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图书馆的规则英语6条是什么?

2023-08-03 16:01:10
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wio

图书馆的规则英语6条有:

1、Do not grab the seat for others, do not lie down in the seat, and do not smoke in the reading room.

不要为他人抢占座位,不要在座位上躺卧,也不要在阅览室内吸烟。

2、Please keep quiet in the reading area. Please mute your mobile phone before entering the reading area. Please keep cell phone calls outside.

阅览区域内须保持安静,请在进入阅览区域前将手机调至静音状态;手机通话请到室外。

3、It is strictly forbidden to hide, tear, paint, steal books or periodicals, violators will be dealt with according to relevant regulations.

严禁藏匿、撕割、涂画、偷窃书刊资料,违者将按有关规定处理。

4、Do not damage the catalog card when reading it. Don"t dot the book randomly.

查阅目录卡片时,不可把目录卡片弄坏。不要在图书上随意圈点。

5、Readers should dress neatly when they go to the library, turn off their mobile phones before entering the library, and do not wear vests or slippers when entering the library.

读者上图书馆学习应衣着整洁,进图书馆前应自觉关手机,不能穿背心、拖鞋进图书馆。

6、Sit and rise gently, and turn the pages gently.

入座和起座要轻,翻书也要轻。

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图书馆的英语单词怎么写?

图书馆的英语单词怎么写
2023-08-03 09:43:321

图书馆英语怎么读语音,学校图书馆英语怎么读

1.图书馆的英文:library;读作:[laibreri]。 2. 图书馆的作用(1)思想教育的职能图书馆是文献信息资源的集散地、是传播文献信息资源的枢纽。 3.在馆藏建设上,不同的国家、不同的阶级都有一定的原则和倾向。 4.中国是无产阶级专政的社会主义国家,图书馆的思想政治教育作用,目的是要引导和帮助读者树立正确的世界观、人生观、价值观,打下科学理论的基础,确立为建设有中国特色社会主义而奋斗的政治方向。 5.从事图书馆的管理人员,时刻不要忘记图书馆的思想政治教育宣传阵地的职能和自己服务育人的神圣职责。 6.(2)两个文明建设的教育职能图书馆是人类文明成果的集散地。 7.在社会主义两个文明建设中,肩负着重要的教育职能作用。 8.图书馆的丰富馆藏,可以向读者提供文献信息服务,把精神化成物质;可以通过对馆藏的遴选、加工、集萃,向读者提供健康有益的精神食粮。 9.图书馆可以通过画廊、墙报、学习园地等各种活动大力宣传两个精神文明建设。 10.(3)文化素质的教育职能图书馆进行社会教育,主要表现在可以为社会、为读者提供最完备的学习条件:资源、场地、设备。 11.受教育者可以长期的、自由地利用图书馆进行自学。 12.它还是学校教育的重要组成部分。 13.在学校里,图书馆是基本的教育设施,它被誉为“知识的宝库、知识的喷泉”、“大学的心脏”、“学校的第二课堂”,直接承担着培养人才的重任。 14.书馆向社会所有成员敞开大门,教育他们如何才能获取文献资源的过程和方法,掌握进行终身学习所必须的技能。 15.(4)丰富群众文化生活教育的职能丰富群众的文化生活也是教育职能的组成部分。 16.健康的文化娱乐是人类社会生活中不可缺少的组成部分。 17.图书馆是社会文化生活中心之一,在传播文化、活跃群众业余文化生活方面具有很重要的地位和作用。 18.人们可以从图书馆里借去自己喜爱的图书回家细细品味;也可以到阅览室里随便翻翻报纸、看看画报,欣赏一下美术作品,享受读书之乐;还可以到计算机网络中心上网进入聊天室聊聊天,给亲朋好友发一份电子邮件等等。
2023-08-03 09:43:551

办公室餐厅音乐室图书馆电脑室学校用英语怎样写

办公室office餐厅 restaurant音乐室studio图书馆library电脑室Computerlab学校school
2023-08-03 09:44:054

在图书馆里英语怎么写在图书馆用英语怎么说

1、在图书馆用英语是inthelibrary。2、in表地点时,指在某一立体空间范围内。3、library的基本意思是“图书馆,藏书室”,也可指某图书馆或某人的“藏书”,还可指“收藏的录音、唱片或影片等”。library有时也可用在其他名词前作定语。4、例句:Designsforthenewsportshallareondisplayinthelibrary.新体育馆的设计图展示在图书馆里。
2023-08-03 09:44:181

图书馆规则英语20条有哪些?

我们来到的图书馆里有很多规矩
2023-08-03 09:44:392

图书馆英语在哪一类

语言类。图书馆,是搜集、整理、收藏图书资料以供人阅览、参考的机构,图书馆英语在语言类,图书馆的分类至少有15~20种,分别都是儿童类,育儿类和教育类等。
2023-08-03 09:45:101

图书馆的规则英语怎么写

图书馆的规则英语6条有:1、Do not grab the seat for others, do not lie down in the seat, and do not smoke in the reading room.不要为他人抢占座位,不要在座位上躺卧,也不要在阅览室内吸烟。2、Please keep quiet in the reading area. Please mute your mobile phone before entering the reading area. Please keep cell phone calls outside.阅览区域内须保持安静,请在进入阅览区域前将手机调至静音状态;手机通话请到室外。3、It is strictly forbidden to hide, tear, paint, steal books or periodicals, violators will be dealt with according to relevant regulations.严禁藏匿、撕割、涂画、偷窃书刊资料,违者将按有关规定处理。4、Do not damage the catalog card when reading it. Don"t dot the book randomly.查阅目录卡片时,不可把目录卡片弄坏。不要在图书上随意圈点。5、Readers should dress neatly when they go to the library, turn off their mobile phones before entering the library, and do not wear vests or slippers when entering the library.读者上图书馆学习应衣着整洁,进图书馆前应自觉关手机,不能穿背心、拖鞋进图书馆。6、Sit and rise gently, and turn the pages gently.入座和起座要轻,翻书也要轻。
2023-08-03 09:45:211

图书馆用英语怎么读

library英 [u02c8laibru0259ri] 美 [u02c8lau026au02ccbrεru026a] n.图书馆;书房;图书馆机构;租书店;丛书;文库[计]程序库;函式库[例句]Obeying an impulse, he entered the library.他一冲动就进了图书馆。
2023-08-03 09:45:571

图书馆的英语单词

答案是library
2023-08-03 09:46:098

图书馆的英语怎么说啊?

图书馆:library操场:playground教室:classroom自习室:study room体育馆:gymnasium食堂:canteen英语角:English corner实验室:laboratory微机房:Computer room礼堂:auditorium办公楼:office building医护中心:health center住宿楼:student"s building阅览室:the reading-room舞蹈室:dance room音乐室:Music room心理咨询室:counseling rooms美术室:Art room乒乓球室:table tennis room篮球场:basketball court标准跑道:the standard runway
2023-08-03 09:46:571

图书馆英语怎么读

图书馆的英语读音:英 [_la_br_ri],美 [_la_breri]。图书馆是搜集、整理、收藏图书资料供人阅览、参考的机构,早在公元前3000年就出现了图书馆,是社会记忆(通常表现为书面记录信息)的外存与选择传递机制。
2023-08-03 09:47:151

图书馆英语怎么说?

图书馆的英语单词是 library 英 [lau026abru0259ri]; [lau026abri] 美 [u02c8lau026abreri/]library 释义图书馆,藏书楼;(书、激光唱片等的)私人收藏;书房,书斋;文库,系列丛书(激光唱片集,成套录像等);软件库;短语1.图书馆 LibraryLibrariesBodleian Library2.国家图书馆 library nationalNational Central Library3.大英图书馆 British LibraryBritish Library Public Catalogue例句1.这座新图书馆很像纳什的风格。The new library is very much after the fashion of Nash. 2.非专业人员很难进入医学图书馆。It is difficult for a lay person to gain access to medical libraries. 3.这个图书馆有大量的生物学藏书。The library has a large biology section. 4.这份材料说明了图书馆的运行规则。This explains the rules under which the library operates. 5.我花在图书馆的时间很有收获。My time spent in the library was very productive.
2023-08-03 09:47:361

图书馆的英语单词怎么拼写?

去图书馆: gotothelibrary
2023-08-03 09:47:478

在图书馆里英语怎么写

1、在图书馆用英语是inthelibrary。2、in表地点时,指在某一立体空间范围内。3、library的基本意思是“图书馆,藏书室”,也可指某图书馆或某人的“藏书”,还可指“收藏的录音、唱片或影片等”。library有时也可用在其他名词前作定语。4、例句:Designsforthenewsportshallareondisplayinthelibrary.新体育馆的设计图展示在图书馆里。
2023-08-03 09:48:051

图书馆的英语怎么读library

图书馆的英语读音:英 [_la_br_ri],美 [_la_breri]。图书馆是搜集、整理、收藏图书资料供人阅览、参考的机构,早在公元前3000年就出现了图书馆,是社会记忆(通常表现为书面记录信息)的外存与选择传递机制。
2023-08-03 09:48:271

如何英语表达图书馆

1、library英[?la?br?ri]美[?la?breri],n.图书馆; 藏书楼; 图书室; 资料室; (书、激光唱片等的)个人收藏。2、[例句]鼓励员工利用图书馆提高自己的专业水平。Staff are encouraged to use the library for professional self-development.
2023-08-03 09:48:341

图书馆英文词汇 求英文解释

1.a shelfmark :a notation on a book showing its place in a library2.to have a book on loan : to buy a book with a sum of money that is expected to be paid back with interest3.to renew a book :to put a book back to where it is4.to stamp a book :to put a mark or word on it using a special tool or machine, usually in order to idnetify it5.a fine: a punishment for returning books late by paying a sum of money
2023-08-03 09:50:262

sum的除法公式

加法公式:“=SUM(第一个加数:最后一个加数)”;减法公式:“=被减数-减数”;乘法公式:“=被乘数*乘数”;除法公式:“=被除数/除数”。
2023-08-03 09:49:441

poppin里的所有动作各叫什么?

对Poppin有兴趣的舞迷们不可不看! The Pop Pop就是一种你震动身体不同部位的动作,这是要靠你震动你的肌肉来达成的。这是非常需要韵律感的,而且需要配合popping风格的音乐,你可以靠着伸直你的手轴来做popping,你也可以将肩膀隆起来做popping,而身体的其它部位都保持直立。 The Lock or Locking Locking就是身体做一些很快的动作,然后在一个动作的时候停住,一个形容Locking 动作最好的解释就是:你有玩过那种小小的齿轮玩具吗?当你上紧发条让他动作时,他真的动的很快,可是发条松了,他又一下子马上停了下来,回到原状,这样看起来是不是很像Locking 呢?(编者按:个人认为Locking应该和Electric Boogie,Boogaloo分开,因为他给人的感觉并不是自然的,比较像是快速) The Tick 这个动作常被用来作为机器人舞的舞蹈中,是Electric Boogie中很重要的一个部分,这个动作给人一种错觉,就好象这个人天生就像机器一般,停下来或开始动作的时候都会有一个震动,做这个动作就是要靠震动肌肉,法国的喜剧演员叫这种动作是“Clique”。 The Floats or Glides Float或是 Glide给人 种错觉,好象你的脚再走路时有一种特定的程序,这个动作给人一种感觉好象你想往东走,但实际上你的脚却是往西走一样,最著名的舞步就是Michael Jackson 跳的“Moon Walk”,这是一个老的喜剧演员的把戏,就像明明要往前走却又往后退。 The SlowMo 这个舞蹈动作做起来就像是你在电视上看到的慢动作回放一样,通常舞者会把这个动作和MOON WALK一起做。 The Wave 这是从四肢开始的波浪的动作。他给人一种错觉就像是有一股看不见的力量穿过你的整个身体,从一个地方开始,穿过手掌,手臂,整个身体最后停在你的脚。波浪的动作是一个标准的动作,包含在每一个舞蹈的例行动作中。不像其它的舞蹈动作,这个动作是流畅连贯的动作,应该是有精神的或是充满律动感的。波浪的动作的确从Pop中截取了不少的风格,但是你和Pop做一个比较,做Pop时如果有一个路径环绕全身,做起来会更加顺畅。 The Mannequin or Robot (Robotics) 这是一个以经存在很久的机械舞蹈风格,他就像是模仿一个展示用的假人在现实生活中动了起来,然后从Mannequin style中又分离出两个动作。一个动作是是舞者就像是被线牵引的傀儡一般,行动不自由,无法自主,人被其它人所牵引着,你可能曾在电视上看过喜剧演员做这样的表演,最经典的动作就是同手同脚向前移动,再表演中这笔不同手不同脚一起移动常被使用。另一个风格就是机器人,这个动作就是你的四肢做动作时被一个固定的速度所控制,然后突然停住或是用Tick停住,就像是只有机器才会做的动作。通常在一个时间里,你只移动身体的一个部分,做的就好象是你被一个计算机程序所控制住一样,动作要做的很制式化。Mannequin:这个字指的是展示用的假人模特儿。 The King Tut (埃及手) 这个动作就好象是挂在墙上埃及的壁画及宫殿般的感觉,它包含了摆手部的动作,肩膀和手轴成90度,你的前臂可能是上或下,弯曲或扭转,可能远离你或靠近你,然后你的手可能要循环的上下或是循环的扭转,这要和Tick一起做,就像机器人舞蹈的风格一样,每一个动作是分开的。 The Lean 这又是另一个相当受欢迎的喜剧演员的花招,他给人一种错觉好象人倚靠着某一样东西,可是这样东西实际上却又不存在,就像看不见的钢琴就是一个例子。 The Collapse 通常和Mannequin结合一起做,这个动作做起来就像是一个轮胎被泄了气一样,或者是像一个被剪断了线的傀儡。 The Heartbeat 这是一个很受欢迎的动作,你把手放在外套或T恤底下,然后把衣服往前推,这样看起来就像是你的心脏正在胸腔里跳动一样,通常舞者会一边做动作一向前走,这会给人一种错觉好象是你的心跳推着人前进一样。 The Bicycle 腿部的动作给人一种印象像是你在骑脚踏车一样,这是另一个喜剧演员常用的小花招,这个动作通常会结合手的往前放的动作,这给人的感觉像是你整抓着脚踏车的手把。 The Toe/Heel walk 这个动作通常和Mannequin dance style一起做,是一个很棒的方法可以让你在整个舞蹈地板上做动作,他的动作包含了:用一只脚的脚指做旋转,再配合另一只脚的脚踝一起,然后在将重量移转到另外的脚指及脚踝上,然后一直做,做的好的话,动作会非常流畅,看起来就像是你滑过整个地板一样。 Cobra(King Cobra) 舞者用一只手做波浪的动作传到另一只手去,然后再把他送回来,但是只用到肩膀。(如果你看名叫“Breakin”的电影,在一开始的尬舞中,就有几个人做这个动作,你可不能错过.) Body Effects就是用身体去做模仿的效果。 Animation 用身体去做像影片般,一格一格的分格动作。 Three Dimensional Tickin" 比depth tickin"更多元化,包括了在同一个tick中,身体做常、宽、高三D般的效果。 Pausin" 停止或暂时停顿一个动作短暂的时间。 ☆ Electric Shock 这个动作看起来就像是有一股电流通过身体一般。 ☆ Water Wave 缓慢做波浪的动作并摇动身体,创造像水波般的效果。 ☆ Internal Moves 动作就像是渗透进身体或是像从身体中发出的一般。和tickin"、wavin"不一样,因为这两者是穿过身体。 ☆ External Moves 动作就像是从身体外部来的感觉一样。Cobra,Octopuss,King tut,Python等这些动作都是。 ☆ Hittin" 持续的收缩肌肉。基本上是放松和收缩颈部、手部、胸部和腿部的肌肉。Moonwalk,Backslide,Side slide,S walk等这些都是 动作集合 [编辑本段]名词中英对照 Air posing 空气中的动作 Animation 动画 Bopping 动感机器人 也可叫Dancing Robot "BOPPIN ANDRE"为创始人 Crazy Legs 疯狂脚 Popin" Pete在 80年代创立的风格 Cobra 眼镜蛇 Dime Stopping 停 不同与pop跟hit robot用的比较多 Floating/Gliding 漂浮 滑行 月球漫步 Hittin 肌肉持续收缩做动作 Puppet 木偶人 Saccin 行走的风格 Scarecrow 稻草人 灵感来自於电影****师 Snaking 蛇 Spiderman 蜘蛛人 Poppin" pete 在90年代创造的风格 Strobing 像相机快照一样 Strutting 一格一格的动作 像DVD快转那种 Tut 埃及手 Shadow Boxing skeet rabbit的style Egyptians Boogaloo基本动作Sam创造的 Master Flex Boogaloo基本动作Sam创造的 E.T. 外星人的效果 poppin pete在90年创立的 主要用膝盖 Speed Control 速度的控制 Sleepy Style 要睡着的style Poppin Pete在 90年代创立的 Ground Moves 地板的动作 Popping 肌肉震动 Boogaloo 每个人有每个人的理解 说法很多 Wavin 电流 Leg Rolls 腿的旋转 Robot 机器人 Tickin 连续的pop Toy Man 玩具人 Walkouts Boogaloo的基础 sam创立的强调boogaloo的立体感 Fresno Boogaloo的基础 sam创立的强调boogaloo的立体感 power wave 用的多一些力量的wave Isolation Poppin style 必须具备的局部控制 Centipede 在地下 像蜈蚣一样在走 Slow Move 慢动作 Pop Control pop 控制
2023-08-03 09:49:481

win10专业版系统自动升级后,stylus rmx1.98,注册码乱码无法注册怎么破?尝试多次重装依然乱码。

可能程序不兼容, 可以更换个版本试试。另外建议参考下程序对配置的要求。或者右键需要运行的程序 选择兼容性 用兼容模式运行试试。
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1.ipad pro 笔与ipad的连接方法:先把ipad pro 笔的笔帽摘下来连接到iPad pro的lightning接口就可以自动配对的2.要值得注意的是:笔帽插入lighting接口时,要先把IPAD PRO的蓝牙功能 开启,然后屏幕会出现配对,点击进行配对.3.如果连接不上先看看是否够电,可以自己查查用电量,查看方法:从iPad Pro屏幕顶端下滑——点击“今天”栏中——选择“编辑”按钮——然后将“电池”添加到上面,然后点击——点击“完成”.
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说明墨盒里面确实没有墨水。方法一:用吸墨夹把连供系统的黑色墨水吸到墨盒里面。方法二:如无吸墨夹,用注射器向墨盒加入与墨盒容量相近黑色墨水后,再与连供系统连接。另外,也有可能是因为使用劣质墨水或过期墨水导致墨盒喷头严重堵塞。如果是堵头,应该用清洗剂清洗喷头。韩国印可得墨水色彩逼真、不宜堵头。好像淘宝有授权卖家。
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怎么在vector nti11中导入基因序列?

格式没有要求。因为你的软件是试用模式,所以导入功能还没有被激活而已。
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sum函数的使用方法

方法如下:工具/原料:电脑华硕A456U、win10系统,excle。1、打开需要求和的excle数据表。2、一键快速求和,快捷键(Alt+=),选中需要求和的区域,直接按(Alt+=),可以一键自动插入求和函数。3、修改求和范围,双击单元格进入编辑状态,然后重新选择。(多区域自动求和)要对多个区域求和,只需要输入逗号,选择添加更多的求和区域。(逗号一定要用英文)。4、累计求和。
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点开始、设置、打印机和传真,在里面找到爱普生R270在其上面点右键选属性,在属性里点“打印首选项”,出来对话框后选“维护”,点“速度和进程”出来对话框后就看到“显示进度表”了,在小框框上点一下显示对勾后点确定就可以了。
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POP和POPPIN有什么区别?

poping是街舞中的机械舞,他是在pop的基础上,加ing成为一个专用的名词,pop的原意是“发出砰(或啪)的响声;砰(或啪)的一声爆裂”
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什么是马克思主义的基本原理?

这是马克思主义自身的理论品质所决定的。马克思主义创立时就提出了这样一个观点:“工人没有祖国”,但是工人“本身还是民族的”。这就揭示了无产阶级的世界性、国际性和民族性的辨证统一性。马克思主义的基本原理随时随地以当时的历史条件为转移。这也是总结我们党的历史经验和教训后得出的郑重结论。回顾我们党的历史,我们清楚看到,什么时候我们坚持马克思主义本国化的原则,我们的革命和建设事业就一帆风顺;反之,什么时候我们违背了这一原则,我们的社会主义事业就会遭到严重的挫败。马克思主义的不同角度从不同的角度,我们可以对什么是马克思主义作出不同的回答。从它的创造者、继承者的认识成果讲,马克思主义是由马克思恩格斯创立的,而由其后各个时代、各个民族的马克思主义者不断丰富和发展的观点和学说的体系。从它的阶级属性讲,马克思主义是无产阶级争取自身解放和整个人类解放的科学理论,是关于无产阶级斗争的性质、目的和解放条件的学说。从它的研究对象和主要内容讲,马克思主义是无产阶级的科学世界观和方法论,是关于自然、社会和思维发展的普遍规律的学说。马克思主义是由一系列的基本理论、基本观点和基本方法构成的科学体系,它是一个完整的体系。其中,马克思主义哲学、马克思主义政治经济学和科学社会主义,是马克思主义理论体系不可分割的三个主要组成部分。
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健康的英文单词

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买的EPSON STYLUS PHOTO 1390 打印机打2张A3的相纸打印速度明显就变得很慢很慢 甚至第3张相纸都打不完

打印机首选项里,主窗口,下面有个高级,里边有个高速打印,你打上对号就好了!我也是开打印社的
2023-08-03 09:49:412

如何设计含attb位点的pcr引物

使用Multisitegateway技术构建载体的方法 Multisite gateway 实验步骤如下 设计含有attB位点的PCR引物建议使用Vector NTI Advance 软件来设计含有attB和attBr的引物。 上游引物必须同时满足以下条件 含有2225 bp的attB位点 至少1825 bp的模板或插入片段特异性的序列 multisitegateway引物序列的特异性 Fig specificsequences Multisitegateway 下游引物的设计也需满足以上三个条件。 因为我们要在E coli 体内表达蛋白 所以设计上游引物时 要在attB位点之前加上SD Shine Dalgarno 序列来保证翻译的准确性。同时为了保证阅读框的正确性 需要在attB位点之前加上两个核苷酸 但不能是AA AG和GA 因为它们会和attB位点末端的胸腺嘧啶核苷酸T形成终止密码子。 得到PCR产物并电泳检测PCR程序设置和电泳方法同上 需要指出的是 若PCR的模板是包含卡那抗性基因 kanamycin resistance gene 的质粒 需要在电泳检测和纯化PCR产物前对其进行消化 使用的酶是Dpn 作用是为了去除模板对后续反应的干扰。 消化的体系和过程 在50μl的PCR反应体系中 加入5 μl10X REact Dpn37 孵育15 min 65 热激15 min使Dpn BP反应得到entryclone 反应体系如下 BP反应的引物组分Table BPreaction Components Sample Negative control positive control attB PCR product 20 50 fmoles pDONRTMvector 150 ng pMSGW control plasmid 100 ng TEBuffer pH 其中携带attB位点的PCR产物的量可以用以下公式来计算 50 fmoles 2500 bp 660 fg fmoles ng106fg 82 PCRproduct required 实验步骤如下 按上面计算方法和反应体系加入合适体积的pDONRTMvector 和PCR产物 20冰箱里拿出BP Clonase II enzyme mix 放在冰盒上两分钟左右使其解冻。 轻轻涡旋BP酶两次每次两秒钟 BPClonaseII enzyme mix 并立即将其送回 20 冰箱里 样品轻轻涡旋几次使其混合均匀。 25孵育1 蛋白酶K37 孵育10 min。 之后进入转化环节后续实验流程同经典载体构建 最终得到含有attL位点的entry clone。 LR反应组分Table LRreaction Component Sample Negative Control attL4 attR1entry clone 10 fmoles attL2entry clone 10 fmoles attR2 attL3entry clone 10 fmoles pDEST R4 R3 Vector II 20 fmoles TEBuffer pH 使用Infusion方法快速大量构建载体的方法 fusion是一种不依赖于限制性内切酶Restriction Free 的克隆方法 引入此方法的最初动机是为了在一个载体的任意位置引入外源DNA片段。此方法基于DNA片度的扩增 得到的大量的DNA可以作为线性载体扩增的模板。这个方法可实现将多个不同的外源基因同时插入某一个特定的载体的任意我们感兴趣的位置 从而弥补了位点特异性重组系统中对特异位点和特殊系统的需求 为分子克隆和蛋白表达的调控提供广阔的思路和方法。这种方法的原理是DNA片段之间的同源重组 现在应用比较广泛的是由Clontech公司提供的In FusionTM system它可以实现以下克隆需求 同时克隆多个DNA片段 Simultaneous cloning 基因的替换 Gene replacement 多位点突变 Multisite mutagenesis 多组分重组 Multi componentassembly 同时插入和删除基因 Simultaneous insertionand deletion 引物设计及目的基因片段扩增该方法的原理和步骤同前in fusion PCR 只是这个方法中PCR产物需用Dpn 将模板消化。载体线性化载体线性化的方法既可以用特异性酶切消化也可以通过常规PCR 使用PCR的方式使载体线性化消除了对特异性酶切位点的依赖和限制 同时彻底实现载体和片段之间的无缝连接 消除后续由于特殊碱基序列的加入对实验结果的影响 同时大华 35大节省了时间和成本投入。fusion“连接”反应将纯化的DNA片段和载体按照2 1的摩尔比混合入250 EP管中必要时可以加入In fusionTM enzyme 由Clontech提供 和相应buffer 是反应总体系为10 μl。之后共同转入感受态细胞 进入筛选环节。 感受态细胞的制备在线虫载体构建的整个过程中 最重要的实验材料是各种促进反应进行的酶和高转化效率的感受态细胞。不同的载体因其携带筛选基因或者特异表达的宿主的不同 需要诸如DH5α、TOP10等不同类型的感受态细胞 例如在Multisite gateway反应中 通常需要借助ccdB的筛选机制 这种情况下就不能使用携带有ccdA基因的菌株 如TOP10F" 。所以 在不同方法的构建中 要严格选择感受态细胞类型。以下以实验室常用的感受态细胞DH5α为例 详述用氯化钙 CaCl2 法的制备过程。 用CaCl2法制备感受态细胞的原理是通过低渗的CaCl2溶液在低温 时处理快速生长的细菌从而得到感受态菌株细菌外形膨胀为球形 这样的形态结构有利于外源DNA分子形成抗DNA酶的羟基 钙磷酸复合物 这种复合物会粘附在细菌表面 如果热激 细胞对DNA的吸收将大大加强。 实验的关键是选取出于对数生长期的菌株 所有的操作必须尽可能保持在完全无污染无杂菌并且低温的条件下进行。实验材料及准备事项 100ml 胰化蛋白胨 CaCl2的制备称取22 CaCl2溶于200ml事先灭菌的水中 充分溶解后保存于4 冰箱中。 将浓度为100的甘油120 高温灭菌。 器材10 ml移液管 需灭菌玻璃大培养皿 内铺一张滤纸 需灭菌大、中、小枪头各一盒 需灭菌 50 ml离心管 mlEP管 用铁饭盒灭菌 100 ml SOB培养基需40个EP管 步骤如下 80冰箱里取出DH5α 常温使其冻融后通过接种环接种细菌与无抗培养皿中。将培养板放入3 将预先水浴锅灭菌的15ml离心管放在超净台中 紫外照射半个小时以上。从培养皿上挑取单个菌落 接种至离心管中 导入3 ml无抗培养基LB 37 摇床振荡过夜培养 转速为300 rpm 。次日取1 ml菌液接种至100 ml LB培养基中 以215 rpm的转速37 培养2 3小时。期间 要每隔半个小时测定一下600 nm的OD值。 停止培养将烧瓶置于冰上10 15分钟 同时将预先灭好菌的50 ml离心管也置于冰上冷却至0 在超净台中将菌液尽可能平均的分装入两个50 ml离心管中 以4000 rmp的转速离心10分钟。 弃上清将离心管倒置在滤纸上1分钟 以吸干残留的培养基。每个离心管中加入5 ml预冷的浓度为0 1M的CaCl2溶液 重悬菌体 并开始计时 可以用移液枪轻轻反复吹打30分钟。 将悬浮好的菌液再次以4000rmp的转速离心5分钟 去掉上清 吸干残余培养基后 每管加入2 ml预冷的浓度为0 M的CaCl2溶液反复吹打以重悬菌体 此时可以将两个离心管合为一个 放于冰上预冷20分钟 这期间 可以将已灭菌的1 mlEP管放于冰上预冷。 加入500 μl浓度为100 的甘油 mlEP管中。等全部分装完成时 投于液氮中1个小时 之后再转移到 80 冰箱中。 细菌转化效率的检测方法 设置阳性对照和阴性对照 阳性对照是为了估算细菌的转化效率 阴性对照是排除感受态细胞被污染的可能 及查明失败的可能因素。 阴性对照 只将感受态细胞涂于含某种抗性的平板上 而不加入任何DNA 正常情况下不应该有单菌落出现。 阳性对照 选择标准质粒 一般是pUC19 以50 pg、100 pg的量分别转化到感受态细胞里 将平板放于37 培养箱里过夜培养。数单菌落的个数以估计感受态的转化效率。 效率估算公式为 转化率 1000克隆 10pg DNA 当此值达到1 106时 可满足一般克隆的实验需求 当此值达到1 107时 可用作更复杂克隆的构建需求。 线虫的显微注射通过将外源基因显微注射到雌雄同体的线虫的性腺 gonad 能够获得有种系特异性的线虫。DNA片段可以通过染色体之间的同源和非同源的整合被传递到下一代中。显微注射的步骤如下 制作Pad将配置好的2 的琼脂糖放在水浴锅内防止其凝固。吸取100 μl于干净的载玻片上 并迅速将另一块载玻片轻压上面 待琼脂糖稍微干燥时取走载玻片 标记Pad的正反面之后放于干燥箱 80 中过夜。拉制电极常常用含有内芯的硼硅玻璃微电极作为注射用电极 该电极的外径为1 nm内径0 75 nm。用拉制仪拉制好的电极尖端是封闭的 在用之前需要打开一个开口 开口的大小要适宜。 准备注射液注射液的体系一般选取10 目的载体质粒的浓度范围为110 μl。其余体积用1TE补平。以12 000 rpm转速离心3分钟。 吸取1μl注射液到拉好的电极中 放置1520分钟 目的是为了使注射液通过内芯的虹吸作用流入电极尖端 并排除内气泡。 拿出注射要用的Pad在上面滴一滴油 保证有足够的油使线虫减慢干燥的过程 但不能太多以使其移动。 用一个干净的针needle 触碰到油上面 挑取N2时期的成虫 线虫挑取的区域应该远离菌斑所在位置 以避免将菌落带到pad上面。选择有容易辨别的gonad的线虫也同样重要。将线虫垂直放在pad上 使其gonad位于左侧 通常 线虫的阴部 vulva 会指向与needle的方向 两侧的gonad会直接与体壁对应。 当needle恰好位于载玻片上时将线虫聚焦在10 的物镜下 确定看到线虫的gonad。将线虫以和needle成15 到45 的角度摆放 通过轻轻降低needle使其和线虫出于同一水平。转换到40 物镜 聚焦到胞体的gonad 使用调试器上下移动needle 直到针尖对准胞体的gonad。 轻轻沿着needle移动线虫当needle插入线虫体内时 按照gonad和虫体壁处于相反位置的方式轻轻压线虫。轻旋调节器 knob 开始DNA注射液的流入 快速的开合 如果needle确定位于gonad处 此处部位会膨胀并充满液体。如果液体流动不畅 轻轻触碰桌面有助于解决此问题。要避免因加入液体过多导致液体沿着needle进入部位流散到线虫的其他部位。 将needle从线虫中拿出建议沿着逆时针方向。回到10 物镜下 滴一滴M9 buffer使线虫悬浮。使用眉毛挑将线虫放置于另外一个含有M9 buffer的板子上。这样做的目的是为了洗掉多余的油。再将线虫挑到含有细菌的板子上。一个板子上可以放置多条注射后的线虫。两三天后 数F1转基因线虫 并将折射成功的线虫单独转移到板子上以得到有稳定转基因种系的线虫。 显微注射线虫的gonadFig elegansgonad 3910 可能出现的问题及策略 注射后线虫破裂或者死掉的原因可能是needle太大了 或者线虫缺水死亡 方法可能是每注射一个线虫的gonad就换一个新的needle 如果线虫没有直立 原因可能是pad太薄或者需要没烘干 可以通过将板子放在罩子上几个小时来烘干 如果线虫干的太快 可以使用更薄的pad或者在注射前将线虫转移到较湿的板子上。 实验结果与讨论实验中用到的质粒的构建方法 在前言部分和方法部门已做了详细阐述 需要研究的相关基因的启动子的信息 诸如启动子大小 表达部位等 借助于相关文献的报道 在Wormbase中截取特定长度的DNA序列 在NCBI中查找此基因的上下游序列和基因方向 借助网页UCSC提供的序列信息最终得到启动子序列。但在设计启动子引物时 必须留意到序列中3"端和5"端的序列可以根据引物的匹配性在小范围内适当调整。还有一些神经元的位置因为缺乏确切表达谱的启动子而无法最终确定。线虫有302个神经元 标记这些神经元需要大量的质粒构建。在实验初期 我们通过传统酶切连接方法和改造的常用线虫载体组成的BP反应来实现。但随着课题的发展和方法的改进 我们发现Multisite gateway方法更为便捷和高效 特别是在购买了雌雄同体线虫启动子库后 这种技术不仅被用来标记线虫神经元 更多的用在rescue实验和钙信号的测定的构建中。同时 为了使整个课题有一套完整的体系 我们又花费大量的精力将之前不太标准的由gateway反应得到的构建进行了改造 得到一个可以通用的表达体系。 改造Multisitegateway 中的载体pDESTR4 R3为pPD49 26 R4 R3 在使用Multisite gateway 技术构建多克隆载体的过程中 我们发现 这个系统并不是完美的 因为这个系统中各个重组位点的序列有一定的相似性 所以如果想要插入载体的片段的序列 特别是与引物匹配的那一段 与重组位点有相似性时 可能会导致这个技术中所涵盖的反应失败。同时 当我们想用一个启动子驱动不止两个以上基因的表达时 不能直接只用Invitrogen公司提供的试剂盒中的pDESTR4R3 因为外源基因在线虫体内表达时 需要3"UTR稳定整个翻译过程中的顺利进行 但该公司试剂盒提供的载体中不含我们需要的3"UTR 因此 我们改造了一个新的LR反应的载体pPD49 26 R4R3 因为pPD49 26中含带unc54 3"UTR 而且实验证华 41明我们改造的载体同样有很高的反应效率 1在Multisitegateway反应中验证pPD49 26 R4 R3的有效性 Pgpa 4特异性标记ASI神经元 可以驱动TagRFP t在此神经元中表达。 为明场与荧光共定位的图。Fig pPD4926 R4 R3 LRreaction multisitegateway ASI can 改造attL1Promoter attL2为attL4 promoter attR1 验证adaptor clone 如前所述 我们将携带attB1 attB2位点的启动子进行改造得到了标准Multisite gateway反应中的第一个entry clone 在这个改造的过程中 需要引入一个中间反应物 adaptor clone。如果我们可以观察到改造后的启动子能够驱动荧光蛋白在特定部位表达 由此可以验证adaptor clone的有效性。在本课题中 我们使用改造后的启动子Pdaf 7驱动荧光蛋白在神经元ASI里表达 由此adaptor clone的有效性得到验证。
2023-08-03 09:49:381

sum的读音

sum [sʌm]基本翻译n. 总数,全部,概略v. 总计,概括,合计网络释义sum:和|总输出编组开关|和,总和,总数n-sum:若剩余值in sum:总而言之|大体上, 总之|简而言之
2023-08-03 09:49:371

epsonstylus PHOTO R290如何设置3R相纸无边距打印?

打印的时候,选择打印首选项/属性------主窗口------打印纸选项下面有一个框,勾选无边距即可.
2023-08-03 09:49:341

Flp-In-293是什么细胞

Flp-In 应该是能够靶向插入目的基因的意思(flp重组酶),具体什么原理,楼主可以看下invitrogen说明书,很详细。293就是一种细胞系。该细胞就是能够将目的基因送入靶向位点的表达细胞
2023-08-03 09:49:301

Epson 打印机的安装问题,我的打印机是Epson STYLUS PHOTO 810型号

分类: 电脑/网络 >> 操作系统/系统故障 问题描述: Epson 打印机的安装问题,我的打印机是Epson STYLUS PHOTO 810型号的,有安装光盘,我从来都没有安装过打印机,我需要安装在公司其中一台上,该怎么安装,请将每一步的安装顺序告诉我,还有哪些需要注意的问题,请详细告诉我。另外在我安装之后需要将此打印机添加到其他的电脑上,我又需要怎么添加呢? 非常感谢 解析: 首先你要在一台电脑上安装打印机驱动程序。然后其他电脑共享这一台打印机。下面我告诉你步骤: 1.在一台电脑安装打印机驱动。放入驱动盘--把打印机连上电脑同时打开电源--电脑发现新硬件后--选择否,暂时不连接--下一步选择你的光驱盘--然后下一步让它自动搜索.最后搜索到了确定一下就行了.2.其他电脑连接这台打印机.首先要和你安装打印机驱动的这台电脑在一个局域网内。进控制面版--打印机和传真里面找到打印机,把打印机设置为共享,然后其他电脑进网上邻居查找到这台电脑。就可以看见打印机了。双击打印机后提示让你是否安装这台打印机驱动。你点确定.就OK了。
2023-08-03 09:49:271

学习Poppin有哪些阶段?这些阶段怎么练?求详解~!

你应该先多听歌````掌握好节奏``` 然后再学身体的12个暴点``` WAVE注意的是身体该动的地方才动 不该动的地方一顶不弄动 不染看起来就不协调 The pop (暴发点) 震动身体不同部位的动作.是用肌肉来达成的.这很需要韵律感且配合poping 风格的音乐.. TheLockorLocking 像小时候玩过的那种齿轮玩具一样..上紧发条..它会动作很快..发条松了.他又一下子马上停下来..很像Locking.^_^ The Tick 停下来或开始动作的时候会带有一个pop(暴发点)这个动作是靠震动身体各部位肌肉及保持匀速而完成的... The Floatsor Glides 如果你看过Michael Jackson的舞...moonwalk(太空步)的印象一定很深吧.,明明让你感觉像向东走的.但实际上却往西走.. The Slow Mo 像看电影时的慢动作回放..通常Dancer会把这个动作和moonwalk一起做 TheToe/Heelwalk 用一只脚的脚指做旋转..再配合另一只脚的脚裸一起.然后再将重量移到另外的脚指及脚裸..如果你做的流畅的话看起来像是滑过地板 The Wave(电流) 哦!这个要好好介绍了...是New popin中才有的.. 它让你一种错觉就像是一股看不见的力量穿过你身体各个部位一个动作后还可以加一个pop.做Pop时如果有一个路径环绕全身,做起来会更加顺畅。 WaterWave(水流) 缓慢做波浪动作并摇动身体..创造水波般的确效果 The Mannequinor Robot(假人模特) 这是存在很久的机械舞风格..像被傀儡被控制住一样..身体某部位动而带动另些部分..连贯性好的话会让人有种木偶的感觉..而且开始动作时如果加上The Tick 会很老软! The Collapse 通常和上面的Mannequinor(假人模特)结合一起做.这个动作像轮胎泻了气或者是木偶被剪断了钱一样 The King Tut (埃及皇) 它包含手部动作..肩膀和手轴成90度..前臂上或下.弯曲或扭转..最重要的是是手部循还...且每一个动作都是分开的.. The Lean 让人感觉你依靠着某种东西..但它实际却又不存在...类似现在舞台剧的无实物表演.. The Heartbeat 这动作很受欢迎的..你把手放在胸口..然后衣服往前推..通常我们会一边做这动作一边向前走..给人一种错觉是心跳推着人前进一样 TheBicycle 腿部动作像是在骑脚踏车.让人一种感觉像是你正抓着脚踏车的手把 Cobra(KingCobra) Dancer用一只手做波浪的动作传到另一只手去..然后再把他送回来..但是只用到肩膀.. Animation 身体像影片般..一格一格得分格动作 Three Dimensional Tickin 一个Tick中..做 长..宽..高..3D般的效果 Pausin 停止或者暂停时一个动作 Internal Moves 动作就像是渗透进身体或是像从身体中发出的一般.. 和wavin不一样的是它是渗透..而wavin是穿过身体 External Moves 身体外部来的一股力量..好像把身体脱动一样 Hittin 持续收缩肌肉 基本上是放松和收缩颈部、手部、胸部和腿部的肌肉.. 一、手部练习的方法 1、把两只手摆成一个很像骑马的姿势,手指往下放,要感觉到很轻松的感觉 2、然后你手腕往下压,可是手指头部分要让他往上,手腕向下压的时候你是否看到你的小手臂有一个凹洞,就是轴那里有个小洞(反复那样练习就是了) 3、练习当中,你看看你手的上半部分,肌肉有没有爆破出来,要是有,你再看看胸部与手臂相连的那部分有没有跳动,还有背部的肌肉有没有跳动?手腕向下压时,胸前的肌肉稍微有点跳动的感觉是不是,但是要注意的是:不是胸部往前,而是胸肌向上跳动。要是有了上面的几点,那就正确了。 估计刚开始练的时候背肌部分的跳动可能还出不来,但是要强加练习就OK了。要注意的是练手的时候肩部不要用力,用力的都在手腕上,请各位尝试一下是否有感觉。 这个手部的练习要配合上脚部的练习才好,这样才自然 二、脚部POP的练习 脚步的POP其实也就是大家所说的胯下的POP,很多人都把它想的好复杂好难练,其实胯下的练习比手部练习更加容易,只要大家别把它想的太复杂就可以了,尽量的简单,越简单越好,下面就跟着我的方法来练习一下,很快就有点功效了哦,注意的是利用膝盖。
2023-08-03 09:49:241

什么是马克思主义基本原理?

辩证的唯物主义,唯物史观。
2023-08-03 09:49:234

sum公式使用方法

如下:sum公式使用方法:1、打开需要使用sum函数的Excel表格;2、点击菜单栏上的“公式”键,找求和公式;3、单击公式中的“插入函数”,选择要插入的sum函数;4、弹出的“插入函数”窗口中选择“数学与三角函数”;5、在“数学与三角函数”的选项中,选择sum函数;6、在弹出的“函数参数”窗口,输入数值区域,单击确定按钮;7、此时,Excel表格中就得出该列内所有数值的和。matlab中sum是求数组元素和的函数。在matlab的命令窗口中输入“docsum”或者“helpsum”就可以得到该函数的帮助信息。
2023-08-03 09:49:221

急求:人正常乳腺细胞(MCF-10A)如何培养,培养基如何配制?

Components for Medium recipes for MCF-10A ER-Src cellsDMEM/F12 (Invitrogen No. 11039-021)Horse serum (Invitrogen No. 16050-122)Pen/Strep (100X solution, Invitrogen No. 15070-063)EGF (Peprotech, 1 mg): Resuspend at 100 ug/ml in sterile ddH2O. Store aliquots at -20°C.Hydrocortisone: (Sigma No. H-0888, 1-g bottles) Resuspend at 1 mg/ml in 200-proof ethanol and storealiquots at -20°C.Cholera toxin: (Sigma No. C-8052, 2-mg vials) Resuspend at 1 mg/ml in sterile ddH2O and allow toreconstitute for about 10 min. Store aliquots at 4°C.Insulin (Sigma No. I-1882, 100-mg vials) Resuspend at 10 mg/ml in sterile ddH2O containing 1% glacialacetic acid. Shake solution and allow 10–15 min to reconstitute. Store aliquots at -20°C.
2023-08-03 09:49:201

EPSON STYLUS PHOTO R230怎么清零?

怎么下载才管用?
2023-08-03 09:49:204

Locking,Poping,Breaking.Waveing哪个好学点?

popin吧。我个人是跳popin的。要学popin要有好的乐律感觉。掌握好爆点。练好肌肉抖动,爆。然后加上自己的想象跳出一些自己独特的舞步。locking要有很好的身体协调。不然跳起来给人看了会很怪。waveing其实和popin可以在一起。wareing主要是知道如何把wareing的基本动作拆结和结合。breaking要求要有一定的力量。没有足够的力量有些动作你做不来。
2023-08-03 09:49:141

为什么马克思主义基本原理是正确的?

马克思主义是无产阶级思想的科学体系。马克思主义是关于无产阶级和人类解放的科学,是对人类文明成果的继承和创新,是科学性与革命性的统一。马克思主义从产生到发展,表现出了强大的生命力,这种强大生命力的根源在于它的以实践为基础的科学性和革命性的统一。马克思主义最重要的理论品质是坚持一切从实际出发,理论联系实际,实事求是,在实践中检验真理和发展真理。这种与时俱进的理论品质,是160多年来马克思主义始终保持蓬勃生命力的关键所在。马克思主义诞生以来,指引各国无产阶级和广大劳动人民进行了艰苦卓绝的斗争,科学社会主义从理论发展为亿万人民群众的实践,人类取得了历史性进步,中国共产党成立以来,把马克思主义基本原理同中国具体实际相结合,带领全国人民取得了革命、建设和改革的卓越成就。实践证明,马克思主义是我们立党立国的根本指导思想,是全国各族人民团结奋斗的共同理论基础。马克思主义的基本原理任何时候都要坚持,否则我们的事业就会因为没有正确的理论基础和思想灵魂而失去方向,就会归于失败。这就是我们为什么必须始终学习和坚持马克思主义基本原理的道理所在。
2023-08-03 09:49:133

分子生物学中,3`race基因技术中的AuAp是什么?我想它是锚定引物?

The Abridged Anchor Primer (AAP),Abridged Universal Amplification Primer (AUAP),Anchor Primer (AP)Universal Amplification Primer (UAP)
2023-08-03 09:49:104

epson stylus c20sx 打印机

这是一款比较老的喷墨打印机,先去下载一个驱动安装上,试着打一张出来,看看效果,如果能打好,就可以用,如果出来的是白纸或不清楚,那就是没墨了或针孔堵了,换墨盒即可,如果只是没墨了,这一款应该可以注墨的,那样会便宜些。
2023-08-03 09:49:101