微生物实验无菌操作台如何灭菌?我在做实验前用酒精做过清理,之后又用紫外灯杀菌,但是做的空白试验（培养基是经过杀菌处理后直

可能是操作过程中污染的.一般使用超净工作台就能使操作空间处于一个洁净状态.但是操作前双手也应用75%酒精擦拭,尤其是指甲.另外,用于消毒的酒精必须是70%到75%的.希望有所帮助.

1、可以从两个角度考虑,一个是,抑菌带并不能全部杀死细菌,因为他只是抑制细菌生长或者说延长其周期,所以短时间内你可能因为周期的关系看不到细菌,但是时间一长,菌落还是可以形成.另一个角度是,在恶劣环境下,有些菌有可能产生适宜该环境的变异,由于数量较少,经过较长时间繁殖才能看到菌落.
2、牛奶高温灭菌,很多食物煮熟后再食用；高盐腌制咸菜储存时间变长；一些生食蔬菜制作凉菜常用醋作为调料

1、显微镜使用,细菌抹片及革兰氏染色,细菌形态、结构的观察
2、常用培养基的制备
3、细菌的分离、培养、移植
4、细菌在培养基中的生长表现及生理生化试验（鉴定）

1) So there is no light refraction while viewing from the lenses.
2) They are in order of lowest to highest magnification and resolution.
3) Oil lenses has higher magnification and resolution by applying a special immersion oil that allows the numerical aperture to exceed one.Ordinary lenses don't have immersion oil and therefore would have light refraction,leading to less resolution and magnification.
答案以上,

直接从土壤分离的,琼脂平板上会出现形状、大小不一的噬菌斑；如果你做了纯化,可以得到单一的噬菌斑.

变量是：细菌的有无
次变量在实验中通过高温灭菌来控制.

自生固氮菌的分离(选做)

实验原理
农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多.将用表土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养.在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖.用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来.
目的要求
1．初步学会从土壤中分离自生固氮菌的方法.
2．初步学会制作临时涂片的方法.
材料用具
农田的表层土壤(土壤溶液的pH不低于6.5).
无菌研钵,无菌玻璃棒,接种环,天平,存放有载玻片的酒精缸,盖玻片,显微镜,酒精灯,火柴,镊子,恒温箱,量筒,玻璃铅笔.
灭过菌的、盛有无氮培养基的培养皿,结晶紫染液,无菌水.
方法步骤
一、接种
1．接种前,将灭过菌的、盛有无氮培养基的培养皿,放在37℃的恒温箱中一两天.随后,选取培养基上没有生长任何微生物的培养皿供实验用.
2．取10g土壤,放在无菌研钵中,注入5mL无菌水,并用无菌玻璃棒搅拌均匀,备用.
3．将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌.略微打开培养皿盖,将接种环放在培养基边缘处冷却.然后,用接种环蘸取少许稀泥浆,轻轻地点接在培养基的表面上,共点接15～20处(注意：接种时手和衣袖不要碰到火焰,以免烧伤).
4．接种后,轻轻地盖上培养皿盖,将培养皿放在实验桌上,并在顶盖上写明实验内容、接种人的姓名和接种日期.
二、培养
将接过种的培养皿放入恒温箱内,在28～30℃的温度下培养3～4d.
三、观察
3～4d后,取出培养皿,仔细观察培养基上稀泥浆周围长出的培养物——黏液.黏液初为无色透明,以后为乳白色,最后变成褐色,表明含有自生固氮菌.
四、镜检
1．制作临时涂片
(1)用镊子从存放载玻片的酒精缸中夹取一片载玻片,将载玻片放在酒精灯火焰的上方缓缓烘烤,以便除去上面的酒精.将载玻片放在实验桌上,待载玻片冷却后,在载玻片的中央滴一滴无菌水.
(2)在火焰旁,按照接种的要求,用灭过菌的接种环从培养基上挑取少许黏液,将黏液涂在载玻片上的水滴中,加1滴结晶紫染液,混合均匀,染色1min.
(3)另取一片载玻片作推片.将推片自液滴左侧向右侧移动,使液滴均匀地附着在两片之间.然后,将推片自右向左平稳地推移(两片之间呈30～45°夹角),推出一层均匀的菌膜.
2．干燥
让临时涂片自然干燥(自生固氮菌的临时涂片不用加热固定,以免破坏荚膜).
3．在显微镜下观察
依次通过低倍镜和高倍镜观察临时涂片,可以看到染成紫色的自生固氮菌.
结论
通过显微镜能够看到几种自生固氮菌?它们在形态上各有什么特点?将得出的结论写在《实验报告册》上.
讨论
1．为什么盛放无氮培养基的培养皿应当是灭过菌的?
2．假如黏液中有三种自生固氮菌,你能不能想出一种办法,将这三种细菌分离开来?

如你所说,做了多次了,稀释用的生理盐水问题应该不大,主要就是样品有抑制菌生长的成分,当样品被稀释之后就不再起抑制作用.其实,常用的那些防腐剂都有这个现象

是大肠杆菌.
现在研究的DNA复制和基因工程和基因的一系列都用到它.

用纳米除油乳化剂就行了.