sp法中一抗、二抗指的是什么?

一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑：
1.二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源;
2.二抗需与一抗的类别或亚类相匹配.这通常是针对单克隆抗体而言.多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体;
3.一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别.然而在一些特殊的实验里, 如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的.

一抗是与底物相结合的,同时一抗必须有抗原识别位点,能被另一种抗体识别并结合.
二抗是能与一抗的抗原识别位点识别并结合,同时,二抗必须有可以观测、计量的性质.
这些性质可以是：①二抗本身带有颜色,可以通过分光度仪检测到二抗的浓度；②二抗还可以作为一种酶,催化另一种底物,通过检测底物或者生成物的浓度检测出二抗的浓度；等等……有很多,就是说必须是可测量的.

还是要看说明书的.具体问题具体分析.有的直接标记的一抗可以直接做免疫荧光,有的是用来做流式的,有的都可以.一般间接免疫荧光信号更强,因为一个一抗分子可以结合多个荧光标记二抗,使信号大大加强.

您好,答题不易
如有帮助请采纳,谢谢!

理论上是可以的
但是效果可能不好

R&D,不推荐AbCam.是否通用只能试了才知道了.操作过程不一样可能影响效果

一抗就是针对你的蛋白的抗体,一般比较特异,若你的蛋白不是常见的,则需要定制（譬如用你的蛋白注射兔子）
二抗是针对一抗的抗体,看你的一抗来自哪种动物,它具有普遍性.不管你的蛋白是什么,只要是从某种动物譬如兔子中获得的一抗,二抗就都可以用同一种抗兔的.所以商品化程度很高
二抗上一般链接一些基团,经反应后显色可以检验目标蛋白

不一定,有的一抗已经可以带荧光标记了...

如果要用一抗标记特异蛋白的话就需要无数个一抗,所以一抗只是中介物,用易于被识别的二抗来显色,或显荧光,易于观察.

原因有以下几点：
1. 一抗识别抗原的数量有限,假设一分子的抗体识别一分子的抗原,而一分子抗原上只有3-6个分子的标记的话,最后只能检测到3-6个标记分子.但是如果使用二抗,一分子一抗可以被多个（n个）二抗识别,这个时候每个二抗上带有3-6个标记分子的话,信号就会放大n倍.另外,一抗如果使用单克隆抗体,只能识别抗原的单一表位,而二抗基本上都是多克隆抗体,所以一个一抗体上可以结合很多个二抗.这是使用二抗最基本的原因,多个二抗用来识别一抗,提高检测灵敏度.
2.任何对一抗进行的标记或者修饰,都有可能造成一抗识别抗原能力的下降.实际上更多的二抗是用HRP或者AP来标记的（当然荧光染料的标记也是很重要的一种）,但是这些酶或染料标记到抗体上后,采用的方法并不能选择标记在抗体的哪个位置,也就是说,标记物越多,有可能对抗原识别位点造成的影响也就越大,从而引起抗体识别抗原能力下降,也会降低检测的灵敏度.
3.一抗价格昂贵,如果对每一个一抗都进行标记,将是一笔很大的花费,因为一抗都是抗原特异的,但是二抗不一样,二抗可以识别同一物种来源的一抗,成本相对低廉.

另外,同位素现在在WB基本没有人用了,同位素半衰期只有14还是15天,就是标记了,半个月标记就没了,不好保存,而且同位素对实验室有要求的.

ELISA（enzymelinked immunosorbent assay）即酶联免疫吸附试验.
二抗（第二抗体）即酶标抗免疫球蛋白的抗全.
因为一个二抗分子可以偶联90个生物素分子（biotin）,4个生物素分子又可以结合1个亲合素分子（avidin）,所以二抗通过生物素可以连接多个亲合素,而且结合非常稳定,二抗与生物素和亲合素结合以后,其生物活性不受影响.
使用生物素-亲合素-过氧化物酶复合物作为指示剂,组成一组新的生物放大系统,提高了酶联免疫吸附试验的敏感度,因此可以检测多对抗原抗体系统,如细菌、病毒、肿瘤细胞表面抗原等等.
定性分析结果应写能检测到的最小稀释度.
定量分析结果应写按公式计算后在曲线上反查到的浓度.

由于你问题中有提到酶标二抗,我认为应该是有两种可能,（1）产品为双抗体夹心法检测抗原,这种情况下有些产品可以比如HBSAG一步法,加入样品50ul后立即加入50ul酶标多抗温育30min洗版加底物显色终止即可.（2）产品为间接法,检测抗体,酶标二抗为抗你检测抗体种源的另一种源抗体,如检测人的IgG,可标记鼠抗人-HRP.这种情况是不能混合的因为二抗会与样本中的所有IgG反应,估计会导致类似HOOK效应的结果.

应该不算是一个概念
抗抗体,是利用抗体本身具有的抗原性质,将其注入有机体后,所产生的抗体,称之为抗抗体.
二抗,主要是用来检测一抗的,在二抗中通常携带有标记酶等物体,用以扩大反应灵敏度,检测目的抗原的存在

这四个不是一码事,HRP和AP是酶,二抗上挂了酶,要给相应的底物才能显色,显色方式可以通过发荧光也可以不发荧光（例如给予ECL底物,其中的H2O2和鲁米诺在HRP的作用下,能在黑暗中发出荧光；也可以给予双氧水和DAB,反应产生棕色不溶于水的物质）；FITC为异硫氰酸荧光素,本身就是黄绿色荧光,二抗结合后可直接在荧光显微镜下观察；生物素一般也是挂在二抗上的,利用卵白素分别连接生物素标记的第二抗体和生物标记的酶,由酶催化底物,生成终产物,这个终产物也是不溶于水的.

直接法是每个抗原的抗体都要荧光标记,而且荧光标记后可能会影响抗体效价甚至失效.所以有人就发明了间接法,这样只要对相应的抗原做出相应的抗体,再用标记好的二抗结合上就行了,不用每个抗体都要荧光标记,而且对一抗的效价影响甚微.
我自己的经验是,直接法跟间接法的结果差不多,敏感性并不像猜测的那么明显,所以直接法还是比间接法有优势

估计不可以了,因为接了一个荧光素基团后,一抗的构象估计要变化了,即使构象不变化荧光基团产生的空间位阻作用也阻止了与二抗的结合,所以最好买专门用的做免疫组化的抗体.

抗体会很快失效