归一化法定量分析的适用范围3Q

油脂中的脂肪酸的检测现在是热点.你问的是定性的问题,首先定性后才能定量.定性有两种办法：1、你购买的是混合标样,这个是无法定性的,需要单标来确定每个色谱峰的位置；2、你购买色谱柱的时候可以向厂家咨询每个色谱峰的出峰位置,然后自己判定.“色谱世界”网站的色谱图库有大量脂肪酸的色谱图,你可以去参考一下.

高效液相色谱使用归一化法定量分析：
1.必须满足两个条件：
A、样品中各组分均出峰,完全分离,且均有响应；B、进样量无须准确,要清楚每个组分的校正因子.
2.此方法的优点：简便、精确,进样量的多少与测定结果无关,操作条件（如流速,柱温）的变化对定量结果的影响较小.（但由于液相色谱所用检测器为选择性检测器,对很多组分没有响应,因此液相色谱法较少使用归一化法.）

校正面积归一化法定量分析的使用必须满足两个前提条件：样品中所有组分在检测器中都有响应；要清楚每个组分的校正因子.
归一化法的优点是简便、准确,定量结果与进样量无关,操作条件对结果影响较小；缺点是试样中所有组分必须全部出峰,某些不需要定量的组分也要测出其校正因子和峰面积.

定量测量时,可根据供试品的具体情况采用峰面积法或峰高法,测定杂质含量时须采用峰面积法.
1、内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量
(1)按各品种项下的规定,精密称（量）取对照品和内标物质,分别配成溶液,精密量取各溶液,配成校正因子测定用的对照溶液.取一定量注入仪器,记录色谱图.测量对照品和内标物质的峰面积或峰高,按下式计算校正因子：
As／Cs
校正因子（f）＝———————
AR／CR
式中 As—内标物质的峰面积或峰高； AR—对照品的峰面积或峰高；
Cs—内标物质的浓度； CR—对照品的浓度.
再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图,测量供试品中待测成分（或其杂质）和内标物质的峰面积或峰高,按下式计算含量：
Ax
含量（C x）＝f×———————
As内／Cs内
式中 Ax—供试品（或其杂质）峰面积或峰高； C x—供试品（或其杂质）的浓度；
As内—内标物质的峰面积或峰高； Cs内—内标物质的浓度；
f—较正因子
当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的供试品溶液,使用同一浓度的内标物质溶液时,则配制内标物质溶液不必精密称（量）取.
(2) 内标物质的选择
① 内标物质应是样品中部含有的组分,否则会使峰重叠而无法准确测量内标物质的峰面积.
② 内标物质的保留时间应与待测成分接近,并达到完全分离,即分离度R>1.5.
③ 内标物质应是纯度符合要求的化合物,若非纯品,无干扰峰也可使用,已知含量的较蠢物质也可使用,但须扣除内标物质的重量.
2、外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量
按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和供试品,配制成溶液,分别精密取一定量,注入仪器,记录色谱图,测量对照品和供试品待测成分的峰面积（或峰高）.按下式计算
含量：Ax
含量（C x）＝CR—————
AR
由于微量注射器不易精确控制进样量,当采用外标法测定供试品中某杂质或主成分含量时,以定量或或自动进样器进样为好.
3、 加校正因子的主成分自身对照法
4、 不加校正因子的主成分自身对照法
5、 面积归一化法
由于峰面积归一化法测定误差大,因此,本法通常只能用于粗略考察供试品中的杂质含量.除另有规定外,一般不宜用于微量杂质的检查.方法是测量各杂质峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积,计算各峰面积占总峰面积的百分率.

不知道什么叫高效液相
但是 峰面积归一法好像知道
恩 就是把峰面面积取做一 然后对应区间的面积是一个概率 即区间面积与总峰面面积之比
好像就这样
见笑了 好像没说清楚 ...

归一化用于很多数学模型,比如主成份分析,灰色模型等,因为数学建模主要是对数据的分析,往往带有单位的数据之间没有可比性,因此要进行数据的归一化或单位化,一般情况下数学模型都会单一化,但是如果单一的用拟合预测类的简单方法就没有必要