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我用电脑玩拳皇13,选了八神战斗的时候却出现了一个高高的,红色的角色,各大高手,请问他是谁?

2023-07-29 17:27:04
TAG: 角色 红色
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coco

saiki 阿修祖先变身后的状态。其实他很容易打,你就死防,他很难破你防。慢慢靠近,或等他逼你到拐角踢下防。然后靠近破他防。这个boss好像设定无下防,但是可以防下踢,总之就是和他磨血别主动进攻绝对打得过。

ardim

奥本那

左迁

小boss saiki

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2023-07-28 22:04:062

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斋忌是拳皇12里的最终boss,很牛叉,比大蛇厉害。
2023-07-28 22:04:483

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灵神星不会就是内颗恒星金属内核吧?
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拳皇13隐藏人物怎么解锁

音巢草,天狗,火八,是直接在选中人物时按select键(具体是哪个,看你自己设置),至于斋忌,billy。就是你玩arcade模式,刷任务,就是左上角那个跳三下,翻滚三下的那个,刷30个不超过40个,billy地三关结束后乱入,40够就是斋忌,打赢就可以用了。手打,望采纳。 顺便steam可以加好友啊?本人菜鸟,平时可以互相练练。
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日语里姓氏的齐木怎么读

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什么是反向点杂交

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tap酶是什么

Taq酶是从水生栖热菌 Thermus Aquaticus ( Taq )中分离出的具有热稳定性的DNA 聚合酶。 对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 与一般酶不同,用Taq酶扩增DNA时常使片段3"端凸出一个A,应注意.
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拳皇13白阿修乱入条件

那个不是阿修,而是他的祖先saiki,街机模式头三队前完成指定动作(绿色那一项)40个以上,saiki就乱入了~
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拳皇中遥远彼之地的主人是谁?

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我选了大蛇,斋祀都错了
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Kof 疯八和Ash实力对比

实力对比没标准的吧,游戏设计出来就是平衡的,那个更强就看控制者的技术了,我个人喜欢用狂八神..呵呵
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热稳定DNA聚合酶。根据查询生物技术研究所查询显示,tapDNA聚合酶是第一个被发现的热稳定DNA聚合酶,分子量65kD,最初由Saiki等从温泉中分离的一株水生噬热杆菌中提取获得。
2023-07-28 22:10:241

拳皇故事全集

  传说中的三种神器便是“草稚剑”、“八尺琼勾玉”、“八咫镜”。  1800年前,支配着海源的性情暴躁的素戈鸣尊(须佐之男),因为天岩户之变而被他的姐姐天照大神(最高的神)流放到人间。  须佐之男看到河水中有筷子顺流而下,断定上游一定有人居住,于是便向上游寻访。结果发现了一对老夫妇在一位女孩(奇稻田姬)面前哭,须佐之男上前打听缘由,得知这里有一条八岐大蛇,一个身子八个头,每年要吃一个女孩,现在这里只剩下一个女孩了,却不得不送去当牺牲品。  已爱上奇稻田姬的须佐之男决心除去这条大蛇,他将奇稻田姬变成梳子带在自己头上,然后在围墙上开了八个入口并架了八个台,每座台上都放了一个装满了烈酒的容器。不久大蛇出现了,它将八个头伸进来喝起了烈酒,不久便醉倒了,这时须佐之男拔出长剑,将大蛇砍成数段。须佐之男在大蛇的尾巴里发现了一把剑,这便是三神器之一的“草稚剑”。须佐之男并用三神器把大蛇封印起来,使其不能轮回转世。  后来,须佐之男的后人分为“草稚”、“八尺琼”、“八咫”三大家族,他们共同守护着三神器。  也许有朋友要问,为什么每次的格斗之王大赛都与大蛇一族有关系呢?大蛇一族的目的究竟是什么呢?  其实大蛇的最终目的是征服全世界。早在1800年前,大蛇就要征服世界,他举行了一个仪式,需要妻稻田姬做祭品,只要仪式举行完毕,世界就是大蛇的了。但是,妻稻田姬恰好被须佐之男救走了。1  800年来,大蛇一直都被封印着,但他没有忘记那次仪式。  97格斗之王时,大蛇被解除了封印,并且找到了妻稻田姬,他要继续1800年前的仪式。谁是妻稻田姬呢?他就是草稚京的恋人——雪。雪是妻稻田姬的轮回转世。因此,雪就成了大蛇一族征服世界的关键人物,97中大蛇就是针对她的,最后大蛇的阴谋破灭了。  可能还有人问:“为什么1800年前须佐之男不直接把大蛇杀死呢?”“废话,杀了大蛇还会有格斗之王玩吗?”(开个玩笑^_^)  大蛇一族与人类不同,他们的生命无限长,而且拥有不死之身,所以他们根本死不了,那怎么办呢?唯一的办法是使用三件神器,将他们的力量封印起来,使他们不能再危害人类。但随着时间的推移和一些特殊的因素(草稚和八神的仇恨),封印会不断减弱,直到封印解除。那时,只有经过三大家族使用三件神器把大蛇一族再次封印。  K.O.F.传说(二)  八咫琼苍月(大约是八神庵的爷爷的爷爷)和草雉旭日是好兄弟,两人合伙杀了那条有八个头的蛇。  苍月与旭日同时爱上了一位美丽的小姐,她叫倾城。  倾城爱苍月,苍月也喜欢倾城,但草雉也喜欢倾城,倾城的父亲就让草雉与八咫琼比武,谁胜了,谁就可以娶倾城。比武前。八咫琼与倾城在一起,倾城说:“我喜欢的是你我对旭日只是兄妹间的感情。”  苍月不忍对好兄弟旭日下手,但是旭日却因为太喜欢倾城了,所以对苍月痛下杀手,并说:“我一定要娶到倾城小姐。”倾城父亲心中说:“我的女婿就是草雉旭日。”  苍月被旭日击中要害,快昏过去之前大喊:“ 草雉旭日从此我们不再是兄弟,而是宿敌,宿敌。”  苍月昏迷了好几天,在梦中一个声音对他说:“你想复仇吗?来吧。解开我的封印吧。我给你力量。”对他说话的人就是大蛇。  苍月本来还不想做的太绝,大蛇又给他看了另一幅画面,倾城小姐被草雉旭日一个耳光打倒在地,她哭着说:”我爱的是苍月,我不爱你,我只把你当哥哥。“苍月看的大怒,正欲解开大蛇的封印,被旭日发现,旭日把他绑了起来,苍月就这样孤独的过了许多年,直到一天,大蛇告诉他,倾城小姐死了,是被旭日杀了她,他愤怒起来。挣断了铁链,他的血滴在封印大蛇的印记上,封印解开了,大蛇照过去约好的,给了他暗黑力量。说你从此就不要叫八咫琼了,你姓八神,八神苍月。“八神苍月用手指在胸膛上划出血来:“好,我用我的血起誓,从此再也没有八咫琼这个姓了。”苍月冲出去后,发现倾城小姐还没有死,她脸上长了许多疱,痛苦万分。希望草雉旭日杀了她,但是旭日下不了手,倾城十分痛苦。草雉打算替她解脱。八咫琼苍月冲了进来,抱住倾城,倾城说:”我喜欢你。苍月。”说完就死了。“  苍月十分悲痛,旭日说:”倾城一直喜欢你,我也从来没有对不起她。“你不该打开大蛇的封印,让我们再次把它封住吧。”  苍月说:“好,看在倾城的份上,我们再合作一次,下不为例。”他戴上了八咫琼勾玉,把暗黑力量化为正义的究极力量,与草雉之剑,八咫之镜合力再次封印了大蛇一族。  这是六百年前的事了。  K.O.F 传说 (三)  八神月因为偷学禁招八雉女,被草雉柴舟告到教主那儿,被赶了出去。  一天,八神月带着十岁的八神庵来到草雉城,柴舟知道他已经练成了八雉女,他是来报仇的。  同样是十岁的草雉京坐在屋顶上,面带微笑看着这一切。  柴舟与月开始打了起来,柴舟本已被八神月的八雉女打的无还手之力,但他太狂了。只差最后一招,他不打了。而开始奚落起草雉柴舟来。八神庵心中明白:自己将是失败者带来的附属品。  京看阒自己的父亲倒在地上,却依旧神色轻松。  果然八神月被柴舟的超大蛇雉打的灰飞烟灭,八神庵没有哭没有叫,只是冷冷的看着这一切,草雉柴舟心里浮出了一种恐惧的感觉心里想:”趁这孩子还小,不如收养他吧。“他走近庵,八神庵冷冷的说:”想要斩草除根的话,就尽管来好了,“柴舟不由的愣住了。八神庵又说:“你要是不动手的话,我就走了。”望着八神庵的身影柴舟不知说什么好。“  八神庵回到家,他妈妈说:“庵,回来了,你爸爸呢?”八神庵说:“妈,你不要太伤心,爸已经死了。”他妈妈一听,大哭起来:“什么,庵,你爸已经死了?月,我劝过你多少次,不要去争那无谓的名利,你就是不听。”一面大哭,心中焦急,一口鲜血吐在八神庵的头上,八神的头发变成了红色,父母双亡,他默默的流下了眼泪,这是他第一次流泪,也许也是最后一次吧。  柴舟回城,问:“京呢?”红丸答道:“他在练功呢,放心吧。”京从小就喜欢打架,七岁那年,被小伙伴打的鼻青脸肿,柴舟来找他的时候,他哭着大喊:“我要做拳皇,我要做拳皇,”七岁的他立下了一生的志愿。十二岁那一年,柴舟对他说:“要想做拳皇,先要达到绝对领域。你能吗?”京自信的说:“我可以的。”他练了一天又一天,就是练不出来,最后他想了一个办法,把自己关在地下五英尺深的钢牢里,绝水绝粮,发誓练不好绝不出来。一个星期过去了,大家都很担心,问柴舟怎么办,柴舟喝了一口茶说:“这办法是他自己想出来的,就一定会做到,如果他半途而废的话,他就不是我儿子。“话虽这么说,但他的眼中依然有一丝担心,只是别人看不见,过了一阵,一阵巨响从钢牢传出,地表炸开了,京摇摇晃晃的走了过来,倒在了大门五郎身上,他已经达到绝对领域的5%。  离草雉柴舟和八神月对决的日子已经过了五年了,一天,京为了躲雨,进入了一个旧仓库里,突然一个声音传来:“是谁?”京循声望去,一个穿着十分有个性,头发是红色的男子站在那里,京从他不变的衣着上看出了,他就是五年前的八神庵,而庵也从他领子上,草雉家的徽章上认出了他,八神的怒气实在很大,三言两语未过,他就和京打了起来,看来,他实在是低估了京,他被打倒在沙袋上,京看着他的脸,却没有注意到,在他视线之外的右手在缓缓的动着,并且生出了一道紫焰,八神突然跳了起来,使出一招暗钩手,向京奔去。这时,一道闪电照亮了天空,仓库中充满的是紫色的光,却不见了京,突然京从后面跳了出来,一式绝对领域5%射向了庵,一方是邪恶的紫火,一方是正义的红火,对恃着  突然一个女人出来了,妖笑着:“我是来找八神君的。”京不想再和庵打下去,就先跑了,庵十分恼火,说:“你是什么人?”那个女子笑道:“我是卢卡尔的秘书,麦卓,我家主人想见你。”八神说:“他想见我干什么?”“参加94拳皇大会呀。”“哼,无聊,我才不去。”八神说完就走,根本不理她,麦卓不以为意,笑着看着八神离去,自言自语道:“主人交待的可是个麻烦人物。”八神追着京,一直到富士山脚下,他们势均力敌,不知谁胜谁负,突然京的身后出现了两个人影,他们的力量合着京的力量一起射向八神庵,八神庵受不了如此强大的冲击,撞向富士山。撞出了一个大洞,庵倒了进去,许多碎石又落了下来,把洞封死了,这些碎石十分的厚,庵也许再也出不来了。  京回头看帮他的人是大门和二阶堂,他问:“你们来干什么?”大门说:“城主要我们找你回去,听说是为了参加94拳皇大赛。”  在草雉城边的树林里,突然一个人影闪过,说:“你就是草雉京啊。”京还没有反应过来,一阵旋风就把他卷了起来,当大门和二阶堂赶到的时候,京双目发直,已经没有生命迹象了,京,难道就这样死了吗?大门进去通知了柴舟,柴舟十分震惊,赶出城一看,他愣住了,突然,他看到京的头巾烧了起来,露出了烈阳战纹,他说:“京,还有救,还有救。”他抱着京找到了草雉烈,草雉烈用手指点着京额上的战纹,说:“京,你是我最疼爱的孙子,疼爱你甚至超过了我的儿子柴舟,快醒来吧。”烈的内力输入京的体内,京慢慢的醒了。  94拳皇大会开始了,京与大门,二阶堂组成了一队,十分顺利的拿到了拳皇。庵在封在富士山里,他没有死,他出来了,并练成了八稚女,心中说:“我终于练成了,我那个没用的父亲死的时候,我就想试试看,草雉柴舟的功夫究竟如何,今天我终于能够如愿以偿了。”他站在一间破庙边,扶着一根柱子,仰头望天,一勾新月在天上,被云遮住了,他说:“是谁说月亮一定要靠太阳发光,是谁下了这可恶的自然规律,我今天就要打破这可恶的规律。我现在很烦,更烦的是,居然有人敢在我最恼火的时候出来惹我。”他一掌劈向周围的草丛,两个女人跳了出来,“原来是你,麦卓。”“八神君,好久不见了,这是薇丝。”“我才不管她是谁,你别来烦我,”麦卓说:“你被草雉京封在山里一年了,你难道不想报仇吗?马上就是96拳皇大赛了,主人想让你参加。”八神这次没有立即拒绝,他想了一会儿,说:“好吧,我要去见见那个卢卡尔。”  见了面,卢卡尔说服八神与麦卓和薇丝组成一队,参加比赛。大家都在谈论着新来的八神,比赛开始了,草雉队全部由京出手,大门和二阶堂在一边看,获得全胜的纪录,而八神队则由那两个秘书出手。八神完全不动手,也获得了全胜的纪录,两个绝对的双方,又有如此相同之处,最后该由八神队和草雉队争得最后的冠军了。  大门和二阶堂吃完了饭,回到休息室,大门手里还端着一盘饭菜,他会给谁端呢?红丸自是和许多女孩子在一起,大门十分看不上他这样,大门端着饭菜,打开了一扇门,里面是京在听音乐。是啊,除了京,还有谁能让大门端饭呢。大门把饭菜放在桌子上,草雉不理他,仍然在听着音乐。大门说:“京,该吃饭了。”京还是不理他,突然,他把桌上的饭菜一扫而空,然后窜出屋子,身后带着长长的火焰,而八神呢,他又在干什么?他坐在沙发上,右边抱着麦卓,左边抱着薇丝,他可真有空,在这种时候还在搂搂抱抱。比赛开始了,仇人相见自是分外眼红,上场时,京仍旧在闭目开心的听着音乐,他把麦卓和薇丝都打败了,庵上场,几招过后,主办人宣布,庵是拳皇。庵一定要追着京打,一定要把他杀了。在场外,京说:“八神,你不要太张狂了,刚才我是让你,因为是我父亲害你父母双亡。”八神冷笑着说:“京,那么我们再比试比试吧。我的八稚女还没有使出来。突然,那个伤害京的人出现了,他说:”我是天国神族的人,我是暴风,八神庵,你不是八神月的儿子,你是我们天国神族的王子,二十年前我们天国神族被封印的时候,你就掉落到八神月家里,你是王子呀。”众人都愣了,八神也愣了,他冲上去揪住暴风说:“你再说一遍,我是谁?”“王子。”八神先愣了一会儿,然后就冷笑:“哈哈哈,什么王子,你以为你信口胡说的话,我也会信吗?怎么可能?”暴风说:“你就是王子,你今年也快二十岁了,对不对。八神月因为自己没有孩子,才收养你的。”八神高喊:“不,不,我不是什么天国神族的王子。”暴风说:“我们要复兴天国神族,杀光草雉和神乐家的人。”庵说:“这倒也不错。”于是同意了。庵进入草雉城,那些侍卫都不是他的对手,连柴舟也不是,庵独自坐在草雉城里,说:“哈哈哈,现在草雉城要改名八神城了。”京匆匆赶来,说:“八神庵,你把我爹怎么样了?”八神得意的说:“京,你放心好了,我只是把他的手脚筋给挑了。”他手中托着四根经脉,京大怒,对一个练武的人来说,不能再练功,就是失落了一切,庵,实在太残忍了。他对庵出手,但是庵轻轻松松的就把他打倒在地,爬不起来了,京眼中流着泪,庵大笑着离去。京怅然的走在森林里,突然暴风出现了,一阵旋风过去,京倒在地上,暴风也不见,二阶堂红妨与大门五郎赶来,京的眼睛已经直了,难道没有办法了吗,他们背后出现了一个苍老的声音:“你们让开。”他们一回头,看见了额上有一个烈阳战纹的老人,是草雉烈,草雉烈也呆呆的看着京,突然京头上的头带烧掉了,出现了烈阳战纹,草雉烈拿出草雉之剑,刺向烈阳战纹,京慢慢的苏醒了,草雉烈说:“你是我最喜欢的孙子,我对你的喜欢甚至超过了对我儿子草雉柴舟的爱。”京答应过一段时间去看烈,刚接近烈的房子,一个小姑娘出来,不让他进去,她说:“除非你打赢我,否则别想进去,”她就是藤堂香澄。“京顽皮的逗她玩,在与她打斗的时候,用大蛇雉烧她的屁股,京做个鬼脸:“小心嫁不出去。”香澄气的要命。  K.O.F 传说 (四)  麦卓太喜欢八神了,所以偷偷的把疯狂之血的秘密告诉了八神庵。八神很想得到暴风身上的疯狂之血,正好神乐千鹤来找他,要他帮忙共同封印暴风,八神为了自己的利益答应了,八神再一次戴上了八咫琼勾玉,草雉京拿起了草雉之剑,神乐千鹤拿起了草雉之镜,找到了暴风,暴风一见到八咫琼勾玉,大惊失色,说:“庵,你这是在做什么,快把那讨厌的勾玉拿掉,我们都是天国神族的人呀。”八神冷笑道:“你不要以为我不知道疯狂之血的秘密。”暴风瞪着麦卓,麦卓低下头,神乐举起了镜子,草雉拿起了剑,草雉之剑突然断裂,碎片进入草雉京的体内,而八神也开始出击,八咫琼勾玉的力量把邪恶的暗黑力量变成正义的究极力量,三人同时出手,薇思突然冲了出来,挡在暴风的前面,她的力量体被封印住,身体像石头一样,三人再次出手,暴风被封住了,八神再一击,把他击碎,但暴风的灵魂不灭,他叫道:“啊,我不要再回到那个黑暗的地方,八神庵,你要为你的行为付出代价。你的父亲也不会放过你的。”八神冷笑着,冲上去吸暴风的血,他的血就是疯狂之血,八神叫道:“太舒服了,我的大伤,小伤,新伤,旧伤,内伤,外伤,全都好了,太舒服了,哈哈哈哈。”  八神正在吸的时候,突然又冲来两人,一个是黑暗帝王,一个就是教主,八神的功力最强,吸的最多,最后他把两人震开,像发了疯一样的到处乱闯,到处破坏。麦卓冲到他面前,想要阻止他,被疯狂的八神一式八雉女给杀了,麦卓死的时候面带微笑,能够死在心爱的人手里,也是一种满足吧,接下来,他又看着香澄,难道得不到,就一定要杀掉吗,香澄的身体高高得被抛了起来,当草雉京冲过去接住她的时候,她的身体已经冷了,草雉京的泪不住的流着,八神在疯狂中杀了爱他的人和他爱的人,他终于停了下来,似乎在思考着什么。  他冲向九六格斗场,时值龙虎队的坂崎獠与特瑞决斗,这两人正同时出招要打对方,八神突然冲到他们中间,他们的拳同时打中了八神,八神被打的飞上高空,他的脸上居然还有一丝微笑,坂崎与特瑞都愣住了,神乐说:“这,这就是吸收疯狂之血的最快的方法,让两大高手的力量同时打中自己。太可怕了。”草雉京仰面看着八神,突然一滴血滴在他的脸上,是八神的血,疯狂之血。  以上是八神获得疯狂之血的过程,下面看他是怎么获得八酒杯的。  八神庵与草雉京相约在富士山决斗,时值九七拳皇大会,八神说:“京,我们之间的恩怨,今天该了了。”草雉京说:“不错,是该了了。”草雉京突然出手,但八神不见了,草雉京到处都找不到,京说:“我感到,他就在附近。”八神的身影在他背后浮现,他嘴角带着一丝冷笑:“你猜得没错,京。”一招屑风,把京打的趴在地上,八神狂笑:“京,快起来呀,你是我的宿敌,不能这么没用吧。”笑声未完,草雉京突然站了起来,并发出超大蛇雉,八神一惊,同时使出八稚女,抓碎他的火焰,八稚女能敌得过超大蛇雉吗,错了,八神的惨叫说出了答案,撕心裂肺的惨叫,八神不忿,再次使出了八稚女,草雉从很远的地方冲过来,八神竟没有动,他不怕草雉吗?不,那是因为他的力量体被封住了,就像暴风被他封住的时候一样,草雉用尽全力把他的力量体打出体外,自己也快不行了,他说:“八神,我们之间的恩怨,是该了了。”已经被封住力量的八神的手指在动,突然间,他抓住了草雉京的头,八稚女的力量全部压在了草雉京的头上,在他的头上不断的爆裂,八神冷笑着,叫着:“京,我要把半年前输给你的耻辱全部还给你,连本带利都还给你,哈哈哈。”他早先在使用八稚女的时候,就是为了让草雉京使出超大蛇雉,而他自己把20%的力量留在了体外,草雉的力量用尽时,就是他反击的最好时机,狂与智慧,这就是八神的可怕之处。在赛场上,七伽社不敌X(与那个戴墨镜的男人在一队的,好象戴一个怪怪的头号巾的,叫什么名字?),被他打的内脏俱裂,医生说,救不回来了,克丽丝不停的哭,而夏尔米一直不说话,冷冷的,X十分抱歉,连连向她们道歉,夏尔米没有说话,虽然看不见她的眼睛,但是能感觉到寒光射了出来,X不由一颤。  富士山上,八神并不认为京已经死了,他默默的等着什么,果然,京的手指在颤动,八神看见了,但他没有动,没有对京动手。京的眼睛只有白眼珠能看得见(俗称翻白眼,呵),使出了绝招“无式”,无式只能在使用者无意识的情况下使用,无招胜有招。八神连连被击中,无还手之力,现在换他倒了下来,双目紧闭,草雉京醒了,看着倒下的八神庵,也没有说话,这次庵是真的败了,败了。  赛场,X与夏尔米决战,X连连出招,夏尔米并没有还手,只是像魅影一般一直飘乎在他的身后,怎么也甩不掉,X十分紧张,他大叫:“你到底要做什么。”夏尔米轻轻的说:“我要你死。”接二连三的发出了绝招。在此同时,她回忆起了与七伽社幸福的时光,当时是七伽社邀请她与克丽丝入队的,她燃起了一生的希望,希望能与七伽社永远在一起,“可是你,却毁了我这个梦想,你一定要死!”最后一记绝招,夏尔米抱住他的腰,向后掼去,眼看X  就要命绝当场。Y(就是那个戴墨镜的人)突然出手,救下了他。新的一轮,开始了。  富士山上,八神仍在深深的昏米之中,仿佛听见有人和他说话,是大蛇:“八神庵,你要学到八酒杯,就必须要中草雉家的无式,你中了而不死,就能体会到八酒杯的奥义了。你明白吗,明白的话,就起来吧,庵。”八神的手指慢慢的动了,他一跃而起,冷笑着看着京:“你完了,京。”庵离京也很远,可京居然也一动未动,但是庵并没有出手封他的力量体,这就是八酒杯的奥义,快,极限的快,八神庵瞬间就到了京的面前,屑风,八稚女,暗勾手,八酒杯,全部用在京的身上,他就是要把京抓碎,才能泄他心头之恨。  赛场,Y一直不敌夏尔米,夏尔米正准备用结束与X对战时的绝招杀了他,一招下去,Y没有死,但他的墨镜碎了,他站了起来,怒吼着:“光,又让我看见这该死的光了。我要杀了你。”夏尔米竟无反抗之力。  Y当年是一名军队将领,不幸中了敌人的埋伏,全军覆没,敌军首领不杀他,把他绑在树上,逼他睁着眼睛,亲眼看着手下一个一个的被杀,敌军首领说:“你看着吧,你这些可爱的部下都是因为你而死的,因为你的无能,让他们都死了,哈哈哈哈。”烈日晒着他的眼睛,他希望死去,但是不能,望着部下的遗体,他发作了,挣断了绑他的铁链,一口气杀光了敌军一个团的人,最后,他戴上了墨镜,发誓,如果这一辈子有谁让他看见光,他就要谁死。如今是夏尔米打破了他的墨镜。  富士山,京已经死了,草雉烈与草雉柴舟同时感觉到了京的气消失了,而坂崎獠也说:“什么,京的气没有了,那么我的两个对手只有一个了,庵,你一定要等我,你千万不能死。”八神终于停了下来,说:“我终于杀了你,我的宿敌,但是我的快乐只有一瞬间,以后的却是深深的寂寞,寂寞呀,京,没有了你,还有谁是我的对手,而在死人的世界里,你还能和香澄在一起,多么幸福。”八神开始狂啸,啸声深入地底,震开了封住怨灵的封印,怨灵石中的怨灵们都出来了。  夏尔米被Y抓住,Y指着天边,说:“那里,就是你通往天堂的路。”正欲使出超必杀,夏尔米突然说:“好讨厌哦,怎么可以这样抱着人家,好无礼,你这种无礼之人,一定要好好教训一下才行。”Y不知怎的,就被夏尔米打昏了过去,而夏尔米,此时也正在糊涂:“我不是中了他的超必杀吗?这是怎么回事?”(想必是七伽社的怨灵来了,呵呵呵)  八神冲向了九七格斗大赛会场,与此同时,有一个神秘人物来到擂台的底下,那里有一个仪器,是专家们设计出来,为了不让选手们的力量伤到观众,所以把他们会散出擂台的力量收集起来,那个神秘人物拿起选手们的力量球,悄悄的走了。
2023-07-28 22:10:333

拳皇13斋祀和黑修谁更狠

当然是黑修了,黑修是saiki和ash结合,而saiki就是saiki,而且难度也不一样。
2023-07-28 22:11:302

核酸诊断的研究历史

聚合酶链反应核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana 于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。1983年的一天,美国科学家Kary Mulis驱车在蜿蜒的州际高速公路上行驶中,孕育出了PCR技术的原型。他在实验上证明了PCR的构想,并于1985年申请了有关PCR的第一个专利,在Science杂志上发表了第一篇PCR的学术论文。从此PCR技术得到了生命科学界的普遍认可,Kary Mulis也因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。 Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶 I的Klenow片段,其缺点是酶不耐高温,90℃会变性失活,每次循环都要重新加。 1988年Saiki等人从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌中提取到一种耐热DNA聚合酶,克服了这个缺点,从而使PCR技术得到了广泛的应用,也使PCR成为遗传与分子分析的根本性基石。经过十几年的发展,PCR成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能直接揭示病原体的存在,能客观反映病原体在人体内感染及活动情况,可以作为临床治疗中的一个有效监控手段,另外采用核酸诊断技术还可以检测到常规检测方法难以检测到的病原体,例如可以克服酶免检测技术中从感染到抗体产生的窗口期问题。因此,以PCR技术为代表的核酸诊断技术在临床诊断中得到日益广泛的应用。
2023-07-28 22:11:451

求拳皇13steam家用机版可选BOSS补丁

Steam上的kof13不需要boss补丁的吧,也没有吧只要打败乱入的变身前saiki和比利就可以了如果是变身后的saiki(即 裸 男版)那就没办法了在前三个对手时完成30个指定动作(即跳三次吧,翻滚4次吧等绿色字的指令)比利即乱入 打败他就可以解锁比利而saiki变身前则需完成40个指定动作 (都要在前三个对手对战时完成,完成后你第四个对手就是saiki或比利 。你想要玩saiki裸男的话只能去玩mugen或者非Steam版的了纯手打的呢...求分
2023-07-28 22:11:581

通用质量体系的pcr是什么意思

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段.可看作生物体外的特殊DNA复制.DNA聚合酶(DNA polymerase I)最早于1955年发现 ,而较具有实验价值及实用性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H. Klenow 所发现,但由于此酶不耐高温,高温能使之变性, 因此不符合使用高温变性的聚合酶链式反应.现今所使用的酶(简称 Taq polymerase), 则是于1976年从 温泉中的细菌(Thermus aquaticus)分离出来的.它的特性就在于能耐高温,是一个很理想的 酶,但它被广泛运用则于80年代之后.PCR最初的原始雏形概念是类似基因修复复制,它是于1971年由 Dr. Kjell Kleppe 提出.他发表了第一个单纯且短暂性基因复制(类似PCR前两个周期反应)的实验.而现今所发展出来的PCR则于1983由 Dr. Kary B. Mullis发展出的,Dr. Mullis当年服务于PE公司,因此PE公司在PCR界有着特殊的地位.Dr. Mullis 并于1985年与 Saiki 等人正式表了第一篇相关的论文.此后,PCR的运用一日千里,相关的论文发表质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背.随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广泛应用,成为分子生物学研究的最重要技术.Mullis也因此获得了1993年诺贝尔化学奖.
2023-07-28 22:12:091

拳皇历代BOSS 是谁

拳皇正统续作94 卢卡尔95 大蛇卢卡尔96 高尼茨97 大蛇98 欧米茄卢卡尔(也叫怒加)99 古利查力度2000 零2001 伊格尼斯2002 NESTS卢卡尔2003 无界XI 祸忌XIII 斋羿
2023-07-28 22:12:192

东京女子摔角选手介绍:治愈系笑容 爆糖兔 瑞希

别看我们的瑞希选手年纪不大,其实她已经是从事职业摔角8年的前辈了,16岁在高中时期就开始了她的摔角训练。 早在2012年就在女子摔角联盟LLPW-X登台亮相完成了自己的擂台首秀。 并于2017年转会加入东京女子摔角联盟,以瑞希为擂台名在东京女子的擂台上开始崭露头角。 2017年4月8日,在东京女子的narimori tournament上击败伊藤麻希(MAKI ITOH)选手,在比赛后,瑞希接受了伊藤的招募邀请,组成了名为伊藤リスペクト军団(伊藤respect军团)的双打组合. 在2018年1月4日,她们发行了自己的首张单曲セツナイロ(尊重)。之后每逢她们比赛出场时,都会先在现场演唱这首活泼可爱的歌曲,给现场观众带来摔角和歌舞的双倍享受。 在同年9月9日,在东京公主双打冠军锦标赛的首轮,瑞希和伊藤组队击败了山下実优(Miyu Yamashita)和才木玲佳(Saiki ReiKei),获得了伊藤リスペクト军団的首场胜利。 多年的擂台打拼,瑞希磨练出了精湛的摔角技术和丰富的擂台经验,她的比赛能力在东京女子绝对可以说是数一数二的技术担当。凭着娇小灵活的体型,瑞希往往能在比赛中展示出多变的高飞技艺,这是对手的噩梦也是观众们拍摄精美照片的绝佳机会。 还有上下翻飞搞得对手晕头转向后再把对手固定在边绳处后接上一发干净利落的双脚飞踢,这样的操作相信已经成为了她对手挥之不去的心理阴影。 话不多说,下面让我们来欣赏几张高能动图!! ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 2018年8月4日,在新宿Face竞标赛上,瑞希与坂琦由佳(Yuka Sakazaki)一起组合为魔法糖兔(マジカルシュガーラビッツ)并在同年8月25日的后乐园大会上赢得了东京公主双打冠军腰带。 在2019年7月7日,瑞希在单打领域再现辉煌,在两国KFC击败爱星优奈赢得第六届东京公主杯冠军。 瑞希选手在生活中是个害羞的小姐姐,绰号叫做 Popping sugar rabbit(爆糖兔) 可不是浪得虚名的,最后让我们来欣赏小姐姐的几张擂台之外的可爱生活照,甜到发腻不偿命 [心]完结撒花~[心]
2023-07-28 22:12:351

拳皇13有什么人物,全部的?

主角:ASH CRIMSON【种子选手,阿修 克里门森】伊丽莎白队:ELISABETH SHENWOO DUOLON 【伊丽莎白,神武,堕珑】草薙队:KYO BENIMARU DAIMON【草薙 京,二阶堂 红丸,大门 五郎】饿狼队:TERRY ANDY JOE【泰利·伯格,安迪·伯格,乔·东丈】超能力队:ATHENA KENSOU CHIN【麻宫 雅典娜,椎拳 崇,镇 元斋】新女性格斗家队:MAI YURI KING【不知火 舞,坂崎 由莉,金】八神队:IORI MATURE VICE【八神 庵(失去苍炎之力),玛卓雅,薇思】怒队:RALF CLARK LEONA【拉尔夫·琼斯·保罗 克拉克·斯蒂尔 雷欧娜·哈迪伦】龙虎队:RYO ROBERT TAKUMA【坂崎 良 罗伯特·加西亚 坂崎 琢磨】金队:KIM HWA RAIDEN【金家藩 霍查 雷电】K‘队:K" Dash MAXIMA KULA【K" 马克希玛 库拉·戴娜门度】小头目:SAIKI【斎祀(变身后),不可选用】最终boss:DARK ASH【血之螺旋疯狂阿修(被SAIKI附身),不可选用】目前已知的家用机版追加内容及其他角色:IORI YAGAMI【夺回苍炎之力的八神庵】BILLY KANE【比利 凯恩】SAIKI【斎祀(变身前)】由此,可用角色共34名,有战斗流程角色共36名其他角色:ROSE BERNSTAIN【萝丝·伯恩斯坦,卢卡尔的女儿, 此次大会的举办(?)者】ADELHEID BERNSTAIN【爱戴尔海德·伯恩斯坦,卢卡尔的儿子,作为家用机版故事主线之一】HEIDREN 【哈迪伦,雷欧娜的义父,ralf和clark的上司,作为家用机版故事主线之一】遥彼众【主要出现过的有无界,牡丹等等】
2023-07-28 22:12:431

谁知道日文名:柳 琳夕 用日文怎么说?

中国人的名字一般音读 りゅう りん ゆう
2023-07-28 22:12:515

拳皇13Steam版怎么选黑修和果男?

BILLY和SAIKI要进行ARCADE模式到第4关BILLY会乱入,打败解锁!SAIKI要在前3关完成40个挑战,达成会在第4关乱入,打败即可解锁,未变身的saiki和黑ash不能用。
2023-07-28 22:13:201

拳皇13 steam edition怎么选冥炎阿修和变了身的斋祀

你好,在街机版是可以选冥炎阿修和变了身的斋祀的,可是在steamedition只能选未变身斋祀。斋祀附体啊修也是不可以选的。希望采纳
2023-07-28 22:13:282

这个是谁

彩季レナ Rena Saiki加勒比071113-379 彩季レナ
2023-07-28 22:13:372

齐木楠雄日文读音

斉木 楠雄さいき くすおSaiki kusuo
2023-07-28 22:13:451

什么是PCR

聚合酶链式反应,一种人工在体外进行DNA基因片断扩增的方法。用于检验,灵敏度极高。比如要检验人体内是否有某个病毒。只要样本中有一个DNA分子片断,就可以通过倍增的方法迅速复制这个分子片断。复制的数量呈指数增长,几十次就可以以得到足够的分子样本进行后续的检验了。
2023-07-28 22:14:032

聚合酶链式反应是怎么回事

聚合酶链反应(PCR)是在试管中,能在较短的时间内使极微量的特定核酸扩增百万倍(106~109),故又称基因扩增技术,其敏感性远远超过包括放射免疫在内的所有血清学检验方法。其是目前世界上研究感染性疾病、遗传性疾病的早期诊断和癌细胞基因检测、基因突变的先进技术。只要患者体内极微量的乙肝病毒和丙肝、庚肝病毒存在就能被检测出来。但也因其太敏感了,也容易因标本的污染等原因出现假阳性。
2023-07-28 22:14:133

分子生物学主要事迹?主要内容

广义上:分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究、以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。狭义概念:既将分子生物学的范畴偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及到与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。现代分子生物学研究的主要内容有:基因与基因组的结构与功能,DNA的复制、转录和翻译,基因表达调控的研究,DNA重组技术,结构分子生物学等。5个分子生物学发展的主要大事纪(年代、发明者、简要内容):1. 1944年,著名微生物学家Avery 等人在对肺炎双球菌的转化实验中证实了DNA是生物的遗传物质。这一重大发现打破了长期以来,许多生物学家认为的只有象蛋白质那样的大分子才能作为细胞遗传物质的观点,在遗传学上树立了DNA是遗传信息载体的理论。2. 1953年,是开创生命科学新时代具有里程碑意义的一年,Watson和Crick发表了“脱氧核糖核酸的结构”的著名论文,他们在Franklin和Wilkins X-射线衍射研究结果的基础上,推导出DNA双螺旋结构模型,为人类充分揭示遗传信息的传递规律奠定了坚实的理论基础。同年,Sanger历经8年,完成了第一个蛋白质——胰岛素的氨基酸全序列分析。3. 1954年Gamnow从理论上研究了遗传密码的编码规律, Crick在前人研究工作基础上,提出了中心法则理论,对正在兴起的分子生物学研究起了重要的推动作用。4. 1956年Volkin和Astrachan发现了mRNA(当时尚未用此名)。5. 1985年,Saiki等发明了聚合酶链式反应(PCR);Sinsheimer首先提出人类基因组图谱制作计划设想;Smith等报导了DNA测序中应用荧光标记取代同位素标记的方法;Miller等发现DNA结合蛋白的锌指结构。
2023-07-28 22:14:233

名词解释:反向点

有反向点杂交的解释核酸杂交技术根据检测目的和检测手段的不同,可分为液相杂交、固相杂交及细胞内定位(原位)杂交。 固相杂交又可分为斑点杂交、凝胶电泳印迹转移杂交。而 反向斑点杂交(reverrsedotblot,RDB)是Saiki等提出的一种斑点杂交技术,该技术较正向斑点杂交和凝胶电泳印迹转移杂交具有快速、简便、高敏感性、特意性强的特点,尤其是基因分型、基因突变检测,病原体的检测等方面有其独特的优势。 反向斑点杂交利用生物素等标记的探针和特意性扩增PCR产物(靶DNA序列)杂交。但是不同于一般的斑点杂交。一般的点印迹杂交是靶DNA固定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上,标记的探针和靶DNA杂交显色。这种方法每次杂交反映只能判断待测DNA是否含有某一种探针的同源序列,对于某些基因座位可能含有十几至几十个等位基因(如HLADRB位点或地中海贫血突变基因等),用这种点杂交方法就会很繁杂,甚至可能做不到。而RDB正是解决了这一难题。RDB是先将待用的探针分别点到硝酸纤维素膜或尼龙膜上,每个探针一个点并编上号,再将待测的DNA样本(一般是经PCR特意性扩增的产物,在PCR引物5"端预先进行生物素标记,使扩增产物相应标记有生物素)与之杂交,这样待检样本就会与具有同源序列的探针结合,经洗涤去除未结合的DNA样本,由于待测的DNA样本具有生物素类的标记物,结合了待测DNA的探针点上就带有生物素类的标记物,再经相应的显色反应就能显出杂交信号。这样一次就可以判断某一基因座位的大部分或全部等位基因,因此利用这样的工作原理还可以用于基因分型、病原体检测、肿瘤研究等。
2023-07-28 22:14:501

有关于英文名psyche

Change into Sehn,no other Significance。Just a people name。American will no more laugh at you,how about Sehn?Adopt mine,ok?
2023-07-28 22:15:014

PCR的原理是什么,它有什么用途

包括:变性,退火,延伸。主要是用于目的基因的扩增。
2023-07-28 22:15:116

什么是PCR?

PCR诊断技术又叫多聚酶链式反应技术,它采用分子技术模拟核酸在体内的复制,从而判定疾病病原的种类,所以从本质上来说,这是一种实验室诊断方法。目前省内一些科研和检测机构,如山东省农科院、山东农业大学以及山东省兽医总站都已经熟练掌握了这项技术。 以往给动物治病,兽医都是采用看闻问摸的方法,这就要等到动物表现出明显的症状,才能初步判定疾病的类型,有时病症复杂了,还得经过很长一段时间的治疗性诊断,不仅错过了治疗的最佳时间,还会造成饲料和药品的浪费。甚至还会出现误诊。而PCR技术就不同了,它不需要观察动物的外观表现,所以无论是在潜伏期还是爆发期,只要对动物的相应器官进行检测,在两个小时内就能准确判定出畜禽疾病的原因和种类,这就意味着能够快速治愈爆发的疾病。另外,这项技术也能作为确定某些疾病流行的权威依据。特别是目前其他各种技术都很难确诊的病毒病,通过它就可以非常直观的得出结论。
2023-07-28 22:15:457

翻译日文……求罗马音

「彼女こそ…私のエリスなのだろうか…」 kanojyo koso...watashi no erisu nano darouka...「——箱庭を骗る槛の中で 禁断の海马(器官)に手を加えて 骄れる无能な创造神(かみ)にでも 成った心算なの……」 --hananiwa wo damaru roei no naka de kindan no kikan ni te ga kuwaete morireru munou na kami ni demo natta shinsan nano.........Love wishing to the "Ark" (崩壊 其れは孕み続けた季节 二月の雪の日 『妹』(Soror)の记忆(ゆめ)) houkai soreha harami tsuduketa kesetsu nigatsu no yuki no hi (soror)no (yume))「我々を楽园へ导ける箱舟は 哀れなる魂を大地から解き放つ 救いを求める贵女にArkを与えよう」 《Arkと呼ばれた物》(それ)は月光を受けて银色に煌いた… wareware wo rakuen he michibikeru hakofune ha awarenaru tamashi wo daichi kara tokihanatsu sukui wo motomeru anata ni Ask wo ataeyou想い出まで裏切った 冷たい言叶の雨 幸せだった二人 永远(とわ)に届かなくなる前に… omoidemade uragiritta tsumetai kotoba no ameshiawase datta futari towa ni todoka naku naru mae ni...「ねぇ…何故変わってしまったの? あんなにも爱し合っていたのに」 涙を微笑みに换え诘め寄る 《Arkと呼ばれた物》(Knife)を握って… ) ne...naze kawatte shimattano? an nani mo aishiatte itanoninamida wo hohoemi ni kae tsume yoru <Ark to yobareta mono>(knife) wo nigitte...——爱憎の箱舟(Ark) aizou no hakufuni (ark)「さぁ…楽园へ还りましょう、お兄様…」 saa...rakuen he kaeri ma syou,oniisama...(因果 其れは手缲り寄せた糸 六月の雨の日 『兄』(Frater)の记忆(ゆめ)) inga sore ha te kuriyoseta ito rokugatsu no ame no hi (frater)no (yume)) 信じてたその人に裏切られた少女 shinjiteta sono hito ni uragirareta syoujyo逃げ込んだ楽园は信仰という狂気 nigekonda rakuen ha shinkou to iu kyouki新しい世界へと羽ばたける自己暗示 atarashii sekai he to habadakeru jikoanji澄み渡る覚醒は进行という凶器 sumi wataru kakusei ha shinkou to iu kyouki最期の瞬间(とき)に廻った 歪な爱の记忆 saiki no toki ni megutta ibitsuna ai no kioku 脆弱な精神(ココロ)が堪えきれず あの日嘘を吐いた… seijyaku na kokowo ga koraekirezu ano hi uso wo tsuita...律すれば律する程堕ちる 赦されぬ想いに灼かれながら rissureba rissuruhodo ochiru yurusarenu omoi ni yakare na garaまぐわう伤は深く甘く 破灭へ诱う… magu wau kizu ha fukaku amaku hametsu he sasou——背徳の箱舟(Ark) haitoku no Ark「さぁ…楽园へ还りましょう、お兄様…」 saa...rakuen he kaeri ma syou,oniisama...被験体#1096 通称『妹』(Soror)同じく hikentai one o nine six tsusyou soror nonajiku(Soror with the "Ark", Frater in the Dark) 被験体#1076 通称『兄』(Frater)を杀害 hikentai one o seven six tsusyou frater wo satsugai(Soror with the "Ark", Frater it"s Dead) <症例番号(Case Number)12> Case Number 12过剰投影型依存における袋小路の模型(モデル) gasyou touei kata izon ni okeru fukurokouji no moderu即ち《虚妄型箱舟依存症候群》(Ark) sunawachi ark限りなく同一に近づける 追忆は狂気にも似た幻想 kageri naku onaji ni chikatsukeru tsuioku ha kyouki ni mo nita gensou求める尽に唇を夺い合い 少しずつ楽园を追われてゆく motomeru mamani kuchibiru wo ubaai sukoshi zutsu rakuen wo owareteyuku同じ心的外伤(トラウマ)重ねれば响き合う けれどそれ以上には… onaji torauma kasanereba hibikiau keredo sore ijyou ni ha...「——箱庭を骗る槛の中で 禁断の海马(器官)に手を加えて 骄れる无能な创造神(かみ)にでも 成った心算なの?」か… hananiwa wo damaru roei no naka de kindan no kikan ni te wo ga kuwaete morireru munou na kami ni demo natta shinsan nano......在りし日に咲かせた花弁は 暗暗に散り逝くように凛と arishi hi ni sakaseta hanabira ha kurayami ni chiriiku you ni rin to少女の声色で嗫く「楽园へ还りましょう」… syoujyo no koeiro de sasayaku rakuen e kaeri masyou...Love wishing to the "Ark" 监视卿(Watcher)は天を仰ぎ深い溜息を吐く Watcher ha ten wo aoge fukai tameiki wo tsuku失った筈の《左手の薬指》(场所)が虚しく疼いた ushinatta hatsu no bassyou ga munashiku uzuita——ふと彼が监视镜(Monitor)の向こうへ视线を戻すと futo kare ga Monitor no mukou e shisen wo motosuto呜呼…いつの间にか少女の背后には『仮面の男』が立っていた——aa...itsu no ma ni ka syoujyo no haigo ha kamen no otoko ga tatte ita
2023-07-28 22:16:311

各位高手谁能给我详细的讲解一下PCR技术的过程

呃,一般都有个pcr仪的dna提取出来后,加入四种核酸原料,引物,聚合酶,Mg2+缓冲液,放到pcr仪里面。里边加热。降温。加热。降温。。。不断复制扩增,引物所对应的一段特定dna。其实没啥技术含量的。。。。
2023-07-28 22:16:424

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2023-07-28 22:16:5210

甲壳素是什么

B
2023-07-28 22:17:184

PCR反应中的“SAP反应”的中文叫什么

  聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。  PCR技术简史  PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。  PCR的实现 1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制,只是在试管中给 DNA的体外合成提供以致一种合适的条件---摸板DNA,寡核苷酸引物,DNA聚合酶,合适的缓冲体系,DNA变性、复性及延伸的温度与时间。  PCR的改进与完善 Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的 Klenow片段,其缺点是:①Klenow酶不耐高温,90℃会变性失活,每次循环都要重新加。②引物链延伸反应在37℃下进行,容易发生模板和引物之 间的碱基错配,其PCR产物特异性较差,合成的DNA片段不均一。此种以Klenow酶催化的PCR技术虽较传统的基因扩增具备许多突出的优点,但由于 Klenow酶不耐热,在DNA模板进行热变性时,会导致此酶钝化,每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期,给PCR技术操作程序添了不少困难。这使得 PCR技术在一段时间内没能引起生物医学界的足够重视。1988年初,Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR,其扩增的DNA片段很均一,真实性也较高,只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次,仍需加入新酶。1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶。此酶具有以下特点:①耐高温,在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的 60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。②在热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效 率,增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率,因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶I Klenow片段区别,将此酶命名为Taq DNA多聚酶(Taq DNA Polymerase)。此酶的发现使PCR广泛的被应用。  PCR技术基本原理  PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引 物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。  PCR的反应动力学 PCR的三个反应步骤反复进行,使DNA扩增量呈指数上升。反应最终的DNA 扩增量可用Y=(1+X)n计算。Y代表DNA片段扩增后的拷贝数,X表示平(Y)均每次的扩增效率,n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为100%, 但在实际反应中平均效率达不到理论值。反应初期,靶序列DNA片段的增加呈指数形式,随着PCR产物的逐渐积累,被扩增的DNA片段不再呈指数增加,而进 入线性增长期或静止期,即出现“停滞效应”,这种效应称平台期数、PCR扩增效率及DNA聚合酶PCR的种类和活性及非特异性产物的竟争等因素。大多数情 况下,平台期的到来是不可避免的。  PCR扩增产物 可分为长产物片段和短产物片段两部分。短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5"端之间,是需要扩增的特定片段。短产物片段和长产物片段是由于引物所 结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应周期中,以两条互补的DNA为模板,引物是从3"端开始延伸,其5"端是固定的,3"端则没 有固定的止点,长短不一,这就是“长产物片段”。进入第二周期后,引物除与原始模板结合外,还要同新合成的链(即“长产物片段”)结合。引物在与新链结合 时,由于新链模板的5"端序列是固定的,这就等于这次延伸的片段3"端被固定了止点,保证了新片段的起点和止点都限定于引物扩增序列以内、形成长短一致的 “短产物片段”。不难看出“短产物片段”是按指数倍数增加,而“长产物片段”则以算术倍数增加,几乎可以忽略不计, 这使得PCR的反应产物不需要再纯化,就能保证足够纯DNA片段供分析与检测用。  PCR反应体系与反应条件  标准的PCR反应体系:  10×扩增缓冲液 10ul  4种dNTP混合物 各200umol/L  引物 各10~100pmol  模板DNA 0.1~2ug  Taq DNA聚合酶 2.5u  Mg2+ 1.5mmol/L  加双或三蒸水至 100ul  PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+  引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。  设计引物应遵循以下原则:  ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。  ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。  ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。  ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3"端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。  ⑤引物3"端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。  ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。  ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。  引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。  酶及其浓度 目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。  dNTP的质量与浓度 dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合,使游离的Mg2+浓度降低。  模板(靶基因)核酸 模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。 SDS的主要功能是: 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀 核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接 用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。  Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。  PCR反应条件的选择  PCR反应条件为温度、时间和循环次数。  温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法, 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。  ①变性温度与时间:变性温度低,解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下,93℃~94℃lmin足以使模板DNA变性,若低于93℃则 需延长时间,但温度不能过高,因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性,就会导致PCR失败。  ②退火(复性)温度与时间:退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃~60℃,可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多,引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长 度。对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度:  Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T)  复性温度=Tm值-(5~10℃)  在Tm值允许范围内, 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合,提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30~60sec,足以使引物与模板之间完全结合。  ③延伸温度与时间:Taq DNA聚合酶的生物学活性:  70~80℃ 150核苷酸/S/酶分子  70℃ 60核苷酸/S/酶分子  55℃ 24核苷酸/S/酶分子  高于90℃时, DNA合成几乎不能进行。  PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增片段的长度而定,一般1Kb以内的DNA片段,延伸时间1min是足够 的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增,延伸时间要稍长些。  循环次数 循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。  PCR反应特点  特异性强 PCR反应的特异性决定因素为:  ①引物与模板DNA特异正确的结合;  ②碱基配对原则;  ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;  ④靶基因的特异性与保守性。  其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。  灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。  简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。  对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等粗制的DNA扩增检测。 PCR扩增产物分析  PCR产物是否为特异性扩增 ,其结果是否准确可靠,必须对其进行严格的分析与鉴定,才能得出正确的结论。PCR产物的分析,可依据研究对象和目的不同而采用不同的分析方法。  凝胶电泳分析:PCR产物电泳,EB溴乙锭染色紫外仪下观察,初步判断产物的特异性。PCR产物片段的大小应与预计的一致,特别是多重PCR,应用多对引物,其产物片断都应符合预讦的大小,这是起码条件。  琼脂糖凝胶电泳: 通常应用1~2%的琼脂糖凝胶,供检测用。  聚丙烯酰胺凝胶电泳:6~10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中,可用于科研及检测分析。  酶切分析:根据PCR产物中限制性内切酶的位点,用相应的酶切、电泳分离后,获得符合理论的片段,此法既能进行产物的鉴定,又能对靶基因分型,还能进行变异性研究。  分子杂交:分子杂交是检测PCR产物特异性的有力证据,也是检测PCR 产物碱基突变的有效方法。  Southern印迹杂交: 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针,与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定,又可以提高检测PCR产物的灵敏度,还可知其分子量及条带形状,主要用于科研。  斑点杂交: 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上,再用内部寡核苷酸探针杂交,观察有无着色斑点,主要用于PCR产物特异性鉴定及变异分析。  核酸序列分析:是检测PCR产物特异性的最可
2023-07-28 22:17:431

有关于日本电影《下水道的美人鱼》

  下水道的美人鱼》  片名:Guinea Pig Mermaid in a Manhole  译名:豚鼠之下水道中的美人鱼  导演: Hideshi Hino  主演: Shigeru Saiki /Mari Somei/齐木茂/久本雅美  上映年度: 1988  语言: 日语  类型:恐怖片/BT  制片国家/地区: 日本  色彩:彩色  片长:63 min  日本《豚鼠系列》一共六部:(《豚鼠系列》又称“实验电影”)  1、恶魔实验 1985  2、血肉之花 1985  3、他不会死 1986  4、地窖人鱼 1988  5、圣母机器人 1988  6、恶魔女医生 1990  《不列颠百科全书》国际中文版对豚鼠(Guinea Pig)的解释是:“一种驯养的啮齿目豚鼠科动物,原产南美洲。在印加时代以前即已驯化,美洲发现后不久便引进欧洲,并迅即成为受人喜爱的观赏动物和有价值的实验动物”。⑩可见,豚鼠只是一种供人们玩赏和进行实验的驯化动物,可奇怪的是《豚鼠》系列影片虽以“实验”为母题,但片中却不见一只真正意义上的豚鼠,我们看到的“豚鼠”是活生生、血淋淋的人体。  《下水道人鱼》是《豚鼠系列》中的第4部,比较具有思想性的一部,但是,仍然很血腥。  被列为14部世界禁播电影之一,现已被多数网站封(如优酷、迅雷、土豆、56、酷6等)。  建议:心理承受能力弱者不要看,极度恶心.  剧情:一个画家在下水道里发现一条美人鱼,只是肚子上长了几个大脓包!好心的画家把她带到家里放在浴缸里养病,美人鱼身上的大脓包越长越多,脓水和血水把浴缸里水给染浑了,画家帮人鱼把脓水一点点的抠出来,用毛巾捂住!美人鱼说她活不了多久了,要画家把她病变的过程给画下来。过了几天,脓包又长满了人鱼的乳房,画家来看人鱼,只见脓包里蠕动着探出半节身子的蛆(水蛭)?画家脸扭成一团~!在人鱼的悲呼下,画家抖抖嗦嗦用手带蛆一条条楸出来!后来人鱼连脸上也长满了,身上不断喷出脓水和蛆,最后几只近一尺长的肥蛆从她身上溢出,美人鱼死了,画家看到这惨绝人寰的一幕,疯狂的拿着刀去砍人鱼身上的蛆,砍了一夜!楼下的邻居在吃饭时,见到血水从天花板上滴出,他们冲到画家的家里,惊骇地看着画家木无表情的在剁尸块,地上还有个婴儿的胚胎!画家被关进牢里,一片人鱼鳞片成了他永远的相伴.  此片给人的最大冲击来自于视觉,肮脏的下水道、半泡在脏水中的弃婴、成堆的蛆、腐烂的猫、长蛆的腐肉、流着粘稠液体的脓包、蛆虫在人鱼的腐肉里爬行、半张烂掉的脸、画家用刀在人鱼的体内挖出了一具成形的婴儿……一个又一个肮脏而恶心的画面,冲击着你可怜的眼球和肠胃,但这些肮脏的东西又实实在在的存在于人类的世界里,在任何一座灯红酒绿、金碧辉煌的城市下面都会有这样的下水道存在,所以美丽的人鱼才会被肮脏的下水道污染,所以艺术总是被人类的欲望玷污。  这个过程贯穿了影片的大部分,期间人鱼痛苦万分而画家则给予人鱼温情的关怀,帮人鱼挤脓,抽出身体里的蛆等等。而画家的画也伴随着人鱼的状况而改变,直到人鱼死去,画作也最终完成,一张布满五彩脓疮的脸。神情恍惚的画家肢解了人鱼,然而在人鱼的腹中竟然发现了一个婴儿。最后police在画家邻居的举报下逮捕了画家。影片完结的镜头定格在一枚人鱼的鳞片上。  人鱼是大海里美丽的精灵,然而将其置于下水道这一伴随人类文明进展而出现的特定环境中,就注定了影片中的悲剧。可以理解为原本美丽的自然一经人类的玷污就会变的丑陋无比。是对人类工业化进程以及其中人与自然关系的反思。其中还有对人类的污染行为进行批判的意味。另外一点,片中对画家的刻画亦十分深刻。从开始的对人鱼迷恋,到后面对已经异化的人鱼所表现出的关怀都体现出画家的勇气,虽然面对一些场景表现出了恐惧和犹豫,但他依然去做了,这可以理解为爱情中的人格魅力(……..)。同时这里我们可以反思一下,当我们的爱人变成片中人鱼的模样时(虽然那是不可能的),我们是否有勇气去面对
2023-07-28 22:17:511

下水道人鱼里女主角人鱼是谁演的?

aaaaaa]]]]你就不能换点其他问题????
2023-07-28 22:18:106