限制酶有什么作用?

瑶草仙子2022-10-04 11:39:542条回答

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像天空一样蓝 共回答了11个问题 | 采纳率100%
细菌反击  许多细菌用切割外来DNA的方法进行自我保护,如切割感染性噬菌体的DNA.这些细菌产生一种能切割DNA的核酸内切酶,一旦发现外来DNA便将其切割,因此它们有效地限制了噬菌体对细菌的感染,故这种核酸内切酶被称为限制酶.
分子剪刀   每种限制酶特异识别专一DNA序列,并在切割位点将其准确切割.
这个是高中生物选修非常重要的一种酶在基因工程中,配合使用DNA连接酶!
1年前
lvmingpop 共回答了6个问题 | 采纳率
你问的是限制性内切酶吧?它能识别特定的脱氧核苷酸序列,并于特定位点上准确切割双链DNA。可以用它来检测基因变异,检测基因存在与否和位置。注意限制酶具有专一性,一种限制性内切酶智能识别一种脱氧核苷酸序列。
1年前

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限制性核酸内切酶主要是从______________中分离纯化出来的,每种限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中____________________断开。以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段:其中的(2)能和________(填序号)在_____________的作用下连接成_______________。
135878785631年前1
a98515383 共回答了18个问题 | 采纳率77.8%
原核生物;特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键;(7) ;DNA 连接酶;“略”
镰刀型细胞贫血症的病因是碱基发生变化,检测这种碱基为什么必须使用限制酶
老二掉了碗大个疤1年前3
邪小笑 共回答了19个问题 | 采纳率78.9%
在特定的位点进行碱基修饰
镰刀型细胞贫血症是DNA中一个CTT变成CAT,即其中一个碱基T变成A,以致产生病变.致使血红蛋白β链中N端第6个氨基酸由谷氨酸(Glu)转变为缬氨酸(Val)·
限制酶识别特定DNA序列
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示.质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点.请回答:www.
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示.质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点.请回答:www.***.com
www.***.com
(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶 PstⅠ、EcoRⅠ,对含抗病基因的DNA、质粒进行切割.
为什么要用这两个酶,
只有PstⅠ、EcoRⅠ两种酶能保持抗病基因结构的完整性,所以构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ两种酶.
为什么这两种酶能保持抗病基因结构的完整性?
因为切割位点还是什么的?
进行切割.
leegentle1年前3
家里猫 共回答了20个问题 | 采纳率95%
据图分析可知抗病基因与载体质粒共有酶切位Pst1.Sma1.EcoR1.但Sma1切割位点在抗病基因(目的基因)上,用其切割会破坏抗病基因的结构而影响其功能,所以只能用限制Pst1.EcoR1对抗病基因和质粒进行切割.
回答有关生物工程的问题.转基因抗病香蕉的培育过程如上图所示.图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶,质粒
回答有关生物工程的问题.

转基因抗病香蕉的培育过程如上图所示.图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶,质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点.如图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点.

(1)若要获得抗病基因,能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割?______,说明理由______.要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒?______.
(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长.欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,重组质粒中应同时含有______基因,作为标记基因.
(3)利用组织培养技术能将香蕉组织细胞培育成植株,这是因为香蕉组织细胞具有______,图中①→②、②→③依次表示香蕉组织细胞的______和______的过程.
(4)②、③阶段是否可使用同种培养基?______;理由是______.
④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基?______;理由是______.
yuanzj5201年前1
三火0315 共回答了22个问题 | 采纳率86.4%
解题思路:分析题图:含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点,其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因(目的基因)上;质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位点.所以要活动重组质粒,可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割.图中①→②表示脱分化过程、②→③表示再分化过程、④是新植体.

(1)因为限制酶SmaⅠ的切割位点位于抗病基因上,对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构,所以要获得抗病基因,不能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割.要获得含抗病基因的重组质粒,也不能否用PstⅠ、Apa...

点评:
本题考点: 基因工程的应用;植物培养的条件及过程.

考点点评: 本题结合转基因抗病香蕉的培育过程图,考查基因工程和植物组织培养技术的相关知识,意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点的能力;能运用所学知识与观点,对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论.

限制酶问题限制酶切割两种末端 粘性末端和平末端,用DNA连接酶连接的两个末端,两个末端必须是相同的 这句话是什么意思?
清风摇曳1年前2
williamying 共回答了24个问题 | 采纳率100%
平末端就不用说了,都能被DNA连接酶连接.
“必须相同”是对粘末端说的,严格说来,应该是“必须互补”的两个粘末端才能被DNA连接酶连接.比如BglII和BamHI两个酶切末端并不完全相同,但是互补,所以也可以被DNA连接酶连接,不过连接后的片段无论用BglII还是BamHI都无法再切开.
限制酶是一种核酸内切酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列.下图为四种限制酶BamH I、EcoR.
限制酶是一种核酸内切酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列.下图为四种限制酶BamH I、EcoR.I、Hind ITI和列Ⅱ的识别序列:
切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是 ( )
A.BamH I和EcoR I;
B.BamH I和HindⅡI:
C.BamH I和BglII:
D.EcoR I和.Hind IⅡ;
为什么选c而不是b
jx_wgh1年前5
sanshang9 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%
C中粘性末端均为GATC,而B中后者为AGCT,当然不能配
记住以后读粘性末端时,不管怎样都从切点开始读就对了
欢迎追问
,为什么目的基因有某酶的酶切位点就不能选择此限制酶
狼叼ww1年前2
玩者 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%
这位同学,你肯定把这句话误解了的.你可以试想目的基因如果有某酶切点,再用此酶,那不就会把目的基因切断了吗了?应该是目的基因两端有某酶切点,再用此酶,切取此目的基因,而不是切点在目的基因中间,那样只会破坏目的基因.
(2011•温州二模)下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割位点,由此推断的以下说法(  )
(2011•温州二模)下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割位点,由此推断的以下说法(  )
限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点
BamHⅠG↓GATCCKpnⅠGGTAC↓C
EcoRⅠC↓AATTCSau3AⅠ↓GATC
HindⅡGTY↓RACSmaⅠCCC↓GGG
(注:Y=C或T,R=A或G)
A.限制酶切割后不一定形成黏性末端
B.限制酶的切割位点一定在识别序列的内部
C.不同限制酶切割后一定形成不同的黏性末端
D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列
白勺的的的1年前1
天马行空yeah 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%
解题思路:限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.

A、SmaⅠ切割位点为CCC↓GGG,形成的是平末端,A正确;
B、Sau3AⅠ的切割位点位于识别序列的一侧,B错误;
C、BamHⅠ和Sau3AⅠ切割后形成的相同的黏性末端,C错误;
D、因为Y=C或T,R=A或G,所以HindⅡ限制酶可识别多种序列,D错误.
故选:A.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查限制酶的作用,考查学生分析图形和从图中获取信息的能力.

根据限制酶的特点,可将它们分成两大类:一类是切割部位无特异性,另外一类是可特异性地识别核苷酸序列.
根据限制酶的特点,可将它们分成两大类:一类是切割部位无特异性,另外一类是可特异性地识别核苷酸序列.
那为什么 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列?不是还有“切割部位无特异性”的存在么?
打乒乓1年前5
我是幸运紫色花 共回答了14个问题 | 采纳率100%
可将它们分成两大类:一类是切割部位无特异性,另外一类是可特异性地识别核苷酸序列.
切割部位无特异性不是说随便什么都可以,还是指一定的核苷酸序列,不过可以是多种,就象蛋白酶能水解不同的蛋白质一样.
请问:什么是单一酶切位点,第二位的答案说"该质粒上只含有一种限制酶的识别位点",不太可能吧,什么载体?第三位说的是限制酶
请问:什么是单一酶切位点,
第二位的答案说"该质粒上只含有一种限制酶的识别位点",不太可能吧,什么载体?
第三位说的是限制酶的切点吧,
其中1类酶识别部位和切点不同,切断部位不定;二类酶切断识别部位或其附近的特定部位;3类酶识别部位和切点不同,但切断特定部位.
可能两位的意思我没弄懂
SkyKing1年前3
ok6yal 共回答了23个问题 | 采纳率87%
一种酶在一个载体上只有一个酶切位点,与多酶切位点对应
限制酶可以用来切割RNA和单链DNA吗?
Job_lee1年前4
them1both 共回答了16个问题 | 采纳率81.3%
限制酶全名是 限制性核酸内切酶
但是 这个核酸仅仅是指 DNA 双链 不包括RNA
至少现在没有发现切割RNA和单链DNA
(2011•普陀区二模)已知正常的β珠蛋白基因(以βA表示)经MstⅡ限制酶切割后可得到长度为1.15kb和0.2kb的
(2011•普陀区二模)已知正常的β珠蛋白基因(以βA表示)经MstⅡ限制酶切割后可得到长度为1.15kb和0.2kb的两个片段(其中0.2kb的片段通常无法检测到),异常的β珠蛋白基因(以βS表示)由于突变恰好在MstⅡ限制酶切割点上,因而失去了该酶切位点,经MstⅡ限制酶处理后只能形成一个1.35kb的DNA片段,如图1;现用MstⅡ限制酶对编号为1、2、3的三份样品进行处理,并进行DNA电泳,结果如图2,则1、2、3号样品的基因型分别是(以βA、βS表示相关的基因)(  )
A.βSβS、βAβS、βAβA
B.βAβA、βAβS、βSβS
C.βAβS、βSβS、βAβA
D.βAβS、βAβA、βSβS
YouandMetogether1年前1
华府华安 共回答了27个问题 | 采纳率92.6%
解题思路:由于0.2 kb的DNA片段通常无法检测到,而电泳结果显示经过MstⅡ限制酶处理的样品2中有两个不同大小的DNA片段,应该一个是1.35 kb的DNA片段,另外一个是1.15 kb的DNA片段;DNA的片段越小,那么其在电泳场中的移动速度越快,这样样品1的是1.35 kb的DNA片段,样品3的是1.15 kb的DNA片段.

由题图2可知有4个DNA片段,由于βS较βA长,在电泳过程中,迁移速率较慢,由此可得1号的是由两段1.35 kb的DNA片段组成,其基因型为βSβS,2号是由一段1.35 kb的DNA片段和1.15 kb的DNA片段,其基因型为βAβS,3号两段1.15 kb的DNA片段组成,其基因型为βAβA.
故选:A

点评:
本题考点: 蛋白质的提取和分离;基因工程的原理及技术.

考点点评: 解题关键:①理解DNA电泳法的原理,DNA的片段越小,其在电泳场中的移动速度越快;②正确识图,通过分析图1、图2,推断相关结论.

为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA?
candy_strawberry1年前4
绝情久久零 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%
很标准的答案:
迄今为止,基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的,它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列.细菌中限制酶之所以不切断自身DNA,是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,对于外源入侵的DNA可以降解掉.生物在长期演化过程中,含有某种限制酶的细胞,其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开.这样,尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断,并且可以防止外源DNA的入侵
真菌中有限制酶吗
骄傲的狼1年前1
冰冷世界 共回答了20个问题 | 采纳率95%
一般基因工程中用的限制性内切酶均来自原核生物,传统意义上的这类酶似乎在真核生物中不存在
但真菌中有这种功能的酶,譬如,很多真菌的I型内含子会编码内切酶以利于自己转座到同源位点上
为何用相同限制酶切割目的基因和质粒
为何用相同限制酶切割目的基因和质粒
目的基因与运载体重组里的过程 粘…没学过
高傲的孤独1年前1
蚕豆1 共回答了12个问题 | 采纳率91.7%
这样可以使切割后的目的基因与质粒连接上
用限制酶切割一个DNA分子,获得一个目的基因,同时有四个磷酸二酯键被水解.这话对么?注意到DNA是双链的...可为什么要
用限制酶切割一个DNA分子,获得一个目的基因,同时有四个磷酸二酯键被水解.这话对么?注意到DNA是双链的...可为什么要切四个呢?
因利而制权1年前1
stoa-7 共回答了24个问题 | 采纳率79.2%
对的,因为一条单链要切两下才可获得一个片段.DNA为双链 当然要要有四个磷酸二酯键被水解了.
目的基因与运载体重组后,使用同一种限制酶可以切割重组质粒吗
yyes20081年前5
爱上天使的泪 共回答了16个问题 | 采纳率81.3%
是的,必须的.因为同种限制酶的碱基序列相同,目的基因与运载体重组后必须用同种限制酶,它们的碱基序列才会相同.
目的基因与运载体结合的疑惑!用相同限制酶分别切割目的基因和运载体基因时,限制酶不是只能切割特定的切点如G /A,比如序列
目的基因与运载体结合的疑惑!
用相同限制酶分别切割目的基因和运载体基因时,
限制酶不是只能切割特定的切点如G /A,比如序列是...GAATTC...和...CTTAAG...那么前面的...碱基和后面的...碱基会断掉么?
逍遥881年前1
metthewlunix 共回答了9个问题 | 采纳率100%
切哪断哪,前后序列你又没给,是不是限制酶识别的特异性序列只有你清楚咯.不能切的自然是不会断掉啦.
这年头,问题越来越玄了.
限制酶和连接酶,解旋酶的作用位点是什么?质粒的化学本质是什么?
jiazhijz1年前3
幽晶恋羽 共回答了23个问题 | 采纳率87%
限制酶和连接酶:相邻核苷酸之间连接的磷酸二酯键
解旋酶:互补碱基之间的氢键,如:A=T
质粒的化学本质是裸露的双链环状DNA.
限制酶能切RNA病毒吗?
qq45104511年前3
VSaber 共回答了12个问题 | 采纳率83.3%
不可以
限制性核酸内切酶是识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶.它能识别双链分子的某种特定核苷酸序列,使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,而且只能切割DNA,不能切割RNA.另外,根据酶的专一性也能得出答案.另外,是存在RNA限制酶的,但是RNA只在转录的时候才作为翻译蛋白质的模板出现,行使功能后即被降解,在机体内存活时间短.病毒内RNA存活时间较长,我们知道多数病毒以RNA为遗传物质,病毒侵染细胞后,释放出来的RNA行使功能后也会被降解.所以对于RNA限制酶的研究较少.
基因工程质粒的要求有一个是:有一个至多个限制酶切割位点
基因工程质粒的要求有一个是:有一个至多个限制酶切割位点
这句话为什么对?如果只有一个位点 那就只能断2个磷酸二酯键 怎么把目的基因配对上去呢?
为什么说质粒只有一个切口?
wumeng19811年前2
草莓原浆 共回答了16个问题 | 采纳率100%
每个限制酶的识别位点只能插入一个目的基因.
如质粒上可以有多个同种限制酶的识别位点,但每个识别位点只能插入一个目的基因
因为质粒是环状的,而DNA是链状的.
限制酶所识别的序列有什么特点?
cdguyi1年前2
bx917811柏鑫 共回答了17个问题 | 采纳率100%
限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一个中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的.
回答下列有关基因工程的问题.如图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素
回答下列有关基因工程的问题.
如图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因.

(1)将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,连接后获得的质粒类型有______.(可多选)
A.X-1B.X-2C.X-3D.X-4
(2)若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌,然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上.在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有______、______.
(3)如果X-1用E1酶切,产生850对碱基和3550对碱基两种片段:那么质粒X-2(Tcr基因的长度为1200对碱基)用E2酶切后的片段长度为______对碱基.
(4)若将外源的Tcr基因两端用E2切开,再与用E2切开的X-1混合连接,并导入大肠杆菌细胞,结果显示,含X-4的细胞数与含X-1的细胞数之比为13,增大DNA连接酶用量能否提高上述比值?______.原因是______.
ee曾记过客1年前1
barley2005 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
解题思路:据图分析,每种限制酶能特异性识别专一DNA序列,并在切割位点将其准确切割.用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,三个片段之间的连接是随机的,连接后形成的质粒类型包括题中的A、B、C三项.
X-1即质粒中含有Apr基因,能在含有青霉素的培养基上生长,X-2中含有Tcr基因,能在含有四环素的培养基上生长,X-4中含有Apr基因和Tcr基因,能在含有青霉素或者四环素的培养基中生长,而X-3中没有这两种抗性基因,故没有导入质粒的大肠杆菌细胞和导入X-3的大肠杆菌细胞在这两种培养基上均不能生长.
由图可知,X-2为X-1剪切Apr基因后再连接Tcr基因形成的,故其长度为3350+1200=4750对碱基.

(1)因目的基因和质粒都是用E1切开且质粒上有两个E1酶切位点,故Apr基因和Tcr基因的黏性末端相同,既可能出现Apr基因和X-1连接的产物(X-1),也可能出现Tcr基因和X-1连接的产物(X-2),还可能出现X-1两端连接形成的产物(X-3).
(2)X-1含有Apr基因,该基因表达后对青霉素有抗性,X-2含有Tcr基因,该基因表达后对四环素有抗性,X-3不含抗性基因,X-4同时含有Apr和Tcr基因,Apr和Tcr基因表达后,对青霉素、四环素都有抗性.故而在含有青霉素或四环素的两种培养基上不能生长的大肠杆菌中不含X-1、X-2、X-4,即无质粒细胞和含X-3的细胞.
(3)用E1酶切X-1,产生850对碱基的Apr基因大部分碱基片段和3550对碱基含有E2酶切位点的片段.与Tcr基因形成含有4750个碱基对的X-2质粒.用E2酶切割质粒,由环状变为链状,碱基对数不变.
(4)含X-4的细胞数与含X-1的细胞数的比值与形成这两种质粒的数量有关.这两种质粒的形成是通过末端随机结合形成碱基对,再由DNA连接酶连接缺口,而DNA连接酶对该DNA片段无选择作用,故增加DNA连接酶的用量,不改变题中的比值.
故答案为:
(1)ABC
(2)无质粒细胞含X-3的细胞
(3)4750
(4)不能DNA连接酶对DNA片段没有选择性或者DNA末端相同

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查基因工程的相关知识,意在考查学生的识图和理解能力,比较抽象,需要耐心分析.

一个DNA分子用限制酶切割,获得一个目的基因,为什么需要断开4个磷酸二酯键?
一个DNA分子用限制酶切割,获得一个目的基因,为什么需要断开4个磷酸二酯键?
把原理说一下,尽量简洁一点.
紫沐1年前1
wzylx 共回答了27个问题 | 采纳率85.2%
因为要获得一个目的基因,需将此目的基因两边多余的脱氧核苷酸切除掉,因此有两个切口,又DNA分子是双链的,所以有4个磷酸二酯键被切.
基因工程中用限制酶切割质粒和目的基因用一种限制酶和两种限制酶是否都可以?各有何优缺点?
文青19831年前2
bzqbfyc 共回答了23个问题 | 采纳率91.3%
用一种来切的话你插入的目的基因没法确定方向 因为两头都可以连上
用两种来切的话就可以保证你插入序列的方向性
(2011•虹口区模拟)某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得
(2011•虹口区模拟)某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表.限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示.下列有关说法正确的是(  )
A酶切割产物(bp)b酶再次切割产物(bp)
2100:1400:1000:5001900:200:800:600:1000:500

A.在该DNA分子中,a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个
B.a酶与b酶切出的粘性末端不能相互连接
C.a酶与b酶切断的化学键不相同
D.用a酶切割与线性DNA相同碱基序列的质粒,得到4种切割产物
初一的夏季1年前1
zwdhp123 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
解题思路:结合题意分析图表:由图可以看出a酶和b酶切割后产生的黏性末端相同.表格中看出a酶可以把原有DNA切成4段,说明有该DNA分子上有3个切口,即a酶的识别序列有3个;b酶把大小是2100的DNA切成大小分别为1900和200两个片段,再把大小是1400的DNA切成大小分别为800和600两个片段,说明b酶在该DNA分子上有2个切口,即b酶的识别序列有2个.

A、a酶可以把原有DNA切成4段,说明有该DNA分子上有3个切口,即a酶的识别序列有3个,b酶把大小是2100的DNA切成大小分别为1900和200两个片段,再把大小是1400的DNA切成大小分别为800和600两个片段,说明b酶在该DNA分子上有2个切口,A正确;
B、由图可以看出a酶和b酶切割后产生的黏性末端相同,它们之间能相互连接,B错误;
C、a酶与b酶切断的化学键均为磷酸二酯键,C错误;
D、质粒为环状DNA,并且酶a在该DNA分子上有3个识别序列,因此用a酶切割可以得到3种切割产物,D错误.
故选:A.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题难度适中,属于考纲中理解层次的要求,着重考查了限制酶的识别位点和切割结果,考生要能够根据切割结果判断切割位点,并且两种限制酶切割形成的末端相同,因此能够互相连接.

(2013•商丘二模)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示:图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶,质粒和抗
(2013•商丘二模)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示:图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶,质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点.下表是四种限制酶的识别序列及酶切位点.

限制酶PstⅠSmaⅠEooRⅠApaⅠ
识别序列及酶切位点
(1)若要获得抗病基因,能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割?______,说明由______.
要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒?______.
(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长.欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,重组质粒中应同时含有______基因,作为标记基因.
(3)②、③阶段是否可使用同种培养基?______;理由是______.
(4)已知④阶段可以使用不添加任何植物激素的培养基即可生根,请根据所学知识给出理由:______.
一派山水1年前1
偶爱相思 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
解题思路:限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.

(1)由抗病基因中酶切割位点可知,限制酶SmaⅠ的切割位点在抗病基因中间,对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构,所以不能用限制酶SmaⅠ.根据重组质粒中目的基因的位置可知,切割质粒用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割.所以不能用PstⅠ、ApaⅠ限制酶.
(2)根据题意,培养基中有卡那霉素,所以培养的微生物中要含有抗卡那霉素基因作用为标记基因.
(3)在植物组织培养的不同阶段,培养基中激素种类、数量、比例不同,所以②③不能用同种培养基.
(4)④过程不需要添加植物激素,因为植物的芽能产生生长素,促进生根.
故答案为:
(1)不能对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构不能
(2)抗卡那霉素
(3)不能两阶段培养基中激素种类、数量、比例不同
(4)因为芽能产生生长素,促进根的生长

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术;植物培养的条件及过程.

考点点评: 本题考查转基因植物培育过程,要求学生理解限制酶的用法、识记激素对植物组织培养的作用.

(2014•天津一模)基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-
(2014•天津一模)基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-.根据图示判断下列操作正确的是(  )

A.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割
B.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割
C.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
D.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
hackerlt1年前1
kevinwfl 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%
解题思路:由图可知,由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列,限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列.要将目的基因从该DNA链中提取出来,需要在目的基因左右切开,所以要用限制酶Ⅱ;质粒不能用限制酶Ⅱ,否则会将两个标记基因都给切割开.

限制酶I的识别序列和切点是-GGATCC-,限制酶II的识别序列和切点是-GATC-,可知限制酶II能够识别和切割限制酶I切割后的黏性末端.据题图可知,目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是-GGATCC-和限制酶II的识别序列和切点是-GATC-,只有用限制酶II才能同时将目的基因切割下来.质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因,分别有限制酶II的识别序列和限制酶I的识别序列;如果用限制酶II切割,则GeneI 和GeneⅡ都被破坏,造成重组质粒无标记基因;用限制酶I切割,则破坏GeneⅡ,保留GeneI,其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同,可以连接形成重组DNA.
故选:A.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查基因工程限制酶相关知识,意在考查考生的识图和理解能力,解题的关键是理解基因表达载体构建的过程.

Ⅱ型限制酶的基本特性?
好了还没疯1年前1
搞和 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
3.限制与修饰系统的种类
根据酶的亚单位组成、识别序列的种类和是否需要辅助因子,限制与修饰系统至少可分为四类.表 2-2 是各种限制与修饰系统的比较.
Ⅱ 型(type Ⅱ)限制与修饰系统所占的比例最大,达 93% .Ⅱ 型酶相对来说最简单,它们识别回文对称序列,在回文序列内部或附近切割 DNA ,产生带 3'- 羟基和 5'- 磷酸基团的 DNA 产物,需 Mg2+ 的存在才能发挥活性,相应的修饰酶只需 SAM .识别序列主要为 4-6bp ,或更长且呈二重对称的特殊序列,但有少数酶识别更长的序列或简并序列,切割位置因酶而异,有些是隔开的.
Ⅱs 型(type Ⅱs)限制与修饰系统,占 5% ,与 Ⅱ 型具有相似的辅因子要求,但识别位点是非对称,也是非间断的,长度为 4-7bp ,切割位点可能在识别位点一侧的 20bp 范围内.
Ⅱ 型限制酶一般是同源二聚体(homodimer),由两个彼此按相反方向结合在一起的相同亚单位组成,每个亚单位作用在 DNA 链的两个互补位点上.修饰酶是单体,修饰作用一般由两个甲基转移酶来完成,分别作用于其中一条链,但甲基化的碱基在两条链上是不同的.
在 Ⅱ 型限制酶中还有一类特殊的类型,该酶只切割双链 DNA 中的一条链,造成一个切口,这类限制酶也称切口酶 (nicking enzyme),如 N.Bst NBI .
(2013•闵行区一模)切割目的基因需要用到限制酶.下列有关限制酶的相关表述正确的是(↓表示剪切点)(  )
(2013•闵行区一模)切割目的基因需要用到限制酶.下列有关限制酶的相关表述正确的是(↓表示剪切点)(  )
A.限制酶切割的都是氢键
B.-CCGCGG-序列被限制酶切割后断裂的碱基对有4对
C.能识别-GGATCC-序列的限制酶,也能识别-GATC-序列
D.-CATG-和-GGATCC-序列被限制酶切出的黏性末端核苷酸数目相同
就爱钟凯1年前1
breakf 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
解题思路:限制酶主要从原核生物中分离纯化出来.特异性:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,形成黏性末端和平末端两种.

A、限制酶切割的是磷酸二酯键,A错误;
B、-CCGCGG-序列被限制酶切割后断裂的碱基对有2对,B错误;
C、限制酶具有特异性,一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列,C错误;
D、-CATG-和-GGATCC-序列被限制酶切出的黏性末端核苷酸数目具有四个,D正确.
故选:D.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题难度适中,属于考纲中识记、理解层次的要求,着重考查了限制酶的特点,知道限制酶的作用部位以及能写出限制酶切割形成的黏性末端.

限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列.下图为四种限制酶BamHI,EcoRI,HindⅢ
限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列.下图为四种限制酶BamHI,EcoRI,HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列.箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为何?(  )

A. BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列-AATT-
B. BamHⅠ和HindⅢ;末端互补序列-GATC-
C. EcoRⅠ和HindⅢ;末端互补序列-AATT-
D. BamHⅠ和BglⅡ;末端互补序列-GATC-
kxvy3bczi71591年前1
猪是老虎的LG 共回答了19个问题 | 采纳率94.7%
解题思路:1.限制性核酸内切酶(限制酶)是“分子手术刀”.来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的.功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性.结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端.
2.解答本题的关键是理解限制酶的特点.切割目的基因和运载体时,一定要使用同一种限制性内切酶,这样,切出的切口才一样,才能进行碱基互补配对连接起来.两个黏性末端只要一样就可以进行碱基互补配对,再通过DNA连接酶连接起来.

限制酶所识别的是特定的碱基序列,并在特定部位进行切割,不同的限制酶识别不同的核苷酸序列并识别不同的切点,黏性末端不同.但不同的粘性末端有时是可以进行拼接的,只要切下的游离碱基互补即可互补黏合,由图示可知BamHI和BglII都可切下序列-GATC-,故末端互补序列-GATC-,故D正确.
故选:D.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题主要考查黏性末端的知识.解答本题的关键是理解限制酶的特点.限制酶所识别的是特定的碱基序列,并在特定部位进行切割,限制酶不同,所识别的碱基序列不同,黏性末端不同,但不同的粘性末端有时是可以进行拼接的,不要混淆.

在基因工程中 切割运载体和含有基因的DNA 片段为什么要使用同一种限制酶
江小鱼20081年前2
lsuuwlv 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
因为需要有相同的切口,这样才能让载体和DNA 结合啊.
为什么限制酶将DNA分子切为两个片段需消耗两分子水?
深海鳕鱼1年前0
共回答了个问题 | 采纳率
限制酶广泛存在于各种生物钟,微生物中很少分布.这句话对吗?为什么?
hw12261年前1
选择错误 共回答了22个问题 | 采纳率81.8%
  不对.限制酶主要分布于微生物.到目前为止,细菌是限制性内切酶,尤其是特异性非常强的I类限制性内切酶的主要来源.
限制酶切割磷酸二酯键,碱基间的氢键是如何断裂的?
限制酶切割磷酸二酯键,碱基间的氢键是如何断裂的?
如果通过解旋酶的话,是否会将整条DNA链打开呢?
找个girl去醉1年前2
五花八门6 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%
氢键是既容易形成也容易断裂的键.当磷酸二酯键断裂后,外则的基本骨架断了,氢键会自己断裂.
过解旋酶能打断氢键,使DNA由双螺旋解开成单链.但不能打断DNA.
载体与目的基因必须用同一种限制酶处理么
可遇不可求1年前1
奇怪泡泡 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
没错,只有用同一种酶处理,载体和目的基因两端才会形成相同的粘性末端,才能把两者连起来.
限制酶主要分布在细胞的哪个部位?
sishengweilan1年前1
xjj1977 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
限制酶是从原核细胞中分离出来的吧,而原核细胞的酶应该在细胞质中吧.
在基因工程中是否用一种限制酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理质粒DNA
songxia0951年前1
上帝保佑的dd度 共回答了19个问题 | 采纳率84.2%
不是
处理含目的基因的DNA的酶和处理质粒DNA的酶必须是同一种酶.
这样才能使目的基因和质粒露出相同的粘性末端,目的基因和质粒才能被DNA连接酶连接起来.
用同一种限制酶切割后的运载体与目的基因连接方式有
用同一种限制酶切割后的运载体与目的基因连接方式有
3种 但是为什么有3种
shevsten1年前3
西门小飞猪 共回答了22个问题 | 采纳率77.3%
1,运载体和运载体连接
2,运载体和目的基因连接
3,目的基因和目的基因连接
用限制酶切割目的基因是否需要遵循碱基互补配对原则?
nikey43151年前2
智者忧 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%
不需要
只要有特定序列,就切
重组质粒时才遵循碱基互补配对原则,因此切割目的基因的限制酶和切割质粒的
限制酶要用同一种
EcoRI和SmaⅠ限制酶识别的序列均由6个核苷酸组成,但切割后产生的结果不同,其识别序列和切割位点(图中箭头处)分别如
EcoRI和SmaⅠ限制酶识别的序列均由6个核苷酸组成,但切割后产生的结果不同,其识别序列和切割位点(图中箭头处)分别如图所示,请据图分析正确的是(  )

A.所有限制酶的识别位点均由6个核苷酸序列组成
B.SmaⅠ限制酶切割后产生的是黏性末端
C.用DNA连接酶连接平末端和黏性末端的连接效率一样
D.细菌细胞内限制酶可以切割外源DNA,防止外源DNA入侵
简爱JIAN1年前1
chh1981414 共回答了19个问题 | 采纳率100%
解题思路:限制酶:主要从原核生物中分离纯化出来.特异性:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.形成黏性末端和平末端.
DNA连接酶:根据酶的来源不同分为两类:E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶.这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低.

A、限制酶的识别位点一般由4、5、6或8个核苷酸序列组成,故A错误;
B、据图分析,SmaⅠ限制酶切割后产生的是平末端,故B错误;
C、用DNA连接酶连接平末端的效率比黏性末端低,故C错误;
D、细菌细胞内限制酶可以切割外源DNA,防止外源DNA入侵,是一套完善的防御机制,故D正确.
故选:D.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查限制酶的特点、功能的相关知识,意在考查学生提取信息、分析推理能力,平时应该加强训练.

用两种不同限制酶切一个环状DNA分子能得到几个片段(每个限制酶只有一个切点)
lilei024221年前1
tigerdahu 共回答了22个问题 | 采纳率77.3%
2个片段啦、
一个圆环、在边缘切2刀
DNA连接酶的种类及区别?限制酶和DNA连接酶作用的化学键分别是什么?载体的条件是?(3点 )
ldrjz1年前1
shuijinnh 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%
1.
(1)E·coli DNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;
(2)T4DNA连接酶:来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低.
(3)热稳定的DNA连接酶(thermostableDNAligase),是从嗜热高温放线菌(Thermoactinomycesthermophilus)菌株中分离纯化的,一种能够在高温下催化两条寡核苷酸探针发生连接作用的一种核酸酶.
2.
DNA连接酶:连接DNA单链与DNA单链之间的磷酸二酯键
限制性核酸内切酶:剪切双链DNA内的磷酸二酯键
3.
作为运载体必须具有三个条件:
①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制;
②有多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入;
③有一定的标记基因,便于进行筛选.如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因.一般来说,天然运载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建.现在所使用的质粒载体几乎都是经过改建的.
肺炎双球菌的转化实验中,S型细菌的DNA进入R型细菌中,之后是怎样转化的?限制酶不切它的原因?
shibang6481年前1
牛头带洋花 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%
不是不切它,在自然中没有绝对.不是在培养基中只是出现部分s型菌落么,就是有部分S型细菌的DNA被切掉了.S型细菌的DNA进入R型细菌中,类似于基因重组,而S型细菌的DNA类似为显性,转录时其性状表达.
哪些酶作用于DNA分子的氢键?解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶都分别作用于什么键?请问当限制酶作用于磷酸二脂键
哪些酶作用于DNA分子的氢键?
解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶都分别作用于什么键?
请问当限制酶作用于磷酸二脂键时,氢键又怎么断裂?
咖啡煮饭1年前1
qcwblm 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
作用于DNA分子的氢键:解旋酶
作用于DNA分子的磷酸二酯键:DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶
——————
氢键,不是化学键,很容易断裂.
限制酶把磷酸二酯键切断后,氢键就会自动断裂.
限制酶使核苷酸内部的磷酸基与脱氧核苷酸之间的键发生水解对吗
hjj15141年前4
鸭鸭蛋 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
不对.
限制酶切开的是磷酸二酯键,位于两个核苷酸间的磷酸基与脱氧核糖之间
拥有限制酶的细菌为什么不切割自身DNA
拥有限制酶的细菌为什么不切割自身DNA
什么是甲基化?
流云轻抹1年前2
lhlh668866 共回答了12个问题 | 采纳率91.7%
1酶的专一性,它们作用于特定部位
2细菌内某种物质自我保护
为什么限制酶是从原核生物中分离提纯出来的?这类酶在原核生物中的作用是什么?
niuff190881年前1
wangxh1982 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
因为此酶在原核生物体内是为了切除外源DNA,以免对原核生物遗传表达造成影响
某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如表.
某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如表.限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示.下列有关说法不正确的是(  )
a酶切割产物(bp) b酶再次切割产物(bp)
2100:1400:1000:500 1900:200:800:600:1000:500

A.在该DNA分子中,a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个
B.a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接
C.a酶与b酶切断的化学键相同
D.用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,若干循环后,-AGATCC--TCTAGG-序列会明显增多
chen_he1年前1
0am4at 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
解题思路:分析题图:a酶和b酶识别的脱氧核苷酸序列不同,但切割后产生的黏性末端相同.
分析表格:a酶可以把原有DNA切成4段,说明有该DNA分子上有3个切口,即a酶的识别序列有3个;b酶把大小是2100的DNA切成大小分别为1900和200两个片段,把大小是1400的DNA切成大小分别为800和600两个片段,且a酶和b酶的识别位点不同,说明b酶的识别序列有2个.

A、由以上分析可知,a酶的识别序列有3个,b酶的识别序列有2个,A正确;
B、a酶与b酶切出的黏性末端相同,用DNA连接酶可以将它们连接起来,B错误;
C、限制酶切割的化学键都是磷酸二酯键,C正确;
D、a酶和b酶切割后形成的黏性末端相同,在DNA连接酶的作用下可连接形成AGATCC∥TCTAGG或GGATCT∥CCTAGA.所以用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,若干循环后,所得DNA分子中AGATCC∥TCTAGG序列会明显增多,D正确.
故选:A.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题结合图表,考查基因工程的原理及技术,重点考查限制酶的相关知识,要求考生识记限制酶的特点及作用,能比较图中a酶和b酶的识别序列,明确两者切割后产生的黏性末端相同;能分析表中数据,明确a酶有3个识别位点,b酶有2个识别位点,再结合所学的知识准确判断各选项.

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