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＼77

1. 超声(ultrasound)：利用人体不同组织的声阻抗和衰减特性的差异，利用探头发射出超声波并接收回波。图上的点的亮暗表示回波的强弱。2. 计算机断层成像(CT)：利用人体不同组织对于X射线的吸收系数的差异，从不同方向发射出射线并在另一头接收得到该方向被吸收后的强度。综合各个方向的结果，利用类似于解方程组的原理来求解整个平面各个位置的CT值作为图像。3. 磁共振成像(MRI)：原理是这几个里面最为神奇的，先说结论。最终得到的信号是图像的频域表示，即对其进行反傅里叶变换可得到图像。具体原理我们当时有一本书来讲，简单描述一下，就是利用氢原子在强磁场下受到共振磁场激励脉冲的激发下由于各种量子力学的原理而发出的信号。不同脉冲序列能得到不同特点的图像，比如T1，T2，等等。而不同特点的图像具有不同的对比度，分别用来看不同的组织器官。在这里膜拜一下两位发明人Paul C. Lauterbur和Peter Mansfield。作者：郭亨凯链接：https://www.zhihu.com/question/53816804/answer/136686983来源：知乎著作权归作者所有，转载请联系作者获得授权。

其实都适用于全院，只是产生的地点不同。

MR医学代号？

这是一种比较特定的疫苗形式，最基本的原理就是通过疫苗注射之后形成的身体抗体，对抗身体当中产生的病毒以及变异性的病毒。

KimRoccoShieldsKimRoccoShields是一名导演，代表作品有《你只需要爱?》《你只需要爱?》等。外文名：KimRoccoShields职业：导演合作人物：卡米拉·贝勒代表作品：《你只需要爱?》《你只需要爱?》

主干句是：Mr.Scotthassentrequests主语Mr.Scott，谓语hassent，宾语requestsagreatmany用来修饰requests，表示很多forsparepartsandotherurgentmessages也是修饰requests的。requestsfor……——一些对于……的请求要求。Mr.Scotthassent（agreatmany）requests（forsparepartsandotherurgentmessages）

WolframRupertiWolframRuperti是一名演员，主要作品有《埃瑞拉》、《女王密使》、《FüralleFlleStefanie》。外文名：WolframRuperti职业：演员代表作品：埃瑞拉合作人物：昂德瑞·托让电影作品

影响PyroSim其它版本的运行。必须在安装的盘符下搜索“PyroSim”全部删除，尤其是lic结尾的文件。

歌曲名:Prelude歌手:Mr.Children专辑:Sense-ToysfactoryレコードMr.Children - Prelude作词：桜井和寿 / 作曲：桜井和寿　Hey you　日が暮れる今日はどんな一日だった?全部が思い通りにいくはずないって知ってて闻いてんだ　明日はどこに行こう?ねぇmy friend. where do we go?七色の光を放ってた梦がしぼんじゃったとしても颜を上げな　前奏曲(プレリュード)が闻こえてくるさぁ　耳を澄ませてごらん停留场で仆は待ってる君も一绪に乗らないか?　胸の高鸣りにその身をゆだねよう熏りをわだかまりを舍てに行こう深く考えないことが切符代わりだ　首を縦に振るただそれだけで昨日が过ぎてしまったそんな自分を嫌にならない为の言い訳を自分に缲り返しやり过ごしているのなら　梦幻(まぼろし)を振りまいて　今その列车は走り出す汽笛を轰かせて　躯体を震わせて　光の射す方へ悩んでたことなんて　今はとりあえず棚の上へ要らないぜ　荷物なんて何も持たないで飞び乗れ!　Hey you　その昔は英雄になれると勘违いしてたテーブルでスタンバってたって何も运ばれちゃこないのに　そこで何してるの?ねぇmy friend. what" s going on?探し物は见つかったの?それともニセモノをつかまされて泣き寝入りかい?　信じていれば梦は叶うだなんて口が裂けても言えないだけど信じてなければ成し得ないことがきっと何処かで仆らの访れを待っている　悲しみを追い越して　なおもその列车は走ってく暗闇を切り裂いて　风をおこして　目指してたその向こうへ良识やモラルなんて　今はとりあえず棚の上へ要らないぜ　客観视なんて息绝えるまで止まらないで!　长いこと続いてた自分探しの旅もこの辺で终わりにしようか明日こそ　谁かに必要とされる自分を见つけたい　Hey you　日が暮れる明日はどんな一日にしようか?前奏曲(プレリュード)が闻こえてるさぁ　耳を澄ませてごらん　憧れを连れ回して　今日もその列车は走ってる汽笛を轰かせて　躯体を震わせて　光の射す方へ悩んでたことなんて　今はとりあえず棚の上へ要らないぜ　荷物なんて何も手にしないで飞び回れ!　The End...http://music.baidu.com/song/1966682

不会。NikeAirZoomRivalFly3属于速读训练跑鞋今年会推出新款速度训练跑鞋，可以与顶级的竞速跑鞋AlphaflyNext相媲美。前掌两个AirZoom气垫，中前足的ZoomX缓震泡棉，后掌React缓震泡棉，内置复合纤维板，脚感也是很激进的的，又软又弹，但是跑步的声音特别响而且脚后跟容易磨脚，建议穿长一点的袜子。

zoomfly3是在2019年7月正式出售的，鞋面使用了vaporweave新材质，与NikeVaporflyNEXT%相同，zoomfly3的鞋面和zoomflysp的可不一样，更加舒适，而且更轻薄，鞋底设计更加科学。zoomfly3鞋面使用了全新Vaporweave科技，这种类似蝉翼的材质相比Flyknit更加轻薄透气，更重要的是避免了鞋面吸收汗水和雨水

nike zoom rival d 10是属于长跑鞋，不适用于短跑。短跑鞋和长跑鞋不仅从外观上来讲不一样，功能也各不相同。短跑鞋，一般底部有鞋钉，对地面有更高地抓取力。中长跑鞋一般底部很正常，穿起来也很舒适。短跑鞋普遍都比较轻，这对于爆发来说是个强力辅助。中长跑鞋有的是轻的，有的却有点重，但相对于短跑鞋来讲，穿起来很舒服。短跑鞋鞋型更紧一些，尤其是足弓的位置，鞋钉长度也比长跑鞋要长。中长跑鞋还提供短跑鞋不具备的缓震的功能。

您输入的IMEI/MEID/序列号为无效的序列号：F17MROWRFNJN应该是 ：序列号 F17MR0WRFNJN 设备型号 iPhone 5s 32GB 白色 制式型号 A1533 类型 iPhone6,1 代号 n51ap 生产时间 2014年05月25日-2014年05月31日 生产厂商 中国(富士康-郑州) 激活状态 已激活 电话支持 已过期 硬件保修 已过期 剩余保修 无 延保状态 未延保 备注 美国V版，全部无锁，支持三网(移动2G+联通2G/3G/4G+电信2G/3G)

无效的序列号

美国是三权分立 国会有参议院、众议院公共组成国会、、 行政权是美国总统 两届一任 司法权 终身制法官

π=TR-TC=PQ 两端求导：MR-MC=P 可得MR=MC+P=0.0012Q+28-0.0008Q=28+0.0004Q

R=P(Q)*Q,所以MR即对R求导 MR=Q*(dP/dQ)+P，已知MR=4.8，P=6，则 Q*(dP/dQ)=-1.2，得到(dP/dQ)=-1.2/Q,得到dQ/dP=-Q/1.2而e=- (dQ/dP)*（P/Q）=-[(-Q)/1.2]*(P/Q)=6/1.2=5

它是假定线性反需求函数P=a-bQ，得到总收益函数TR=aQ-bQ^2，从而得到边际收益函数MR=dTR/dQ=a-2bQ不等于P

P是关于Q的函数，简单求导而已。

边际收益MR：是指厂商增加一单位产品销售所获得的收入增加量MR=ΔTR/Δy。 边际收益：厂商的收益就是厂商的销售收入。厂商的收益可分为总收益、平均收益和边际收益。边际收益是指厂商增加一单位产品销售所获得的总收入的增加。其公式为：　　MR（Q）=ΔTR（Q）/ΔQ或者MR= dTR（Q）/dQ。

：MR=dTR/dQ=d(P*Q)/dQ=Q*dP/dQ+P=P(1+Q/P*dP/dQ) 此为式1 需求价格弹性e=-P/Q*dQ/dP 代入1式得MR=P(1-1/e） 当需求富于弹性时e大于1，而P是大于0的，故MR为正值。管理经济学1、 管理经济学:是一门研究如何把传统经济学的理论和经济分析方法应用于企业管理决策实践的学科。2、 经济模型:由经济变量之间的函数关系构成，通过建立经济模型来研究经济变量之间的因果关系，可达到科学地进行经济预测和经济决策的目的。 3、 边际分析法:是微观经济学分析和研究资源最优配置的基本方法，是一种正确的决策思想，用其衡量一个方案或一项活动是否有利，就是要把这个方案或活动引起的额外成本(边际成本)与引起的额外收益(边际收入)相比，如果后者大于前者，就是有利的，否则就是不利的，这种决策方法体现了向前看的决策思想。 4、 机会成本:是指资源用于其他的、次好的用途所可能得到的净收入，只有用机会成本做决策，才能判断资源是否真正得到了最优使用。拓展资料：食品的种植、养殖、加工、包装、储藏、运输、销售、消费等活动符合国家强制标准和要求，不存在可能损害或威胁人体健康的有毒有害物质以导致消费者病亡或者危及消费者及其后代的隐患。该概念表明，食品安全既包括生产安全，也包括经营安全；既包括结果安全，也包括过程安全；既包括现实安全，也包括未来安全。《中华人民共和国食品安全法》第十章附则第九十九条规定：本法下列用语的含义：食品安全，指食品无毒、无害，符合应当有的营养要求，对人体健康不造成任何急性、亚急性或者慢性危害食品可持续安全：这是从发展角度要求食品的获取需要注重生态环境的良好保护和资源利用的可持续

想知道你现在这题知道答案没，应该我现在也想要问

当弹性小于0时， 那么p的变化大于qd，既然p=10，那么QD就要小于0 MR=p*qd,所以是-10PED=QD/P=-0.5p=10QD=-5

根据基本公式推导的如下所示:TR=PQMR=dTR/dQ=P+Q*dp/dQ

计算和结论都没有问题。在计算总收益变化△TR=P·△Q+Q·△P+△P·△Q时，由于最后一项△P·△Q为两变化量之积，相比之下往往非常小而可以忽略。这样一来△TR/△Q=P+Q·(△P/△Q)，就与直接计算的值△TR/△Q=d(PQ)/d(Q)=P·d(Q)/d(Q)+Q·d(P)/d(Q)=P+Q·(△P/△Q)结论相同了。

MR是边际收益，是总收益TR的导数，你对总收益函数TR求导数就是边际收益函数了。ΔTR和ΔQ是指总收益的增量和产量的增量。MR＝ΔTR/ΔQ或者MR＝dTR/dQ，是边际收益MR的计算公式。

http://blog.tianya.cn/blogger/post_show.asp?BlogID=228398&PostID=6283133&idWriter=0&Key=0看看你就知道了楼上错了是Mr.p

蔡依林 - MR.Q (Live)数一数 每天你撞见我的次数 赌一睹你的神情中有爱慕与其辛苦又要耍酷又要埋伏那么何不让爱快一点倾巢而出(一窝蜂 都装酷 不醒目)Hey U,Mr.Q 爱你耍Q的指数 电流像瀑布 好像重力加速度你又杀 又无辜与生俱来的功夫加快脚步 要加入连署说你愿意为了我幸福开始吃素放弃森林好好只照顾一棵树木我的付出一辈子都不会辜负所有害怕从此有你拔刀相助(我爱你的赌注 不怕输)Hey U,Mr.Q 爱你耍Q的指数电流像瀑布 好像重力加速度你又杀 又无辜与生俱来的功夫加快脚步 要加入连署So Q (hey U,Mr.Q,hey U) just because of U (hey U,Mr.Q,Mr.Q)So Q (hey U,Mr.Q,hey U) just because of U (hey U,Mr.Q,Mr.Q)So Q (hey U,Mr.Q,hey U) just because of U (hey U,Mr.Q,Mr.Q)So Q (hey U,Mr.Q,hey U) just because of U (hey U,Mr.Q,Mr.Q)(RAP) I can see in your eyes BabyGive it up and come here for me Don"t be so cool shout out sweetieMake your dreams come trueYour love gonna stop my heartbeatCome kill me with your hot kissLife wouid be so cute HoneyBe my Mr.Q

酷 说可爱者乱说的

数一数 每天你撞见我的次数赌一睹 你的神情中有爱慕与其辛苦又要耍酷又要埋伏那麽何不让爱快一点倾巢而出(一窝蜂 都装酷 不醒目)hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流像瀑布 好像重力加速度你又傻 又无辜 与生俱来的功夫加快 脚步 要加入连署说你 愿意为了我幸福开始吃素放弃 森林好好只照顾一棵树木我的付出一辈子都不会辜负所有害怕从此有你拔刀相助(我爱你的赌注 不怕输)hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流像瀑布 好像重力加速度你又傻 又无辜 与生俱来的功夫加快 脚步 要加入连署hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流像瀑布 好像重力加速度你又傻 又无辜 与生俱来的功夫加快 脚步 要加入连署hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流像瀑布 好像重力加速度你又傻 又无辜 与生俱来的功夫加快 脚步 要加入连署(一窝蜂 都装酷 不醒目)hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流像瀑布 好像重力加速度你又傻 又无辜 与生俱来的功夫加快 脚步 要加入连署so q(hey u,mr.q hey u)just because of uso q(hey u,mr.q hey u)just because of uso q(hey u,mr.q hey u)just because of uso q(hey u,mr.q hey u)just because of ui can see in your eyes babygive it up and come here for medon"t be so cool shout out sweetiemake your dreams come trueyour love gonna stop my heartbeatcome kill me with your hot kisslife would be so cute honey be my mr.qhey u,mr.q 爱你耍q的指数电流像瀑布 好像重力加速度你又傻 又无辜 与生俱来的功夫加快 脚步 要加入连署hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流像瀑布 好像重力加速度你又傻 又无辜 与生俱来的功夫加快 脚步 要加入连署

歌曲：mr.q 歌手：蔡依林 专辑：舞娘 数一数每天你撞见我的次数 赌一睹你的神情中有爱慕 与其辛苦又要耍酷又要埋伏 那么何不让爱快一点倾巢而出 (一窝蜂都装酷不醒目) hey u,mr.q 爱你耍q的指数 电流像瀑布好像重力加速度 你又杀又无辜 与生俱来的功夫 加快脚步要加入连署 说你愿意为了我幸福开始吃素 放弃森林好好只照顾一棵树木 我的付出一辈子都不会辜负 所有害怕从此有你拔刀相助 (我爱你的赌注不怕输) hey u,mr.q 爱你耍q的指数 电流像瀑布好像重力加速度 你又杀又无辜 与生俱来的功夫 加快脚步要加入连署 so q (hey u,mr.q,hey u) just because of u (hey u,mr.q,mr.q) so q (hey u,mr.q,hey u) just because of u (hey u,mr.q,mr.q) so q (hey u,mr.q,hey u) just because of u (hey u,mr.q,mr.q) so q (hey u,mr.q,hey u) just because of u (hey u,mr.q,mr.q) (rap) i can see in your eyes baby give it up and come here for me don"t be so cool shout out sweetie make your dreams come true your love gonna stop my heartbeat come kill me with your hot kiss life would be so cute honey be my mr.q

Q是指英文中的cute,也就是可爱的意思可爱先生

Mr.Q歌词（附rap） 数一数 每天你撞见我的次数 赌一睹 你的神情中有爱慕 与其辛苦又要耍酷又要埋伏 那麽何不让爱快一点倾巢而出 (一窝蜂 都装酷 不醒目) hey u,mr.q 爱你耍q的指数 电流像瀑布 好像重力加速度 你又傻 又无辜 与生俱来的功夫 加快 脚步 要加入连署 说你 愿意为了我幸福开始吃素 放弃 森林好好只照顾一棵树木 我的付出一辈子都不会辜负 所有害怕从此有你拔刀相助 (我爱你的赌注 不怕输) hey u,mr.q 爱你耍q的指数 电流像瀑布 好像重力加速度 你又傻 又无辜 与生俱来的功夫 加快 脚步 要加入连署 so q(hey u,mr.q hey u)just because of u so q(hey u,mr.q hey u)just because of u so q(hey u,mr.q hey u)just because of u so q(hey u,mr.q hey u)just because of u i can see in your eyes baby give it up and come here for me don"t be so cool shout out sweetie make your dreams come true your love gonna stop my heartbeat come kill me with your hot kiss life would be so cute honey be my mr.q hey u,mr.q 爱你耍q的指数 电流像瀑布 好像重力加速度 你又傻 又无辜 与生俱来的功夫 加快 脚步 要加入连署 hey u,mr.q 爱你耍q的指数 电流像瀑布 好像重力加速度 你又傻 又无辜 与生俱来的功夫 加快 脚步 要加入连署

歌曲：Mr.Q 歌手：数一数每天你撞见我的次数赌一睹你的神情中有爱慕与其辛苦又要耍酷又要埋伏那么何不让爱快一点倾巢而出(一窝蜂都装酷不醒目)hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流向瀑布好像重力加速度你又杀又无辜与生俱来的功夫加快脚步要加入连署说你愿意为了我幸福开始吃素放弃森林好好只照顾一棵树木我的付出一辈子都不会辜负所有害怕从此有你拔刀相助(我爱你的赌注不怕输)hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流像瀑布好像重力加速度你又杀又无辜与生俱来的功夫加快脚步要加入连署hey u,mr.qhey u,mr.q 爱你耍q的指数电流向瀑布好像重力加速度你又杀又无辜与生俱来的功夫加快脚步要加入连署hey u,mr.q 爱你耍q的指数电流向瀑布好像重力加速度你又杀又无辜与生俱来的功夫加快脚步要加入连署Jason.whttp://music.baidu.com/song/5952506

　　●01●　　虽然大二女生颜珍珍已经练就了一边看“犯罪现场调查”中法医解剖的场面一边津津有味地吃晚餐这种本事，但隔着屏幕和隔着眼镜看到尸体，那完全是两种天壤之别的体验。颜珍珍见过真的尸体，就在半月前的体育馆地下室。她是尸体的发现者，她撕心裂肺的尖叫声引来了身在五楼的老师。 　　颜珍珍病了，准确地说是心理疾病，她夜不能寐，被脑子里那挥之不去的尸体折磨，半个月瘦了近十斤。半个月瘦了10斤的还有颜珍珍的室友兼死党张妍，因为吊死在体育馆地下室的人是她的男友杨鑫。 　　颜珍珍坐在电脑前浏览学校论坛的帖子，她希望能够找到一个愿意帮助她脱离苦海的人，哪怕这个人只是愿意当个倾听者。她真的急需帮助。 　　结果，真的让颜珍珍找到了一个热心人，这个名为Mr.Q的人在网上留下了一个邮箱地址，声称愿意倾听同学们的烦恼，愿意用自己浅薄的心理学知识为需要帮助的人排忧解难。 　　换作以前，颜珍珍会觉得这个人是吃饱了撑的，但是现在，她觉得自己找到了救命稻草。 　　只是Mr.Q这个名字，读音和某个暗地里风靡校园的神秘人物十分相像。那就是Mr.Kill！S大的传奇人物。对了，这个传奇人物和杨鑫的死绝对脱不开干系。 　　Mr.Q的真名叫做丁哲，是颜珍珍的学长，S大的研究生。按照丁哲自己的话来说，他是个爱心泛滥的闲人，不过以往最多是通过电话或者网络语音与寻求他帮助的人交流，可是这次，他愿意从网络中走到现实，坐在冷饮厅里请颜珍珍吃冰激凌，和她面对面交流。 　　颜珍珍一边品着冰激凌一边扬起小脸有些不好意思地问，“为什么愿意见我？” 　　然而丁哲的回答让她有些失望，“因为我对Mr.Kill很好奇，你是杨鑫尸体的发现者，而按照警方的观点，杨鑫自杀就是因为受到了Mr.Kill的恐吓。” 　　提到Mr.Kill，颜珍珍有些害怕地缩了缩肩膀，毕竟这个Mr.Kill是不能拿到台面上讲的人物。这个传奇人物就像是一个暗夜杀手，无所不在无所不能。S大的学生们全都心照不宣。不管你有什么样的问题，只要你有钱，就可以找Mr.Kill来帮你解决。如果你失恋了，你可以找他，如果你心里不痛快，你可以找他，如果你挂科了，你还是可以找他。Mr.Kill有办法让你移情别恋的女友乖乖回到你身边，有办法让那个使你不痛快的人跪在你面前磕头道歉，也有办法让你的试卷与某个接近满分的试卷名字互换。总而言之，MR.KILL是个神通广大的人物，活跃在S大的论坛上行踪难觅。 　　在那件事之前，有些S大的学生还以本校能够有这么一位神通广大的人物自豪。一直到有个男生因为承受不了Mr.Kill长期以来的恐吓，选择跳楼自杀。Mr.Kill成了一个禁忌，因为他真的名副其实和kill沾上了边。如今，他背上了第二条人命——杨鑫。他虽然不是直接凶手，但却是那个把死者逼向鬼门关的魔鬼。 　　“我觉得警方关于杨鑫是自杀的结论下得为时过早，难道就因为有先例？恐怕事情没那么简单。还有你，吞吞吐吐，有所隐瞒的样子，如果你不把知道的一切都告诉我，我怎么帮你呢？”丁哲含笑望着颜珍珍。 　　 　　●02● 　　没错，颜珍珍夜不能寐，体重急剧下降不单单是因为杨鑫吊死在眼前的景象挥之不去，还因为她和杨鑫的死也脱不开干系。 　　“好吧，我承认，但是求求你不要外传好吗？事情到这个地步并不是我所期望的！”颜珍珍眼神闪烁，不敢直视丁哲的眼睛，“与其说我是被杨鑫吊死的场面折磨还不如说我是被自己的良心折磨。大概是杨鑫死前的一周，我通过QQ找到了Mr.Kill，请他教训一下杨鑫，因为他背叛了我的死党张妍，张妍为此夜夜失眠，有时候还躲在被窝里偷偷地哭。我只是想帮张妍教训一下这个负心汉，但我没想让他死啊！我只付了500元的报酬，500元，也就是在他衣柜里放几只蟑螂的程度，哪个杀手会为500元杀人？可是，他真的就杀了杨鑫，我向警方隐瞒了事实，我不是凑巧去体育馆地下室的，是Mr.Kill给我发了短信，让我去那里验收成果！” 　　丁哲答应颜珍珍不会把这件事宣扬出去，他只是很诚恳地安抚颜珍珍激动的情绪，最后告诉她，他会帮她解开心结。至于这个心结怎么解开，颜珍珍从丁哲的眼神里看出了一二，丁哲坚定而兴奋的眼神分明在说，他会把MR.KILL的身份和杨鑫之死查个水落石出。 　　已经过了午夜，丁哲仍然精神奕奕地对着电脑，他想在学校的论坛上寻找Mr.Kill的蛛丝马迹，他按照特定寻找Mr.Kill的方法，在论坛上搜寻隐藏着Mr.Kill最新联系方式的帖子，这个帖子有可能是旅游游记啊，生活小窍门啊，甚至是哪个女生的DIY面膜教程，总之只有聪明人才能找得到Mr.Kill的最新联络方式。可找了好几个小时仍然无果。这个结果丁哲早就想到了，杨鑫刚死不久，Mr.Kill肯定会有一段时间销声匿迹的。 　　关于Mr.Kill最新联系方式的帖子没找到，倒是翻出来了一个不久前咒骂Mr.Kill泄愤的帖子。发帖的男生显然曾经遭受过Mr.Kill的恐吓，他的网名是一连串无序的数字，看来他是想隐藏身份的，后面寥寥无几跟帖的也都是游客，有人劝楼主不要公开谩骂Mr.Kill，小心惹祸上身，有的感慨Mr.Kill果真是无所不能，有的和楼主一样同仇敌忾。 　　丁哲看着看着便笑出声来，虽然这个楼主想要隐藏身份，但是帖子写得实在是慷慨激昂，已经把自己的身份暴露得差不多了。有心人只要一查，便可以找到那个轮滑课上因为受伤而不得不下学期重修的男生是谁。 　　第二天中午，丁哲约上了颜珍珍等在男生公寓4号楼门前。远远地，丁哲便看到了从食堂方向走来，步履有些别扭的男生。 　　男生名叫刘铮，一个月前在轮滑课上受伤，腿上被缝了十几针。原因是有人在他的鞋上做了手脚，当然那个人就是Mr.Kill。 　　现在说起这件事刘铮仍然激动不已，“该死的，这个Mr.Kill还真是无所不能，我是说，那么多鞋子，他怎么就能肯定我会穿那双被他动了手脚的呢？总不能买通上轮滑课的所有同学吧。这还不算数，我出院回来，每天晚上都能在我的公寓床下发现动物的尸体，今天是死兔子，明天是死松鼠，还有一次是整整一口袋的虫子！”

MR代表边际收益，TR代表总收益，Q代表产量。这个公式的意思是边际收益等于总收益的变化量除以产量的变化量。含义是边际收益代表平均一单位的产量变化能带来多少的收益变化。

说起来麻烦，我手腿酸死了，你还是问问微博新浪玩过的游戏里的人去问问。

【答案】：边际收益又称边际报酬是指增加一单位产品销售所引起的总收益的变化量即MR(Q)=△TR(Q)／△Q。 在完全竞争市场上企业所面临的需求曲线是水平的产品销售量的变化不会导致产品价格的变化边际收益等于产品价格也是固定不变的。而在不完全竞争市场上企业所面临的需求曲线一般具有负斜率即产品价格与其需求量二者呈反方向变化。如果增加产品的销售量就需要降低产品的价格。在这种情况下企业的边际收益随着销售量的增加而递减。边际收益又称边际报酬,是指增加一单位产品销售所引起的总收益的变化量,即MR(Q)=△TR(Q)／△Q。在完全竞争市场上,企业所面临的需求曲线是水平的,产品销售量的变化不会导致产品价格的变化,边际收益等于产品价格,也是固定不变的。而在不完全竞争市场上,企业所面临的需求曲线一般具有负斜率,即产品价格与其需求量二者呈反方向变化。如果增加产品的销售量,就需要降低产品的价格。在这种情况下,企业的边际收益随着销售量的增加而递减。

由Q=50-3P知 P=（50-Q)/3 因为总收益TR=PQ,对总收益求导等于边际收益MR 那么：PQ=(50-Q)Q/3 =50Q/3-Q^2/3 进行求导则有：MR=50/3-2/3Q

TR=PQ 那么MR=d（PQ)/dQ 而在完全竞争的时候，P由市场决定，与Q无关 所以MR=P*dQ/dQ=P

MR是指的边际收益，即现在我多卖出去一个产品，可以多赚多少钱。对于竞争性厂商而言，它是价格的接受者，若高于这个市场给定价格，根据完全竞争市场的基本假设，商品是一致无差的，它将没有销量，若低于这个市场给定价格，它会是亏本的。所以，竞争性厂商，MR=P

MR = 0先看看书上MR的公式，参考下图（这是范里安的中级微观教材）。MR=q（1-|e|），e是弹性，如果需求曲线具有单位弹性，意味着弹性是-1，所以e的绝对值是1，所以MR=0

求导数求错了

很简单，就是变量乘积求导公式(PQ)"=P*Q"+Q*P"=P+Q*dp/dQ (都是对Q求导，Q"=1，P是Q的函数，比如P=25-2Q,那么P‘=dp/dQ=-2）

日前，观致汽车旗下全新紧凑型SUV——观致7正式开启预售，预售价为10.98-16.18万元。据悉，新车采用了时尚运动化的造型设计，搭载全新1.6T和1.8T发动机，有望于9月17日正式上市。值得一提的是，观致汽车还针对预售期间下订的用户推出了三大终身免费服务与四重预售抢订礼。外观来看，观致7采用家族化方界美学外观设计语言，车灯与L型立体饰件共同构成方正轮廓，多形面转折的立柱阵列式大灯营造出分体式设计的错觉，极具特色。车身侧面，新车采用偏运动化的设计手法，侧面只保留了一条圆润的下腰线，整体线条更加光滑流畅，并且采用了悬浮式车顶设计，看起来更为时尚。车身尾部，新车采用了造型犀利的LED尾灯，让尾部整体比例更加协调。上方扰流板搭配后包围扩散器和双边共两出的排气，营造出一种运动的车身氛围。内饰方面，观致7采用目前最符合大众审美的设计形式，一体式贯穿出风口，有效提升内饰层次感。同时，新车最大的亮点是搭载12.3英寸全液晶仪表盘以及14.6英寸高清大屏，将支持包括导航、音乐、蓝牙通话等一系列功能。动力方面，观致7将搭载两款全新发动机，其中1.6T涡轮增压发动机最大功率为204马力，峰值扭矩为280牛·米；1.8T涡轮增压发动机最大功率为231马力，峰值扭矩为300牛·米。传动系统方面，两款发动机均匹配格特拉克7速湿式双离合变速箱。本文来源于汽车之家车家号作者，不代表汽车之家的观点立场。

我是蔡依林的9年歌迷啦，英语也不错，我的绝对准确：原词：(Rap) I can see in yr eyes Baby, Given it up and come here for me Don"t be so cool sht t sweetie, Make yr dreams come true Yr love gonna stop my heartbeat, Come kill me with yr hot kiss Life wld be so cute Honey, Be my Mr.Q 读音：爱ken丝因哟爱s杯壁给5啊扑看木Hi而佛谜动笔所苦是替丝为题没课哟追慕看木出哟咯5干那四多普买哈比特看木Kir米维斯哟Ha‘Ki丝来维尔比索Kiu哈尼比买米斯特Kiu

can see in your eyes baby give it up and come here for me don`t be so cool shout out sweetie make your dreams come true your love gonna stop my heartbeat come kill me with your hot kiss life would be so cute honey be my Mr.Q

我能看见你眼中的宝贝，放弃她,来我这里。　　　　别那那么酷喊出宝贝，让你的梦想成真。　　　　你的爱可以阻止我的心跳，用你的热吻迷惑我。 生命将会那么可爱，甜心，当我的MR.Q.

强

为了这首很美式风格的舞曲，唱片公司特别重金礼聘美国编舞老师，让Jolin亲赴美国学习新式舞蹈，演绎出时尚迷情的曲风。Jolin也特别为此曲写rap词。而这首歌里头跟Jolin对戏的Mr. Q并非是虚拟的人物，这次也别出心裁找了个“真”的Mr. Q来助阵。

好男人呀

Q先生 阿Q正传 的Q也没改啊对吧

Mr.Q就等于Mr.Cute,就是“俏皮，可爱“先生 Mr Q ,是可爱聪明至极的人的意思 Q是cute的谐音，cute，香港人广东人喜欢用你好“Q”来形容“可爱”。 说多了就被简化成Q 就像我们的网络用语把美眉简化成MM一个意思FAQ是英文Frequently Asked Questions的缩写，中文意思就是“经常问到的问题”，或者更通俗地叫做“常见问题解答”。

Mr Q ,是可爱的人的意思

Q先生mr是先生的缩写

Q是指英文中的cute,也就是可爱的意思~

同一周期元素，原子半径随着原子序数增大而减小，同一主族元素，原子半径随着原子序数增大而增大，所以右上角元素原子半径最小，左下角元素原子半径最大，元素最高正价等于其族序数，同一非金属元素最高正价与其最低负价的绝对值之和为8，X原子半径最大且最高正价为+1，则X为Na元素；Y元素最高正价是+7、最低负价是-1价，则Y为Cl元素；Z元素最高正价为+3，为第IIIA族元素，且原子半径大于Cl元素，所以Z是Al元素；M元素最高正价为+2，为第IIA族元素，且原子半径大于Z，所以M是Mg元素；R元素最高正价为+5、最低负价为-3，所以R为第VA族元素，且原子半径小于Cl元素，为N元素；Q元素最低负价为-2且没有最高正价，为O元素；A．元素X和Q形成的化合物有Na2O、Na2O2，过氧化钠中含有共价键，故A错误；B．非金属性越弱的元素，其阴离子还原性越强，非金属性O＞N元素，则Q2-比R3-稳定，故C错误；C．X、Z、R的最高价氧化物的水化物分别是NaOH、Al（OH）3、HNO3，氢氧化铝具有两性，所以它们之间可两两相互反应，故C正确；D．元素的金属性越强，其最高价氧化物的水化物碱性越强，M金属性小于X，所以M（OH）2的碱性比XOH的碱性弱，故D错误；故选C．

捧心西子大辩不言皲手茧足沉湎淫逸手到拈来

hi3798mrqcv101000和mrbcv1010D0有区别如下湖南移动盒子芯片Hi3798MRQCV101000海思机顶盒。海思HI3798MRBCV1010D0 宇航军工。海思HI3798MRBCV1010D0 宇航军工的物品。军工专用物资，国家有关部门根据军队特殊需要专门安排试制或生产的物资。如军工专用非标准机械产品、国防化工产品和轻工军工产品等。它既不属统配部管物资，也不属地方管理物资。

PE后面的TTM指的是过往一年12个月的盈利，PB后面的MRQ指的是最近的一个季度的盈利值，两个值都是根据年报上的数据所计算得出的数值。

具体解释如下：PEG，是用公司的市盈率（PE）除以公司未来3或5年的每股收益复合增长率。MRQ则是和PB一起用，意思是基于最近一季度财报当中的净资产数据计算的市净率。

MRQ:先导式叠加溢流阀

要看在哪里看到的了。如果是同客人谈产品价钱时谈到的，可能是：minimum required quantity ， 即：最小需求数量。

可爱

电流像瀑布 好像重力加速度

　　《Mr.Q》是蔡依林演唱的一首歌曲，歌曲歌词写出了在爱情的表现出来的勇敢和直接，是一首鼓励人的歌曲。下面我给大家带来蔡依林《Mr.Q》歌词的介绍，欢迎阅读! 　　蔡依林歌曲《Mr.Q》歌词 　　数一数 　　每天你撞见我的次数 　　赌一赌 　　你的神情中有爱慕 　　与其辛苦 　　又要耍酷又要埋伏 　　那么何不 　　让爱快一点倾巢而出 　　一窝蜂都装酷不醒目 　　Hey You Mr.Q 　　爱你耍Q的指数 　　电流向瀑布 　　好像重力加速度 　　你又傻又无辜 　　与生俱来的功夫 　　加快脚步 　　要加入连署 　　说你愿意 　　为了我幸福开始吃素 　　放弃森林 　　好好只照顾一棵树木 　　我的付出 　　一辈子都不会辜负 　　所有害怕 　　从此有你拔刀相助 　　我爱你的赌注不怕输 　　Hey You Mr.Q 　　爱你耍Q的指数 　　电流像瀑布 　　好像重力加速度 　　你又傻又无辜 　　与生俱来的功夫 　　加快脚步 　　要加入连署 　　So Q(hey you,Mr.Q hey you)just because of U 　　So Q(hey you,Mr.Q hey you)just because of U 　　(Rap) 　　I can see in your eyes Baby 　　Give it up and come here for me 　　Don"t be so cool shout out sweetie 　　Make your dreams come true 　　Your love gonna stop my heartbeat 　　Come kill me with your hot kiss 　　Life would be so cute Honey Be my Mr.Q 　　Hey You Mr.Q 　　爱你耍Q的指数 　　电流向瀑布 　　好像重力加速度 　　你又傻又无辜 　　与生俱来的功夫 　　加快脚步 　　要加入连署 　　Hey You Mr.Q 　　爱你耍Q的指数 　　电流向瀑布 　　好像重力加速度 　　你又傻又无辜 　　与生俱来的功夫 　　加快脚步 　　要加入连署 　　蔡依林《Mr.Q》歌词歌曲创作背景 　　为了这首很美式风格的舞曲，唱片公司特别重金礼聘美国编舞老师，让Jolin亲赴美国学习新式舞蹈，演绎出时尚迷情的曲风。Jolin也特别为此曲写rap词。而这首歌里头跟Jolin对戏的Mr. Q并非是虚拟的人物，这次也别出心裁找了个“真”的Mr. Q来助阵。 　　蔡依林《Mr.Q》歌词作者简介 　　陈镇川1972年出生在台北， 张惠妹的经纪人，《Star》专辑制作人 。台湾著名作词人，制作人，经纪人，演唱会导演。曾导演过多次金曲奖颁奖典礼，以及张惠妹、王力宏、蔡依林等很多艺人的演唱会，是非常资深的业内人士。

TTM，trailing twelve month，过去12个月。正常的PE值是随着年报公布的数据来计算的，但是年中季报出来的时候，盈利数据和股价都会有变化，这个时候可以根据当时时点开始计算过往12个月的盈利来计算PE，即PE,TTMMRQ，most recent quarter，最近一季。根据最近一季的财报数据计算的PB，即PB, MRQ。

PB：股票中提到的应该为P/B值，即市净率（Price to book ratio即P/B），市净率指的是每股股价与每股净资产的比率。 市净率可用于投资分析，一般来说市净率较低的股票，投资价值较高，相反，则投资价值较低；但在判断投资价值时还要考虑当时的市场环境以及公司经营情况、盈利能力等因素。MRQ，most recent quarter，最近一季。根据最近一季的财报数据计算的PB值类似的还有PE TTM（trailing twelve month过去12个月）

市净率（PB）指的是每股股价与每股净资产的比率。 市净率（MRQ）最近一个季度的市净率。

mrq是市净率指标，指的是每股股价与每股净资产的比率。市净率可用于股票投资分析，一般来说市净率较低的股票，投资价值较高，相反，则投资价值较低。MR.Q，北京人民广播电台MetroRadioFM94.5主持人，打破“最长时间电台主持马拉松”世界纪录。

MRQ是mercialradioquotas的简写，指商业广播播出量配额。它是一种为推动公众收听新歌、原创歌曲以及少数族裔歌手做出贡献的政策措施。MRQ对于不同地区的广播电台来说是有区别的，要求电台每周播出一定数量的新歌，以及每天播出的少数族裔歌手的歌曲的时长要求也相应不同。MRQ的实施目的是促进音乐文化多样性，避免大众媒体只播放少数被大众所熟悉的歌曲，从而给新歌和少数族裔的歌手机会，能够让广播电台更加广泛的播放歌曲，使更多的音乐作品能够被更多的收听者所欣赏。通过设置MRQ，电台得到另外一种推动新歌播放的途径——特定时段播放特定类型的音乐，比如在早上节目中安排新歌柔和的流行歌曲，晚上节目中安排摇滚歌曲等，这样就可以让不同类型的歌曲都能够有机会被播放，进一步拓展听众的口味，从而推动不同类型歌曲的发展。

1、在NCBI上查找基因的mRNA序列。2、MessengerRNA(mRNA）——信使核糖核酸信使核糖核酸携带遗传信息，在蛋白质合成时充当模板的RNA。信使RNA从脱氧核糖核酸（DNA）转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸（RNA）。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板，决定肽链的氨基酸排列顺序。mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器（如线粒体和叶绿体）中。

真核生物的mRNA分子是单顺反子，是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物，因此，高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA，理论上认为每克细胞可分离出5～10mg RNA。其中 rRNA为75％～ 85％，tRNA占10％～16％，而mRNA仅占1%～5％，并且mRNA分子种类繁多，分子量大小不均一，表达丰度也不一样。真核生物mRNA有特征性的结构，即具有5"端帽子结构（m7G）和3"端的poly(A)尾巴——绝大多数哺乳动物细胞的3"端存在20~300个腺苷酸组成的poly（A）尾，通常用poly（A+）表示，这种结构为真核mRNA分子的提取、纯化，提供了极为方便的选择性标志，寡聚（dT）纤维素或寡聚（U）琼脂糖亲合层析分离纯化mRNA的理论基础就在于此。一般mRNA分离纯化的原理就是根据mRNA 3" 末端含有多poly(A)尾巴结构特性设计的。当总RNA流经寡聚（dT）（即oligo(dT)）纤维素柱时，在高盐缓冲液作用下，mRNA被特异地吸附在oligo(dT)纤维素柱上，在低盐浓度或蒸馏水中，mRNA可被洗下，经过两次oligo(dT)纤维素柱，即可得到较纯的mRNA。目前常用的mRNA的纯化方法有：（1）寡聚（dT）－纤维素柱层析法，即分离mRNA的标准方法；（2）寡聚（dT）－纤维素液相离心法，即用寡聚（dT）－纤维素直接加入到总的 RNA溶液中并使mRNA与寡聚（dT）－纤维素结合，离心收集寡聚（dT）－纤维素／mRNA复合物，再用洗脱液分离mRNA，然后离心除去寡聚（dT）－纤维素；（3）其它一些方法：如寡聚（dT）－磁性球珠法等。本实验应用方法（1）进行mRNA的分离纯化。【试剂与器材】（一）试剂1． 0.1mol/L NaOH ，每组200mL2． 寡聚Oligo（dT）-纤维素3． 加样/洗涤缓冲液1：0.5 mol/L NaCl, 20 m mol/L Tris-HCl(pH 7.6)，每组250mL或0.5mol/L NaCl, 20mmol/L Tris-HCl(pH7.6), 1mmol/L EDTA(pH8.0), 0.1% SDS。4． 洗涤缓冲液2：0.1 mol/L NaCl, 20 m mol/L Tris-HCl(pH 7.6)，每组250mL或10mmol/L Tris-HCl (pH7.6), 1mmol/L EDTA (pH8.0), 0.05% SDS。配制时可先配制Tris-HCl(pH 7.6)、NaCl、EDTA（pH 8.0）的母液，经高压消毒后按各成分确切含量，经混合后再高压消毒，冷却至65℃时，加入经65℃温育（30min）的10%SDS至终浓度。5． 5 mol/L NaCl，每组10mL6． 3 mol/L NaAc pH5.2，每组10mL7． 无RNase双蒸水(DEPC水)，每组100mL8． 70%乙醇，每组10mL注意：溶液5，6的配制都应该加0.1% DEPC处理过夜，溶液1，3，4，8则用经0.1% DEPC处理过的无RNase双蒸水配制，Tris应选用无RNase的级别。溶液配制后，最好能够按一次实验所需的分量分装成多瓶（如10ml或50ml/瓶）保存，每次实验只用一份，避免多次操作造成对溶液的污染。（二）器材1． 恒温水浴箱2． 冷冻高速离心机3． 紫外分光光度计4． 巴斯德吸管5． 玻璃棉6． 5ml一次性注射器【操作方法】（一） oligo(dT)纤维素的预处理1． 用0.1mol/L NaOH悬浮0.5-1.0g oligo(dT)纤维素。2． 将悬浮液装入填有经DEPC水处理并经高压灭菌的玻璃棉的巴斯德吸管中，柱床体积为0.5-1.0mL，用3倍柱床体积的无RNase的灭菌双蒸水冲洗oligo(dT)纤维素。3． 用3-5倍柱床洗涤缓冲液I冲洗oligo(dT)纤维素，直到流出液的pH值小于8.0。4． 将处理好的oligo(dT)纤维素从巴斯德吸管倒出，用适当的柱床洗涤缓冲液I悬浮，浓度约为0.1g/mL，保存在4℃待用。（二） 总RNA浓度的调整1． 把实验一所提的总RNA转到适合的离心管中，如果总RNA的浓度大于0.55mg/mL，则用无RNase的双蒸水稀释至0.55mg/mL，总RNA的浓度对除去rRNA是很重要的。把RNA溶液置于65℃水浴加热5 分钟，然后迅速插在冰上冷却。2． 加入1/10体积5 mol/L NaCl使RNA溶液中盐的浓度调至0.5 mol/L。（三） mRNA的分离1． mRNA与Oligo(dT)-纤维素结合：用移液器重新悬浮oligo(dT)-纤维素，按下表取适量的oligo(dT)-纤维素到RNA样品中，盖上盖子，颠倒数次将oligo(dT)-纤维素与RNA混匀。于37℃水浴保温并温和摇荡15分钟。总RNA (mg)寡聚Oligo(dT)-纤维素(mL)洗涤缓冲液1，2 (mL)洗脱体积(mL)<0.20.21.01.00.2-0.50.51.51.50.5-1.01.03.03.01.0-2.02.05.05.02． 转移：取1个5ml的一次性注射器，取适量经过高温灭菌的玻璃棉塞紧前端，并把它固定在无RNase的支架上，再把oligo(dT)-纤维素/RNA悬浮液转移到注射器，推进塞子直至底部，把含有未结合上的RNA液体排到无RNase的离心管中（保留至确定获得足够的mRNA）。3． 洗涤：根据上表直接用注射器慢慢吸取适量的洗涤缓冲液1，温和振荡，充分重新悬浮mRNA-oligo(dT)-纤维素，推进塞子，用无RNase的离心管收集洗出液。测定每一管的OD260，当洗出液中OD为0时准备洗脱。4． 洗脱：根据上表直接用注射器慢慢吸取适量（2-3倍柱床体积）的洗脱缓冲液2或无RNase双蒸水到注射器内充分重悬mRNA-oligo(dT)-纤维素，推进塞子以1/3至1/2柱床体积分管收集洗脱液。5． 测定每一管的OD260，合并含有RNA的洗脱液组分于4℃，2500g，离心2-3分钟，上清转移至新的离心管中，去掉残余的oligo(dT)-纤维素。6． 沉淀：洗脱液中加入1/10体积的3mol/L NaAc （pH5.2）, 再加入2.5倍体积的冰冷乙醇，混匀后，-20℃30分钟或放置过夜。7． 离心收集：12000g, 4℃离心15分钟，小心弃去上清，mRNA沉淀此时往往看不见，用70%乙醇漂洗沉淀，12000g, 4℃离心5 分钟，小心弃去上清液，沉淀空气干燥10分钟，或真空干燥10分钟。将mRNA沉淀溶于适当体积的无RNase的双蒸水，立即用于cDNA合成（或保存在70%乙醇中并贮存于-70℃）。8． 定量：测定OD260和OD280，计算产率以及OD260/OD280的比率（同上一实验）。【注意事项与提示】1． 整个操作过程必须严格遵守无RNase操作环境规则。2． 提取的总RNA必须完整，不能被降解，这是mRNA质量的先决条件。3． 总RNA与Oligo(dT)-纤维素的比例要适当，过量的总RNA，容易造成mRNA不纯。4． RNA溶液与Oligo(dT)-纤维素结合前必须置于65℃加热5 分钟，这一步很重要，其作用（1）破坏mRNA的二级结构，特别是poly(A+)尾处的二级结构，使poly(A+)尾充分暴露，提高poly(A+)RNA回收率；（2）解离mRNA与rRNA的结合。加热后应立即插入冰上，以免由于温度的缓慢下降使mRNA又恢复其二级结构。5． 应注意mRNA不能被DNA污染，即使是1 ppm DNA污染，也可严重影响实验结果。6． mRNA制备后，可用变性琼脂糖凝胶电泳捡测其完整性和有无DNA污染。提取的mRNA应该在0.5~8.0kb之间呈现弥散状，无明显区带，但大部分的mRNA应在1-2.0kb范围内（如下图）。一般来说，经过一次纯化分离的mRNA还会有微量的rRNA残留，但一般来说不会对后续实验造成很大的影响，如果样品充足，可将经过一次纯化分离的mRNA再纯化一次，进一步提高其纯度。Lane 1, 0.24–7.5kb RNA分子量Maker;Lane 2, 老鼠肝脏总 RNA;Lane 3, 老鼠肝脏mRNA7． 为防止mRNA降解，应避免多次冻融，可将mRNA少量分装后保存。另外，如果有低温冰箱,最好在 -70℃～ -80℃保存。 也可将mRNA在70%乙醇中-70℃保存一年以上。8． 寡聚(dT)纤维素柱用后可用0.3mol/l NaOH洗净，然后用层析柱加样缓冲液平衡，并加入0.02%叠氮钠（NaN3)冰箱保存，重复使用。每次用前需用NaOH、灭菌 ddH2O、层析柱加样缓冲液依次淋洗柱床。9． 一般而言，107哺乳动物培养细胞能提取1-5μg Poly(A+)RNA，约相当于上柱总RNA量的1%-2%。【实验安排】1． 第一天：试剂的配制和所用一次性塑料制品和玻璃器皿的去RNase处理（0.1%DEPC浸泡或高温干烤）。2． 第二天：进行（一）、（二）和（三）1-6。3． 第三天：进行（三）7和变性琼脂糖凝胶电泳捡测mRNA。4． 为了避免由于保存时间过长造成的RNA降解，最好能将总RNA提取、mRNA的分离纯化、RT-PCR和cDNA文库构建实验安排在连续的时间内进行。【实验报告要求与思考题】1． mRNA的OD260和OD280值，OD260/OD280比率和计算mRNA产率；2． mRNA变性琼脂糖凝胶电泳结果；3． 为什么mRNA提取是cDNA合成成败的关键？附录：1．逆转录酶及其活性逆转录酶（reversetranscriptase）又称RNA指导的DNA聚合酶，是以RNA为模板合成DNA的酶。这种酶是1970年美国科学家特明（H.M.Temin）和巴尔的摩（D.Baltimore）分别于动物致癌RNA病毒中发现的，他们以此获得了1975年度诺贝尔生理学或医学奖。人们发现，当RNA致癌病毒，如鸟类劳氏肉瘤病毒（Rous sar-coma virus）进入宿主细胞后，其逆转录酶先催化合成与病毒RNA互补的DNA单链，继而复制出双螺旋DNA，并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色体DNA中，该整合的DNA可能潜伏数个世代不表达，等到适合的条件时被激活，才利用宿主的酶系统转录成相应的RNA，其中一部分作为病毒的遗传物质，另一部分则作为mRNA翻译成病毒特有的蛋白质。最后，这些RNA和蛋白质被组装成新的病毒粒子。在这个过程中，遗传信息流动的方向是从RNA到DNA，正好与转录过程相反，故称反转录（reversetranscription，RT）。逆转录酶在许多方面与DNA聚合酶相似，含Zn2+，以脱氧核苷三磷酸为底物，从5"到3"合成DNA，反应需要引物。目前已发现不少动物反转录病毒，近年来也发现了几种人类反转录病毒，艾滋病毒也是一种反转录病毒。一些生物公司已经提纯了逆转录酶，生产出了各自的主打产品，比如TAKARA从禽类成髓细胞瘤病毒纯化到的禽类成髓细胞病毒(AMV)逆转录酶，Invitrogen 从表达克隆化的Moloney鼠白血病病毒反转录酶基因的大肠杆菌中分离到的鼠白血病病毒(MLV)反转录酶, 以及进一步开发的更耐高温的ThermoScript，Gibco 开发的SuperScripⅡ等，可作为合成某些特定RNA的互补DNA的工具酶，也可用于DNA的序列分析和克隆重组DNA。AMV反转录酶包括两个具有若干种酶活性的多肽亚基,这些活性包括依赖于RNA的DNA合成,依赖于DNA的 DNA合成以及对DNA:RNA杂交体的RNA部分进行内切降解(RNA酶H活性)。MLV反转录酶只有单个多肽亚基,兼备依赖于RNA和依赖于DNA的DNA合成活性,但降解RNA:DNA杂交体中的RNA的能力较弱,且对热的稳定性较AMV反转录酶差。MLV反转录酶能合成较长的cDNA(如大于2-3kb)。AMV反转录酶和MLV反转录酶利用RNA模板合成cDNA时的最适pH值,最适盐浓度和最适温室各不相同,所以合成第一链时相应调整条件是非常重要。因为RT-PCR灵敏度会受cDNA合成量的影响，良好的逆转录效果非常重要。研究表明，ThermoScript比AMV的灵敏性强得多。RT-PCR产物的大小受限于逆转录酶合成cDNA的能力，尤其是克隆较大的cDNA时。同MMLV相比，SuperScripⅡ显著提高了长RT-PCR产物的产量。不管是M-MLV还是AMV，在本身的聚合酶活性之外，都具有内源RNaseH活性。RNaseH活性同聚合酶活性相互竞争RNA模板与DNA引物或cDNA延伸链间形成的杂合链，并降解RNA：DNA复合物中的RNA链。被RNaseH活性所降解的RNA模板不能再作为合成cDNA的有效底物，降低了cDNA合成的产量和长度。因此消除或大大降低逆转录酶的RNaseH活性将会大有裨益。研究表明，SuperScriptⅡ逆转录酶，RNaseH- 的MMLV逆转录酶及ThermoScript逆转录酶，RNaseH- 的 AMV，比MMLV和AMV得到更多量和更多全长的cDNA。RNaseH- 的逆转录酶同时增加了热稳定性，所以反应可以在高于正常的37-42℃的温度下进行。2．引物的设计一般遵循的原则：1）典型的引物20-24个核苷长。引物需要足够长，保证序列独特性，并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。但是太长的引物可能会与错误配对序列杂交降低了特异性，同时因为 比短序列杂交慢，从而降低了产量。2）设计5"端和中间区为G或C，且GC含量为50％~60％的引物，以增加引物的稳定性及其与目的序列杂交的稳定性。3）3"末端尽量不要富含GC。设计引物时保证在最后5个核苷中含有3个A或T。但因为3"端核苷需要同模板退火以供聚合酶催化延伸，为了避免3"末端的错误配对，所以末端尽量避免为核苷A。4）在引物对3"末端尽量避免互补序列以免形成引物二聚体，抑制扩增。如果引物序列可能产生内部二级结构会破坏引物退火稳定性，也要尽量避免。此外，目的序列上并不存在的附加序列，如限制位点和启动子序列，可以加入到引物5"端而不影响特异性。有时候，仅有有限的序列信息可供用于引物设计。比如，如果仅知道氨基酸序列，可以设计简并引物，同时使用较高的引物浓度（1μM到3μM），因为许多简并混合物中的引物不是特异性针对目的模板。为了增加特异性，可以参考密码子使用表，根据不同生物的碱基使用偏好，减少简并性。次黄嘌呤可以同所有的碱基配对，降低引物的退火温度。不要在引物的3"端使用简并碱基，因为3"端最后3个碱基的退火足以在错误位点起始PCR。

1. 防止样本降解。液氮速冻或者RNALater保存液保存2。防止RNA酶污染，可以加抑制剂3。迅速操作4。提取后尽快进行下一步实验，mRNA不宜存放于水溶液冻存。

楼上说的是错的，逆转录出来的dna是唯一的，不可能有多种可能，因为一种基因的mrna是唯一的！这位同学应该多看看密码子的知识，扯了半天都是与题目无关的。提取mrna、反转录的操作都是基因工程，但是问题在于：这句话本身就是错的！一言以蔽之，肝脏细胞不表达胰岛素基因！胰岛素基因在肝脏细胞内不转录，没有mrna生成，所以无从提取，也无从反转录！这个实验设计就是失败的。基因工程首先必须得在合适的标本下进行合适的操作。

【答案】：成功提取mRNA，最关键的问题是抑制RNA酶活性。因为mRNA呈单链状，容易受到核酸酶的攻击。异硫氰酸胍法(TriZol)原理：TRIZOL试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA，有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。[考点]总RNA中分离mRNA的原理。细胞中的总RNA包括mRNA、rRNA、tRNA以及一些小RNA(sRNA)。完整RNA的提取，是进行RNA方面的研究工作的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点，即(1)样品细胞或组织的有效破碎；(2)有效地使核蛋白复合体变性；(3)对内源RNA酶的有效抑制；(4)有效地将RNA从DNA和蛋白混合物中分离；(5)对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。但其中最关键的是抑制RNA酶活性。总RNA提取的方法有多种，主要有LiCl法、CTAB法、异硫氰酸胍法(TriZol)。

大多数真核细胞mRNA的3"端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴，寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷（OligoT）可以与之配对结合，这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上，现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT，亲和素标记磁珠（生物素和亲和素间具有高度亲和力）。实验时生物素标记的OligoT与mRNA的polyA高效杂交形成复合体，此复合体又与标有亲和素的磁珠结合。用磁性分离架就可以将这堆复合物分离出来。最后用无RNase去离子水将mRNA从复合物中洗脱下来即可。寡聚dT纤维素柱层析法的大致流程：总RNA流经寡聚dT纤维素柱时，在高盐缓冲液中，带polyA尾的mRNA被特异地结合在柱上。降低盐浓度，mRNA被洗脱。一般过两次柱后，就可得到较高纯度的mRNA。当然有些mRNA没有polyA尾巴，这种就比较难办了，我最近的实验就是在对付这种东西。如果你是拿mRNA做RT-PCR，其实一般是不必分离mRNA的，设计好引物就可以用总RNA做了。

1 细胞总RNA的提取 1）、6孔板细胞（CNE-2）汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂（Gibco公司） 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟（观察：液体变粘稠,细胞脱壁）. 2）、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中,加新开的氯仿0.2 ml,轻摇15秒. 3）、室温静置2-3分钟后,12000 rpm,15 min,4℃,离心.然后取上清无色水相（约0.6 ml）到 EP管（DEPC处理过）,加0.5 ml新开的异丙醇,室温下静置10分钟. 4）、12000 rpm,10分钟,4℃,离心.观察总RNA在管底的白色沉淀,弃去上清（小心别丢了沉淀）,75%乙醇1.0 ml洗涤（用DEPC水新配制）后,7500 rpm,5 min,4℃离心. 5）、去上清,点离,用小Tip吸干液体.气干沉淀5-10分钟,DEPC处理水20-30 ul加入,中枪打匀,55-60℃水浴10分钟溶解总RNA,测OD值. 6）、电泳. 2 从总RNA中分离mRNA（Oligotex mRNA Mini Kit,Cat.no.:70022,QIAGEN） 1）、取上述提取的总RNA若干（少于0.25 mg）到一个新的无RNase 的EP管中,用无RNase的水定容到250 ul. 2）、加入Buffer OBB 250 ul,Oligotex Suspension 15 ul.用Tip打匀或用手弹匀. 3）、70℃水浴,3分钟（裂解RNA的二级结构）. 4）、20-30℃条件下,静置10分钟（让Oligotex与mRNA结合）. 5）、高速离心2分钟,小心吸走上清（该上清要保留）,留下约50 ul的上清在原管里. 6）、用Buffer OW2 400 ul重悬含Oligotex/mRNA复合物的沉淀,然后将这些加到套有1.5 ml EP管的SPIN柱子上,高速离心1分钟. 7）、将SPIN柱子移到一个新的EP管上,加Buffer OW2 400 ul到柱子,高速离心1分钟,丢掉滤过液. 8）、将SPIN柱子移到一个新的EP管上,加20-100 ul热的（70℃）Buffer OEB到柱子上,用Tip来回吸打3-4次,高速离心1分钟. 9）、为保证最大的 mRNA产量,可再次重复第8步. 10）、电泳. RNA提取的原理就是核酸在异丙醇中的溶解度很低!其他步骤都是防止RNA降解和使RNA从细胞中溶出. 逆转录过程请看参考资料.