细胞系与细胞株要不要求来自同一祖细胞,像克隆细胞系一样?
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朱比二代 共回答了15个问题
|采纳率100%- 不需要来自同一祖细胞.
细胞系与细胞株,是原代培养的细胞的后代,而不是一个细胞分裂而成的后代.
原代培养的细胞,是从动物机体取出的进行培养的细胞群.不是一个细胞,而是细胞群(多个细胞).
克隆细胞系:一个细胞不断分裂而形成的一个细胞群. - 1年前
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细胞形态学检查:通常在细胞接种24小时和48小时后,用100倍显微镜检查,观察细胞在低密度和高密度生长时的形态.这种方法比较直观,但只是一个比较粗略的鉴别方法,并且与检测人员的经验密切相关.
种属特异性抗原检测:也就是用种属特异性抗血清来检测种属特异性抗原,比如间接免疫荧光抗体染色.这种方法操作起来比较简单,但是试验敏感性较差,也就是如果存在少量的细胞污染不能分辨出来.
染色体核型分析:多数情况下,不同细胞的染色体结构是有明显差别的,因此可以利用这些差别进行细胞种属的鉴别.但是需要提醒的是,亲缘关系接近的灵长类动物细胞的染色特征就比较接近,因此要注意仔细辨别每一谱带的特点.试验时,应从同一世代不同细胞培养瓶中取细胞混合再培养,制备染色体标本片.染色体标本应长期保存(直至褪色不能用为止),以备复查.染色体核型分析是一个比较精确的检测方法,但试验操作比较复杂,需要对试验人员进行培训.
同功酶分析(Isoenzyme Analysis):不同种属的细胞所表达的同功酶是不同的,因此可以利用同功酶分析来进行细胞的鉴别.该方法通常检测以下四种同功酶:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和核苷磷酸化酶(NP).试验时,通常要设一个小鼠源细胞(如L929细胞系)标准品和人源细胞(如Hela S3细胞系)的对照品.检测性能比较可靠,但是价格比较昂贵.
限制性酶切图谱分析(restriction digest analysis):首先,使用商品化试剂盒或其它方法提取细胞基质的基因组DNA,一般要求细胞数在2~5×106细胞,并进行核酸定量,然后进行限制性内切酶的消化,再进行琼脂糖电泳观察电泳条带的特点.这种方法可操作性较好,灵敏度较高,不仅可以鉴别细胞种属,对于细胞间交叉污染的检测也是相当灵敏的,但是公认具有种属特异性的内切酶的选择是本方法的关键.
随着分子生物学技术的发展,许多新的技术方法也开始应用,如种属特异性的β-球蛋白或其它特征性基因片段的PCR方法、DNA指纹分析、HLA表面抗原鉴定试验等.这些方法的检测灵敏度和特异性均较前有所改进,但其可操作性如何,还需要进行不断地实践.由于不同的细胞鉴别试验方法具有不同的检测特性和灵敏度,因此应结合具体细胞的固有特性进行适宜的组合和选择,但最终应以实现正确鉴别为目的.1年前查看全部
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我估计是在FSC上看到的大小两群?有时候光凭这个参数来判断大小是不很特异的.建议Gate细胞后(排除了debris后),再gate一下,以SSC-H和SSC-A作为X和Y的指标,正常情况下应该是比较紧密的直线,如果有散点在SSC-A的方向发散,说明有2个细胞聚集了,样本没有充分制备为单细胞悬液.
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B、某肿瘤细胞在体外培养繁殖是由一祖先细胞分裂繁殖成一团细胞的过程,属于无性繁殖,因此属于克隆,B正确;
C、将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内属于基因工程中转基因技术,不是克隆,C错误;
D、将鼠的骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞是细胞融合过程,不是克隆,D错误.
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25.灯刷染色体
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