比浊法测细菌生长曲线如何避免仪器的污染?

平板法得到的曲线比比浊法的位置低.
因为比浊法测的是细菌总量,其中包括死掉的细菌.但是平板法中只有活的细菌长成菌落.而且平板法中,虽然通常来讲一个菌落代表的是一个细菌细胞长成的,但是也可能有多个细胞长成一个菌落的.所以平板法测出来的细菌数要比比浊法小.

做活菌计数就可以了.将样品梯度稀释(1ml样品+9ml无菌缓冲液),各取1ml到元菌平皿中,分别做2个平行.用营养琼脂倒平皿,35度培48小时后,计数.计数范围：30-300/皿.

稀释其实就是为了控制吸光度在一个合适的范围内
控制吸光度的目的有点不好描述,我先简单地说下,你不明白再问我:
原理是不同浓度的菌液有不同浓度的吸光度,通过对一系列浓度菌液吸光度的测量,通过浓度和吸光度的比值,我们就可以划一条直线,X轴为浓度,Y轴为吸光度.当一个未知样本的吸光度知道了,也就是X轴上的那个点知道了,那么通过这条直线,它所对应在Y轴上的浓度就是我们的测量结果了.
第一方面:
测量的关键就是要保证线性,也就是说要保证浓度和吸光度的比例关系,这只能在较低浓度可以保证,因为浓度高了,会使吸光度无限接近100%,那显然就不在这条直线上了,曲线就会下压,那么就无法计算了.所以样品的浓度一定要在线性范围内.这就是为什么最大是0.7
第二方面:
如果你稀释的浓度太低了,夸张一点说,比如只有0.01,出现一点点污染,使得数值变成0.02,实际上在正常情况下这一点点误差完全可以忽略的,可是因为你稀释太低了,一下子造成了测量结果是实际值的2倍!这就太夸张了.这就是为什么最小值是0.2
当然,这两个数是实际工作中总结出来的

A=aCL,A：吸光度
a：吸收系数
C：浓度
L：光在介质中通过的距离,也就是比色皿的宽度
听过公式可以得知,L不会改变,a是待测物质的固有性质,不会随外界环境改变而改变,故
A和C成正比例关系,

平板计数法更科学.
比浊法只是一种大致测定细胞密度的方法,其结果准确度受细胞大小、细胞状态影响很大.
平板计数法不受细胞大小和状态影响,还能通过染色排除死细胞,所以更加精确.

测定微生物细胞数目方法有多介绍几种
1.血细胞计数法
稀释菌液样品滴血细胞计数板上显微镜下计算4~5格细菌数并求出每小格所含细菌平均数再此依据估算总菌数
①此法缺点能区分死菌和活菌
②对压小方格界线上细菌应当取平均值计数
③此法用于测定培养液酵母菌种群数量变化
2.稀释涂布平板法
原理：每活细菌适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落培养基表面生长菌落来源于样品稀释液活菌
①方法常用来统计样品活菌数目
②统计菌落数往往比活菌实际数目低原因当两活多细胞连起时平板上观察只菌落因此统计结般用菌落数而用活菌数来表示
③土壤、水、牛奶、食品和其材料所含细菌、酵母、芽孢与孢子等数量均用此法测定适于测定样品丝状体微生物例放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等营养体等
④此法若培养成菌落通过定量菌液均匀地涂布玻片上定面积上经固定染色显微镜下计数样又称涂片计数法染色用台盼蓝台盼蓝能使死细胞染成蓝色分别计数死细胞和活细胞
3.滤膜法
滤膜法当样品菌数低时定体积湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器滤膜干燥、染色并经处理使膜透明再显微镜下计算膜上（或定面积上）细菌数
此法也通过培养观察形成菌落数来推算样品菌数例测定饮用水大肠杆菌数目：已知体积水过滤滤膜放伊红美蓝培养基上培养该培养基上大肠杆菌菌落呈现黑色根据培养基上黑色菌落数目计算出水样大肠杆菌数目
此法也统计样品活菌数目
4.比浊法
原理定范围内菌悬液细胞浓度与混浊度成正比即与光密度成正比菌越多光密度越大因此借助与分光光度计定波长下测定菌悬液光密度光密度表示菌量实验测量时定要控制菌浓度与光密度成正比线性范围内否则准确
5.显微镜直接计数法
课本生物选修1生物技术实践P22除了上述活菌计数法外显微镜直接计数也测定微生物数量常用方法里说显微镜直接计数我认应该稀释涂布基础上培养成菌落而通过染色方法显微镜下直接计数再滤膜法也样有两种情况
另外微生物计数法发展迅速多种多样快速、简易、自动化仪器和装置等方法用来统计微生物数目.
直接计数的方法是不经过培养,直接通过各种仪器来检测.如1.血细胞计数法、3.滤膜法、4.比浊法、5.显微镜直接计数法.
来源：http://zhidao.baidu.com/link?url=tcNC2D11qC4JtEwQUImdbsCMqb3ufWZIguy2G41fBInjWJ6ISwvZnRhG3ob1ye7Y0rp7LEZF7Dq5chhYTeO1xK

C

PEG沉淀比浊法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定.这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法.当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光线的强度.在水质监测和管理过程中,比浊法常用于测量饮用水、工业用水、废水的透明度；也用于测量空气及其他各种气体中悬浮固体的含量,是空气和水污染研究的一种工具.在酿造工业中,比浊法常用于各种饮料澄清过程的控制和过滤过程的监控.在分析化学上,可通过生成悬浮沉淀的反应产物来测定某些元素的浓度,例如,通过生成硫酸钡悬浮物来测定Ba2+ 或SO2-,以及在煤、焦炭、油、橡胶中的总硫量；通过生成硫化银和氯化银悬浮物来测定Ag+或Cl-；在容量分析中,浊度测量也可用于确定滴定终点,如用钙盐滴定氟化物、用银盐滴定溴化物、用钡盐滴定硫酸盐等.在生物化学中,比浊法广泛用于测定液体食品中细菌的生长量及氨基酸、维生素和抗生素等.根据悬浮体系中粒子的沉降速度与其半径的平方成正比的原理,比浊法可用于不同大小粒子沉降速度的监测和粒子大小的分类.
给分吧

我只知道以下几种：
苄索氯铵 (用于测定脑脊液蛋白质),磺基水杨酸和硫酸钠混合物（测定人体血清总蛋白）,十二烷基磺酸钠（用于测定血清酸溶性蛋白）,聚二乙醇6000（免疫透射比浊法测定血清蛋白）.

2n=X2/X1
n lg2=lgX2-lgX1
n =（lgX2-lgX1）/lg2 =3.322（lgX2-lgX1）
G=（t2-t1）/n=lg2（t2-t1）/lgX2-lgX1
n=繁殖世代数
X1=对数期开始时（t1）菌数
X2=对数期后期（t2）菌数
G=世代时间