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2000到2014诺贝尔化学奖获得者

2023-07-18 03:55:50
共3条回复
黑桃云

1、2000:黑格(美国人)、麦克迪尔米德(美国人)、白川秀树(日本人)

2、2001:野依良治 日本人 、威廉·诺尔斯 美国人 、巴里·夏普莱斯 美国人

3、2002:美国科学家约翰·芬恩、日本科学家田中耕一和瑞士科学家库尔特·维特里希

4、2003:美国科学家彼得·阿格雷和罗德里克·麦金农。

5、2004:以色列科学家阿龙·切哈诺沃、阿夫拉姆·赫什科和美国科学家欧文·罗斯

6、2005:法国石油研究所的伊夫·肖万、美国加州理工学院的罗伯特·格拉布和麻省理工学院的理查德·施罗克

7、2006:美国科学家罗杰·科恩伯格因

PLASMON

8、2007:德国科学家格哈德·埃特尔

9、2008:美国的Osamu Shimomura(下村修),Martin Chalfie(马丁·查尔菲),Roger Y. Tsien(钱永健)

10、2009:美国科学家Venkatraman Ramakrishnan、Thomas A. Steitz及以色列科学家Ada E. Yonath

11、2010:美国科学家理查德·赫克和日本科学家根岸荣一和铃木章

12、2011:以色列科学家Daniel Shechtman(丹尼尔·舍特曼)

13、2012:美国科学家罗伯特·洛夫科维茨(Robert J. Lefkowitz)以及布莱恩·克比尔卡(Brian K. Kobilka)。

14、2013年:犹太裔美国理论化学家马丁·卡普拉斯(Martin Karplus)、美国斯坦福大学生物物理学家迈克尔·莱维特(Michael Levitt)和南加州大学化学家亚利耶·瓦谢尔(Arieh Warshel)

15、2014年:美国霍华德·休斯医学研究所的埃里克·本茨格(Eric Betzig),德国马克斯普朗克 生物物理化学研究所的史蒂芬·赫尔(Stefan W. Hell)以及美国斯坦福大学的威廉·默尔纳(William E. Moerner)

余辉

  2000年—2015年的诺贝尔化学奖获得者及其获奖原因:

  2000年:艾伦u2022黑格(美)艾伦u2022麦克迪尔米德(美/新西兰)白川英树(日)对导电聚合物的研究。

  2001年:威廉u2022诺尔斯(美)野依良治(日)手性催化还原反应,巴里u2022夏普莱斯(美)手性催化氧化反应。

  2002年库尔特u2022维特里希(瑞士)约翰u2022贝内特u2022芬恩(美)田中耕一(日)对生物大分子的鉴定和结构分析方法的研究。

  2003年:彼得u2022阿格雷(美)罗德里克u2022麦金农(美)对细胞膜中的水通道的发现以及对离子通道的研究。

  2004年:阿龙u2022切哈诺沃(以)阿夫拉姆u2022赫什科(以)欧文u2022罗斯(美)发现了泛素调解的蛋白质降解。

  2005年:罗伯特u2022格拉布(美)理查德u2022施罗克(美)伊夫u2022肖万(法)对烯烃复分解反应的研究。

  2006年:罗杰u2022科恩伯格(美)对真核转录的分子基础所作的研究。

  2007年:诺贝尔化学奖授予德国科学家格哈德u2022埃特尔,以表彰他在“固体表面化学过程”研究中作出的贡献。

  2008年:美国Woods Hole海洋生物学实验室的下村修、哥伦比亚大学的Martin Chalfie和加州大学圣地亚哥分校的钱永健因发现并发展了绿色荧光蛋白(GFP)而获得该奖项。

  2009年:英国生物学家万卡特拉曼u2022拉玛克里斯南(Venkatraman Ramakrishnan)、美国科学家托马斯u2022斯泰茨(Thomas A. Steitz)和以色列女生物学家约纳什(Ada E. Yonath)因在核糖体结构和功能研究中的贡献共同获该奖。

  2010年:美国德拉威尔大学的Richard F. Heck、普渡大学的Ei-ichi Negishi以及日本仓敷艺术科学大学的Akira Suzuki,他们发明了新的连接碳原子的方法,获得2010年诺贝尔化学奖。

  2012年:美国科学家罗伯特u2022莱夫科维茨和布莱恩u2022克比尔卡因“G蛋白偶联受体研究”获诺贝尔化学奖。

  2013年:诺贝尔化学奖授予美国科学家马丁u2022卡普拉斯、迈克尔u2022莱维特和阿里耶u2022瓦谢勒,以表彰他们在开发多尺度复杂化学系统模型方面所做的贡献。

  2014年:诺贝尔化学奖授予了美国科学家埃里克u2022贝齐格、威廉u2022莫纳和德国科学家斯特凡u2022黑尔,以表彰他们为发展超分辨率荧光显微镜所作的贡献。

  2015年:托马斯u2022林道尔(Tomas Lindahl)、保罗u2022莫德里奇(Paul Modrich)以及阿奇兹u2022桑卡(Aziz Sancar)获奖。获奖理由是“DNA修复的细胞机制研究”。

CarieVinne
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链接是百度文库的一个文章,里面有历届诺贝尔奖得主的基本信息。我看了下,里面有一直到2013年的。
然后以下是2014年的
2014年新诺贝尔和平奖获得者:Edward Snowden

爱德华·斯诺登(Edward Snowden)于2013年5月向全世界公布了美国政府有关部门极其高明的监控手段,正是通过这些监控措施,使得美国警方粉碎了多起针对美国的恐怖袭击图谋,保护了无数美国人的生命财产安全。让世界各国都受教了,使大家确信,只有足够且有效的监控才能换来安全、稳定与和平。基于此,我们把2014年新诺贝尔和平奖授予爱德华·斯诺登。

2014年新诺贝尔物理学奖获得者:Thomas W. Ebbesen

法国斯特拉斯堡大学 教授兼 ISIS科学与超分子工程学院院长 Thomas W. Ebbesen 因观察和解释光通过亚波长孔的传播,为Surface Plasmon Photonics表面等离子体领域的研究作出巨大贡献而荣获2014年新诺贝尔物理学奖。

2014年新诺贝尔化学奖获得者: Stephen J. Lippard

美国麻省理工学院 化学系教授 Stephen J. Lippard 因开展生物无机化学领域的开创性研究,包括发现破坏 DNA 复制的金属配合物而荣获2014年新诺贝尔化学奖。DNA 复制对癌症疗法的进步做出了巨大贡献。

2014年新诺贝尔生理学或医学奖获得者:Jacques F. A. P. Miller

雅克·米勒(Jacques F. A. P. Miller),澳大利亚墨尔本大学、沃尔特伊丽莎医学研究所(Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research)名誉教授。因发现哺乳动物胸腺的功能以及T细胞和B细胞的鉴定等成就荣获2014年新诺贝尔生理学或医学奖。

2014年新诺贝尔文学奖获得者:Milan Kundera

米兰·昆德拉(Milan Kundera),捷克小说家,生于捷克布尔诺市。1948年,到首都布拉格读大学。主要作品有《玩笑》,《好笑的爱》,《生活在别处》,《告别圆舞曲》,《笑忘书》,《生命中不能承受之轻》 ,《不朽》,《慢》,《身份》,《无知》,《庆祝无意义》。

2014年新诺贝尔经济学奖获得者: Albert Alesina

美国哈佛大学 经济系 政治经济学教授 Albert Alesina 因其针对政治与宏观经济之间的关系所进行的理论和实证研究,尤其是关于政治经济周期的研究而荣获2014年新诺贝尔经济学奖。

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2023-07-17 22:55:331

什么是局域表面等离子体共振?

金属表面等离子体振荡分为表面等离子体激元SPP和局域表面等离子体振荡LSP。如果在介质和金属的界面上存在微细结构(微粒或微小沟槽),那么,除了SPP之外,还会存在一种局域在微细表面结构上的所谓Local SP(LSP)。LSP的频率除了金属和介质的材料以外,还与微细结构的尺度形状有关。LSP和SPP的不同:两者的色散关系不同,SPP是一种表面的传播场,而LSP是依托于某种表面结构的局域电磁场振荡,具有一系列分立的、复数的频率,是由产生LSP的表面微结构的尺度形状决定的。LSP振荡可以由合适的频率和偏振的光来激发,与激励光的波矢无关,而SPP的激发则要求激励光的频率和波矢都要和SPP匹配。LSP和SPP可以相互转换:在粗糙的表面,LSP和SPP的频率接近,LSP振荡可以激励SPP,SPP也可以激发LSP。(从而实现能量转换)LSP和SPP之间能量的转换,对于SPP的激励起着重要作用。(因为LSP不要求波矢匹配,通过LSP来激发SPP效率更高)提高了表面结构对于SPP的散射作用。
2023-07-17 22:55:434

表面等离子体的科学历史

1902年,R. W. Wood在实验中发现了金属光栅的衍射异常现象 ,在正常的衍射角分布谱中出现了新的衍射峰(谷),1907年Rayleigh在他的衍射理论中尝试解释这一现象 ,但是直到1941年U. Fano 才成功地将这一现象和先前1899-1909年由Zenneck和Sommerfeld提出的电磁表面波(electromagnetic surface wave)的理论 联系起来。衍射谱的峰(谷)实际上衍射模式和金属表面的表面等离激元耦合过后的结果。在特定的衍射角度,当满足波矢匹配(也即光的动量守恒)条件时,光能量可以与表面等离激元能量互相转换,衍射谱图中也就相应的出现峰或谷。R. H. Ritchie注意到,当高能电子通过金属薄膜时,不仅在等离激元频率处有能量损失,在更低频率处也有能量损失峰,并认为这与金属薄膜的界面有关 。1959年,C. J. Powell和J. B. Swan通过实验证实了R. H. Ritchie的理论 。1960年,E. A. Stren和R. A. Farrel研究了此种模式产生共振的条件并首次提出了表面等离激元(SurfacePlasmon,SP)的概念 。在纳米技术成熟之后,表面等离子体受到了人们极大的关注,从20世纪90年代起成为研究的热点。它已经被应用于包括生物化学传感,光电子集成器件多个领域。
2023-07-17 22:55:531

二氧化硅包裹金颗粒的颜色变化

题主是否想询问“二氧化硅包裹金颗粒颜色变化的原因”原因是由于表面等离子体共振效应(SurfacePlasmonResonance,SPR)的影响。这种SPR效应与金颗粒的尺寸、形状、材料、表面修饰等因素有关,会导致光的吸收和散射发生变化,从而引起颜色的变化。当光线照射在金颗粒表面时,激发金颗粒表面的电子,形成电子密度波,产生SPR效应。
2023-07-17 22:56:161

研究蛋白质之间相互作用的实验方法有哪些?

白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。把原来spaces空间上的一篇蛋白质与蛋白质间相互作用研究方法转来,算是实验技巧分类目录的首篇。x0dx0ax0dx0a一、酵母双杂交系统x0dx0a酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大规模蛋白质之间相互作用的研究。在实际工作中,人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。x0dx0ax0dx0a二、噬茵体展示技术x0dx0a在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前,用优化的噬菌体展示技术,已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cDNA文库,并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。x0dx0a三、等离子共振技术x0dx0a表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)已成为蛋白质相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一种纳米级的薄膜吸附上“诱饵蛋白”,当待测蛋白与诱饵蛋白结合后,薄膜的共振性质会发生改变,通过检测便可知这两种蛋白的结合情况。SPR技术的优点是不需标记物或染料,反应过程可实时监控。测定快速且安全,还可用于检测蛋白一核酸及其它生物大分子之间的相互作用。x0dx0a四、荧光能量转移技术x0dx0a荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究分子间的距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合,可定量获取有关生物活体内蛋白质、脂类、DNA 和RNA 的时空信息。随着绿色荧光蛋白(GFP)的发展,FRET 荧光显微镜有可能实时测量活体细胞内分子的动态性质。提出了一种定量测量FRET效率以及供体与受体间距离的简单方法,仅需使用一组滤光片和测量一个比值,利用供体和受体的发射谱消除光谱间的串扰。该方法简单快速,可实时定量测量FRET 的效率和供体与受体间的距离,尤其适用于基于GFP 的供体受体对。x0dx0a五、抗体与蛋白质阵列技术x0dx0a蛋白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变,微型化,集成化,高通量化的抗体芯片就是一个非常好的研究工具,他也是芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展,比如肿瘤标志物抗体芯片等,还有很多已经应用再眼就的各个领域里。x0dx0a六、免疫共沉淀技术 x0dx0a免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用[/url]的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA|Pansobin”,因为SPA|Pansobin比较大,这样复合物在离心时就被分离出来。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物四组分又被分开。然后经Western blotting法,用抗体检测目的蛋白是什么,是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白可信度高。但这种方法有两个缺陷:一是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;二是必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。x0dx0a七、pull-down技术x0dx0a蛋白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western法研究。Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过Pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。
2023-07-17 22:56:271

表面等离子体的基本原理

表面等离子体(Surface Plasmons,SPs)是指在金属表面存在的自由振动的电子与光子相互作用产生的沿着金属表面传播的电子疏密波。其产生的物理原理如下:如作图所示,在两种半无限大、各向同性介质构成的界面,介质的介电常数是正的实数,金属的介电常数是实部为负的复数。根据maxwell方程,结合边界条件和材料的特性,可以计算得出表面等离子体的场分布和色散特性。纳米金属晶体的表面等离子体共振存在不同的分类方式:1) 横向(transverse surface plasmon resonance)与纵向(longitude surface plasmon resonance)。 其中,纵向表面等离子体共振有希望应用于光波导。2) 局域等离子体共振(localized surface plasmon resonance)与传播等立体子体共振(propagating surfaceplasmon resonance)。值得注意的是longitude surface plasmon resonance与localized surfaceplasmon resonance的英文缩写都是LSPR(或者LSP),在不同的文章中容易混淆。
2023-07-17 22:56:361

spp是横波还是纵波

SPP是横波。SPP是表面等离子波(Surface Plasmon Polariton)的缩写,是一种在金属-介质界面上传播的电磁波。它是由金属中的自由电子与光场相互作用形成的一种耦合模式。SPP的传播方向与金属表面平行,电场和磁场分布都是垂直于传播方向的,因此它是一种横波。横波是指波动方向与传播方向垂直的波动形式。在SPP中,电场和磁场的振动方向都是垂直于传播方向的,因此SPP是一种横波。与横波相对的是纵波,纵波是指波动方向与传播方向平行的波动形式,例如声波就是一种纵波。SPP在纳米光学、光电子学和表面增强拉曼散射等领域具有重要应用。由于其特殊的传播性质和与光场的耦合效应,SPP在纳米尺度下可以实现超分辨率成像和局域场增强效应,为纳米光学器件和传感器的设计提供了新的思路和方法。
2023-07-17 22:58:011

Optics letters文章下载

留个邮箱吧。下了之后好发给你。
2023-07-17 22:58:192

nanoplasmonic是什么意思

plasmonic 网络释义 相关词条 plasmon excitation 1.等离振子激发 2.等离子体子激发 surface plasmon 1.表面等离激元 2.表面等离子体 plasmon resonance 1.等离子共振
2023-07-17 22:58:541

appliedsurfacescience摘要字数要求

Yuanyuan Li, Mingming Zhai, Hui Xu*Institute of Advanced Synthesis, School of Chemistry and Molecular Engineering, Jiangsu National Synergetic Innovation Center for Advanced Materials, Nanjing Tech University, Nanjing 211816, China. * To whom correspondence should be addressed. Email: ias_hxu@njtech.edu.cnAbstract: We reported a controlled synthesis and characterization of high-yield sea urchin-like gold nanoparticles (SGNPs) and their optical characteristics. The morphology of the SGNPs can be readily tuned by varying the experimental parameters, i.e., seeds growth time, proportion of precursors in silver/gold seeds, and amount of gold precursor used for spikes growth. Detailed statistical analysis such as TEM and SEM measurements unravels the average diameter and spike length of the SGNPs were ~ 150 and ~ 25 nm, respectively. Their corresponding optical properties was studied in detail. The absorption spectra of the SGNPs comprising a short and long plasmon band showed that the localized surface plasmon resonance (LSPR) peaks were red-shifted with the increasing spike length of SGNPs. In addition, the surface-enhanced Raman scattering (SERS) of the resulting SGNPs were also investigated using 4-mercaptobenzoic acid as a Raman reporter molecule, which exhibited a distinctive surface plasmon resonance band in the visible and near-infrared region depending on their morphologies. It is shown that the SGNPs with sharp and numerous spikes can be used as excellent SERS substrates for single-molecule detection.
2023-07-17 22:59:091

生物中提到的spr技术是什么?要详细一点

好像是 生物传感器
2023-07-17 22:59:282

金属表面等离子体震荡频率与什么因素有关

表面等离子体(Surface Plasmons,SPs)是指在金属表面存在的自由振动的电子与光子相互作用产生的沿着金属表面传播的电子疏密波。其产生的物理原理如下:如作图所示,在两种半无限大、各向同性介质构成的界面,介质的介电常数是正的实数,金属的介电常数是实部为负的复数。根据maxwell方程,结合边界条件和材料的特性,可以计算得出表面等离子体的场分布和色散特性。金属膜与电介质表面间的等离子体振荡金属膜与电介质表面间的等离子体振荡纳米金属晶体的表面等离子体共振存在不同的分类方式:1) 横向(transverse surface plasmon resonance)与纵向(longitude surface plasmon resonance)。[6] 其中,纵向表面等离子体共振有希望应用于光波导。2) 局域等离子体共振(localized surface plasmon resonance)与传播等立体子体共振(propagating surfaceplasmon resonance)。值得注意的是longitude surface plasmon resonance与localized surfaceplasmon resonance的英文缩写都是LSPR(或者LSP),在不同的文章中容易混淆。
2023-07-17 22:59:411

生物体哪些生化过程涉及蛋白与蛋白互作

蛋白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。一、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大规模蛋白质之间相互作用的研究。在实际工作中,人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。二、噬菌体展示技术:在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前,用优化的噬菌体展示技术,已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cdna文库,并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。三、等离子共振技术:表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)已成为蛋白质相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一种纳米级的薄膜吸附上“诱饵蛋白”,当待测蛋白与诱饵蛋白结合后,薄膜的共振性质会发生改变,通过检测便可知这两种蛋白的结合情况。SPR技术的优点是不需标记物或染料,反应过程可实时监控。测定快速且安全,还可用于检测蛋白一核酸及其它生物大分子之间的相互作用。四、荧光能量转移技术:荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究分子间的距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合,可定量获取有关生物活体内蛋白质、脂类、DNA 和RNA 的时空信息。随着绿色荧光蛋白(GFP)的发展,FRET 荧光显微镜有可能实时测量活体细胞内分子的动态性质。提出了一种定量测量FRET效率以及供体与受体间距离的简单方法,仅需使用一组滤光片和测量一个比值,利用供体和受体的发射谱消除光谱间的串扰。该方法简单快速,可实时定量测量FRET 的效率和供体与受体间的距离,尤其适用于基于GFP 的供体受体对。五、抗体与蛋白质阵列技术:蛋白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变,微型化,集成化,高通量化的抗体芯片就是一个非常好的研究工具,他也是芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展,比如肿瘤标志物抗体芯片等,还有很多已经应用再眼就的各个领域里。六、免疫共沉淀技术:免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA|Pansobin”,因为SPA|Pansobin比较大,这样复合物在离心时就被分离出来。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物四组分又被分开。然后经Western blotting法,用抗体检测目的蛋白是什么,是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白可信度高。但这种方法有两个缺陷:一是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;二是必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。七、pull-down技术:蛋白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western法研究。Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过Pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。
2023-07-17 22:59:521

求毕业论文超光学分辨率的NSOM(近场扫描光学显微镜)探讨,的文献综述

  高分辨率光学显微术在生命科学中的应用  【摘要】 提高光学显微镜分辨率的研究主要集中在两个方面进行,一是利用经典方法提高各种条件下的空间分辨率,如用于厚样品研究的SPIM技术,用于快速测量的SHG技术以及用于活细胞研究的MPM技术等。二是将最新的非线性技术与高数值孔径测量技术(如STED和SSIM技术)相结合。生物科学研究离不开超高分辨率显微术的技术支撑,人们迫切需要更新显微术来适应时代发展的要求。近年来研究表明,光学显微镜的分辨率已经成功突破200nm横向分辨率和400nm轴向分辨率的衍射极限。高分辨率乃至超高分辨率光学显微术的发展不仅在于技术本身的进步,而且它将会极大促进生物样品的研究,为亚细胞级和分子水平的研究提供新的手段。  【关键词】 光学显微镜;高分辨率;非线性技术;纳米水平  在生物学发展的历程中显微镜技术的作用至关重要,尤其是早期显微术领域的某些重要发现,直接促成了细胞生物学及其相关学科的突破性发展。对固定样品和活体样品的生物结构和过程的观察,使得光学显微镜成为绝大多数生命科学研究的必备仪器。随着生命科学的研究由整个物种发展到分子水平,显微镜的空间分辨率及鉴别精微细节的能力已经成为一个非常关键的技术问题。光学显微镜的发展史就是人类不断挑战分辨率极限的历史。在400~760nm的可见光范围内,显微镜的分辨极限大约是光波的半个波长,约为200nm,而最新取得的研究成果所能达到的极限值为20~30nm。本文主要从高分辨率三维显微术和高分辨率表面显微术两个方面,综述高分辨率光学显微镜的各种技术原理以及近年来在突破光的衍射极限方面所取得的研究进展。  1 传统光学显微镜的分辨率  光学显微镜图像的大小主要取决于光线的波长和显微镜物镜的有限尺寸。类似点源的物体在像空间的亮度分布称为光学系统的点扩散函数(point spread function, PSF)。因为光学系统的特点和发射光的性质决定了光学显微镜不是真正意义上的线性移不变系统,所以PSF通常在垂直于光轴的x-y平面上呈径向对称分布,但沿z光轴方向具有明显的扩展。由Rayleigh判据可知,两点间能够分辨的最小间距大约等于PSF的宽度。  根据Rayleigh判据,传统光学显微镜的分辨率极限由以下公式表示[1]:  横向分辨率(x-y平面):dx,y=■  轴向分辨率(沿z光轴):dz=■  可见,光学显微镜分辨率的提高受到光波波长λ和显微镜的数值孔径N.A等因素的制约;PSF越窄,光学成像系统的分辨率就越高。为提高分辨率,可通过以下两个途径:(1)选择更短的波长;(2)为提高数值孔径, 用折射率很高的材料。  Rayleigh判据是建立在传播波的假设上的,若能够探测非辐射场,就有可能突破Rayleigh判据关于衍射壁垒的限制。  2 高分辨率三维显微术  在提高光学显微镜分辨率的研究中,显微镜物镜的像差和色差校正具有非常重要的意义。从一般的透镜组合方式到利用光阑限制非近轴光线,从稳定消色差到复消色差再到超消色差,都明显提高了光学显微镜的成像质量。最近Kam等[2]和Booth等[3]应用自适应光学原理,在显微镜像差校正方面进行了相关研究。自适应光学系统由波前传感器、可变形透镜、计算机、控制硬件和特定的软件组成,用于连续测量显微镜系统的像差并进行自动校正。 一般可将现有的高分辨率三维显微术分为3类:共聚焦与去卷积显微术、干涉成像显微术和非线性显微术。  2.1 共聚焦显微术与去卷积显微术 解决厚的生物样品显微成像较为成熟的方法是使用共聚焦显微术(confocal microscopy) [4]和三维去卷积显微术(three-dimensional deconvolution microscopy, 3-DDM) [5],它们都能在无需制备样品物理切片的前提下,仅利用光学切片就获得样品的三维荧光显微图像。  共聚焦显微术的主要特点是,通过应用探测针孔去除非共焦平面荧光目标产生的荧光来改善图像反差。共聚焦显微镜的PSF与常规显微镜的PSF呈平方关系,分辨率的改善约为■倍。为获得满意的图像,三维共聚焦技术常需使用高强度的激发光,从而导致染料漂白,对活生物样品产生光毒性。加之结构复杂、价格昂贵,从而使应用在一定程度上受到了限制。  3-DDM采用软件方式处理整个光学切片序列,与共聚焦显微镜相比,该技术采用低强度激发光,减少了光漂白和光毒性,适合对活生物样品进行较长时间的研究。利用科学级冷却型CCD传感器同时探测焦平面与邻近离焦平面的光子,具有宽的动态范围和较长的可曝光时间,提高了光学效率和图像信噪比。3-DDM拓展了传统宽场荧光显微镜的应用领域受到生命科学领域的广泛关注[6]。  2.2 选择性平面照明显微术 针对较大的活生物样品对光的吸收和散射特性,Huisken[7]等开发了选择性平面照明显微术(selective plane illumination microscopy,SPIM)。与通常需要将样品切割并固定在载玻片上的方式不同,SPIM能在一种近似自然的状态下观察2~3mm的较大活生物样品。SPIM通过柱面透镜和薄型光学窗口形成超薄层光,移动样品获得超薄层照明下切片图像,还可通过可旋转载物台对样品以不同的观察角度扫描成像,从而实现高质量的三维图像重建。因为使用超薄层光,SPIM降低了光线对活生物样品造成的损伤,使完整的样品可继续存活生长,这是目前其他光学显微术无法实现的。SPIM技术的出现为观察较大活样品的瞬间生物现象提供了合适的显微工具,对于发育生物学研究和观察细胞的三维结构具有特别意义。  2.3 结构照明技术和干涉成像 当荧光显微镜以高数值孔径的物镜对较厚生物样品成像时,采用光学切片是一种获得高分辨3D数据的理想方法,包括共聚焦显微镜、3D去卷积显微镜和Nipkow 盘显微镜等。1997年由Neil等报道的基于结构照明的显微术,是一种利用常规荧光显微镜实现光学切片的新技术,并可获得与共聚焦显微镜一样的轴向分辨率。干涉成像技术在光学显微镜方面的应用1993年最早由Lanni等提出,随着I5M、HELM和4Pi显微镜技术的应用得到了进一步发展。与常规荧光显微镜所观察的荧光相比,干涉成像技术所记录的发射荧光携带了更高分辨率的信息。(1)结构照明技术:结合了特殊设计的硬件系统与软件系统,硬件包括内含栅格结构的滑板及其控制器,软件实现对硬件系统的控制和图像计算。为产生光学切片,利用CCD采集根据栅格线的不同位置所对应的原始投影图像,通过软件计算,获得不含非在焦平面杂散荧光的清晰图像,同时图像的反差和锐利度得到了明显改善。利用结构照明的光学切片技术,解决了2D和3D荧光成像中获得光学切片的非在焦平面杂散荧光的干扰、费时的重建以及长时间的计算等问题。结构照明技术的光学切片厚度可达0.01nm,轴向分辨率较常规荧光显微镜提高2倍,3D成像速度较共聚焦显微镜提高3倍。(2)4Pi 显微镜:基于干涉原理的4Pi显微镜是共聚焦/双光子显微镜技术的扩展。4Pi显微镜在标本的前、后方各设置1个具有公共焦点的物镜,通过3种方式获得高分辨率的成像:①样品由两个波前产生的干涉光照明;②探测器探测2个发射波前产生的干涉光;③照明和探测波前均为干涉光。4Pi显微镜利用激光作为共聚焦模式中的照明光源,可以给出小于100nm的空间横向分辨率,轴向分辨率比共聚焦荧光显微镜技术提高4~7倍。利用4Pi显微镜技术,能够实现活细胞的超高分辨率成像。Egner等[8,9]利用多束平行光束和1个双光子装置,观测活细胞体内的线粒体和高尔基体等细胞器的精微细节。Carl[10]首次应用4Pi显微镜对哺乳动物HEK293细胞的细胞膜上Kir2.1离子通道类别进行了测量。研究表明,4Pi显微镜可用于对细胞膜结构纳米级分辨率的形态学研究。(3)成像干涉显微镜(image interference microscopy, I2M):使用2个高数值孔径的物镜以及光束分离器,收集相同焦平面上的荧光图像,并使它们在CCD平面上产生干涉。1996年Gustaffson等用这样的双物镜从两个侧面用非相干光源(如汞灯)照明样品,发明了I3M显微镜技术(incoherent, interference, illumination microscopy, I3M),并将它与I2M联合构成了I5M显微镜技术。测量过程中,通过逐层扫描共聚焦平面的样品获得一系列图像,再对数据适当去卷积,即可得到高分辨率的三维信息。I5M的分辨范围在100nm内。  2.4 非线性高分辨率显微术 非线性现象可用于检测极少量的荧光甚至是无标记物的样品。虽有的技术还处在物理实验室阶段,但与现有的三维显微镜技术融合具有极大的发展空间。(1)多光子激发显微术:(multiphoton excitation microscope,MPEM)是一种结合了共聚焦显微镜与多光子激发荧光技术的显微术,不但能够产生样品的高分辨率三维图像,而且基本解决了光漂白和光毒性问题。在多光子激发过程中,吸收几率是非线性的[11]。荧光由同时吸收的两个甚至3个光子产生,荧光强度与激发光强度的平方成比例。对于聚焦光束产生的对角锥形激光分布,只有在标本的中心多光子激发才能进行,具有固有的三维成像能力。通过吸收有害的短波激发能量,明显地降低对周围细胞和组织的损害,这一特点使得MPEM成为厚生物样品成像的有力手段。MPEM轴向分辨率高于共聚焦显微镜和3D去卷积荧光显微镜。(2)受激发射损耗显微术:Westphal[12]最近实现了Hell等在1994年前提出的受激发射损耗(stimulated emission depletion, STED)成像的有关概念。STED成像利用了荧光饱和与激发态荧光受激损耗的非线性关系。STED技术通过2个脉冲激光以确保样品中发射荧光的体积非常小。第1个激光作为激发光激发荧光分子;第2个激光照明样品,其波长可使发光物质的分子被激发后立即返回到基态,焦点光斑上那些受STED光损耗的荧光分子失去发射荧光光子的能力,而剩下的可发射荧光区被限制在小于衍射极限区域内,于是获得了一个小于衍射极限的光点。Hell等已获得了28nm的横向分辨率和33nm的轴向分辨率[12,13],且完全分开相距62nm的2个同类的分子。近来将STED和4Pi显微镜互补性地结合,已获得最低为28nm的轴向分辨率,还首次证明了免疫荧光蛋白图像的轴向分辨率可以达到50nm[14]。(3)饱和结构照明显微术:Heintzmann等[15]提出了与STED概念相反的饱和结构照明显微镜的理论设想,最近由Gustafsson等[16]成功地进行了测试。当光强度增加时,这些体积会变得非常小,小于任何PSF的宽度。使用该技术,已经达到小于50nm的分辨率。(4)二次谐波 (second harmonic generation, SHG)成像利用超快激光脉冲与介质相互作用产生的倍频相干辐射作为图像信号来源。SHG一般为非共振过程,光子在生物样品中只发生非线性散射不被吸收,故不会产生伴随的光化学过程,可减小对生物样品的损伤。SHG成像不需要进行染色,可避免使用染料带来的光毒性。因其对活生物样品无损测量或长时间动态观察显示出独特的应用价值,越来越受到生命科学研究领域的重视[17]。  3 表面高分辨率显微术  表面高分辨率显微术是指一些不能用于三维测量只适用于表面二维高分辨率测量的显微技术。主要包括近场扫描光学显微术、全内反射荧光显微术、表面等离子共振显微术等。  3.1 近场扫描光学显微术 近场扫描学光显微术(near-field scanning optical microscope, NSOM)是一种具有亚波长分辨率的光学显微镜。由于光源与样品的间距接近到纳米水平,因此分辨率由光探针口径和探针与样品之间的间距决定,而与光源的波长无关。NSOM的横向分辨率小于100nm,Lewis[18]则通过控制在一定针尖振动频率上采样,获得了小于10nm的分辨率。NSOM具有非常高的图像信噪比,能够进行每秒100帧图像的快速测量[19],NSOM已经在细胞膜上单个荧光团成像和波谱分析中获得应用。  3.2 全内反射荧光显微术 绿色荧光蛋白及其衍生物被发现后,全内反射荧光(total internal reflection fluorescence,TIRF)技术获得了更多的重视和应用。TIRF采用特有的样品光学照明装置可提供高轴向分辨率。当样品附着在离棱镜很近的盖玻片上,伴随着全内反射现象的出现,避免了光对生物样品的直接照明。但因为波动效应,有小部分的能量仍然会穿过玻片与液体介质的界面而照明样品,这些光线的亮度足以在近玻片约100nm的薄层形成1个光的隐失区,并且激发这一浅层内的荧光分子[20]。激发的荧光由物镜获取从而得到接近100nm的高轴向分辨率。TIRF近来与干涉照明技术结合应用在分子马达步态的动力学研究领域, 分辨率达到8nm,时间分辨率达到100μs[21]。  3.3 表面等离子共振 表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR) [22]是一种物理光学现象。当入射角以临界角入射到两种不同透明介质的界面时将发生全反射,且反射光强度在各个角度上都应相同,但若在介质表面镀上一层金属薄膜后,由于入射光被耦合入表面等离子体内可引起电子发生共振,从而导致反射光在一定角度内大大减弱,其中使反射光完全消失的角度称为共振角。共振角会随金属薄膜表面流过的液相的折射率而改变,折射率的改变又与结合在金属表面的生物分子质量成正比。表面折射率的细微变化可以通过测量涂层表面折射光线强度的改变而获得。  1992年Fagerstan等用于生物特异相互作用分析以来,SPR技术在DNA-DNA生物特异相互作用分析检测、微生物细胞的监测、蛋白质折叠机制的研究,以及细菌毒素对糖脂受体亲和力和特异性的定量分析等方面已获得应用[23]。当SPR信息通过纳米级孔道[24]传递而提供一种卓越的光学性能时,将SPR技术与纳米结构设备相结合,该技术的深入研究将有可能发展出一种全新的成像原理显微镜。  【参考文献】  [1] 汤乐民,丁 斐.生物科学图像处理与分析[M].北京:科学出版社,2005:205.  [2] Kam Z, Hanser B, Gustafsson MGL, et al.Computational adaptive optics for live three-dimensional biological imaging[J]. Proc Natl Acad Sci USA,2001,98:3790-3795.  [3] Booth MJ, Neil MAA, Juskaitis R, et al. Adaptive aberration correction in a confocal microscope[J]. Proc Natl Acad Sci USA,2002, 99:5788-5792.  [4] Goldman RD,Spector DL.Live cell imaging a laboratory manual[J].Gold Spring Harbor Laboratory Press,2005.  [5] Monvel JB,Scarfone E,Calvez SL,et al.Image-adaptive deconvolution for three-dimensional deep biological imaging[J].Biophys,2003,85:3991-4001.  [6] 李栋栋,郭学彬,瞿安连.以三维荧光反卷
2023-07-17 23:00:061

为什么永久删除的数据还能恢复!

数据一旦被写入磁介质内,都会留下难以磨灭的磁痕迹,像牛皮糖一样牢牢地“霸占”着宝贵的磁带/磁盘空间。虽然它们的存在,在灾难发生时还是能派上用场,有助于数据还原;但是,如果企业的目标是“循规”——换言之,就是将超过保存期限的存档数据彻底地从磁介质上抹除——的话,就非常麻烦了。 “自2001年12月2日安然(ENRON)公司申请破产保护的丑闻被踢爆以来,各大企业纷纷引以为鉴,拒绝保留过期的文书文档,”Nexsan科技有限公司的资深副总裁Diamond Lauffin表示。这家SATA磁盘阵列制造商前不久发布了一款名为Assureon的安全存储专用设备,可依照用户预先设定的数据部署政策,彻底地清除驻留在存储介质上的文件和数据碎片。出于循规的目的,越来越多的企业机构对于可永久删除无价值存档数据的技术表现出越来越强烈的需求。“企业在接受有关机构审查时,如果企业内部仍然保有审查机构所需的数据,即使这些数据已经超过了规定的保存期限,也仍然需要向审查机构出示,这样一来,无法通过审核的风险无形中就增加了几分,”另一家光存储介质和光盘库制造商Plasmon的高级营销副总裁Dave DuPont分析说。对于那些喜欢使用一次写入多次读写(WORM)光盘来存档内部数据的企业而言,彻底删除数据的唯一办法就是用物理手段销毁光盘。真的没有其它办法了吗?Plasmon的答案是NO。今年夏天,该公司推出了一个全新的UDO光盘柜系列,大大改进了前代产品的WORM特性,引入了“删除文件级数据”的新功能,一条新的存储术语——Compliant Write Once(简称CWO)——随之诞生了,其功效与物理销毁电子记录差不多,删除的文件将永远无法被读写。当用户需要永久删除某个文件时,UDO光盘驱动器会将基片上对应的数据块的状态设置为“0”或“1”,这样一来,该文件就无法被读取了。与磁介质不同的是,这种处理方式并不会在光盘基片上遗留下被删除数据的磁痕迹。此外,CWO还会自动地记录下该文件是在何时被何人删除的,以备日后审核之需。据DuPont介绍,CWO的设计思路并非Plasmon原创的,而是由它的UDO用户提出的。“我们以前压根儿就没有考虑过这个问题……我们的用户们非常欣赏UDO的WORM特性,不过,也希望在使用过程中能够永久地删除光盘上部分已失去价值的数据”,同时不必销毁整个光盘柜。Nexsan技术公司推出的Assureon——一款内建安全“防弹级”归档功能的存储设备——采用的是另一套完全不同的数据删除办法。该系统结合了内容寻址存储(content-addressed storage,简称CAS)和顶级安全功能,支持256位AES加密、访问和文件证明、远程密钥存储、持续完整性校验和自动“切碎隐藏”特性。与策略引擎结合使用,当指定文件或对象的保存时间接近规定期限时,Assureon将会自动删除它的密钥,这样一来,该文件就永远无法恢复了。不过,来自麻省米尔福德市(Milford)企业策略集团(Enterprise Strategy Group)的信息安全高级分析师Jon Oltsik指出,Nexsan发明的数据删除方法存在一个重大“盲点”,“如果无法证明密钥真的已经被删除了,一切都白搭。”
2023-07-17 23:00:157

怎样用生化手段证明一个蛋白是受体

  一、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大规模蛋白质之间相互作用的研究。在实际工作中,人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。  二、噬菌体展示技术:在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前,用优化的噬菌体展示技术,已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cdna文库,并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。  三、等离子共振技术:表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)已成为蛋白质相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一种纳米级的薄膜吸附上“诱饵蛋白”,当待测蛋白与诱饵蛋白结合后,薄膜的共振性质会发生改变,通过检测便可知这两种蛋白的结合情况。SPR技术的优点是不需标记物或染料,反应过程可实时监控。测定快速且安全,还可用于检测蛋白一核酸及其它生物大分子之间的相互作用。  四、荧光能量转移技术:荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究分子间的距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合,可定量获取有关生物活体内蛋白质、脂类、DNA 和RNA 的时空信息。随着绿色荧光蛋白(GFP)的发展,FRET 荧光显微镜有可能实时测量活体细胞内分子的动态性质。提出了一种定量测量FRET效率以及供体与受体间距离的简单方法,仅需使用一组滤光片和测量一个比值,利用供体和受体的发射谱消除光谱间的串扰。该方法简单快速,可实时定量测量FRET 的效率和供体与受体间的距离,尤其适用于基于GFP 的供体受体对。  五、抗体与蛋白质阵列技术:蛋白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变,微型化,集成化,高通量化的抗体芯片就是一个非常好的研究工具,他也是芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展,比如肿瘤标志物抗体芯片等,还有很多已经应用再眼就的各个领域里。  六、免疫共沉淀技术:免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA|Pansobin”,因为SPA|Pansobin比较大,这样复合物在离心时就被分离出来。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物四组分又被分开。然后经Western blotting法,用抗体检测目的蛋白是什么,是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白可信度高。但这种方法有两个缺陷:一是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;二是必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。  七、pull-down技术:蛋白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western法研究。Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过Pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。
2023-07-17 23:00:561

表面等离子体和表面等离激元的区别

主要区别是,性质不同、特性不同、应用不同,具体如下:一、性质不同1、表面等离子体表面等离子体(surface plasmons,SPs)是一种电磁表面波,它在表面处场强最大,在垂直于界面方向是指数衰减场,它能够被电子也能被光波激发。2、表面等离激元表面等离激元(Surface Plasmon, SP)是在金属表面区域的一种自由电子和光子相互作用的形成的电磁振荡。二、特性不同1、表面等离子体①、其场分布在沿着界面方向是高度局域的,是一个消逝波,且在金属场中分布比在介质中分布更集中,一般分布深度与波长量级相同。②、在平行于表面的方向,场是可以传播的,但是由于金属的损耗存在,所以在传播的过程中会有衰减存在,传播距离有限。③、表面等离子体波的色散曲线处在光线的右侧,在相同频率的情况下,其波矢量比光波矢量要大。2、表面等离激元①、在垂直于界面的方向场强呈指数衰减。②、 能够突破衍射极限。③、 具有很强的局域场增强效应。④、只能发生在介电参数(实部)符号相反(即金属和介质)的界面两侧。三、应用不同1、表面等离子体①、表面等离子体波是在两种界面附近存在的波,界面两侧的折射率分布对场分布有很大的影响,利用这一点能够进行传感。这种传感技术结构简单,灵敏度高,检测过程中无需标记物,可实时监测样品结合过程。该技术可用于气体、 液体和有机薄膜等分析,主要用于生命科学和化学领域。②、表面等离子体波具有局域分布的特性,而且其分布深度可小于波长量级,突破衍射极限,使得表面等离子体波能够应用于制作亚波长量级的光电子器件的生产,有利用光电子集成器件的制作。由于能够突破极限,所以能够应用表面等离子体效应来做近场显微镜,做曝光等等。③、表面等离子体波在太阳能电池和LED等新型能源相关器件方面的应用。利用表面等离子体效应可以提高太阳能电池的光电转换效率,同样也可以在LED上。2、表面等离激元随着表面等离激元理论研究的深入以及各种结构的器件的成功制作,其在光学各领域应用具有巨大的潜力,尤其在解决了一些以往光学长期不能解决的问题,其中包括金属亚波长结构的增透效应在超分辨率纳米光刻、高密度数据存储、近场光学等领域的应用。参考资料来源:百度百科-表面等离子体参考资料来源:百度百科-表面等离激元
2023-07-17 23:01:051

蛋白质组学主要包括哪些分析技术及各自特点

为探究生物进程的分子机制,需要确定介导这个过程的蛋白质-蛋白质间的相互作用。研究蛋白质间相互作用的主要技术总结如下:一、酵母双杂交系统酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道 基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大 规模蛋白质之间相互作用的研究。在实际工作中,人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介 导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。二、噬茵体展示技术在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体 特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混 合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前,用优化的噬菌体展示技术,已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cDNA文 库,并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。三、等离子共振技术表 面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)已成为蛋白质相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一种纳米级的薄膜吸附上“诱饵蛋白”,当待测蛋白与诱饵蛋白结合后,薄 膜的共振性质会发生改变,通过检测便可知这两种蛋白的结合情况。SPR技术的优点是不需标记物或染料,反应过程可实时监控。测定快速且安全,还可用于检测 蛋白一核酸及其它生物大分子之间的相互作用。四、荧光能量转移技术荧 光共振能量转移(FRET )广泛用于研究分子间的距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合,可定量获取有关生物活体内蛋白质、脂类、DNA 和RNA 的时空信息。随着绿色荧光蛋白(GFP)的发展,FRET 荧光显微镜有可能实时测量活体细胞内分子的动态性质。提出了一种定量测量FRET效率以及供体与受体间距离的简单方法,仅需使用一组滤光片和测量一个比 值,利用供体和受体的发射谱消除光谱间的串扰。该方法简单快速,可实时定量测量FRET 的效率和供体与受体间的距离,尤其适用于基于GFP 的供体受体对。五、抗体与蛋白质阵列技术 蛋 白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变,微型化,集成化,高通量化的抗 体芯片就是一个非常好的研究工具,他也是芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展,比如肿瘤标志物抗体 芯片等,还有很多已经应用再眼就的各个领域里。六、免疫共沉淀技术 免 疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于 Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴 趣蛋白抗体—SPA|Pansobin”,因为SPA|Pansobin比较大,这样复合物在离心时就被分离出来。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物 四组分又被分开。然后经Western blotting法,用抗体检测目的蛋白是什么,是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白 可信度高。但这种方法有两个缺陷:一是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;二是必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择 最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。七、pull-down技术 蛋 白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western法研究。Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或 GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过Pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体 外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。
2023-07-17 23:01:391

核基因与质基因的功能各是什么?两者又有什么关系?

细胞质基因就是一些细胞器内存在的DNA分子比如线粒体,叶绿体。这些基因在这些细胞器内部就能完成表达并控制一些性状。而且子代细胞的细胞器都来自母本(受精时,由于精子所含细胞质极少可认为受精卵里的细胞质全来自母本)所以由细胞质基因控制的性状都由母本传给后代细胞质基因plasmagene  细胞质中存在的支配遗传性状的基因。细胞质基因组(plasmon)是细胞质中基因的总称,而细胞质基因是指细胞质中存在的一个个基因。在细胞质基因中,凡存在于色素体中的称为质体基因,存在于线粒体中的称为线粒体基因等,从线粒体、叶绿体等小细胞器中曾经分离出被染色体那样的DNA。  细胞质基因也是双螺旋结构,按半保留方式复制,与核基因的突变率相同,但个别遗传密码子不同于核基因
2023-07-17 23:02:031

分子互作仪大分子直接偶联和小分子溶剂矫正是什么意思

分子互作仪大分子直接偶联和小分子溶剂矫正是医疗器械。大分子相互作用仪。又称光学表面等离子共振生物分析仪。BIACORE是基于表面等离子共振(surfacePlasmonresonance,SPR)开发的新型生物分析传感技术。
2023-07-17 23:02:111

细胞质dna来自哪里?

细胞质基因组(plasmon)是细胞质中基因的总称,而细胞质基因是指细胞质中存在的一个个基因。在细胞质基因中,凡存在于色素体中的称为质体基因,存在于线粒体中的称为线粒体基因等,从线粒体、叶绿体等小细胞器中曾经分离出被染色体那样的DNA。
2023-07-17 23:02:201

gst pulldown 能证明两蛋白间是直接相互作用的吗

可以证明,因为体系中只有纯化的两种蛋白,不直接相互作用的话,就不会被pulldown下来。前面的回答就是复制粘贴,p用没有。
2023-07-17 23:02:332

核基因与质基因的功能各是什么?两者又有什么关系?

细胞质基因就是一些细胞器内存在的DNA分子 比如线粒体,叶绿体.这些基因在这些细胞器内部就能完成表达 并控制一些性状.而且子代细胞的细胞器都来自母本(受精时,由于精子所含细胞质极少可认为受精卵里的细胞质全来自母本)所以由细胞质基因控制的性状都由母本传给后代 细胞质基因 plasmagene   细胞质中存在的支配遗传性状的基因.细胞质基因组(plasmon)是细胞质中基因的总称,而细胞质基因是指细胞质中存在的一个个基因.在细胞质基因中,凡存在于色素体中的称为质体基因,存在于线粒体中的称为线粒体基因等,从线粒体、叶绿体等小细胞器中曾经分离出被染色体那样的DNA.   细胞质基因也是双螺旋结构,按半保留方式复制,与核基因的突变率相同,但个别遗传密码子不同于核基因
2023-07-17 23:02:401

细胞质的dna从哪里来?

细胞质基因组(plasmon)是细胞质中基因的总称,而细胞质基因是指细胞质中存在的一个个基因。在细胞质基因中,凡存在于色素体中的称为质体基因,存在于线粒体中的称为线粒体基因等,从线粒体、叶绿体等小细胞器中曾经分离出被染色体那样的dna。
2023-07-17 23:02:502

验证两蛋白的相互作用关系,要做哪些相关实验

蛋白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。<ul>一、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大规模蛋白质之间相互作用的研究。在实际工作中,人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。二、噬菌体展示技术:在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前,用优化的噬菌体展示技术,已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cdna文库,并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。三、等离子共振技术:表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)已成为蛋白质相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一种纳米级的薄膜吸附上“诱饵蛋白”,当待测蛋白与诱饵蛋白结合后,薄膜的共振性质会发生改变,通过检测便可知这两种蛋白的结合情况。SPR技术的优点是不需标记物或染料,反应过程可实时监控。测定快速且安全,还可用于检测蛋白一核酸及其它生物大分子之间的相互作用。四、荧光能量转移技术:荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究分子间的距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合,可定量获取有关生物活体内蛋白质、脂类、DNA 和RNA 的时空信息。随着绿色荧光蛋白(GFP)的发展,FRET 荧光显微镜有可能实时测量活体细胞内分子的动态性质。提出了一种定量测量FRET效率以及供体与受体间距离的简单方法,仅需使用一组滤光片和测量一个比值,利用供体和受体的发射谱消除光谱间的串扰。该方法简单快速,可实时定量测量FRET 的效率和供体与受体间的距离,尤其适用于基于GFP 的供体受体对。五、抗体与蛋白质阵列技术:蛋白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变,微型化,集成化,高通量化的抗体芯片就是一个非常好的研究工具,他也是芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展,比如肿瘤标志物抗体芯片等,还有很多已经应用再眼就的各个领域里。六、免疫共沉淀技术:免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPAPansobin”,因为SPAPansobin比较大,这样复合物在离心时就被分离出来。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物四组分又被分开。然后经Western blotting法,用抗体检测目的蛋白是什么,是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白可信度高。但这种方法有两个缺陷:一是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;二是必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。七、pull-down技术:蛋白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western法研究。Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过Pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。</ul>
2023-07-17 23:03:001

研究蛋白质之间相互作用的实验方法有哪些?

白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。把原来spaces空间上的一篇蛋白质与蛋白质间相互作用研究方法转来,算是实验技巧分类目录的首篇。一、酵母双杂交系统酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大规模蛋白质之间相互作用的研究。在实际工作中,人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。二、噬茵体展示技术在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前,用优化的噬菌体展示技术,已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cDNA文库,并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。三、等离子共振技术表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)已成为蛋白质相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一种纳米级的薄膜吸附上“诱饵蛋白”,当待测蛋白与诱饵蛋白结合后,薄膜的共振性质会发生改变,通过检测便可知这两种蛋白的结合情况。SPR技术的优点是不需标记物或染料,反应过程可实时监控。测定快速且安全,还可用于检测蛋白一核酸及其它生物大分子之间的相互作用。四、荧光能量转移技术荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究分子间的距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合,可定量获取有关生物活体内蛋白质、脂类、DNA 和RNA 的时空信息。随着绿色荧光蛋白(GFP)的发展,FRET 荧光显微镜有可能实时测量活体细胞内分子的动态性质。提出了一种定量测量FRET效率以及供体与受体间距离的简单方法,仅需使用一组滤光片和测量一个比值,利用供体和受体的发射谱消除光谱间的串扰。该方法简单快速,可实时定量测量FRET 的效率和供体与受体间的距离,尤其适用于基于GFP 的供体受体对。五、抗体与蛋白质阵列技术蛋白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变,微型化,集成化,高通量化的抗体芯片就是一个非常好的研究工具,他也是芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展,比如肿瘤标志物抗体芯片等,还有很多已经应用再眼就的各个领域里。六、免疫共沉淀技术 免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用[/url]的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA|Pansobin”,因为SPA|Pansobin比较大,这样复合物在离心时就被分离出来。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物四组分又被分开。然后经Western blotting法,用抗体检测目的蛋白是什么,是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白可信度高。但这种方法有两个缺陷:一是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;二是必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。七、pull-down技术蛋白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western法研究。Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过Pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。
2023-07-17 23:03:111

核基因与质基因的功能各是什么?两者又有什么关系?

细胞质基因就是一些细胞器内存在的DNA分子 比如线粒体,叶绿体.这些基因在这些细胞器内部就能完成表达 并控制一些性状.而且子代细胞的细胞器都来自母本(受精时,由于精子所含细胞质极少可认为受精卵里的细胞质全来自母本)所以由细胞质基因控制的性状都由母本传给后代 细胞质基因 plasmagene   细胞质中存在的支配遗传性状的基因.细胞质基因组(plasmon)是细胞质中基因的总称,而细胞质基因是指细胞质中存在的一个个基因.在细胞质基因中,凡存在于色素体中的称为质体基因,存在于线粒体中的称为线粒体基因等,从线粒体、叶绿体等小细胞器中曾经分离出被染色体那样的DNA.   细胞质基因也是双螺旋结构,按半保留方式复制,与核基因的突变率相同,但个别遗传密码子不同于核基因
2023-07-17 23:03:321