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DJ satomi - waves 歌词

2023-08-04 19:18:59
共1条回复
南yi

Artist:dj satomi Songs Title:waves Like a rush on the beach At the end of the day When the sand is going to be cold under your way The season fades And you think everything"s lost in the waves Like a spark in your eyes So your love will be mine When the sky is going to light and shine You take my hands And I think that time will give me one more chance Do you remember A kiss under the moonlight When it was summer It was love at first sight Can you remember Cause I feel the same now Until the winter Will see blooming this love Like a dive in the waves I am caught in you love And I"m flying in the clouds above I feel you near And I fear no more the winter "cause you"re here Do you remember A kiss under the moonlight When it was summer It was love at first sight Can you remember Cause I feel the same now Until the winter Will see blooming this love 1

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《对不起我爱你》和《飘雪》都是翻唱的。原唱是日本歌手中岛美嘉的《雪之华》。 歌名:雪之华作词:Satomi作曲:松本良喜演唱:中岛美嘉歌词:のびた人阴(かげ)を 舗道に并べ夕闇のなかをキミと歩いてる手を繋いでいつまでもずっとそばにいれたなら泣けちゃうくらい风が冷たくなって冬の匂いがしたそろそろこの街にキミと近付ける季节がくる今年、最初の雪の华を2人寄り添って眺めているこの时间(とき)にシアワセがあふれだす甘えとか弱さじゃないただ、キミを爱してる心からそう思ったキミがいると どんなことでも乗りきれるような気持ちになってるこんな日々がいつまでもきっと続いてくことを祈っているよ风が窓を揺らした夜は揺り起こしてどんな悲しいこともボクが笑颜へと変えてあげる舞い落ちてきた雪の华が窓の外ずっと降りやむことを知らずにボクらの街を染める谁かのために何かをしたいと思えるのが爱ということを知ったもし、キミを失ったとしたなら星になってキミを照らすだろう笑颜も 涙に濡れてる夜もいつもいつでもそばにいるよ今年、最初の雪の华を2人寄り添って眺めているこの时间(とき)シアワセがあふれだす甘えとか弱さじゃないただ、キミとずっとこのまま一绪にいたい素直にそう思えるこの街に降り积もってく真っ白な雪の华2人の胸にそっと想い出を描くよこれからもキミとずっと…
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歌曲名:心に梦を君には爱を歌手:近畿小子专辑:2003 ORICON Top 100 SingleKinKi Kids - 心に梦を君には爱を作词:Satomi作曲:松本良喜心に梦を君には爱をいつも忘れないようにいつでも仆は君のそばにいる気持ちはつたわる云ひとつなく澄んでいる青い空に诱われて気の向くまま何処か行こう二人のためにほろ苦い想い出なんか今 空に解き放とうあの阳射しをくぐり抜けて笑えるようにまぶしい太阳の粒子を胸に吸い込んだら昨日の涙の理由も笑颜へと染めてゆく夏の风をまといながら心に梦を君には爱をいつも忘れないようにめぐる季节のなかていつまでも君と二人で雨が降ったら少し休もうきっとすぐに晴れるだろう急がなくてもいいからゆっくり歩いて行きましょう悩んではひとりたたずみ强い风に背を向けてうつむいてる君の背中抱いてあけるきらめく梦の破片を拾い集めたなら二人で阳射しをあびて深呼吸してみようすぐにきっと叶うはずさ心に花を君には爱をいつも咲かせていたいから仆の気持ちに嘘なんかないよ信じて欲しい淋しい朝も切ない夜もそっと瞳を闭じたならいつでも 仆は君のそばにいる気持ちはつたわる心に梦を君には爱をいつも忘れないようにめぐる季节のなかていつまでも君と二人で雨が降ったら少し休もうきっとすぐに晴れるだろう急がなくてもいいからゆっくり歩いて行きましょうLa la la… La la la…La la la… La la la…La la la… La la la…La la la… La la la…终わりhttp://music.baidu.com/song/20691101
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2023-08-04 17:58:231

KinKi Kids 孤独之街角 中日文歌词及罗马音.

孤独の街角(孤独的街角)KODOKU NO MACHIKADO 作曲:松本良喜作词:Satomi【日语歌词】孤独の街角を濡らす 哀しい通り雨が铺道と心に描いた 大粒な模样が 胸、焦がす突然の雨に讨たれて ボクはずぶ濡れのままでひとり想い出をなぞるように 街を彷徨うこの胸で熏っている 爱は未だ冷めやらず钝い痛みが知らないうちに 加速する别れて气がついた 初めてこの虚しさを埋めていたのは キミだと…孤独の街角でキミの 残像を搜してみても足早に过ぎ行く群众の波に搔き消され忘れようとすればするほどふたり过ごした日々は鲜やかに色付きながらずっと忘れられない…爱になるこんなにも まだこんなにも キミをいとしく忆える钝い痛みをごまかしたって 消せはしない泪を溜めてゆく 儚い器を谁が名付けたのだろう 心と…孤独の街角で爱の破片、搜してみても止まること知らない时间のなかで见失う忘れようとすればするほどふたり过ごした日々は鲜やかに色付きながらずっと忘れられない…爱になる普天の谁よりも 爱したキミがいまでも 记忆の中で微笑む孤独の街角を濡らす 哀しい通り雨が铺道と心に描いた 大粒な模样を…孤独の街角でキミの 残像を搜してみても足早に过ぎ行く群众の波に搔き消され忘れようとすればするほどふたり过ごした日々は鲜やかに色付きながらずっと忘れられない…爱になる【罗马拼音】Kodoku no machi wo nurasu Kanashii tooiame gaHodou to kokoro ni kaita Oozubu na moyou ga Mune, kogasuTotsuzen no ame ni utarete BOKU wa zubunure no mama deHitori omoide wo nazoru you ni Machi wo samayouKono mune de kusubutteiru Ai wa imada same yarazuNibui itami ga shiranai uchi ni Kosoku suruWakarete kiga tsuita HajimeteKono munashisa wo umete ita no wa KIMI da to...Kodoku no machikado deKIMI no Kage wo sagashite mite moAshibaya ni sugi yukuHito no nami ni kaki kesareWasureyou to sureba suru hodoFutari sugoshita hibi waAzayaka ni irozuki nagaraZutto wasurerarenai... Ai ni naruKonna ni mo Mada konna ni mo KIMI wo itoshiku omoeruNibui itami wo gomakashitatte Kese wa shinaiNamida wo tamete yuku HakanaiUtsuwa wo dare ga natsuketa no darou Kokoro to...Kodoku no machikado deAi no kakera, sagashite mite moTomaru koto shiranaiToki no naka de miushinauWasureyou to sureba suru hodoFutari sugoshita hibi waAzayaka ni irozuki nagaraZutto wasurerarenai... Ai ni naruFuten no dare yori mo AishitaKIMI ga ima demo Kioku no naka de hohoemuKodoku no machi wo nurasu Kanashii tooiame gaHodou to kokoro ni kaita Oozubu na moyou wo...Kodoku no machikado deKIMI no Kage wo sagashite mite moAshibaya ni sugi yukuHito no nami ni kaki kesareWasureyou to sureba suru hodoFutari sugoshita hibi waAzayaka ni irozuki nagaraZutto wasurerarenai... Ai ni naru【中文翻译】把孤独的街角淋湿的哀伤阵雨把路上大雨的样子刻在我心里 使我内心煎熬被突然的雨水拍打 我全身湿透的样子像是为了描绘出我孤独的回忆般 使我在街上彷徨我的心里还在矛盾 这份爱还未冷却就趁还没知道这迟钝的痛苦前 加速第一次察觉到什么是分手把这虚无缥缈埋藏的是 你吧…在孤独的街角里当我试着寻找你的残余映像都已经先跑掉了被人浪所抹掉了我越是想要忘记但与你相处过的每一天却涂上了鲜艳的颜色一直都不能磨灭…成为爱这样地 还是这样地 能可爱地忆起你只要蒙骗这迟钝的痛苦 就不必删去了把泪水储起来 是没意思的是谁在这器量上刻上名字的 是这颗心…在孤独的街角里当我试着寻找爱的碎片却不知道要停下来结果在时间之中失去了我越是想要忘记但与你相处过的每一天却涂上了鲜艳的颜色一直都不能磨灭…成为爱我比普天之下的任何人 都爱过你你现在仍在 我的记忆里微笑着把孤独的街角淋湿的哀伤阵雨把路上大雨的样子刻在我心里在孤独的街角里当我试着寻找你的残余映像都已经先跑掉了被人浪所抹掉了我越是想要忘记但与你相处过的每一天却涂上了鲜艳的颜色一直都不能磨灭…成为爱 望采纳,谢谢
2023-08-04 17:58:311

跪求高杉さと美《泪》的假名歌词TUT(日文也行

歌曲:泪歌手:高杉さと美专辑:Mascara-rhythm zone作词∶Satomi Takasugi/BJ作曲∶Yasuhiro Minami歌手∶高杉さと美歌词:透き通る风 小さく吸い込んで胸の奥が震えてる见上げる夜空 まばらな星达が哀れに瞬くどんな优しい言叶も乾いた心をすり抜けてく他の谁にもわからない 切なさを…こぼれる想い 光の雫届けたいのに 届かない声この手にそっと 握りしめたらもう少し 强くなれるわたし後悔だけを 独りで抱いたまま涙の海に沈んで気づかぬうちに 失くしかけていたね自分らしさまで今夜木枯らしが吹いて戸惑うわたしを连れ去るでしょう悲しみのない穏やかな 梦の中…壊れるくらい 爱しさつのる忘れられない 忘れたくないたとえばずっと 远い未来も変わらずに 信じ続けるから壊れるくらい 爱しさつのる忘れられない 忘れたくないたとえばずっと 远い未来も変わらずに 信じ続けるから
2023-08-04 17:58:474

安在旭的《Yesterday》 歌词

歌曲名:Yesterday歌手:安在旭专辑:感谢Yesterday Once again Once again君はもういないよ サヨナラMemories I"m Alone I"m Alone明日を梦见てた「Yesterday」作词∶Satton/伊秩弘将作曲∶伊秩弘将歌∶SATOMI"君以外 街の中で帰るトコなんてない始発まで彷徨っても 结局は君を探してた満たされないこころ いつもぶつけて何でも言えたから キズつけた夜もあった置き去りにしたまま ずっと言えずにいた事今君へ届けて ha----Lovin" You もう一度抱きしめて何もなかったように あの顷へMemories 离れてわかったよやさしさも爱も真夜中 抜け出して 语り明かしたね(I was with you)あの朝见た 朝焼けが まぶたの奥 今も渗むよどんくらい涙こぼせば 君のすべて忘れるの?教えて ha----Yesterday ふたりでひとつだった季节は戻らない 叫んでもMemories 色褪せぬ想い出はやがて星になる见かけない鸟たちがあの日ふたりで见てた空へ 高く高く旅立つ勇気を 胸に感じて 飞び立っていこう今 明日へとYesterday Once again Once again君はもういないよ サヨナラMemories I"m Alone I"m Alone明日を梦见てたYesterday ---- ふたりは帰らない 叫んでもMemories ---- 出逢えてよかったYesterday収録:The Best発売日:2009/05/20http://music.baidu.com/song/844119
2023-08-04 18:01:091

请问这是哪位日本的明星,是不是明星都不知道,但是很面熟

- -看不清楚啊……有米有清楚一点的……或者……其实……可能是coser的说……
2023-08-04 18:01:1813

请帮忙把这首歌歌词翻译成罗马音

「metamorphose」BY 寿美菜子作词:Satomi 作曲:増田武史浓い霞が 朝の息吹koi kasumi ga asa no ibuki古へと染めゆくinishie he to some yuku云の隙间 差す光にkumo no sukima sasu hikari ni诱われし旅人izanaware"shi tabibito缀られゆく时代のなかtsudzurare yuku toki no naka话してくれましたhanashite kure mashita美しく 咲いて舞い散るutsukushiku saite mai chiru世界があると…sekai ga aru to…忧いに満ちた目でurei ni michita me de鲜やかに変わってく世界でazayaka ni kawatteku sekai de変わらないものを探してゆくkawaranai mono wo sagashite yuku儚くとも それは强くhakanaku to mo sore wa tsuyoku光を放つと信じられるhikari wo hanatsu to shinjirareruあなたと共にいられるのならanata to tomo ni irareru no nara彩られた 时代の絵巻irodorareta toki no emaki金色云がかかるkonjiki kumo ga kakaru折り重なる 言ノ叶たちori kasanaru koto NO ha tachiそしていま此処に生るsoshite ima koko ni naruあなたのこと想うたびanata no koto omou tabiこの胸しめつけるkono mune shime tsukeruやわらかな この苦しみをyawaraka na kono kurushimi wo何と呼んだらnan to yo"n dara愈されるのですか?iyasareru no desuka?ゆっくりと変わってく世界でyukkuri to kawatteku sekai de変わらないものを探してゆくkawaranai mono wo sagashite yuku募る想い 胸のなかでtsunoru omoi mune no naka de変わってゆくことにも気づかず…kawatte yuku koto ni mo kidzukazu…祈りを捧げるようにinori wo sasageru you ni掌に残ったtenohira ni nokottaぬくもりを 确かめながらnukumori wo tashikame nagaraそっと握ったsotto nigitta手を手で抱きましたte wo te de daki mashitaあなたを知り私の知らないanata wo shiri watashi no shiranai本当の私に会えたときhontou no watashi ni aeta tokiこの心は 运命を変えkono kokoro wa katachi wo kae遥かなる时代を越えてゆくのharuka naru toki wo koete yuku no鲜やかに変わってく世界でazayaka ni kawatteku sekai de変わらないものを探してゆくkawaranai mono wo sagashite yuku儚くとも それは强くhakanaku to mo sore wa tsuyoku光を放つと信じられるhikari wo hanatsu to shinjirareruあなたと共にいられるのならanata to tomo ni irareru no nara
2023-08-04 18:01:571

韩国电影《大叔》的片尾曲叫什么名字啊???

韩国电影《大叔》的片尾曲叫【MV】
2023-08-04 18:02:052

还有其他的名字么?为什么想找歌都找不到?

中文名:《福星小子》 香港译名:《山T女福星》
2023-08-04 18:02:294

求sexy zone的歌的罗马音歌词

哪种类型的啊
2023-08-04 18:02:402

新城里美是谁

总有舒适的周末终水滴石穿欣赏花儿的芬芳放假真是好
2023-08-04 18:02:582

爱の十字架

晕,为什么说罗马音。意大利语
2023-08-04 18:03:102

跪求高杉さと美《泪》的假名歌词TUT(日文也行

「涙」 作词∶SatomiTakasugi/BJ 作曲∶YasuhiroMinami 歌∶高杉さと美透(す)き通(と)る风(かぜ) 小(ちい)さく吸(す)い込(こ)んで su ki to ru kaze chii saku su i ko n de胸(もね)の奥(く)が震(ふ)えてる mone no ku ga fu eteru见上(みあ)げる夜空(よつま) まばらな星达(ほしだち)が mia geru yotsuma mabarana hoshidachi ga哀(あろ)れに瞬(まだだ)く aro reni madada kuどんな优(やさ)しい言叶(こどば)も donna yasa shii kodoba mo乾(かわ)いた心(ここ)をすり抜(ぬ)けてく kawa ita koko wosuri nu keteku他(ほが)の谁(だれ)にもわからない 切(せつ)なさを… hoga no dare nimowakaranai setsu nasaoこぼれる想(お)い 光(ひがり)の雫(しすぐ) koboreru omo i higari no shisugu届(とど)けたいのに 届(とど)かない声(かわ) todo ketainoni todo kanai kowaこの手(て)にそっと 握(にい)りしめたら kono te nisotto nii rishimetaraもう少(すこ)し 强(つよ)くなれるわたし mou suko shi tsuyo kunareruwatashi后悔(この)だけを 独(ひど)りで抱(た)いたまま kono dakewo hido ride ta itamama涙(わ)の海(うみ)に沈(しつ)んで wa no umi ni shitsu nde気(き)づかぬうちに 失(な)くしかけていたね ki zikaneuchini na kushikaketeitane自分(ちんなしさ)らしさまで chinnashisa rashichimade今夜木枯(こんなこが)らしが吹(ふ)いて konnakoga rashiga fu ite戸惑(とま)うわたしを连(ず)れ去(せ)るでしょう toma uwatashio zu re se rusyou悲(かな)しみのない穏(おだ)やかな 梦(ゆめ)の中(なか)… kana shiminonai oda yakana yume no naka壊(こわ)れるくらい 爱(いと)しさつのる kowa rerukurai ito shisatsunoru忘(わす)れられない 忘(わす)れたくない wasu rerarenai wasu rerakunaiたとえばずっと 远(ずお)い未来(みらい)も tatoebazutto zuo i mirai mo変(か)わらずに 信(しん)じ続(つず)けるから ka warazuni shin ji tsuzu kerukara壊(こわ)れるくらい 爱(いと)しさつのる kowa rerukurai ito shisatsunoru忘(わす)れられない 忘(わす)れたくない wasu rerarenai wasu rerakunaiたとえばずっと 远(ずお)い未来(みらい)も tatoebazutto zuo i mirai mo変(か)わらずに 信(しん)じ続(つず)けるから ka warazuni shin ji tsuzu kerukara 希望你喜欢O(∩_∩)O
2023-08-04 18:03:171

求日本动漫里的少女名字,日语和读音,最多采纳

中文:樱 日语:sa-ku-la 日文:さ く ら
2023-08-04 18:05:512

Motel Connection的《Three》 歌词

歌曲名:Three歌手:Motel Connection专辑:A/R Andata E Ritorno (Colonna Sonora Originale)「three」作词∶Satomi Takasugi作曲∶Satomi Takasugi歌∶高杉さと美待ち合わせは いつもの駅先に着いて 微笑む君が见える今まで通り 会えなくなるね君は変わらないよねどこにいてもケータイあるし二度と会えないわけじゃないでしょ别に悲しくはないけど言いたくない セリフばかり わがままが 头过る「元気でいて」 そんな决まり文句も 违ういつだって 君の未来 光るように 愿ってたはず同じ场所に 何时までもいられない わかっていた乾杯しよう この旅立ちに先の事は ひとまず全部忘れて代わりなんていない やっぱり君は 大切な人だから柄にもなく黙り込まないで抑えてた気持ち 暴れ出すなんで 君は いつも 胜手なの暗い空に 突然咲いた 赤い花火风に乗って 届いた音は 3秒遅れ2人は近い 远いけど空に似た 君の瞳(め)が 映し出す 未来の色その辉きに 囚われた私は ずっと「またいつか」手を振って 歩き出す 心の中悔しいくらい 眩しい君の涙で 渗んでいく【 おわり 】http://music.baidu.com/song/7951946
2023-08-04 18:06:411

Solid Works三维机械设计软件与AutoCAD设计软件有什么区别?

这么跟你说吧。SW是专业的。CAD则是通用型的,画简单的SD造型可以。
2023-08-04 17:58:393

帮我找一个英语作文关于名人的100词左右带翻译的啊 最好一句一句翻译

爱迪生(1847~1931)Edison,Thomas Alva 美国发明家。以创办工厂实验室、开辟使技术开发与科学研究紧密结合的途径而名垂史册 。1847 年2月11日生于俄亥俄州的迈兰的一个荷兰移民家庭。1931年10月18日于新泽西州西奥兰治逝世 。幼时只受过3个月正规教育 。12岁起做过报童、小贩、报务员等以自谋生计。因受M.法拉第的影响,一生从事电学实验研究和发明。1868年他发明了一台选票记录仪想推销给国会,但没有被采用。爱迪生的第一项发明没有找到市场使他更注意发明的实用性。1869年,爱迪生由波士顿移居纽约。他改进了金指示器电报公司的电报机,得到公司经理的赏识 ,受聘月薪300美元( 这在当时是很高的月薪 )。1870 年 ,移居新泽西州 ,开始他的高效发明时期 。1874年改进了打字机 。1876年 ,给A.G.贝尔发明的电话加装了炭粒话筒,提高了受话的声响。 1876年,创办了他著名的实验室。在这个实验室里,他 打破了以往科学家个人独自从事研究的传统,组织一批专门人才(包括N.特斯拉等人),由他出题目并分派任务,共同致力于一项发明 , 从而开创了 现代科学研究 的正确途径 。1877年,发明了留声机,这使他名扬四海。1878年,开始白炽灯的研究,在十几个月中经过多次失败后,于1879年10月21日成功地点亮了白炽炭丝灯,稳定地点亮了两整天。1882年,在纽约珍珠街创办世界第二座公用火电厂,建立起纽约市区电灯照明系统,成为现代电力系统的雏形。电照明的实现,不仅大大改善了人们生产劳动的条件,也预示着日常生活电气化时代即将到来。1883年,爱迪生在试验真空灯泡时,意外地发现冷、热电极间有电流通过。这种现象后来称为爱迪生效应,成为电子管和电子工业的基础。1887年,移居西奥兰治,并于同年在该市创建规模更大、装备也更新的实验室,即著名的爱迪生实验室(后人称之为发明工厂)。在这里,根据G.伊斯曼的发明,制作了自己的照相机。1914年 ,用留声机和照相机制成了最早的有声电影系统。晚年,他的发明和革新包括蓄电池、水泥搅拌机、录音电话、双工式和多工式电报系统、铁路用制动器等。第一次世界大战期间,他任海军技术顾问委员会主席,指导鱼雷和反潜设备研究,发明了几十种武器。为此,美国政府于1920年授予他卓越服 务奖章 , 法国政府授 予他军团荣誉勋位 。1928年,美国国会授予他荣誉奖章。终其一生,爱迪生和他的实验室共获1093项发明专利权。爱迪生一生发明众多,但他毕竟缺乏系统的科学知识 ,因而对现代技术的发展不能作出正确判断。19世纪末,交流输电系统已经出现,但他仍坚持直流输电,并在与G.威斯汀豪斯发生的激烈竞争中丧失了承建尼亚加拉水电站的合同 ;他的实验室盲目试制磁力选矿设备,耗尽了发明电灯所得的资金,最后不得不放弃。但是,爱迪生在电力开发、电器制造推广电能应用等方面所作的贡献,使他成为人类历史上最伟大的发明家之一。 Edison (1847~1931) Edison,Thomas Alva American inventor. To the creation of factory laboratories, technology development and to open up avenues of scientific research in close connection with the name lowered history. February 11, 1847 in the Ohio Mailan a Dutch immigrant family. October 18, 1931 in New Jersey Xiaolan in death. Produced only three months of formal education received. 12-year-old has done Bao Tong, hawkers, Rapporteur, to fend for themselves. Because M. Faraday effect in life science research experiments and inventions. In 1868 he invented a recording device to sell to Taiwan votes Congress, but has not been used. Edison first invented so that he did not find the market more attention to the relevance of the invention. 1869, Edison moved to New York from Boston. He improved the indicators cable companies telegraph, the recognition by the manager of the company, employed 300 US dollars monthly salary (which at the time was very high salary). 1870, moved to New Jersey to begin his efficient invention period. 1874 improved typewriters. 1876, to the latter. Bell invented the telephone with a carbon Reap route, and raised the words beep. 1876, founded his famous laboratory. In the laboratory, he broke the previous individual scientists to engage in research tradition, organized a group of professionals (including N. Tesla and others), and the subject of his assignment, a common commitment to the invention, thus creating the correct way to modern scientific research. 1877, invented gramophone, which makes him original. 1878, the study began incandescent lamp in the 10 months after many failures, October 21, 1879 in the successful location of incandescence light lights carbon silk, stable location between two days. 1882, in New York pearl Street Block communal fire was the world"s second plant, built in New York Urban Electric lighting, a modern electricity system to take shape. Mar lighting achievement has not only greatly improved the working conditions of production, but also herald an era of daily life electrification forthcoming. 1883, Edison bulbs in a vacuum test, accidentally discovered the cold, there is a current hot electrode. This phenomenon was called the Edison effect, become electron tube and electronic industries. 1887, from Xiaolan government, and in the same year in a larger city, the laboratory equipment is also updated the famous Edison Laboratory (later known as the invention factory). Here, according to G. School invention, produced its own camera. 1914, by Gramophone and camera film produced by the first audio system. Old age, his inventions and innovations including batteries, cement mixer, sound recording telephone, double - and multi-type cable system, railways used brakes. First World War, he served as Chairman of the Technical Advisory Committee to guide torpedoes and anti-submarine equipment research, invented dozens of weapons. To this end, the United States government in 1920 conferred on him the Distinguished Services Medal serving, the French government awarded honorary medals to his Corps spaces. 1928, the United States Congress to grant him honorary medals. Throughout their entire life cycle, Edison and his laboratory received 1,093 patents for their invention. Edison invented many life, but he is after all a system of scientific knowledge, and thus to the development of modern technology can not make the right judgment. In the 19th century, the exchange of transmission system has emerged, but he still insisted on direct current transmission, and with G. Westinghouse Niehaus fierce competition occurred lost Niagara hydropower project contracts; He blindly testing laboratory magnetic milling equipment, the invention Electric depletion of the funds had to be abandoned. However, Edison electricity in the development, application of electric appliances manufacturing promote the contribution that he became the history of mankind"s greatest inventor the world.
2023-08-04 17:58:413

PCR原理是什么?

PCR原理:DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。扩展资料:常见问题:1,假阴性不出现扩增条带。PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及溴乙锭的使用, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时,不出现扩增带,极有可能是标本的消化处理,模板核酸提取过程出了毛病,因而要配制有效而稳定的消化处理液,其程序亦应 固定不宜随意更改。2,阴性需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。引物:引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称,是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题,两条引物一条浓度高,一条浓度低,造成低效率的不对称扩增,对策为:①选定一个好的引物合成单位。②引物的浓度不仅要看OD值,更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳,一定要有引物条带出现,而且两引物带的亮度应大体一致,如一条引物有条带,一条引物无条带,此时做PCR有可能失败,应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高,一条亮度低,在稀释引物时要平衡其浓度。③引物应高浓度小量分装保存,防止多次冻融或长期放冰箱冷藏部分,导致引物变质降解失效。④引物设计不合理,如引物长度不够,引物之间形成二聚体等。Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特 异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul,应用多 大体积进行PCR扩增,是根据科研和临床检测不同目的而设定,在做小体积如20ul 后,再做大体积时,一定要模索条件,否则容易失败。物理原因:变性对PCR扩增来说相当重要,如变性温度低,变性时间短,极有可能出现假阴性;退火温度过低,可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。有时还有必要用标准的温度计,检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度,这也是PCR失败的原因之一。靶序列变异:如靶序列发生突变或缺失,影响引物与模板特异性结合,或因靶序列某 段缺失使引物与模板失去互补序列,其PCR扩增是不会成功的。3,假阳性出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个基因组或大片段的交叉污染,导致假阳性。这种假阳性可用以下方法解决:操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及样进枪头等均应一次性使用。必要时,在加标本前,反应管和试剂用紫外线照射,以破坏存在的核酸。二是空气中的小片段核酸污染,这些小片段比靶序列短,但有一定的同源性。可互相拼接,与引物互补后,可扩增出PCR产物,而导致假阳性的产生,可用巢式PCR方法来减轻或消除。4,出现非特异性扩增带PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关。其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有:必要时重新设计引 物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸)。5,出现片状拖带或涂抹带PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。其对策有:减少酶量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓 度。增加模板量,减少循环次数。参考资料:百度百科----聚合酶链式反应
2023-08-04 17:58:421

狮王英语培训怎么样

好。根据查询职友集官网显示:1、师资:狮王(国际)教育,成立于1994年11月1日,是一支阵容强劲兼具实力的教育团队,不断开拓进取,以国际化的一流标准,提供儿童美语教育、早期教育等课程。2、环境:狮王英语培训位于黄埔东路298号惠润广场二楼2008室距裕丰围站570米,交通环境好,交通便利,城市发展好,周边设施齐全。
2023-08-04 17:58:421

跪求大神帮忙翻译遥控器上的英文,谢谢!!!

以粉红按键为中心——粉红:开关粉左边:模式粉右边:风速粉正下方:省电模式粉左下方:摇摆粉右下及粉右下下——定时器开/关粉上方写TEMP的两个标有箭头的按键是调节温度显示屏左边从上到下:自动冷气干燥加热右边从上到下:风速高中低
2023-08-04 17:58:372

sphinx是什么?

一个搜索引擎!
2023-08-04 17:58:353

如何用普通的pcr做基因分型 还有原理是什么

原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA单链的结合。引物与互补DNA结合后,以靶DNA单链为模板,经反链杂交复性(退火),在Taq DNA聚合酶的作用下以4种三磷酸脱氧核苷(dNTP)为原料按5"到3"方向将引物延伸、自动合成新的DNA链、使DNA重新复制成双链。然后又开始第二次循环扩增。引物在反应中不仅起引导作用,而且起着特异性的限制扩增DNA片段范围大小的作用。新合成的DNA链含有引物的互补序列,并又可作为下一轮聚合反应的模板。如此重复上述DNA模板加热变性双链解开—引物退火复性—在DNA聚合酶作用下的引物延伸的循环过程,使每次循环延伸的模板又增加1倍,亦即扩增DNA产物增加1倍,经反复循环,使靶DNA片段指数性扩增。PCR的扩增倍数Y=(1+E)n,这里Y是扩增量,n为PCR的循环次数。E为PCR循环扩增效率。设PCR扩增效率E为100%、循环次数n=25次,靶DNA将扩增到33554432个拷贝,即扩增3355万倍:若E为80%、n=20、则扩增数量将下降到1408865拷贝,即扩增产物约丢失93%,若E=100%,n=20,则扩增数量减少1048576个拷贝,扩增产物约减少97%。可见PCR循环扩增效率及循环次数都对扩增数量有很大影响。PCR扩增属于酶促反应,所以,DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。靶DNA片段的扩增最初表现为直线上升,随着靶DNA片段的逐渐积累,当引物—模板/DNA/聚合酶达到一定比值时,酶的促化反应趋于饱和,此时靶DNA产物的浓度不再增加,即出现所谓平台效应。PCR反应达到平台期的时间主要取决于反应开始时样品中的靶DNA的含量和扩增效率,起始模板量越多到达平台期的时间就越短、扩增效率越高到达平台期的时间也越短。另外酶的含量,dNTp 浓度,非特异性产物的扩增都对到达平台期时间有影响。
2023-08-04 17:58:351

运用知识论,说明我们怎样才能避免信息茧房子?

认识论说明怎样才能避免信息茧房:①实践是认识的基础,实践是认识的来源、是认识发展的动力、是检验认识真理性的唯一标准,是认识的目的。只有“破茧而出”,才能避免闭目塞听、作茧自缚,使我们的视野更加开阔。只有通过实践获取认识、用认识去指导实践,在实践中检验和发展真理,才能避免陷入信息茧房。②认识具有反复性、无限性和上升性,追求真理是一个永无止境的过程。信息茧房看似“越来越懂你”,实际上使人在无形中失去了解不同事物、不同观点的机会,在不断重复和自我确证中固化已有的思维,而排斥与自己相异的观点。认识受到各种条件的限制,这决定了人们对事物的正确认识往往要经过实践到认识、再从认识到实践多次反复才能完成。
2023-08-04 17:58:341