酶标抗二和抗二有什么区别ELISA新手,要设计一个双夹心的实验,抗原是体内的一种生化酶,准备选择单克隆抗体作为一抗,查了

alicecl2022-10-04 11:39:541条回答

酶标抗二和抗二有什么区别
ELISA新手,要设计一个双夹心的实验,抗原是体内的一种生化酶,准备选择单克隆抗体作为一抗,查了一下资料发现有的试剂盒用的二抗是生物素标记抗体,酶标二抗成了酶标亲和素,请问这还是双夹心法吗?还是间接法呢?

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long194335 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%: 夹心法吗?你只用了一个一抗,怎么夹心?一抗：抗原：一抗：酶标二抗是标准的夹心; 1年前

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由于你问题中有提到酶标二抗,我认为应该是有两种可能,（1）产品为双抗体夹心法检测抗原,这种情况下有些产品可以比如HBSAG一步法,加入样品50ul后立即加入50ul酶标多抗温育30min洗版加底物显色终止即可.（2）产品为间接法,检测抗体,酶标二抗为抗你检测抗体种源的另一种源抗体,如检测人的IgG,可标记鼠抗人-HRP.这种情况是不能混合的因为二抗会与样本中的所有IgG反应,估计会导致类似HOOK效应的结果.

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一起加更准确一些.分开加的话,特别是加样时间长的话,先加的会先反应上去,这样不在同一起跑线上,竞争不公平,结果不准确.但如果加样时间很短（具体多短也不好说）,影响小.

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做酶标前处理,最后说加入300微升6M磷酸中和,请问这里6M磷酸是不是就是试剂瓶里买来的浓磷酸? tianlanxing1年前1: 小小柠檬糖共回答了24个问题 | 采纳率95.8%

试剂的浓磷酸浓度是85%,相当于14.6M,
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