原位杂交过夜时为什么要盖盖玻片

幻o忘忧2022-10-04 11:39:541条回答

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AA制 共回答了24个问题 | 采纳率87.5%
防止蒸发导致玻片干燥
1年前

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为什么检测某种蛋白的表达都用免疫组化和原位杂交l呢
为什么检测某种蛋白的表达都用免疫组化和原位杂交l呢
看每一篇文献基本上都是这两种方法联合使用,做原位杂交(好像一般都是用western blotting)的目的是什么呢,检测表达的多少(能定量吗?)为什么不用ELISA法呢,它不是可以定量?
canlanzhe1年前1
红尘唯你 共回答了15个问题 | 采纳率80%
原位杂交是检测基因的,如DNA或者RNA,不过这个技术有些落后,误差比较大,是比较老的技术了.而免疫组化是进行蛋白定位的,这两种技术可靠性都比较差,但因为操作简单,成本也不太高,在以前是比较常用的,免疫组化只能进行半定量.ELISA可以精确定量,但对抗体要求高,临床的试剂盒可信,但科研用的,质量差别太大,成本也很高.检测表达用western blotting可靠性高一些,因为有分子量大小指标,难以做假.
原位杂交的正义探针和反义探针是如何界定的?
woshizhu5141年前1
bgs4465005 共回答了27个问题 | 采纳率88.9%
如果使用的质粒在克隆的模板序列上均带有启动子,由此产生的反义链探针可与mRNA 杂交,而正义链探针不产生杂交信号,即:反义RNA链---又称cRNA链,用作杂交的探针.正义RNA链---用于杂交的阴性对照
MRNA的含量等同于表达量吗?用原位杂交检测检测准确还是PCR准确?或者免疫组化?
word9tparse1年前1
xiaoyuan0823 共回答了17个问题 | 采纳率82.4%
不能说等同.
只是能作为表达量的一种表现形式,实际上是转录水平的表达量
狭义的表达量应该是成熟蛋白的量
原位杂交和pcr都不准确,研究的目的不同,原位杂交是看形态学上(非细胞学)的各个部位表达量(转录水平),这个实验挺难做的.qpcr是对某一组织的表达量(转录水平),和northern blot的目的几乎一样,却别在于pcr快捷,容易量化,但没有northern直接,也就没有northern准确.
免疫组化就是蛋白水平了.对于表达量来说这个比较直接,是针对蛋白的.其实如果有合适手段的话,最直接的是检测蛋白活力,蛋白活力对于表达量这个概念是最接近的的.
原位杂交是对细胞内()进行定位?A、蛋白质B、线粒体C、核酸D、端粒E、核蛋白
Oo天山莲花oO1年前1
夯小李子 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程.所以选 C 核酸
原位杂交 与 southern 杂交的区别~
原位杂交 与 southern 杂交的区别~
如题
随便叫什么名字1年前1
zzrzzr 共回答了18个问题 | 采纳率72.2%
将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交.
Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法.一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量.
即前者是在组织中直接杂交,后者是提取出来再杂交
要检测一个基因的mrna表达量用原位杂交PCR技术,哪个定量更准?
亡灵守护者1年前2
dd_kuaile 共回答了17个问题 | 采纳率82.4%
个人认为PCR更准,应为PCR的灵敏度比原味杂交要高,如果你有正确的标准品,定量PCR基本可以算出每细胞某基因的拷贝数