x-gal粉末配法x-gal粉末怎么配成溶液

rxh1988182022-10-04 11:39:541条回答

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shengwumanyou 共回答了18个问题 | 采纳率100%
X–Gal
(5–Bromo–4–Chloro–3–Indolyl–β–D–Galactoside)
使 用 说 明 书
Code No.:ZB136
包 装 量 :100mg
价格:169.00元
储运温度 :―20℃
形 态 :白色粉末
分 子 量 :408.6
纯 度 :
◆ 作为β–galactosidase的底物进行了生物活性检定.
◆ 通过TLC分析确定纯度.
用 途 :
X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈蓝色.基于这个特点,pUC系列载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体.
使用方法 :
首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的琼脂培养基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg/ml)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基.当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后,涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培养基,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体).
注意事项 :
◆ 培养噬菌体时,Top agar中的添加量为:50 μl/3 ml(20mg/ml).
◆ 含有X-Gal的培养基4℃避光保存,须在1~2周内使用.
1年前

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