苯酚

　　苯酚硫酸法测定总糖原理是：　　多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。　　简介：　　苯酚硫酸法测定总糖所用试剂：　　1. 浓硫酸:分析纯，95.5%　　2. 80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。　　3. 6%苯酚:临用前以80%苯酚配制。(每次测定均需现配)　　4. 标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia),或分析纯葡萄糖。　　5. 15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。　　6. 5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。　　7. 6mol/L 氢氧化钠:120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。　　8. 6mol/L 盐酸　　操作步骤：　　1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。　　2.样品含量测定:　　①取样品1克(湿样)加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5%TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5%TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。最后一次将残渣一起到入离心管。注意:总的溶液不要超出10毫升。(既不要超出离心管的容量)。　　②离心，转速3000转/分钟，共三次。第一次15分钟，取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。最后滤液保持18毫升左右。(测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。因为其脂肪含量大容易夹带残渣。)　　③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。　　④定容取样。水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2 ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以标准曲线计算多糖含量。

四氯苯酚tetrachlorophenol如何去除在腐蚀介质和较高拉应力共同作用下，金属表面产生腐蚀并向内扩展成微裂纹，常导致突然破断。混凝土中的高强度钢筋（钢丝）可能发生这种破坏。 硬度表示材料抵抗硬物体压入其表面的能力。它是金属材料的重要性能指标之一。一般硬度越高，耐磨性越好。常用的硬度指标有布氏硬度、洛氏硬度和维氏硬度。1.布氏硬度（HB）以一定的载荷（一般3000kg）把一定大小（直径一般为10mm）的淬硬钢球压入材料表面，保持一段时间，去载后，负荷与其压痕面积之比值，即为布氏硬度值（HB），单位为公斤力/mm2 (N/mm2）。2.洛氏硬度（HR）当HB>450或者试样过小时，不能采用布氏硬度试验而改用洛氏硬度计量。它是用一个顶角120°的金刚石圆锥体或直径为1.59、3.18mm的钢球，在一定载荷下压入被测材料表面，由压痕的深度求出材料的硬度。根据试验材料硬度的不同，可采用不同的压头和总试验压力组成几种不同的洛氏硬度标尺，每一种标尺用一个字母在洛氏硬度符号HR后面加以注明。常用的洛氏硬度标尺是A、B、C三种（HRA、HRB、HRC）。其中C标尺应用最为广泛。

不要被人误导了这样应该是阻断自由基链式反应更详细的解释自由基链式反应包括如下反应（只是一部分反应）HO+R-H=H2O+R(自由基)R（自由基）+O2=ROO（自由基）ROO（自由基）可以夺取RH或者H2O的氢生成ROOH与R或者OH自由基，进一步参与反应而ROOH不稳定，容易分解ROOH=RO（自由基）+OH（自由基）生成的自由基可以进一步参与反应这样一来少量的OH自由基就可以促使O2与RH反应但是，若有2,4,6-三叔丁基苯酚存在OH可以夺取其中的酚羟基的氢生成半醌自由基对于这个自由基，它很稳定原因在于1 O上的未共用电子与苯环发生共轭2 叔丁基的位阻阻碍了自由基的偶联所以，这个自由基不能够与RH反应而当这个自由基进一步遇到OH自由基时，可以被完全氧化生成醌，这又猝灭了一个自由基猝灭过氧化物自由基的机理与之相似

2,6-二叔丁基对甲基苯酚具有抗氧化性的原因是：1 O上的未共用电子与苯环发生共轭2 叔丁基的位阻阻碍了自由基的偶联。所以，这个自由基不能够与RH反应。而当这个自由基进一步遇到OH自由基时，可以被完全氧化生成醌，这又猝灭了一个自由基。猝灭过氧化物自由基的机理与之相似。具体反应原理如下：自由基链式反应包括如下反应（只是一部分反应）HO+R-H=H2O+R(自由基)。R（自由基）+O2=ROO（自由基）。ROO（自由基）可以夺取RH或者H2O的氢生成ROOH与R或者OH自由基，进一步参与反应，而ROOH不稳定，容易分解。ROOH=RO（自由基）+OH（自由基）。生成的自由基可以进一步参与反应。这样一来少量的OH自由基就可以促使O2与RH反应。但是，若有2,6-二叔丁基对甲基苯酚存在，OH可以夺取其中的酚羟基的氢生成半醌自由基。对于这个自由基，它很稳定

基本上，具有官能团的有机物就能相似相容。比如苯酚和乙醇都有-OH

二酚在人体中会转变成二醌，属于染料的合成物质之一，有毒，可破坏肝细胞，并且能诱发肿瘤。直接作用于能量代谢过程，可使细胞氧化过程增强，磷酰化过程抑制。

苯酚比碳酸氢根强，所以可以制碳酸氢根比碳酸弱

NaHCO3显弱酸我觉得你想错方向了他说的强酸盐不是显强酸性的盐而是含有强酸根的盐比如H2SO4+Na2HPO3=NA2SO4+H3PO3

动植物组织mRNA提取： 一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织。 二、设备 研钵，冷冻台式高速离心机，低温冰箱，冷冻真空干燥器，紫外检测仪，电泳仪，电泳槽。 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小时）装蒸馏水，然后加入0.01%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高压灭菌。 2、75%乙醇：用DEPC处理水配制75%乙醇，（用高温灭菌器皿配制），然后装入高温烘烤的玻璃瓶中，存放于低温冰箱。 3、1×层析柱加样缓冲液；20mmol/L Tris·Cl(pH7.6)，0.5mol/L NaCl，1mmol/L EDTA(pH8.0)，0.1% SDS。 4、洗脱缓冲液：10mmol/L Tris·Cl (pH7.6)，1mmol/L EDTA (pH8.0)，0.05% SDS。 四、操作步骤 （一）动植物总RNA提取-Trizol法 Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌，样品量从几十毫克至几克。用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染。RNA可直接用于Northern斑点分析，斑点杂交， Poly(A)+分离，体外翻译，RNase封阻分析和分子克隆。 1、将组织在液N中磨成粉末后，再以50-100mg组织加入1ml Trizol液研磨，注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。 2、研磨液室温放置5分钟，然后以每1mlTrizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒。 3、取上层水相于一新的离心管，按每mlTrizol液加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇，室温放置10分钟，12000g离心10分钟。 4、弃去上清液，按每ml Trizol液加入至少1ml的比例加入75%乙醇，涡旋混匀，4℃下7500g离心5分钟。 5、小心弃去上清液，然后室温或真空干燥5-10分钟，注意不要干燥过分，否则会降低RNA的溶解度。然后将RNA溶于水中，必要时可55℃-60℃水溶 10分钟。RNA可进行mRNA分离，或贮存于70%乙醇并保存于-70℃。 [注意] 1、整个操作要带口罩及一次性手套，并尽可能在低温下操作。 2、加氯仿前的匀浆液可在-70℃保存一个月以上，RNA沉淀在70%乙醇中可在4℃保存一周，-20℃保存一年。 （二）mRNA提取 由于mRNA末端含有多poly(A)+，当总RNA流径oligo(dT)纤维素时，在高盐缓冲液作用下，mRNA被特异的吸附在oligo(dT)纤维素柱上，在低盐浓度或蒸馏水中，mRNA可被洗下，经过两次oligo(dT) 纤维素柱，可得到较纯的mRNA。 1、用0.1mol/L NaOH悬浮0.5-1.0g oligo(dT)纤维素。 2、将悬浮液装入灭菌的一次性层析柱中或装入填有经DEPC处理并经高压灭菌的玻璃棉的巴斯德吸管中，柱床体积为0.5-1.0ml，用3倍柱床体积的灭菌水冲洗柱床。 3、用1x柱层析加样缓冲液冲洗柱床，直到流出液的pH值小于8.0。 4、将（一）中提取的RNA液于65℃温育5分钟后迅速冷却至室温，加入等体积2x柱层析缓冲液，上样，立即用灭菌试管收集洗出液，当所有RNA溶液进入柱床后，加入1倍柱床体积的1x层析柱加样溶液。 5、测定每一管的OD260，当洗出液中OD为0时，加入2-3倍柱床体积的灭菌洗脱缓冲液，以1/3至1/2柱床体积分管收集洗脱液。 6、测定OD260，合并含有RNA的洗脱组分。 7、加入1/10体积的3M NaAc(pH5.2)， 2.5倍体积的冰冷乙醇， 混匀， -20℃30分钟。 8、4℃下12000g离心15分钟，小心弃去上清液，用70%乙醇洗 涤沉淀，4℃下12000g离心5分钟。 9、小心弃去上清液，沉淀空气干燥10分钟，或真空干燥10分钟。 10、用少量水溶解RNA液，即可用于cDNA合成（或保存在70%乙醇中并贮存于-70℃）。 [注意] 1、mRNA在70%乙醇中-70℃可保存一年以上。 2、oligo(dT)纤维素柱用后可用0.3mol/l NaOH洗净，然后用层析柱加样缓冲液平衡，并加入0.02%叠氮钠（NaN3）冰箱保存，重复使用。每次用前需用NaOH水层析柱加样缓冲液依次淋洗柱床。 兔肝RNA的制备： 实验目的 1.学习从兔肝中提取RNA的方法。 2.通过地衣酚显色法测定RNA的含量。 实验原理 细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起，并且多以核蛋白的形式存在。因此，分离制备RNA时，首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离，并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同，所用的制备方法各异，一般常用的方法有，盐酸胍法，去污剂法和苯酚法。其中，以苯酚法使用较为广泛。产品纯度高，适合小规模生产。 动物组织中以肝脏器官RNA含量较为丰富。经组织匀浆用苯酚处理并离心后RNA溶于上层被酚饱和的水相中，DNA和蛋白质则留在酚层中，向水层中加入乙醇后，RNA即以白色絮状沉淀析出。此法能较好的除去DNA和蛋白质。上述方法提取的的RNA具有生物活性。工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA；其工艺简单，所提取的核酸均为变性RNA，只能用作制备核苷酸原料。本实验就是将兔肝组织，在酚与十二烷基硫酸钠的存在下，RNA与蛋白质分离使蛋白质变性凝固。RNA溶解在水相中，用乙醇使RNA从水相中沉淀，达到分离。 RNA含量的测定，除了可用紫外吸收法及定磷法外，常用地衣酚法测定，其反应原理是当RNA与浓盐酸共热时，即发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者与3， 5-二羟甲苯（地衣酚orcinol)反应，在Fe3+或Cu2+催化下，生成鲜绿色的复合物．反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20－250微克范围内，光吸收与RNA浓度 成正比。地衣酚反应特异性较差，凡是戊糖均有此反应。DNA和其他杂质也能给出类似的颜色。 实验试剂 0.05mol/L醋酸缓冲液（PH5.0） 0.05mol/L醋酸钠35毫升， 0.2mol/L醋酸15毫升，加蒸馏水至1000毫升，混合后测PH5.0 25%SDS:称取SDS25克，溶于50％乙醇中至100毫升，室温存放。 80％酚：取苯酚80份，加蒸馏水20份，混匀后装棕色瓶中。 2mol/L醋酸钠：取无水醋酸钠16。4克，用蒸馏水溶解后配成100毫升 95％乙醇 RNA标准溶液：取酵母标准RNA配成100μg/ml溶液。 样品待测液：准确稀释成每毫升溶液含RNA干燥制品50-100μg。 地衣酚试剂：先配制0.1%三氯化铁的浓盐酸溶液，实验前以此溶液为溶剂配成0.1%地衣酚溶液。 操作步骤 RNA提取：将新鲜兔肝浸入预冷0度0.05mol/L醋酸钠缓冲液(PH5.0)中,除去肝脏处的结缔组织,除去血凝,用滤纸吸干,称取0.9克. 取0.9克肝脏,加入 0.05mol/L醋酸缓冲液(PH5.0)9毫升,250克/升.SDS1.5毫升,移入匀浆管中,匀浆后再加入等体积80%酚,再匀浆一次. 移入三角瓶中,置65度水浴中继续振摇5-8分,取出流水冷却. 离心,3000转/分,10-15分,上层为稍混浊,含有RNA的水相,中层为变性蛋白,下层为酚液,管底残渣,含有RNA.吸出上层水溶液要RNA的收获量,可向中下层液中再加1/2体积的醋酸缓冲液,同样在65度水浴中振摇提取一次,离心后所收得的上层水液,可与上述水液合并,本次实验只提取一次. 用量筒测水液的量,加入1/10体积的2mol/L醋酸钠混匀.再加入2.5倍体积预冷的95%乙醇混匀,冷却放置絮状沉淀充分形成. 离心3000转/分,10分钟,倾出上清(不要废弃,可倒入收集瓶,作蒸馏回收乙醇用. 沉淀用蒸馏水4毫升溶解,慢慢向沉淀中加入蒸馏水,不断搅拌,至沉淀完全溶解即可,待作含量测定

三种物质中加入NaHCO3溶液，苯甲酸转化为苯甲酸钠，进入水层； 分液，将苯甲酸钠分离； 再加入NaOH溶液，苯酚转化为苯酚钠，进入水层； 分液，将苯酚钠分离； 此时有机相中的就是苯甲醇

硝基咪唑类有机化合物是一类具有硝基咪唑环结构的药物，包括甲硝唑(MNZ)、二甲硝咪唑(DMZ)、异丙硝唑(IPZ)、塞可硝唑(SCZ)、奥硝唑(ONZ)、替硝唑(TNZ)和洛硝哒唑(RNZ)等。其中，二甲硝咪唑(DMZ)和洛硝哒唑(RNZ)可以水解为轻基二甲硝咪哇，甲硝唑(DMZ)水解为轻基甲硝唑，异丙硝唑(IPZ)水解为经基异丙硝唑。硝基咪唑类药物具有抗菌作用，尤其是具有很强的抗厌氧菌作用，同时还具有抗肿瘤、抗病毒和抗原虫活性。

苯酚有杀菌消毒的作用

苯酚的稀水溶液可直接用作防腐剂和消毒剂药皂里通常用的是甲酚(甲基苯酚)甲酚抗菌作用较苯酚强3～10倍，而毒性几乎相等，故治疗指数更高。能杀灭包括分支杆菌在内的细菌繁殖体。2％溶液经10～15min能杀死大部分致病性细菌，2．5％溶液30min能杀灭结核杆菌。由于在水中溶解度低，常配成甲酚皂溶液（来苏儿，Lysol）。甲酚皂溶液易与水混合，使用方便。 【适应症】 1％～2％水溶液用于手和皮肤消毒；3％～5％溶液用于器械、用具消毒；5％～10％溶液用于排泄物消毒。 【外观】 无色或灰棕黄色液体，久贮或露置日光下颜色变暗，有酚臭。可溶于水（1:50）；能与乙醇、氯仿、乙醚、甘油混溶；极易溶于脂肪油和挥发油；可溶于碱性溶液，2％的水溶液呈中性。

来苏儿甲酚(甲苯酚三种异构体的混合物)的皂溶液俗称 来苏儿 (Lysol),也称煤酚皂液。

所谓额外撒啊我的思维

一种消毒剂。苯酚稀溶液是医药上最早使用的喷洒消毒剂，商品“来苏儿”(Lysol)消毒药水就是苯酚和甲苯酚的肥皂液。苯酚显粉红色，原因是被空气中的氧气氧化。有特殊的臭味和燃烧味，极稀的溶液具有甜味。

来苏儿 甲酚(甲苯酚三种异构体的混合物)的皂溶液俗称 来苏儿 (Lysol),也称煤酚皂液。

氨基苯酚（aminophenol）在醋酸-吡啶和高温条件下可以发生氧化偶联反应，生成偶氮苯酚（azophenol）。具体反应方程式如下：2 aminophenol + 2 acetic acid + 2 pyridine → azophenol + 2 water + 2 pyridine acetate在反应中，醋酸作为氧化剂参与反应，吡啶则起催化剂作用。高温条件加速了反应的进行。偶氮苯酚是一种有机化合物，具有强的还原性和着色作用，可以用作染料和化学指示剂等。需要注意的是，在操作时应该注意安全，避免接触和吸入反应物和产物。

方法提要在酸性条件下，用GDX-502固相萃取柱吸附水中酚类化合物，乙腈解析柱中有机酚，高效液相色谱-紫外检测器检测。方法适用于饮用水、地下水及湖库水中苯酚、对硝基酚、间甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚6种酚类的测定。对水中6种酚通常可检测到10～50ng/L水平。仪器高效液相色谱仪带紫外检测器，恒流梯度泵系统。色谱柱WatersSymmetryue4d2C8，4.6mm×250mm，粒径5μm或性质相似的色谱柱。GDX-502固相萃取小柱将使用过的SPE小柱填充物去掉并清洗干净，湿法加入约为0.5g纯化溶胀后的GDX-502树脂，打开活塞放出甲醇，直到液面刚好达到树脂床顶部。用10mL乙腈淋洗树脂，再用10mL水淋洗树脂，每次淋洗保持液面不低于树脂床。针头过滤器孔径0.45μm，直径13mm，有机系。固相萃取装置12管固相萃取装置。真空泵。采样瓶1L具磨口玻璃塞的棕色玻璃细口瓶。氮吹仪。微量注射器10μL、50μL、100μL、1000μL等气密性微量注射器。K.D浓缩瓶25mL，带1mL定量管，须标定容积后使用。试剂空白试剂水去离子水蒸馏再经Millipore处理。高效液相色谱流动相为水(含1%乙酸)和乙腈的混合溶液。碳酸氢钠溶液c(NaHCO3)=0.05mol/L。硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)。乙腈，甲醇HPLC级。丙酮(C3H6O)农残级。乙酸。盐酸。标准储备溶液苯酚、对硝基酚、间甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚六种的混标，购自国家标准物质研究中心。保存在-18℃冰箱中。GDX-502树脂使用前用丙酮浸泡数日，数次更换新溶剂到丙酮无色。再用乙腈回流提取6h以上。纯化后的树脂密封保存在甲醇中备用。替代物标准2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚混标。样品的采集与保存1)水样采集。必须采集在玻璃容器中，在采样点采样及盖好瓶塞时，样品瓶要完全注满，不留空气。若水中有残余氯存在，要在每升水中加入80mg硫代硫酸钠除氯。2)水样保存。避光、4℃下中保存。采样后7d内完成提取。40d内完成分析。分析步骤1)水样预处理。用孔径0.45μm的玻璃纤维滤膜，去除水中机械杂质。根据水中酚类化合物含量，取水样50～1000mL，加入2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚等替代物标准，用6mol/LHCl调至pH2。水样以10mL/min的流速流经已活化的GDX-502固相萃取柱。当水样完全流过柱子后，用0.05mol/L碳酸氢钠溶液10mL淋洗柱子。用N2或空气将柱中水分充分抽干。用4mL每次1mL乙腈淋洗小柱，前两次淋洗液需在柱中平衡10min，后两次平衡2min，合并淋洗液，最终用乙腈定容为1.00mL。0.45μm有机相滤膜过滤，HPLC分析。2)校准曲线。3)高效液相色谱分析条件。紫外检测器:双波长检测，检测波长280nm和290nm。柱温35℃。流动相组成:A泵，99%水+(1+99)乙酸;B泵，100%乙腈。流动相流量:1mL/min，恒流。梯度洗脱，洗脱程序，见表82.41。表82.41 洗脱程序4)色谱图的考察。见图82.13。定性与定量分析1)定性分析。以样品保留时间和标样保留时间相比较来定性。根据标准色谱图各组分的保留时间，确定出被测样品中目标物数目和名称。对有检出的样品需用其他方法确证，如GC-MS等技术。图82.13 六种标准酚类样品在不同检测波长下的液相色谱图(2μg/mL)2) 定量分析。每个工作日必须测定一种或几种浓度的标准溶液来检验校准曲线或响应因子。如若某一化合物的响应值与预期值间的偏差大于 10%，则必须用新的标准对该化合物绘制新的校准曲线或求出新的响应因子。使用紫外检测器时，6 种酚类的最大吸收波长不同，为提高分析灵敏度，苯酚、间甲酚采用 280nm 波长定量; 对硝基酚、2，4 -二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚采用 290nm 波长定量。计算公式参见式 (82.16) 。方法性能指标1) 精密度、检出限和线性范围。按实验方法，配制浓度为 0.5μg / mL 酚类混合标准样品，按选定的工作条件分析，重复检测 7 次，计算方法的精密度。检出限的测量是以相对于基线噪音 3 倍时组分峰高所对应的浓度。各组分的精密度、检测下限和线性范围见表82.42。表82.42 方法精密度、检出限及线性范围2) 准确度。分别将 50μL 浓度为 2μg / mL 的混合标准样品加入 0.25L 和 1.0L 试剂空白水中，用 502 树脂固相萃取柱吸附富集，洗脱后定容 1.0mL，HPLC 测定，计算加标回收率。结果见表82.43。表82.43 方法的准确度3) 基体加标回收率。从北京不同地区取护城河水过滤后，分别取 1L 水加入表82.44中不同量的标准样品，及未加入标准样品的 1L 水，经水样预处理，在 HPLC 上检测，得到加标回收率。表82.44 地表污水加标回收率注: 2-氟苯酚、2，4，6-三溴苯酚为替代物，回收率均符合控制限要求。