电泳

u2022电泳原理：电泳是电泳涂料在阴阳两极，施加于电压作用下，带电荷之涂料离子移动到阴极，并与阴极表面所产生之碱性作用形成不溶解物，沉积于工件表面。它包括四个过程：1）电解（分解）在阴极反应最初为电解反应，生成氢气及氢氧根离子OH，此反应造成阴极面形成一高碱性边界层，当阳离子与氢氧根作用成为不溶于水的物质，涂膜沉积，方程式为：H2O→OH+H2）电泳动（泳动、迁移）阳离子树脂及H+在电场作用下，向阴极移动，而阴离子向阳极移动过程。3）电沉积（析出）在被涂工件表面，阳离子树脂与阴极表面碱性作用，中和而析出不沉积物，沉积于被涂工件上。4）电渗（脱水）涂料固体与工件表面上的涂膜为半透明性的，具有多数毛细孔，水被从阴极涂膜中排渗出来，在电场作用下，引起涂膜脱水，而涂膜则吸附于工件表面，而完成整个电泳过程。u2022电泳表面处理工艺的特点：电泳漆膜具有涂层丰满、均匀、平整、光滑的优点，电泳漆膜的硬度、附着力、耐腐、冲击性能、渗透性能明显优于其它涂装工艺。

在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作用下，单位时间内移动的距离（即迁移率）为常数，是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同，或虽所带电荷相同但荷质比不同，在同一电场中电泳，经一定时间后，由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。胶体有电泳现象，证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同，它们吸附的离子不同，所以带有不同的电荷。

电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。

原理：在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作用下，单位时间内移动的距离为常数，是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同，或虽所带电荷相同但荷质比不同，在同一电场中电泳，经一定时间后，由于移动距离不同而相互分离。电泳移动规律：1、利用电泳可以确定胶体微粒的电性质，向阳极移动的胶粒带负电荷，向阴极移动的胶粒带正电荷。2、一般来讲，金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子，带正电荷；非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子，带负电荷。3、在电泳实验中，氢氧化铁胶体微粒向阴极移动，三硫化二砷胶体微粒向阳极移动。利用电泳可以分离带不同电荷的溶胶。扩展资料主要应用方向：1、在医院临床检验中，利用电泳技术分析血清中的酶及同工酶，可以判定血细胞的正常与异常；；测定体液中可能存在微生物、原虫的特异性抗原成分，在抗原成分分离的基础上，寻找所需的单克隆抗体等等。2、在陶瓷生产中，借助它来除去黏土中所混杂的氧化铁杂质。由于黏土微粒带负电荷而向正极移动，氧化铁微粒带正电荷而向负极移动。因此，在正极附近就可收集到纯净的黏土。3、电泳在农业领域用途非常广泛，它可以用于杂种优势的预测，杂种后代的鉴定，不同品种的区别，亲缘关系的分析，雄性不育系的鉴定，遗传基因的定位，植物抗性的研究等许多方面。参考资料来源：百度百科-电泳

电泳是金属表面有另外一种树脂离子沉积在表面的过程。溶液中带电粒子（离子）在电场中移动的现象。电镀是利用电解原理在某些金属表面上镀上一层其它金属或合金的过程。 电泳是金属表面有另外一种树脂离子沉积在表面的过程。溶液中带电粒子（离子）在电场中移动的现象。电镀是利用电解原理在某些金属表面上镀上一层其它金属或合金的过程电泳是金属表面有另外一种树脂离子沉积在表面的过程。溶液中带电粒子（离子）在电场中移动的现象。电镀是利用电解原理在某些金属表面上镀上一层其它金属或合金的过程。 一、功能 电镀是利用电解作用使金属或其它材料制件的表面附着一层金属膜的工艺，从而起到防止金属氧化(如锈蚀)，提高耐磨性、导电性、反光性、抗腐蚀性(硫酸铜等)及增进美观等作用。电镀有金属质感。 而电泳只是高仿电镀，性能，颜色还是有一定的差距。电泳很难做出电镀的金属质感。u2002但是：在漆膜均匀度方面，电泳漆涂层高低电位的u2002膜厚均匀，而电镀层的高低电位的镀层就不均匀了。 电泳在漆膜覆盖上也更有优势，电泳涂层能完全覆盖隐蔽处，如内壁及凹陷处；而电镀一般不能深入隐蔽处。 电泳只能作用于可导电的金属表面；电镀除了金属表面，还可以电镀在经过特殊处理的塑胶上面。二、成本 电镀是镀的一层金属，而电泳涂的是一层树脂，电泳相比电镀更加简单、操作方便。所以从成本上来说相差甚远，电泳比电镀要便宜很多。三、环保 电泳漆是以水为溶剂，废弃物少，对环境污染少。 电镀废水含铬、镉、镍、银等重金属离子和氰化物等，容易产生污染。

　　定义：　　电泳是指带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。　　电镀就是利用电解原理在某些金属表面上镀上一薄层其它金属或合金的过程，是利用电解作用使金属或其它材料制件的表面附着一层金属膜的工艺从而起到防止金属氧化（如锈蚀），提高耐磨性、导电性、反光性、抗腐蚀性(硫酸铜等）及增进美观等作用。、　　补充：　　在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作用下，单位时间内移动的距离（即迁移率）为常数，是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同，或虽所带电荷相同但荷质比不同，在同一电场中电泳，经一定时间后，由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。　　在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。胶体有电泳现象，证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同，它们吸附的离子不同，所以带有不同的电荷。　　电镀时，镀层金属或其他不溶性材料做阳极，待镀的工件做阴极，镀层金属的阳离子在待镀工件表面被还原形成镀层。为排除其它阳离子的干扰，且使镀层均匀、牢固，需用含镀层金属阳离子的溶液做电镀液，以保持镀层金属阳离子的浓度不变。电镀的目的是在基材上镀上金属镀层，改变基材表面性质或尺寸。电镀能增强金属的抗腐蚀性(镀层金属多采用耐腐蚀的金属)、增加硬度、防止磨耗、提高导电性、光滑性、耐热性和表面美观。

这是百度百科里的解释：电镀(Electroplating)就是利用电解原理在某些金属表面上镀上一薄层其它金属或合金的过程，是利用电解作用使金属或其它材料制件的表面附着一层金属膜的工艺从而起到防止腐蚀,提高耐磨性、导电性、反光性及增进美观等作用。这是链接：http://baike.baidu.com/view/101914.htm电泳：带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳(electrophoresis, EP)。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。1937 年瑞典学者 A.W.K.蒂塞利乌斯设计制造了移动界面电泳仪 ，分离了马血清白蛋白的3种球蛋白，创建了电泳技术。这是链接：http://baike.baidu.com/view/25110.htm说白了，电镀是在产品表面上覆盖上金属，电泳是覆盖上漆；电泳俗称镀漆，是高分子树脂的沉积。电镀是金属离子沉积的过程。对于他们的区别，电泳漆层高低电位厚薄均匀，而电镀高低电位处镀层厚薄差距大 ；电泳漆层能完全覆盖隐蔽处，而电镀不能深入隐蔽处

电镀就是利用电解原理在某些金属表面上镀上一薄层其它金属或合金的过程。 电泳:溶液中带电粒子（离子）在电场中移动的现象 电镀： 电镀时，镀层金属做阳极，被氧化成阳离子进入电镀液；待镀的金属制品做阴极，镀层金属的阳离子在金属表面被还原形成镀层。为排除其它阳离子的干扰，且使镀层均匀、牢固，需用含镀层金属阳离子的溶液做电镀液，以保持镀层金属阳离子的浓度不变。电镀的目的是在基材上镀上金属镀层(deposit),改变基材表面性质或尺寸.电镀能增强金属的抗腐蚀性(镀层金属多采用耐腐蚀的金属)、增加硬度、防止磨耗、提高导电性、润滑性、耐热性、和表面美观。 电泳： 利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。1937 年瑞典学者 A.W.K.蒂塞利乌斯设计制造了移动界面电泳仪 ，分离了马血清白蛋白的3种球蛋白，创建了电泳技术。 在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作用下，单位时间内移动的距离（即迁移率）为常数，是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同，或虽所带电荷相同但荷质比不同，在同一电场中电泳，经一定时间后，由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。

电泳与电镀原理不同、作用不同。1、原理不同电镀是利用电解原理在某些金属表面上镀上一薄层其它金属或合金的过程。电泳利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术。2、作用不同电镀可提高耐磨性、导电性、反光性、抗腐蚀性（硫酸铜等）及增进美观等作用。电泳用于小分子物质的分离分析。电镀是利用电解作用使金属或其它材料制件的表面附着一层金属膜的工艺从而起到防止金属氧化（如锈蚀）。电泳是带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动。扩展资料：电泳漆膜特点：1、采用水溶性涂料，以水为溶解介质，节省了大量有机溶剂，大大降低了大气污染和环境危害，安全卫生，同时避免了火灾的隐患。2、涂装效率高，涂料损失小，涂料的利用率可达90%～95%。3、涂膜厚度均匀，附着力强，涂装质量好，工件各个部位如内层、凹陷、焊缝等处都能获得均匀、平滑的漆膜，解决了其他涂装方法对复 杂形状工件的涂装难题。4、施工可实现自动化连续生产，大大提高劳动效率。5、设备复杂，投资费用高，耗电量大，其烘干固化要求的温度较高，涂料、涂装的管理复杂，施工条件严格，并需进行废水处理。参考资料：百度百科-电镀百度百科-电泳

PCR产物电泳条带为什么被“劈开”了说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题（特异性很差）.如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer3去试试（目前最好的免费引物设计）.如果还是不行,把序列发给我,我帮你设计（我有专业软件,ABI primer express 3 和 Invitrogen Vector NTI 10)通常是非特异扩增过多引起，提高退火温度试试PCR产物放置过久考虑产物降解；如果是PCR后及时上样，考虑引物特异性较差或者模板不纯（包括降解以及掺有别的DNA序列）如果用PCR产物做模板的话，量太大也会有这个现象。胶没煮好也会这样

DNA提取产物经琼脂糖凝胶电泳条带有两条是怎么回事“从头拖到尾,另外一对引物就能做出来”说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题（特异性很差）.如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer3去试试（目前最好的免费引物设计）.如果还是不行,把序列发给我,我帮你设计（我有专业软件,ABI primer express 3 和 Invitrogen Vector NTI 10)

说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题（特异性很差）.如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer3去试试（目前最好的免费引物设计）.如果还是不行,把序列发给我,我帮你设计（我有专业软件,ABI primer express 3 和 Invitrogen Vector NTI 10)通常是非特异扩增过多引起，提高退火温度试试PCR产物放置过久考虑产物降解；如果是PCR后及时上样，考虑引物特异性较差或者模板不纯（包括降解以及掺有别的DNA序列）如果用PCR产物做模板的话，量太大也会有这个现象。胶没煮好也会这样

You can run a DNA agarose gel at 120 V,but the current maybe should be higher than 2 mA with a regular size gel.It will be different if you are running very small gel.You may check whether the running buffer is correctly made.The low current indicates you have low conductive buffer.

第一种好。原电池原理锌先腐蚀

1.你的loading buffer 是不是有沉淀2.胶如果是自己做的，看做胶的试剂以及操作有没有问题3.电泳的时候，胶有没放平

跑westernblot时电泳时的条带呈斜行原因很多主要可能是电泳凝胶配制时未搅拌均匀，造成条带未能直线跑完电泳凝胶中混入气泡，造成条带被挤压倾斜也可能是样品缓冲液有干扰，造成条带迁移率不统一另外上样量过大，被其他泳道挤压也有可能

跑westernblot时电泳时的条带呈斜行原因很多主要可能是电泳凝胶配制时未搅拌均匀，造成条带未能直线跑完电泳凝胶中混入气泡，造成条带被挤压倾斜也可能是样品缓冲液有干扰，造成条带迁移率不统一另外上样量过大，被其他泳道挤压也有可能

降低PH值最好的法就是换水或者加入新水。一般鱼类安全生存的氢离子浓度范围是316.2-0.316那摩/升（PH值6.5—9.5），最佳值为7—8.5.千万不要加石灰，不懂就不要乱讲，生石灰是提高PH值的。酸性物质肯定是降低PH值的。每平方米水面泼洒食醋0.5千克或者冰醋酸10毫升，应该就可以降下来。同时注意新注入的水，PH值不要过高，清淤，去除水中的藻类物质。每亩水深1米使用沸石粉（200目）50kg，可去除水中氨氮95%，净化水质，缓解转水现象（李松勋1993年）。当虾池中氨氮总量超过允许含量一倍时，即达到1.2mg/L，使用沸石16mg/L处理后，可使池水氨氮含量降至安全浓度。（孙国平（1997年），用沸石作水质改良剂时，一般海水用量为80pmm，淡水用量为15pmm。（胡文平1998年）

任何产品都可以做MSDS，只要客户有要求都需要做

这个问题有点意思电着：主要是阴极电泳涂装，黑色，一般用于防腐保护电泳：有阴极电泳也有阳极电泳，多色，主要用于表面装饰电镀：跟电泳不同的地方就是电镀的镀层是金属，而电泳的是有机高分子聚合物COATING;翻译就是涂层，覆盖层，主要是烤漆类，喷涂，涉及的主要是有机高分子。工艺的区别就是前三者为湿制程，COATING为干制程详情百度川海电泳可以找寻答案

电泳现象 胶粒在外加电场作用下，能在分解剂里向阳极或阴极作定向移动，这种现象叫电泳。 说明： （1）电泳现象表明胶粒带电荷，但胶体都是电中性的。 （2）一般来说，金属氢氧化物、金属氧化物的胶体微粒吸附阳离子，带正电荷，如Fe(OH)3胶体和Al(OH)3胶体微粒。非金属氧化物、金属硫化物胶体微粒吸附阴离子，带负电荷，如As2S3胶体、H2SiO3胶体的微粒。当然，胶体中胶粒带电的电荷种类可能与其他因素有关。 （3）同种胶体的胶粒带相同的电荷。 （4）固溶胶不发生电泳现象。凡是胶粒带电荷的液溶胶，通常都可发生电泳现象。气溶胶在高压电的条件也能发生电泳现象。 电泳——在外加电场的作用下，胶体的微粒在分散剂里向阴极（或阳极）作定向移动的现象。原因：胶粒带有电荷（胶粒表面积很大，吸附能力很强，能选择性地吸附溶液中的离子而带有电荷）。布朗运动悬浮在气体或液体中的固态微粒受到气体或液体分子的撞击作永不停止的,无规则的运动,叫做布朗运动.

SDS-PAGE：蛋白质的相对分子质量决定了SDS-蛋白复合物在凝胶电泳中的迁移率，聚丙烯酰胺凝胶中的去垢剂SDS带有大量的负电荷，与之相比，蛋白质所带电荷量可忽略不计。因此，蛋白质在SDS凝胶电场中的运动速度和距离完全取决于相对分子质量（速度与相对分子质量成反比）而不受其所带电荷的影响，不同相对分子质量的蛋白质将位于凝胶的不同区段而得到分离。

你说的SDS电泳实际上是SDS-PAGE，SDS只是蛋白变性剂，而凝胶是聚丙烯酰胺。SDS-PAGE和琼脂糖凝胶电泳使用的是完全不同的凝胶材料。SDS－PAGE采用的是聚丙烯酰胺，它是靠化学反应形成的凝胶。而琼脂糖凝胶则是物理反应（加热融化，冷却凝固）。通常情况下，我们采用聚丙烯酰胺凝胶电泳来分离蛋白质，而琼脂糖凝胶电泳来分离核酸。当然，这并不绝对，如果要用来分辨碱基数相近的核酸片段时，我们也会采用聚丙烯酰胺凝胶来进行电泳，如DNA测序反应中的变性聚丙烯凝胶电泳。至于为啥琼脂糖凝胶不用两种浓度不同的胶，实际上是和SDS-PAGE与琼脂糖凝胶电泳点样孔方向有关。SDS－PAGE是竖胶，电泳点样孔与电泳方向平行，点样的时候肯定会造成样品分布不均。所以需要一个高浓度的胶来预电泳保证在分离胶的时候所有蛋白处于同一水平。而琼脂糖凝胶电泳时，胶是横着的，点样孔方向与胶的方向垂直，所以加样的时候不会导致样品电泳时不在同一水平。故不需要两种不用浓度的凝胶。

如果你是做测量蛋白质相对分子质量大小的话： 聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高分辨率,用它分离、检测蛋白质混合样品,主要是根据各蛋白质组分电泳迁移率的不同.这种差异就蛋白质分子本身而言,主要与其所带电荷的差异以及分子大小不同有关.如果将电荷差异这一因素去除或减小到可以忽略不计的程度,分子在凝胶上迁移率的大小则完全取决于相对分子质量的大小. 十二烷基硫酸钠（SDS）是一种阴离子表面活性剂,当其与蛋白质混合,质量比达到1.4:1时,SDS能破坏蛋白质分子间以及其他物质分子间的非共价键使蛋白质的构象发生变化继而使蛋白质变性解离成单一亚基,从而降低或消除了各种蛋白质分子间的天然电荷差异,形成SDS-蛋白质负离子,这样就使电泳迁移率只取决于分子大小这一因素.据经验得知,当蛋白质的相对分子质量在17000-165000之间时,蛋白质-SDS复合物的电泳迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系,于是根据标准蛋白质相对分子质量的对数和迁移率所作的标准曲线,可求得未知蛋白质的相对分子质量.

你说的SDS电泳实际上是SDS-PAGE，SDS只是蛋白变性剂，而凝胶是聚丙烯酰胺。SDS-PAGE和琼脂糖凝胶电泳使用的是完全不同的凝胶材料。SDS－PAGE采用的是聚丙烯酰胺，它是靠化学反应形成的凝胶。而琼脂糖凝胶则是物理反应（加热融化，冷却凝固）。通常情况下，我们采用聚丙烯酰胺凝胶电泳来分离蛋白质，而琼脂糖凝胶电泳来分离核酸。当然，这并不绝对，如果要用来分辨碱基数相近的核酸片段时，我们也会采用聚丙烯酰胺凝胶来进行电泳，如DNA测序反应中的变性聚丙烯凝胶电泳。至于为啥琼脂糖凝胶不用两种浓度不同的胶，实际上是和SDS-PAGE与琼脂糖凝胶电泳点样孔方向有关。SDS－PAGE是竖胶，电泳点样孔与电泳方向平行，点样的时候肯定会造成样品分布不均。所以需要一个高浓度的胶来预电泳保证在分离胶的时候所有蛋白处于同一水平。而琼脂糖凝胶电泳时，胶是横着的，点样孔方向与胶的方向垂直，所以加样的时候不会导致样品电泳时不在同一水平。故不需要两种不用浓度的凝胶。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠)，SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与1.4g去污剂结合。当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。生物帮上面有去看看吧， http://www.bio1000.com/reseach/physiology/ 微生物生理学科研进展,植物生理学科研进展,动物生理学科研进展,人体生理学科研进展 。

sds电泳里的试剂分别是什么作用在sds电泳聚丙烯酰胺的作用：丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关；制胶缓冲液：浓缩胶选择ph6.7,分离胶选择ph8.9,选择tris－hcl系统,具体作用后面介绍；temed与ap：促凝作用,加速聚丙烯酰胺的凝固；十二烷基硫酸钠（sds）：阳离子去污剂,作用有四：去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠.

你好，我回答这个问题。选择电源的确是一件很难的事情。200V电泳电源指的是输出电压200V，其用途：《400（台兴）- 101（智能）- 3780（电源）》适用于汽车、建筑材料、航空、家具、电器等各种行业金属材料的阴阳极电泳涂漆。 特点为： ·变压器采用双三相桥式并联，十二相脉波整流，避免了五次、七次低次谐波对电网的干扰，同时十二相整流输出波形更好，功率因数更高。 ·根据电泳工艺，直流输出极加装滤波电抗器和电容，使纹波系数指标达到涂装工艺要求，低纹波的电压能够使金属表面漆膜结构致密、厚度均匀、表面平滑且附着力强。 ·控制模式采用稳压限流可自行设定。希望可以帮到您。

聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质。在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中，凝胶的制作是分层进行的，因此凝胶不仅有分子筛效应，还具有浓缩效应。和琼脂糖凝胶相比，聚丙烯酰胺凝胶难于制备和处理。它们的分离范围较窄。但是它们也有突出的优点，由于是不连续的pH 梯度，故样品被压缩成一条狭窄的区带，因而增强了分离效果，提高电泳分辨率。尤其对小DNA 片段的分析(5～500bp)。在这一范围内，仅差1bp 的DNA 分子也能清晰地分开。其次，DNA 纯度很高。从聚丙烯酰胺凝胶中得到的DNA 纯度很高以致于下步操作不用任何处理。还有，它的负载容量高。该胶的标准加样槽中可以加入高达10mL 的DNA 样品，而不影响电泳分辨率。多应用于分离纯化和鉴定大小为5～500bp 的DNA 片段。聚丙烯酰胺凝胶电泳有连续与不连续体系两种，前者指在整个电泳体系中的缓冲液pH 值和凝胶孔径大小相同，主要用于核酸分析。后者主要用于蛋白质样品的分离，它除了电泳槽中的缓冲体系和pH 值与凝胶中不同外，凝胶本身也由缓冲体系、pH 值和凝胶孔径不同的两种凝胶堆积而成。 生物帮上面有这方面的详细内容，分子生物学缓冲液 http://product.bio1000.com/100250/

电泳涂装是将具有导电性的被涂物浸渍在装满水稀释的、浓度比较低的电泳涂料槽中作为阳极（或阴极），在槽中另设置与其相对应的阴极（或阳极），在两极间通一定时间的直流电，在被涂物上析出均一、水不溶涂膜的一种涂装方法。 粉末涂料静电喷涂技术采用的是粉末―空气混合物。在粉末进料斗中设置有一个小型的流化床以形成粉末―空气混合物。在某些情况下，进料斗的振动有助于防止粉末在进入输送线前发生堵塞或聚集。粉末通过一根软管被输送至喷枪中，喷枪的喷嘴由于高压直流电的输入而形成带电电极。其区别在于静电喷漆具有如下特点：由于静电效应，使所喷的漆膜均匀丰满，附着力强，装饰性好。高生产力，多喷枪同时使用可实现半自动、全自动流水作业。与传统的压缩空气喷漆相比，生产力可提高数倍。由于静电吸附作用，减少漆雾污染，从而改善了劳动卫生条件。静电喷漆由于提高了油漆利用率，降低成本。静电喷漆由于漆雾带电绝缘，因此对于复杂工件的凹孔不易涂复，而凸尖部分漆膜分布不均匀，操作时应注意工艺调整或手工修补。电泳漆虽因使用的电泳涂料种类、电泳施工工艺条件不同，电泳结果会有不同。但一般地说具有下述特点： （1）电泳漆获得的漆膜质量大致与通电量成正比，因此可借增减通电量来调整涂膜沉积量； （2）电泳漆使形状复杂的被涂覆物之锐边或隅角部分、点焊焊缝等缝隙中，箱形体的内外表面都可获得比较均匀的漆膜，防腐性能获得显著改善； （3）电泳漆膜烘干前含水率已很低，它不溶于水，不流动，不易产生垂滴、流痕、滞痕等漆膜弊病；也不会在烘干中产生象浸涂漆膜烘干时（箱形件或管件内部）经常发生的溶剂气洗现象；还可显著缩短烘干前使水分蒸发的预干时间； （4）由于带负电的高分子粒子在电场作用下定向沉积，因而电泳漆膜的耐水性能很好；附着力也比采用其他施工方法的高； （5）电泳漆所用漆液浓度低、粘度小，故因浸渍作用粘附于被涂物而带出的漆较少，特别是超滤技术应用于电泳漆后，漆的利用率甚至可高达100%； （6）与一般水性漆施工相同，电泳漆克服了发生火灾及苯中毒的问题。

Olivares，Smith和Henion等分别在1987-1988年提出毛细管电泳-质谱联用（CE-MS）技术，在CE中，紫外检测器由于通过样品的光程较短导致灵敏度较低，特别对一些紫外吸收较弱的化合物的检测。近年由于大气压电离（API）、电喷雾电离（ESI）及新型质谱仪的快速扫描等新技术的出现，足以满足CE窄峰形的特点，使得CE-MS，CE-MS-MS均得到快速发展，并正在成为实验室的重要常规分析方法之一。质谱检测器有如下特点：1）与紫外，激光诱导荧光和电化学检测器相比，更是一种通用型检测器；2）由于质谱的选择性和专一性，弥补了样品迁移时间变化的不足；3）质谱检测的灵敏度优于紫外分光光度法；4）质谱在检出峰的同时还能给出分子量和结构信息；5）某些质谱技术可以给出多电荷离子，对分析大分子如糖，蛋白质等与CE联用更有利。CE的许多模式，如CZE，MEKC，CITP，CGE和ACE以及CEC等都能与质谱检测器成功地连接，其中应用较多的仍是CZE-MS。MEKC由于添加表面活性剂形成的胶束会抑制样品离子的信号，所以MEKC-MS使用较少。与CE相连的MS最常用的电离方式是ESI，可以直接把样品分子从液相转移到气相，而且可以测定分子量较大的样品。与CE相连的质谱仪主要有三元四极（QQQ）质谱仪，离子阱（TTT）质谱仪，傅立叶转换离子回旋加速器共振（FT-ICQ）质谱仪和飞行时间（TOF）质谱仪等，前两者较为常用。CE-MS常用的接口有无套管接口，液体接合接口和同轴套管流体接口等三种，后两种接口均在毛细管流出部分引入补充流体，以维持一个稳定的电喷雾流。CE-MS所使用的缓冲液最好是易挥发、低浓度，可获得较好的离子流响应。与质谱相连的CE中常使用加入较高含量的有机溶剂（例如甲醇、乙睛）的缓冲液或者使用非水毛细管电泳，有利于离子喷雾过程，可以增进检测的灵敏度。天然植物药各组分之间以及药物与其代谢产物之间往往结构比较相似，用CE-MS无论对分离及鉴定都显示了优势。Henion等用同轴套管流体接口，全扫描质谱方式分离了8种合成的异哇琳生物碱，对威氏黄柏（Phenllodendron wilsonii）树皮中的8种组分进行了分离并鉴定了其中的6种。Unge等用同样接口将卢竹碱等巧种叫垛类生物碱和生物胺基线分离。此外，离子喷雾（Ionspray，ISP），大气压化学电离（APCI）等也被应用在CE－MS中。

1.紫外检测器(UV) UV检测器集中在提高灵敏度，如采用平面积分检测池，这种设计可使检测光路增加到1cm[26]。也有用光散射二极管(LEDS)作光源，其线性范围和信噪比优于汞灯。总体来说进展不大。 2.激光诱导荧光检测[LIF] LIF是CE最灵敏的检测器之一，极大地拓展了CE的应用，DNA测序就须用LIF，单细胞和单分子检测也离不开LIF。LIF不但提高了灵敏度，也可增加选择性，缺点在于被测物须用荧光试剂标记成染色。利用CE-LIF技术可检出染色的单个DNA分子，向癌症的早期诊断及临床酶和免疫学检测等方向进行。CE/LIF向三个方向发展：在原有氦—镉激光器(325nm)和氩离子激光器(488nm)之外，发展价廉、长波长的二极管激光器；发展更多的荧光标记试剂来扩展应用面；开展更多的应用研究。CE／I‘IF和微透析结合可测定脑中神经肽。采用波长分辨荧光检测器可提供有关蛋白和DNA序列的一些结构和动态信息[27]。一些适用于二极管激光器的荧光标记试剂如CY—5等，正在不断开发和应用。 3.CE/MS联用 将现在最有力的分离手段CE和能提供组分结构信息的质谱联用，弥补了CE定性鉴定的不足，故发展特别快。CE/MS联用主要在两方面发展：一是各种CE模式和MS联用，二是CE和各种MS联用。关键是解决接口装置。成功地应用到CE/MS接口中的离子化技术有电喷雾(ESI)、大气压化学电离(APCI)、离子喷雾(ISP)、连续流快原子轰击(CF-FAB)、基体辅助激光解吸离子化(MALDI)、等离子体解析(PD)、音波喷雾离子化(SSI)等。六种CE模式均已和MS联甩。最早报道CE/MS联用是采用单级四极杆质谱，现已发展到三级四极质谱、离子阱质谱、时间飞行质谱(TOF/MS)、电感锅台等离子体质P谱(ICP/MS)、磁质谱和傅里叶变换离子回旋共振质谱(FTICR／MS)等。CE/MS联用特别适合于复杂生物体系的分离鉴定。因所需样品少，目前大部分工作集中在基因工程产品和蛋白样品，如用CIEF-ESI-MS监测蛋白的去折迭过程[28]、各种方法联用综合评价基因工程药物—促红细胞生成素(EPO)[29]等。CE-ICP-MS进行元素分析[30]、联接CE-TOF-MS的新的激光蒸发离子化接口[31]以及用CE-FTICR-MS成功地分离和鉴定单个红细胞中血红蛋白的α和β链等，表明CE/MS联用已成为CE研究中的热点，CE/MS联用在中药复杂体系分离分析中将起重要作用。 4.电化学检测器（EC） EC可避免光学类检测器遇到的光程太短的问题，故和LIF同为CE中灵敏度最高的检测器。报道最多的是电化学伏安检测器，常用碳纤维微电极进行单细胞极微量神经递质(如多巴胺等)的测定．可用脉冲伏安法测定糖、糖肽及金属离子[33]，也可用循环伏安法，另一类常用的EC为电导检测器，Li＋的检测限达10-7mol/L(10-15mol)。 5.化学发光检测器(CL) CL具有结构简单、灵敏度高的特点，近年来引起重视。用CE—CL检测血红蛋白，其检测限比CE—UV降低约4个数量级[34]。应用最多的仍是鲁米那(luminol)体系，因该体系对多数待测物如一些金属离子、氨基酸及其衍生物的检测灵敏度很高，且反应在水相进行．如Co（Ⅱ）的检测限可达20zmol(5×10-13mol)[35]，用间接CL法可测定100——400fnmol未标记的氨基酸，线性范围达2个数量级。电致化学发光(ECL)也已成功地用作CE检测[36]。鲁米那等发光标记物在蛋白及基因的CE—CL检测中可能有很大的潜力，预计将会得到进一步发展。 6.其它检测器 采用激光作激励源的除LIF外，还有激光热透镜检测、激光光热检测和激光拉曼检测等。普通荧光检测器研究集中在开发新的荧光染料，以提高灵敏度。同位素检测器具有高选择性和高灵敏度〔可达10-9加mol/L〕，但测定时需经同位素标记步骤，故应用受到限制。 总之，检测器是CE中具有挑战性的研究工作。CE/MS联用是最有应用价值的检测器，但价格昂贵，不易推广。发展新型检测器、提高UV等检测器灵敏度，以及发展CE和其它分离方法、检测方法的联用是CE研究重点之一。

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【答案】：BpH6.5TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳，主要用于HbH和HbBarts的检出。HbH等电点为5.6，在pH6.5TEB缓冲液中电泳时泳向阳极，HbBarts则在点样点不动，而其余的血红蛋白都向阴极移动。

【答案】：E根据考试指导所给参考值，正常血红蛋白电泳区带中的HbA所占比例为>95％。

目录 1 拼音 2 英文参考 3 概述 4 血红蛋白电泳的医学检查 4.1 检查名称 4.2 分类 4.3 取材 4.4 血红蛋白电泳的测定原理 4.5 试剂 4.5.1 微量血红蛋白电电泳： 4.5.2 醋酸纤维膜电泳染色比色法： 4.6 操作方法 4.6.1 微量血红蛋白电电泳： 4.6.2 醋酸纤维素膜电泳染色比色法： 4.6.3 蜡酸纤维薄膜电泳直接比色法 4.7 正常值 4.8 化验结果临床意义 4.9 相关疾病 1 拼音 xuè hóng dàn bái diàn yǒng 2 英文参考 HE hemoglobin electrophoresis 3 概述 各种血红蛋白具有不同的等电点，在一定pH值的缓冲液中可带不同电荷。在堿性缓冲液中带负电荷，反之带正电。在一定的电场中带有不同电荷的Hb分子可分别向正极或负极移动，其移动速度随Hb分子所带电荷的强弱而不同，结果形成各种区带——电泳图谱。从电泳图谱中可初步鉴别出各种异常血红蛋白，经光电比色或扫描的方法求其含量。 4 血红蛋白电泳的医学检查 4.1 检查名称 血红蛋白电泳 4.2 分类 临床血液检查 > 红细胞 4.3 取材 血液 4.4 血红蛋白电泳的测定原理 （1）微量血红蛋白电电泳：血红蛋白中的各组分由于其分子表面所带电荷性质与数量不同而等电点各异。在不同pH的电场中，因其所带电荷差异而泳动速度不同。由此可将血红蛋白的各组份分开。异常血红蛋白分子如果有电荷的改变，则会在正常电泳图形的其他部位出现异常区带，以达到分离鉴定的目的。 在电泳法中，因所用支持物不同，有纸上电泳、琼脂电泳、淀粉胶电泳、淀粉板电泳、醋酸纤维素膜电泳等。所用的电泳缓冲液有pH8.6或8.9的巴比妥缓冲液，pH9.1、9.0、8.9及8.5的TEB缓冲液。pH16.8和7.0的磷酸缓冲液等。 目前临床实验室首选的是醋酸纤维素膜堿性电泳。该方法操作简易、电泳时间短，分辨率高，常用于异常血红蛋白的筛选。必要时再用pH6.5或pH6～6.2缓冲液的酸性电泳进一步进行异常血红蛋白的鉴别。 （2）异常肽链鉴定（尿素解离法）：将巯基乙醇与尿素加入血红蛋白溶液后，可使血红蛋白分子中二硫键还原，空间结构被破坏，珠蛋白被裂解为肽链亚单位。不同肽链的等电点不同，迁移率各异，可用电泳将肽链分开。异常血红蛋白的异常肽链也可用此法分开，并根据其位置判断属何种异常。 4.5 试剂 4.5.1 （1）微量血红蛋白电电泳： ①TEB缓冲液（pH8.5，浸膜用）： 三羟甲基氨基甲烷 （Tris） 10.2g EDTA 0.6g 硼酸（boric acid） 3.2g 蒸馏水 加至1000ml ②BB缓冲液（电泳槽用）： 硼砂 6.87g 硼酸 5.56g 蒸馏水 加至1000ml ③血红蛋白溶液：按前法制备的血红蛋白溶液稀释成30～50g/L。 ④丽春红染液： 丽春红S染料 1.8g 三氯醋酸 26.8g 磺柳酸 26.8g 蒸馏水 加至1000ml 此为贮存液。最好用安瓿分装，每支2ml。用前按每毫升贮存液加蒸馏水19ml稀释。 ⑤脱色液3%醋酸溶液。 ⑥透明液： 无水乙醇 70ml 冰醋酸 30ml 4.5.2 （2）醋酸纤维膜电泳染色比色法： ①TEB缓冲液及BB缓冲液同微量血红蛋白电电泳。 ②染色液： 氨基黑10B 0.5g 甲醇 50ml 冰醋酸 10ml 蒸馏水 40ml 溶解后贮存于棕色瓶内。 ③漂洗液： 乙醇（或甲醇） 45ml 冰醋酸 5ml 蒸馏水 50ml ④浸出液 NaOH 0.4mol/L。 （3）异常肽链鉴定（尿素解离法）： ①解离液： 尿素5.4g β巯基乙醇 2.0ml TEB缓冲液（血红蛋白电电泳用，pH8.5）加至10ml 置于冰箱备用。 ②浸膜液： 尿素 48g Tris 1.14g EDTANa2 0.12g 硼酸 0.32g 蒸馏水 加至100ml ③电泳缓冲液（同血红蛋白电电泳BB缓冲液）。 ④丽春红染液（同血红蛋白电电泳）。 ⑤冼脱液（同血红蛋白电电泳）。 4.6 操作方法 4.6.1 （1）微量血红蛋白电电泳： ①浸膜：将醋酸纤维素膜漂浮于TEB缓冲液表面，待其均匀浸透沉下后，至少20min才可使用。这样可防止产生气泡。 ②点样：取出醋酸纤维薄膜用滤纸吸去多余的水份。用微量吸管吸取血红蛋白溶液置于多标本加样器的凹型槽内,以多标本加样器蘸取血红蛋白液，点样于醋酸纤维素膜无光泽面。距阴极端1.5～2cm处，点样量约3～5μl同时平行地点上正常血红蛋白溶液作对照。 ③电泳：在微型电泳槽两侧缓冲液槽内分别加入等量的BB缓冲液，以二层滤纸做盐桥搭在醋酸纤维薄膜支架上。将膜无光泽面向下，点样端接负极，平衡5min。接通电源。电压180V，电流量约为0.2mA/cm膜宽，电泳时间20～30min。槽中缓冲液可在倒换电极后再用1次。 ④染色：电泳后的薄膜放在丽春红染色液中染色10min左右取出，用3%醋酸漂洗数次，至背景呈白色，阴干。 ⑤透明：将醋酸纤维素膜置透明液中浸湿，贴于洁净玻璃板上，用玻棒赶去二者之间的气泡。于一层析缸内倒少量冰醋酸，将玻璃板反盖在层析缸上（有薄膜面向内）。以挥发的冰醋酸熏10～20min，待膜透明即可取下。 4.6.2 （2）醋酸纤维素膜电泳染色比色法： ①将TEB缓冲液浸泡过的4cm×6cm的醋酸纤维素膜取出，用滤纸吸干多余水分。于无光泽面距阴极端1.5cm处，用血红蛋白吸管直线状均匀整齐地滴加50g/L Hb溶液约5μl，待血红蛋白液渗入膜内后，将膜翻转置电泳槽支持板的滤纸桥上。 ②电泳：电压180V,时间30～40min，以Hb各区带完全分离为准。电泳后交换电极，电泳缓冲液可多次使用。 ③染色：将膜浸入染色液中，冬天需染2h,夏天或将染缸置25～30℃．可只染30min左右。注意如染色不透（如时间太短或血红蛋白溶液过浓），或电压过高使HbA带过于集中，易致色带剥脱，均影响定量的准确性。染毕用漂洗液洗数次，至背景漂净为止。 ④定量：将漂净的膜取出，分别剪下各区带，及相当于HbA2大小的对照区带，各自放在相应的试管中。于HbA管中加浸出液10ml，其余各管加浸出液2ml，浸泡20min，时时振摇。使色带完全洗脱（注意在气温较高时，洗脱时间不可过长，否则洗脱液蓝色减退，并逐步变为紫红色）。将洗脱液混匀，用721分光光度计，波长620nm，以空白调零，测各管吸光度。 ⑤计算：同直接比色法。 4.6.3 蜡酸纤维薄膜电泳直接比色法 试剂：同醋酸纤维素膜微量血红蛋白电电泳。 操作： （1）将醋酸纤维素膜作1/3切开（4cm×8cm）漫于TEB缓冲液中，10min以上。 （2）取出醋酸纤维素膜用滤纸吸去多余的水份。以Hb吸管吸取100g/L溶血液10μl均匀涂于玻璃推片下缘，在距薄膜阴极端1.5～2.0cm处于无光泽面点样。每个标本同时做两份。 （3）电泳：缓冲液同微量血红蛋白电电泳。电压180V，时间40min～1h。（以各区带明显分开为宣）电泳后交换电极，缓冲液可反复使用。 （4）洗脱与定量 分别剪下HbA,HbA2和相当于HbA2大小的对照区带。如有异常Hb区带（HbX）也同时剪下，各自放在相应的试管中。于HbA管中加TEB缓冲液10ml，其余各管加TEB缓冲液2ml，浸泡30min，时时振摇。待完全洗脱后。将 洗脱液混匀，用721分光光度计，波长413nm。以空白调零，测各管吸光度。 （5）计算： 如有异常HbX，则计算HbA2%时，分母中还要加：HbX吸光度。 HbX%＝ 4.7 正常值 电泳法： HbA 95% HbA2 1.1%～3.2% HbA3 2%～3% Singer法：HbF＜4% 4.8 化验结果临床意义 （1）增高：重型地中海贫血（HbA2、HbF增高）、轻型β地中海贫血（HbA2 4%～10%） （2）降低（HbA2）：缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血。 4.9 相关疾病

Gamma在这里指的是丙种球蛋白，也就是γ蛋白，正常值是30%-40%。

常用的dna电泳marker：dl2000plus的条带大小依次为5000、3000、2000、1000、750、500、250、100bp共8条带.dl2000的就是少了5000的那条,一共7条带.如果要是d1000的话,就是1000、700、500、400、300、200、100bp共6条,常用的就这些了.常用的蛋白电泳marker：蛋白预染marker大小依次为170、130、95、72、55、43、34、26、17、10kda,其中72是红色的那条,10是绿色的那条,共10条带.其他的也是视情况而定.所以最好还是知道你的那个marker是什么类型的,或者知道你的marker是多少条带,条带的样式,然后你再去百度图片里边对应着你的样式去找一下就知道了.

什么marker啊,是DNA的电泳marker还是蛋白电泳的marker呢?常用的DNA电泳marker：DL2000 plus的条带大小依次为5000、3000、2000、1000、750、500、250、100bp共8条带.DL2000的就是少了5000的那条,一共7条带.如果要是D1...

pcr实验本身中不需要加入marker,但是在pcr过后跑电泳的时候需要加入marker.用来对比pcr产物的大小,看看产物的电泳条带是不是符合你的预期的。pcr中加marker的原因：marker是人为的把一系列已知大小的dna（或已知质量的蛋白,当然pcr中用的是dnamarker不是蛋白marker）混合在一起,在电泳的时候对照用.跑完电泳之后,会看到marker的有几条清楚的条带,而每条的大小都是可以在这个marker的说明书上查到的.所以,条带对照,就大体知道你需要的条带的大小范围了。pcr：pcr(聚合酶链式反应）是利用dna在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°c左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至dna聚合酶最适反应温度（72°c左右），dna聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5"-3")的方向合成互补链。基于聚合酶制造的pcr仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。marker：标记（marker），染色体上一个可以被识别的区域（比如限制性内切酶的酶切点，基因的位置等）。标记的遗传能够被检测出来。标记可以是染色体上有表达功能的部分（比如基因），也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分。

我不是大人，我是三年级学生。

控制以下几项：槽液的PH、电导率、固体份、颜基比、温度，电泳时电压

上样前冲去上样空底部未聚合的丙稀酰胺,否则电泳过程中会发生聚合; 2.现在有商品化的等电聚焦凝胶,但只限于水平平板电泳系统(如Pharmmacia-LKB,Hoefer)...

一、原理毛细管等速电泳的分离过程及测定原理ITP是一种利用中空毛细管内的电解质溶液进行分离的分析技术。为了分离阴离子，分析毛细管和正极槽充满的前导电解质的阴离子必须具有大于所有待分离离子的迁移率。前导电解质的阳离子对进行分析的pH值有缓冲能力。负极槽充满尾随电解质，其阴离子的迁移率比所有离子都小。样品由微量注射器注入到前导和尾随电解质界面上（图11-1）。当正、负极槽之间的高压恒流电源接通后，离子就会在电位差影响下进行泳动，不同组分按淌度大小依次分成不同的分子带。泳动电荷的淌度取决于弱酸的离解程度，也就是说取决于电解质的pH值，以及其它因素。毛细管中的带电离子的浓度必须在每一段都相等，才能使通过毛细管的电流恒定。因此，先行离子的浓度决定了所有后续带中离子的浓度。测定每个带通过电导检测器的时间长度，就得到每个带中样品离子相对于先行离子的电导率，它取决于每种离子的有效浓度。对于给定的pH值和缓冲系统来说，每种化合物的阶梯高度为定值。图11-1　ITP分析示意图（L：前导；T：尾随）二、实验研究1.仪器与试剂1）实验仪器（1）LKB2127型等速电泳仪（瑞典LKB公司生产），配以200×0.5mm聚四氟乙烯毛细管、电导检测器、紫外检测器及记录仪。（2）IP-2A型等速电泳仪（日本岛津公司生产），配以50×1mm、100×0.5mm二级聚四氟乙烯毛细管、电位梯度检测器、紫外检测器及记录仪。（3）pH计（pHS-2型，上海分析仪器厂）。2）主要试剂所有的有机酸（或有机酸盐）标准均为分析纯，L-组氨酸、D，L-组氨酸单盐酸盐为层析纯，2-N-吗啉代乙磺酸（MES）为生化试剂，Triton X-100、HCl/β-丙氨酸为日本产，固体NaOH及盐酸均为分析纯。（1）有机酸标准溶液中各种有机酸均配成0.05mol/L溶液，低温保存备用，按实验要求再配成各种含量的工作液，现用现配。（2）前导电解质溶液有以下两种。①0.01mol/L组氨酸单盐酸盐-组氨酸溶液。称取组氨酸单盐酸盐1.0500g两份，分别溶于1000mL蒸馏水中。在pH计上，用0.01mol/L HCl及组氨酸调节溶液pH至3.3和5.5，分别加100g/L Triton X-100 10 mL，摇匀。②0.01mol/L HCl与β-丙氨酸混合溶液。pH3.6，含0.5g/L Triton X-100。（3）尾随电解质溶液也有两种。①0.005mol/L2-N-吗啉代乙磺酸（MES）溶液：称取MES0.4880g，用蒸馏水溶解后，稀释定容至500mL。②0.01mol/L正己酸溶液。（4）0.01mol/L HCl溶液。（5）1mol/L NaOH溶液。（6）分析纯丙酮、乙醚及无水乙醇。以上溶液均用二次蒸馏水配制。2.实验方法由于油田水的矿化度相当高，给测试带来了很大的困难。高含量的Cl-使得仪器运行时间过长，而且由于大量本底化合物的存在常易超载，达不到分离的目的，需要对高矿化度水样进行预处理。本文应用水相蒸发法，利用无机盐和有机盐在有机溶剂中溶解度的不同除去大量的无机盐类。1）实验步骤取水样10mL，水浴低温蒸发，温度控制在70℃左右，蒸发至盐类大部分结晶析出，取下冷却，加浓盐酸数滴，然后用有机溶剂（乙醇、乙醚、丙酮）洗涤过滤至结晶析出的盐类呈松散粉末状。滤液用1mol/L氢氧化钠调节pH值至8～9，置于70℃恒温水浴中蒸发，待有机溶剂挥发殆尽转至10mL容量瓶中，定容，摇匀。2）毛细管等速电泳法测定使用（a）LKB-2127及（b）IP-2A两台等速电泳仪同时进行测定，用仪器（a）时，分别采用pH值为3.3及5.5的组氨酸盐酸盐/组氨酸-MES体系，测定2～3次后更换新的电解质溶液，以保证电解质的缓冲能力。用仪器（b）时采用盐酸/β-丙氨酸-正己酸体系，每次正负极储液槽都更换新的溶液。对于仪器（a），其峰宽的微分信号用标尺测量，这会带来较大的误差。而仪器（b）则是用配套的数据处理器对峰宽的微分信号进行计算，但微分信号的微小波动也会打出时间数据，干扰记录。由于仪器（b）测定的紫外吸收峰较明显，因而采用两台仪器同时进行定性定量分析。3）分离条件见表11-1。表11-1　毛细管等速电泳分离条件三、结果与讨论1.实验条件的选择实验条件的选择首先是电解质体系的选择，所选择的前导及尾随电解质的迁移率必须分别大于和小于所有待测有机酸的有效迁移率。其次是前导电解质pH值的选择，只有选择了合适的pH值才能使待分离化合物获得最佳分离且本底干扰小。1）电解质体系的选择本文对HCl/β-丙氨酸-MES（A）、HCl/β-丙氨酸-正己酸（B）、组氨酸盐酸盐/组氨酸-MES（C）及组氨酸盐酸盐/组氨酸-正己酸（D）四组电解质体系分别进行了实验，结果发现A、D两组电解质体系均不适用于有机酸的分离，B组电解质体系对二元酸分离效果较佳，草酸阶高低，不易受甲酸的干扰，且苯甲酸阶高位于乙酸和乳酸之间，分离较好，紫外吸收也较明显（图11-2）。C组电解质体系对一元羧酸具有较好的分离效果（图11-3）。2）前导电解质pH值的选择等速电泳过程中的pH值的大小是由前导电解质所控制的，电解质的pH值直接影响着有机酸的解离度，从而决定了有机酸的有效迁移率，即阶梯高度随之变化。实验中对以组氨酸盐酸盐/组氨酸为前导电解质的系统，用组氨酸或0.01mol/L HCl溶液将其pH值调节为2.82、3.00、3.20、3.42、3.63、3.79、4.08、4.17、4.45、5.00、5.50及6.00.在上述pH条件下分别对C1—C8一元羧酸，C2—C4、C6二元羧酸及一个代表性水样（甲酸乙酸之间有多官能团羧酸）进行了测定。图11-4为所选代表性水样在上述pH条件下的几个特征图，图11-5为上述pH值下各酸相对阶梯高度曲线。由图可见，对于油田水样的测定，甲酸乙酸之间多官能团羧酸较多，但未检测出二元羧酸，因而本文选择在pH值为3.3处进行水样分离测定，但在此pH条件下苯甲酸峰位于乙酸之前，不易定量。在pH值为5.5处，C1—C6一元羧酸分离较好，且苯甲酸峰位于乙酸之后，苯甲酸既可定性又有利于定量，所以本实验选用了pH值为3.3及5.5的组氨酸盐酸盐/组氨酸-MES电解质体系。在pH值为3.3时，有机酸只有部分电离，分离效果主要取决于PKa值，在pH值为5.5时，有机酸电离度大于80%，分离效果则主要取决于绝对淌度。3）预处理有机溶剂选择配制含5mol/L的甲酸溶液及相应的人工卤水，溶解后按水相蒸发预处理除Cl，其它按实验方法部分进行测定。采用了不同的有机溶剂进行预处理，测定结果见表11-2。表11-2　不同有机溶剂溶解甲酸的测定结果由结果可见，以丙酮为有机溶剂，回收率96.5%，而乙醚为91.9%，且乙醚毒性及挥发性大，燃点低。用氯仿、乙醇等进行了实验，均未达到要求。故本实验选用丙酮为预处理有机溶剂。图11-2　模拟水样分析谱图（IP-2A）图11-3　C1—C6一元酸标准（LKB-2127）其它各有机酸使用丙酮为有机溶剂的测定结果见表11-3。表11-3　丙酮为有机溶剂时有机酸的测定结果注：加星号者为在LKB上测到的数据。综合上述实验，最后选择了pH值为3.3及5.5的组氨酸盐酸盐/组氨酸-MES、HCl/β丙氨酸-正己酸体系，预处理有机溶剂为丙酮。图11-4　组氨酸盐酸盐/组氨酸体系（LN10井4790～4793m油田水）A—pH值为2.28；B—pH值为3.2；C—pH值为3.63；D—pH值为5.5四、定性分析1.相对阶梯高度在pH值为3.3及5.5组氨酸盐酸盐/组氨酸体系（LKB上测）和HCl/β丙氨酸-正己酸体系（IP-2A仪上）中各有机酸相对乙酸的阶梯高度见表11-4。表中同时给出了相重叠化合物及紫外吸收情况。表11-4　有机酸标准相对阶高注：AC为乙酸。2.定性分析对油田水样采用三个体系及标准共注法进行定性分析。以LN10井4790～4793m油田水为例，图11-6A为pH值为3.3的组氨基盐酸盐/组氨酸-MES体系中该水样乳酸定性情况，图11-6B、6C为pH值为5.5的组氨酸盐酸盐/组氨酸-MES体系该水样苯甲酸定性情况，图11-6D、6E为HCl/β-丙氨酸-正己酸体系该水样苯甲酸定性情况，同时苯甲酸还可观察到紫外吸收。与此类似，对其它各有机酸在三种体系、三种pH值条件下均进行了测定，只在一种体系下存在的酸则排除其存在的可能性。定性结果LN10水样所含有机酸成分为甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸及苯甲酸；还有二种未知有机酸，由于标样所限，未能一一检出。图11-5　不同pH值下各酸阶高（1）—甲酸；（2）—乙二酸；（3）—乳酸；（4）—乙酸；（5）—丁二酸；（6）—苯甲酸；（7）一己二酸；（8）—丙酸（9）—丁酸；（10）—丙二酸3.定量分析在pH值为3.3的组氨酸盐酸盐/组氨酸-MES及HCl/β-丙氨酸-正己酸体系分别对1mol/L甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、苯甲酸、乳酸进行10～20次测定，由记录的谱带长度与进样量得到工作曲线。各酸进样量1～20nmol。得到的工作曲线线性较好，相关系数大于0.99。在电解质储备液浓度发生变化时，工作曲线需重新测定。上述分离测定条件同实验方法部分。4.检出限检出限与前导离子浓度C1、毛细管内径及检测器有关： ，r为毛细管内径，l0为检测器可检出的最小区带长度。不同检测器l0不同，电位梯度检测器l0=0.2cm，电导检测器（CD）l0=0.1cm。本实验所用毛细管内径0.5mm,C1=0.01mol/L。PGD检出限：qp＝π·（0.5/2）2×0.01×0.2×10=3.90×10-3μmol。CD检出限：qc＝π·（0.5/2）2×0.01×0.1×10=1.95×10-3μmol。5.分析方法的精密度和准确度测定1）精密度实验配制含1mmol/L甲酸、3mmol/L乙酸、1mmol/L乳酸、0.5mmol/L苯甲酸、0.5mmol/L丙酸、0.5mmol/L丁酸混合有机酸标准溶液。吸取上述标准溶液10mL，加入NaCl1g、CaCl20.5g及少量MgCl2，待溶解后按水样预处理手续进行分析。此水样Cl-离子浓度约3mol/L，经预处理后Cl-离子浓度为0.1～0.2mol/L。测定结果见表11-5。进样20μL。有机酸标准溶液在实验过程中进样三次，进样量20μL，取其平均值得到标准值。图11-6　LN10井4790～4793m油田水在不同条件下的谱图A—LKB,pH值为3.3；B—LKB,pH值为5.5；C—加入苯甲酸标准，LKB,pH值为5.5；D—IP-2A；E—加入苯甲酸标准，IP-2A测定在pH值为3.3的组氨酸盐酸/组氨酸-MES、HCl/β-丙氨酸-正己酸两体系进行，其它分离条件同实验方法部分。由表11-5可知，测定的相对标准偏差为2.4%～7.6%。2）准确度测定对YM10井埋深4881～4884m的水样进行了四次预处理及分析测定，并进行了加标回收率实验，水样加标经预处理后进行分析测定，结果见表11-6，回收率97%～105%.表11-5　精密度实验表11-6　准确度测定

等电点：在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，所带净电荷为零，呈电中性，此时溶液的pH称为该氨基酸的等电点。两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变，当两性离子正负电荷数值相等时，溶液的pH值即其等电点。 ①当外界溶液的pH大于两性离子的pI值，两性离子释放质子带负电。 ②当外界溶液的pH小于两性离子的pI值，两性离子质子化带正电。 ③当达到等电点时氨基酸在溶液中的溶解度最小。

由于分散粒子表面带有电荷而吸引周围的反号离子，这些反号离子在两相界面呈扩散状态分布而形成扩散双电层。根据Stern双电层理论可将双电层分为两部分，即Stern层和扩散层。当分散粒子在外电场的作用下，稳定层与扩散层发生相对移动时的滑动面即是剪切面，该处对远离界面的流体中的某点的电位称为Zeta电位或电动电位（ζ-电位）。即Zeta电位是连续相与附着在分散粒子上的流体稳定层之间的电势差。它可以通过电动现象直接测定。

不连续电泳体系采用了两种或两种以上的缓冲液、PH值和孔径，能使稀的样品在电泳过程中浓缩成层，从而提高分辨力。

buffer应该就是指loading buffer吧，加了之后样品有颜色，可观察大概跑到什么位置，且有利于DNA沉降，不会跑出胶孔的作用marker是一系列已知大小的DNA片段，加入后可以与样品比对，知道样品大小（貌似没有loading marker的说法吧。。。）

冉的SDS-PAGE，要用于周围SDS处理的蛋白质结合大量的SDS样品蛋白之前，使蛋白质与大量的负电荷。其等电点的蛋白质电无关，所以不会影响你的电泳缓冲液的pH值和蛋白质样品的等电点。 离子强度的影响，因此运行数据公布特殊标准-PAGE，最好在洗澡一次。