在蛋白类药物的提取分离时,如何避免蛋白质失活?
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menghun75 共回答了14个问题
|采纳率92.9%- 蛋白质在溶液中容易受到温度、蛋白酶、pH、盐类等的影响而失活.
① 温度:一般的蛋白都不耐高温,所以在提取及储存过程中应注意进行温度控制,一般过程样品等都应放置在4℃.
② 蛋白酶:为防止蛋白受到蛋白酶的作用降解失活,一般会加入如EDTA金属螯合剂,PMSF之类的蛋白酶抑制剂等,另低温也可以起到一定的抑制蛋白酶作用.
③ pH:应采用有足够缓冲容量的缓冲体系防止pH过度的变化,缓冲液pH范围根据蛋白稳定性来确定.尤其是加入大量盐类如盐析等时应特别注意.
百度教育团队【海纳百川团】为您解答. - 1年前
商淮离泣 共回答了100个问题
|采纳率- 温度、pH值、提取物中混杂的蛋白酶确实是一个重要的考量,另外提取工艺也会影响到蛋白类药物的活性,例如分子筛分离、样品浓缩时,缓冲液离子强度、压强、流速等也可能影响蛋白活性;
- 1年前
hw_hmily 共回答了11个问题
|采纳率- 是否可以考虑加蛋白酶抑制剂
- 1年前
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|采纳率84%酶的命名
①习惯(_xi2 guan4)命名法
多年来普遍使用的酶的习惯名称是根据以下三种原则来命名的:一是根据酶作用的性质,例如水解酶、氧化酶、转移酶等;二是根据作用的底物并兼顾作用的性质,例如淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等;三是拮合以上两种情况并根据酶的来源而命名,例如胃蛋白酶、胰蛋白酶等.
习惯命名法一般采用底物加反应类型而命名,如蛋白水解酶、乳酸脱氢酶、磷酸己糖异构酶等.对水解酶类,只要底物名称即可,如蔗糖酶、胆碱酯酶、蛋白酶等.有时在底物名称前冠以酶的来源,如血清谷氨酸-丙酮酸转氨酶、拓液淀粉酶等. 习惯命名法简单,应用历史长,但缺乏系统性,有时出现曰酶数名或一名数酶的现象.
②系统命名法
鉴于新酶的不断发现和过去文献中对酶命名的混乱,国际酶学委员会规定了一套系统的命名法,使一种酶只有一种名称.系统命名法以4个阿拉伯数字来代表一种酶.例如α-淀粉酶(习惯命名)的系统命名为α - l4 - 葡萄糖-4葡萄糖水解酶,标示为:EC 3.2.1.1.EC代表国际酶学委员会,其中的第一个数字分别代表酶的大类,以1,2,3,4,5,6来分别代表,1为氧化还原酶类,3为水解酶类,其余(wei4 shui3 jie3 mei2 lei4 _qi2 yu2)类推.(见酶的分类).第二个数字为酶的亚类,酶的每一大类下有若干个亚类:如在氧化还原酶中的亚类按供电子体的基团分类,如以CH-OH为电子供体标为1,醛基为电子供体标为2,余类推;转移酶中以转移的基团为亚类;水解酶中以水解键连接的形式为亚类;裂肉酶中以裂肉键的形式为亚类;亚类一般较多,达数十个.标示中的第三个数字是属酶的次亚类,是在亚类的基础上再细分的类型,该次亚类中,氧化还原酶按电子受体基团分类,如都以CH-OH为电子供体的反应,可以有不同的电子受体,如以NAD+或NADP+为受体标为1,余类推;转移酶的次亚类也按接受基团分类,如以-OH接受转移基团,该次亚类标为1.总之,酶的系统名称中前三个数字表示酶作用的方式.第四个数字则表示对相同作用的酶的流水编号
又如对催化下列反应酶的命名.(you4 ru2 dui4 cui1 hua4 xia4 lie4 fan3 ying1 mei2 de0 ming4 ming2 _)
ATP+D—葡萄糖→ADP+D—葡萄糖-6-磷酸
该酶的正式系统命名是:ATP:葡萄糖磷酸转移酶,表示该酶催化从ATP中转移一个磷酸到葡萄糖分子上的反应.它系统命名是:E.C.2.7.1.1,第1个数字“2”代表酶的分类名称(转移酶类),第2个数字“7”代表亚类(转移磷酸基),第3个数字“1”代表次亚类(以羟基作为受体的磷酸转移酶类),第4个数字“1”代表该酶在次亚类中第号(D-葡萄糖作为磷酸基的受体). 健康名言:身体在健康在很大程度上取决于精神的健康(约翰·格雷) 7.2.4.2 核酶的分类自1982年以来,被发现的核酸类酶磷酸转移酶类),第4个数字“1”代表该酶在次亚类中第号(D-葡萄糖作为磷酸基的受体).
核酶的分类
自1982年以来,被发现的核酸类酶(R-酶)越来越多,对它的研究也越来越深入和普遍.但是由于历史不长,对于其分类和命名还没有统一的原则和规定.但根据酶催化反应的类型,区分为分子内催化R-酶和分子间催化R-酶,根据作用方(mei _gen ju zuo yong fang)式将R-酶分为3类:剪切酶、剪接酶和多功能酶.现将R-酶的初步分类简介如下:
(1)分子内催化R-酶 分子内催化的R-酶是指催化本身RNA分子进行反应的一类核酸类酶.这类酶是最早发现的R-酶.该大类酶均为RNA前体.由于这类酶是催化本身RNA分子反应,所以冠以“自我”(self)根据酶所(gen1 ju4 mei2 suo3)催化的反应类型,可以将该大类酶分为自我剪切和自我剪接两个亚类.
①自我剪切酶(self-cleavage ribozyme) 自我剪切酶是指催化本身RNA进行剪切反应(jin xing jian qie fan ying)的R-酶.具有自我剪切功能的R-酶是RNA的前体.它可以在一定条件下催化本身RNA进行剪切反应,使RNA前体生成成熟的RNA分子和另一个RNA片段.②自我剪接酶(self-splicing ribozyme) 自我剪接酶是在一定条件下催化本身RNA分子同时进行剪切和连接反应的R-酶.自我剪接酶都是RNA前体.它可以同时(qian ti _ta ke yi tong shi)催化RNA前体本身的剪切和连接两种类型的反应.根据其拮构特点和催化特性的不同,该亚类分为两个小类,即含Ⅰ型间隔序列(intervening sequence IVS)的R-酶和含Ⅱ型 IVS的R-酶.(2)分子间催化R-酶 分子间催化R-酶是催化其他分子进行反应的核酸类酶.根据所作用的底物分子的不同,可以分为若干亚类.①作用于其他RNA分子的R-酶 该亚类的酶可催化其他RNA分子进行反应.根据反应的类型不同,可以分为若干小类,如RNA剪切酶、多功能R-酶等.②多功能R-酶 多功能R-酶是指能够催化其他RNA分子进行多种反应的核酸类酶. 例如,1986年,切克等人发现四膜虫26 S RNA前体通过自我剪接作用,切下的间隔序列(IVS)经过自身环化作用,最后得到一个在其5′-末端失去19个核苷酸的线状RNA分子,称为L-19 IVS.它是一种多功能R-酶,能够催化其他RNA分子进行多种类型的反应③作用于DNA的R-酶 该亚类的酶是催化DNA分子进行反应的R-酶.1990年,发现核酸类酶除了以RNA为底物外,有些R-酶还可以DNA为底物,在一定条件下催化DNA分子进行剪切反应.据目前所知的资料,该亚类R-酶只有DNA剪切酶一个小类.④作用于多糖的R-酶 该亚类的酶是能够催化多糖分子进行反应的核酸类酶.兔肌14-A-D-葡聚糖分支酶 [EC 2. 4.1.18]是一种催化直链葡聚糖转化为支链葡聚糖的糖链转移酶,分子中含有蛋白质和RNA.其RNA组分由31个核苷酸组成,单独具有分支酶的催化功能,即该RNA可以催化糖链的剪切和连接反应,属于多糖剪接酶.⑤作用于氨基酸酯的R-酶 1992年,发现了以催化氨基酸酯为底物的核酸类酶.该酶同时具有氨基酸酯的剪切作用、氨酰基-tRNA的连接作用和多肽的剪接作用等功能.由于蛋白类酶和核酸类酶的组成和拮构不同,命名和分类原则有所区别.为了便于区分两大类别的酶,有时催化的反应相同,在蛋白类酶和核酸类酶中的命名却有所不同.例如,催化大分子水解生成较小分子的酶,在核酸类由于蛋白类酶和核酸类酶的组成和拮构不同,命名和分类原则有所区别.为了便于区分两大类别的酶,有时催化的反应相同,在蛋白类酶和核酸类酶中的命名却有所不同.例如,催化大分子水解生成较小分子的酶,在核酸类酶中的称为剪切酶,在蛋白类酶中则称为水解酶;在核酸类酶中的剪接酶,与蛋白类酶中的转移酶亦催化相似的反应等.1年前查看全部
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