡的智力,温柔的爱心,飘逸的长发。 虽然这些我都不完全拥有,但至少我有她那敏锐的目光,修长而富有杀伤力的手指,你可不要误解,我的武器不是一般女生的眼泪。正如徐怀钰歌中唱的眼泪不是我的武器。 我的武器是凶猛的犹如排山倒海的气势!福尔摩斯型女生我的目光犹如一把利剑,我的声音好像一缕温柔的音符,我的耳朵好像一架测谎仪,看一看,听一听,辩一辩,就知道好坏真假。这就是我,一个福尔摩斯型的女生。 我的偶像可是大名鼎鼎的福尔摩斯。我的梦想也是当一个像他一样做一名出色的侦探。 虽然不知道福尔摩斯是不是真的,虽然我长大后也不一定真能当侦探,但我依旧崇拜他。因为他能为民除害,有勇有谋,为受害者伸张冤屈,把坏人绳之以法。 生活中的我喜爱动脑,会耍耍小聪明,虽然我现在还不能跟他媲美,但我正在不断努力。后记:我是不是很不像女生啊?我的性格就像个男孩子。 但我坚持我的个性,不想随便去改变它。我就像侦探书一样,充满着悬念和未知,但到最后,肯定是水落石出,光明一片。 5. 作文〈特别的 特别的一天 今天是特别的一天,因为我们班要举行“家长开放日”活动。 今天的活动分为四个板块。首先是家长聆听我们上英语课和数学课。接着,就进入才艺表演。美丽的新疆舞让我们迷醉其间;悦耳的合唱又让我们喜笑颜开;动力十足的自编操更是赢得了观众的热烈掌声!然后,我们开始了感恩父母诗文朗诵会。每位同学都上台尽心地表演了节目,让每位家长都看到了自己儿女的英姿! 在这次活动中,有一个片段最使我感动。那就是全班同学望着父母唱《感恩的心》这首歌的那一个时刻。那时,李老师叫了几位同学给家长说了一句又一句贴心的话语。我们就唱起了《感恩的心》。我们边唱还一边用手势来表达内心的情感。我望着妈妈心中想起了许多许多……小时候,我经常生病。妈妈呢,要上班没时间照顾我。但只要我一生病,妈妈就会不顾一切地赶回来,带我去看病。还有一年级时,我第一次考了一个100分。我很高兴,立刻跑回家,告诉了妈妈。而妈妈高兴了一会儿后说了一句话,“虚心才能成功呀!”虽然我不懂,但还是隐隐约约地感觉到妈妈是在教育我。还有那次……从我呱呱坠地,直至现在,妈妈为我付出了太多太多,无论怎样我也报答不了这份爱。这时,妈妈再也不能控制自己的情感,晶莹的泪水顺着她那红润的脸颊流了下来。这是妈妈感动的泪水,这是妈妈欣慰的泪水,这是妈妈为我辛勤付出多年终于成果的泪水!今天,妈妈终于知道,她的孩子,懂事了!她多年来培养的孩子终于又向成熟跨出了一大步。这泪水中包含着一位母亲的爱呀!我真希望这时候时间能够停止,让我们继续沉浸在爱的包围之中! 这次“家长开放日”活动,促进了老师和家长的沟通,更让我们明白了父母的爱,让我们一起怀揣一颗感恩的之心回报父母的爱吧! 6. 以特别的为题写一篇初二作文 特殊的审判夜晚,微风徐徐,人们都已经酣睡了,一束耀眼的光束从空中射下来,把地球上几十亿人类都带到了宇宙最高法院。 在这里,人类成了被告。“肃静!肃静!”审判官太阳公公严肃地说:“原告大自然,你们说被告犯了伤害罪,有何证据?”“法官大人,”树抢先说,“我们本来生活在森林里,那里草木茂盛,百花盛放。 我整天无忧无虑,听小鸟歌唱,与风儿嬉戏。可如今,我的绝大部分同伴都惨遭人类的杀害。 人类,你知道吗?没有我,哪有新鲜纯净的空气供您们呼吸?又有谁为你们防止沙尘暴和洪水?”树一口气说了这么多,在场的人类都羞愧地低下了头。树刚说完,水便迫不及待地说开了:“我本来生活在河里,身体是晶莹剔透的,可是,人类不断把垃圾、废水都丢进我的家,现在的我,黑乎乎的,臭气熏天,再也没有了往日的风采。” 说完,水嚎啕大哭。树上前不停地安慰她,才渐渐停止了哭泣。 这时,大地母亲站出来说:“我是人类赖以生存的土地,人类对我本应珍爱有加,可事情并非如此。你们在我身上乱采乱挖,我现在已是千疮百孔,遍体鳞伤!”大地的控诉声泪俱下,人们都震惊了,纷纷留下了悔恨的泪水。 许多生物争先恐后,蜂拥而至地向法官大人告状。最后,太阳公公宣判:“人类,你们肆无忌惮地伤害大自然,现在,我宣判:你们必须在以后的所有时间里,竭尽所能,修复大自然!”。 7. 以特别的什么为题作文专题 特别微笑 特别的一个微笑微笑,是每个人都有的表情,但,也是微笑能够让人与人之间多了一层亲切,和谐。而我,直到她,让我真正体会到了微笑的真正意义。 记得那时我刚升初一,比较内向,被分到的那个班里恰巧一个同学也不认识,所以也就没什么朋友,整天就呆呆的坐在自己的座位上,看着其他同学不停地谈论着,交流着。而我恰恰相反,盼望着什么时候可以放学,因为放学了就可以回家了! 正想得出神,一张清秀的娃娃脸挡住了我的视线“嗨,想什么呢,怎么出神。“她面带微笑的说着。我原本不想理她的,觉得自己本来就是一个人,多一个人和少一个人在身边都无所谓。但是,当我看到她和我说话时是那么亲切,像极了本身就是一对好朋友的对话时,我突然有种想要主动回应她的冲动。但,始终被我自己的本性“内向”给打败了,我怔怔地回答:“额。.没什么。”我以为她会识趣地离开,但是她没有。“嘿!作为你的新同学我都还不知道你叫什么呐!”她一只手拖着腮帮笑着问。 “额。..你叫我玲玲叫可以了。”“那好,待会吃饭你和我一起吧,记得别先走哈!”就这样,我们慢慢的变成了好朋友,虽说是好朋友,但永远是她的开朗乐观牵引着我,让我慢慢学着去开阔主动与人交流。那天,我们吃着饭,我突然想到个问题:“对了,记得我们第一次见面的时候,明明我们都不认识对方,而你却是笑着和我说话的呢?” “你知道吗,微笑是人与人交流的第一步呐,你看,事实证明啦,我和你笑着搭讪,你回应我的机会才大啊!” 她耐心的解释着我这个无聊的问题。后来,我们的关系自然而然的越来越好了,因为她的微笑让我不怕尴尬,也因为她的微笑让我学会如何去与人沟通,也让我们的友谊更近一层。 8. 特别的什么作文四年级 特别的礼物作文400字姥姥去香港旅游,回来时送给我一件特别的礼物——一朵金灿灿的紫荆花。 这是一朵用金色纸板做的花,花的底座是一小块大理石,上面有很多精美的图案,有盛开的花儿,有可爱的元宝,还有圆圆的月亮……紫荆花的茎粗粗的,也是金色的,花朵特别好看,五瓣花盛开,意寓香港经济繁荣,蒸蒸日上。我的这朵紫荆花花蕊会变颜色,只要按下底座的一个按钮,它一会儿是红色,一会儿是白色,一会儿又是绿色,一会儿还是紫色,变幻迷离,妙不可言。 而同时,还会响起威武雄壮的国歌呢!旁侧还有一面小旗,写着:H.K的字样,那是“香港”英文字母的缩写。听姥姥说,紫荆花是香港区徽图案,也是香港的象征。 它是香港回归时设计的,代表五福临门:财位、健康、官职、事业、学业五福。我真希望台湾也早日回到祖国怀抱,那样我就又有一样回归纪念品了。
2023-08-17 23:00:071

MCLAREN是什么车

Mclaren是一个来源于美国的超级跑车生产商,由知名F1赛车手布鲁斯·迈凯伦于1966年开创,总公司设在美国沃金。迈凯伦最具象征性的汽车有迈凯伦F1、迈凯伦MP4-12C、及其迈凯伦SENNA。不容易造成的F1车手并不是好车手汇总布鲁斯·迈凯伦的一生造就,他既在F1比赛场上取得过数次冠军,也对赛车工作拥有卓越贡献。但假如要给他们写一份介绍,他的奉献必然是笔酣墨饱,而它的造就必然是轻描淡写。1959年,布鲁斯·迈凯伦初次参与F1的比赛,凭着精湛的驾车技巧,常常位居在得分榜上,而且最后得到了这一_季的总冠军,与此同时也是这一比赛最年轻漂亮的冠军。1960年,布鲁斯·迈凯伦挑选了退伍,但他依然在赛车行业出现,其开创了布鲁斯·迈凯伦赛车有限责任公司,逐渐生产制造自个的赛车。(布鲁斯·迈凯伦与他设计方案的赛车)1966年,迈凯伦开创了迈凯伦F1运输队,迄今迈凯伦共得到8次生产商总冠军,更主要的是,迈凯伦塑造了很多F1热血传奇车手,包含艾默生·菲蒂帕迪、埃尔顿·赛纳、米卡·哈基宁和刘易斯·汉米尔顿,这种车手一共得到了12次车手冠军。所以说布鲁斯·迈凯伦针对F1比赛的奉献,要远高于他自己在F1比赛场上获得的造就。(1988年、1990年、1991年F1全球冠军,埃尔顿·赛纳)迈凯伦最令人尊敬的车系-MclarenF12005年,柯尼塞格CCR超级跑车摆脱了封尘10年时间的全世界更快批量生产超级跑车纪录,这一霸榜10年的纪录,便是由迈凯伦F1在1994年造就的。迈凯伦F1由戈登·默里承担产品研发,他将很多F1赛车的技术性融进了到迈凯伦F1上,整车选用了十分多的碳纤维材料、铝合金、压铸铝原材料,就连汽车底盘全是碳纤维材料生产的,整车的结构简单明了的风阻仅有0.32。那时候迈凯伦F1运输队的模块经销商是广州本田,那时候广州本田的汽车发动机但是非常厉害,并且广州本田仍在那时候发布了NSX,因此戈登·默里曾期待迈凯伦F1能配用本田发动机。但广州本田拒绝了,最后迈凯伦F1配用了来源于宝马五系的6.1升V12自吸汽车发动机。这台汽车发动机也是强大,身型紧密净重仅有256KG,却能够_出627匹大马力,让迈凯伦F1最后创出了最速批量生产超级跑车的记载并维持了长达10年。迈凯伦F1还有一个较为非常的地区,那便是车里合理布局选用了12的方式,前座安全驾驶位坐落于中间,后排座仅仅含意一下有一点空间。迈凯伦F1只制造了107辆,特斯拉汽车的首席总裁埃隆马斯克就有着一辆迈凯伦,憨豆先生的饰演者罗温·艾金森也是迈凯伦买车人。迈凯伦在我国伴随着我们中国人愈来愈颇具,超级跑车在我国的需求持续扩大,2013年,迈凯伦公布宣布登录我国市场,最先产生的汽车有迈凯伦P1、迈凯伦12C/12CSpider。现阶段,迈凯伦在我国北京市、上海市、广州市、成都市等区域建立了受权代理商,而截止至2018年,迈凯伦在我国的销售量早已提升了1000辆。百万购车补贴
2023-08-17 23:00:071

苹果14midnight什么意思

手机午夜暗色配色。截止2022年10月20日,苹果14midnight的意思就是苹果14手机手机午夜暗色配色,这种颜色是非常靓的,受到了很多用户的称赞。iPhone14,是苹果推出的智能手机,该机型采用刘海屏设计,共有5种潮流配色,产品搭载运动模式,配备5核图形处理器的A15仿生芯片。
2023-08-17 23:00:041

离心式风机的结构和工作原理是什么?

离心风机的结构:离心式风机主要由电机,叶轮、蜗壳、进气箱、进风口,扩压器、导风圈,轴及轴承等部件组成,其中风轮由叶片、前盘、后盘及轮毂所构成。 2.离心风机的工作原理 当风机的风轮被电机经轴带动旋转时,充满叶片之间的气体在叶片的推动下随之高速转动,使得气体获得大量能量,在惯性高心力的作用下,甩往叶轮外缘,气体的压能和动能增加后,从蜗形外壳流出,叶轮中部则形成负压,在大气压力的作用下源源不断吸入气体予以补充。
2023-08-17 23:00:043

渣浆泵是什么类型的泵

渣浆泵属于什么类型的泵呢?一起到文中来看看吧!渣浆泵是一种大型的离心泵,主要的任务是输送含有磨蚀性的固体颗粒的介质,是冶金、电厂、矿山、煤炭等行业中不可缺失通用型设备。渣浆泵从原理上讲是属于离心泵的一种,是渣浆泵在工作中依靠泵体内叶轮的旋转带动浆液产生的离心力,使其能量增加而进行输送。渣浆泵的工作原理是什么前文已经简单提到,渣浆泵从原理上讲是属于离心泵的一种,那么你知道渣浆泵的工作原理是什么吗?渣浆泵的基本结构是由叶轮,泵壳,轴,轴承,及托架,轴封等部分组成。动力一般是联接电机,可以联轴器直联,也可以有皮带,皮带轮来边接。原理就是当叶轮快速运转时,叶轮的叶片促使浆液很快的旋转,旋转着的浆液在离心力的作用下从叶轮中飞出,泵腔里的液体被抛出后,叶轮的中心部分形成真空区,浆液在大气压力或水压的作用下通过管网压到了进料管内,这样一直循环,就可以实现连续供料,从而达到工况设计要求的扬程和流量。现在渣浆泵的进料方式多采用倒灌式安装,即浆体的液位要高于泵的入口。以上就是渣浆泵是什么类型的泵以及渣浆泵的工作原理是什么的内容介绍,希望帮助到您,主页还有很多相关知识,欢迎点击查看哦。拓展小知识知识点一、微型齿轮油泵的优点1、电机寿命长:密封性更强,细节展现品质,寿命长效率高;2、全铜线线圈:冷轧性矽钢片800#,温升低,效率高动力足,使用寿命长;3、不锈钢接轴:加工成型操作平稳,表面防潮、防锈处理;4、滚珠轴承:大载荷轴承,结构简单,使用方便,防尘性能好;5、定制合金密封:304不锈钢弹簧,强度高,密封小,阻力小,防沙;6、高品质齿轮:高温淬火提高合金硬度强度,经久耐用。知识点二、螺杆泵主要用于什么场合1、螺杆泵因其可变量输送、自吸能力强、可逆转、能输送含固体颗粒的液体等特点,在污水处理厂中,螺杆泵广泛地被使用在输送水、湿污泥和絮凝剂药液方面。2、螺杆泵由于结构和工作特性,能输送高固体含量的介质,流量均匀、压力稳定,低转速时更为明显,由于具有良好的变量调节性,因而可一泵多用,输送不同粘度的介质。3、螺杆泵的安装位置可以任意倾斜,适合输送敏性物品和易受离心力等破坏的物品。知识点三、螺杆泵的工作特点螺杆泵主要具有以下几个特点:结构简单、使用安全可靠、使用维护便利、出液持续平均、压力平稳,杂音和振动小,具有自吸能力,但螺杆加工比较麻烦。知识点四、什么是三螺杆泵螺杆泵是一种回转式容积泵,按螺杆多少,可分为单螺杆、双螺杆、三螺杆和多螺杆泵,三螺杆泵,就是有三根螺杆的螺杆泵,包括一根安插在泵缸中的主动螺杆和与其啮合的两根从动螺杆,三根互相啮合的螺杆,在泵缸内按每个导程形成为一个密封腔,造成吸排口之间的密封。知识点五、蠕动泵用途有哪些蠕动泵的任何一个使用场景都是为了处理流体(可以是任何有流动性的液体、也可以是固液混合体),蠕动泵的主要作用就是输送。蠕动泵的输送精度可以达到最高±0.5%,所以可以满足定量输送的需求,也可以满足定量分配的需求。从产品功能的层面来看,蠕动泵的用途主要就是:定量或计量输送,定量或计量分配。所以凡是有定量输送和分配需求的应用场景,都可以选用蠕动泵去满足应用需求。蠕动泵拥有优秀的性能和可靠性,所以应用非常广泛,能满足各种流程的应用需求,包括从实验科研、分析仪器到工业生产的众多领域中,所以蠕动泵的用处非常多,用途也非常广泛,主要有以下领域:1、分析仪器:色谱仪、原子荧光光度计。2、医疗行业:医疗设备和诊断试剂仪器。3、生物制药:包衣机、制粒制丸机、发酵罐、用于纯化、流体输送、分配灌装、高精度配液。4、实验科研:实验室和研究设备。5、食品饮料:现调饮料机、酸奶机、自助售卖机、智能奶茶机、调味品分配添加、啤酒行业。
2023-08-17 23:00:021