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由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键,在碱性溶液中,双缩脲试剂能与蛋白质反应,形成紫色络合物.因此蛋白质的检测作用的实验原理是:双缩脲试剂与蛋白质呈现紫色反应。
用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/mL。
双缩脲试剂检测蛋白质评价:
优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好, 双缩脲试剂可以长期保存( 若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制)。
缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。
以上内容参考:百度百科-双缩脲试剂
双缩脲试剂鉴定蛋白质的原理
紫色络合物分子结构式在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与铜离子(Cu2+)作用,形成紫色络合物(该物质的分子结构式见图),该反应即双缩脲反应。 双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的,而为氨基酸所没有的一种颜色反应。一般分子中含有两个氨基甲酪基(即肽键:-CO-NH-)的化合物与碱性 铜溶液作用,就会形成紫色或蓝紫色络合物。 注:除-CO-NH-有此反应外,(-CONH2-)、(-CH2-)、(-NH2-)、(-CS-CS-NH2)等基团亦有此反应。2023-08-10 04:51:343
双缩脲试剂鉴别蛋白质的原理?!
肽键与双缩脲试剂反应生成紫色络合物2023-08-10 04:52:176
蛋白质的双缩脲反应原理是什么
双缩脲反应是指: 具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与铜的一价离子反应,生成红紫色的络合物的化学反应。 所有的蛋白质均有此显色反应,双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色显色反应的试剂,它是氢氧化钠和硫酸铜两种溶液组成的。 在双缩脲反应的实验过程中,先在含蛋白质的溶液中加入等体积的氢氧化钠溶液,混合均匀后,再滴几滴硫酸铜溶液,即先后加入含蛋白质的溶液,混合液中就没有铜的二价离子,显色反应就不会发生。2023-08-10 04:52:421
双缩脲检验蛋白质原理,实验现象是什么
蛋 白质的鉴定原理 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液。在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。2023-08-10 04:52:512
蛋白质浓度测定 双缩脲法实验原理?
蛋白质浓度测定 双缩脲法原理 将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而形成双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2). 双缩脲在碱性溶液中与Cu2+结合生成紫色络合物,这一呈色反应称为双缩脲反应.蛋白质分子中的肽键类似双缩脲结构,故亦能呈双缩脲反应.2023-08-10 04:52:581
双缩脲试剂为什么能鉴别蛋白质
鉴定蛋白质的原理是:在碱性条件下,蛋白质与CuSO4发生络合反应,产生紫色络合物。所以要先加NaOH,再加CuSO4.2023-08-10 04:53:094
双缩脲试剂鉴定蛋白质的原理
紫色络合物分子结构式在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与铜离子(Cu2+)作用,形成紫色络合物(该物质的分子结构式见图),该反应即双缩脲反应。 双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的,而为氨基酸所没有的一种颜色反应。一般分子中含有两个氨基甲酪基(即肽键:-CO-NH-)的化合物与碱性 铜溶液作用,就会形成紫色或蓝紫色络合物。 注:除-CO-NH-有此反应外,(-CONH2-)、(-CH2-)、(-NH2-)、(-CS-CS-NH2)等基团亦有此反应。2023-08-10 04:53:191
蛋白质浓度测定 双缩脲法实验原理?
Bradford法测定蛋白质浓度(一)实验原理双缩脲法(Biuret法)和Folin—酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(uf06cmax),由465nm变为595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。在595nm下测定的吸光度值A595,与蛋白质浓度成正比。Bradford法的突出优点是:(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1uf06dg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。(2)测定快速、简便,只需加一种试剂。完成一个样品的测定,只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程,大约只要2分钟即可完成,其颜色可以在1小时内保持稳定,且在5分钟至20分钟之间,颜色的稳定性最好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。(3)干扰物质少。如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。2023-08-10 04:53:411
双缩脲与蛋白质反应的原理是什么呢?
双缩脲就是缩二脲,就是两个尿素分子缩合,脱去一分子氨所形成的化合物,结构简式: (也可写成“NH2CONHCONH2”),双缩脲可以和硫酸铜反应,生成紫色的物质, 可能是由于双缩脲分子中的肽键结构所引起的,肽键的氮原子会和Cu2+离子生成紫色络合物,因为蛋白质中也有肽键结构,所以也会发生此类反应,我们称这种含有肽键结构的化合物与硫酸铜溶液发生的显紫色的反应叫做“双缩脲反应”. 也就是说,分子中只要含有肽键,一般都会发生这种特征的紫色反应. 蛋白质中的肽键与铜离子络合的示意图: 不是双缩脲和蛋白质反应,而是蛋白质和铜离子的反应的类别,与双缩脲和铜离子的反应类别相同,都是“双缩脲反应”,生物试验也没给咱讲清楚,他说的双缩脲试剂中根本就没有双缩脲,而是0.1g/mL的氢氧化钠(双缩脲试剂A)和0.01g/mL的硫酸铜(双缩脲试剂B),在使用时是先向蛋白质溶液中加入A,震荡摇匀后,加入B. 至于氢氧化钠是强碱、硫酸铜是重金属盐,都可使蛋白质变性,这个问题应该不影响紫色反应,蛋白质变性的本质是空间结构遭到破坏,使其沉淀,失去生理活性,但是肽键结构、肽链的氨基酸顺序一般不被破坏. 强酸或强碱破坏蛋白zhi的一级结构,应该是因为多肽在强酸或强碱的作用下可以发生水解,但是不会说完全都水解掉了(常温下速率也不会很快),特别是在酸的催化下,水解是可逆的.事实就是产生了紫色反应,该反应确实发生了,我们不能否认事实啊.但也不能否认氨基酸也可以和铜离子络合,但生成的络合物不一定是紫色络合物,要么书上怎么说双缩脲反应是特征反应呢?2023-08-10 04:53:481
蛋白质双缩脲反应原理
双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物,将尿素加热到180度,则两分子尿素缩合成一分子双缩脲,并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。(生物化学书上的答案)2023-08-10 04:53:571
双缩脲试剂为什么能鉴别蛋白质
蛋白质是多肽化合物,含有两个或两个以上肽键。 双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1克每毫升氢氧化钠或氢氧化钾、0.01克每毫升硫酸铜配制。 具有两个或者两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。 蛋白质的肽键在碱性溶液中与双缩脲试剂中的二价铜离子反应,生成紫红色络合物。 因此,呈蓝色的双缩脲试剂可以通过颜色是否变成紫红色来鉴别蛋白质。2023-08-10 04:54:071
双缩脲试剂,斐林试剂检验蛋白质和还原糖的原理是什么?求答案
双缩脲试剂与蛋白质会出现紫色反应,反应本质是铜离子与蛋白质中的双缩脲结构结合形成了一种紫色络合物斐林试剂的成分是氢氧化铜悬浊液,能够被还原糖中的还原性基团醛基还原成氧化亚铜这种砖红色物质,形成沉淀2023-08-10 04:54:172
双缩脲试剂的作用原理
蛋白质中的肽键在碱性溶液中可以和二价铜离子产生紫红色反应。2023-08-10 04:54:272
蛋白质的检测必须依次加入双缩脲试剂,其原因是?
双缩尿遇蛋白质会变成紫色,这样可以检测蛋白质的存在。试剂的顺序问题,先加硫酸铜,后加氢氧化钠的话.由于硫酸铜为重金属盐,能使蛋白质变性,影响检测.2023-08-10 04:54:371
双缩脲试剂检验蛋白质的原理,清楚一点。
双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能够以一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。2023-08-10 04:54:541
双缩脲试剂与蛋白质反映的原理是甚么
具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。因此,看到颜色变化就能鉴别蛋白质2023-08-10 04:55:031
双缩脲试剂和蛋白质反应的实质,是那一部分的反应
具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色找百度大神神马都会告诉你的2023-08-10 04:55:232
双缩脲试剂检验蛋白质的原理和条件
原理是CuSO4在碱性条件下与具有两个肽键以上化合物反应生成络合物,显紫色。不需要加热进行。注意双缩脲试剂和斐林试剂的区别。2023-08-10 04:55:342
双缩脲试剂与蛋白质反应原理,??
硫酸铜在碱性条件下与蛋白质中的肽键结合2023-08-10 04:55:423
双缩脲法测定蛋白质的含量实验分析与讨论怎么写?
一 实验目的二 实验原理,实验流程以及装置图三 实验设备及材料四 实验方法步骤及注意事项2023-08-10 04:55:543
双缩脲试剂为什么能鉴别蛋白质
双缩脲试剂是由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.01g/mL的CuSO4组成的而从以上比例可看出碱是过量的 是因为双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性条件下与二价铜离子结合成了紫色的络合物而蛋白质的鉴定实际上是因为肽健(-CO-NH-)与二价铜离子在碱性条件下结合成了紫色的络合物因为肽健与双缩脲结构相似2023-08-10 04:56:055
用双缩脲试剂检测蛋白质,滤液是紫色吗?(我知道有紫色络合物)
是的2023-08-10 04:56:263
双缩脲法测定蛋白质,是由于蛋白质有什么, 解释一下原因
是由于蛋白质结构中有两个以上肽键,一般含两个或以上肽键结构的物质都有该反应.2023-08-10 04:56:342
双缩脲试剂的作用原理
斐林试剂和双缩脲试剂区别1、试剂的浓度和配制方法不同斐林试剂:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液;乙液:0.05g/mL的溶液。使用前临时配制,在2mL的甲液中滴入4滴~5滴乙液,振荡使混合均匀后即可。双缩脲试剂:A液:0.1g/mL的NaOH溶液;B液:0.01g/mL的溶液。分别配制好A液和B液即可。2、试剂的作用和鉴定原理不同斐林试剂:作用:可鉴定可溶性还原糖。原理:甲液和乙液混合后产生沉淀,与含醛基(—CHO)的可溶性还原糖,在加热条件下反应,将还原为砖红色的沉淀。双缩脲试剂:作用:可鉴定蛋白质溶液。原理:在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲()能与反应,形成紫色络合物。由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键(—CO—NH—),因此,蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色。3、试剂的使用方法不同斐林试剂:使用时现配现用,要水浴加热。如果斐林试剂放置一段时间,因沉淀在溶液底部而无法使用。使用时,甲液和乙液不可分别加入到待测液中,否则,待测液(苹果组织样液)中的有机酸会中和NaOH,使产生的不足而影响鉴定。双缩脲试剂:使用时,双缩脲试剂A液和双缩脲试剂B液要分别先后加入到待测液中,不需要加热。双缩脲试剂A液和双缩脲试剂B液不可以混合后再加入待测液。如先混合,则会产生沉淀而无产生。加入的双缩脲试剂B液()也不能过量,否则蓝色的会遮盖产生的紫色。4、反应中出现的颜色不同斐林试剂鉴定可溶性还原糖,出现的颜色变化为:浅蓝色→棕色→砖红色。待测液加入刚配制的斐林试剂,溶液是浅蓝色;水浴加热后,一部分被还原为砖红色的,溶液呈现两种颜色的混合色——棕色;随着反应的完成,全部被还原为,溶液呈砖红色。双缩脲试剂鉴定蛋白质,出现的颜色变化为:无色→浅蓝色→紫色。加入双缩脲试剂A液,溶液无色;再加入双缩脲试剂B液,有形成,溶液呈浅蓝色;振荡均匀后,反应完成,溶液呈紫色希望我的答案,会个你有帮助,记住我,逆龙志2023-08-10 04:56:441
生化实验双缩脲法测定血清总蛋白质中的公式怎么推出来的
双缩脲反应的原理双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2)在碱性溶液中可与铜离子产生紫红色的络合物,这一反应称为双缩脲反应双缩脲反应主要涉及肽键、尿素中含有类似肽键的结构、可与铜离子产生紫红色的络合物双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液; 双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液. 双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在. 而尿素中不含蛋白质,所以尿素不能与双缩脲试剂反应2023-08-10 04:57:071
高中生物所有有关物质鉴定实验所用的试剂、结果(最好说出显什么颜色)。
1 斐林试剂检测可溶性还原糖生成砖红色沉淀注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热。2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。3 双缩脲试剂蛋白质+双缩脲试剂→紫色注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热)。4 碘液检测淀粉原理:淀粉+碘液→蓝色注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉5 甲基绿DNA+甲基绿→绿色6 吡罗红原理:RNA+吡罗红→红色7 台盼蓝使死细胞染成蓝色原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。 8 健那绿原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。9 重铬酸钾原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色。10 溴麝香草酚蓝水溶液原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。11 龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色。12 吲哚酚试剂原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色。13 刚果红检测纤维素分解菌原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。2023-08-10 04:57:292
如何鉴定蛋白质简写出原理过程该过程双缩脲试剂应如何使用?
1.原理蛋白质和双缩脲试剂发生紫色反应。2.过程(1)向试管加2毫升待测样液。(2)向试管加双缩脲试剂A液1毫升,摇匀。(3)向试管加双缩脲试剂B液4滴,摇匀。(4)观察试管中出现的颜色变化。3、双缩脲试剂使用先加A液,摇匀后,再加B液。A液:质量浓度0.1g/mL的氢氧化钠溶液。B液:质量浓度0.01g/mL的硫酸铜溶液。2023-08-10 04:57:381
用双缩脲试剂检验蛋白质,生成的紫色物质是什么啊?原理是什么?
蛋白质只有在双缩脲试剂A的强碱环境下,肽健才能与双缩脲试剂B中的铜离子结合生成紫色络合物.2023-08-10 04:57:481
双缩脲法的原理
发生络合反应。2023-08-10 04:57:572
双缩脲试剂测定蛋白质含量步骤?
原理:蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。双缩脲反应是指蛋白质在碱性溶液中与二价铜离子结合,生成紫红色络合物的反应。其颜色的深浅与蛋白质的含量成正比,而与蛋白质的相对分子质量和氨基酸的组成无关。操作方法,1、标准曲线的制作:于试管中分别加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml的1%标准酪蛋白溶液,用水补足1ml。然后各加入4ml双缩脲试剂,充分摇匀在室温下反应30min,于540nm波长下测定光吸收率。以酪蛋白的含量为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。2、样品测定取样品溶液1ml加入4ml双缩脲试剂,摇匀后在室温下反应30min,测定光吸收值,从标准曲线查出蛋白质含量。生物帮上面有详细的介绍,Z保护性氨基酸单体及衍生物http://product.bio1000.com/101195/2023-08-10 04:58:061
双缩脲试剂鉴别蛋白质的原理?!斐林试剂鉴别还原糖的原理?!
1:双缩脲试剂与蛋白质呈紫色反应 ,第2个我不是很清楚2023-08-10 04:58:162
血清总蛋白测定 双缩脲比色法的原理 有谁知道?
蛋白质在碱性溶液中与硫酸铜作用形成紫蓝色络合物的呈色反应。在540nm 波长处有最大吸收。可用于蛋白质的定性和定量检测。2023-08-10 04:58:252
双缩尿检验蛋白质 两个试剂为什么不一起加,而分开加?
首先,是“双缩脲”而不是“双缩尿”,从化学角度看这是两种完全不同的试剂:双缩尿化学式是NH(CONH2)2,又叫缩二脲、氨基甲酰脲,是一种有毒物质;而双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成的:双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液. 分开加的原因: 双缩脲检测蛋白质的原理是具有两个或两个以上肽键的化合物和双缩脲试剂B中的Cu2+反应产生紫色反应.蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物.而这些反应的前提就是,必须在碱性溶液中才能反应,所以要先加入双缩脲试剂A创造碱性环境. 假如一块加入,那双缩脲试剂A和双缩脲试剂B就会发生反应: 2NaOH+CuSO4=Na2SO4+Cu(OH)2(沉淀)(农民朋友配制波尔多液的反应) 没有了Cu2+,也就不能检测蛋白质了. 生物其实和化学还是有一定关系的,学会学科间的融会贯通有时候也是件很有意思的事,是吧? 加油!2023-08-10 04:58:321
蛋白质能使双缩脲试剂变色 那氨基酸呢 使双缩脲试剂变色的原理是什么 具体怎么反应
氨基酸不能与之反应 要使双缩脲试剂变色分子中要含有肽键2023-08-10 04:58:432
双缩脲法测蛋白质中该如何校正实验结果
在碱性溶液中,双缩脲(H2N-CO-NH-CO-NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以上酰胺基(—CO-NH2),或与此相似的基团[如—CH2-NH2,—CS-NH2,—C(NH)NH2]的任何化合物,无论这类基团直接相连还是通过一个碳或氮原子间接相连,均可发生上述反应。蛋白质分子含有众多肽键(—CO-NH—),可发生双缩脲反应,强度在一定浓度范围内与肽键数量即与蛋白质含量成正比,可用比色法测定蛋白含量。测定范围为1~10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有:硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。此法的优点是较快速,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。三、实验试剂和器材[试剂]1.双缩脲试剂: 取CuSO4·5H20(c.P.)1.5g和酒石酸钾钠(c.P.)6.0g以少量蒸馏水溶解,第 2 页再加2.5mol/L NaOH溶液300ml,KI 1.0g,然后加水至1000ml。棕色瓶中避光保存。长期放置后若有暗红色沉淀出现,即不能使用。2.标准蛋白质溶液: 用标准的结晶牛血清清蛋白(BSA)或标准酪蛋白,配制成10g/L的标准蛋白溶液,可用BSA浓度1g/L的A280为0.66来校正其纯度。如有需要,标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,计算出其纯度,再根据其纯度,称量配制成标准蛋白质溶液。牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制,酪蛋白用0.05mol/L NaOH配制。2023-08-10 04:59:032
双缩脲试剂检测蛋白质原理是什么?
由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键,在碱性溶液中,双缩脲试剂能与蛋白质反应,形成紫色络合物.因此蛋白质的检测作用的实验原理是:双缩脲试剂与蛋白质呈现紫色反应。用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/mL。双缩脲试剂检测蛋白质评价:优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好, 双缩脲试剂可以长期保存( 若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制)。缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。以上内容参考:百度百科-双缩脲试剂2023-08-10 04:59:241
蛋白质与双缩脲试剂的检测原理是什么?
双缩脲试剂检测蛋白质原理是双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度。双缩脲法测定蛋白质的优缺点:优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好,双缩脲试剂可以长期保存。缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。2023-08-10 04:59:391
双缩脲试剂是如何检测蛋白质?
双缩脲试剂检测蛋白质原理是双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度。双缩脲法测定蛋白质的优缺点:优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好,双缩脲试剂可以长期保存。缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。2023-08-10 04:59:521
双缩脲反应原理是什么?
双缩脲试剂检测蛋白质原理是双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度。双缩脲法测定蛋白质的优缺点:优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好,双缩脲试剂可以长期保存。缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。2023-08-10 05:00:061
双缩脲试剂检测蛋白质原理是什么?
双缩脲试剂检测蛋白质原理是双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度。双缩脲法测定蛋白质的优缺点:优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好,双缩脲试剂可以长期保存。缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。2023-08-10 05:00:211
双缩脲试剂检测蛋白质原理是什么?
双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物,将尿素加热到180度,则两分子尿素缩合成一分子双缩脲,并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。该原理高中阶段不要求掌握,知道反应现象即可。双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1 g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01 g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾,会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。2023-08-10 05:00:361
双缩脲试剂检测蛋白质原理是什么?
双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物,将尿素加热到180度,则两分子尿素缩合成一分子双缩脲,并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。该原理高中阶段不要求掌握,知道反应现象即可。双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1 g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01 g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾,会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。2023-08-10 05:00:531
双缩脲试剂的反应原理是什么?
答:双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1g/mL 氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。会遇到蛋白质显紫色。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。双缩脲试剂中真正起作用的是 硫酸铜,而 氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾,会延长试剂的使用寿命。 酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。[1]需要注意的是,能与双缩脲试剂发生紫色反应的化合物分子中至少含有两个肽键。因此,二肽无法用它来检验。一、优点:双缩脲法测定蛋白质测定范围能够是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好, 双缩脲试剂可以长期保存( 若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制)。二、缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。 干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。2023-08-10 05:01:231
双缩脲试剂检测蛋白质的原理
你好,双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物,将尿素加热到180度,则两分子尿素缩合成一分子双缩脲,并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。该原理高中阶段不要求掌握,知道反应现象即可希望有所帮助,不懂可以追问,有帮助请采纳2023-08-10 05:01:331
双缩脲试剂可以鉴定蛋白质的原因
A具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应蛋白质中有-CONH-基2023-08-10 05:01:545
双缩脲与蛋白质反应的原理是什么呢?
双缩脲就是缩二脲,就是两个尿素分子缩合,脱去一分子氨所形成的化合物,结构简式:(也可写成“NH2CONHCONH2”),双缩脲可以和硫酸铜反应,生成紫色的物质,可能是由于双缩脲分子中的肽键结构所引起的,肽键的氮原子会和Cu2+离子生成紫色络合物,因为蛋白质中也有肽键结构,所以也会发生此类反应,我们称这种含有肽键结构的化合物与硫酸铜溶液发生的显紫色的反应叫做“双缩脲反应”。也就是说,分子中只要含有肽键,一般都会发生这种特征的紫色反应。蛋白质中的肽键与铜离子络合的示意图: 不是双缩脲和蛋白质反应,而是蛋白质和铜离子的反应的类别,与双缩脲和铜离子的反应类别相同,都是“双缩脲反应”,生物试验也没给咱讲清楚,他说的双缩脲试剂中根本就没有双缩脲,而是0.1g/mL的氢氧化钠(双缩脲试剂A)和0.01g/mL的硫酸铜(双缩脲试剂B),在使用时是先向蛋白质溶液中加入A,震荡摇匀后,加入B。至于氢氧化钠是强碱、硫酸铜是重金属盐,都可使蛋白质变性,这个问题应该不影响紫色反应,蛋白质变性的本质是空间结构遭到破坏,使其沉淀,失去生理活性,但是肽键结构、肽链的氨基酸顺序一般不被破坏。强酸或强碱破坏蛋白zhi的一级结构,应该是因为多肽在强酸或强碱的作用下可以发生水解,但是不会说完全都水解掉了(常温下速率也不会很快),特别是在酸的催化下,水解是可逆的。事实就是产生了紫色反应,该反应确实发生了,我们不能否认事实啊。但也不能否认氨基酸也可以和铜离子络合,但生成的络合物不一定是紫色络合物,要么书上怎么说双缩脲反应是特征反应呢?2023-08-10 05:02:111
双缩脲试剂鉴定蛋白质的原理是什么?
紫色络合物分子结构式在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与铜离子(Cu2+)作用,形成紫色络合物(该物质的分子结构式见图),该反应即双缩脲反应。 双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的,而为氨基酸所没有的一种颜色反应。一般分子中含有两个氨基甲酪基(即肽键:-CO-NH-)的化合物与碱性 铜溶液作用,就会形成紫色或蓝紫色络合物。 注:除-CO-NH-有此反应外,(-CONH2-)、(-CH2-)、(-NH2-)、(-CS-CS-NH2)等基团亦有此反应。2023-08-10 05:02:201
双缩脲试剂使蛋白质显紫色的原理是什么?
你好,双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物,将尿素加热到180度,则两分子尿素缩合成一分子双缩脲,并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。该原理高中阶段不要求掌握,知道反应现象即可希望有所帮助,不懂可以追问,有帮助请采纳2023-08-10 05:02:292
双缩脲试剂,斐林试剂检验蛋白质和还原糖的原理是什么?
双缩脲试剂与蛋白质会出现紫色反应,反应本质是铜离子与蛋白质中的双缩脲结构结合形成了一种紫色络合物斐林试剂的成分是氢氧化铜悬浊液,能够被还原糖中的还原性基团醛基还原成氧化亚铜这种砖红色物质,形成沉淀2023-08-10 05:02:392
双缩脲与蛋白质反应的原理是什么呢?
强酸强碱只会使蛋白质发生变性,即改变空间结构,不会破坏其内部,主要是肽键和双缩尿反应有紫色产生2023-08-10 05:02:482